新型lycoctine型二萜生物碱类化合物及其制备方法和应用
本发明属于医药，更具体地，涉及一种新型lycoctine型二萜生物碱类化合物及其制备方法和应用。
背景技术：
1、现如今社会竞争日益激烈，高强度、高压力的生活对人们的身心健康产生严重影响，抑郁症逐渐增多并且严重影响人们的正常工作及生活。目前，治疗抑郁症的药物普遍具有较大的副作用而在临床应用中具有一定的局限性。
2、发明人从中药附子中制备得到了一种新颖lycoctine型c20二萜生物碱类化合物carmaloidline e，并发现其在小鼠行为绝望模型实验中表现出显著抗抑郁活性，优于阳性药氟西汀，可用于开发抗抑郁类药物。
技术实现思路
1、本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺陷，提供一种新颖lycoctine型c20二萜生物碱类化合物carmaloidline e及其制备方法、药物组合物和应用。
2、为实现上述目的，本发明的技术方案提供了一种新型lycoctine型二萜生物碱类化合物(简称化合物carmaloidline e)，其具有如式(1)所示的结构：
3、
4、本发明另一方面还提供了一种上述新型lycoctine型二萜生物碱类化合物的制备方法，所述新型lycoctine型二萜生物碱类化合物是从附子中提取分离获得。
5、进一步地，包括如下提取分离步骤：
6、s1、将附子用溶剂回流提取，合并提取液后浓缩，得浸膏；
7、s2、将步骤s1获得的浸膏溶解于酸性溶液中，经混悬、过滤除杂后得到滤后酸水溶液；滤后酸水溶液经二氯甲烷萃取，得到酸水溶液a和萃取物a；
8、调节酸水溶液a的ph为碱性，而后通过二氯甲烷萃取，得到萃取物b；
9、s3、所述萃取物b依次进行柱层析分离和高效液相色谱分离，得到所述新型lycoctine型二萜生物碱类化合物；
10、其中，所述柱层析分离包括依次进行的硅胶柱层析、ods柱层析、凝胶柱层析。
11、其中，凝胶柱层析优选为sephadex lh-20凝胶柱层析。
12、进一步地，步骤s1中，所述溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿和石油醚中的一种或若干种。
13、进一步地，步骤s1中，所述溶剂为88-98v％的乙醇水溶液；
14、溶剂加入质量为附子的8-10倍；回流提取的次数为2-4次，每次提取1-3h。
15、进一步地，步骤s2中，所述酸性溶液为0.1-1.0％稀盐酸；所述酸性溶液的加入量为所述浸膏质量的8-15倍。
16、进一步地，步骤s2中，通过向酸水溶液a中添加碱调节其ph为8-11；优选的，ph＝9。
17、进一步地，按总体积为100为基准，步骤s3中，所述硅胶柱层析采用梯度洗脱，流动相采用溶剂a和溶剂b按体积比(0：100)-(100：0)组成的混合溶剂；
18、所述溶剂a为二氯甲烷、氯仿和石油醚中任意一种；
19、所述溶剂b为氯仿、丙酮、乙酸乙酯和甲醇中任意一种。
20、优选的，流动相为二氯甲烷-甲醇。
21、进一步地，步骤s3包括：
22、s31、使用二氯甲烷-甲醇经硅胶柱层析对所述萃取物b进行梯度洗脱，得到馏分c；利用硅胶薄层层析检识时，馏分c对应的rf值为0.72-0.75；
23、s32、使用流动相甲醇-水经ods柱层析对馏分c进行洗脱，得到馏分c3；利用硅胶薄层层析检识时，馏分c3对应的rf值为0.50-0.60；
24、s33、使用流动相甲醇-水将馏分c3进行凝胶柱层析，得到馏分m1；馏分m1的rf值为0.30-0.39；
25、s34、将馏分m1经rp-hplc反相高效液相色谱，流动相为乙腈-水，得到结构式如式(1)所示的新型lycoctine型二萜生物碱类化合物，新型lycoctine型二萜生物碱类化合物的保留时间为10-15min。
26、进一步地，步骤s31中，硅胶柱层析流动相为体积比为(93：7)-(91：9)的二氯甲烷-甲醇。
27、优选的，流动相二氯甲烷-甲醇的体积比为92：8。
28、进一步地，步骤s32中，ods柱层析流动相甲醇-水的体积比为(35：65)-(45:55)；流动相中还含有体积占比为0.01-0.1％甲酸。
29、优选的，步骤s32中流动相甲醇-水的体积比为40:60；
30、和/或，所述ods柱层析的流动相中甲酸体积占比0.05％。
31、进一步地，步骤s33中，凝胶柱层析流动相甲醇-水的体积比为(0：100)-(10：90)。
32、优选的，步骤s33中，流动相甲醇-水的体积比为0：100。
33、进一步地，步骤s34中，rp-hplc反相高效液相色谱流动相为体积比为(4：96)-(10：90)的乙腈-水，且所述流动相还含有体积占比为0.01-0.5％三氟乙酸。
34、进一步地，步骤s34中，rp-hplc反相高效液相色谱，流动相乙腈-水的体积比为5：95；所述流动相中三氟乙酸体积占比为0.1％。
35、优选的，结构式如式(1)所示的新型lycoctine型二萜生物碱类化合物的保留时间为12min。
36、其中，包括所述新型lycoctine型二萜生物碱类化合物的互变异构体或者在药学上可接受的盐也属于本发明的保护范围。
37、本技术第三方面公开了一种药物组合物，包括所述的新型lycoctine型二萜生物碱类化合物。
38、进一步地，还包括药学上可接受的载体或赋形剂。
39、也就是说，含有作为活性成份的本发明的lycoctine型c20二萜生物碱类化合物和常规药物赋形剂或辅剂或载体的药物组合物亦包含在本发明内。
40、进一步地，还包括增效剂；
41、所述增效剂为以下物质中的一种或若干种：
42、氟西汀、帕罗西汀、氟伏沙明、舍曲林、西酞普兰、艾司西酞普兰、文拉法辛、度洛西汀、米氮平、安非他酮、阿戈美拉汀、曲唑酮、瑞波西汀、丙咪嗪、阿米替林、氯丙咪嗪、多塞平、马普替林、吗氯贝胺、疏肝解郁胶囊、圣˙约翰草提取物、氟哌噻吨美利曲辛。
43、进一步地，所述药物组合物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、冲剂、滴丸、微丸、静脉注射剂或肌肉注射剂。
44、本发明还提供了上述新型lycoctine型二萜生物碱类化合物或上述药物组合物在制备抗抑郁药物中的应用。
45、本发明的优点和有益效果在于：
46、(1)本发明提供了一种目前尚未见报道的新颖lycoctine型c20二萜生物碱类化合物carmaloidline e，并进一步提供了操作简单、重现性好、提取纯度高的从附子中提取获得carmaloidline e的方法；
47、(2)实验结果表明，本发明所提供的新颖lycoctine型c20二萜生物碱类化合物carmaloidline e在小鼠行为绝望模型实验中表现出显著抗抑郁活性，优于阳性药氟西汀(治疗抑郁症的临床一线用药)。结果表明carmaloidline e可用于开发抗抑郁类药物。
技术特征：
1.新型lycoctine型二萜生物碱类化合物，其特征在于，其具有如式(1)所示的结构：
2.如权利要求1所述的新型lycoctine型二萜生物碱类化合物，其特征在于，从附子中提取分离获得。
3.一种权利要求1或2所述的新型lycoctine型二萜生物碱类化合物的制备方法，其特征在于，包括如下提取分离步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿和石油醚中的一种或若干种。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述溶剂为88-98v％的乙醇水溶液；
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤s2中，所述酸性溶液为0.1-1.0％稀盐酸；所述酸性溶液的加入量为所述浸膏质量的8-15倍。
7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤s2中，通过向酸水溶液a中添加碱调节其ph为8-11。
8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，按总体积为100为基准，步骤s3中，所述硅胶柱层析采用梯度洗脱，流动相采用溶剂a和溶剂b按体积比(0：100)-(100：0)组成的混合溶剂；
9.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤s3包括：
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，步骤s31中，硅胶柱层析流动相为体积比为(93：7)-(91：9)的二氯甲烷-甲醇。
技术总结
本发明公开了一种新型lycoctine型二萜生物碱类化合物及其制备方法和应用。其中，本发明所提供的新型lycoctine型C<subgt;20</subgt;二萜生物碱类化合物Carmaloidline E在小鼠行为绝望模型实验中表现出显著抗抑郁活性，明显优于阳性药氟西汀，可用于开发抗抑郁类药物。
技术研发人员：续洁琨,张维库,赫军,殷伟峰,丁康,王漫妮
受保护的技术使用者：北京中医药大学
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23