参白注射液的制备方法
专利名称：参白注射液的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种参白注射液的制备方法，属于中药领域。
背景技术：
人参为五加科植物人参(Panax ginseng C. A. Mey.)的干燥根及根茎，以其根部 入药，具有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津，安神的功效，是著名的珍贵药材。现代实 验药理学和临床药理学研究表明，人参具有抗肿瘤活性，其抗肿瘤的活性成分主要是人参 皂苷和人参多糖。人参皂苷可直接作用于癌细胞，通过诱导其凋亡抑制肿瘤的生长或诱导 其分化使其逆转；可通过作用于肿瘤侵袭的多个环节抑制肿瘤的转移；可逆转肿瘤的耐药 性，提高化疗药物的抗肿瘤活性；也可通过影响代谢和调节免疫功能，增强机体对疾病的抵 抗能力，从而抑制肿瘤的生长；还可影响细胞连接通讯或抑制酶的活性拮抗致癌剂的作用 起化学防癌的作用。白花蛇舌草(Oldenlandia diffusa(Willd)Roxb)始载于《广西中药志》，为茜草科 植物白花蛇舌草的带根全草。广泛分布于长江流域及以南，主产福建、广东、广西等地，其昧 苦、甘、寒，入心、肝、脾三经，有清热解毒，活血化瘀，消炎止痛等功效。现代药理研究表明白 花蛇舌草具有抗菌消炎、清热解毒、活血化瘀、利水通淋及抗肿瘤等作用，可用于治疗胃癌、 食管癌、直肠癌、恶性淋巴瘤、肺癌、肝癌、子宫颈癌、卵巢癌、膀胱癌等，临床应用广泛。白花 蛇舌草中的黄酮类、三萜混合酸，香豆素类和多糖类为其抗癌的主要有效成分。
发明内容
本发明提供了一种参白注射液的制备方法，目的是提供一种具有抑瘤效果的中药 的制备方法。本发明所提供的参白注射液的制备方法，是以人参和白花蛇舌草为原料，所述原 料中人参和白花蛇舌草的质量比为3 2。所述方法按照如下步骤进行人参和白花蛇舌草用水煎煮，然后滤过，滤液用乙醇沉淀，回收乙醇，用大孔树脂 纯化，获得参白注射液。所述参白注射液经过灭菌处理。所述水煎煮进行两次，第一次水煎煮水的质量为人参和白花蛇舌草总质量的13 倍，第二次水煎煮水的质量为人参和白花蛇舌草总质量的10倍。所述乙醇沉淀进行两次，第一次乙醇沉淀乙醇的终浓度(质量百分)含量为75%， 第二次乙醇沉淀乙醇的终浓度(质量百分)含量为85%。所述大孔树脂纯化过程所用的洗脱液为70%乙醇。所述第一次水煎煮的时间为2. 5小时；所述第二次水煎煮的时间为2小时。所述第一次乙醇沉淀和第二次乙醇沉淀的时间均为12小时。本发明的参白注射液经药效学研究证明，抑瘤范围广，抑瘤率高，且毒性低。
具体实施例方式参白注射液的原料为人参和白花蛇舌草，其中人参和白花蛇舌草的质量比为具体制备方法如下人参，采收于吉林，按《中华人民共和国药典》一部人参项下方法鉴别，为五加科植 物人参Panax ginseng C. A. Mey.的干燥根。白花蛇舌草采收于福建，按《广西药材标准》1996年版白花蛇舌草项下方法鉴 别，为茜草科(Rubiaceae)植物白花蛇舌草 Hedyotis diffusa ffilld. [Oldencandia diffusa(ffi 11.) Roxb.]的干燥全草。提取前，将人参、白花蛇舌草净选，除去非药用部位及杂质，淋洗，烘干。人参粉碎成最粗粉，称取1200g，白花蛇舌草剪段，称取800g，将两者混和，加水煎 煮两次；第一次水量为人参和白花蛇舌草质量的13倍，煎煮2. 5小时；第二次水量为人参 和白花蛇舌草质量的10倍煎煮2小时，合并煎液，然后滤过，滤液浓缩至2000ml，加乙醇使 乙醇的质量百分含量为75%，冷藏过夜，再滤过，滤液继续加乙醇使乙醇的质量百分含量为 85%,冷藏过夜，再滤过，滤液用40% NaOH溶液调节pH值8. O 8. 5，冷藏过夜，滤过，滤液 用lmol/1 HCL溶液调节pH值6 7，放置4小时，滤过，滤液回收乙醇，加水稀释至4000ml， 过SP700大孔树脂柱(大孔树脂以干大孔树脂计2000g)，流速(ml. min—1) = 0. 02 (min—1) * 柱高(cm)*柱横截面积(cm2)。再用24000ml水洗脱，流速(ml. min—1) = 0. (MOnirT1)*柱高 (cm)*柱横截面积(cm2)，弃去流出液；用70%乙醇洗脱，流速(ml. min—1) = 0. ( (mirT1)*柱 高(cm)*柱横截面积(cm2)。收集乙醇洗脱液20000ml，回收乙醇，浓缩至体积为1000ml，用 40% NaOH调节pH值为6. 5 8. 0，100°C加热15分钟，冷藏过夜，滤过，滤液置100°C加热 15分钟，冷藏过夜，用0. 22 μ m微孔滤膜滤过，灌装于IOml安瓿中，封口，流通蒸汽灭菌30 分钟，冷却，灯检，包装，获得参白注射液。按上述方法进行了三批中试，结果表明该方法重复性好，三批参白注射液指纹图 谱经计算与标准指纹图谱比较相似度大于0. 9。人参、白花蛇舌草为常用中药材，两者合用具有软坚散结、清热解毒、活血化瘀的 作用，可用于肿瘤的防治。参白注射液的组方简单，配比合理。测定参白注射液的LD50。结果表明参白注射液LD5tl静脉给量为170. 8g/kg，腹腔给药为192. Og生药/kg，说 明毒性较低。20只S-180荷瘤小鼠、Lewis荷瘤小鼠、EMT-6荷瘤小鼠、MGC-803荷瘤小鼠或 Bel-702荷瘤小鼠。每种荷瘤小鼠随机分为2组，包括1个实验组和1个对照组，每组10只 小鼠，连续10天静脉注射给药。实验组1 静脉注射参白注射液，剂量为LD5tl的1/10 ；对照组静脉注射生理盐水。实验结果表明，参白注射液对小鼠肉瘤S-180有着明显的抑制作用，对小鼠移 植性肿瘤 Lewis，EMT-6, MGC-803, Bel-702 的抑瘤率率分别为 37. 6 士 2. 8% ；36. 2%, 39. O士2. 7% ；48. 4士3.2%。说明参白注射液抑瘤范围较广，且抑瘤率明显。
权利要求
1.参白注射液的制备方法，是以人参和白花蛇舌草为原料，所述原料中人参和白花蛇 舌草的质量比为3 2。
2.根据权利要求1所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述方法按照如下步 骤进行人参和白花蛇舌草用水煎煮，然后滤过，滤液用乙醇沉淀，回收乙醇，用大孔树脂纯化， 获得参白注射液。
3.根据权利要求2所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述参白注射液经过 灭菌处理。
4.根据权利要求2或3所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述水煎煮进行 两次，第一次水煎煮水的质量为人参和白花蛇舌草总质量的13倍，第二次水煎煮水的质量 为人参和白花蛇舌草总质量的10倍。
5.根据权利要求4所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述乙醇沉淀进行两 次，第一次乙醇沉淀乙醇的终浓度(质量百分)含量为75%，第二次乙醇沉淀乙醇的终浓度 (质量百分)含量为85%。
6.根据权利要求5所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述大孔树脂纯化过 程所用的洗脱液为70%乙醇。
7.根据权利要求4所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述第一次水煎煮的 时间为2. 5小时；所述第二次水煎煮的时间为2小时。
8.根据权利要求5所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述第一次乙醇沉淀 和第二次乙醇沉淀的时间均为12小时。
全文摘要
本发明公开了一种参白注射液的制备方法，属于中药领域，该方法是以人参和白花蛇舌草为原料，所述原料中人参和白花蛇舌草的质量比为3∶2。所述方法按照如下步骤进行人参和白花蛇舌草用水煎煮，然后滤过，滤液用乙醇沉淀，回收乙醇，用大孔树脂纯化，获得参白注射液。本发明的参白注射液经药效学研究证明，抑瘤范围广，抑瘤率高，且毒性低。
文档编号A61K36/74GK102078410SQ20091023851
公开日2011年6月1日 申请日期2009年11月30日 优先权日2009年11月30日
发明者刘锁兰, 王振国, 王振贤, 王磊 申请人:北京振国天仙生物技术有限公司, 吉林省通化振国药业有限公司
技术领域：
本发明涉及一种参白注射液的制备方法，属于中药领域。
背景技术：
人参为五加科植物人参(Panax ginseng C. A. Mey.)的干燥根及根茎，以其根部 入药，具有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津，安神的功效，是著名的珍贵药材。现代实 验药理学和临床药理学研究表明，人参具有抗肿瘤活性，其抗肿瘤的活性成分主要是人参 皂苷和人参多糖。人参皂苷可直接作用于癌细胞，通过诱导其凋亡抑制肿瘤的生长或诱导 其分化使其逆转；可通过作用于肿瘤侵袭的多个环节抑制肿瘤的转移；可逆转肿瘤的耐药 性，提高化疗药物的抗肿瘤活性；也可通过影响代谢和调节免疫功能，增强机体对疾病的抵 抗能力，从而抑制肿瘤的生长；还可影响细胞连接通讯或抑制酶的活性拮抗致癌剂的作用 起化学防癌的作用。白花蛇舌草(Oldenlandia diffusa(Willd)Roxb)始载于《广西中药志》，为茜草科 植物白花蛇舌草的带根全草。广泛分布于长江流域及以南，主产福建、广东、广西等地，其昧 苦、甘、寒，入心、肝、脾三经，有清热解毒，活血化瘀，消炎止痛等功效。现代药理研究表明白 花蛇舌草具有抗菌消炎、清热解毒、活血化瘀、利水通淋及抗肿瘤等作用，可用于治疗胃癌、 食管癌、直肠癌、恶性淋巴瘤、肺癌、肝癌、子宫颈癌、卵巢癌、膀胱癌等，临床应用广泛。白花 蛇舌草中的黄酮类、三萜混合酸，香豆素类和多糖类为其抗癌的主要有效成分。
发明内容
本发明提供了一种参白注射液的制备方法，目的是提供一种具有抑瘤效果的中药 的制备方法。本发明所提供的参白注射液的制备方法，是以人参和白花蛇舌草为原料，所述原 料中人参和白花蛇舌草的质量比为3 2。所述方法按照如下步骤进行人参和白花蛇舌草用水煎煮，然后滤过，滤液用乙醇沉淀，回收乙醇，用大孔树脂 纯化，获得参白注射液。所述参白注射液经过灭菌处理。所述水煎煮进行两次，第一次水煎煮水的质量为人参和白花蛇舌草总质量的13 倍，第二次水煎煮水的质量为人参和白花蛇舌草总质量的10倍。所述乙醇沉淀进行两次，第一次乙醇沉淀乙醇的终浓度(质量百分)含量为75%， 第二次乙醇沉淀乙醇的终浓度(质量百分)含量为85%。所述大孔树脂纯化过程所用的洗脱液为70%乙醇。所述第一次水煎煮的时间为2. 5小时；所述第二次水煎煮的时间为2小时。所述第一次乙醇沉淀和第二次乙醇沉淀的时间均为12小时。本发明的参白注射液经药效学研究证明，抑瘤范围广，抑瘤率高，且毒性低。
具体实施例方式参白注射液的原料为人参和白花蛇舌草，其中人参和白花蛇舌草的质量比为具体制备方法如下人参，采收于吉林，按《中华人民共和国药典》一部人参项下方法鉴别，为五加科植 物人参Panax ginseng C. A. Mey.的干燥根。白花蛇舌草采收于福建，按《广西药材标准》1996年版白花蛇舌草项下方法鉴 别，为茜草科(Rubiaceae)植物白花蛇舌草 Hedyotis diffusa ffilld. [Oldencandia diffusa(ffi 11.) Roxb.]的干燥全草。提取前，将人参、白花蛇舌草净选，除去非药用部位及杂质，淋洗，烘干。人参粉碎成最粗粉，称取1200g，白花蛇舌草剪段，称取800g，将两者混和，加水煎 煮两次；第一次水量为人参和白花蛇舌草质量的13倍，煎煮2. 5小时；第二次水量为人参 和白花蛇舌草质量的10倍煎煮2小时，合并煎液，然后滤过，滤液浓缩至2000ml，加乙醇使 乙醇的质量百分含量为75%，冷藏过夜，再滤过，滤液继续加乙醇使乙醇的质量百分含量为 85%,冷藏过夜，再滤过，滤液用40% NaOH溶液调节pH值8. O 8. 5，冷藏过夜，滤过，滤液 用lmol/1 HCL溶液调节pH值6 7，放置4小时，滤过，滤液回收乙醇，加水稀释至4000ml， 过SP700大孔树脂柱(大孔树脂以干大孔树脂计2000g)，流速(ml. min—1) = 0. 02 (min—1) * 柱高(cm)*柱横截面积(cm2)。再用24000ml水洗脱，流速(ml. min—1) = 0. (MOnirT1)*柱高 (cm)*柱横截面积(cm2)，弃去流出液；用70%乙醇洗脱，流速(ml. min—1) = 0. ( (mirT1)*柱 高(cm)*柱横截面积(cm2)。收集乙醇洗脱液20000ml，回收乙醇，浓缩至体积为1000ml，用 40% NaOH调节pH值为6. 5 8. 0，100°C加热15分钟，冷藏过夜，滤过，滤液置100°C加热 15分钟，冷藏过夜，用0. 22 μ m微孔滤膜滤过，灌装于IOml安瓿中，封口，流通蒸汽灭菌30 分钟，冷却，灯检，包装，获得参白注射液。按上述方法进行了三批中试，结果表明该方法重复性好，三批参白注射液指纹图 谱经计算与标准指纹图谱比较相似度大于0. 9。人参、白花蛇舌草为常用中药材，两者合用具有软坚散结、清热解毒、活血化瘀的 作用，可用于肿瘤的防治。参白注射液的组方简单，配比合理。测定参白注射液的LD50。结果表明参白注射液LD5tl静脉给量为170. 8g/kg，腹腔给药为192. Og生药/kg，说 明毒性较低。20只S-180荷瘤小鼠、Lewis荷瘤小鼠、EMT-6荷瘤小鼠、MGC-803荷瘤小鼠或 Bel-702荷瘤小鼠。每种荷瘤小鼠随机分为2组，包括1个实验组和1个对照组，每组10只 小鼠，连续10天静脉注射给药。实验组1 静脉注射参白注射液，剂量为LD5tl的1/10 ；对照组静脉注射生理盐水。实验结果表明，参白注射液对小鼠肉瘤S-180有着明显的抑制作用，对小鼠移 植性肿瘤 Lewis，EMT-6, MGC-803, Bel-702 的抑瘤率率分别为 37. 6 士 2. 8% ；36. 2%, 39. O士2. 7% ；48. 4士3.2%。说明参白注射液抑瘤范围较广，且抑瘤率明显。
权利要求
1.参白注射液的制备方法，是以人参和白花蛇舌草为原料，所述原料中人参和白花蛇 舌草的质量比为3 2。
2.根据权利要求1所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述方法按照如下步 骤进行人参和白花蛇舌草用水煎煮，然后滤过，滤液用乙醇沉淀，回收乙醇，用大孔树脂纯化， 获得参白注射液。
3.根据权利要求2所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述参白注射液经过 灭菌处理。
4.根据权利要求2或3所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述水煎煮进行 两次，第一次水煎煮水的质量为人参和白花蛇舌草总质量的13倍，第二次水煎煮水的质量 为人参和白花蛇舌草总质量的10倍。
5.根据权利要求4所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述乙醇沉淀进行两 次，第一次乙醇沉淀乙醇的终浓度(质量百分)含量为75%，第二次乙醇沉淀乙醇的终浓度 (质量百分)含量为85%。
6.根据权利要求5所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述大孔树脂纯化过 程所用的洗脱液为70%乙醇。
7.根据权利要求4所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述第一次水煎煮的 时间为2. 5小时；所述第二次水煎煮的时间为2小时。
8.根据权利要求5所述的参白注射液的制备方法，其特征在于所述第一次乙醇沉淀 和第二次乙醇沉淀的时间均为12小时。
全文摘要
本发明公开了一种参白注射液的制备方法，属于中药领域，该方法是以人参和白花蛇舌草为原料，所述原料中人参和白花蛇舌草的质量比为3∶2。所述方法按照如下步骤进行人参和白花蛇舌草用水煎煮，然后滤过，滤液用乙醇沉淀，回收乙醇，用大孔树脂纯化，获得参白注射液。本发明的参白注射液经药效学研究证明，抑瘤范围广，抑瘤率高，且毒性低。
文档编号A61K36/74GK102078410SQ20091023851
公开日2011年6月1日 申请日期2009年11月30日 优先权日2009年11月30日
发明者刘锁兰, 王振国, 王振贤, 王磊 申请人:北京振国天仙生物技术有限公司, 吉林省通化振国药业有限公司
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