非特异性反应抑制剂的制作方法

本发明涉及一种非特异性反应抑制剂，其用于在免疫测定方法中正确地检测微量物质、抑制成为定量时的阻碍的非特异性反应。

背景技术：

1、在日本特开平11-287801号公报中，作为抑制非特异性反应的方法，公开了使针对非特异性反应物质的抗体在测定试剂中共存，降低受检样本中的非特异性反应物质造成的非特异性反应。然而，该技术中存在以下问题：若将igg或igm用作针对非特异性反应物质的抗体，则会因与非特异性反应物质形成免疫复合物，从而产生免疫散射比浊反应，存在基于乳胶免疫比浊法的测定无法示出正确的测定值的情况。作为针对该问题的对策，若减少igg、igm相对于非特异性反应物质的添加量，则存在不能充分获得非特异性抑制效果的情况。

2、为了消除免疫散射比浊反应，通过将igg裂解为f(ab’)2、减少疏水性，能够大量地添加在试剂中，且能够使免疫散射比浊反应难以发生。然而，在试剂中的非特异性抑制效果的持续性方面存在技术问题，预想其原因在于由f(ab’)2分解为fab’而造成的非特异性抑制效果的减弱。在日本专利第5189098号公报中，fab’的非特异性抑制效果的低下程度表示分子尺寸大小不足的可能性，为了解决该技术问题，公开了一种方法，其通过在fab’等抗体片段上修饰高分子化合物而使其巨大化，从而增强非特异性抑制效果。

3、现有技术文献

4、专利文献

5、专利文献1：日本特开平11-287801号公报

6、专利文献2：日本专利第5189098号公报

技术实现思路

1、（一）要解决的技术问题

2、然而，近年来，要求更高灵敏度的免疫测定法，若以试剂的高灵敏度化为目标而增加所使用的样本量，则非特异性反应物质在反应体系中的存在量会变得非常多，随之需要使非特异性反应抑制剂大量共存于试剂中。此外，在样本中大量地存在非特异性物质时，也同样需要使非特异性反应抑制剂大量地共存于试剂中。在这样的状况下，由于日本专利第5189098号公报的技术使用了抗体或抗体片段等较昂贵的生物原料，因此在成本方面及原料的批次差方面存在技术问题，同时由于技术本质为分子尺寸的巨大化，因此改善在试剂中的溶解性的效果不充分，在以高灵敏度化为目标而增大样本量时，无法满足确保充分获得非特异性抑制效果的添加量。

3、鉴于这样的状况，本发明的技术问题在于提供一种非特异性反应抑制剂，其溶解性高，能够确保充分的添加量，廉价且批次差少。

4、（二）技术方案

5、为了达成上述技术问题，进行了认真研究，知晓了通过在相较于fab’而言为低分子且对非特异性反应物质具有结合性的肽上修饰聚乙二醇(peg)等高分子，会高效地表现出非特异性抑制效果。虽然fab’为分子量为55kda左右的分子，但根据日本专利第5189098号公报的记载，即使为这种程度的分子量，非特异性抑制效果仍会消失。然而，发明人发现了以下令人意外的效果：即使为1kda左右的极小的肽，通过与5kda左右的peg结合，虽分子量小于fab’，还仍能够获得高效的非特异性抑制效果。

6、本发明的所述技术问题能够通过以下的本发明解决：

7、[1] 一种用于免疫学测定的非特异性反应抑制剂，其包含肽或核酸分子与高分子化合物的复合物，所述肽或核酸分子与非特异性反应物质特异性结合。

8、[2] 根据[1]的非特异性反应抑制剂，其中，与所述非特异性反应物质特异性结合的物质为能够化学合成的物质。

9、[3] 根据[1]或[2]所述的非特异性反应抑制剂，其中，所述复合物为50kda以下。

10、[4] 根据[1]~[3]中任一项所述的非特异性反应抑制剂，其中，高分子化合物为聚乙二醇。

11、[5] 根据[1]~[4]中任一项所述的非特异性反应抑制剂，其中，所述非特异性反应物质为免疫球蛋白。

12、[6] 一种免疫学测定方法，其特征在于，使用肽或核酸分子与高分子化合物的复合物，所述肽或核酸分子与非特异性反应物质特异性结合。

13、[7] 根据[6]的免疫学测定方法，其中，免疫学测定方法为乳胶凝集光学测定法、免疫散射比浊法、免疫透射比浊法、化学发光免疫测定法、酶免疫测定方法、荧光免疫测定法或放射免疫测定法。

14、[8] 一种免疫学测定试剂，其包含肽或核酸分子与高分子化合物的复合物，所述肽或核酸分子与非特异性反应物质特异性结合。

15、[9] 根据[8]的免疫学测定方法，其特征在于，在稳定化试剂中包含肽或核酸分子与高分子化合物的复合物，所述肽或核酸分子与非特异性反应物质特异性结合。

16、（三）有益效果

17、根据本发明，由于成本相较于生物原料更为廉价，能够化学合成，因此能够减少批次差。此外，根据本发明，由于为更低的低分子，因此溶解性高，能够确保充分的添加量。

技术特征：

1.一种用于免疫学测定的非特异性反应抑制剂，其包含肽或核酸分子与高分子化合物的复合物，所述肽或核酸分子与非特异性反应物质特异性结合。

2.根据权利要求1所述的非特异性反应抑制剂，其中，与所述非特异性反应物质特异性结合的物质为能够化学合成的物质。

3.根据权利要求1或2所述的非特异性反应抑制剂，其中，所述复合物为50kda以下。

4.根据权利要求1~3中任一项所述的非特异性反应抑制剂，其中，高分子化合物为聚乙二醇。

5.根据权利要求1~4中任一项所述的非特异性反应抑制剂，其中，所述非特异性反应物质为免疫球蛋白。

6.一种免疫学测定方法，其特征在于，使用肽或核酸分子与高分子化合物的复合物，所述肽或核酸分子与非特异性反应物质特异性结合。

7.根据权利要求6所述的免疫学测定方法，其中，免疫学测定方法为乳胶凝集光学测定法、免疫散射比浊法、免疫透射比浊法、化学发光免疫测定法、酶免疫测定方法、荧光免疫测定法或放射免疫测定法。

8.一种免疫学测定试剂，其包含肽或核酸分子与高分子化合物的复合物，所述肽或核酸分子与非特异性反应物质特异性结合。

9.根据权利要求8所述的免疫学测定试剂，其特征在于，在稳定化试剂中包含肽或核酸分子与高分子化合物的复合物，所述肽或核酸分子与非特异性反应物质特异性结合。

技术总结
本发明提供一种非特异性反应抑制剂，其溶解性高，能够确保充分的添加量，廉价且批次差少。本发明的非特异性反应抑制剂包含肽或核酸分子与高分子化合物的复合物，所述肽或核酸分子与非特异性反应物质特异性结合。

技术研发人员：山口小岛佳奈子,吉田龙也
受保护的技术使用者：普和希株式会社
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23