一种促进骨折愈合的新型组合物制备方法

本发明涉及医药，具体涉及一种促进骨折愈合的新型组合物制备方法。

背景技术：

1、骨质疏松性骨折的治疗具有挑战性，因为周围骨强度下降，愈合能力不佳，容易发生固定失败和骨不连。植骨被广泛用于修复受伤、衰老或患病的骨骼组织。植骨旨在通过损伤部位的成骨(骨生成)促进骨愈合，但只有当增强物包括能够形成骨的细胞时才能实现。自体骨移植是最安全、最有效的移植方法，因为它含有患者自身的骨生长细胞(增强成骨)和蛋白质(增强成骨诱导)，同时为新骨生长(骨传导)提供框架。然而，自体骨移植物的数量有限，其采集(例如从髂骨)需要额外的手术干预，通常会导致疼痛和并发症。另一个解决方案是直接选用来自组织库(新鲜冷冻)或准备保存(干燥或冻干)的同种异体骨移植。这种溶液不含活细胞，一些基质蛋白会被在冷冻过程中被病毒灭活处理和破坏。因此，它只能保证骨传导性能。此外，同种异体移植物骨还可能传播疾病或导致免疫排斥。

2、除了骨移植物、替代物及其与生长因子合成代谢策略外，已有研究提出使用更加安全有效的细胞疗法作为新的成骨诱导和成骨解决方案。间充质干细胞(mesenchymalstem cells，mscs)是非造血基质干细胞，来源广泛，如骨髓、骨膜、脂肪、肌肉、外周循环、脐带血、皮肤和牙齿组织等。它们能够自我复制，分化为间充质组织，如骨、软骨、韧带、肌腱、肌肉和脂肪组织，并促进其再生。骨髓间充质干细胞是目前最适合诱导骨修复的细胞，因为它们有很强的成骨潜力。促进患者骨折愈合的骨髓间充质干细胞浓度平均为1500mscs/ml，总量为54,000mscs。

3、然而，通过培养骨(如髂骨)吸入物获得的骨髓间充质干细胞数量(msc浓度)有限，其获取需要额外的手术干预，经常导致疼痛和并发症的发生。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了解决上述问题，提供一种促进骨折愈合的新型组合物制备方法。

2、为了达到上述目的，本发明的技术方案如下：

3、本发明提供了一种促进骨折愈合的新型组合物制备方法，包括以下步骤：

4、步骤s1、自体脂肪干细胞的提取：从雌性大鼠腹股沟皮下白色脂肪组织中提取脂肪干细胞；

5、步骤s2、脂肪干细胞的培养：在37℃、5％co2情况下，将提取出的脂肪干细胞放在培养基中培养，向培养基中添加10％胎牛血清、1％青霉素和链霉素形成生长培养基，培养至融合度80％～90％；

6、步骤s3、制作成骨培养基：向生长培养基中添加20mmβ-甘油磷酸、50mm抗坏血酸和1nm地塞米松；

7、步骤s4、向成骨培养基中添加外源性神经肽y。

8、与现有技术相比，本方案的有益效果：adscs可从自体皮下脂肪组织中获得，具有成骨潜能，来源广泛，可满足骨质疏松性骨折愈合所需的足够msc浓度，npy在调节骨骼稳态中发挥重要作用，可通过调节adscs的成骨分化促进骨质疏松性骨折的愈合。

技术特征：

1.一种促进骨折愈合的新型组合物制备方法，其特征是，包括以下步骤：

技术总结
本发明公开了一种促进骨折愈合的新型组合物制备方法，涉及医药技术领域，其技术要点为：步骤S1、自体脂肪干细胞的提取：从雌性大鼠腹股沟皮下白色脂肪组织中提取脂肪干细胞；步骤S2、脂肪干细胞的培养：在37℃、5％CO<subgt;2</subgt;情况下，将提取出的脂肪干细胞放在培养基中培养，向培养基中添加10％胎牛血清、1％青霉素和链霉素形成生长培养基，培养至融合度80％～90％；步骤S3、制作成骨培养基：向生长培养基中添加20mMβ‑甘油磷酸、50mM抗坏血酸和1nM地塞米松；步骤S4、向成骨培养基中添加外源性神经肽Y。具有促进骨质疏松性骨折愈合的效果。

技术研发人员：刘敏,刘红,周后德,吴卉萱,王婷,吴骄阳,王萌,冯果,唐辰义,罗寓方,吴锦如
受保护的技术使用者：中南大学湘雅三医院
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23