绿原酸在制备治疗骨髓感染的药物中的用途的制作方法

专利名称：：绿原酸在制备治疗骨髓感染的药物中的用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及绿原酸的新用途，具体来说，是绿原酸在制备治疗骨髓感染的药物中的用途。
背景技术：
：绿原酸广泛存在于各种药用植物如金银花等中，目前对它的化学结构研究已经清楚，已有人对其进行药用研究，报道了绿原酸可以应用于治疗肿瘤等疾病。绿原酸(chlorogenicacid)是一种从双子叶植物(如忍冬叶、咖啡豆、向日葵)的叶和果实分离得到的酚类，也是许多中草药(如杜仲、金银花、茵陈等)及中药复方制剂抗菌消炎、清热解毒的主要活性成分，目前已成为中草药制剂质量控制的主要指标之一。绿原酸是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。它是一种由咖啡酸(caffeicacid)与奎尼酸(鸡纳酸，quinicacid，即1_羟基六氢没食子酸)縮合而成的縮酚酸，异名咖啡鞣酸，化学名3-0-咖啡酰奎尼酸(3-0-caffeoylquinicacid)，分子式为C16H1809，分子量345.30，半水合物为针状晶体，时变为无水化合物，易溶于水、乙醇、丙酮，微溶于乙酸乙酯，常温下呈淡黄色固体。绿原酸的结构式如下植物中绿原酸的生物合成包括了一系列的酶促反应。在酶的催化下，葡萄糖转化成莽草酸(shikimicacid)，后者再转化成苯丙氨酸，最后经合成酶作用得绿原酸。绿原酸在植物中分布广泛，从高等双子叶植物到蕨类植物均有报道，但含量较高的植物不多，主要存在于忍冬科忍冬属(Lonicera)、菊科蒿属(Artemisia)植物中，其中包括杜仲、金银花、向日葵、咖啡、可可树。由于绿原酸是极性较强的有机酸，易溶于醇、水，难溶于氯仿、乙醚，因此绿原酸的提取方法较多，有醇(甲醇、乙醇)溶法、水提醇沉、醇提铅沉、石灰乳沉淀法及聚酰胺柱层析法等。现有文献报道的绿原酸的药理作用有l、对透明质酸酶及葡萄糖-6-磷酸酶的抑制作用透明质酸梅(HAase)是裂解粘多糖的酶之一，可催化透明质酸(HA)的分解，关系到血管系统的通透性和炎症反应。HA是由糖醛酸和乙酰氨基葡萄糖组成的一种粘多糖，具有多种功能，如治愈创伤，使皮肤润湿健康，润滑关节和防止炎症等。从狭叶紫锥花(EchinaceaamgustifoliaDC)根的乙酸乙酯提取物中发现3，5_二咖啡酰奎尼酸(朝鲜蓟酸)和绿原酸有较强的抑制HAase激活的作用。动物体内的研究证明，使用绿原酸可以降低由使用胰高血糖素引起的(肝糖分解造成的)高血糖峰值。因此，绿原酸可以降低血糖水平，提高肝脏葡萄糖-6-磷酸和肝糖原的浓度。2、自由基的清除及抗脂质过氧化作用绿原酸抑制前列腺素代谢中脂氧化酶活性，抑制维生素A的氧化，保护肾上腺素免受氧化，抗维生素A酸(retinoicacid)5，6_环氧化的生物活性，绿原酸甲酯和二咖啡酰奎尼酸可抑制线粒体和微粒体脂质过氧化。绿原酸和3，5-二咖啡酰奎尼酸属于小分子化合物，能与过氧自由基快速反应，因此它们是潜在重要的生物抗氧化剂。其可能的抗氧化机制为儿茶酚类(catechols)部分作为过氧自由基接受氢原子供体，继而转化成低活性产物。因此，它们可终止链自由基反应。3、抗癌变作用绿原酸是植物代谢中的一种重要物质，也是促佛波醇酯活性肿瘤的抑制剂。近来，日本学者研究了杜仲茶的变异原性抑制作用(Antimutagenicity)与杜仲叶所含的绿原酸、京尼平甙、京尼平甙酸等抗变异原性成分有关，揭示了杜仲茶对肿瘤的预防具有重要意义。4、预防心血管疾病绿原酸是咖啡中一种主要的酚类化合物。日常引用咖啡的人每日摄取量为0.5-lg。绿原酸和咖啡酸在体外是抗氧化剂，因此可能对预防心血管疾病有作用。5、抗菌、抗病毒作用绿原酸和异绿原酸对多种致病菌和病毒有较强的抑制和杀灭作用，还有利胆、降压、消炎及显著增加胃肠蠕动和促进胃液分泌等药理作用。目前，关于绿原酸的制药用途有相关报道，如CN200410022438.6，发明名称高纯度绿原酸制剂，该发明涉及高纯度绿原酸为原料制备成药学上可应用于临床的各种剂型的药品。采用含量95%_105%的绿原酸制成含lmg-3g的各种注射液、无菌粉针、各种片剂、胶囊、口服液、滴眼液、软膏、各种缓控释制剂。绿原酸作为一种有效的中药成分，是大约170余种中成药的定性或者定量指标。公开的申请号为CN02829404.l，发明名称"能作为抗白血病药物的草药分子"的专利申请中，该发明公开了从萎叶叶提取物中或从任何其它来源分离到的化合物绿原酸在治疗急性和慢性髓细胞性白血病和淋巴细胞性白血病中新的用途，还提供了含有绿原酸和可药用添加剂的用于治疗急性和慢性髓细胞性白血病和淋巴细胞性白血病的药物组合物，它包含有效量的、从萎叶叶的任何植物部分或任何其它天然或合成来源分离到的绿原酸(CA)和/或3-o-p-香豆酰奎尼酸(PCQ)，和可药用添加剂。白血病是骨髓的粒系统细胞异常增生而致的一种恶性肿瘤，因此，说明绿原酸可以通过抑制白细胞的过度增生，从而对急性和慢性粒细胞性白血病即通常意义上的血癌有治疗的作用。有些疾病，如血小板减少症、贫血、白细胞减少症等，与骨髓细胞功能低下有关。增强骨髓细胞功效实质是通过对骨髓干细胞的作用，治疗或纠正血小板减少症、贫血、白细胞减少症。而在现有技术中，尚未发现绿原酸对骨髓功效具有影响的相关报道。
发明内容本发明的技术方案是提供绿原酸的新用途，具体地，是在制备具有增加骨髓细胞功效药物的用途。本发明提供了绿原酸Chlorogenicacid在制备增加骨髓细胞功效的药物中的用途。本发明采用的绿原酸可以是来自于天然植物提取、精制，也可采用合成方式合成。其中，所述的药物是促进骨髓细胞增殖、分化、成熟与释放功能的药物。进一步地，所述的药物是用于增加骨髓干细胞的药物。增加骨髓细胞功效实质是指通过对骨髓干细胞的作用，增加骨髓三大系统细胞的数量的作用。进一步地，所述的药物是用于增加骨髓造血干细胞的药物。进一步地，上述用于增加骨髓造血干细胞的药物是用于增强造血功能，用于白细胞减少症的药物；更进一步地，所述药物是治疗粒细胞减少症的药物。或者，上述用于增加骨髓造血干细胞的药物是用于治疗血小板减少症、贫血的药物。更进一步地，所述的贫血是失血性贫血、溶血性贫血、巨细胞贫血、再生障碍性贫血。由于绿原酸可对整个骨髓细胞有促进作用，骨髓纤维化致整个骨髓三大系统(红系、粒系、巨细胞系)的细胞减少，出现红系的贫血，粒系的白细胞减少，巨细胞系的血小板减少。绿原酸对白细胞有正常增生作用，是通过对正常的骨髓干细胞的促进作用，从而促进三大系统的骨髓细胞正常发生，因为属于正常促进作用，不会对粒系统产生增生过度的作用。贫血系各种原因致骨髓红系统增生障碍，使外周血红细胞数量和或红细胞血红蛋白含量减少，或各种原因致外周血的红细胞破坏丢失过多，使外周血红细胞数量和或红细胞血红蛋白含量减少而产生的疾病、也是一种临床症状。其中，所述的药物是治疗骨髓纤维化的药物。其中，所述的药物是治疗骨髓感染的药物。骨髓感染后也造成骨髓三大系统的细胞减少，绿原酸的作用是对整个骨髓细胞有促进作用。其中，所述的药物是对脾脏造血干细胞损伤有保护、修复作用的药物。进一步地，所述的药物是治疗脾功能亢进的药物。脾功能亢进致三大系统的细胞在脾脏破坏加速，使细胞在外周血的周期縮短，绿原酸对整个骨髓细胞有促进作用，加快产出。本发明还提供了一种具有增加骨髓细胞功效的药物组合物，它是以有效量的绿原酸为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的药剂。其中，所述的药剂中每制剂单位含有绿原酸l-3000mg。根据绿原酸动物安全性试验(长期毒性试验)结果(160mg/kg)推算人用安全剂量为不大于90mg/kg，若人体体重按50kg计算，人用剂量不超过4500mg/日。进一步地，所述的药剂中每制剂单位含有绿原酸l-3000mg。其中，所述的药剂是口服制剂或注射剂。经过实验，发现绿原酸可升高白细胞；可剌激犬骨髓细胞增生，包括对正常的骨髓干细胞的增加作用，并且绿原酸对6°Co_Y射线致小鼠脾脏造血干细胞损伤有显著地保护作用，从而促进三大系统的骨髓细胞正常发生。机体的造血过程是一个活跃的细胞增殖、分化、成熟与释放的过程。它是由多潜能造血干细胞的自我更新维持其数量的恒定，并由多潜能造血干细胞到各系定向祖细胞，再进一步增殖、分化、释放到外周血循环。药物可通过影响造血干细胞、祖细胞的增殖分化等多种环节影响造血过程。因此，造血祖细胞体外培养技术的建立为本发明药物的作用提供了手段和方法。本发明通过药效试验，对9月龄小鼠为实验模型并以同月龄的小鼠为对照说明了绿原酸对其造血功能的影响。研究结果显示小鼠CFU-S、CFU-GM、CFU-E和BFU-E的增殖分化能力和外周血WBC数明显低于同月龄的小鼠。而绿原酸可使小鼠降低的CFU-S数明显增加，说明绿原酸可剌激造血干细胞的增殖，同时绿原酸可明显促进小鼠骨髓粒单系祖细胞，早期、晚期红系祖细胞的增殖分化，并可使其外周血WBC数升高，证明绿原酸可影响小鼠造血的整个过程，可知原酸可能调节机体内造血调控系统。通过小鼠血清集落剌激活力的测定结果说明绿原酸可通过促进小鼠机体产生集落剌激因子来增强其祖细胞的增殖分化。组织学的研究结果则进一步证实了绿原酸能增强小鼠的造血功能。由此，绿原酸可治疗各种原因引起的贫血，且不仅仅限于失血性贫血、溶血性贫血，造血不良性贫血包括巨细胞性贫血、再生障碍性贫血和脾功能亢进，对各种原因引起的白细胞减少状态、粒细胞减少症、粒细胞缺乏症有治疗作用，对各种原因引起的巨核系统改变如特发性血小板减少性紫癜等有治疗作用；对各种原因引起的骨髓纤维化，骨髓感染有一定治疗作用。基于上述发现，绿原酸可以单独或与其他具有已知功效的药物一起采用各种制药技术制备成各种药用剂型如但不仅仅限于口服剂型、静脉给药剂型和外用剂型。以下通过实验对绿原酸所具有的上述功效加以证实。应该理解的是，本发明的实验例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。发明的具体实施例方式以下通过具体的药效学试验证明本发明的有益效果。实验例1绿原酸对小鼠物理因素所致骨髓抑制的作用绿原酸，含量99.56%，用氯化钠注射液配制成所需浓度。阳性对照药重组人粒细胞集落剌激因子注射液，300ug/支，1.2ml/支。SPF级ICR小鼠，体重2230g，240只。根据体重和性别随机分为绿原酸高、中、低剂量组和阳性对照组、模型对照组及正常对照组，每组40只，雌雄各半。除正常对照组外其余动物均用6°CoY射线全身照射，照射剂量为4Gy(剂量率为256Gy/h，照射时间为2min)，照射后各组根据表1给予相应的受试物(对照组和模型组给予体积的氯化钠注射液)，每天一次，连续给药14天。在给药第4、7、11、14天，定量取尾静脉血20ul，将血液缓慢吹入加有500ul稀释液的试管内，使血液与稀释液混匀，用全自动血球计数仪检测外周血象。每次采完血后每组随机抽取10只动物(最少不低于8只，尽量保持雌雄各半)，动物安乐死后立即取股骨作骨髓推片，瑞氏染色，镜下检查骨髓象。取骨髓的同时，取脾脏称重并计算脾脏指数。结果用SPSS13.0统计软件进行单因素方差统计分析。脾脏指数=^|，《1000体重表1分组与给药剂量6<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>[OO43]与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较:aP<0.05，b]<0.01;表3绿原酸治疗性给药对辐照小鼠血小板数的影响(X109/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较bP<0.01。表4绿原酸治疗性给药对辐照小鼠脾指数的影响(g/kg)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注:"A"表示样本数n二19。表5绿原酸治疗性给药对辐照小鼠粒细胞系统一总数的影响(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较aP<0.05，bP<0.01;'Tn=9。表6绿原酸治疗性给药对辐照小鼠粒细胞系统-原始粒的影响(%)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较aP<0.05，bP<0.01;'Tn=9。表7绿原酸治疗性给药对辐照小鼠粒细胞系统-早幼粒的影响(%)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较aP<0.05，bP<0.01;'Tn=9。表8绿原酸治疗性给药对辐照小鼠粒细胞系统_中幼的影响(％)如fill辐照后给药組別3d7d10d14d样本数(n)10101010模型组6.70±3.066.50±2.01**7.80±3.229.10±U0*低剂量组8.80±1.75a*7.50±1.58**7.60±1.958.80±4.39中剂量组8.80±1.93a*5.30±1.42**7.56士1.6716.60±1.43b高剂量组10.10±0.57b**5,00±0.82a**5.30±1.42a**8.10±1.60阳性对照组11.70±2.36b8.70±1.89b6.22±2.11'*6.30±1.70b正常对照组6.70±1.259.80±1.558.90±2.386.60±1.58与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较，<0.05，b]<0.01;'Tn=9。表9绿原酸治疗性给药对辐照小鼠粒细胞系统-晚幼的影响(5々n创辐照后给药组別3d7d10d14d样本数(n)10101010模型组14.00±3.5914.60±2.726.70±3.34**00±2.21**低剂量组13.10±2.6415.30±3.237.40±1.51**12.50±2.92b中剂量组13.60±2.2215.50±2.8415.00±3.28lb15.70±3.62b**高剂量组17.00±2.36a16.80±1.7515.50±2.84b16.80±2.30b**阳性对照组20.80±2.44b**14.90±3.2513.78±3.07lb8.20±2.49**正常对照组4"0±1.6015.00±2.1614.00±2.9412.10±3.04与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较aP<0.05，b]<0.01;'Tn=9。表10绿原酸治疗性给药对辐照小鼠粒细胞系统_杆状的影响(:%)招则辐照后给药班力u3d7d10d14d样本数(n)10101010模型组7.60±2.01**7.50±2.92**7.50±3.47**7.50±3.69**低剂量组6.70±1.77**7.40±2.07**7.20±1.62**7.70±3.65**中剂量组10.10±1.91b**10,00±1.63a**6.75±1.75lsi!*10.70±4.35a高剂量组8.40±2.07**6.30±1.64b10.20±1.48a**9.90±2.47*阳性对照组8.卯±1.91**8,10±2,23**7.56土3.05"承10.90±2.02a正常对照组17.50±2.0717.50±3.3415.30±3.9213.60±3.89与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较aP<0.05，bP<0.01;'Tn=9。表11绿原酸治疗性给药对辐照小鼠粒细胞系统_分叶的影响(％)^:曰fill辐照后给药班力U3d7d脂14d样本数(n)10101010模型组9.30±4.32**9.30±2.95"9.80±3.88**10.20±3.85**低剂量组10.70±3.59**8.60±2.12**7.80±1.14**9.40±5.28**中剂量组15.10±2.64b**15.00±2.06b**8.33±2.061hi*15.30±4.55高剂量组12.20±3.58a**20.00±1.25b15.20±2.04b**15.00±3.71阳性对照组10.90±1.73**8.50±1.27**8.89士3.221^15.10±1.20a正常对照组20.80±2.8220.80±2.4419.30±4.5718.60±3.13与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较aP<0.05，b]<0.01;'Tn=9。表12绿原酸治疗性给药对辐照小鼠红细胞系统一总数的影响(%)々F1fill辐照后给药組別3d7d10d14d样本数(n)10101010模型组46.10±10.09**43.20±8.7841.40±9.19**36.60±8.37**低剂量组33.40±4.65b**41.80±7.68**19.00±4.67b27.50±5.32中剂量组32.60±6.31b**35.70±5.96**27.22zt9.39lb**24.50±3.75a高剂量组29.10±6.32b**20.40±4.12b38.40±8.41**19.60±4.14b阳性对照组23.60±5.52b*23.80±1.62b**31.67士7.8611>**16.30±5.95b正常对照组17.70±4.1415.60±3.1317.70±4.1420.80士3.08与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较aP<0.05，b]<0.01;'Tn=9。表13绿原酸治疗性给药对辐照小鼠红细胞系统_原红的影响(别辐照后给药组另U3d7d10d14d样本数(n)10101010模型组3.20±1.48**2.50土1.512.70±1.642.00±1.25低剂量组1.40±U7b2.10±1.601.00±0.67b2.40±1.26中剂量组1.90±0.99b2.30±0.68*3.56土1.0115^1.30±1.57高剂量组1.00±0.94b0.70±0.682.00±1.561.80±1.03阳性对照组0.60±0.52b*3.20±0.92**1.78土1.20'0.30±0.48a**正常对照组1.80±0.790.90±0.991.80±0.791.60±0.70与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较aP<0.05，bP<0.01;'Tn=9。表14绿原酸治疗性给药对辐照小鼠红细胞系统_早幼的影响(％)々RPll辐照后给药组另1」3d7d10d14d样本数(n)10101010模型组18.70±4.78**16.00±3.83**15.00±4.1414.00±5.16低剂量组14.20±2.49b**15.40±2.99**8.10±2.2310.40±2.22中剂量组14.20±3.74b**11.60±2.76**10.44士3.3219.60±1.51高剂量组12.70±4.27b**8.50±2.07b13.70±2.837.10±1.73a阳性对照组10.40±2.88b*9.40土0.84b10.56土2.7016.20±2.25a正常对照组6.40土l.卯6.卯±1.976.40±1.卯8.70±2.41与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较aP<0.05，bP<0.01;'Tn=9。表15绿原酸治疗性给药对辐照小鼠红细胞系统-中幼的影响(々F1Bll辐照后给药巩别3d7d10d14d样本数(n)10101010模型组6.10±1.60**7.70±2.63**6.70±1.95**4.80±1.69**低剂量组5.50±1.35**6.30±2.21**2.70±1.49b2.60±1.26b中剂量组5.40±2.46**9.80±2.10**2.89土2.0312.卯土1.45b高剂量组4.10±3.38a2.80±1.48b*5.90±2.77**2.40±1.26b阳性对照组3.40±1.35b2.10±0.74b**8.33±3.64'*1.10±1.20b*正常对照组2.70±1.060.50±0.7622.70±1.062,60±0.84与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较aP<0.05，<0.01;'Tn=9。表16绿原酸治疗性给药对辐照小鼠红细胞系统-晚幼的影响(4>BSill辐照后给药组別3d7d10d14d样本数(n)10101010模型组18.10±4.20**17.00±3.74**17.00±3.23**15.80±2.82**低剂量组12.30±4.24b**18.00±4.30**7.20±2.15b12.10±2.60**中剂量组12.33±2.65lb**12,00±3.20*10.33士3.87V10.70±2.58b高剂量组11.30±2.11b**8.40±1.96b16.80±4.89**8.30±1.42b阳性对照组9.20±2.00b9.10±1.37b11.00士3.04'b"8.70±3.02b正常对照组6.80±2.207.40±2.226.80土2.20b7.90±0.88与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较aP<0.05，bP<0.01;'Tn=9。表17绿原酸性治疗给药对辐照小鼠淋巴的影响(％)11化Pll辐照后给药组另u3d7d10d14d样本数(n)10101010模型组8.20±3.68**12.60±4.2020.40±10.6819.80±7.70低剂量组19.30±5.66b12.50±4.9341.90±4.63b**27.50±3.92b**中剂量组10.20±3.26*13.20±4.1029.00士13.25"22.80±5.45高剂量组8.10±6.1018.10±2.85b*IO.IO土12.3223.30±5.50阳性对照组16.80±4.16b22.90±4.04b**25.33土14.07135.70±7.54b**正常对照组15.10±1.2914.20±3.2918.20±11.9220.20±4.89与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较bP<0.01;"l"n=9。表18绿原酸治疗性给药对辐照小鼠骨髓粒红比的影响(％)招J2ll辐照后给药虹别3d7d10d14d样本数(n)10101010模型组1.07±0.49"1.09士0,40"0.99±0.40**1.24±0.37**低剂量组1.43±0,25"1.13±0.33**2.16i0.53b*1.71±0.54**中剂量组1.83±0.50a**1.49±0.35**1.69±0.37la**2.23±0.61b*高剂量组2.25±0.58b**3,14±0.73b1.41±0.26**3.01±0.61b阳性对照组2,64±0.64b2.21±0.18b*1.40土0.301^3.23±1.10b正常对照组4.00±1.064.83±1,983.82±1.332,92±0.70与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;与模型对照组比较bP<0.01;"l"n=9。表2、表3结果显示造模后，模型动物外周血白细胞和血小板明显下降，与正常对照组比较有非常显著差异(P<0.01)，治疗给药7天后药物高、中、低剂量组动物的白细胞均呈明显上升趋势，给药第11天时高剂量组与模型对照组比较有显著差异(P<0.05)。表518结果显示造模后，各辐照组动物的粒细胞总数均不同程度地下降，与正常对照组比较有显著或非常显著差异(P<0.05orP<0.01)，模型组动物的杆状和分叶粒细胞均不同程度地低于正常对照组(P<0.05orP<0.01)，各辐照组动物红细胞系总数及中幼、晚幼红细胞均高于正常对照组(P<0.05orP<0.01)，其余各分类细胞有一定的升高趋势，粒红比均明显低于正常对照组(P<0.05orP<0.01)。治疗给药后，药物高、中剂量组的粒细胞总数明显升高，与模型对照组比较差别有非常显著意义(P<0.01)，高、中剂量组的晚幼、杆状和分叶粒细胞与模型组比较有增高趋势，且部分检测值与模型组比较有显著或非常显著差异(P<0.05orP〈0.01)，高、中、低剂量组的红细胞总数和早幼、中幼、晚幼红细胞不同程度地低于模型组，且部分检测值与模型组比较有显著或非常显著差异(P<0.05orP〈0.01)，高、中、低剂量组的粒红比均高于模型组，与模型组比较有显著或非常显著意义(P<0.05orP<0.01)。实验例2绿原酸对犬化学因素所致骨髓抑制的作用绿原酸，含量99.56%，阳性对照药利可君片，20mg/片，一日三次(3片)，注射用环磷酰胺(简称CY)，白色粉末，200mg/安瓿装，5支/盒装。Beagle犬，36只(雌雄各半)，正常、健康、体重均一、雌性未孕，体重67kg，年龄6月龄。剂量设计见表19。表19剂量设计~^^^^i给药体积相当于临床拟定』别(只)(mg/kg.d.1)途径ml/kg_成人日用量倍数除正常对照组外，其它5组犬静脉注射8mg/ml的环磷酰胺0.8ml/kg(8mg/kg)，每日一次，连续5天。第6天开始按表19给与各受试药，模型对照组和正常对照组给生理盐水，连续13天。在造模前、造模后每天、治疗后的2、4、6、8、10、12、14天分别取外周血检查各动物的白细胞；造模前(注射环磷酰胺)、造模结束(注射环磷酰胺第5天)、治疗第7天和第14天，分别取犬侧卧弯腰，髂骨上脊穿剌抽取骨髓，涂片，瑞氏染液染色。显微镜下进行分类计数、粒细胞、红细胞、巨核细胞、单核细胞系统等。计数200个细胞。巨核细胞全片计数总和，血小板计数25个(成熟有血小板形成和成熟无血小板形成)，结果进行统计学处理。给药前1次，注射CY每天1次，治疗给药第1、2、3、4、6、7、9、11天、15天各1次。取空腹犬前肢静脉血，作外周血检测。给药前1次，注射CY6天，治疗给药第7、14天各1次。作骨髓检测。结果进行统计学处理。骨髓像增生情况分6级，1极度活跃，2明显活跃，3活跃，4减低，5明显减低，6极度低下。表20各组动物骨髓细胞增生情况~~"1~~i动物数(只)造模前~~造模5天治疗7天治疗14天表20结果显示注射环磷酰胺后，各组犬骨髓增生均减低，绿原酸各剂量组给药第7天均明显可看见犬骨髓细胞增生，其大、中剂量组略见明显，阳性药组和模型组作用效果略差，模型组死亡1只犬，第14天药物组恢复较好，模型组仍有1例处于增生低下，正常对照组未见异常。中性粒细胞杆状为主，占全片总数4550%，其次为中幼、晚幼、分叶细胞。偶见嗜酸粒细胞，未见原始、早幼粒细胞。未见中幼和晚幼粒细胞。红细胞系统以晚幼红细胞为主，约占全片计数2530%左右，其次为中幼红细胞，全片镜下未见原红、早幼红、早巨、中巨、晚巨红细胞。淋巴系统以成熟淋巴细胞为主(约占1012%)，未见原始和幼稚淋巴细胞。单核系统各组各犬未见有原始、幼稚、单核细胞。巨核细胞以成熟有血小板形大剂量组绿原酸6中剂量组绿原酸6小剂量组绿原酸6阳性药组6模型对照组6正常对照组63级5例3级、l例2级3例3级、3例2级3例3级、3例2级2例3级3例4级2级2级3级3例3级3例4级5例3级1例4级4例3级1例4级2级模型对照组6生理盐水正常对照组6生理盐7K级级级级级级级级级级级级oooo滴滴滴服滴滴斷,静□斷,MS5^酸酸酸鄉原原原投成为主，成熟无血小板形成次之，未见幼稚巨核细胞。其它细胞未见浆细胞，未见网状、内皮、吞噬、寄生虫、组织巨细胞、不明细胞以及特殊细胞。粒细胞系统与红细胞系统之比各组间比较均无统计学差异(P>0.05)。表21实验前正常骨髓细胞检查(％x±s)指标高剂量中剂量低剂量模型组阳性组正常照(n=6)(n=6)(n=6)(n=6)(n=6)(n=6)原始血细胞000000原始粒细胞000000早幼粒细胞000000中幼粒细胞5.25土0.825.42±0.585.25±0.525.25±0.614.75±0.525.50±0.71中性晚幼粒细胞3.33±0.413.33±0.523.83±0.683.58±0.383.75±0.523.33±0.41中性杆状粒细胞50.50±1.0050.75±0.2750.42±0.9250.50±0.6350.5純9750.67±0.61中性分叶核粒细胞2.92±0.582.67±0.613.00±1.183.00±0.712.92±0.583.00±0.63嗜酸中幼粒细胞000000嗜酸晚幼粒细胞000000嗜酸杆状粒细胞000000嗜酸分叶粒细胞000000嗜硷中幼粒细胞000000嗜硷晚幼粒细胞000000嗜硷杆状粒细胞000000嗜硷分叶粒细胞000000原始红细胞000000早幼红细胞000000中幼红细胞000000晚幼红细胞25.42±0.9225.08±0.7425.33±0.5225.25±0.7625.33±0.6125.42±0.38早巨红细胞000000中巨红细胞000000晚巨红细胞000000粒系红系(M:E)2.40士0.132.43±0.102.42±0.052.42±0.082.40士0.062.43±0.05原始淋巴细胞000000幼稚淋巴细胞000000淋巴细胞12.58±0.5812.75±0.6112.17±0.4112.50±1.0512.67±1.1712.08±0.49原始单核细胞000000幼稚单核细胞000000单核细胞000000全片巨核细胞总数跳0±23.9120.0±28.7127.7±14.7126.5±50.2133.2±23.8135.8±32.0原始巨核细胞000000幼稚巨核细胞000000成熟有血小板形成20.8±1.720.3±1.221.0±1.720.0±1.320.5±1.920.3±1.2■IA士上-JL<,丄r"TT,战热兀皿小极形讽4.2±1.74.7±1.24.0±1.75.0±1.34.5±1.94.7±1.2裸核细胞000000网状细胞000000内皮细胞000000吞噬细胞000000桨细胞000000组织巨细胞000000不明细胞000000退化细胞000000表22CY造模6天骨髓细胞检查(％x±s)指标高剂量中剂量低剂量模型组阳性组正常照(n=6)(n=6)(n=6)(n=6)(n=6)(n=6)原始血细胞000000原始粒细胞000000早幼粒细胞000000中幼粒细胞1.42±1.391.67±0.411.42±0.381.08±0.741.67±1.665.42±0.58中性晚幼粒细胞1.25±0.941.00±0.320.67±0.260.50±1.211.00±1.143.42±0.74中性杆状粒细胞25.67±I0.924.25土5.8224.25±1.6421.75±2.0722.17±1.6949.25±0.61中性分叶核粒细34.08±4.8537.25±1.9236.42±2.1137.25±1.3335.83±3.594.75±0.61嗜酸中幼粒细胞000000嗜酸晚幼粒细胞000000嗜酸杆状粒细胞000000嗜酸分叶粒细胞000000嗜硷中幼粒细胞000000嗜硷晚幼粒细胞000000嗜硷杆状粒细胞000000嗜硷分叶粒细胞000000原始红细胞000000早幼红细胞000000中幼红细胞000000晚幼红细胞2.50±2,211.71±0.981.25±0.762條1.247.92±6.2125.08士0.80早巨红细胞000000中巨红细胞000000晚巨红细胞000000粒系红系(M:E)38.7士55.926.1±21.733.6±27.922.3±13.711.5±6.62.50±0.06原始淋巴细胞000000幼稚淋巴细胞000000淋巴细胞36.33±6.8936.42±2.0136.0±1.8736.75±2.3431.33±6.1512.08±0.58原始单核细胞000000幼稚单核细胞000000单核细胞000000全片巨核细胞总数4.5±4.60.5±0,88.7±14.11.8±1.65.8±8.746.2±13.0原始巨核细胞000000幼稚巨核细胞000000成熟有血小板形成1.33±1.750002.3±3.619.2±1.2成熟无血小板形成3.17±2.930003.2±5.0产O■1。裸核细胞000000网状细胞000000内皮细胞000000吞噬细胞000000浆细胞000000组织巨细胞000000不明细胞000000退化细胞000000表22结果除正常对照组外，其余各组犬骨髓像增生明显受到抑制，粒红比严重异常，非造血细胞淋巴细胞增多，粒系细胞，红系细胞，巨核细胞总数减少，未见成熟有血小板形成和成熟无血小板形成。正常骨髓像各细胞计数平均数标准差增大，表明注射CY8mg/kg4天，粒细胞系统明显受到抑制，造模是成功的。表23绿原酸治疗第7天骨髓细胞变化(％x±s)指标高剂量中剂量低剂量模型组阳性组正常照(n=6)(n=6)(n=6)(n=5)(n-6)(n=6)原始血细胞000000原始粒细胞000000早幼粒细胞000000中幼粒细胞5豫0.924.83±0.935.42土0.665.67±0.612.40±2.274.67±0.93中性晚幼粒细胞3.25±0.614,00±0.453.58±0.203.50±0.451.60±1.563.50±0.55中性杆状粒细胞50.5±0.6350.25±0.6150.25±0.8250.08±0.8634.0±14.8550.33±0.61中性分叶核粒细胞3.67±1.083.58±0,583.75±0.763.42±0.7424.40±19.13.17±0.61嗜酸中幼粒细胞000000嗜酸晚幼粒细胞000000嗜酸杆状粒细胞000000嗜酸分叶粒细胞000000嗜硷中幼粒细胞000000嗜硷晚幼粒细胞000000嗜硷杆状粒细胞000000嗜硷分叶粒细胞000000原始红细胞000000早幼红细胞000000中幼红细胞000000晚幼红细胞24.75±0.6925.42±0.7425.08±0.6625.42±0.8010.10±13.625.33±0.75早巨红细胞000000中巨红细胞000000晚巨红细胞000000粒系红系(M:E)2.48士0.122.43±0.082.45±0.082.43±0.1026.1±55.82.40±0.09原始淋巴细胞000000幼稚淋巴细胞000000淋巴细胞12.75±1.1711.92±0.9712.08±1,0711.83±0.6127.6±13.113.0±0.89原始单核细胞000000幼稚单核细胞000000单核细胞000000全片巨核细胞总数43.8±42.246.8±10.852.2±15.557.3士13.58.40±11.253.5±18.9原始巨核细胞000000幼稚巨核细胞000000成熟有血小板形成8.67±9.719.0±1.420.7±1.220.2±1.56.2士0.120.2±1.3成熟无血小板形成3.2±3.56.0±1.44.3±1.24.8±1.52.4±3.44.8±1.3裸核细胞000000网状细胞000000内皮细胞000000吞噬细胞000000浆细胞000000组织巨细胞000000不明细胞000000退化细胞000000表23:治疗第7天药物组各犬骨髓像增生基本恢复正常，粒细胞系，红细胞系，淋巴细胞系，巨核细胞总数，成熟有血小板形成和成熟无血小板形成，镜下计数与正常对照组相差不大。而模型对照组2只动物增生仍低下，非造血细胞淋巴细胞增多，淋系减少。结果表明药物组犬骨髓像受CY急性抑制，比模型对照组恢复快，药物对白细胞下降有升高的作用。表24绿原酸治疗结束(14天)骨髓细胞检查(％x±s)指标高剂量中剂量低剂量模型组阳性组正常照(n=6)(n=6)(n=6)(n=5)(n=6)(n=6)原始血细胞000000原始粒细胞000000早幼粒细胞000000中幼粒细胞4.58±0.864.67±0.981.83±2.143.42±2.183.00±2.034.75±0.52中性晚幼粒细胞3.25±0,523.25±0.271.92±1.532.58±1.322.00±1.273.08±0.38中性杆状粒细胞50.2±1.2150.08±0.6638.33±13.844.75±11.243.3±11.7548.83±0.68中性分叶核粒细胞3.50±1.523.50±1.0518.92±16.29.83±14.112.0±13.93.75±0.52嗜酸中幼粒细胞000000嗜酸晚幼粒细胞000000嗜酸杆状粒细胞000000嗜酸分叶粒细胞000000嗜硷中幼粒细胞000000嗜硷晚幼粒细胞000000嗜硷杆状粒细胞000000嗜硷分叶粒细胞000000原始红细胞000000早幼红细胞000000中幼红细胞000000晚幼红细胞25.17±0.6925.25±0.4216.2±8.7322.00±6.4019.90±5.85:24.33±0.61早巨红细胞000000中巨红细胞000000晚巨红细胞000000粒系红系(M:E)2.40士0.092.38±0.083.15±1.242.42±0.152.卯±0.932.43±0.05原始淋巴细胞000000幼稚淋巴细胞000000淋巴细胞13.33±1.3313.25±1.1322.83±10.0617.50±6.6019.20±6.6615.3±0.94原始单核细胞000000幼稚单核细胞000000单核细胞000000全片巨核细胞总数11.3±1.312.7±9.13.2±6.01.83±2.72.8±2.02.5±1.1原始巨核细胞000000幼稚巨核细胞000000成熟有血小板形成5.50土8.67.3±8.21.7±4.1000成熟无血小板形成2.3±3,63.8土4.51.0±2.5000裸核细胞000000网状细胞000000内皮细胞000000吞噬细胞000000浆细胞000000组织巨细胞000000不明细胞000000退化细胞000000治疗第14天，低剂量组2只犬，模型组1只犬骨髓象增生低下，非造血细胞淋巴细胞增多，粒系细胞，红细胞系统减少，骨髓增生未能恢复，其余各犬骨髓细胞增生活跃，恢复正常。造模后(i.vCY)动物白细胞明显下降，与对照组和自身造模前有非常显著性差17异(P〈0.01)，治疗6天后药物组和对照组白细胞均升高，但组间比较无明显差异(P>0.05)。结果见表25、26。表25不同时间各组动物的白细胞(xl07Lx±s)指标大剂量中齐u量小剂量(11=6)阳性对照模型对照空白对照(n=6)(n=6)(n=6)(n=6)(n=6)造模前正常11.98±3.3916.70±2.9616.92±楊12.95±1.7313.03±2.5717.93±3.89造模第一大10.95±2.2815.93±3.2211.37±2.6012條2.1011.58±3.2717.55±2.72造模第二天8.13±0.899.18±2.5813.85±8.548.25±1,556.卯±1.7717.57±4.59造模第三天7.12±0.407.97±1.668.73土3.329.08±2.926.53土0.4115.73±3.25造模第四天5.18±1.196.03±1.408.20±3.236.55±1.405.05±0.9713.32±2.43造模第五天3,97±1.214.95±2.425.25±2.535.33±2.674.30±1.4413.22±2.10治疗第二天2.75±2.223.05±1.964.25±1.932.43±0.442.48±0.6514.70±1.20治疗第四天1.35±0.671.13±0.661.62±1.011.82±0.851.30±0.4413.42±1.31治疗第六天3.80±1.554.98±0.796.33±1.687.65±5.437.48±4.4514.57±2.16治疗第八天5.93±3.195.65士2.0612.73±2.886.88±0.227.18±5.3616.78±2.48治疗第十天5.03±1.688.50±4.2613.52±3.148.10±2.48"7.88土6.3312.80±2.55治疗第十二天9.82±0.8212,13±5.6012.57±4.559,45±9.1810,24土3.7813.90±1.84治疗第十四天12.27±5.9913.93±1.5912.47±5.2511.58±4.1610.98±2.9712.37±1.63注第6天起模型组动物数为5只表26治疗后动物白细胞的变化率(治疗后_造模第5天)/造模第5天(％，x±s)指标大剂量01=6)中剂量(11=6)小剂量(11=6)阳性对照模型对照对照(11=6)(n=6)造模第五天3.97±1.214.95±2.425.25±2.535.33±2.674.30±1.4413.22±2.10治疗第二夭-39.30±38.57-30.57±22.87-28,52±32.49-35.58±15.14-36.20±19.2715.99±5.95治疗第四天-66.31±10.40-76.22±16.35-72.57±9.11-61.52±19.07-58.02±29.533.68±15.10治疗第六夭-3.75±21.8158.50±121.628.47±51,8428,07±47.2656.71±52.3712.52±9.98治疗第八天49.07±55.12跳10±331.4111.11±133.750.51±51.81102.48±195.236.43±15.83治疗第十天35.55±55.09232.49±319.6135.25±143.257.14±72.32126.14±221.6-1.40±17.71治疗第十二天173.16±102.9247.33±217.3143.20±85.9252.36±48.7399.43±98.4110.63±8.29治疗第十四天256.42±264.7245.07±138.4123.71±1]2.0134.51±56.70134.26±114.72.28±12.82注第6天起模型组动物数为5只表25、26结果表明，注射CY使白细胞计数(WBC)下降，药物治疗后使下降的WBC计数明显升高，三个受试药组均显示药物有升高作用，大剂量组在第12天后，中剂量组在第8天后略显明显，阳性对照组与模型组不明显。正常对照组在正常值范围内波动。由此可见，绿原酸对无论是物理还是化学因素所致的骨髓抑制，均有明显促进骨髓细胞增生的作用。实验例3绿原酸对6°Co_Y射线致小鼠脾脏造血干细胞损伤的保护作用1、实验方法取健康C57小鼠60只，依性别体重随机分成5组。按分组分别给药，阴性组各鼠腹腔注射生理盐水0.4ml/20g体重，阳性组(粒细胞集落剌激因子)各鼠腹腔注射给予0.4ml/20g体重(2ug/kg)，其余三组分别以0.1%、0.05%和0.025%的绿原酸药液给各组各鼠腹腔注射0.4ml/20g体重(剂量20、10和5mg/kg)。以上5组各鼠均每日给药一次，连续7日，第7日称存活动物体重，末次给药后l小时。各组小鼠全身一次照射后第9天颈椎脱臼处死，取出脾脏，除去粘连的脂肪，然后置于Bouins液中固定3min，用放大镜观察并进行内源性脾结节计数(CFU-S)，骨髓单个核细胞计数(BMNC)。组间比较显著差异。2、实验结果表27绿原酸对6°Co_Y射线致小鼠脾脏造血干细胞损伤的保护作用剂量(mg/kg)动物数(只)CFU-S"~~(10—Vspleen)(107fermr)与模型对照组比较***P<0.001**P<0.01*P<0.053、结论表27的结果表明，绿原酸20、10和5mg/kg给小鼠腹腔注射，每日一次，连续7日，对6°Co_Y射线致小鼠脾脏造血干细胞损伤有较强的保护作用。实验例4绿原酸对小鼠造血功能的影响1、实验方法骨髓细胞(BMC)的制备将C57动物安乐死后，酒精消毒，无菌剥取一侧股骨，用RPMI-1640液通过6号针头反复冲洗骨髓腔数次，再将冲出的骨髓细胞液通过4号针头制备成单细胞悬液。小鼠骨髓造血干细胞(CFU-S)的测定C57小鼠，无菌制备BMC悬液，计数有核细胞后配成每毫升5X104个细胞，给经8.0Gy60Go照射后小鼠尾静脉输注0.2ml细胞悬液，第9天安乐死受体鼠，取脾用Bouin液固定24h后计数表面结节数。骨髓粒单系祖细胞(CFU-GM)的测定将定量(1X105)的骨髓细胞悬液加马血清与RPMI-1640培养液在37。C水浴中保温1020min，加入30g/L琼脂后混匀，转入含有0.2ml鼠肺条件剌激液的琼脂培养皿中，于37°C，0.05%C02饱和湿度的培养箱中培养57天，置低倍镜下计数含50个细胞以上的集落(CFU-GM)数。骨髓早期、晚期红系祖细胞(BFU-E、CFUE)的测定将培养体系配成终浓度为10%骨髓细胞悬液(5X104ml)，200g/L马血清，100g/L小牛血清白蛋白，1X10-5mol/L二巯基乙醇、10%爆式集落促进活性(BPA)，0.8X甲基纤维素及每毫升1UEPO等充分混合后，加10iU至微孔塑料培养板中，置培养箱中培养3天，用联苯胺染色后在倒置显微镜下计数8个以上染色阳性细胞集落计为红系集落形成单位(CFU-E)，培养8天计数含50个以上联苯胺染色阳性细胞集落为爆式红系集落形成单位(BFU-E)。小鼠外周血象的测定小鼠尾静脉采血，Coulter血细胞计数仪计数。小鼠骨髓组织学观察安乐死小鼠取完整左侧股骨，入Hellyps液固定，石蜡包埋切片，HE染色，光镜下观察组织学变化。2、实验结果(1)绿原酸小鼠骨髓造血干细胞的影响将C57小鼠随机分为3组1组为C57对照组，2、3组为绿原酸10，20mg/kg/天X80.02520105121212121223.6±1.778.2±12.2*林82.8±5.3***72.4士12.6林53.10±8.2*21±3.5188.6±12.9林*89.8±13.7***69.2±6.8林51.2±11.2*且经照组酸酸酸对性原原原型阳绿绿绿模天，静脉注射。另取同月龄C57对照组，每天给予生理盐水。9天安乐死各组小鼠，制备BMC悬液，按前述方法输注给受体鼠。9天安乐死取脾固定观察结果，结果显示模型对照组C57小鼠CFU-S数9.583±1.084(n=12)。与给予绿原酸后C57小鼠相比较CFU-S数明显减少，予绿原酸后C57小鼠CFU-S数分别为20.667±2.103和23.250±2.379结果提示绿原酸对C57小鼠骨髓造血干细胞的增殖分化有一定剌激作用。表28绿原酸对60Co-Y射线致小鼠脾脏造血干细胞损伤的CFU-S<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>与模型对照组比较***P<0.001**P<0.01*P<0.05(2)绿原酸对小鼠骨髓造血祖细胞增殖的影响动物分组，给药与前相同，于给药第9天安乐死小鼠，无菌制备BMC悬液按前述方法进行实验。结果表明C57小鼠骨髓造血祖细胞的增殖能力明显低于C57小鼠，二者之间有明显差异。而绿原酸则可使C57小鼠的粒单系造血祖细胞，早期及晚期红系祖细胞的增殖能力均明显增。表29绿原酸对小鼠骨髓造血祖细胞增殖CFU-E组别剂量(mg/kg)动物数(只)CFU-E模型对照组201012121259.000±7.520102.167±5.149**104.750±6.917**与模型对照组比较***P<0.001**P<0.01*P<0.05表30绿原酸对小鼠骨髓造血祖细胞增殖BFU-E组别剂量(mg/kg)动物数(只)BRJ-E模型对照组绿原酸绿原酸201012121237.167±5.79781.833±5.306**85.250±7.569**与模型对照组比较***P<0.001**P<0.01(3)绿原酸对小鼠外周血象的影响表31绿原酸对小鼠外周血象WBC*P<0.05组别剂量(mg/kg)动物数(只)WBC(108个)模型对照组绿原酸绿原酸20101212121.533±0.3316.625±0.669**7.025±0.703**与模型对照组比较***P<0.001**P<0.01*P<0.05结果表明C57小鼠外周血象中，其WBC数明显低于同月龄小鼠。绿原酸10，20mg/kg则可明显使其WBC数增加,20(4)绿原酸对小鼠血清CSA的影响将各组小鼠分别心脏采血，静止离心制备血清，以血清取代肺条件剌激液(CSF-GM)，观察其对CFU-GM增殖的影响，以CFU-GM的产率代表CSA。结果证明C57小鼠血清的CFU-GM的产率77.333±6.706明显低于给予绿原酸后C57小鼠CFU-GM173.000±14.283和201.833±18.065(n=12，P<0.01)。而给予绿原酸后10，20mg/kgC57小鼠的CFU-GM明显增加(CFU-GM分别为173.000±14.283和201.833±18.065)与C57组相比有显著差异，提示绿原酸可明显增强C57小鼠体内的CSA，促进C57小鼠骨髓造血祖细胞的增殖分化。表32绿原酸对小鼠骨髓造血祖细胞增殖CFU-GM组另u剂量(mg/kg)动物数(只)CFU-GM模型对照组1277.333±6.706绿原酸2012173.000±14.283**绿原酸1012201.833±18.065**与模型对照组比较***P<0.001**P<0.01*P<0.05(5)绿原酸对小鼠骨髓组织学的影响组织学研究结果显示小鼠骨髓腔内造血祖细胞丰富，各系细胞均可见到，并且形态良好，增殖旺盛，血窦较多。而同月龄C57小鼠骨髓腔内造血细胞明显减少，增生不活跃，以中晚幼粒细胞为主，甚至局部缺少造血细胞，纤维结缔组织增生，血窦较少。给予绿原酸后的C57小鼠与未用药C57小鼠相比其骨髓腔内造血细胞明显增多，增生活跃，血窦较多，但较C57小鼠骨髓造血细胞及血窦为少。这一结果说明绿原酸可明显改善C57小鼠骨髓造血功能。以下通过具体实施例说明绿原酸在本发明的新用途下，可制备成药学上常规的制剂，但绿原酸的用量并不仅仅限于所述的实施例的范围内。实施例1制备氯化钠0.9%的静脉注射用注射液处方一纯度大于95%的绿原酸lg枸橼酸l.Og枸橼酸钠0.5g氯化钠18g注射用水2000ml_按注射剂的常规操作共制成2ml的注射剂1000支，每支含绿原酸1毫克处方二纯度大于95%的绿原酸3000g氯化钠2250g注射用水2000，000ml_按注射剂的常规操作共制成1000ml的注射剂1000瓶，每瓶含绿原酸3克生理可用的pH值调节剂柠檬酸、富马酸、谷氨酸、L-天冬氨酸、乳酸、乳糖酸、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、抗坏血酸、盐酸、醋酸。实施例4绿原酸片剂处方一绿原酸(纯度大于95%)1.00g填充剂180.00g崩解剂10.00g黏合剂6.00g润滑剂3.00g共计200.00g按片剂常规方法制备，共制成1000片，每片含绿原酸300mg。绿原酸的纯度大于95%。填充剂如淀粉、糊精、糖粉、预胶化淀粉、乳糖、葡萄糖、微晶纤维素、碳酸钙、硫酸钙、碳酸氢钙。黏合剂如羟丙甲纤维素、聚维酮、淀粉浆、糊精浆、糖浆、胶浆、海藻酸钠、聚乙二醇、桃胶、阿拉伯胶。崩解剂如交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲淀粉钠、羟丙基淀粉、低取代羟填充剂155.OOg崩解剂20.OOg黏合剂15.OOg润滑剂10.OOg共计500.OOg按片剂常规方法制备，共制成1000片，每片含绿原酸lmg。处方二绿原酸(纯度大于95%)100.OOg按片剂常规方法制备，共制成1000片，每片含绿原酸100mg。处方三绿原酸(纯度大于95%)300.OOg丙基纤维素、柠檬酸、酒石酸、酸酐、碳酸氢钠、碳酸钠。润滑剂如硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶、液体石蜡、聚乙二醇。实施例5绿原酸胶囊剂处方一绿原酸(纯度大于95%)1.OOg填充齐U184.OOg黏合剂5.OOg润滑剂10.OOg共计200.OOg按胶囊剂常规方法制备，共制成1000粒胶囊，每粒胶囊含绿原酸lmg。处方二绿原酸(纯度大于95%)100.OOg填充剂85.OOg黏合剂5.OOg润滑剂10.OOg共计200.OOg按胶囊剂常规方法制备，共制成1000粒胶囊，每粒胶囊含绿原酸100mg。处方三绿原酸(纯度大于％%)300.OOg填充剂85.OOg黏合剂5.OOg润滑剂10.OOg共计400.OOg按胶囊剂常规方法制备，共制成1000粒囊，每粒胶囊含绿原酸300mg。绿原酸的纯度大于95%。填充剂如淀粉、糊精、糖粉、预胶化淀粉、乳糖、葡萄糖、微晶纤维素、碳酸钙、硫酸钙、碳酸氢钙。黏合剂如羟丙甲纤维素、聚维酮、淀粉浆、糊精浆、糖浆、胶浆、海藻酸钠、聚乙二醇、桃胶、阿拉伯胶。润滑剂如硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶、液体石蜡、聚乙二醇。权利要求1.绿原酸Chlorogenicacid在制备治疗骨髓感染的药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述的药物是以有效量的绿原酸为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的药剂。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于所述的药剂中每制剂单位含有绿原酸l-3000mg。4.根据权利要求2或3所述的用途，其特征在于所述的药剂是口服制剂、注射剂。全文摘要文档编号A61P43/00GK101695484SQ20091024613公开日2010年4月21日申请日期2006年7月21日优先权日2006年7月21日发明者包旭,张亮,张洁,张舒,徐小平,易大朝申请人:四川九章生物化工科技发展有限公司;