药物组合物的制作方法
专利名称：药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种原料药为丹参丹酚酸A和人参皂苷Rg1 的药物组合物。
背景技术：
传统中药复方是以中药原药材或其有效部位进行组方，进行简单的提取工艺，制 备成制剂，缺乏物质基础研究，质量控制模糊，产品质量不稳定不均一，临床疗效不稳定；现 代天然药物是以活性物质研究为基础，经提取、分离与纯化等现代工艺获得有效成分或组 分有效部位，将彼此具有药效协同与互补作用的、在活性物质清楚并精确定量及量效关系 明确的基础上进行科学优选组方，活性有效成分采用精确定量，全面客观定量组方中有效 成分的含量，质量控制系统精确，客观全面反应产品的质量，达到产品质量稳定均一，药效 作用强，并且疗效稳定；传统中药配伍研究多停留在药材配伍或有效部位配伍的基础上， 虽然可以用中医理论进行解释，但其科学性一直存在争议，天然活性有效成分在量效关系 /时效关系等研究的基础上，通过配伍/比例优选，进行科学组方，是开发高效天然药物特 别是天然药物制剂的核心和灵魂所在，是在传承中医药特色和优势基础上，发展天然药物 创新、现代化与国际化的科学基础与科学发展发展之路；它既不是简单的药材在作用上、数 量上的相加，也不是机械的毒性反应的抵消，而是通过一系列科学的研究，在辨证法的基础 上，成为有机组合。天然药物有效成分的组方不能简单的看成中药药味复方的延续，中药药味的复方 是很多化合物组合的复方，而有效成分的复方是在纯度提高、用量加大的基础上进行的组 合，同时，也不是任何有效成分之间都能组合，必须通过科学的实验才能确认这种组合是否 可行，因此，天然药物有效成分的组合研究是一个系统的工程，不能想当然的认为药味、有 效部位或其他有效成分能够组合，与其相似或相近的有效成分也能够组合，这对于严谨的 医药学学科是不可取的，因此，有效成分之间的组方需要科学人员根据现有的、科学的方法 进行深入的研究才能确定。中国专利200310100813. χ公开了丹参总酚酸与人参总皂苷配伍的药物组合物， 二者是有效部位的药物组合，虽然经过药效学实验证明二者具有协同作用，但这种协同作 用的物质基础是不明确的，无法揭示其机理；本院申请的中国专利200710097272. 8公开了 丹酚酸A与三七总皂苷或人参皂苷Rb1配伍的药物组合物，这篇文献给出了丹参丹酚酸A 与三七总皂苷或人参皂苷Rbl具有协同作用的技术启示，但人参总皂苷中还含有人参皂苷 Rg1、三七皂苷R1等成分，将上述成分单独与丹参丹酚酸A配伍，是否也具有协同作用，无法 进行推测，只有通过创造性的技术实验才能获得。
发明内容
基于上述原因，我们在将丹参丹酚酸A和人参皂苷的组合进行广泛而深入的 研究，发现二者在一定重量份下进行组方具有协同的药理作用，即二者在一定重量份下可
3以组方，并且优于人参和丹参药味或有效部位的组方，在节省资源、具有更好的药效作用的 基础上，有效成分组合物具有更好的安全性。本发明通过以下技术方案实现的。一种药物组合物，原料药为丹参丹酚酸A和人参皂苷Rg1，其中丹参丹酚酸A2-32 重量份，人参皂苷Rg1I-S重量份。其中丹参丹酚酸A2-32重量份，人参皂苷Rgl2_4重量份。其中丹参丹酚酸A4-16重量份，人参皂苷Rg1I-S重量份。其中丹参丹酚酸A4-16重量份，人参皂苷Rgl2_4重量份。上述丹参丹酚酸A包括但不限于纯度为50% -100%的丹参丹酚酸A，上述人参皂 苷Rg1包括但不限于纯度为50% -100%的人参皂苷Rg1。上述丹参丹酚酸A包括但不限于纯度为90% -100%的丹参丹酚酸A，上述人参皂 苷Rg1包括但不限于纯度为90% -100%的人参皂苷Rg1。原料药为丹参丹酚酸A和人参皂苷Rg1，本发明丹参丹酚酸A和人参皂苷可以 由现有技术进行制备，其中人参皂苷Rg1也可以由人参、三七、西洋参、越南人参、竹节参，葫 芦科绞股蓝属绞股蓝、缘果绞股蓝等植物的根、茎、叶、花蕾中得到总皂苷，再经过高效液相 色谱制备方法进行纯化得到，也可以由硅胶柱层析进行单体分离，高效液相色谱法控制终 点得到，等等；本发明人参皂苷包括但不限于由下述方法得到取三七、人参、西洋参或绞股蓝提取得到的总皂苷，总皂苷加水溶解，滤过，滤液通 过非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗，洗脱液弃去，20% -60%乙醇洗脱，收集洗脱液， 浓缩、干燥，干燥物加水溶解，滤过，滤液通过非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗，洗脱 液弃去，再用10% -50%乙醇洗脱，洗脱液弃去，再用20% -60%乙醇洗脱，收集洗脱液， 浓缩干燥，得人参皂苷粗品，加入有机溶剂加热回流提取，提取液滤过，滤液回收溶剂 至干，残渣干燥，得到人参皂苷；其中非极性或弱极性大孔树脂为HPD-100、HPD-100A、 HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-1、1400 或 AB-8 ；其中有机溶剂为乙酸乙 酯、丙酮、正丁醇、乙醇、甲醇中的一种或几种。或者取三七、人参、西洋参或绞股蓝提取得到的总皂苷，总皂苷加水溶解；溶解 液滤过，滤液通过非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗，洗脱液弃去，20 %-60 %乙醇洗 脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，得到人参皂苷粗品，加入有机溶剂提取，提取液滤过，滤液 回收溶剂至干，残渣干燥，得到人参皂苷Rg1 ；其中非极性或弱极性大孔树脂为HPD-100、 HPD-100A, HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、DlOl、1300-1、1400 或 AB-8 ；其中有机溶 剂为乙酸乙酯、丙酮、正丁醇、乙醇、甲醇中的一种或几种。上述药物组合物制备的单位剂量的药物制剂。其中制剂中单位剂量为10_4000mg。上述药物组合物在制备治疗心脑血管疾病、微循环障碍、老年性痴呆、器官纤维化 或肿瘤疾病药物方面中应用。一、检测分析方法1、丹参丹酚酸A的检测分析实验方法
色谱柱CW反相色谱柱，250*4. 6mm, ODS ；色谱条件与系统适用性实验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速1.0ml/ min ；柱温35 °C ；检测波长286nm ；以乙腈-0. 2%醋酸水溶液为流动相，按下述梯度洗脱条件 进行梯度洗脱，运行90分钟；0-15分钟时，乙腈的比例由10%升至20%，0. 2%醋酸水溶液的比例由90%降 至80% ； 15-55分钟时，乙腈的比例由20%升至30%，0. 2%醋酸水溶液的比例由80%降 至70% ；55-65分钟时，乙腈的比例由30%升至50%，0.2%醋酸水溶液的比例由70%降 至50% ；65-72分钟时，乙腈的比例由50%升至80%，0. 2%醋酸水溶液的比例由50%降至 20% ；72-77分钟时，乙腈的比例80%,0. 2%醋酸水溶液的比例20% ；77-80分钟时，乙腈 的比例由80 %降至10%，0. 2%醋酸水溶液的比例由20%升至90% ；80-90分钟时，保持乙 腈-0. 2%醋酸水溶液以10 90的比例进行洗脱；对照品溶液的配制精密称取丹酚酸A对照品到容量瓶中，加甲醇溶解摇勻，并稀 释至刻度；样品溶液的配制取丹酚酸A样品，加入甲醇溶解摇勻，并稀释至刻度；或精密量 取或称取制剂，加甲醇溶解摇勻，并稀释至刻度；测定法分别精密吸取对照品溶液和样品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，采 用外标法以峰面积计算，即得；2、人参皂的检测分析实验方法采用高效液相色谱法进行含量测定；色谱柱C18反相色谱柱；色谱条件与系统适用性实验以十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂；流速1. Oml/min ；柱温25°C;检测波长203nm ；理论板数按人参皂苷I^1计应不低 于2500 ；以水乙腈为流动相，按下述梯度洗脱条件进行梯度洗脱，运行60分钟；0-40分钟时，水的比例由80%降至50%，乙腈的比例由20%升至50% ；40-43分 钟时，水的比例由50%降至20%，乙腈的比例由50%升至80% ；43-48分钟时，保持水的比 例为20%，保持乙腈的比例为80% ；48-50分钟时，水比例由20%升至80%，乙腈的比例由 80%降至20% ；50-60分钟保持水的比例为20%，乙腈的比例80% ；对照品溶液的配制精密称取人参皂苷对照品到容量瓶中，加甲醇溶解摇勻， 并稀释至刻度；供试品溶液的配制精密称取样品到容量瓶中加甲醇溶解摇勻，并稀释至刻度；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各，注入液相色谱仪，采用按外标 法以峰面积计算，即得。注本发明人参皂苷恥工对照品是法定标准品，购买自中国药品生物制品鉴定所。二、药效学实验实验1对麻醉大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用实验动物健康SD大鼠，体重M0460g。实验药物生理盐水；人参皂苷Rgl、本发明药物组合物。实验试剂20%乌拉坦按；碘酒；试剂盒；TTC0实验仪器呼吸机；心电图机；眼科镊；全自动生化分析仪；数码相机。实验方法将大鼠随机分组模型组、丹参总酚酸和人参总皂苷组、丹酚酸A和人参皂苷Rb1组、人参皂苷组、本发明不同重量份药物组合物实验组。置于相同环境预饲 养2天，自由饮食。预饲养结束后，进行实验，动物称重，20%乌拉坦按0.6ml/100g腹腔注 射，待麻醉满意后，仰卧固定于鼠板上，气管插管，接呼吸机，按10 12ml潮气量，70次/ 分的频率给予呼气，持续正压呼吸，吸呼比为1 1。根据呼吸频率及深度调整呼吸参 数。随后接心电图机，测正常心电图。剪去胸前手术区毛，碘酒消毒，剪开皮肤、皮下组织、 胸前肌肉及筋膜3 km，用18#血管钳沿第三肋间钝性分离肋间肌3cm长，打开胸腔及心 包膜，记录心电图，撑开3、4肋骨，用左手四指托住大鼠右侧胸腔，助手用眼科镊将胸腺向 上推，在左心耳与肺动脉圆锥之间找到结扎标志血管左冠状静脉，在左心耳下方2mm处用 无创小圆针带6-0丝线穿线，进针深度为1 1.5mm，宽2 3mm，穿线后记录心电图，经尾 静脉给予相应药液，给药IOmin后记录心电图，并用一带凹槽的小塑料管垫在结扎部位，两 端线头在其上结扎。结扎后即刻记录心电图，以左室前壁呈紫绀或II导联S-T段弓背向上 抬高大于0. Imv并持续0. 5h以上为结扎成功标志(S-T段无改变者淘汰)。结扎后IOmin 再次记录心电图，结扎30min后剪开结扎线，实现再灌注，并记录再灌注即刻心电图，清除 胸腔内积血后逐层缝合胸壁，撤呼吸机，动物恢复自主呼吸，气管切口不做处理。再灌即刻、 10min、20min、40min、lh、2h、3h分别记录心电图。再灌3小时，经腹主动脉取血，4000rpm离 心IOmin取血清，采用全自动生化分析仪检测LDH、CK及CK-MB活性，并采用相应试剂盒检 测血清S0D、MDA(以上指标具体检测步骤详见说明书)，解剖取心脏，冰生理盐水洗去残血， 剪去心房及右心室，立即放入冰箱中冷冻。将心脏在冰箱中冷冻IOmin后，自心尖向心底平 行房室沟方向将左室切成相等厚度的5片，放入TTC染液中，37°C染色lOmin，未坏死区 为暗红色，坏死区呈灰白色。数码相机拍照。将坏死区和非坏死区分别称重，计算坏死区占 左心室重量的百分比，即梗死范围。
权利要求
1.一种药物组合物，其特征在于原料药为丹参丹酚酸A和人参皂苷Rg1,其中丹参丹酚 酸A2-32重量份，人参皂苷Rgll_8重量份。
2.根据权利要求1所述的一种药物组合物，其中丹参丹酚酸A2-32重量份，人参皂苷 Rgl2-4重量份。
3.根据权利要求1所述的一种药物组合物，其中丹参丹酚酸A4-16重量份，人参皂苷 Rg11-8重量份。
4.根据权利要求1所述的一种药物组合物，其中丹参丹酚酸A4-16重量份，人参皂苷 Rgl2-4重量份。
5.根据权利要求1-4任一项所述的一种药物组合物，其中丹参丹酚酸A的纯度为 50 % -100 %，人参皂苷的纯度为50 % -100 %。
6.根据权利要求1-4任一项所述的一种药物，其中丹参丹酚酸A纯度为90%-100%, 人参皂的纯度为90% -100%。
7.根据权利要求1-4任一项所述的一种药物组合物，原料药为丹参丹酚酸A和人参皂 苷Rg1,其中人参皂苷Rg1的制备方法为取三七、人参、西洋参或绞股蓝提取得到的总皂苷，总皂苷加水溶解，滤过，滤液通过非 极性或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗，洗脱液弃去，20% -60%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩、 干燥，干燥物加水溶解，滤过，滤液通过非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗，洗脱液弃 去，再用10% -50%乙醇洗脱，洗脱液弃去，再用20% -60%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干 燥，得人参皂苷粗品，加入有机溶剂加热回流提取，提取液滤过，滤液回收溶剂至干，残 渣干燥，得到人参皂苷；其中非极性或弱极性大孔树脂为HPD-100、HPD-100A、HPD-300、 HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-1、1400 或 AB-8 ；其中有机溶剂为乙酸乙酯、丙酮、 正丁醇、乙醇、甲醇中的一种或几种；或者取三七、人参、西洋参或绞股蓝提取得到的总皂苷，总皂苷加水溶解；溶解液滤 过，滤液通过非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗，洗脱液弃去，20 %-60 %乙醇洗脱，收 集洗脱液，浓缩、干燥，得到人参皂苷粗品，加入有机溶剂提取，提取液滤过，滤液回收溶 剂至干，残渣干燥，得到人参皂苷Rg1 ；其中非极性或弱极性大孔树脂为HPD-100、HPD-100A、 HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-1、1400 或 AB-8 ；其中有机溶剂为乙酸乙 酯、丙酮、正丁醇、乙醇、甲醇中的一种或几种。
8.根据权利要求1-4任一项所述的一种药物组合物制备的单位剂量的药物制剂。
9.根据权利要求8所述的一种药物组合物制备的单位剂量的药物制剂，其中制剂制备 方法中单位剂量为10-4000mg。
10.根据权利要求1-4任一项所述的药物组合物在制备治疗心脑血管疾病、微循环障 碍、老年性痴呆、器官纤维化或肿瘤疾病药物方面中应用。
全文摘要
本发明公开了一种药物组合物，其特征在于原料药为丹参丹酚酸A和人参皂苷Rg1，其中丹参丹酚酸A2-32重量份，人参皂苷Rg11-8重量份。优选丹参丹酚酸A2-32重量份，人参皂苷Rg12-4重量份。优选丹参丹酚酸A4-16重量份，人参皂苷Rg11-8重量份。优选丹参丹酚酸A4-16重量份，人参皂苷Rg12-4重量份。药理实验表明，本发明药物组合物具有协同作用，与人参、丹参有效部位等组合物比较，具有更好的药理作用。
文档编号A61P35/00GK102085206SQ20091024175
公开日2011年6月8日 申请日期2009年12月7日 优先权日2009年12月7日
发明者孙德杰, 渠守峰, 米长江, 郭小鹏, 顾群 申请人:北京本草天源药物研究院
技术领域：
本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种原料药为丹参丹酚酸A和人参皂苷Rg1 的药物组合物。
背景技术：
传统中药复方是以中药原药材或其有效部位进行组方，进行简单的提取工艺，制 备成制剂，缺乏物质基础研究，质量控制模糊，产品质量不稳定不均一，临床疗效不稳定；现 代天然药物是以活性物质研究为基础，经提取、分离与纯化等现代工艺获得有效成分或组 分有效部位，将彼此具有药效协同与互补作用的、在活性物质清楚并精确定量及量效关系 明确的基础上进行科学优选组方，活性有效成分采用精确定量，全面客观定量组方中有效 成分的含量，质量控制系统精确，客观全面反应产品的质量，达到产品质量稳定均一，药效 作用强，并且疗效稳定；传统中药配伍研究多停留在药材配伍或有效部位配伍的基础上， 虽然可以用中医理论进行解释，但其科学性一直存在争议，天然活性有效成分在量效关系 /时效关系等研究的基础上，通过配伍/比例优选，进行科学组方，是开发高效天然药物特 别是天然药物制剂的核心和灵魂所在，是在传承中医药特色和优势基础上，发展天然药物 创新、现代化与国际化的科学基础与科学发展发展之路；它既不是简单的药材在作用上、数 量上的相加，也不是机械的毒性反应的抵消，而是通过一系列科学的研究，在辨证法的基础 上，成为有机组合。天然药物有效成分的组方不能简单的看成中药药味复方的延续，中药药味的复方 是很多化合物组合的复方，而有效成分的复方是在纯度提高、用量加大的基础上进行的组 合，同时，也不是任何有效成分之间都能组合，必须通过科学的实验才能确认这种组合是否 可行，因此，天然药物有效成分的组合研究是一个系统的工程，不能想当然的认为药味、有 效部位或其他有效成分能够组合，与其相似或相近的有效成分也能够组合，这对于严谨的 医药学学科是不可取的，因此，有效成分之间的组方需要科学人员根据现有的、科学的方法 进行深入的研究才能确定。中国专利200310100813. χ公开了丹参总酚酸与人参总皂苷配伍的药物组合物， 二者是有效部位的药物组合，虽然经过药效学实验证明二者具有协同作用，但这种协同作 用的物质基础是不明确的，无法揭示其机理；本院申请的中国专利200710097272. 8公开了 丹酚酸A与三七总皂苷或人参皂苷Rb1配伍的药物组合物，这篇文献给出了丹参丹酚酸A 与三七总皂苷或人参皂苷Rbl具有协同作用的技术启示，但人参总皂苷中还含有人参皂苷 Rg1、三七皂苷R1等成分，将上述成分单独与丹参丹酚酸A配伍，是否也具有协同作用，无法 进行推测，只有通过创造性的技术实验才能获得。
发明内容
基于上述原因，我们在将丹参丹酚酸A和人参皂苷的组合进行广泛而深入的 研究，发现二者在一定重量份下进行组方具有协同的药理作用，即二者在一定重量份下可
3以组方，并且优于人参和丹参药味或有效部位的组方，在节省资源、具有更好的药效作用的 基础上，有效成分组合物具有更好的安全性。本发明通过以下技术方案实现的。一种药物组合物，原料药为丹参丹酚酸A和人参皂苷Rg1，其中丹参丹酚酸A2-32 重量份，人参皂苷Rg1I-S重量份。其中丹参丹酚酸A2-32重量份，人参皂苷Rgl2_4重量份。其中丹参丹酚酸A4-16重量份，人参皂苷Rg1I-S重量份。其中丹参丹酚酸A4-16重量份，人参皂苷Rgl2_4重量份。上述丹参丹酚酸A包括但不限于纯度为50% -100%的丹参丹酚酸A，上述人参皂 苷Rg1包括但不限于纯度为50% -100%的人参皂苷Rg1。上述丹参丹酚酸A包括但不限于纯度为90% -100%的丹参丹酚酸A，上述人参皂 苷Rg1包括但不限于纯度为90% -100%的人参皂苷Rg1。原料药为丹参丹酚酸A和人参皂苷Rg1，本发明丹参丹酚酸A和人参皂苷可以 由现有技术进行制备，其中人参皂苷Rg1也可以由人参、三七、西洋参、越南人参、竹节参，葫 芦科绞股蓝属绞股蓝、缘果绞股蓝等植物的根、茎、叶、花蕾中得到总皂苷，再经过高效液相 色谱制备方法进行纯化得到，也可以由硅胶柱层析进行单体分离，高效液相色谱法控制终 点得到，等等；本发明人参皂苷包括但不限于由下述方法得到取三七、人参、西洋参或绞股蓝提取得到的总皂苷，总皂苷加水溶解，滤过，滤液通 过非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗，洗脱液弃去，20% -60%乙醇洗脱，收集洗脱液， 浓缩、干燥，干燥物加水溶解，滤过，滤液通过非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗，洗脱 液弃去，再用10% -50%乙醇洗脱，洗脱液弃去，再用20% -60%乙醇洗脱，收集洗脱液， 浓缩干燥，得人参皂苷粗品，加入有机溶剂加热回流提取，提取液滤过，滤液回收溶剂 至干，残渣干燥，得到人参皂苷；其中非极性或弱极性大孔树脂为HPD-100、HPD-100A、 HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-1、1400 或 AB-8 ；其中有机溶剂为乙酸乙 酯、丙酮、正丁醇、乙醇、甲醇中的一种或几种。或者取三七、人参、西洋参或绞股蓝提取得到的总皂苷，总皂苷加水溶解；溶解 液滤过，滤液通过非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗，洗脱液弃去，20 %-60 %乙醇洗 脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，得到人参皂苷粗品，加入有机溶剂提取，提取液滤过，滤液 回收溶剂至干，残渣干燥，得到人参皂苷Rg1 ；其中非极性或弱极性大孔树脂为HPD-100、 HPD-100A, HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、DlOl、1300-1、1400 或 AB-8 ；其中有机溶 剂为乙酸乙酯、丙酮、正丁醇、乙醇、甲醇中的一种或几种。上述药物组合物制备的单位剂量的药物制剂。其中制剂中单位剂量为10_4000mg。上述药物组合物在制备治疗心脑血管疾病、微循环障碍、老年性痴呆、器官纤维化 或肿瘤疾病药物方面中应用。一、检测分析方法1、丹参丹酚酸A的检测分析实验方法
色谱柱CW反相色谱柱，250*4. 6mm, ODS ；色谱条件与系统适用性实验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速1.0ml/ min ；柱温35 °C ；检测波长286nm ；以乙腈-0. 2%醋酸水溶液为流动相，按下述梯度洗脱条件 进行梯度洗脱，运行90分钟；0-15分钟时，乙腈的比例由10%升至20%，0. 2%醋酸水溶液的比例由90%降 至80% ； 15-55分钟时，乙腈的比例由20%升至30%，0. 2%醋酸水溶液的比例由80%降 至70% ；55-65分钟时，乙腈的比例由30%升至50%，0.2%醋酸水溶液的比例由70%降 至50% ；65-72分钟时，乙腈的比例由50%升至80%，0. 2%醋酸水溶液的比例由50%降至 20% ；72-77分钟时，乙腈的比例80%,0. 2%醋酸水溶液的比例20% ；77-80分钟时，乙腈 的比例由80 %降至10%，0. 2%醋酸水溶液的比例由20%升至90% ；80-90分钟时，保持乙 腈-0. 2%醋酸水溶液以10 90的比例进行洗脱；对照品溶液的配制精密称取丹酚酸A对照品到容量瓶中，加甲醇溶解摇勻，并稀 释至刻度；样品溶液的配制取丹酚酸A样品，加入甲醇溶解摇勻，并稀释至刻度；或精密量 取或称取制剂，加甲醇溶解摇勻，并稀释至刻度；测定法分别精密吸取对照品溶液和样品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，采 用外标法以峰面积计算，即得；2、人参皂的检测分析实验方法采用高效液相色谱法进行含量测定；色谱柱C18反相色谱柱；色谱条件与系统适用性实验以十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂；流速1. Oml/min ；柱温25°C;检测波长203nm ；理论板数按人参皂苷I^1计应不低 于2500 ；以水乙腈为流动相，按下述梯度洗脱条件进行梯度洗脱，运行60分钟；0-40分钟时，水的比例由80%降至50%，乙腈的比例由20%升至50% ；40-43分 钟时，水的比例由50%降至20%，乙腈的比例由50%升至80% ；43-48分钟时，保持水的比 例为20%，保持乙腈的比例为80% ；48-50分钟时，水比例由20%升至80%，乙腈的比例由 80%降至20% ；50-60分钟保持水的比例为20%，乙腈的比例80% ；对照品溶液的配制精密称取人参皂苷对照品到容量瓶中，加甲醇溶解摇勻， 并稀释至刻度；供试品溶液的配制精密称取样品到容量瓶中加甲醇溶解摇勻，并稀释至刻度；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各，注入液相色谱仪，采用按外标 法以峰面积计算，即得。注本发明人参皂苷恥工对照品是法定标准品，购买自中国药品生物制品鉴定所。二、药效学实验实验1对麻醉大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用实验动物健康SD大鼠，体重M0460g。实验药物生理盐水；人参皂苷Rgl、本发明药物组合物。实验试剂20%乌拉坦按；碘酒；试剂盒；TTC0实验仪器呼吸机；心电图机；眼科镊；全自动生化分析仪；数码相机。实验方法将大鼠随机分组模型组、丹参总酚酸和人参总皂苷组、丹酚酸A和人参皂苷Rb1组、人参皂苷组、本发明不同重量份药物组合物实验组。置于相同环境预饲 养2天，自由饮食。预饲养结束后，进行实验，动物称重，20%乌拉坦按0.6ml/100g腹腔注 射，待麻醉满意后，仰卧固定于鼠板上，气管插管，接呼吸机，按10 12ml潮气量，70次/ 分的频率给予呼气，持续正压呼吸，吸呼比为1 1。根据呼吸频率及深度调整呼吸参 数。随后接心电图机，测正常心电图。剪去胸前手术区毛，碘酒消毒，剪开皮肤、皮下组织、 胸前肌肉及筋膜3 km，用18#血管钳沿第三肋间钝性分离肋间肌3cm长，打开胸腔及心 包膜，记录心电图，撑开3、4肋骨，用左手四指托住大鼠右侧胸腔，助手用眼科镊将胸腺向 上推，在左心耳与肺动脉圆锥之间找到结扎标志血管左冠状静脉，在左心耳下方2mm处用 无创小圆针带6-0丝线穿线，进针深度为1 1.5mm，宽2 3mm，穿线后记录心电图，经尾 静脉给予相应药液，给药IOmin后记录心电图，并用一带凹槽的小塑料管垫在结扎部位，两 端线头在其上结扎。结扎后即刻记录心电图，以左室前壁呈紫绀或II导联S-T段弓背向上 抬高大于0. Imv并持续0. 5h以上为结扎成功标志(S-T段无改变者淘汰)。结扎后IOmin 再次记录心电图，结扎30min后剪开结扎线，实现再灌注，并记录再灌注即刻心电图，清除 胸腔内积血后逐层缝合胸壁，撤呼吸机，动物恢复自主呼吸，气管切口不做处理。再灌即刻、 10min、20min、40min、lh、2h、3h分别记录心电图。再灌3小时，经腹主动脉取血，4000rpm离 心IOmin取血清，采用全自动生化分析仪检测LDH、CK及CK-MB活性，并采用相应试剂盒检 测血清S0D、MDA(以上指标具体检测步骤详见说明书)，解剖取心脏，冰生理盐水洗去残血， 剪去心房及右心室，立即放入冰箱中冷冻。将心脏在冰箱中冷冻IOmin后，自心尖向心底平 行房室沟方向将左室切成相等厚度的5片，放入TTC染液中，37°C染色lOmin，未坏死区 为暗红色，坏死区呈灰白色。数码相机拍照。将坏死区和非坏死区分别称重，计算坏死区占 左心室重量的百分比，即梗死范围。
权利要求
1.一种药物组合物，其特征在于原料药为丹参丹酚酸A和人参皂苷Rg1,其中丹参丹酚 酸A2-32重量份，人参皂苷Rgll_8重量份。
2.根据权利要求1所述的一种药物组合物，其中丹参丹酚酸A2-32重量份，人参皂苷 Rgl2-4重量份。
3.根据权利要求1所述的一种药物组合物，其中丹参丹酚酸A4-16重量份，人参皂苷 Rg11-8重量份。
4.根据权利要求1所述的一种药物组合物，其中丹参丹酚酸A4-16重量份，人参皂苷 Rgl2-4重量份。
5.根据权利要求1-4任一项所述的一种药物组合物，其中丹参丹酚酸A的纯度为 50 % -100 %，人参皂苷的纯度为50 % -100 %。
6.根据权利要求1-4任一项所述的一种药物，其中丹参丹酚酸A纯度为90%-100%, 人参皂的纯度为90% -100%。
7.根据权利要求1-4任一项所述的一种药物组合物，原料药为丹参丹酚酸A和人参皂 苷Rg1,其中人参皂苷Rg1的制备方法为取三七、人参、西洋参或绞股蓝提取得到的总皂苷，总皂苷加水溶解，滤过，滤液通过非 极性或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗，洗脱液弃去，20% -60%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩、 干燥，干燥物加水溶解，滤过，滤液通过非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗，洗脱液弃 去，再用10% -50%乙醇洗脱，洗脱液弃去，再用20% -60%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干 燥，得人参皂苷粗品，加入有机溶剂加热回流提取，提取液滤过，滤液回收溶剂至干，残 渣干燥，得到人参皂苷；其中非极性或弱极性大孔树脂为HPD-100、HPD-100A、HPD-300、 HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-1、1400 或 AB-8 ；其中有机溶剂为乙酸乙酯、丙酮、 正丁醇、乙醇、甲醇中的一种或几种；或者取三七、人参、西洋参或绞股蓝提取得到的总皂苷，总皂苷加水溶解；溶解液滤 过，滤液通过非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗，洗脱液弃去，20 %-60 %乙醇洗脱，收 集洗脱液，浓缩、干燥，得到人参皂苷粗品，加入有机溶剂提取，提取液滤过，滤液回收溶 剂至干，残渣干燥，得到人参皂苷Rg1 ；其中非极性或弱极性大孔树脂为HPD-100、HPD-100A、 HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-1、1400 或 AB-8 ；其中有机溶剂为乙酸乙 酯、丙酮、正丁醇、乙醇、甲醇中的一种或几种。
8.根据权利要求1-4任一项所述的一种药物组合物制备的单位剂量的药物制剂。
9.根据权利要求8所述的一种药物组合物制备的单位剂量的药物制剂，其中制剂制备 方法中单位剂量为10-4000mg。
10.根据权利要求1-4任一项所述的药物组合物在制备治疗心脑血管疾病、微循环障 碍、老年性痴呆、器官纤维化或肿瘤疾病药物方面中应用。
全文摘要
本发明公开了一种药物组合物，其特征在于原料药为丹参丹酚酸A和人参皂苷Rg1，其中丹参丹酚酸A2-32重量份，人参皂苷Rg11-8重量份。优选丹参丹酚酸A2-32重量份，人参皂苷Rg12-4重量份。优选丹参丹酚酸A4-16重量份，人参皂苷Rg11-8重量份。优选丹参丹酚酸A4-16重量份，人参皂苷Rg12-4重量份。药理实验表明，本发明药物组合物具有协同作用，与人参、丹参有效部位等组合物比较，具有更好的药理作用。
文档编号A61P35/00GK102085206SQ20091024175
公开日2011年6月8日 申请日期2009年12月7日 优先权日2009年12月7日
发明者孙德杰, 渠守峰, 米长江, 郭小鹏, 顾群 申请人:北京本草天源药物研究院
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