一株木霉菌及其微胶囊制备方法和应用
本发明涉及植物病害生防菌领域，特别是涉及一株木霉菌及其微胶囊制备方法和应用。
背景技术：
1、生防制剂指的是利用微生物(如细菌、真菌、病毒等)及其代谢产物等加工而成的生物制品，用于防治植物病害。生防制剂的研究和应用，对于由施用化学农药造成的环境污染、病害抗性增强和人体健康威胁等问题，可以起到很好的缓解作用，对于农业的可持续发展十分必要。
2、然而，由于温度、湿度、紫外线辐射等原因，生物制剂在土壤中的施用存在不稳定性，是目前在农业领域中使用存在的主要挑战。微胶囊化是一种创新而有效的技术，它是指将活性成分包裹在保护涂层或基质内的过程。它可以作为一道屏障保护微生物免受生物或非生物的胁迫，增加其稳定性，同时也可以克服其他制剂，例如固体或液体配方在储存和应用上的局限性，通过控制微生物的释放来延长微生物的寿命，提高微生物的使用效率。
3、微胶囊性能则由载体或包封材料的特性决定，它们对生物防治剂微胶囊化的成功和效率起着至关重要的作用。海藻酸钠是一种普遍用作载体中的材料，它是由α-l-葡萄糖醛酸和β-甘露醛酸单元组成的一种多糖。其无毒、可生物降解、易与钙离子等多种交联剂凝胶化等特点，使其成为包裹细胞、药物和其他生物活性分子进行递送和释放的首选载体材料。然而，海藻酸盐存在机械刚度大，大小不一，物理性能差等的局限性，使其不适合提供被封装微生物的长期稳定性。因此，为了克服这些限制，通常在配方中加入合适的填料，蒙脱石就是其中一种。它表面积大，膨胀能力优异，并且自然存在于土壤中，是一种合适的填料封装。
4、目前，在防治辣椒白绢病方面，发现的生防制剂比较少。例如，cn 104988079b公布了一种哈茨木霉jsnl1404，其对铁皮石斛白绢病具有强烈的抑菌能力；再如cn 117327593a公布一种哈茨木霉zm1，对花生白绢病有防效。关于用于防治辣椒白绢病方面的生防菌剂还相对较少，且目前关于木霉微胶囊的报道更是鲜有报道。因此，本领域亟需筛选一种对于辣椒白绢病具有高效生防效果的木霉菌株，并通过微胶囊化实现其应用。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一株木霉菌及其微胶囊制备方法和应用，以解决上述现有技术存在的问题，本发明提供的木霉菌yz-1及其微胶囊对于辣椒白绢病具有优异的防效，有较大的潜力开发成商业化的活菌生防制剂。
2、为实现上述目的，本发明提供了如下方案：
3、本发明提供一株木霉菌(trichoderma afroharzianum)yz-1，所述木霉菌yz-1的保藏编号为cctcc no：m 20241084。
4、本发明还提供一种木霉菌yz-1微胶囊，包含所述的木霉菌yz-1。
5、本发明还提供一种所述的木霉菌yz-1微胶囊的制备方法，包括以下步骤：
6、取1～4g蒙脱石k-10溶解于100～500ml去离子水中，加入6～9g海藻酸钠，再加入甘油充分混匀，得蒙脱石-海藻酸钠溶液；
7、取木霉菌yz-1孢子液，离心得孢子，加入所述蒙脱石-海藻酸钠溶液悬浮孢子，得孢子浓度为1×107～1×109孢子/ml的蒙脱石-海藻酸钠孢子悬浮液；
8、将所述蒙脱石-海藻酸钠孢子悬浮液挤入2％cac12溶液中，无菌水洗脱，得木霉菌yz-1微胶囊。
9、进一步地，所述的制备方法，包括以下步骤：
10、取2.5g蒙脱石溶解于300ml去离子水中，加入7.5g海藻酸钠，再加入甘油充分混匀，得蒙脱石-海藻酸钠溶液；
11、取木霉菌yz-1孢子液，离心得孢子，加入所述蒙脱石-海藻酸钠溶液悬浮孢子，得孢子浓度为1×108孢子/ml的蒙脱石-海藻酸钠孢子悬浮液；
12、将所述蒙脱石-海藻酸钠孢子悬浮液挤入2％cac12溶液中，无菌水洗脱，得木霉菌yz-1微胶囊。
13、本发明还提供一种微生物菌剂，含有所述的木霉菌yz-1。
14、进一步地，所述微生物菌剂的活菌浓度为1×108孢子/ml。
15、本发明还提供一种所述的木霉菌yz-1、所述的木霉菌yz-1微胶囊或所述的微生物菌剂在抑制病原菌生长中的应用，所述病原菌包括辣椒白绢病菌、辣椒灰霉病菌、辣椒疫病菌、烟草靶斑病菌、辣椒立枯病菌、辣椒炭疽病菌。
16、本发明还提供一种所述的木霉菌yz-1、所述的木霉菌yz-1微胶囊或所述的微生物菌剂在防治植物病害中的应用，所述植物病害为由辣椒白绢病菌引起的辣椒白绢病。
17、本发明还提供一种防治由辣椒白绢病菌引起的辣椒白绢病的方法，包括以下步骤：
18、采用所述的木霉菌yz-1或其发酵液或菌悬液或所述的木霉菌yz-1微胶囊处理辣椒植株；
19、所述发酵液或菌悬液中活菌浓度为1×108孢子/ml。
20、进一步地，所述处理为：将浓度为1×108孢子/ml的木霉菌yz-1的发酵液或菌悬液或所述的木霉菌yz-1微胶囊对辣椒植株进行灌根处理。
21、本发明公开了以下技术效果：
22、本发明分离筛选获得一株木霉菌(trichoderma afroharzianum)yz-1，经实验验证，本发明提供的木霉菌yz-1对于由辣椒白绢病菌引起的辣椒白绢病具有优异的防效，防效可达97.57％；另外还对辣椒和烟草上的其他5种植物病原真菌均具有拮抗活性，抑菌率在51.12±1.20％到81.09±1.28％之间。同时，本发明以海藻酸钠和蒙脱石k-10为壁材，通过挤压法制备了木霉菌yz-1的微胶囊，其盆栽防效为74.13％。本发明提供的木霉菌及其微胶囊有较大的潜力开发成商业化的活菌生防制剂。
技术特征：
1.一株木霉菌(trichoderma afroharzianum)yz-1，其特征在于，所述木霉菌yz-1的保藏编号为cctcc no：m 20241084。
2.一种木霉菌yz-1微胶囊，其特征在于，包含权利要求1所述的木霉菌yz-1。
3.如权利要求2所述的木霉菌yz-1微胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
5.一种微生物菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述的木霉菌yz-1。
6.如权利要求5所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂的活菌浓度为1×108孢子/ml。
7.如权利要求1所述的木霉菌yz-1、权利要求2所述的木霉菌yz-1微胶囊或权利要求5-6任一项所述的微生物菌剂在抑制病原菌生长中的应用，其特征在于，所述病原菌包括辣椒白绢病菌、辣椒灰霉病菌、辣椒疫病菌、烟草靶斑病菌、辣椒立枯病菌、辣椒炭疽病菌。
8.如权利要求1所述的木霉菌yz-1、权利要求2所述的木霉菌yz-1微胶囊或权利要求5-6任一项所述的微生物菌剂在防治植物病害中的应用，其特征在于，所述植物病害为由辣椒白绢病菌引起的辣椒白绢病。
9.一种防治由辣椒白绢病菌引起的辣椒白绢病的方法，其特征在于，包括以下步骤：
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述处理为：将浓度为1×108孢子/ml的木霉菌yz-1的发酵液或菌悬液或权利要求2所述的木霉菌yz-1微胶囊对辣椒植株进行灌根处理。
技术总结
本发明公开了一株木霉菌及其微胶囊制备方法和应用，属于植物病害生防菌领域，该木霉菌(Trichoderma afroharzianum)YZ‑1已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 20241084。本发明提供的木霉菌YZ‑1对于辣椒白绢病具有优异的防效，防效可达97.57％；另外还对辣椒和烟草上的其他5种植物病原真菌均具有拮抗活性，抑菌率在51.12±1.20％到81.09±1.28％之间。同时，本发明以海藻酸钠和蒙脱石K‑10为壁材，通过挤压法制备了木霉菌YZ‑1的微胶囊，其盆栽防效为74.13％。本发明提供的木霉菌及其微胶囊有较大的潜力开发成商业化的活菌生防制剂。
技术研发人员：钟杰,邱泽澜,侯诗仪,金萍萍,刘仕达,吴晓,郭蕊,柏心怡,黄焱斌,李璐予
受保护的技术使用者：湖南农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23