EVT-401体内葡萄糖醛酸化代谢物M3、其衍生物及其制备方法和用途与流程
本发明涉及有机合成与医药，尤其涉及evt-401体内葡萄糖醛酸化代谢物m3、其衍生物及其制备方法和用途。
背景技术：
1、evt-401，化学式c22h20f4n2o3，其结构如下所示：
2、
3、evt-401是白细胞介素1β配体(il-1β)调节剂和嘌呤受体p2x7受体拮抗剂，作为一种ⅰ类新药主要用于炎症性疾病：镇痛(急性、炎性和神经性疼痛、慢性痛、牙痛、头痛)；炎症介导的疾病和障碍(关节炎、类风湿性关节炎等)；神经炎症介导的疾病和障碍(创伤性脑损伤、脑炎等)；呼吸和气道疾病和障碍(过敏性鼻炎、哮喘、反应性气道病和copd等及多发性硬化等)。
4、目前还没有关于evt-401药物在动物体内以及人体内的体内代谢物、及其代谢物类似物的相关报道，更没有关于这些代谢物和类似物的制备方法及潜在应用的报道。因此，提供关于evt-401药物的体内代谢物及其类似物，并进行相应的潜在适应症用途研究，对于evt-401药物的临床应用、对于类似于evt-401药物的新药研究，具有重要的研究意义。
技术实现思路
1、本发明的目的之一，就是在以evt-401为原料的基础上，提供一种evt-401药物的体内葡萄糖醛酸化代谢物m3，以解决上述问题。
2、为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
3、在前期的动物实验以及人肝细胞实验中，evt-401药物在经过动物和人肝细胞的代谢后，通过检测分析，发现具有代谢物m3的存在，其中m3的化学名为：(2s,3s,4s,5r,6s)-6-((r)-2-(5-(2-(3-氟-4-三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1h)-丙氧基)-3,4,5-三羟基四氢吡喃-2-羧酸，其结构式为：
4、
5、上述化合物m3为evt-401药物在动物体内或者人体肝细胞内，evt-401分子中的丙醇基上羟基，会与生物体内的葡萄糖基进行结合，发生醇羟基的葡萄糖基化，从而形成了evt-401药物的葡萄糖醛酸化代谢产物，其结构如下：
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7、本发明的目的之二，在于提供上述evt-401药物体内葡萄糖醛酸化代谢物m3的衍生物，其具有如下式ⅱ或ⅲ的结构：
8、
9、其中，在上述ⅱ或ⅲ的结构式中，r1选自甲基、乙基、异丙基、烯丙基、苄基、正丁基、中的至少一种；r2选自乙酰基、三氟乙酰基、苯甲酰基、叔丁氧羰基中的至少一种；r3选自甲基、乙基、异丙基、烯丙基、苄基、正丁基、甲氧基亚甲基、对甲苯磺酰基中的至少一种。
10、本发明的目的之三，在于提供上述的evt-401药物的体内葡萄糖醛酸化代谢物m3的制备方法，采用的技术方案为，包括以下步骤：
11、(1)将分子筛、化合物ⅰ、反应溶剂和原料evt-401加入反应烧瓶中，降温至0℃，搅拌状态下，缓慢滴加lewis酸，待滴完后将反应液升温至25～40℃继续反应；反应完毕后，经过萃取、柱层析得到黄色粘稠状化合物ⅱ。其中所述化合物ⅰ为2,3,4-三-o-乙酰基-β-d-葡萄糖醛酸甲酯-三氯乙酰亚胺酯(cas:92420-89-8)；
12、(2)将化合物ⅱ和反应溶剂加入到反应烧瓶中，降温至0℃，在搅拌状态下，向反应瓶中缓慢加入甲醇钠固体，逐渐调节ph＝8-10；并保持在0℃下继续反应30分钟；
13、(3)待上述反应完毕，将上述反应在0℃，搅拌状态下，向其中缓慢加入氢氧化锂一水合物或者氢氧化钠的水溶液；滴加完毕后，逐渐恢复至25～40℃继续反应。待反应完毕，向反应液中加入酸性离子交换树脂并搅拌30分钟。然后滤去离子交换树脂，经柱层析，即可得到evt-401的体内代谢物m3。
14、作为优选的技术方案，步骤(1)中，所述lewis酸为三氟化硼乙醚络合物、三氟化硼四氢呋喃溶液、氯化铝、氯化铁、等中的一种；反应溶剂选自二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、水、等中的一种。
15、作为优选的技术方案，步骤(1)中，步骤(1)中，所述化合物ⅰ与evt-401的摩尔比为1.0:(1.3～2.0)，所述化合物ⅰ和与lewis酸的摩尔比为1.0:(1.0～2.0)；步骤(2)中，所述化合物ⅱ与甲醇钠的摩尔比为1.0:(3.0～6.0)；步骤(3)中，氢氧化锂一水合物与化合物ⅱ的摩尔比为(3.0～5.0):1.0。
16、本发明的目的之四，在于提供上述m3的类似物，即化合物ⅱ与化合物ⅲ的制备方法。其中所述化合物ⅱ的制备方法与前述m3的制备方法的步骤(1)相同，仅取代基不同；具体如下式所示：
17、
18、其中，在上述化合物ⅱ的结构式中，r1为选自甲基、乙基、异丙基、烯丙基、苄基、正丁基、中的至少一种；r2为选自乙酰基、三氟乙酰基、苯甲酰基、叔丁氧羰基中的至少一种；
19、所述化合物ⅲ的制备方法为，使用相应的烷基卤代物与evt-401中的伯醇官能团在碱的作用下发生取代反应；具体如下式所示：
20、
21、其中，在上述化合物ⅲ的结构式中，r3选自甲基、乙基、异丙基、烯丙基、苄基、正丁基、甲氧基亚甲基、对甲苯磺酰基中的至少一种。
22、作为优选的技术方案，所述烷基卤代烷物与evt-401的摩尔比为1.0:(1.3～2.0)；所述取代反应的反应温度为0～40℃；所述碱为无机碱或者有机碱；所述取代反应的反应溶剂优选二氯甲烷。
23、作为进一步优选的技术方案，所述无机碱选自碳酸钾、碳酸铯、碳酸锂、叔丁醇钾，叔丁醇锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铯、等中的一种，所述有机碱选自三乙胺、二异丙基乙基胺、二乙基甲基胺、三亚乙基二胺、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯，等中的一种。
24、本发明的目的之五，在于提供上述的化合物m3、化合物ii、以及化合物ⅲ在制备治疗炎症性疾病的药物中的应用。作为药物的潜在应用，特别是在炎症性疾病方面的抗炎止痛用途。
25、作为优选的技术方案，在pma(佛波酯)和lps(脂多糖)诱导thp-1(人单核细胞白血病细胞)的炎症模型中，上述化合物可显著降低炎性因子il-1β的水平，且抑制作用随着化合物的浓度升高而增强，呈现一定的浓度依赖性，说明化合物具有明显的抗炎止痛活性，可作为干预炎症性疾病方面的新型候选药物。
26、与现有技术相比，本发明的有益效果在于：本发明以evt-401药物为源头，对evt-401药物在体内的代谢物m3、m3的类似化合物ii、以及类似化合物ⅲ进行合成制备，并对这些化合物可作为药物的潜在应用，特别是在炎症性疾病方面的抗炎止痛用途进行说明。同时，本发明也可为深入开展evt-401药物的代谢机理研究提供对照品，也有助于深入研究evt-401药物在体内的代谢过程，为进一步的合理用药提供科学依据。
技术特征：
1.一种evt-401体内葡萄糖醛酸化代谢物m3，其特征在于，所述m3的化学名为：(2s,3s,4s,5r,6s)-6-((r)-2-(5-(2-(3-氟-4-三氟甲基)苯基)乙酰氨基)-6-甲基-1-氧代异喹啉-2(1h)-丙氧基)-3,4,5-三羟基四氢吡喃-2-羧酸，其结构式为：
2.权利要求1所述evt-401体内葡萄糖醛酸化代谢物m3的衍生物，其特征在于，具有如下式ⅱ或ⅲ的结构：
3.权利要求1所述evt-401体内葡萄糖醛酸化代谢物m3的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述lewis酸为三氟化硼乙醚络合物、三氟化硼四氢呋喃溶液、氯化铝、氯化铁、等中的一种；反应溶剂选自二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、水、等中的一种。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述化合物ⅰ与evt-401的摩尔比为1.0:(1.3～2.0)，所述化合物ⅰ和与lewis酸的摩尔比为1.0:(1.0～2.0)；在步骤(2)中，所述化合物ⅱ与甲醇钠的摩尔比为1.0:(3.0～6.0)；在步骤(3)中，氢氧化锂一水合物与化合物ⅱ的摩尔比为(3.0～5.0):1.0。
6.根据权利要求2所述的m3类似物，即化合物ⅱ与化合物ⅲ的制备方法，其特征在于，
7.根据权利要求6所述化合物ⅲ的制备方法，其特征在于，所述烷基卤代烷物与evt-401的摩尔比为1.0:(1.3～2.0)；所述取代反应的反应温度为0～40℃；所述碱为无机碱或者有机碱；所述取代反应的反应溶剂优选二氯甲烷。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述无机碱选自碳酸钾、碳酸铯、碳酸锂、叔丁醇钾，叔丁醇锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铯、等中的一种，所述有机碱选自三乙胺、二异丙基乙基胺、二乙基甲基胺、三亚乙基二胺、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯，等中的一种。
9.权利要求1或2的化合物在制备治疗炎症性疾病的药物中的应用。
技术总结
本发明公开了一种EVT‑401体内葡萄糖醛酸化代谢物M3、其衍生物及其制备方法和用途，属于有机合成与医药技术领域，所述M3的化学名为：(2S,3S,4S,5R,6S)‑6‑((R)‑2‑(5‑(2‑(3‑氟‑4‑三氟甲基)苯基)乙酰氨基)‑6‑甲基‑1‑氧代异喹啉‑2(1H)‑丙氧基)‑3,4,5‑三羟基四氢吡喃‑2‑羧酸。本发明以EVT‑401药物为源头，对EVT‑401药物在体内的代谢物M3、M3的类似化合物II、以及类似化合物III进行合成制备，公开了上述化合物在炎症性疾病方面的抗炎止痛用途；本发明不但可为深入开展EVT‑401药物的代谢机理研究提供对照品，也有助于深入研究EVT‑401药物在体内的代谢过程，为进一步的合理用药提供科学依据。
技术研发人员：金庆平,袁伟成,陈斌,蔡华路,余斌,孙婷珈
受保护的技术使用者：浙江金华康恩贝生物制药有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23