一种柑橘中抑芽丹残留的测定方法与流程
本发明属于柑橘农药残留，具体涉及一种柑橘中抑芽丹残留的测定方法。
背景技术：
1、抑芽丹又名马来酰肼，化学名为顺丁烯二酰肼，是一种植物生长调节剂和选择性除草剂。有研究发现，抑芽丹是一种诱变致癌剂，其在一定剂量下会导致细胞染色体断裂，从而产生细胞毒性，因此抑芽丹残留量日益收到关注，各国对抑芽丹在不同作物中的最大残留限量也有相应的规定。
2、抑芽丹残留量的分析方法有很多：蒸馏分光光度法、高效液相色谱-紫外检测法、高效液相色谱-质谱法、气相色谱法、毛细管电泳法、流动注射法、脉冲伏安法及酶联免疫法等。在现有技术中，cn109142591a的专利公开了一种烟草中残留抑芽丹的水热提取方法及液相色谱串联质谱测定方法；cn105823872a的专利公开了一种用于检测抑芽丹的酶联免疫试剂盒，其特别适用于烟草、鲜烟叶及瓜果蔬菜中抑芽丹残留量的检测。然而，还未见到适用于柑橘中抑芽丹残留量的检测方法。
3、发明人通过对仪器及条件进行优化，探索并建立了柑橘全果、柑橘果浆、柑橘汁、柑橘浓缩汁、柑橘果渣、柑橘精油及水样等不同基质中抑芽丹的分析方法，可为柑橘中抑芽丹残留量的分析检测提供参考与借鉴，同时也可为标准分析方法的制定提供技术支撑。
4、公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种柑橘中抑芽丹残留的测定方法。
2、为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：
3、一种柑橘中抑芽丹残留的测定方法，包括以下步骤：
4、s1.分别配制抑芽丹的标准溶液和待测柑橘样品溶液；
5、s2.采用高效液相色谱-质谱法测定，其中，色谱条件和质谱条件分别如下：
6、色谱柱：月旭boltimate hilic，150*2.1mm，2.7μm；柱温箱温度：40℃；流动相a：0.1％甲酸水；流动相b：乙腈；流速：0.300ml/min；洗脱方式：梯度洗脱；
7、样品冷却器温度：8℃；进样量：6μl；离子源类型：esi(-)；扫描模式：mrm；碰撞气cad：9psi；气帘气cur：30psi；鞘气gs1：55psi；辅助加热气gs2：55psi；离子喷雾电压is：-4500v；离子源温度：550℃；
8、s3.建立标准曲线，求出待测柑橘样品中抑芽丹的含量。
9、作为优选，s1中，抑芽丹标准溶液的配制方法为：准确称取0.01110g抑芽丹标准品至10ml容量瓶，加入少量甲醇溶解，待固体标准品全部溶解后定容，得到质量浓度为1.11×103mg/l的抑芽丹标准溶液。
10、作为优选，s1中，待测柑橘样品溶液包括柑橘全果、柑橘果浆、柑橘汁、柑橘浓缩汁、柑橘果渣、柑橘精油及水样。
11、作为优选，所述柑橘全果、柑橘果浆、柑橘汁、柑橘浓缩汁、柑橘果渣及水样溶液的配制方法为：
12、(1)提取：称取5g样品于50ml聚四氟乙烯管中，加入10ml浓度为4mol/l的盐酸溶液，三粒沸石，轻度振荡混匀，再用10ml浓度为4mol/l的盐酸溶液冲洗管壁；用记号笔于管外标记液面，置于电热鼓风干燥箱中加热；待加热完毕，将聚四氟乙烯管取出，冷却至室温，根据标记线将管内溶液用4mol/l盐酸定容至25ml，然后过滤到50ml离心管中，得到提取液；
13、(2)净化：加入2ml分析纯甲醇和2ml浓度为4mol/l盐酸溶液，活化规格为500mg，6ml的c18固相萃取柱，自然流干；准确移取2ml上述提取液至c18固相萃取柱中；用4ml浓度为0.1mol/l的盐酸溶液淋洗c18固相萃取柱，抽干c18固相萃取柱，弃去流出液；用2ml体积为1：4的乙腈-10mmol/l乙酸铵水溶液混合溶剂洗脱c18固相萃取柱，收集洗脱液；过0.22μm有机滤膜，收集滤液即可。
14、作为优选，所述柑橘精油溶液的配制方法为：
15、(1)提取：称取1g样品于50ml聚四氟乙烯管中，加入10ml浓度为4mol/l的盐酸溶液，三粒沸石，轻度振荡混匀，再用10ml浓度为4mol/l的盐酸溶液冲洗管壁；用记号笔于管外标记液面，置于电热鼓风干燥箱中加热；待加热完毕，将聚四氟乙烯管取出，冷却至室温，根据标记线将管内溶液用4mol/l盐酸定容至20ml，然后过滤到50ml离心管中，得到提取液；
16、(2)净化：加入2ml分析纯甲醇和2ml浓度为4mol/l盐酸溶液，活化规格为500mg，6ml的c18固相萃取柱，自然流干；准确移取2ml上述提取液至c18固相萃取柱中；用4ml浓度为0.1mol/l的盐酸溶液淋洗c18固相萃取柱，抽干c18固相萃取柱，弃去流出液；用2ml体积为1：4的乙腈-10mmol/l乙酸铵水溶液混合溶剂洗脱c18固相萃取柱，收集洗脱液；过0.22μm有机滤膜，收集滤液即可。
17、作为优选，所述电热鼓风干燥箱工作参数为：120℃，60min；140℃，30min；150℃，30min。
18、作为优选，s2中，流动相比例为：0min，20％流动相a，80流动相b；0.5min，20％流动相a，80流动相b；1.0min，70％流动相a，30流动相b；2.0min，70％流动相a，30流动相b；2.1min，20％流动相a，80流动相b；3.0min，20％流动相a，80流动相b。
19、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
20、本发明通过对仪器及条件进行优化，探索并建立了柑橘全果、柑橘果浆、柑橘汁、柑橘浓缩汁、柑橘果渣、柑橘精油及水样等不同基质中抑芽丹的分析方法；本发明的检测方法在定量限、回收率、正确度、精密度及相对标准偏差方面均能满足农药残留分析定量要求，可为柑橘中抑芽丹残留量的分析检测提供参考与借鉴，同时也可为标准分析方法的制定提供技术支撑。
技术特征：
1.一种柑橘中抑芽丹残留的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的柑橘中抑芽丹残留的测定方法，其特征在于，s1中，抑芽丹标准溶液的配制方法为：准确称取0.01110g抑芽丹标准品至10ml容量瓶，加入少量甲醇溶解，待固体标准品全部溶解后定容，得到质量浓度为1.11×103mg/l的抑芽丹标准溶液。
3.根据权利要求1所述的柑橘中抑芽丹残留的测定方法，其特征在于，s1中，待测柑橘样品溶液包括柑橘全果、柑橘果浆、柑橘汁、柑橘浓缩汁、柑橘果渣、柑橘精油及水样。
4.根据权利要求3所述的柑橘中抑芽丹残留的测定方法，其特征在于，所述柑橘全果、柑橘果浆、柑橘汁、柑橘浓缩汁、柑橘果渣及水样溶液的配制方法为：
5.根据权利要求3所述的柑橘中抑芽丹残留的测定方法，其特征在于，所述柑橘精油溶液的配制方法为：
6.根据权利要求4或5所述的柑橘中抑芽丹残留的测定方法，其特征在于，所述电热鼓风干燥箱工作参数为：120℃，60min；140℃，30min；150℃，30min。
7.根据权利要求4或5所述的柑橘中抑芽丹残留的测定方法，其特征在于，s2中，流动相比例为：0min，20％流动相a，80流动相b；0.5min，20％流动相a，80流动相b；1.0min，70％流动相a，30流动相b；2.0min，70％流动相a，30流动相b；2.1min，20％流动相a，80流动相b；3.0min，20％流动相a，80流动相b。
技术总结
本发明属于柑橘农药残留检测技术领域，具体涉及一种柑橘中抑芽丹残留的测定方法，包括以下步骤：S1.分别配制抑芽丹的标准溶液和待测柑橘样品溶液；S2.采用高效液相色谱‑质谱法测定；S3.建立标准曲线，求出待测柑橘样品中抑芽丹的含量。本发明通过对仪器及条件进行优化，探索并建立了柑橘全果、柑橘果浆、柑橘汁、柑橘浓缩汁、柑橘果渣、柑橘精油及水样等不同基质中抑芽丹的分析方法；本发明的检测方法在定量限、回收率、正确度、精密度及相对标准偏差方面均能满足农药残留分析定量要求，可为柑橘中抑芽丹残留量的分析检测提供参考与借鉴，同时也可为标准分析方法的制定提供技术支撑。
技术研发人员：黄树肖,何明远,计桂芳,崔少青,吕宇虹,韦泽林,李赵莲,谭贤勇
受保护的技术使用者：广西思浦林科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23