一种核黄素磷酸钠冻干粉针及其制备方法
专利名称：一种核黄素磷酸钠冻干粉针及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种核黄素磷酸钠冻干粉针及其制备方法，用于由核黄素缺乏引起的 口角炎、唇炎、舌炎、眼结膜炎及阴囊炎等疾病的治疗。属于医药制剂的技术领域。
背景技术：
核黄素磷酸钠为维生素类药，核黄素(维生素化)是人体重要营养素，在能量代谢 中起关键作用。核黄素磷酸钠为黄素单核苷酸(FMN)和黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)前体药， 而FMN和FAD是黄素酶家族的重要辅助因子。黄素酶催化很多生化反应，最典型的为氧化 还原反应，它们是细胞呼吸的关键因子。FAD和FMN在线粒体转动链中递氢，在此过程中产 生细胞能量。缺乏时可影响机体的生物氧化，使代谢发生障碍，其病变多表现为口、眼、外生 殖器部位的炎症。在临床上主要用于由核黄素缺乏引起的口角炎、唇炎、舌炎、眼结膜炎及 阴囊炎等疾病的治疗。核黄素磷酸钠化学名称核黄素5’ _(二氢磷酸酯)单钠盐二水合物，其化学结构 式为 关于核黄素磷酸钠的现有技术有CN200910130064. 2(公开号CN101518516，申请 日2009.4. 3)涉及一种核黄素磷酸钠冻干粉针剂及其制备方法，该冻干粉针剂由以下组 分经过冷冻干燥制得核黄素磷酸钠以核黄素计5-10g、甘露醇20-40g、适量的pH调节剂 (lmol/L的NaOH溶液和/或lmol/L的HC1溶液)和注射用加水至1000_2000ml。该专利 申请中的所有实施例中核黄素与甘露醇的重量配比均为1 4，专利申请所提供的长期试 验水分测定数据为4% 6%，根据国家药品标准的规定，水分不得过5. 0%，而该专利申请 水分测定0天试验数据为5. 0 5. 6%，已超过质量标准规定，且随着常温放置时间的增加， 水分含量越来越低。由于核黄素磷酸钠原料药具有引湿性，随着放置时间的增加，其水分含 量不可能减少。而加速试验中提供的水分数据为左右，因此该专利申请制备的产品是 否为核黄素磷酸钠制剂值得怀疑。也更进一步证明该专利申请制备得到的产品不稳定，不 适于作为药品。CN200410093401. 2(公开号:CN1660120A,申请日=2004. 12. 15)公开了一种 核黄素磷酸钠注射液，每支注射液中含核黄素磷酸钠5mg-100mg，0 -环糊精10mg-20mg，每 支加注射用水至2ml-10ml。用pH值调节剂调至pH3-8，pH值调节剂为氢氧化钠或碳酸氢 钠或碳酸钠中的一种或两种以上。其制备工艺为取处方量的核黄素磷酸钠与环糊精， 置研磨机中研磨20-50分钟取出，用注射用水适量搅拌使溶解，再加入注射用水到全量，用pH值调节剂调节pH值至3-8，经过滤，灌装，充氮，熔封，高温灭菌，降温后灯检，包装、检验 即得。研究显示，核黄素磷酸钠注射液稳定性差，在贮存过程中容易出现澄清度不好、溶液 易变浑浊等缺陷；且环糊精用于注射剂辅料临床安全性有待评价，以上两种情况均为 临床使用上大大增加了不可预知的风险。上述现有技术中还均存在以下问题国家药品标准规定的核黄素磷酸钠注射剂的 药品质量标准都有钠盐的鉴别反应，以上两个专利的辅料均有钠离子干扰鉴别(均以NaOH 或者碳酸钠等含钠离子的碱作为PH调节剂)。因此，迫切需要开发一种在药品生产中不使 用含钠离子的辅料，且产品稳定、澄清度好的核黄素磷酸钠注射剂。
发明内容
为了解决现有技术的上述缺陷，本发明人经过深入研究，令人惊奇地发现，选用合 适的赋形剂，并以少量不含有钠离子的PH值调节剂调节本品pH值，可以得到没有钠离子干 扰检验、且安全、稳定适于临床使用的核黄素磷酸钠注射剂，从而完成了本发明。因此，本发明提供一种核黄素磷酸钠注射剂，该注射剂选择甘露醇为特定的赋形 剂，以氨水为PH调节剂，其中核黄素磷酸钠与赋形剂甘露醇具有特定的重量配比。核黄 素磷酸钠对光敏感，故采用棕色西林瓶，目的是使产品生产、运输过程中和长期贮藏更好避 光，确保产品的稳定性。本发明还提供一种核黄素磷酸钠冻干粉针制备方法和优化的冻干 工艺，该方法可以制得外观性状好，主药含量高，水分含量低，且澄清度好质量稳定的核黄 素磷酸钠冻干粉针。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针剂与现有技术相比，具有如下显著的有益效果 ①处方中辅料单一、明确，可以满足工业化大批量生产的要求；②原、辅料均为药用注射级， 符合人体静脉注射用药要求，大大降低了临床使用潜在的不良反应风险；③经稳定性长期 试验，表明该制剂30°C以下可贮藏2年，能保证流通中药品的稳定和临床用药的安全；④经 过敏性、溶血性、血管刺激性等特殊安全性试验表明，未见溶血及凝集、刺激、过敏反应。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针剂组合物由核黄素磷酸钠二水合物、甘露醇和/ 或氨水组成。本发明核黄素磷酸钠冻干粉针剂中核黄素磷酸钠与甘露醇的重量比优选为 1 8 40，更优选1 9 20，最优选为1 10 15。氨水的用量没有特别限制，只要调节使本发明灌装前溶液的pH值在5. 5 6. 5的 范围内即可；如PH值符合要求，亦可不加氨水。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针剂是由水溶液经冻干制备而得的，因此制剂中有 时难免含有少量水分，但只要水分的含量在规定范围内，就不影响本发明产品的性能和有 益效果。本发明核黄素磷酸钠冻干粉针的水分含量在常规的冻干粉针剂允许的范围内，例 如水分的重量含量为0 5%。本发明的另一目的在于提供所述的核黄素磷酸钠冻干粉针的制备方法。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针制备工艺包括如下步骤称取处方量的核黄素磷 酸钠和甘露醇溶于适量的注射用水中，搅拌溶解，用氨水溶液调节PH值为5. 5 6. 5(如 pH值符合要求，亦可不加氨水)，补加注射用水至全量；加入活性炭，搅拌，过滤除炭，滤液 再经微孔滤膜精滤；将滤液灌装于棕色西林瓶内；冻干，出箱，即得核黄素磷酸钠冻干粉针剂。
具体地，本发明制备方法包括下列步骤在洁净区内，称取处方量的核黄素磷酸钠 和甘露醇溶于适量(例如为总水量的80%)注射用水中，搅拌，溶解，用氨水溶液调节溶液 的pH值为5. 5 6. 5 (如pH值符合要求，亦可不加氨水)，补加注射用水至全量；然后加入 占液体量0. 0.3% (W/V)的活性炭，搅拌脱色10 30分钟，再循环搅拌5 20分钟， 以钛滤棒过滤脱炭，再经微孔滤膜(例如0. 22 μ m滤膜)精滤；取滤液进行含量、密度、内毒 素、酸度、澄明度等检测，检测合格后灌装于棕色西林瓶内；将分装好的样品放入冻干箱中， 按冻干曲线进行冻干，加塞出箱，即得核黄素磷酸钠冻干粉针剂。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针剂的冻干工艺为以_35°C以下做为预冻温度， 预冻2 5小时；然后开始进行升华，升华温度为0°C时，升华时间为13小时以上；再于 30°C进行干燥，干燥时间为2小时以上；压塞出箱，轧盖，即得核黄素磷酸钠冻干粉针。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针处方工艺简单，有利于工业化大生产；冻干工艺 合理可行，时间相对短，可以节能、降低生产成本；所制备的冻干粉针产品外观饱满，质量保 证。
具体实施例方式下面将通过具体实施方式
对本发明作进一步说明，但并不因此将本发明限制在所 述的实施例范围中。本领域的技术人员应理解，对本发明内容所作的等同替换，或相应的改 进，仍属于本发明的保护范围之内。实施例1核黄素磷酸钠5g(以核黄素计)甘露醇50. Og氨水适量注射用水加至IOOOml制成1000 支制备工艺避光操作，称取处方量的核黄素磷酸钠和甘露醇溶于适量的注射用水 中，搅拌，溶解，用氨水溶液调节溶液的PH值为5. 9，补加注射用水至全量；然后加入占液体 量0.1% (W/V)的活性炭，搅拌脱色20分钟，再循环搅10分钟，以钛滤棒过滤脱炭，再经微 孔滤膜(0. 22 μ m滤膜)精滤；取滤液进行含量、密度、内毒素、酸度、澄明度等检测，检测合 格后灌装于棕色西林瓶内；将分装好的样品放入冻干箱中，以-40°C做为预冻温度，预冻3 小时后；然后开始进行升华，升华温度为0°C时，升华时间为13小时；再于30°C进行干燥， 干燥时间为4小时；加塞出箱，轧盖，即得核黄素磷酸钠冻干粉针剂。实施例2核黄素磷酸钠IOg (以核黄素计)甘露醇100. Og氨水适量注射用水加至IOOOml制成1000 支制备工艺避光操作，称取处方量的核黄素磷酸钠和甘露醇溶于适量的注射用水中，搅拌，溶解，用氨水溶液调节溶液的PH值为6. 0，补加注射用水至全量；然后加入占液体 量0.2% (W/V)的活性炭，搅拌脱色20分钟，再循环搅10分钟，以钛滤棒过滤脱炭，再经微 孔滤膜(0. 22 μ m滤膜)精滤；取滤液进行含量、密度、内毒素、酸度、澄明度等检测，检测合 格后灌装于棕色西林瓶内；将分装好的样品放入冻干箱中，以-40°C做为预冻温度，预冻4 小时后；然后开始进行升华，升华温度为0°C时，升华时间为15小时；再于30°C进行干燥， 干燥时间为5小时；加塞出箱，轧盖，即得核黄素磷酸钠冻干粉针剂。实施例3核黄素磷酸钠5g (以核黄素计)甘露醇60. Og注射用水加至IOOOml
制成1000 支制备工艺避光操作，称取处方量的核黄素磷酸钠和甘露醇溶于适量的注射用水 中，搅拌，溶解，测定溶液的PH值为5. 9 (在要求范围内，不用氨水pH值)，补加注射用水至 全量；然后加入占液体量0.1% (W/V)的活性炭，搅拌脱色20分钟，再循环搅10分钟，以钛 滤棒过滤脱炭，再经微孔滤膜(0. 22 μ m滤膜)精滤；取滤液进行含量、密度、内毒素、酸度、 澄明度等检测，检测合格后灌装于棕色西林瓶内；将分装好的样品放入冻干箱中，以-35X 做为预冻温度，预冻3小时后；然后开始进行升华，升华温度为0°C时，升华时间为15小时； 再于30°C进行干燥，干燥时间为5小时；加塞出箱，轧盖，即得核黄素磷酸钠冻干粉针剂。实施例4核黄素磷酸钠IOg (以核黄素计)甘露醇150. Og氨水适量注射用水加至2000ml制成1000 支制备工艺避光操作，称取处方量的核黄素磷酸钠和甘露醇溶于适量的注射用水 中，搅拌，溶解，用氨水溶液调节溶液的PH值为6. 0，补加注射用水至全量；然后加入占液体 量0.2% (W/V)的活性炭，搅拌脱色25分钟，再循环搅10分钟，以钛滤棒过滤脱炭，再经微 孔滤膜(0. 22 μ m滤膜)精滤；取滤液进行含量、密度、内毒素、酸度、澄明度等检测，检测合 格后灌装于棕色西林瓶内；将分装好的样品放入冻干箱中，以-40°C做为预冻温度，预冻4 小时后；然后开始进行升华，升华温度为0°C时，升华时间为16小时；再于30°C进行干燥， 干燥时间为6小时；加塞出箱，轧盖，即得核黄素磷酸钠冻干粉针剂。对比例按照专利申请CN200910130064. 2中实施例1的处方和方法制备的核黄素磷酸钠
注射剂。将以上实施例和对比例的样品按照核黄素磷酸钠冻干粉针剂国家质量标准要求 进行全检，结果见表1。表1核黄素磷酸钠冻干粉针剂检验结果 结果实施例和对比例生产的核黄素磷酸钠冻干粉针剂质量均符合要求，但对比例澄清度相对差，含量相对稍低。进一步说明本品对光敏感，其产品质量明显优于现有技术产品。
根据中国药典2005年版二部附录X工X C药物稳定性试验指导原则，对按本发明实施例和对比例生产的样品进行长期稳定性考察。取样品，按市售包装于温度为30°C以下放 置，分别于3、6、9、12、18、24月末取样，对性状、酸度、可见异物、不溶性微粒及含量等项目 进行测定，结果见表3。表3长期试验测定结果 经长期试验24个月，本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针剂各项检测指标仍在质量 标准范围内，质量合格。而对比例产品经长期18个月其澄清度、不溶性微粒也不符合规定， 24个月对比例产品的可见异物也不符合规定。由试验结果可见，本发明的核黄素磷酸钠冻 干粉针质量明显优于对比例。药理实验本发明核黄素磷酸钠冻干粉针的药理实验研究(一 )溶血性试验1. 1试验材料(1)试验动物日本大耳白雄性家兔1只，体重2. 3kg，由海南省医学实验动物中心 提供。合格证号医动字30-003号。
(2)试验药物本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针剂(即实施例1)，临用前用灭菌注 射用水稀释成每ml含0. 5mg、lmg、3mg核黄素。1. 2试验方法(1)2%兔血细胞混悬液的制备取家兔心脏血20ml，放入含玻璃珠的三角烧瓶中 振摇10分钟，除去纤维蛋白原，使成脱纤血液，移入刻度离心管内，加生理盐水，摇勻，离 心，1000-15000r/min离心15分钟，除去上清液，沉淀的红细胞再用生理盐水洗至上清液呈 无色透明为止，按雪球体积，用生理盐水将其稀释成2 %的混悬液。(2)溶血性试验取试管7支，按表4加入各种液体，第6管不加入供试品溶液，用 生理盐水作空白对照，第7管用蒸馏水代替生理盐水，作为溶血的阳性对照。各管轻轻摇勻 后送入37 °C恒温水浴箱中孵育，记录0. 5h、lh、2h、3h、4h结果。1. 3试验结果表4核黄素磷酸钠冻干粉针溶血性试验结果 注结果中“ + ”表示溶血；“A”表示凝聚；“_”表示不溶血也不凝聚。从表4可见浓度为lmg/ml的核黄素磷酸钠冻干粉针，在0. 1,0. 2,0. 3,0. 4、. 05ml 管，37°C保温4h，均为上层液黄色澄明，红细胞全部下沉，表明lmg/ml的核黄素磷酸钠冻干 粉针无明显溶血作用，经振摇后可见红细胞均勻散开，证明无红细胞凝聚。表明符合静脉注 射用安全性检查的要求。(二)刺激性试验2. 1试验材料(1)试验动物日本大耳白家兔，雌雄不拘(雌性兔无孕)2. 0 2. 5kg，由海南省 医学实验动物中心提供。合格证号医动字30-003号。(2)试验药物同1. 1 (2)项下。2. 2试验方法(1)家兔耳缘静脉血管刺激试验取家兔3只，每日每只兔一侧耳缘静脉按无菌操作方法分别静脉缓慢推注浓度为lmg/ml的核黄素磷酸钠冻干粉针剂lml/kg，另侧同法给予等体积的灭菌注射用水，每天1 次，连续5日，于末次给药24h、48h、72h后分别放血处死1只家兔，处死后立即于注射部位 近心端1. 5cm至3cm处剪取耳缘(含耳缘静脉血管)，10%甲醛固定，送病理组织学检查，观 察有无组织变性或坏死等显著性刺激反应。(2)家兔股四头肌刺激试验取家兔2只，每只于一侧股四头肌肉按无菌操作方法注入浓度为3mg/ml的核黄素 磷酸钠冻干粉针剂lml/kg，另一侧注射等体积的灭菌注射用水，48h后放血处死，观察受试 物的刺激反应。2. 3试验结果
(1)家兔耳缘血管刺激试验家兔每日耳缘静脉滴注浓度为lmg/ml的核黄素磷酸 钠冻干粉针剂lml/kg，另侧同法给予等体积的灭菌注射用水，每日1次，连续5日，末次给药 24h 72h内观察注射部位血管未见明显充血及水肿，血管边缘清晰，病理组织检查未见组 织变形及坏死等病理改变。(2)家兔股四头肌刺激试验家兔一侧股四头肌注射3mg/ml的核黄素磷酸钠冻干 粉针剂lml/kg，另侧注射等体积的灭菌注射用水，给药后48h，取股四头肌观察均未见明显 刺激反应，反应分值均为0，病理组织检查未见组织变性及坏死等病理改变。(三)全身过敏试验3. 1试验材料(1)试验动物白化豚鼠，雌雄兼用(雌性豚鼠无孕)，体重300 370g，由江苏省江 宁县汤山青龙山动物繁殖场提供。实验动物生产许可证号SCXK (苏)2002-0004。(2)试验药物同1. 1 (2)项下。(3)鸡蛋，购自市场，使用时按无菌操作取出鸡蛋清，加生理盐水配制成100ml/L 鸡蛋清溶液。3. 2试验方法取白化无伤豚鼠24只，均分4组，取第1组(设为低剂量组)豚鼠按无菌操作隔 日每只腹腔注射浓度为0. 5mg/ml的核黄素磷酸钠冻干粉针剂Iml/只致敏，连续3次，取第 2组(设为高剂量组)豚鼠按无菌操作隔日每只腹腔注射浓度为lmg/ml的核黄素磷酸钠冻 干粉针剂Iml/致敏，连续3次。第1、2组于末次注射后第10d，静脉注射给予为2ml/只的 核黄素磷酸钠冻干粉针剂(低剂量组浓度为0. 5mg/ml、高剂量组浓度为mg/ml)进行激发攻 击；取第3组(设为阴性对照组)豚鼠隔日每只腹腔注射灭菌注射用水Iml/只，共3次，于 末次注射后第IOd静脉注射给予灭菌注射用水2ml/只进行攻击；取第4组(设为阳性对照 组)豚鼠隔日每只腹腔注射100ml/L鸡蛋清溶液Iml/只，共3次，于末次注射后第IOd静 脉注射给予100ml/L鸡蛋清溶液2ml/只进行攻击。各组豚鼠注射攻击后30min内，观察记 录结果。3. 3试验结果表5核黄素磷酸钠冻干粉针全身主动过敏试验结果 经药理实验研究表明本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针无过敏性、刺激性和溶血性 反应。
权利要求
一种核黄素磷酸钠冻干粉针，其特征在于，所述的核黄素磷酸钠冻干粉针组合物主要由核黄素磷酸钠二水合物、甘露醇和/或氨水组成。
2.根据权利要求1所述的核黄素磷酸钠冻干粉针，其特征在于，核黄素磷酸钠与甘露 醇的重量比为本1 8 40。
3.根据权利要求2中所述的核黄素磷酸钠冻干粉针，其特征在于，核黄素磷酸钠与甘 露醇的重量比为1 9 20。
4.根据权利要求3中所述的核黄素磷酸钠冻干粉针，其特征在于，核黄素磷酸钠与甘 露醇的重量比为1 10 15。
5.根据权利要求1至4中任意一项所述的核黄素磷酸钠冻干粉针，其特征在于，所述的 PH调节剂为氨水，氨水的用量为调节制剂中间体溶液pH值在5. 5 6. 5的量。
6.根据权利要求1至5中任意一项所述的核黄素磷酸钠冻干粉针，其特征在于，所述制 剂中亦可不加氨水。
7.根据权利要求1至6中任意一项所述的核黄素磷酸钠冻干粉针的制备方法，其特征 在于，所述的工艺步骤如下称取处方量的核黄素磷酸钠和甘露醇溶于适量注射用水中，搅 拌，溶解，用氨水溶液调节溶液的pH值为5. 5 6. 5 (如pH值符合要求，亦可不加氨水)，补 加注射用水至全量；然后加入占液体量0.1% 0.3% (W/V)的活性炭，搅拌脱色10 30 分钟，再循环搅拌5 20分钟，以钛滤棒过滤脱炭，再经微孔滤膜(0. 22 μ m滤膜)精滤；取 滤液进行含量、密度、内毒素、酸度、澄明度等检测，检测合格后灌装于棕色西林瓶；将分装 好的样品放入冻干箱中，按冻干曲线进行冻干，加塞出箱，即得核黄素磷酸钠冻干粉针。
8.根据专利要求7中所述的核黄素磷酸钠冻干粉针的制备方法，其特征在于，其中冻 干工艺如下以_35°C以下做为预冻温度，预冻2 5小时；然后开始进行升华，升华温度为 0°C时，升华时间为13小时以上；再于30°C进行干燥，干燥时间为2小时以上；压塞出箱，轧 盖，即得核黄素磷酸钠冻干粉针。
全文摘要
本发明涉及一种核黄素磷酸钠冻干粉针及其制备方法，其特征在于，由核黄素磷酸钠二水合物、甘露醇和/或氨水组成。本品对光敏感，使用棕色西林瓶作为本品内包装。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针具有如下显著的有益效果①处方中辅料单一、明确，可以满足工业化大批量生产的要求；②原、辅料均为药用注射级，符合人体静脉注射用药要求，大大降低了临床使用潜在的不良反应风险；③经稳定性长期试验，表明该制剂30℃以下可贮藏2年，能保证流通中药品的稳定和临床用药的安全；④经过敏性、溶血性、血管刺激性等特殊安全性试验表明，未见溶血及凝集、刺激、过敏反应。
文档编号A61P27/02GK101874787SQ20091025820
公开日2010年11月3日 申请日期2009年12月11日 优先权日2009年12月11日
发明者张志宏, 朱玉, 王欣, 龙娇 申请人:海南利能康泰制药有限公司
技术领域：
本发明涉及一种核黄素磷酸钠冻干粉针及其制备方法，用于由核黄素缺乏引起的 口角炎、唇炎、舌炎、眼结膜炎及阴囊炎等疾病的治疗。属于医药制剂的技术领域。
背景技术：
核黄素磷酸钠为维生素类药，核黄素(维生素化)是人体重要营养素，在能量代谢 中起关键作用。核黄素磷酸钠为黄素单核苷酸(FMN)和黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)前体药， 而FMN和FAD是黄素酶家族的重要辅助因子。黄素酶催化很多生化反应，最典型的为氧化 还原反应，它们是细胞呼吸的关键因子。FAD和FMN在线粒体转动链中递氢，在此过程中产 生细胞能量。缺乏时可影响机体的生物氧化，使代谢发生障碍，其病变多表现为口、眼、外生 殖器部位的炎症。在临床上主要用于由核黄素缺乏引起的口角炎、唇炎、舌炎、眼结膜炎及 阴囊炎等疾病的治疗。核黄素磷酸钠化学名称核黄素5’ _(二氢磷酸酯)单钠盐二水合物，其化学结构 式为 关于核黄素磷酸钠的现有技术有CN200910130064. 2(公开号CN101518516，申请 日2009.4. 3)涉及一种核黄素磷酸钠冻干粉针剂及其制备方法，该冻干粉针剂由以下组 分经过冷冻干燥制得核黄素磷酸钠以核黄素计5-10g、甘露醇20-40g、适量的pH调节剂 (lmol/L的NaOH溶液和/或lmol/L的HC1溶液)和注射用加水至1000_2000ml。该专利 申请中的所有实施例中核黄素与甘露醇的重量配比均为1 4，专利申请所提供的长期试 验水分测定数据为4% 6%，根据国家药品标准的规定，水分不得过5. 0%，而该专利申请 水分测定0天试验数据为5. 0 5. 6%，已超过质量标准规定，且随着常温放置时间的增加， 水分含量越来越低。由于核黄素磷酸钠原料药具有引湿性，随着放置时间的增加，其水分含 量不可能减少。而加速试验中提供的水分数据为左右，因此该专利申请制备的产品是 否为核黄素磷酸钠制剂值得怀疑。也更进一步证明该专利申请制备得到的产品不稳定，不 适于作为药品。CN200410093401. 2(公开号:CN1660120A,申请日=2004. 12. 15)公开了一种 核黄素磷酸钠注射液，每支注射液中含核黄素磷酸钠5mg-100mg，0 -环糊精10mg-20mg，每 支加注射用水至2ml-10ml。用pH值调节剂调至pH3-8，pH值调节剂为氢氧化钠或碳酸氢 钠或碳酸钠中的一种或两种以上。其制备工艺为取处方量的核黄素磷酸钠与环糊精， 置研磨机中研磨20-50分钟取出，用注射用水适量搅拌使溶解，再加入注射用水到全量，用pH值调节剂调节pH值至3-8，经过滤，灌装，充氮，熔封，高温灭菌，降温后灯检，包装、检验 即得。研究显示，核黄素磷酸钠注射液稳定性差，在贮存过程中容易出现澄清度不好、溶液 易变浑浊等缺陷；且环糊精用于注射剂辅料临床安全性有待评价，以上两种情况均为 临床使用上大大增加了不可预知的风险。上述现有技术中还均存在以下问题国家药品标准规定的核黄素磷酸钠注射剂的 药品质量标准都有钠盐的鉴别反应，以上两个专利的辅料均有钠离子干扰鉴别(均以NaOH 或者碳酸钠等含钠离子的碱作为PH调节剂)。因此，迫切需要开发一种在药品生产中不使 用含钠离子的辅料，且产品稳定、澄清度好的核黄素磷酸钠注射剂。
发明内容
为了解决现有技术的上述缺陷，本发明人经过深入研究，令人惊奇地发现，选用合 适的赋形剂，并以少量不含有钠离子的PH值调节剂调节本品pH值，可以得到没有钠离子干 扰检验、且安全、稳定适于临床使用的核黄素磷酸钠注射剂，从而完成了本发明。因此，本发明提供一种核黄素磷酸钠注射剂，该注射剂选择甘露醇为特定的赋形 剂，以氨水为PH调节剂，其中核黄素磷酸钠与赋形剂甘露醇具有特定的重量配比。核黄 素磷酸钠对光敏感，故采用棕色西林瓶，目的是使产品生产、运输过程中和长期贮藏更好避 光，确保产品的稳定性。本发明还提供一种核黄素磷酸钠冻干粉针制备方法和优化的冻干 工艺，该方法可以制得外观性状好，主药含量高，水分含量低，且澄清度好质量稳定的核黄 素磷酸钠冻干粉针。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针剂与现有技术相比，具有如下显著的有益效果 ①处方中辅料单一、明确，可以满足工业化大批量生产的要求；②原、辅料均为药用注射级， 符合人体静脉注射用药要求，大大降低了临床使用潜在的不良反应风险；③经稳定性长期 试验，表明该制剂30°C以下可贮藏2年，能保证流通中药品的稳定和临床用药的安全；④经 过敏性、溶血性、血管刺激性等特殊安全性试验表明，未见溶血及凝集、刺激、过敏反应。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针剂组合物由核黄素磷酸钠二水合物、甘露醇和/ 或氨水组成。本发明核黄素磷酸钠冻干粉针剂中核黄素磷酸钠与甘露醇的重量比优选为 1 8 40，更优选1 9 20，最优选为1 10 15。氨水的用量没有特别限制，只要调节使本发明灌装前溶液的pH值在5. 5 6. 5的 范围内即可；如PH值符合要求，亦可不加氨水。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针剂是由水溶液经冻干制备而得的，因此制剂中有 时难免含有少量水分，但只要水分的含量在规定范围内，就不影响本发明产品的性能和有 益效果。本发明核黄素磷酸钠冻干粉针的水分含量在常规的冻干粉针剂允许的范围内，例 如水分的重量含量为0 5%。本发明的另一目的在于提供所述的核黄素磷酸钠冻干粉针的制备方法。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针制备工艺包括如下步骤称取处方量的核黄素磷 酸钠和甘露醇溶于适量的注射用水中，搅拌溶解，用氨水溶液调节PH值为5. 5 6. 5(如 pH值符合要求，亦可不加氨水)，补加注射用水至全量；加入活性炭，搅拌，过滤除炭，滤液 再经微孔滤膜精滤；将滤液灌装于棕色西林瓶内；冻干，出箱，即得核黄素磷酸钠冻干粉针剂。
具体地，本发明制备方法包括下列步骤在洁净区内，称取处方量的核黄素磷酸钠 和甘露醇溶于适量(例如为总水量的80%)注射用水中，搅拌，溶解，用氨水溶液调节溶液 的pH值为5. 5 6. 5 (如pH值符合要求，亦可不加氨水)，补加注射用水至全量；然后加入 占液体量0. 0.3% (W/V)的活性炭，搅拌脱色10 30分钟，再循环搅拌5 20分钟， 以钛滤棒过滤脱炭，再经微孔滤膜(例如0. 22 μ m滤膜)精滤；取滤液进行含量、密度、内毒 素、酸度、澄明度等检测，检测合格后灌装于棕色西林瓶内；将分装好的样品放入冻干箱中， 按冻干曲线进行冻干，加塞出箱，即得核黄素磷酸钠冻干粉针剂。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针剂的冻干工艺为以_35°C以下做为预冻温度， 预冻2 5小时；然后开始进行升华，升华温度为0°C时，升华时间为13小时以上；再于 30°C进行干燥，干燥时间为2小时以上；压塞出箱，轧盖，即得核黄素磷酸钠冻干粉针。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针处方工艺简单，有利于工业化大生产；冻干工艺 合理可行，时间相对短，可以节能、降低生产成本；所制备的冻干粉针产品外观饱满，质量保 证。
具体实施例方式下面将通过具体实施方式
对本发明作进一步说明，但并不因此将本发明限制在所 述的实施例范围中。本领域的技术人员应理解，对本发明内容所作的等同替换，或相应的改 进，仍属于本发明的保护范围之内。实施例1核黄素磷酸钠5g(以核黄素计)甘露醇50. Og氨水适量注射用水加至IOOOml制成1000 支制备工艺避光操作，称取处方量的核黄素磷酸钠和甘露醇溶于适量的注射用水 中，搅拌，溶解，用氨水溶液调节溶液的PH值为5. 9，补加注射用水至全量；然后加入占液体 量0.1% (W/V)的活性炭，搅拌脱色20分钟，再循环搅10分钟，以钛滤棒过滤脱炭，再经微 孔滤膜(0. 22 μ m滤膜)精滤；取滤液进行含量、密度、内毒素、酸度、澄明度等检测，检测合 格后灌装于棕色西林瓶内；将分装好的样品放入冻干箱中，以-40°C做为预冻温度，预冻3 小时后；然后开始进行升华，升华温度为0°C时，升华时间为13小时；再于30°C进行干燥， 干燥时间为4小时；加塞出箱，轧盖，即得核黄素磷酸钠冻干粉针剂。实施例2核黄素磷酸钠IOg (以核黄素计)甘露醇100. Og氨水适量注射用水加至IOOOml制成1000 支制备工艺避光操作，称取处方量的核黄素磷酸钠和甘露醇溶于适量的注射用水中，搅拌，溶解，用氨水溶液调节溶液的PH值为6. 0，补加注射用水至全量；然后加入占液体 量0.2% (W/V)的活性炭，搅拌脱色20分钟，再循环搅10分钟，以钛滤棒过滤脱炭，再经微 孔滤膜(0. 22 μ m滤膜)精滤；取滤液进行含量、密度、内毒素、酸度、澄明度等检测，检测合 格后灌装于棕色西林瓶内；将分装好的样品放入冻干箱中，以-40°C做为预冻温度，预冻4 小时后；然后开始进行升华，升华温度为0°C时，升华时间为15小时；再于30°C进行干燥， 干燥时间为5小时；加塞出箱，轧盖，即得核黄素磷酸钠冻干粉针剂。实施例3核黄素磷酸钠5g (以核黄素计)甘露醇60. Og注射用水加至IOOOml
制成1000 支制备工艺避光操作，称取处方量的核黄素磷酸钠和甘露醇溶于适量的注射用水 中，搅拌，溶解，测定溶液的PH值为5. 9 (在要求范围内，不用氨水pH值)，补加注射用水至 全量；然后加入占液体量0.1% (W/V)的活性炭，搅拌脱色20分钟，再循环搅10分钟，以钛 滤棒过滤脱炭，再经微孔滤膜(0. 22 μ m滤膜)精滤；取滤液进行含量、密度、内毒素、酸度、 澄明度等检测，检测合格后灌装于棕色西林瓶内；将分装好的样品放入冻干箱中，以-35X 做为预冻温度，预冻3小时后；然后开始进行升华，升华温度为0°C时，升华时间为15小时； 再于30°C进行干燥，干燥时间为5小时；加塞出箱，轧盖，即得核黄素磷酸钠冻干粉针剂。实施例4核黄素磷酸钠IOg (以核黄素计)甘露醇150. Og氨水适量注射用水加至2000ml制成1000 支制备工艺避光操作，称取处方量的核黄素磷酸钠和甘露醇溶于适量的注射用水 中，搅拌，溶解，用氨水溶液调节溶液的PH值为6. 0，补加注射用水至全量；然后加入占液体 量0.2% (W/V)的活性炭，搅拌脱色25分钟，再循环搅10分钟，以钛滤棒过滤脱炭，再经微 孔滤膜(0. 22 μ m滤膜)精滤；取滤液进行含量、密度、内毒素、酸度、澄明度等检测，检测合 格后灌装于棕色西林瓶内；将分装好的样品放入冻干箱中，以-40°C做为预冻温度，预冻4 小时后；然后开始进行升华，升华温度为0°C时，升华时间为16小时；再于30°C进行干燥， 干燥时间为6小时；加塞出箱，轧盖，即得核黄素磷酸钠冻干粉针剂。对比例按照专利申请CN200910130064. 2中实施例1的处方和方法制备的核黄素磷酸钠
注射剂。将以上实施例和对比例的样品按照核黄素磷酸钠冻干粉针剂国家质量标准要求 进行全检，结果见表1。表1核黄素磷酸钠冻干粉针剂检验结果 结果实施例和对比例生产的核黄素磷酸钠冻干粉针剂质量均符合要求，但对比例澄清度相对差，含量相对稍低。进一步说明本品对光敏感，其产品质量明显优于现有技术产品。
根据中国药典2005年版二部附录X工X C药物稳定性试验指导原则，对按本发明实施例和对比例生产的样品进行长期稳定性考察。取样品，按市售包装于温度为30°C以下放 置，分别于3、6、9、12、18、24月末取样，对性状、酸度、可见异物、不溶性微粒及含量等项目 进行测定，结果见表3。表3长期试验测定结果 经长期试验24个月，本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针剂各项检测指标仍在质量 标准范围内，质量合格。而对比例产品经长期18个月其澄清度、不溶性微粒也不符合规定， 24个月对比例产品的可见异物也不符合规定。由试验结果可见，本发明的核黄素磷酸钠冻 干粉针质量明显优于对比例。药理实验本发明核黄素磷酸钠冻干粉针的药理实验研究(一 )溶血性试验1. 1试验材料(1)试验动物日本大耳白雄性家兔1只，体重2. 3kg，由海南省医学实验动物中心 提供。合格证号医动字30-003号。
(2)试验药物本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针剂(即实施例1)，临用前用灭菌注 射用水稀释成每ml含0. 5mg、lmg、3mg核黄素。1. 2试验方法(1)2%兔血细胞混悬液的制备取家兔心脏血20ml，放入含玻璃珠的三角烧瓶中 振摇10分钟，除去纤维蛋白原，使成脱纤血液，移入刻度离心管内，加生理盐水，摇勻，离 心，1000-15000r/min离心15分钟，除去上清液，沉淀的红细胞再用生理盐水洗至上清液呈 无色透明为止，按雪球体积，用生理盐水将其稀释成2 %的混悬液。(2)溶血性试验取试管7支，按表4加入各种液体，第6管不加入供试品溶液，用 生理盐水作空白对照，第7管用蒸馏水代替生理盐水，作为溶血的阳性对照。各管轻轻摇勻 后送入37 °C恒温水浴箱中孵育，记录0. 5h、lh、2h、3h、4h结果。1. 3试验结果表4核黄素磷酸钠冻干粉针溶血性试验结果 注结果中“ + ”表示溶血；“A”表示凝聚；“_”表示不溶血也不凝聚。从表4可见浓度为lmg/ml的核黄素磷酸钠冻干粉针，在0. 1,0. 2,0. 3,0. 4、. 05ml 管，37°C保温4h，均为上层液黄色澄明，红细胞全部下沉，表明lmg/ml的核黄素磷酸钠冻干 粉针无明显溶血作用，经振摇后可见红细胞均勻散开，证明无红细胞凝聚。表明符合静脉注 射用安全性检查的要求。(二)刺激性试验2. 1试验材料(1)试验动物日本大耳白家兔，雌雄不拘(雌性兔无孕)2. 0 2. 5kg，由海南省 医学实验动物中心提供。合格证号医动字30-003号。(2)试验药物同1. 1 (2)项下。2. 2试验方法(1)家兔耳缘静脉血管刺激试验取家兔3只，每日每只兔一侧耳缘静脉按无菌操作方法分别静脉缓慢推注浓度为lmg/ml的核黄素磷酸钠冻干粉针剂lml/kg，另侧同法给予等体积的灭菌注射用水，每天1 次，连续5日，于末次给药24h、48h、72h后分别放血处死1只家兔，处死后立即于注射部位 近心端1. 5cm至3cm处剪取耳缘(含耳缘静脉血管)，10%甲醛固定，送病理组织学检查，观 察有无组织变性或坏死等显著性刺激反应。(2)家兔股四头肌刺激试验取家兔2只，每只于一侧股四头肌肉按无菌操作方法注入浓度为3mg/ml的核黄素 磷酸钠冻干粉针剂lml/kg，另一侧注射等体积的灭菌注射用水，48h后放血处死，观察受试 物的刺激反应。2. 3试验结果
(1)家兔耳缘血管刺激试验家兔每日耳缘静脉滴注浓度为lmg/ml的核黄素磷酸 钠冻干粉针剂lml/kg，另侧同法给予等体积的灭菌注射用水，每日1次，连续5日，末次给药 24h 72h内观察注射部位血管未见明显充血及水肿，血管边缘清晰，病理组织检查未见组 织变形及坏死等病理改变。(2)家兔股四头肌刺激试验家兔一侧股四头肌注射3mg/ml的核黄素磷酸钠冻干 粉针剂lml/kg，另侧注射等体积的灭菌注射用水，给药后48h，取股四头肌观察均未见明显 刺激反应，反应分值均为0，病理组织检查未见组织变性及坏死等病理改变。(三)全身过敏试验3. 1试验材料(1)试验动物白化豚鼠，雌雄兼用(雌性豚鼠无孕)，体重300 370g，由江苏省江 宁县汤山青龙山动物繁殖场提供。实验动物生产许可证号SCXK (苏)2002-0004。(2)试验药物同1. 1 (2)项下。(3)鸡蛋，购自市场，使用时按无菌操作取出鸡蛋清，加生理盐水配制成100ml/L 鸡蛋清溶液。3. 2试验方法取白化无伤豚鼠24只，均分4组，取第1组(设为低剂量组)豚鼠按无菌操作隔 日每只腹腔注射浓度为0. 5mg/ml的核黄素磷酸钠冻干粉针剂Iml/只致敏，连续3次，取第 2组(设为高剂量组)豚鼠按无菌操作隔日每只腹腔注射浓度为lmg/ml的核黄素磷酸钠冻 干粉针剂Iml/致敏，连续3次。第1、2组于末次注射后第10d，静脉注射给予为2ml/只的 核黄素磷酸钠冻干粉针剂(低剂量组浓度为0. 5mg/ml、高剂量组浓度为mg/ml)进行激发攻 击；取第3组(设为阴性对照组)豚鼠隔日每只腹腔注射灭菌注射用水Iml/只，共3次，于 末次注射后第IOd静脉注射给予灭菌注射用水2ml/只进行攻击；取第4组(设为阳性对照 组)豚鼠隔日每只腹腔注射100ml/L鸡蛋清溶液Iml/只，共3次，于末次注射后第IOd静 脉注射给予100ml/L鸡蛋清溶液2ml/只进行攻击。各组豚鼠注射攻击后30min内，观察记 录结果。3. 3试验结果表5核黄素磷酸钠冻干粉针全身主动过敏试验结果 经药理实验研究表明本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针无过敏性、刺激性和溶血性 反应。
权利要求
一种核黄素磷酸钠冻干粉针，其特征在于，所述的核黄素磷酸钠冻干粉针组合物主要由核黄素磷酸钠二水合物、甘露醇和/或氨水组成。
2.根据权利要求1所述的核黄素磷酸钠冻干粉针，其特征在于，核黄素磷酸钠与甘露 醇的重量比为本1 8 40。
3.根据权利要求2中所述的核黄素磷酸钠冻干粉针，其特征在于，核黄素磷酸钠与甘 露醇的重量比为1 9 20。
4.根据权利要求3中所述的核黄素磷酸钠冻干粉针，其特征在于，核黄素磷酸钠与甘 露醇的重量比为1 10 15。
5.根据权利要求1至4中任意一项所述的核黄素磷酸钠冻干粉针，其特征在于，所述的 PH调节剂为氨水，氨水的用量为调节制剂中间体溶液pH值在5. 5 6. 5的量。
6.根据权利要求1至5中任意一项所述的核黄素磷酸钠冻干粉针，其特征在于，所述制 剂中亦可不加氨水。
7.根据权利要求1至6中任意一项所述的核黄素磷酸钠冻干粉针的制备方法，其特征 在于，所述的工艺步骤如下称取处方量的核黄素磷酸钠和甘露醇溶于适量注射用水中，搅 拌，溶解，用氨水溶液调节溶液的pH值为5. 5 6. 5 (如pH值符合要求，亦可不加氨水)，补 加注射用水至全量；然后加入占液体量0.1% 0.3% (W/V)的活性炭，搅拌脱色10 30 分钟，再循环搅拌5 20分钟，以钛滤棒过滤脱炭，再经微孔滤膜(0. 22 μ m滤膜)精滤；取 滤液进行含量、密度、内毒素、酸度、澄明度等检测，检测合格后灌装于棕色西林瓶；将分装 好的样品放入冻干箱中，按冻干曲线进行冻干，加塞出箱，即得核黄素磷酸钠冻干粉针。
8.根据专利要求7中所述的核黄素磷酸钠冻干粉针的制备方法，其特征在于，其中冻 干工艺如下以_35°C以下做为预冻温度，预冻2 5小时；然后开始进行升华，升华温度为 0°C时，升华时间为13小时以上；再于30°C进行干燥，干燥时间为2小时以上；压塞出箱，轧 盖，即得核黄素磷酸钠冻干粉针。
全文摘要
本发明涉及一种核黄素磷酸钠冻干粉针及其制备方法，其特征在于，由核黄素磷酸钠二水合物、甘露醇和/或氨水组成。本品对光敏感，使用棕色西林瓶作为本品内包装。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针具有如下显著的有益效果①处方中辅料单一、明确，可以满足工业化大批量生产的要求；②原、辅料均为药用注射级，符合人体静脉注射用药要求，大大降低了临床使用潜在的不良反应风险；③经稳定性长期试验，表明该制剂30℃以下可贮藏2年，能保证流通中药品的稳定和临床用药的安全；④经过敏性、溶血性、血管刺激性等特殊安全性试验表明，未见溶血及凝集、刺激、过敏反应。
文档编号A61P27/02GK101874787SQ20091025820
公开日2010年11月3日 申请日期2009年12月11日 优先权日2009年12月11日
发明者张志宏, 朱玉, 王欣, 龙娇 申请人:海南利能康泰制药有限公司
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