一种防治烟草白粉病的菌剂及制备方法和应用与流程
本发明属于植物病菌防治，具体涉及一种防治烟草白粉病的菌剂及制备方法和应用。
背景技术：
1、烟草(nicotiana tabacum)属于茄科，一年生草本植物，起源于热带和亚热带美洲，是生物碱尼古丁的丰富来源，长期作为草药和社会兴奋剂使用。
2、烟草白粉病是烟草上的常见真菌性病害之一，是由子囊菌亚门单囊壳属真菌侵染引起的真菌病害。白粉病病菌多为外寄生性，菌丝体全部或大部暴露在寄主植物的表面，初发病时先在叶片上产生近圆形粉状白霜，后融合成粉状斑，严重时病斑布满叶片，致叶片干枯或脱落，叶片组织坏死，丧失经济价值。烟草白粉病在适宜温度条件下，很容易暴发流行，随着空气相对湿度的增高发病速度加快，空气相对湿度越高发病越重，且发病的空气相对湿度范围宽。
3、对于烟草白粉病防治主要有以下方法：(1)在发病的初期，烟农为了减少损失，将下部侵染白粉病的未成熟叶提前采烤，大大减少了田间传染病源，对降低病情上升率有很好抑制作用，但该方法主要依靠及时发现和人工采摘进行，因此需要投入大量的时间和人力；(2)发病初期，通过采摘底脚叶增加田间通风透光、降低湿度，再结合叶面喷施36％甲基硫菌灵悬浮剂400～500倍液、4％农抗120水剂10000倍液、70％甲基托布津可湿性粉剂500～800倍液、或15％的粉锈宁可湿粉剂500倍液、20％粉锈宁可湿粉剂1000～1500倍液等。然而，化学药剂的长期使用不仅会增强病原菌抗性，导致农药残留增加，影响吸烟者安全，还会对生态环境造成污染与破坏。
技术实现思路
1、本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中长期使用化学药剂对导致农药残留增加的缺陷，提供一种防治烟草白粉病的菌剂及制备方法和应用。
2、为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案进行。
3、本发明的第一方面提供一种复合微生物菌剂，该微生物菌剂的有效成分为解淀粉芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌和马来西亚链霉菌的发酵液按照体积比5-7:4-7:2-5:2-3混合制备而成。
4、本发明的一些实施方式中，将所述解淀粉芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌和马来西亚链霉菌经活化后，接入种子培养基，进行种子液培养，之后将种子液接种于发酵培养基中，进行发酵培养，以获得所述解淀粉芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌和马来西亚链霉菌的发酵液。
5、本发明的一些实施方式中，活化包括将所述解淀粉芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌和马来西亚链霉菌接种于pda固体培养基上进行。
6、本发明的一些实施方式中，所述种子培养基包括：蛋白胨8-12g/l，酵母提取粉2-3g/l，氯化钠8-12g/l。
7、本发明的一些实施方式中，种子液培养的条件为：在28-30℃下，于160-200pm/min条件下培养12-36h，得到种子液。
8、本发明的一些实施方式中，所述种子液与发酵培养基的体积比为1:100-140。
9、本发明的一些实施方式中，所述复合微生物菌剂的制备方法包括：分别将所述解淀粉芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌和马来西亚链霉菌接种于发酵培养基中，培养20-28h，制得各菌株的发酵液；将各菌株的发酵液混合，制得复合微生物菌剂。
10、本发明的一些实施方式中，所述发酵培养基包括以下原料：黄豆饼粉12-18g/l、蔗糖1-3g/l、蛋白胨2-4g/l、玉米粉8-12g/l、碳酸钙0.8-1.2g/l、鱼粉5-9g/l、硫酸铵0.02-0.07g/l、硫酸镁0.02-0.06g/l、磷酸二氢钾0.01-0.05g/l、磷酸氢二钾0.02-0.06g/l、氯化钠0.8-1.2g/l、消泡剂0.8-1.2g/l。
11、本发明的一些实施方式中，培养的温度为28-30℃。
12、本发明的一些实施方式中，培养在转速为200-220r/min条件下进行。
13、本发明的一些实施方式中，所述发酵液中有效活菌的数量在在2.0×108cfu/g以上。
14、本发明的第二方面提供所述的复合微生物制剂在防治烟草白粉病中的应用。
15、本发明的第三方面提供一种防治烟草白粉病的方法，将所述复合微生物制剂施用于烟草叶片，用于防治烟草白粉病。
16、本发明的一些实施方式中，将所述复合微生物菌剂稀释300-600倍后施用于烟草叶片上。
17、本发明的一些实施方式中，所述复合微生物菌剂连续施药2-3次，所述施用的方法为每次施用间隔10-12天。
18、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：本发明中提供了一种复合微生物菌剂，其包括解淀粉芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌和马来西亚链霉菌的发酵液。该菌剂能够对烟草的白粉病进行有效的防治，其防治效率最高达到了87.93％。
19、本发明还提供了还提供了一种白粉病的防治方法，将该菌剂施用于烟草叶片上，结果发现，该菌剂在烟草白粉病的防治上较好的防治作用，为烟草白粉病的防治提供了新的思路。该方法能够有效减少化学农药的使用，同时还有利于生态环境的保护。
20、本发明中还对复合微生物菌剂中各微生物的发酵液添加量进行的摸索，从而确认出了一种效果更加的白粉病防治菌剂。
技术特征：
1.一种复合微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂的有效成分为解淀粉芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌和马来西亚链霉菌的发酵液按照体积比5-7:4-7:2-5:2-3混合制备而成。
2.如权利要求1所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂的制备方法包括：分别将所述解淀粉芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌和马来西亚链霉菌接种于发酵培养基中，培养20-28h，制得各菌株的发酵液；将各菌株的发酵液混合，制得复合微生物菌剂。
3.如权利要求2所述的复合微生物菌剂，其特征在于，培养的温度为28-30℃。
4.如权利要求2所述的复合微生物菌剂，其特征在于，培养在转速为200-220r/min条件下进行。
5.如权利要求1所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述发酵液中有效活菌的数量在2.0×108cfu/g以上。
6.如权利要求1所述的复合微生物制剂在防治烟草白粉病中的应用。
7.一种防治烟草白粉病的应用，其特征在于，将权利要求1-5任一项所述复合微生物制剂施用于烟草叶片，用于防治烟草白粉病。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，将所述复合微生物菌剂稀释300-700倍后施用于烟草叶片上。
9.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述复合微生物菌剂连续施药2-3次，所述施用的方法为每次施用间隔10-12天。
技术总结
本发明属于植物病菌防治技术领域，具体涉及一种防治烟草白粉病的菌剂及制备方法和应用。本发明公开了一种复合微生物菌剂，该微生物菌剂的有效成分为解淀粉芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌和马来西亚链霉菌。本发明还公开了一种防治烟草白粉病的方法，包括将解淀粉芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌、枯草芽孢杆菌和马来西亚链霉菌的发酵液按照体积比5‑7:4‑7:2‑5:2‑3混合制备为复合微生物菌剂，将其施用在烟草叶片上，结果发现，该复合菌剂在烟草白粉病的防治上较好的防治作用，为烟草白粉病的防治提供了新的思路。
技术研发人员：胡刚,齐琳,李斌,王飞,刘东阳,徐传涛,江连强,鄢敏,张宗锦,顾会战
受保护的技术使用者：中国烟草总公司四川省公司
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23