以MMP9+中性粒细胞亚群作为靶点在制备治疗各种缺血再灌注损伤药物中的应用
本申请涉及生物医药领域，更具体地说，它涉及以mmp9+中性粒细胞亚群作为靶点在制备治疗各种缺血/再灌注损伤药物中的应用。
背景技术：
1、心肌梗死(mi)是冠心病患者死亡的主要原因。早期治疗如经皮冠状动脉介入治疗、冠状动脉搭桥术和药物可以恢复血液供应，挽救心肌，降低死亡率。然而，冠状动脉闭塞后血流的快速恢复会导致心肌缺血/再灌注损伤，进一步加剧心肌损伤和功能障碍。类似地，在感染或各种外科手术的条件下，肾、肝、肺和脑也会发生再灌注损伤。中性粒细胞是在缺血/再灌注损伤期间，特别是在其早期，渗透到炎症部位的主要白细胞。它们主要通过形成中性粒细胞外陷阱(nets)来显著放大炎症级联反应。nets是由dna、组蛋白和各种颗粒蛋白组成的网状结构，由特定的中性粒细胞亚群释放，在炎症和组织损伤中发挥关键作用。在体外，nets的形成通常是在初始刺激后数小时发生的细胞死亡事件，但体内nets形成的确切机制和意义仍在研究中。了解中性粒细胞在各种缺血/再灌注损伤中形成nets的作用，可以对减轻心肌损伤的病理过程和潜在治疗靶点产生新的见解。
2、中性粒细胞由于在分化、成熟和迁移中获得的异质性，在组织损伤和愈合中表现出多方面的作用。非特异性的中性粒细胞治疗，如非甾体抗炎药、中性粒细胞耗竭以及内皮和中性粒细胞粘附抑制剂，由于中性粒细胞的愈合功能(如促进血管生成)的耗竭，没有取得良好的效果。因此，识别特定的中性粒细胞亚群，特别是那些参与nets形成的亚群，并进行干预，对于推进各种缺血/再灌注损伤治疗和理解至关重要。
技术实现思路
1、本申请的目的在于提供nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群作为各种缺血/再灌注损伤，包括心肌、肾脏、肝脏、肺脏和脑缺血/再灌注损伤的治疗靶点及应用。
2、本发明定义了一个特定的mmp9+中性粒细胞亚群。在人血样本中，所述nets前体mmp9+中性粒细胞亚群指的是：含有表面分子cd45、cd66b、cd16，以及含有内分子mmp9的细胞组成的中性粒细胞亚群；在小鼠血样本及心脏样本中，所述nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群指的是：含有表面分子cd45、cd11b、ly6g，以及含有内分子mmp9的细胞组成的中性粒细胞亚群。所述mmp9+中性粒细胞亚群与nets生成相关。
3、第一方面，本申请公开以nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群作为靶点在制备治疗各种缺血/再灌注损伤药物中的应用。
4、第二方面，本申请公开抑制如第一方面中所述的nets前体mmp9+中性粒细胞亚群生成的物质在制备治疗各种缺血/再灌注损伤药物中的应用。
5、进一步地，所述抑制nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群生成的物质包括proteinarginine deiminase 4(pad4)抑制剂，包括小分子抑制剂，抗体抑制剂，sirna inhibitor和基因编辑与敲除。
6、进一步地，所述抑制nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群生成的物质包括proteinarginine deiminase 4(pad4)抑制剂gsk484；gsk484通过抑制mmp9+中性粒细胞的marker基因padi4，降低中性粒细胞中mmp9+细胞亚群的比例和nets形成，改善缺血/再灌注损伤。
7、进一步地，所述抑制nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群生成的物质包括spi1/transcription factor pu.1抑制剂，包括小分子抑制剂，抗体抑制剂，sirna inhibitor和基因编辑与敲除。
8、进一步地，所述抑制nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群生成的物质包括spi1/transcription factor pu.1抑制剂db2313。
9、进一步地，所述db2313通过抑制mmp9+中性粒细胞生成的重要转录因子spi1，降低中性粒细胞中mmp9+细胞亚群的比例和nets形成，改善缺血/再灌注损伤。
10、进一步地，所述抑制nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群生成的物质包括cystatin-f(cst7)抑制剂，包括小分子抑制剂，抗体抑制剂，sirna inhibitor和基因编辑与敲除。
11、综上所述，与现有技术相比，本申请的有益效果在于：本申请提供了一个更加精确的中性粒细胞亚群以及其干预方式，从而更精确地对各种缺血/再灌注损伤进行治疗，对于临床治疗有重要意义。
技术特征：
1.以nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群作为靶点在制备治疗各种缺血/再灌注损伤药物中的应用；
2.抑制如权利要求1所述的nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群生成的物质在制备治疗各种缺血/再灌注损伤药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述抑制nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群生成的物质包括protein arginine deiminase 4(pad4)抑制剂，包括小分子抑制剂，抗体抑制剂，sirna inhibitor和基因编辑与敲除。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抑制nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群生成的物质包括protein arginine deiminase 4(pad4)抑制剂gsk484；所述gsk484通过抑制mmp9+中性粒细胞的marker基因padi4，降低中性粒细胞中mmp9+细胞亚群的比例和nets形成，改善缺血/再灌注损伤。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述抑制nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群生成的物质包括spi1/transcription factor pu.1抑制剂，包括小分子抑制剂，抗体抑制剂，sirnainhibitor和基因编辑与敲除。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述抑制nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群生成的物质包括spi1/transcription factor pu.1抑制剂db2313；所述db2313通过抑制mmp9+中性粒细胞生成的重要转录因子spi1，降低中性粒细胞中mmp9+细胞亚群的比例和nets形成，改善缺血/再灌注损伤。
7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述抑制nets前体群mmp9+中性粒细胞亚群生成的物质包括cystatin-f(cst7)抑制剂，包括小分子抑制剂，抗体抑制剂，sirnainhibitor和基因编辑与敲除。
技术总结
本申请涉及生物医药领域，公开了一种以NETs前体群MMP9+中性粒细胞亚群作为靶点在制备治疗心脏、肾脏、肝脏、肺脏和脑等各种缺血/再灌注损伤药物中的应用，人血样本中，所述NETs前体群MMP9+中性粒细胞亚群指的是：含有表面分子CD45、CD66b、CD16，以及含有内分子MMP的细胞组成的中性粒细胞亚群；在小鼠血样本及心脏样本中，所述NETs前体群MMP9+中性粒细胞亚群指的是：含有表面分子CD45、CD11b、Ly6G，以及含有内分子MMP9的细胞组成的中性粒细胞亚群。本申请提供了一个更加精确的中性粒细胞亚群以及其干预方式，从而更精确地对各种缺血/再灌注损伤进行治疗，对于临床治疗有重要意义。
技术研发人员：曹嘉添,张峰,胡世钰,王连升,钱菊英,葛均波
受保护的技术使用者：复旦大学附属中山医院
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23