包含多不饱和脂肪酸和至少一种免疫抑制剂或抗肿瘤剂的药物组合物的制作方法
专利名称：包含多不饱和脂肪酸和至少一种免疫抑制剂或抗肿瘤剂的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及至少一种多不饱和脂肪酸(″PUFA″)或其药学上可接受的盐或衍生物与至少一种免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物相联合在局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况中的应用，这些病况比如炎性肠病(″IBD″)、类风湿性关节炎、白塞氏综合征(Behcets syndrome)、银屑病、前列腺癌或肠癌。
背景技术：
根据Martindale(″The Complete Drug Reference″；第32版；1999)，IBD包括胃肠道(″GI″)的慢性非特异性炎症性病况。IBD的两种主要形式是克罗恩氏病和溃疡性结肠炎。
克罗恩氏病的特征为GI壁区域增厚，且伴有贯穿所有层的炎症、深度溃疡和粘膜裂缝，以及形成肉芽肿。受影响区域可存在于GI道的任何区域，散布于正常组织中。
溃疡性结肠炎局限于结肠和直肠。炎症发生于受影响区域的表面但是连续的，而肉芽肿则少见。在轻度疾病中，可以只影响直肠(直肠炎)。在重度疾病中，广泛发生溃疡并可能失去大量粘膜，增加了结肠毒性扩张的危险，这是潜在的威胁生命的并发症。
尽管克罗恩氏病和溃疡性结肠炎之间存在差异，但对于这两种病况可使用类似的疗法。皮质类固醇被用于治疗较严重的活动疾病，氨基水杨酸衍生物可用于治疗较轻的活动疾病。此外，免疫抑制疗法已用于治疗慢性活动疾病。例如，硫唑嘌呤(CAS No.446-86-6；6-(1-甲基-4-硝基咪唑-5-基硫代)嘌呤)已显示了对于克罗恩氏病患者有益，特别是当并发有瘘时，并可用于难治性溃疡性结肠炎。
类风湿性关节炎是炎性关节炎，其中关节(通常包括手脚关节)发炎导致肿胀、疼痛且经常破坏关节。其被认为是自身免疫疾病，其中免疫系统成分攻击关节内层的软组织。这样的病况用非甾类抗炎药(″NSAID″)比如布洛芬、皮质类固醇比如泼尼松以及免疫抑制药比如甲氨喋呤和英夫利昔单抗(infliximab)进行治疗。
白塞氏综合征是慢性复发性炎性疾病，其可引起反复发作的疼痛口疮、皮肤水泡、生殖器溃疡与关节肿胀。眼睛、血管、神经系统和消化道也可发炎。其被认为是自身免疫病。该病况用皮质类固醇比如泼尼松和免疫抑制剂比如环孢菌素进行治疗。
银屑病是慢性反复发作性疾病，其导致一块或多块凸起的红斑，其具有银色的鳞片且在斑片与正常皮肤之间具有清楚的边界。它是因为皮肤细胞的异常高速生长而引发的，被认为是由免疫系统问题引起的。过去使用光疗法、使用局部药物比如皮质类固醇和用口服药物比如环孢菌素和甲氨喋呤治疗该病况。
前列腺癌是美国男性中最常见的癌症且是癌症死亡的第二常见的原因。目前有三种治疗前列腺癌的方式外科手术、放疗和激素疗法。
肠癌在美国和西欧甚为常见。约50％的大肠肿瘤发生于直肠内且约20％发生于乙状结肠中。局限性疾病的一线治疗是外科手术。还广法应用了通常基于氟尿嘧啶的辅助疗法。研究表明，与推注给药相比，长时间输注氟尿嘧啶可改善辅助疗法的疗效。另一方法是使用生物化学调节剂比如亚叶酸或免疫调节剂比如左旋咪唑。
甲氨蝶呤(CAS No.59-05-2；4-氨基-4-脱氧-10-甲基蝶酰基-L-谷氨酸)是一种抗肿瘤剂，其作用是叶酸的抗代谢物。其通常与其它抗肿瘤剂联合，已经广泛用于治疗多种恶性疾病比如口和胃的肿瘤。在Martindale中没有涉及甲氨蝶呤在治疗结肠或直肠癌症中的应用。相反，氟尿嘧啶(5-氟嘧啶-2，4-(1H，3H)-二酮)似乎是治疗此类恶性肿瘤的备选抗肿瘤剂。
甲氨蝶呤也是免疫抑制剂，其用于治疗IBD。每周以25mg的剂量肌肉给药一次，甲氨蝶呤可改善慢性活动性克罗恩氏病的症状并降低对于皮质类固醇的需求(Feagan et al；N.Engi.J.Med.1995；332；292-7)。低剂量的甲氨蝶呤已经用于诱导缓解症状并用于难治性皮质类固醇依赖型克罗恩氏病中替代甾类的作用(Egan et al；Mayo.Clin.Proc.1996；71；69-80)。在后者的文献中公开了与口服给予甲氨蝶呤相比，肌肉注射的副作用更低且更少复发。
环孢菌素(CAS No.59865-13-3；环{-[4-(E)-丁-2-烯基-N，4-二甲基-L-苏氨酰基]-L-高丙氨酰基-(N-甲基甘氨酰基)-(N-甲基-L-亮氨酰基)-L-缬氨酰基-(N-甲基-L-亮氨酰基)-L-丙氨酰基-D-丙氨酰基-(N-甲基-L-亮氨酰基)-(N-甲基-L-亮氨酰基)-(N-甲基-L-缬氨酰基)-})是免疫抑制剂，已用于治疗被认为具有自身免疫组分的多种疾病。在IBD中，已试验了环孢菌素作为二线药物，获得了多方面的成功。已发现静脉内高剂量的环孢菌素对于难治性溃疡性结肠炎有效(Lichtiger et al；N.Engl.J.Med.1994；330；1841-5)且若经灌肠给药也可有效(Sandborn et al；Am.J.Gastroenterol.1993；88；640-5)。但是，对于克罗恩氏病的益处尚不太清楚。尽管报道了静脉内疗法适用于治愈难治性瘘，但较低的口服剂量在具有活动性克罗恩氏病的成人和儿童体内产生了令人失望的效果(例如参见Feagan et al；N.Engl.J.Med.1994；330；1846-51)。口服给药时，环孢菌素通常作为液体填充胶囊或作为油性悬剂给药。
更生霉素(CAS No.50-76-0；N，N′-(2-氨基-4，6-二甲基-3-氧代-3H-苯并噁嗪-1，9-二基二羰基)-双[苏氨酰-D-缬氨酰脯氨酰(N-甲基甘氨酰基)(N-甲基缬氨酸)1.5-3.1-内酯]是一种抗肿瘤剂，其已用于治疗妊娠期滋养层细胞瘤和其它实体瘤包括脑瘤、Wilm′s瘤和多种肉瘤。其也是免疫抑制剂且通常静脉内给药。
已知二十碳-5，8，11，14，17-五烯酸(″EPA″)、二十二碳-4，7，10，13，16，19-六烯酸(″DHA″)和其它PUFA可用于治疗IBD(例如参见，EP-A-0244832，EP-A-0289204，EP-A-0311091和WO-A-93/21912)。
EP-A-0825858(Buser et al；公布于1996年11月21日)公开了一种口服剂型，含有作为活性基本成分的PUFA，其为游离酸形式或为其药学上可接受的盐。该口服剂型用时间而非pH依赖性释放的包衣材料包被，其允许在回肠内释放PUFA。该口服剂型用于治疗IBD。
Zerouga等(Anti-Cancer Drugs 2002；13；301-311)合成并表征了包含两种抗癌剂DHA和甲氨蝶呤的亲脂性磷脂酰胆碱衍生物，所述抗癌剂分别共价连接在磷脂的sn-1和sn-2位。结果表明DHA和甲氨蝶呤在体外抑制鼠白血病细胞增殖，且当作为单个药物同时递送时以及当通过磷脂酰胆碱结构连接在一起时，DHA和甲氨蝶呤之间存在潜在的协同作用。
Ferguson(Proc.Annu.Meet.Am.Assoc.Cancer Res.1995；36；A1722)研究了γ-亚油酸(″GLA″)对人鳞状细胞癌系以及多药抗性和卡铂抗性变异株的细胞毒和化学调节作用。结果表明使用GLA预处理的细胞较未处理的细胞在接触长春新碱和卡铂时更加敏感。取决于GLA的浓度，卡铂的毒性在人鳞状细胞癌以及卡铂抗性变异细胞系中均增加50％。此外，观察到GLA使长春新碱的毒性增加了40％。
JP-A-63258816(Imayado et al；公布于1988年10月26日)公开了一种抗癌组合物，含有低选择毒性的抗癌剂(选自长春新碱、柔红霉素、VP-16和顺铂)和具有高选择毒性的高度不饱和脂肪酸(如GLA、花生四烯酸或EPA)。该文献公开了可以以施用所示抗癌剂的常规方式使用该组合物。该文献举例说明了抗癌剂与某一种高度不饱和脂肪酸的多种组合的0.5wt％乙醇溶液的作用的体外研究。脂肪酸的纯度均为99％。
JP-A-8092129(Yazawa et al；公布于1996年4月9日)公开了由自身免疫疾病引起的眼疾的治疗方法，其包含免疫抑制剂和EPA和/或DHA。所公开的免疫抑制剂包括地塞米松、环孢菌素A、雷帕霉素、FK506、咪唑立宾(mizoribine)、环磷酰胺、硫唑嘌呤与甲氨喋呤。在仅有的一个示例性实施方案中，服用环孢霉素A的两名患者和服用FK506的另两名患者被给予含鲔鱼油的软明胶胶囊，其中含有6％的EPA和25％的DHA。剂量为2400mg每天，其被分为三份给药。
WO-A-98/09621(Scott et al；公布于1998年3月12日)公开了使用PUFA治疗和预防抗癌化疗副作用的方法，所述PUFA的碳链长度为14-26且在分子中具有2-6个顺式或反式构型双键。优选的PUFA包括EPA和DHA。根据公开，该治疗特别适于治疗由于使用甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、环磷酰胺、顺铂、多柔比星、紫杉醇和长春新碱而引起的副作用。PUFA可以与抗癌药同时给药或优选在抗癌药之前以及其治疗过程中给药。PFUA的剂量可以是1mg-100g每天，PUFA可以以任何适宜的方式给药包括口服形式例如胶囊和片剂。
在WO-A-98/09621所例举的使用甲氨蝶呤的唯一实施方案中，以2g/天口服GLA锂的连续治疗在静脉内接受累积剂量为30g作为锂盐的GLA后一周，患乳腺癌的女性用″CMF″方案(环磷酰胺、甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶)治疗。抗癌治疗的副反应被减轻。
在WO-A-98/09621所例举的治疗胃肠道病况的唯一实施方案中，转移结肠癌男性患者用5-氟尿嘧啶治疗。在化疗之前两周以及整个化疗过程中，该男性也接受3g/天EPA的纯甘油三酯。同样，化疗的副作用被减轻。
Suzuki等人(J.Pharm.Sci.1998；87(10)；1196-202)公开了在大鼠体内使用脂肪酸乳剂增强了结肠和直肠内对于肽激素——胰岛素的吸收。该乳剂直接原位给予大鼠肠回路。测试了饱和、单不饱和与多不饱和脂肪酸包括EPA和DHA，结果表明胰岛素的吸收水平随着脂肪酸不饱和水平依次增加。
Barichello等人(Int.J.Pharm.1999；183(2)；125-32)公开了使用包含不饱和脂肪酸的Pluronic F-127凝胶制剂在大鼠中直肠施用胰岛素。
WO-A-97/44063(Bradley等人；公布于1997年11月27日)公开了DHA与药物剂的缀合物用于治疗非中枢神经系统病况特别是乳癌、结肠癌和卵巢癌。所述药物剂可以是抗肿瘤剂或免疫抑制剂。该文献例举了DHA与紫杉醇以及紫杉醇衍生物的缀合物。
WO-A-03/92671(Krishnan；公布于2003年11月13日)公开了抑制血管生成的组合物。该组合物包括烷基取代的脂肪酸，任选地具有免疫抑制剂比如环孢霉素。该文献公开了涉及血管生成的许多病况，包括多种癌症、克罗恩氏病和溃疡性结肠炎。
EP-A-0297842(Wood；公布于1989年1月4日)公开了含有芬氯酸(一种免疫抑制剂)的延迟释放片，以丙烯酸基树脂(EudragitF)包衣以确保在回肠末端和结肠释放该活性成分。
发明内容
需要对于涉及急性或慢性免疫应答不足的病况比如IBD和肠癌的改善治疗。因此，本发明的一个目的是提供这些病况的改善治疗。
本发明优选实施方案的一个目的在于提高免疫抑制剂和抗肿瘤剂的口服生物利用度。
本发明优选实施方案的另一个目的是提供施用免疫抑制剂和抗肿瘤剂的方法，其降低了通常与胃肠外给药途径相关的全身副作用(包括恶心和呕吐)。
根据第一方面，提供了PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物在制备药物中的应用，该药物含有至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物，用于局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况，特别是肠病。在使用PUFA衍生物的实施方案中，该衍生物通常是酯或n-3磷脂。
本发明的第一方面还提供了多不饱和脂肪酸(″PUFA″)或其药学上可接受的盐或衍生物和至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物在制备用于局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况尤其是肠病中的应用。
本发明第一方面还提供了至少一种免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物在制备含有PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物的药物中的应用，该药物用于局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况，特别是肠病。
具体实施例方式
术语“免疫抑制剂”意指在人或动物体内具有抑制免疫应答作用的药学上可接受的化合物。术语“抗肿瘤剂”意指对于肿瘤细胞具有细胞毒性的药学上可接受的化合物。术语“局部治疗”意指局部施用所述活性剂于至少部分的肠粘膜以治疗病况。这些术语将容易被技术人员所理解。
通过将活性剂局部施用于肠粘膜以达到局部或全身作用而提供了对于这些疾病的治疗。当所治疗的疾病是肠病时，活性剂具有局部作用。
与PUFA一起施用至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂的一个优势在于通常提高了所述药剂的口服生物利用度，并由此可给予较低剂量的所述药剂以治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况，特别是肠病，而不是必须经胃肠道外给药。由此避免了不期望的皮下和静脉内给予这些药物，并导致减少或消除了与高口服剂量或胃肠外用药相关的不期望的副作用。
不希望受限于任何具体理论，发明人相信药物吸收的增加不是由药理学作用而相反是由PUFA与药物相互作用引发的物理作用所导致的。据信，药物可“包装”于可与肠粘膜细胞融合的PUFA层中。与不饱和水平低的脂肪酸相比，PUFA的较高流动性可由此导致药物释放被提高。
在优选实施方案中，至少有某些PUFA和药物在胃后释放。通常，所有或几乎所有的释放发生于胃后。活性剂在肠中的释放位置可以是靶向的并且可根据所治疗的病况确定。
当准备系统性治疗病况如慢性炎症或肿瘤病时，优选在空肠内起始释放并沿着回肠的大部分继续进行。观察到活性剂的生物利用度沿着肠的该段增加。通常，在这些实施方案中，在回肠末端之前完全释放。相似的释放特征曲线可用于局部治疗肠病比如小肠炎症(如，小肠克罗恩氏病和白塞氏综合征)以及小肠肿瘤。
在另一些实施方案中，将在小肠开始释放并且沿大肠向下继续进行。例如，局部治疗结肠病况如结肠的炎症性病况(如溃疡性结肠炎)和结肠-直肠瘤时，优选活性剂在回肠-结肠释放。
据信在与肠粘膜接触时所述药剂与PUFA相互作用。PUFA有助于药剂被肠壁细胞吸收，从而增加药物的局部细胞吸收进入粘膜和肠壁的免疫细胞和肿瘤细胞中。只要在肠壁免疫细胞和/或肿瘤细胞中可存在高浓度的PUFA和所述药剂，通常就可实现药物的局部给药，发明人相信这就显著增强了组分的效果。
已知PUFA具有抗肿瘤和免疫抑制活性(如上所示)。由此，本发明的另一个优势在于联合施用所述药剂和PUFA导致药剂的抗肿瘤和/或免疫抑制作用的协同增强。
合适的PUFA包括ω-3、ω-6和ω-9PUFA，但只要使用PUFA，就优选它们未被取代。合适的实例包括EPA、DHA和GLA。至少一种PUFA优选是EPA或DHA。在一些优选实施方案中，使用含EPA和DHA的PUFA混合物。在这些实施方案中，混合物中EPA和DHA的总量优选至少约为混合物的60wt％。混合物可以是浓缩鱼油制品的形式。在一些优选实施方案中，混合物含有约50-约60wt％、优选55wt％的EPA和约15-约25wt％、优选20wt％的DHA。
该PUFA或至少一种PUFA优选是游离酸的形式。作为替代，该PUFA或至少一种PUFA可以是药学上可接受的盐比如锂或钠盐，药学上可接受的酯比如乙酯或甘油三酯或药学上可接受的n-3磷脂。
免疫抑制剂或抗肿瘤剂可含有至少一个氨基酸残基，例如1-15个氨基酸残基。适宜的氨基酸源的免疫抑制剂包括甲氨蝶呤、更生霉素、环孢菌素和单克隆抗体比如英夫利昔单抗、那他珠单抗(natalizumab)、达克珠单抗(daclizumab)或莫罗单抗(muromonab)。合适的氨基酸源的抗肿瘤剂包括甲氨蝶呤和更生霉素。
可与本发明联合使用其它非氨基酸源的药物。这些药物可以具有复杂的化学结构如生物碱，或是真菌或细菌源的。其它的非氨基酸源免疫抑制剂的实例包括6-巯基嘌呤(″6-MP″)、环磷酰胺、霉酚酸酯、泼尼松龙、西罗莫司、地塞米松、雷帕霉素、FK506、咪唑立宾、硫唑嘌呤和他克莫司。其它的非氨基酸源抗肿瘤剂的实例包括氟尿嘧啶、博来霉素、依托泊苷、紫杉醇、长春新碱、多柔比星、顺铂、柔红霉素和VP-16。
药物可包含至少一种口服剂型，其包含所述PUFA或所述其盐或衍生物与至少一种的所述免疫抑制剂和所述抗肿瘤剂或所述其盐或衍生物以及药学上可接受的载体的混合物。在这些实施方案中，免疫抑制剂或抗肿瘤剂与PUFA同时共施用。在这些实施方案中，PUFA与其它药物剂相分离，即不相结合。该混合物可基本上由该混合物组成或还可包含药学上可接受的载体。
作为替代，所述药物可包含至少一种包含所述PUFA或其所述盐或衍生物的第一口服剂型以及至少一种包含至少一种所述免疫抑制剂和所述抗肿瘤剂或其所述盐或衍生物的第二口服剂型。在这些实施方案中，免疫抑制剂或抗肿瘤剂可与PUFA同时或相继共同施用。第一或第二口服剂型还可包含药学上可接受的载体。
合适的待治疗病况可以是慢性炎症性疾病。例如，慢性炎症性疾病可由免疫应答的过度活性以及部分缺陷控制所引起。这些病况的实例包括IBD(即，克罗恩氏病和溃疡性结肠炎)、类风湿性关节炎、白塞氏综合征和银屑病。
另一种合适的待治疗病况可以是肿瘤。例如，可由缺乏对异常细胞的免疫识别和应答而引起肿瘤疾病。这些病况的实例包括肠癌和前列腺癌。
本发明对于肠病的局部治疗具有特殊应用。
待治疗的肠病可以是IBD，例如克罗恩氏病或溃疡性结肠炎。在这些实施方案中，所用的药物剂通常是选自相关上述列举的免疫抑制剂。
待治疗的肠病可以是肠癌。在这些实施方案中，抗肿瘤剂可以选自相关的上述列举内容。本发明对于治疗结肠和/或直肠癌具有特殊应用。
本发明的第一方面还提供了PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物用于提高药物中至少一种免疫抑制剂和抗肿瘤剂的生物利用度的应用，以局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况。
根据本发明的第二方面，提供了局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的疾病的方法，包括同时或相继给予PUFA或其药学上可接受的载体或衍生物以及至少一种免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或其衍生物。所述药物剂通常以治疗相关具体疾病所需的治疗有效量施用。在使用PUFA衍生物的实施方案中，衍生物通常是酯或n-3磷脂。该治疗可具有上述的任何特征。
如上所述，PUFA和药物剂可在同一口服剂型或不同口服剂型中共同施用。由此，术语“口服剂型”意在包括其中PUFA和药物剂在同一口服剂型中共同施用的实施方案以及其中PUFA和药物剂在不同口服剂型中共同施用的实施方案。合适的剂型包括胶囊(比如硬或软明胶胶囊)和片剂。在使用明胶胶囊的实施方案中，明胶可以是A型明胶或B型明胶，优选A型明胶。制备明胶的胶原源可以是猪、牛或鱼。优选猪明胶，特别是在使用游离酸形式的PUFA的实施方案中，因为与使用其它来源的明胶相比，PUFA与胶囊壁的不期望的相互作用的水平降低了，由此提高了制剂的稳定性和有效储存时间。
根据本发明的第三方面，提供了包含至少一种免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物的口服剂型，其中口服剂型包有延迟释放包衣，例如肠溶衣，以使药物在穿过胃以后延迟释放。
这样的口服剂型可以与包含PUFA的分离口服剂型比如EP-A-0825858中所公开的分离口服剂型联合使用，该公开内容在此引入作为参考。作为替代，该口服剂型还可包含至少一种PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物。
用于局部治疗肠病的口服剂型优选延迟释放PUFA和药物剂直至到达受影响的肠部分。在这些实施方案中，口服剂型可用包衣剂包衣，以允许在胃后释放活性成分或各活性成分以向肠粘膜局部施用活性成分。合适的包衣以pH依赖的方式或非pH依赖的方式延缓药物的释放。
口服剂型可用pH依赖的释放包衣材料包衣。从十二指肠至结肠的pH从约6平稳地升至约7.5。已开发了不同的聚丙烯酸基包衣材料，其在不同的肠pH处溶解，由此沿着肠道在不同点释放包衣剂型的活性物。合适的肠包衣材料包括EudragitTML、EudragitTMS和EudragitTMF( PharmaPolymers)。
包衣可以以非pH依赖的方式延迟药物的初始释放。例如，在优选实施方案中，包衣以时间而非pH依赖的方式延迟药物的起始释放。口服剂型可以用时间而非pH依赖的延迟释放包衣材料包衣。在这些实施方案中，释放位置可根据这种包衣的厚度而变化。例如，随着包衣厚度的增加，初始释放的位置沿着肠道后移。由此，相对较薄的包衣材料可提供在小肠(如空肠)中的初始释放，而相对较厚的包衣可提供在结肠的末端回肠中的初始释放。
在一些实施方案中，包衣厚度可足以延迟活性剂的初始释放至平均约30至约60分钟。这些实施方案将适于在回肠释放药物。在另一些实施方案中，包衣厚度可足以延迟活性剂的初始释放至平均约60至约120分钟且优选平均约90至120分钟。这些实施方案将适于在末端回肠或结肠中或附近起始释放活性剂。
时间而非pH依赖释放的包衣材料可以是中性的聚丙烯酸材料比如聚(丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯)材料。合适材料的实例包括Eudragit NE 30-D( Pharma GmbH)，其平均分子量约为800,000，通常用于形成延迟释放基质。
另一种合适的非pH依赖的延迟释放包衣是在结肠中通过细菌酶的作用而生物降解的包衣。合适包衣的实例是由乙基纤维素和直链淀粉制备的包衣，其是非pH依赖的且在结肠细菌酶作用下降解而在结肠释放药物。以相同方式工作的其它聚合物也是适宜的。
活性成分或各活性成分的释放优选沿着至少部分肠道持续释放。可使用本领域已知的任何适宜的持续释放活性成分的方法。但是，如果使用包衣了时间依赖而非pH依赖的释放包衣材料(尤其是Eudragit NE 30D)的软明胶胶囊，那么活性药物以微滴样方式沿着一段肠释放。发明人相信这样的持续释放特性是独特的。
不希望受限于任何具体理论，本发明人相信包衣溶胀并穿孔以允许肠液穿过包衣。当液体与明胶接触时，胶囊溶胀至囊壁无法保持其整体性，并允许胶囊内容物以微滴逸出包衣中的穿孔。该胶囊沿着肠继续运行，由此沿着肠的一段释放胶囊内容物。
包含至少一种免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物的口服剂型优选通过诊断或治疗而用于人或动物体的治疗。
在一个优选实施方案中，药物包含双重口服剂型。第一口服剂型是软明胶胶囊，含400mg或800mg药物组合物，其包含约55wt％EPA和约20wt％DHA，均为游离酸形式。该胶囊由A型猪明胶制备并用Eudragit NE 30 D包衣。第二口服剂型例如可以是2.5mg甲氨蝶呤片或25mg环孢菌素软胶囊。第二口服剂型优选用Eudragit NE 30 D包衣。
根据本发明第四方面，提供了包含至少一种第一口服剂型和至少一种第二口服剂型的药物制品，其中第一口服剂型包含PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物以及第二口服剂型包含至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物，其中至少一种的第一和第二口服剂型用在穿过胃后延迟释放所述活性剂的包衣剂包衣。
下面仅以实施例的方式描述本发明目前优选的实施方案。
实施例-双重口服剂型第一口服剂型(PUFA)向透明软明胶胶囊中分别填充1000mg包含至少60％重量DHA和EPA(Incromega 3F60；Croda Universal Ltd，UK)的鱼油浓缩物。通过在0.8巴压力下于25℃使用薄膜包衣组合物(如下)以35ml/min喷雾并于25℃空气干燥至少30分钟，从而使填充好的明胶胶囊用EudragitNE 30-D薄膜包衣使得在pH 5.5时可耐受30-60分钟。
制备薄膜包衣组合物(用于50,000个胶囊)时，向水(75mg)中缓慢地相继加入硅酮消泡乳剂(0.36mg)、褐色氧化铁(E 172；3.00mg)、二氧化钛(2.35mg)和滑石粉(10mg)并搅拌1-2小时以形成极细分散液。平均分子量约为800,000的聚(丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯)(Eudragit NE 30D；60mg)的30％水分散液，加入在少量水中的聚山梨醇酯80(MO 55F；0.2mg)，并搅拌所得混合物。加入硅酮消泡剂(2或3滴)以除去所得泡沫并缓慢加入前述分散液。容器经水(25mg)洗涤并搅拌分散液30分钟，之后过滤(150μm)。
第二口服剂型(甲氨蝶呤)包含2.5mg甲氨蝶呤钠和药学上可接受载体的至少一种片剂。应理解到本发明不限于上面参考优选实施方案所描述的细节，在不偏离如以下权利要求书中限定的精神或范围情况下可进行许多修改和变化。
权利要求
1.多不饱和脂肪酸(“PUFA”)或其药学上可接受的盐或衍生物在制备药物中的应用，该药物包含至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物，用于局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况。
2.如权利要求1所述的应用，其中至少一种PUFA是二十碳-5，8，11，14，17-五烯酸(“EPA”)。
3.如权利要求1或2所述的应用，其中至少一种PUFA是二十二碳-4，7，10，13，16，19-六烯酸(″DHA″)。
4.如前任一权利要求所述的应用，其中至少一种PUFA是游离酸形式。
5.如前任一权利要求所述的应用，其中所述抗肿瘤剂选自甲氨蝶呤、更生霉素、氟尿嘧啶、博来霉素、依托泊苷、紫杉醇、长春新碱、多柔比星、顺铂、柔红霉素和VP-16。
6.如前任一权利要求所述的应用，其中所述免疫抑制剂选自甲氨蝶呤、更生霉素、环孢菌素、6-巯基嘌呤、环磷酰胺、霉酚酸酯、泼尼松龙、西罗莫司、地塞米松、雷帕霉素、FK506、咪唑立宾、硫唑嘌呤和他克莫司和单克隆抗体。
7.如前任一权利要求所述的应用，其中所述药物包含至少一种口服剂型，该剂型包含所述PUFA或其所述盐或衍生物与至少一种的所述免疫抑制剂和所述抗肿瘤剂或其所述盐或衍生物的混合物。
8.如权利要求1-6任一项所述的应用，其中所述药物包含至少一种包含所述PUFA或其所述盐或衍生物的第一口服剂型以及至少一种包含至少一种的所述免疫抑制剂和所述抗肿瘤剂或其所述盐或衍生物的第二口服剂型以同时或相继施用。
9.如前任一权利要求所述的应用，其中所述病况是慢性炎症性疾病。
10.如权利要求9所述的应用，其中所述病况选自炎性肠病(″IBD″)、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎、白塞氏综合征和银屑病。
11.如权利要求1-8任一项所述的应用，其中所述病况是肿瘤疾病。
12.如权利要求11所述的应用，其中所述病况选自肠癌和前列腺癌。
13.局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的疾病的方法，包括同时或相继施用PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物与至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物。
14.一种口服剂型，包含至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物，其中该口服剂型用时间而非pH依赖的释放包衣材料包衣，其延迟所述活性剂的释放直至穿过胃以后。
15.如权利要求14所述的口服剂型，还包含PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物。
16.一种口服剂型，包含PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物以及至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物，其中该口服剂型用一种材料包衣，所述材料延迟所述活性剂的释放直至穿过胃以后。
17.如权利要求14-16任一项所述的口服剂型，用于经诊断或治疗而治疗人或动物体。
18.一种药物制品，包含至少一种包含PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物的第一口服剂型以及至少一种包含至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物的第二口服剂型，其中第一和第二口服剂型的至少一种用包衣材料包衣，所述包衣材料延迟所述活性剂的释放直至穿过胃以后。
19.如权利要求1所述的应用，基本如说明书中所附实施例所述。
20.如权利要求14的口服剂型，基本如说明书中所附实施例所述。
21.如权利要求18所述的药物制品，基本如说明书中所附实施例所述。
全文摘要
使用多不饱和脂肪酸(″PUFA″)或其药学上可接受的盐或衍生物(比如EPA和/或DHA)与至少一种免疫抑制剂或抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物相联合，通过局部施用所述活性剂至肠粘膜的至少一部分而用于治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况。可治疗的具体病况包括慢性炎症性疾病(如克罗恩氏病和溃疡性结肠炎)和肿瘤疾病(如肠癌和前列腺癌)。本发明优选实施方案的一个优势是增加了免疫抑制剂或抗肿瘤剂的生物利用度。
文档编号A61K9/48GK1968689SQ200580019762
公开日2007年5月23日 申请日期2005年6月15日 优先权日2004年6月18日
发明者乌尔里克·米特曼, 让-皮埃尔·萨谢托 申请人:狄洛特医药有限公司
技术领域：
本发明涉及至少一种多不饱和脂肪酸(″PUFA″)或其药学上可接受的盐或衍生物与至少一种免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物相联合在局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况中的应用，这些病况比如炎性肠病(″IBD″)、类风湿性关节炎、白塞氏综合征(Behcets syndrome)、银屑病、前列腺癌或肠癌。
背景技术：
根据Martindale(″The Complete Drug Reference″；第32版；1999)，IBD包括胃肠道(″GI″)的慢性非特异性炎症性病况。IBD的两种主要形式是克罗恩氏病和溃疡性结肠炎。
克罗恩氏病的特征为GI壁区域增厚，且伴有贯穿所有层的炎症、深度溃疡和粘膜裂缝，以及形成肉芽肿。受影响区域可存在于GI道的任何区域，散布于正常组织中。
溃疡性结肠炎局限于结肠和直肠。炎症发生于受影响区域的表面但是连续的，而肉芽肿则少见。在轻度疾病中，可以只影响直肠(直肠炎)。在重度疾病中，广泛发生溃疡并可能失去大量粘膜，增加了结肠毒性扩张的危险，这是潜在的威胁生命的并发症。
尽管克罗恩氏病和溃疡性结肠炎之间存在差异，但对于这两种病况可使用类似的疗法。皮质类固醇被用于治疗较严重的活动疾病，氨基水杨酸衍生物可用于治疗较轻的活动疾病。此外，免疫抑制疗法已用于治疗慢性活动疾病。例如，硫唑嘌呤(CAS No.446-86-6；6-(1-甲基-4-硝基咪唑-5-基硫代)嘌呤)已显示了对于克罗恩氏病患者有益，特别是当并发有瘘时，并可用于难治性溃疡性结肠炎。
类风湿性关节炎是炎性关节炎，其中关节(通常包括手脚关节)发炎导致肿胀、疼痛且经常破坏关节。其被认为是自身免疫疾病，其中免疫系统成分攻击关节内层的软组织。这样的病况用非甾类抗炎药(″NSAID″)比如布洛芬、皮质类固醇比如泼尼松以及免疫抑制药比如甲氨喋呤和英夫利昔单抗(infliximab)进行治疗。
白塞氏综合征是慢性复发性炎性疾病，其可引起反复发作的疼痛口疮、皮肤水泡、生殖器溃疡与关节肿胀。眼睛、血管、神经系统和消化道也可发炎。其被认为是自身免疫病。该病况用皮质类固醇比如泼尼松和免疫抑制剂比如环孢菌素进行治疗。
银屑病是慢性反复发作性疾病，其导致一块或多块凸起的红斑，其具有银色的鳞片且在斑片与正常皮肤之间具有清楚的边界。它是因为皮肤细胞的异常高速生长而引发的，被认为是由免疫系统问题引起的。过去使用光疗法、使用局部药物比如皮质类固醇和用口服药物比如环孢菌素和甲氨喋呤治疗该病况。
前列腺癌是美国男性中最常见的癌症且是癌症死亡的第二常见的原因。目前有三种治疗前列腺癌的方式外科手术、放疗和激素疗法。
肠癌在美国和西欧甚为常见。约50％的大肠肿瘤发生于直肠内且约20％发生于乙状结肠中。局限性疾病的一线治疗是外科手术。还广法应用了通常基于氟尿嘧啶的辅助疗法。研究表明，与推注给药相比，长时间输注氟尿嘧啶可改善辅助疗法的疗效。另一方法是使用生物化学调节剂比如亚叶酸或免疫调节剂比如左旋咪唑。
甲氨蝶呤(CAS No.59-05-2；4-氨基-4-脱氧-10-甲基蝶酰基-L-谷氨酸)是一种抗肿瘤剂，其作用是叶酸的抗代谢物。其通常与其它抗肿瘤剂联合，已经广泛用于治疗多种恶性疾病比如口和胃的肿瘤。在Martindale中没有涉及甲氨蝶呤在治疗结肠或直肠癌症中的应用。相反，氟尿嘧啶(5-氟嘧啶-2，4-(1H，3H)-二酮)似乎是治疗此类恶性肿瘤的备选抗肿瘤剂。
甲氨蝶呤也是免疫抑制剂，其用于治疗IBD。每周以25mg的剂量肌肉给药一次，甲氨蝶呤可改善慢性活动性克罗恩氏病的症状并降低对于皮质类固醇的需求(Feagan et al；N.Engi.J.Med.1995；332；292-7)。低剂量的甲氨蝶呤已经用于诱导缓解症状并用于难治性皮质类固醇依赖型克罗恩氏病中替代甾类的作用(Egan et al；Mayo.Clin.Proc.1996；71；69-80)。在后者的文献中公开了与口服给予甲氨蝶呤相比，肌肉注射的副作用更低且更少复发。
环孢菌素(CAS No.59865-13-3；环{-[4-(E)-丁-2-烯基-N，4-二甲基-L-苏氨酰基]-L-高丙氨酰基-(N-甲基甘氨酰基)-(N-甲基-L-亮氨酰基)-L-缬氨酰基-(N-甲基-L-亮氨酰基)-L-丙氨酰基-D-丙氨酰基-(N-甲基-L-亮氨酰基)-(N-甲基-L-亮氨酰基)-(N-甲基-L-缬氨酰基)-})是免疫抑制剂，已用于治疗被认为具有自身免疫组分的多种疾病。在IBD中，已试验了环孢菌素作为二线药物，获得了多方面的成功。已发现静脉内高剂量的环孢菌素对于难治性溃疡性结肠炎有效(Lichtiger et al；N.Engl.J.Med.1994；330；1841-5)且若经灌肠给药也可有效(Sandborn et al；Am.J.Gastroenterol.1993；88；640-5)。但是，对于克罗恩氏病的益处尚不太清楚。尽管报道了静脉内疗法适用于治愈难治性瘘，但较低的口服剂量在具有活动性克罗恩氏病的成人和儿童体内产生了令人失望的效果(例如参见Feagan et al；N.Engl.J.Med.1994；330；1846-51)。口服给药时，环孢菌素通常作为液体填充胶囊或作为油性悬剂给药。
更生霉素(CAS No.50-76-0；N，N′-(2-氨基-4，6-二甲基-3-氧代-3H-苯并噁嗪-1，9-二基二羰基)-双[苏氨酰-D-缬氨酰脯氨酰(N-甲基甘氨酰基)(N-甲基缬氨酸)1.5-3.1-内酯]是一种抗肿瘤剂，其已用于治疗妊娠期滋养层细胞瘤和其它实体瘤包括脑瘤、Wilm′s瘤和多种肉瘤。其也是免疫抑制剂且通常静脉内给药。
已知二十碳-5，8，11，14，17-五烯酸(″EPA″)、二十二碳-4，7，10，13，16，19-六烯酸(″DHA″)和其它PUFA可用于治疗IBD(例如参见，EP-A-0244832，EP-A-0289204，EP-A-0311091和WO-A-93/21912)。
EP-A-0825858(Buser et al；公布于1996年11月21日)公开了一种口服剂型，含有作为活性基本成分的PUFA，其为游离酸形式或为其药学上可接受的盐。该口服剂型用时间而非pH依赖性释放的包衣材料包被，其允许在回肠内释放PUFA。该口服剂型用于治疗IBD。
Zerouga等(Anti-Cancer Drugs 2002；13；301-311)合成并表征了包含两种抗癌剂DHA和甲氨蝶呤的亲脂性磷脂酰胆碱衍生物，所述抗癌剂分别共价连接在磷脂的sn-1和sn-2位。结果表明DHA和甲氨蝶呤在体外抑制鼠白血病细胞增殖，且当作为单个药物同时递送时以及当通过磷脂酰胆碱结构连接在一起时，DHA和甲氨蝶呤之间存在潜在的协同作用。
Ferguson(Proc.Annu.Meet.Am.Assoc.Cancer Res.1995；36；A1722)研究了γ-亚油酸(″GLA″)对人鳞状细胞癌系以及多药抗性和卡铂抗性变异株的细胞毒和化学调节作用。结果表明使用GLA预处理的细胞较未处理的细胞在接触长春新碱和卡铂时更加敏感。取决于GLA的浓度，卡铂的毒性在人鳞状细胞癌以及卡铂抗性变异细胞系中均增加50％。此外，观察到GLA使长春新碱的毒性增加了40％。
JP-A-63258816(Imayado et al；公布于1988年10月26日)公开了一种抗癌组合物，含有低选择毒性的抗癌剂(选自长春新碱、柔红霉素、VP-16和顺铂)和具有高选择毒性的高度不饱和脂肪酸(如GLA、花生四烯酸或EPA)。该文献公开了可以以施用所示抗癌剂的常规方式使用该组合物。该文献举例说明了抗癌剂与某一种高度不饱和脂肪酸的多种组合的0.5wt％乙醇溶液的作用的体外研究。脂肪酸的纯度均为99％。
JP-A-8092129(Yazawa et al；公布于1996年4月9日)公开了由自身免疫疾病引起的眼疾的治疗方法，其包含免疫抑制剂和EPA和/或DHA。所公开的免疫抑制剂包括地塞米松、环孢菌素A、雷帕霉素、FK506、咪唑立宾(mizoribine)、环磷酰胺、硫唑嘌呤与甲氨喋呤。在仅有的一个示例性实施方案中，服用环孢霉素A的两名患者和服用FK506的另两名患者被给予含鲔鱼油的软明胶胶囊，其中含有6％的EPA和25％的DHA。剂量为2400mg每天，其被分为三份给药。
WO-A-98/09621(Scott et al；公布于1998年3月12日)公开了使用PUFA治疗和预防抗癌化疗副作用的方法，所述PUFA的碳链长度为14-26且在分子中具有2-6个顺式或反式构型双键。优选的PUFA包括EPA和DHA。根据公开，该治疗特别适于治疗由于使用甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、环磷酰胺、顺铂、多柔比星、紫杉醇和长春新碱而引起的副作用。PUFA可以与抗癌药同时给药或优选在抗癌药之前以及其治疗过程中给药。PFUA的剂量可以是1mg-100g每天，PUFA可以以任何适宜的方式给药包括口服形式例如胶囊和片剂。
在WO-A-98/09621所例举的使用甲氨蝶呤的唯一实施方案中，以2g/天口服GLA锂的连续治疗在静脉内接受累积剂量为30g作为锂盐的GLA后一周，患乳腺癌的女性用″CMF″方案(环磷酰胺、甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶)治疗。抗癌治疗的副反应被减轻。
在WO-A-98/09621所例举的治疗胃肠道病况的唯一实施方案中，转移结肠癌男性患者用5-氟尿嘧啶治疗。在化疗之前两周以及整个化疗过程中，该男性也接受3g/天EPA的纯甘油三酯。同样，化疗的副作用被减轻。
Suzuki等人(J.Pharm.Sci.1998；87(10)；1196-202)公开了在大鼠体内使用脂肪酸乳剂增强了结肠和直肠内对于肽激素——胰岛素的吸收。该乳剂直接原位给予大鼠肠回路。测试了饱和、单不饱和与多不饱和脂肪酸包括EPA和DHA，结果表明胰岛素的吸收水平随着脂肪酸不饱和水平依次增加。
Barichello等人(Int.J.Pharm.1999；183(2)；125-32)公开了使用包含不饱和脂肪酸的Pluronic F-127凝胶制剂在大鼠中直肠施用胰岛素。
WO-A-97/44063(Bradley等人；公布于1997年11月27日)公开了DHA与药物剂的缀合物用于治疗非中枢神经系统病况特别是乳癌、结肠癌和卵巢癌。所述药物剂可以是抗肿瘤剂或免疫抑制剂。该文献例举了DHA与紫杉醇以及紫杉醇衍生物的缀合物。
WO-A-03/92671(Krishnan；公布于2003年11月13日)公开了抑制血管生成的组合物。该组合物包括烷基取代的脂肪酸，任选地具有免疫抑制剂比如环孢霉素。该文献公开了涉及血管生成的许多病况，包括多种癌症、克罗恩氏病和溃疡性结肠炎。
EP-A-0297842(Wood；公布于1989年1月4日)公开了含有芬氯酸(一种免疫抑制剂)的延迟释放片，以丙烯酸基树脂(EudragitF)包衣以确保在回肠末端和结肠释放该活性成分。
发明内容
需要对于涉及急性或慢性免疫应答不足的病况比如IBD和肠癌的改善治疗。因此，本发明的一个目的是提供这些病况的改善治疗。
本发明优选实施方案的一个目的在于提高免疫抑制剂和抗肿瘤剂的口服生物利用度。
本发明优选实施方案的另一个目的是提供施用免疫抑制剂和抗肿瘤剂的方法，其降低了通常与胃肠外给药途径相关的全身副作用(包括恶心和呕吐)。
根据第一方面，提供了PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物在制备药物中的应用，该药物含有至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物，用于局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况，特别是肠病。在使用PUFA衍生物的实施方案中，该衍生物通常是酯或n-3磷脂。
本发明的第一方面还提供了多不饱和脂肪酸(″PUFA″)或其药学上可接受的盐或衍生物和至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物在制备用于局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况尤其是肠病中的应用。
本发明第一方面还提供了至少一种免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物在制备含有PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物的药物中的应用，该药物用于局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况，特别是肠病。
具体实施例方式
术语“免疫抑制剂”意指在人或动物体内具有抑制免疫应答作用的药学上可接受的化合物。术语“抗肿瘤剂”意指对于肿瘤细胞具有细胞毒性的药学上可接受的化合物。术语“局部治疗”意指局部施用所述活性剂于至少部分的肠粘膜以治疗病况。这些术语将容易被技术人员所理解。
通过将活性剂局部施用于肠粘膜以达到局部或全身作用而提供了对于这些疾病的治疗。当所治疗的疾病是肠病时，活性剂具有局部作用。
与PUFA一起施用至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂的一个优势在于通常提高了所述药剂的口服生物利用度，并由此可给予较低剂量的所述药剂以治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况，特别是肠病，而不是必须经胃肠道外给药。由此避免了不期望的皮下和静脉内给予这些药物，并导致减少或消除了与高口服剂量或胃肠外用药相关的不期望的副作用。
不希望受限于任何具体理论，发明人相信药物吸收的增加不是由药理学作用而相反是由PUFA与药物相互作用引发的物理作用所导致的。据信，药物可“包装”于可与肠粘膜细胞融合的PUFA层中。与不饱和水平低的脂肪酸相比，PUFA的较高流动性可由此导致药物释放被提高。
在优选实施方案中，至少有某些PUFA和药物在胃后释放。通常，所有或几乎所有的释放发生于胃后。活性剂在肠中的释放位置可以是靶向的并且可根据所治疗的病况确定。
当准备系统性治疗病况如慢性炎症或肿瘤病时，优选在空肠内起始释放并沿着回肠的大部分继续进行。观察到活性剂的生物利用度沿着肠的该段增加。通常，在这些实施方案中，在回肠末端之前完全释放。相似的释放特征曲线可用于局部治疗肠病比如小肠炎症(如，小肠克罗恩氏病和白塞氏综合征)以及小肠肿瘤。
在另一些实施方案中，将在小肠开始释放并且沿大肠向下继续进行。例如，局部治疗结肠病况如结肠的炎症性病况(如溃疡性结肠炎)和结肠-直肠瘤时，优选活性剂在回肠-结肠释放。
据信在与肠粘膜接触时所述药剂与PUFA相互作用。PUFA有助于药剂被肠壁细胞吸收，从而增加药物的局部细胞吸收进入粘膜和肠壁的免疫细胞和肿瘤细胞中。只要在肠壁免疫细胞和/或肿瘤细胞中可存在高浓度的PUFA和所述药剂，通常就可实现药物的局部给药，发明人相信这就显著增强了组分的效果。
已知PUFA具有抗肿瘤和免疫抑制活性(如上所示)。由此，本发明的另一个优势在于联合施用所述药剂和PUFA导致药剂的抗肿瘤和/或免疫抑制作用的协同增强。
合适的PUFA包括ω-3、ω-6和ω-9PUFA，但只要使用PUFA，就优选它们未被取代。合适的实例包括EPA、DHA和GLA。至少一种PUFA优选是EPA或DHA。在一些优选实施方案中，使用含EPA和DHA的PUFA混合物。在这些实施方案中，混合物中EPA和DHA的总量优选至少约为混合物的60wt％。混合物可以是浓缩鱼油制品的形式。在一些优选实施方案中，混合物含有约50-约60wt％、优选55wt％的EPA和约15-约25wt％、优选20wt％的DHA。
该PUFA或至少一种PUFA优选是游离酸的形式。作为替代，该PUFA或至少一种PUFA可以是药学上可接受的盐比如锂或钠盐，药学上可接受的酯比如乙酯或甘油三酯或药学上可接受的n-3磷脂。
免疫抑制剂或抗肿瘤剂可含有至少一个氨基酸残基，例如1-15个氨基酸残基。适宜的氨基酸源的免疫抑制剂包括甲氨蝶呤、更生霉素、环孢菌素和单克隆抗体比如英夫利昔单抗、那他珠单抗(natalizumab)、达克珠单抗(daclizumab)或莫罗单抗(muromonab)。合适的氨基酸源的抗肿瘤剂包括甲氨蝶呤和更生霉素。
可与本发明联合使用其它非氨基酸源的药物。这些药物可以具有复杂的化学结构如生物碱，或是真菌或细菌源的。其它的非氨基酸源免疫抑制剂的实例包括6-巯基嘌呤(″6-MP″)、环磷酰胺、霉酚酸酯、泼尼松龙、西罗莫司、地塞米松、雷帕霉素、FK506、咪唑立宾、硫唑嘌呤和他克莫司。其它的非氨基酸源抗肿瘤剂的实例包括氟尿嘧啶、博来霉素、依托泊苷、紫杉醇、长春新碱、多柔比星、顺铂、柔红霉素和VP-16。
药物可包含至少一种口服剂型，其包含所述PUFA或所述其盐或衍生物与至少一种的所述免疫抑制剂和所述抗肿瘤剂或所述其盐或衍生物以及药学上可接受的载体的混合物。在这些实施方案中，免疫抑制剂或抗肿瘤剂与PUFA同时共施用。在这些实施方案中，PUFA与其它药物剂相分离，即不相结合。该混合物可基本上由该混合物组成或还可包含药学上可接受的载体。
作为替代，所述药物可包含至少一种包含所述PUFA或其所述盐或衍生物的第一口服剂型以及至少一种包含至少一种所述免疫抑制剂和所述抗肿瘤剂或其所述盐或衍生物的第二口服剂型。在这些实施方案中，免疫抑制剂或抗肿瘤剂可与PUFA同时或相继共同施用。第一或第二口服剂型还可包含药学上可接受的载体。
合适的待治疗病况可以是慢性炎症性疾病。例如，慢性炎症性疾病可由免疫应答的过度活性以及部分缺陷控制所引起。这些病况的实例包括IBD(即，克罗恩氏病和溃疡性结肠炎)、类风湿性关节炎、白塞氏综合征和银屑病。
另一种合适的待治疗病况可以是肿瘤。例如，可由缺乏对异常细胞的免疫识别和应答而引起肿瘤疾病。这些病况的实例包括肠癌和前列腺癌。
本发明对于肠病的局部治疗具有特殊应用。
待治疗的肠病可以是IBD，例如克罗恩氏病或溃疡性结肠炎。在这些实施方案中，所用的药物剂通常是选自相关上述列举的免疫抑制剂。
待治疗的肠病可以是肠癌。在这些实施方案中，抗肿瘤剂可以选自相关的上述列举内容。本发明对于治疗结肠和/或直肠癌具有特殊应用。
本发明的第一方面还提供了PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物用于提高药物中至少一种免疫抑制剂和抗肿瘤剂的生物利用度的应用，以局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况。
根据本发明的第二方面，提供了局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的疾病的方法，包括同时或相继给予PUFA或其药学上可接受的载体或衍生物以及至少一种免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或其衍生物。所述药物剂通常以治疗相关具体疾病所需的治疗有效量施用。在使用PUFA衍生物的实施方案中，衍生物通常是酯或n-3磷脂。该治疗可具有上述的任何特征。
如上所述，PUFA和药物剂可在同一口服剂型或不同口服剂型中共同施用。由此，术语“口服剂型”意在包括其中PUFA和药物剂在同一口服剂型中共同施用的实施方案以及其中PUFA和药物剂在不同口服剂型中共同施用的实施方案。合适的剂型包括胶囊(比如硬或软明胶胶囊)和片剂。在使用明胶胶囊的实施方案中，明胶可以是A型明胶或B型明胶，优选A型明胶。制备明胶的胶原源可以是猪、牛或鱼。优选猪明胶，特别是在使用游离酸形式的PUFA的实施方案中，因为与使用其它来源的明胶相比，PUFA与胶囊壁的不期望的相互作用的水平降低了，由此提高了制剂的稳定性和有效储存时间。
根据本发明的第三方面，提供了包含至少一种免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物的口服剂型，其中口服剂型包有延迟释放包衣，例如肠溶衣，以使药物在穿过胃以后延迟释放。
这样的口服剂型可以与包含PUFA的分离口服剂型比如EP-A-0825858中所公开的分离口服剂型联合使用，该公开内容在此引入作为参考。作为替代，该口服剂型还可包含至少一种PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物。
用于局部治疗肠病的口服剂型优选延迟释放PUFA和药物剂直至到达受影响的肠部分。在这些实施方案中，口服剂型可用包衣剂包衣，以允许在胃后释放活性成分或各活性成分以向肠粘膜局部施用活性成分。合适的包衣以pH依赖的方式或非pH依赖的方式延缓药物的释放。
口服剂型可用pH依赖的释放包衣材料包衣。从十二指肠至结肠的pH从约6平稳地升至约7.5。已开发了不同的聚丙烯酸基包衣材料，其在不同的肠pH处溶解，由此沿着肠道在不同点释放包衣剂型的活性物。合适的肠包衣材料包括EudragitTML、EudragitTMS和EudragitTMF( PharmaPolymers)。
包衣可以以非pH依赖的方式延迟药物的初始释放。例如，在优选实施方案中，包衣以时间而非pH依赖的方式延迟药物的起始释放。口服剂型可以用时间而非pH依赖的延迟释放包衣材料包衣。在这些实施方案中，释放位置可根据这种包衣的厚度而变化。例如，随着包衣厚度的增加，初始释放的位置沿着肠道后移。由此，相对较薄的包衣材料可提供在小肠(如空肠)中的初始释放，而相对较厚的包衣可提供在结肠的末端回肠中的初始释放。
在一些实施方案中，包衣厚度可足以延迟活性剂的初始释放至平均约30至约60分钟。这些实施方案将适于在回肠释放药物。在另一些实施方案中，包衣厚度可足以延迟活性剂的初始释放至平均约60至约120分钟且优选平均约90至120分钟。这些实施方案将适于在末端回肠或结肠中或附近起始释放活性剂。
时间而非pH依赖释放的包衣材料可以是中性的聚丙烯酸材料比如聚(丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯)材料。合适材料的实例包括Eudragit NE 30-D( Pharma GmbH)，其平均分子量约为800,000，通常用于形成延迟释放基质。
另一种合适的非pH依赖的延迟释放包衣是在结肠中通过细菌酶的作用而生物降解的包衣。合适包衣的实例是由乙基纤维素和直链淀粉制备的包衣，其是非pH依赖的且在结肠细菌酶作用下降解而在结肠释放药物。以相同方式工作的其它聚合物也是适宜的。
活性成分或各活性成分的释放优选沿着至少部分肠道持续释放。可使用本领域已知的任何适宜的持续释放活性成分的方法。但是，如果使用包衣了时间依赖而非pH依赖的释放包衣材料(尤其是Eudragit NE 30D)的软明胶胶囊，那么活性药物以微滴样方式沿着一段肠释放。发明人相信这样的持续释放特性是独特的。
不希望受限于任何具体理论，本发明人相信包衣溶胀并穿孔以允许肠液穿过包衣。当液体与明胶接触时，胶囊溶胀至囊壁无法保持其整体性，并允许胶囊内容物以微滴逸出包衣中的穿孔。该胶囊沿着肠继续运行，由此沿着肠的一段释放胶囊内容物。
包含至少一种免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物的口服剂型优选通过诊断或治疗而用于人或动物体的治疗。
在一个优选实施方案中，药物包含双重口服剂型。第一口服剂型是软明胶胶囊，含400mg或800mg药物组合物，其包含约55wt％EPA和约20wt％DHA，均为游离酸形式。该胶囊由A型猪明胶制备并用Eudragit NE 30 D包衣。第二口服剂型例如可以是2.5mg甲氨蝶呤片或25mg环孢菌素软胶囊。第二口服剂型优选用Eudragit NE 30 D包衣。
根据本发明第四方面，提供了包含至少一种第一口服剂型和至少一种第二口服剂型的药物制品，其中第一口服剂型包含PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物以及第二口服剂型包含至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物，其中至少一种的第一和第二口服剂型用在穿过胃后延迟释放所述活性剂的包衣剂包衣。
下面仅以实施例的方式描述本发明目前优选的实施方案。
实施例-双重口服剂型第一口服剂型(PUFA)向透明软明胶胶囊中分别填充1000mg包含至少60％重量DHA和EPA(Incromega 3F60；Croda Universal Ltd，UK)的鱼油浓缩物。通过在0.8巴压力下于25℃使用薄膜包衣组合物(如下)以35ml/min喷雾并于25℃空气干燥至少30分钟，从而使填充好的明胶胶囊用EudragitNE 30-D薄膜包衣使得在pH 5.5时可耐受30-60分钟。
制备薄膜包衣组合物(用于50,000个胶囊)时，向水(75mg)中缓慢地相继加入硅酮消泡乳剂(0.36mg)、褐色氧化铁(E 172；3.00mg)、二氧化钛(2.35mg)和滑石粉(10mg)并搅拌1-2小时以形成极细分散液。平均分子量约为800,000的聚(丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯)(Eudragit NE 30D；60mg)的30％水分散液，加入在少量水中的聚山梨醇酯80(MO 55F；0.2mg)，并搅拌所得混合物。加入硅酮消泡剂(2或3滴)以除去所得泡沫并缓慢加入前述分散液。容器经水(25mg)洗涤并搅拌分散液30分钟，之后过滤(150μm)。
第二口服剂型(甲氨蝶呤)包含2.5mg甲氨蝶呤钠和药学上可接受载体的至少一种片剂。应理解到本发明不限于上面参考优选实施方案所描述的细节，在不偏离如以下权利要求书中限定的精神或范围情况下可进行许多修改和变化。
权利要求
1.多不饱和脂肪酸(“PUFA”)或其药学上可接受的盐或衍生物在制备药物中的应用，该药物包含至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物，用于局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况。
2.如权利要求1所述的应用，其中至少一种PUFA是二十碳-5，8，11，14，17-五烯酸(“EPA”)。
3.如权利要求1或2所述的应用，其中至少一种PUFA是二十二碳-4，7，10，13，16，19-六烯酸(″DHA″)。
4.如前任一权利要求所述的应用，其中至少一种PUFA是游离酸形式。
5.如前任一权利要求所述的应用，其中所述抗肿瘤剂选自甲氨蝶呤、更生霉素、氟尿嘧啶、博来霉素、依托泊苷、紫杉醇、长春新碱、多柔比星、顺铂、柔红霉素和VP-16。
6.如前任一权利要求所述的应用，其中所述免疫抑制剂选自甲氨蝶呤、更生霉素、环孢菌素、6-巯基嘌呤、环磷酰胺、霉酚酸酯、泼尼松龙、西罗莫司、地塞米松、雷帕霉素、FK506、咪唑立宾、硫唑嘌呤和他克莫司和单克隆抗体。
7.如前任一权利要求所述的应用，其中所述药物包含至少一种口服剂型，该剂型包含所述PUFA或其所述盐或衍生物与至少一种的所述免疫抑制剂和所述抗肿瘤剂或其所述盐或衍生物的混合物。
8.如权利要求1-6任一项所述的应用，其中所述药物包含至少一种包含所述PUFA或其所述盐或衍生物的第一口服剂型以及至少一种包含至少一种的所述免疫抑制剂和所述抗肿瘤剂或其所述盐或衍生物的第二口服剂型以同时或相继施用。
9.如前任一权利要求所述的应用，其中所述病况是慢性炎症性疾病。
10.如权利要求9所述的应用，其中所述病况选自炎性肠病(″IBD″)、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎、白塞氏综合征和银屑病。
11.如权利要求1-8任一项所述的应用，其中所述病况是肿瘤疾病。
12.如权利要求11所述的应用，其中所述病况选自肠癌和前列腺癌。
13.局部治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的疾病的方法，包括同时或相继施用PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物与至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物。
14.一种口服剂型，包含至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物，其中该口服剂型用时间而非pH依赖的释放包衣材料包衣，其延迟所述活性剂的释放直至穿过胃以后。
15.如权利要求14所述的口服剂型，还包含PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物。
16.一种口服剂型，包含PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物以及至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物，其中该口服剂型用一种材料包衣，所述材料延迟所述活性剂的释放直至穿过胃以后。
17.如权利要求14-16任一项所述的口服剂型，用于经诊断或治疗而治疗人或动物体。
18.一种药物制品，包含至少一种包含PUFA或其药学上可接受的盐或衍生物的第一口服剂型以及至少一种包含至少一种的免疫抑制剂和抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物的第二口服剂型，其中第一和第二口服剂型的至少一种用包衣材料包衣，所述包衣材料延迟所述活性剂的释放直至穿过胃以后。
19.如权利要求1所述的应用，基本如说明书中所附实施例所述。
20.如权利要求14的口服剂型，基本如说明书中所附实施例所述。
21.如权利要求18所述的药物制品，基本如说明书中所附实施例所述。
全文摘要
使用多不饱和脂肪酸(″PUFA″)或其药学上可接受的盐或衍生物(比如EPA和/或DHA)与至少一种免疫抑制剂或抗肿瘤剂或其药学上可接受的盐或衍生物相联合，通过局部施用所述活性剂至肠粘膜的至少一部分而用于治疗涉及急性或慢性免疫应答不足的病况。可治疗的具体病况包括慢性炎症性疾病(如克罗恩氏病和溃疡性结肠炎)和肿瘤疾病(如肠癌和前列腺癌)。本发明优选实施方案的一个优势是增加了免疫抑制剂或抗肿瘤剂的生物利用度。
文档编号A61K9/48GK1968689SQ200580019762
公开日2007年5月23日 申请日期2005年6月15日 优先权日2004年6月18日
发明者乌尔里克·米特曼, 让-皮埃尔·萨谢托 申请人:狄洛特医药有限公司
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