本发明涉及医用制品，更具体的涉及一种负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料及其制备方法和应用。
背景技术：
1、皮肤由多种细胞组成，这些细胞排列在多层中，复杂血管网络交杂其间，共同创造了一个细胞与基质相互作用的动态微环境。皮肤由三部分组成：表皮、真皮和皮下组织。表皮与外界直接联系，可阻断组织液流出，减小摩擦并抵抗微生物感染。
2、皮肤不仅是抵御机械力、病原体和紫外线辐射的屏障，还通过维持温度、水合作用和盐分水平来促进全身稳态。由各种应激事件引起的正常皮肤、组织的损伤或恶化情况称之为伤口。创伤的发生具有高频性和普遍性，每年给数百万人带来巨大的痛苦。因此伤口治疗是一个全球性的公共卫生问题。皮肤发生正常的表皮损伤时，在一定程度上可以通过修复能力进行自我愈合。然而患者伤口范围较大或自身具有基础疾病时，容易出现代谢异常，导致伤口炎症，进而转化为慢性溃疡或形成疤痕。伤口护理不当会导致愈合周期延长至数月甚至更长时间，严重影响患者生活质量。并且身体创伤或疾病导致的皮肤组织损失可能导致残疾甚至死亡。
3、皮肤伤口修复过程是一个复杂且高度协调的过程，涉及多种细胞和组织。伤口修复通常可分为四个重叠阶段：止血、炎症、增殖和重塑。修复初始阶段，凝血因子被激活，血小板形成了血栓以减轻失血。继而炎症反应中巨噬细胞和中性粒细胞调控炎症反应进程，限制外源异物侵入并清除细胞碎片，启动成纤维细胞增殖。细胞增殖阶段涉及创源收缩、ecm重塑和再上皮化。肉芽组织的形成是伤口愈合增殖期的一个显著特征。肉芽组织是一种血管化良好的含有巨噬细胞和成纤维细胞的红色结缔组织，负责主动收缩伤口。这种收缩主要由成纤维细胞及其衍生亚型肌成纤维细胞进行“牵拉”。由于此阶段涉及多种细胞和组织，易受多种不良因素影响导致伤口愈合效果不佳。最后，在组织重塑阶段中胶原蛋白沉积，弹性蛋白纤维重排，基底细胞向皮肤缺陷处迁移。新的上皮细胞形成以后，皮肤完成再上皮化。随后，成熟结构包括功能性血管和再分化表皮，通过介导一系列信号传导来诱导组织中细胞向静止阶段转变，角质形成细胞、真皮成纤维细胞和未成熟血管相关细胞等过剩细胞发生退变，转化为相对稳定的皮肤状态。在经过多种细胞的生长与分化后，组织间新生毛细血管网重新配制于整个皮肤器官系统。
4、伤口敷料是主要的医用护理手段。传统的伤口敷料有纱布、绷带、棉垫等。传统敷料可以为损伤提供基本的屏障作用，具有不同程度的吸收性。它们的主要功能一方面是提供屏障防止病菌接触破损皮肤，另一方面是通过吸收伤口渗出液促进其蒸发，使伤口保持干燥。然而研究已经证明，有一个适度湿润的伤口环境有助于更快、更成功地愈合伤口。
5、然而，传统伤口敷料存在以下几个缺点：(1)吸收创面部位的伤口渗出液后极易黏连，更换敷料时易对创面造成二次机械损伤。(2)无法进行药物缓释。(3)对伤口愈合促进效果有限。因此，有必要开发一种实现药物缓释，促进皮肤伤口愈合且更换敷料不会产生二次机械损伤的新型伤口敷料。
技术实现思路
1、针对以上问题，本发明提供了一种负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料及其制备方法和应用，本发明制备的负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料实现了药物缓释，促进皮肤伤口愈合且更换敷料不会产生二次机械损伤。
2、本发明的第一个目的是提供一种负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料的制备方法，包括以下步骤：
3、将丝胶溶解于缓冲液中得到丝胶溶液，加入甲基丙烯酸酐，甲基丙烯酸酐和丝胶发生共聚反应生成酯键实现甲基丙烯酸酐改性丝胶，制备得到丝胶水凝胶；
4、丝胶水凝胶和二甲基乙二酰氨基乙酸溶解于缓冲液中制备得到混合液；
5、以聚己内酯纤维膜为基体，在光引发剂的作用下，混合液中的丝胶水凝胶和二甲基乙二酰氨基乙酸在紫外光下发生光固化反应，将丝胶水凝胶和二甲基乙二酰氨基乙酸负载在聚己内酯纤维膜上制备得到负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料。
6、本发明的一个优选实施例中，丝胶溶液与甲基丙烯酸酐的体积比为1:10，丝胶溶液的质量浓度为6.7％～8％。例如，丝胶溶液的质量浓度为6.7％、6.8％、6.9％、7.0％、7.1％、7.2％、7.3％、7.4％、7.5％、7.6％、7.7％、7.8％、7.9％、8％等，但并不仅限于所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。
7、本发明的一个优选实施例中，缓冲液为0.01-0.015mol/l的pbs缓冲液。例如，pbs缓冲液的浓度为0.01mol/l、0.011mol/l、0.012mol/l、0.013mol/l、0.014mol/l、0.015mol/l等，但并不仅限于所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用，可以理解的是mol/l简称为m。pbs缓冲液能够提供相对稳定的离子环境和ph缓冲能力，ph为7.2-7.4，与人体ph相近，溶液渗透压与人体血液等渗，可以作为溶剂，溶解保护试剂。
8、本发明的一个优选实施例中，丝胶水凝胶、二甲基乙二酰氨基乙酸的质量比为0.1-0.15g：25-200μg。例如，丝胶水凝胶、二甲基乙二酰氨基乙酸的质量比为0.1g：25μg、0.1g：50μg、0.1g：100μg、0.1g：150μg、0.1g：200μg、0.13g：180μg、0.15g：160μg、0.15g：70μg等，但并不仅限于所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。需要说明的是，丝胶水凝胶的增加可以提高复合敷料的亲水性能。
9、本发明的一个优选实施例中，丝胶水凝胶、二甲基乙二酰氨基乙酸的质量比为0.1-0.15g：25-200μg。
10、本发明的一个优选实施例中，丝胶水凝胶和光引发剂的质量比为0.1-0.15：0.01-0.015。例如，丝胶水凝胶和光引发剂的质量比为0.1:0.01、0.1:0.012、0.1:0.013、0.1:0.014、0.1:0.015、0.13:0.012、0.15:0.01等，但并不仅限于所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。当光引发剂的添加量过少，无法有效引起光固化反应，而光引发剂的添加量过多，会造成细胞毒性比较大。
11、本发明的一个优选实施例中，光固化反应是在紫外光下照射1-3min。例如，照射时间为1min，2min、3min等，但并不仅限于所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。
12、本发明的一个优选实施例中，光引发剂为i2959。
13、本发明的第二个目的是提供上述制备方法制备得到的负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料。
14、本发明的第三个目的是提供上述负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料在用于制备损伤修复材料中的应用。
15、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
16、本发明首先利用甲基丙烯酸酐单体在聚合过程中能够发生加成反应，与丝胶末端反应形成较稳定的酯键，从而将甲基丙烯酸酐引入到丝胶结构中，从而提高丝胶的机械性能，成膜性能得到改善，并且丝胶水凝胶具有缓释药物的性能。以静电纺丝得到的pcl薄膜作为基体，负载丝胶水凝胶不仅保留了丝胶的天然生物活性，还可以进一步改善丝胶水凝胶机械性能差的问题，pcl薄膜机械性能良好，赋予载药复合敷料柔软的整体特性以及良好的延展性，在保护伤口的同时有利于患者伤处的活动，不容易牵拉伤口造成二次损伤。丝胶水凝胶具有优异的生物相容性，具备多种生物活性，可有效促进伤口愈合。将dmog药物搭载于丝胶水凝胶载体中，可以对创伤部位靶向缓释药物，有利于保持dmog药物促血管生成活性，提高药物生物利用率。
17、本发明制备负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料通过缓释dmog改善huvecs的功能，加速体外血管生成，增强huvecs胞内no生成，促进huvecs细胞迁移。此外，负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料载药复合敷料被用于治疗小鼠的全层皮肤伤口，通过促进伤口部位的胶原沉积，细胞增殖和新生血管的成熟来加速伤口愈合。
1.一种负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料的制备方法，其特征在于，丝胶溶液与甲基丙烯酸酐的体积比为1:10，丝胶溶液的质量浓度为6.7％～8％。
3.根据权利要求1所述的一种负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料的制备方法，其特征在于，缓冲液为0.01-0.015mol/l的pbs缓冲液。
4.根据权利要求1所述的一种负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料的制备方法，其特征在于，丝胶水凝胶、二甲基乙二酰氨基乙酸的质量比为0.1-0.15g：25-200μg。
5.根据权利要求4所述的一种负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料的制备方法，其特征在于，丝胶水凝胶、二甲基乙二酰氨基乙酸的质量比为0.15g：50μg。
6.根据权利要求1所述的一种负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料的制备方法，其特征在于，丝胶水凝胶和光引发剂的质量比为0.1-0.15：0.01-0.015。
7.根据权利要求1所述的一种负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料的制备方法，其特征在于，光固化反应是在紫外光下照射1-3min。
8.根据权利要求1所述的一种负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料的制备方法，其特征在于，光引发剂为i2959。
9.一种权利要求1-8任一项所述制备方法制备得到的负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料。
10.一种权利要求9所述的负载二甲基乙二酰氨基乙酸复合敷料在用于制备损伤修复材料中的应用。
