一种普瑞巴林的制备方法与流程

本发明涉及药物合成领域，尤其是涉及一种普瑞巴林的制备方法。

背景技术：

1、普瑞巴林(pregabalin)，化学名称(s)-3-氨甲基-5-甲基己酸，分子式为c8h17no2。普瑞巴林是由美国pfizer公司开发的一种新型的γ-氨基丁酸受体激动剂，能阻断电压依赖性钙通道，减少神经递质的释放，主要用于治疗外周神经痛和辅助性治疗局部性癫痫发作。

2、普瑞巴林的合成方法在org process res dev 1997,1,26，med res dev,1999,19,149，w09638405，w09640617等文献和专利中有报道。归纳起来主要分四大类：化学拆分法、不对称合成法、酶法和手性源法。这些合成方法或步骤繁杂，或反应条件苛刻，且普遍存在环境污染问题，很大程度上制约了工业化应用。据此需要一种理想的解决方法。

技术实现思路

1、本发明为了克服普瑞巴林合成步骤繁杂的问题，提供一种普瑞巴林的制备方法，用水解酶将3-氰基-5-甲基己腈选择性水解得到(s)-3-氰基-5-甲基己酸，再经过催化加氢、结晶纯化即可得到普瑞巴林，步骤简单、效率高。

2、为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

3、一种普瑞巴林的制备方法，包括以下步骤：

4、(1)3-氰基-5-甲基己腈在水解酶作用下水解反应得到反应液，反应液萃取取有机相，浓缩得到(s)-3-氰基-5-甲基己酸；

5、(2)所述(s)-3-氰基-5-甲基己酸催化加氢生成普瑞巴林粗品；

6、(3)粗品结晶纯化得到普瑞巴林成品；结晶溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的一种或两种和水的混合溶剂。

7、作为优选，水解酶为含腈水解酶基因的工程菌(优选e.coli(de3)/pet28b)。腈水解酶选自芜菁腈水解酶brnit、高山拟南芥腈水解酶aanit、拟南芥腈水解酶atnit；腈水解酶的形态是经过分离纯化得到的粗酶液或湿细胞，或者经过喷雾干燥或冷冻干燥得到的酶粉。

8、作为优选，水解酶的ph范围为5-10。缓冲液为：醋酸缓冲液(ph5.0-6.0)、磷酸钠缓冲液(ph6.0-7.2)、tris-hcl缓冲液(ph7.0-9.0)和cly-naoh缓冲液(ph9.0-10.0)、碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化镁。更为优选，缓冲液优选tris-hcl缓冲液、氢氧化钠或碳酸钠。

9、作为优选，水解酶用量为1-20g/l，底物浓度为100-240g/l。更为优选，腈水解酶用量为5-15g/l，底物浓度为120-220g/l。

10、作为优选，水解酶的反应温度20-40℃，搅拌速度100-500r/min，反应时间6-24h。更为优选，反应温度24-30℃，反应转速200-400r/min，反应时间6-16h。

11、作为优选，步骤(1)中反应液的萃取方法为：将反应液升温至70-80℃搅拌1-2h，过滤，滤液加入乙酸乙酯萃取，静置分层，有机相浓缩得到r-3-氰基-5-甲基己腈，水相浓缩得到s-3-氰基-5-甲基己酸。

12、作为优选，所述r-3-氰基-5-甲基己腈消旋回收3-氰基-5-甲基己腈；消旋回收的反应条件为：25-40℃，0.5-4h。

13、作为优选，催化加氢的催化剂为雷尼镍，催化剂的用量为原料重量的0.05-0.40倍。

14、作为优选，催化加氢的反应温度25-60℃，反应压力1-6mpa，反应时间2-10h。

15、作为优选，混合溶剂为甲醇、异丙醇和水，其中，甲醇、异丙醇的体积比为(5-8):1，水的体积分数为40-50％。

16、因此，本发明的有益效果为：(1)用水解酶将3-氰基-5-甲基己腈选择性水解得到(s)-3-氰基-5-甲基己酸，再经过催化加氢、结晶纯化即可得到普瑞巴林，步骤简单、效率高；(2)通过筛选合适的结晶溶剂，提高普瑞巴林的纯度。

技术特征：

1.一种普瑞巴林的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种普瑞巴林的制备方法，其特征在于，水解酶为含腈水解酶基因的工程菌，腈水解酶选自芜菁腈水解酶brnit、高山拟南芥腈水解酶aanit、拟南芥腈水解酶atnit中的一种。

3.根据权利要求1或2所述的一种普瑞巴林的制备方法，其特征在于，水解酶的ph范围为5-10。

4.根据权利要求1所述的一种普瑞巴林的制备方法，其特征在于，水解酶用量为1-20g/l，底物浓度为100-240 g/l。

5.根据权利要求1或4所述的一种普瑞巴林的制备方法，其特征在于，水解酶的反应温度20-40 oc，搅拌速度100-500 r/min，反应时间6-24 h。

6.根据权利要求1所述的一种普瑞巴林的制备方法，其特征在于，步骤（1）中反应液的萃取方法为：将反应液升温至70-80 oc搅拌1-2 h，过滤，滤液加入乙酸乙酯萃取，静置分层，有机相浓缩得到r-3-氰基-5-甲基己腈，水相浓缩得到(s)-3-氰基-5-甲基己酸。

7.根据权利要求6所述的一种普瑞巴林的制备方法，其特征在于，所述r-3-氰基-5-甲基己腈消旋回收3-氰基-5-甲基己腈；消旋回收的反应条件为：25-40 ℃，0.5-4 h。

8.根据权利要求1所述的一种普瑞巴林的制备方法，其特征在于，步骤（3）催化加氢的催化剂为雷尼镍，催化剂的用量为原料重量的0.05-0.40倍。

9.根据权利要求1或8所述的一种普瑞巴林的制备方法，其特征在于，步骤（3）催化加氢的反应温度25-60 ℃，反应压力1-6 mpa，反应时间2-10 h。

10.根据权利要求1所述的一种普瑞巴林的制备方法，其特征在于，步骤（3）混合溶剂为甲醇、异丙醇和水，其中，甲醇、异丙醇的体积比为(5-8):1，水的体积分数为40-50%。

技术总结
本发明涉及药物合成领域，针对普瑞巴林合成步骤繁杂的问题，提供一种普瑞巴林的制备方法，包括以下步骤：（1）3‑氰基‑5‑甲基己腈在水解酶作用下水解反应得到反应液，反应液萃取取有机相，浓缩得到(S)‑3‑氰基‑5‑甲基己酸；（2）所述(S)‑3‑氰基‑5‑甲基己酸催化加氢生成普瑞巴林粗品；（3）粗品结晶纯化得到普瑞巴林成品；结晶溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的一种或两种和水的混合溶剂。本发明用水解酶将3‑氰基‑5‑甲基己腈选择性水解得到(S)‑3‑氰基‑5‑甲基己酸，再经过催化加氢、结晶纯化即可得到普瑞巴林，步骤简单、效率高。

技术研发人员：庄程翰,刘击,赫亚征,陈昌赟,叶素斌,刘永权
受保护的技术使用者：浙江普洛家园药业有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23