一种熊胆粉的制备方法及其熊胆粉与流程
本发明属于人工熊胆粉，具体涉及一种熊胆粉的制备方法及其熊胆粉。
背景技术：
1、熊胆，由熊科动物黑熊或棕熊干燥胆囊胆汁得到，具有清热、平肝、明目的功效，其主要成分是牛磺熊去氧胆酸(tudca)。熊胆是四大名贵动物药之一。虽然人工养熊在一定程度上解决了市场对熊胆粉的需求，但市场需求的增长速度高于人工养熊业的熊胆粉产率，导致市场一直处于熊胆粉匮乏的状态。相对于熊而言，家畜家禽的胆汁更容易获得，成本更低，研究者们一直致力于寻找一种能够高效地从家畜家禽的胆汁中提取熊胆粉的方法。目前针对人工熊胆的研究多几种于将鸡胆、猪胆中的鹅去氧胆酸转化为熊胆特有的药理成分熊去氧胆酸以进行人工熊胆的制备。并且上均很少见规模化制备。豚鼠又名荷兰猪，是珍贵的皮肉兼用的多用途草食动物，经研究﹐豚鼠的胆汁酸主要含有鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、t7-ketolca。而以豚鼠作为胆汁源，来制备熊胆粉的技术方案不多。
技术实现思路
1、基于以上背景，本发明提供一种熊胆粉的制备方法及其熊胆粉，其以豚鼠作为胆汁源来制备熊胆粉，所制备得到的熊胆粉的等级高，并熊去氧胆酸含量高。
2、本发明的技术方案为：
3、一种熊胆粉的制备方法，其包括如下步骤：
4、1)准备豚鼠胆汁，用ph＝7～9的缓冲液溶解后进行过滤，得到滤渣和滤液；
5、2)将所述滤液加入混合酶混合反应；
6、所述混合酶包括7α-羟基类固醇脱氢酶、7β-羟基类固醇脱氢酶和辅酶；
7、3)待反应完成后，在缓慢搅拌状态下，加入金属钾进行常温反应；
8、4)向反应液中加入浓盐酸将其ph调至酸性，然后过滤，取滤液；
9、5)将滤液进行蒸馏浓缩后得到固样粗品；
10、6)将固样粗品加入乙酸乙醋中，升温并回流1小时以上后，降温至常温；
11、7)真空干燥，即可获得高tcdca含量的人工熊胆。
12、进一步地，步骤1)中的缓冲液选自磷酸盐缓冲液、tris-hcl缓冲液或甘氨酸-氢氧化钠缓冲液的至少其中一种。
13、进一步地，步骤2)中的混合反应体系中还加入有复合稳定剂。
14、进一步地，所述复合稳定剂由edta、氯化钠、明胶配制而成。
15、进一步地，步骤2)中的反应温度为25-30℃。
16、进一步地，所述辅酶选自nad+或nadp+。
17、基于同一发明构思，本发明还提供了上述的一种熊胆粉的制备方法所制备的熊胆粉。
18、基于同一发明构思，本发明还将上述制备的熊胆粉应用于制备具有解热作用药物中。
19、基于同一发明构思，发明还将上述制备的熊胆粉应用于制备具有抗炎作用药物中。
20、采用本发明的有益效果：
21、本发明以豚鼠作为胆汁源来制备熊胆粉，原料来源广，成本低，并本发明采用复合酶将鹅去氧胆酸转化为熊去氧胆酸，并以金属钾将t7-ketolca高效转化为熊去氧胆酸，所制备得到的熊胆粉的熊去氧胆酸含量可高达50％以上，品质等级高。并采用本发明采用复合稳定剂可提高催化酶的稳定性，使得酶保有足够的活性，高效催化将鹅去氧胆酸转化为熊去氧胆酸。
技术特征：
1.一种熊胆粉的制备方法，其特征在于，
2.根据权利要求1所述的一种熊胆粉的制备方法，其特征在于，步骤1)中的缓冲液选自磷酸盐缓冲液、tris-hcl缓冲液或甘氨酸-氢氧化钠缓冲液的至少其中一种。
3.根据权利要求1所述的一种熊胆粉的制备方法，其特征在于，步骤2)中的混合反应体系中还加入有复合稳定剂。
4.根据权利要求3所述的一种熊胆粉的制备方法，其特征在于，所述复合稳定剂由edta、氯化钠、明胶配制而成。
5.根据权利要求1所述的一种熊胆粉的制备方法，其特征在于，步骤2)中的反应温度为25-30℃。
6.根据权利要求1所述的一种熊胆粉的制备方法，其特征在于，所述辅酶选自nad+或nadp+。
7.权利要求1至6任一项所述的一种熊胆粉的制备方法所制备的熊胆粉。
8.权利要求7所述的熊胆粉在制备用于具有解热作用药物中的应用。
9.权利要求7所述的熊胆粉在制备用于具有抗炎作用药物中的应用。
技术总结
本发明公开了一种熊胆粉的制备方法及其熊胆粉，其包括如下步骤：1)准备豚鼠胆汁，用pH＝7～9的缓冲液溶解后进行过滤，得到滤渣和滤液；2)将所述滤液加入混合酶混合反应；所述混合酶包括7α‑羟基类固醇脱氢酶、7β‑羟基类固醇脱氢酶和辅酶；3)待反应完成后，在缓慢搅拌状态下，加入金属钾进行常温反应；4)向反应液中加入浓盐酸将其pH调至酸性，然后过滤，取滤液；5)将滤液进行蒸馏浓缩后得到固样粗品；6)将固样粗品加入乙酸乙醋中，升温并回流1小时以上后，降温至常温；7)真空干燥，即可获得高TCDCA含量的人工熊胆。本发明以豚鼠作为胆汁源来制备熊胆粉，原料来源广，成本低，并本发明采用复合酶将鹅去氧胆酸转化为熊去氧胆酸，并以金属钾将T7‑ketoLCA高效转化为熊去氧胆酸，所制备得到的熊胆粉的熊去氧胆酸含量可高达50％以上，品质等级高。并采用本发明采用复合稳定剂可提高催化酶的稳定性，使得酶保有足够的活性，高效催化将鹅去氧胆酸转化为熊去氧胆酸。
技术研发人员：金国众,金雅瑞,金冠融,金国强,金洋,金桥盛
受保护的技术使用者：浙江国本医药集团有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23