本发明涉及医药。更具体地说,本发明涉及一种基于内侧隔核-海马ca3区胆碱能神经环路调控构建微波辐射动物脑损伤模型的方法。
背景技术:
1、流行病学研究表明,长期暴露于微波辐射中可导致头痛、失眠多梦、脑电波异常、神经衰弱、记忆力减退/丧失、注意力不集中和睡眠障碍等;啮齿类动物实验研究表明,暴露于一定条件的电磁波辐射可造成其记忆能力(包括运动性记忆、短时记忆、长时记忆等)下降,并伴随兴奋、焦虑等神经行为异常。以上研究提示,大脑是对微波辐射较为敏感的重要靶部位。
2、海马体(hippocampus,hpc)参与学习、记忆、认知及情绪等过程,在记忆定向、转换和存储等功能中扮演着重要的角色,是大脑中执行学习和记忆任务的主要神经中枢;内侧隔核(medial septum,ms)作为hpc theta节律的起搏器,ms胆碱能神经纤维经海马伞、背侧穹窿和杏仁复合体投射到达海马区同位皮质靶点,以及内嗅区、扣带区、脾后区和丘脑下部皮质。ms通过对hpc的胆碱能输入,参与对机体情绪和认知的调控。因而,ms-hpc胆碱能神经环路在情绪和认知行为中可能发挥重要调节作用。
3、由于电磁辐射脑损伤效应的分子机理尚未阐明,关于电磁辐射作用敏感的靶细胞类型及其分子靶标亦未明确,迄今缺乏良好的构建电磁辐射脑损伤动物模型的方法,以致相关防治药物措施缺乏,因此亟需设计一种能够一定程度克服上述缺陷的技术方案。
技术实现思路
1、本发明的一个目的是提供一种基于内侧隔核-海马ca3区胆碱能神经环路调控构建微波辐射动物脑损伤模型的方法,能够准确构建电磁辐射动物脑损伤模型,为阐明电磁辐射脑损伤效应的分子机理及其防治药物研发增加了可能性。
2、为了实现根据本发明的这些目的和其它优点,本发明提供了基于内侧隔核-海马ca3区胆碱能神经环路调控构建微波辐射动物脑损伤模型的方法,包括:设定电磁辐射条件,对试验动物进行电磁辐射处理;比较电磁辐射处理前后内侧隔核与海马ca3区之间的胆碱能神经环路是否激活,若激活,则利用所述电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型。
3、进一步地,采用带有荧光蛋白的顺行跨突触嗜神经病毒于试验动物内侧隔核脑区定位注射,以及采用带有荧光蛋白的逆行不跨突触嗜神经病毒于试验动物海马ca3区定位注射;根据内侧隔核脑区和海马ca3区的荧光信号统计内侧隔核脑区投射至海马ca3区的胆碱能神经纤维以及由海马ca3区逆行投射至内侧隔核脑区的神经纤维,若电磁辐射处理前后,神经纤维的投射量具有统计学意义,则判断所述胆碱能神经环路激活。
4、进一步地,还包括:比较电磁辐射处理前后海马ca3区的神经元动作电位发放及能量振荡,若电位发放减少及能量振荡下降具有统计学意义,则利用所述电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型。
5、进一步地,还包括:利用光遗传系统抑制内侧隔核脑区胆碱能神经元,并比较电磁辐射处理前后海马ca3区的神经元动作电位发放及能量振荡,若电位发放增加及能量振荡升高具有统计学意义,则利用所述电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型。
6、进一步地,还包括:对试验动物进行条件恐惧记忆测试以及恐惧条件记忆再现测试,比较电磁辐射处理前后试验动物的凝滞时间百分比,若凝滞时间百分比的降低具有统计学意义,则利用所述电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型。
7、进一步地,还包括:利用光遗传系统激活内侧隔核脑区胆碱能神经元,并对试验动物进行条件恐惧记忆行为学实验,比较内侧隔核脑区胆碱能神经元光遗传激活和不激活,对电磁辐射处理后试验动物凝滞时间百分比的影响,若凝滞时间百分比的降低具有统计学意义,则利用所述电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型。
8、进一步地,还包括:利用化学遗传技术抑制内侧隔核脑区胆碱能神经元,并对试验动物进行条件恐惧记忆行为学实验,若内侧隔核脑区胆碱能神经元抑制,对电磁辐射前后试验动物凝滞时间百分比的升高具有统计学意义,则利用所述电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型。
9、进一步地,所述电磁辐射条件至少包括中心频率、功率密度、重复频率、脉冲宽度、比吸收率、辐射时间。
10、本发明至少包括以下有益效果:
11、本发明对试验动物进行电磁辐射,并通过比较电磁辐射处理前后内侧隔核与海马ca3区之间的胆碱能神经环路是否激活,若激活,则利用电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型,本发明能够帮助阐明电磁辐射脑损伤的分子机理,为探寻微波辐射致脑损伤的生物学靶点和脑损伤防治提供了新思路。
12、本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
1.基于内侧隔核-海马ca3区胆碱能神经环路调控构建微波辐射动物脑损伤模型的方法,其特征在于,包括:
2.如权利要求1所述的基于内侧隔核-海马ca3区胆碱能神经环路调控构建微波辐射动物脑损伤模型的方法,其特征在于,采用带有荧光蛋白的顺行跨突触嗜神经病毒于试验动物内侧隔核脑区定位注射,以及采用带有荧光蛋白的逆行不跨突触嗜神经病毒于试验动物海马ca3区定位注射;
3.如权利要求1所述的基于内侧隔核-海马ca3区胆碱能神经环路调控构建微波辐射动物脑损伤模型的方法,其特征在于,还包括:
4.如权利要求3所述的基于内侧隔核-海马ca3区胆碱能神经环路调控构建微波辐射动物脑损伤模型的方法,其特征在于,还包括:
5.如权利要求1所述的基于内侧隔核-海马ca3区胆碱能神经环路调控构建微波辐射动物脑损伤模型的方法,其特征在于,还包括:
6.如权利要求5所述的基于内侧隔核-海马ca3区胆碱能神经环路调控构建微波辐射动物脑损伤模型的方法,其特征在于,还包括:
7.如权利要求5所述的基于内侧隔核-海马ca3区胆碱能神经环路调控构建微波辐射动物脑损伤模型的方法,其特征在于,还包括:
8.如权利要求1所述的基于内侧隔核-海马ca3区胆碱能神经环路调控构建微波辐射动物脑损伤模型的方法,其特征在于,所述电磁辐射条件至少包括中心频率、功率密度、重复频率、脉冲宽度、比吸收率、辐射时间。
