靶向BDCA2的抗体或其抗原结合片段及其应用的制作方法

本技术属于生物，具体地，涉及靶向bdca2的抗体或其抗原结合片段及其应用。

背景技术：

1、血液树突状细胞抗原2(bdca-2)，也被命名为clec4c或cd303，在浆细胞样树突状细胞(pdc)上唯一表达，是一种ii型c型凝集素。pdc在免疫系统中发挥重要作用，pdc在外周血或病变部位被异常激活，产生大量干扰素ifn-α以及其他炎性细胞因子和趋化因子，是一些自身免疫疾病的发病机制中的促成因素，如系统性红斑狼疮(sle)、皮肤型红斑狼疮(cle)、硬皮病(ssc)、多发性肌炎和皮肌炎、银屑病、干燥综合征、类风湿性关节炎、格雷夫斯病和桥本氏病等。

2、研究显示，bdca-2的信号传导会使得pdc产生ifn-α受到影响，由于pdc产生ifn-α被认为是自身免疫疾病的主要病理生理因素，因此bdca-2成为阻断自身免疫疾病产生ifn-α的潜力靶点，靶向bdca-2的药物，可以通过减少ifn-α的产生来达到治疗自身免疫疾病的目的。

3、目前，全球靶向bdca-2的药物并不多，进展最快的是渤健生物(biogen)开发的bdca2单抗biib059(litifilimab)，通过结合bdca-2，减少ifn-α等炎性细胞因子的产生，从而达到治疗红斑狼疮的目的，其中sle及cle治疗已经推进至临床iii期。此外，卡佩拉生物科学有限公司(capella bioscience)也在开发bdca2单抗3e5(cbs004)，处于临床前阶段，该项目已于2023年授权给anaptysbio公司。目前，市面上仍缺乏靶向bdca-2的药物。

技术实现思路

1、本技术旨在解决上述技术问题的至少之一。为此，本技术的一个目的在于提供一种高亲和力、高特异性且人猴物种交叉的bdca2抗体。

2、具体而言，本技术提供了如下技术方案：

3、在本技术的第一方面，本技术提出了一种抗体或其抗原结合片段。根据本技术的实施例，包括：重链互补决定区hcdr，所述hcdr包含选自seq id no:1-12中的至少之一或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列。在本技术的一些示例中，前述抗体或其抗原结合片段能够与人以及猴bdca2结合，有效阻断pdc释放ifn-α，具有高特异性、亲和力以及溶解度等优势。基于前述抗体或其抗原结合片段制备的药物能够用于有效治疗与pdc及ifn-α异常相关联的疾病，如自身免疫性疾病。

4、在本技术的第二方面，本技术提出了一种核酸分子。根据本技术的实施例，所述核酸分子编码本技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段。在本技术的一些示例中，所述核酸分子编码的抗体或其抗原结合片段可以与人以及猴bdca2高亲和力、特异性结合。基于前述抗体或其抗原结合片段制备的药物能够用于有效治疗与pdc及ifn-α异常相关联的疾病，如自身免疫性疾病。

5、在本技术的第三方面，本技术提出了一种表达载体。根据本技术的实施例，所述表达载体携带本技术第二方面所述的核酸分子。在本技术的一些示例中，所述表达载体可在适合的宿主细胞中高效表达所述抗体或其抗原结合片段，并且获得的抗体或其抗原结合片段可以与人以及猴bdca2高亲和力、特异性结合。基于前述抗体或其抗原结合片段制备的药物能够用于有效治疗与pdc及ifn-α异常相关联的疾病，如自身免疫性疾病。

6、在本技术的第四方面，本技术提出了一种制备第一方面所述抗体或其抗原结合片段的方法。根据本技术的实施例，所述方法包括：将本技术第三方面所述的表达载体引入到细胞中；将所述细胞在适于蛋白表达和分泌的条件下进行培养，以便获得所述抗体或其抗原结合片段。在本技术的一些示例中，通过本方法制备获得的抗体或其抗原结合片段可以与人以及猴bdca2高亲和力、特异性结合。基于前述抗体或其抗原结合片段制备的药物能够用于有效治疗与pdc及ifn-α异常相关联的疾病，如自身免疫性疾病。

7、在本技术的第五方面，本技术提出了一种重组细胞。根据本技术的实施例，所述重组细胞携带本技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段、第二方面所述的核酸分子或第三方面所述的表达载体。所述重组细胞是通过转染或者转化所述表达载体获得的。在本技术的一些示例中，所述重组细胞在合适条件下可高效表达上述抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段可以与人以及猴bdca2高亲和力、特异性结合。基于前述抗体或其抗原结合片段制备的药物能够用于有效治疗与pdc及ifn-α异常相关联的疾病，如自身免疫性疾病。

8、在本技术的第六方面，本技术提出了一种免疫缀合物。根据本技术的实施例，所述免疫缀合物包括：本技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段、第二方面所述的核酸分子、第三方面所述的表达载体或第五方面所述的重组细胞。如前所述，该抗体或抗原结合片段能够有效与bdca2蛋白进行结合。因此，包含所述抗体或抗原结合片段的免疫缀合物同样能够与人或猴的bdca2蛋白结合，所述免疫缀合物具有良好的预防和/或治疗bdca2介导的自身免疫疾病的效果，如系统性红斑狼疮(sle)、皮肤型红斑狼疮(cle)、硬皮病(ssc)、多发性肌炎和皮肌炎、银屑病、干燥综合征、类风湿性关节炎、格雷夫斯病和桥本氏病等。

9、在本技术的第七方面，本技术提出了一种组合物。根据本技术的实施例，所述组合物包括：申请第一方面所述的抗体或其抗原结合片段、第二方面所述的核酸分子、第三方面所述的表达载体、第五方面所述的重组细胞或第六方面的免疫缀合物。如前所述，该抗体或其抗原结合片段能够有效人以及猴bdca2结合，因此，包含所述抗体或其抗原结合片段的组合物，如食品组合物、药物组合物等，同样能够有效治疗或预防自身免疫疾病，如系统性红斑狼疮(sle)、皮肤型红斑狼疮(cle)、硬皮病(ssc)、多发性肌炎和皮肌炎、银屑病、干燥综合征、类风湿性关节炎、格雷夫斯病和桥本氏病等。

10、在本技术的第八方面，本技术提出了第一方面所述的抗体或其抗原结合片段、第二方面所述的核酸分子、第三方面所述的表达载体、第五方面所述的重组细胞、第六方面的免疫缀合物或第七方面所述的组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或者预防bdca2介导的相关疾病。如前所述，该抗体或其抗原结合片段能够有效人以及猴bdca2结合，因此，包含所述抗体或其抗原结合片段等一系列物质的药物同样具有显著的治疗或预防bdca2介导的自身免疫疾病(如，系统性红斑狼疮(sle)、皮肤型红斑狼疮(cle)、硬皮病(ssc)、多发性肌炎和皮肌炎、银屑病、干燥综合征、类风湿性关节炎、格雷夫斯病和桥本氏病等)的作用。

11、在本技术的第九方面，本技术提出了一种药物。根据本技术的实施例，所述药物包括：第一方面所述的抗体或其抗原结合片段、第二方面所述的核酸分子、第三方面所述的表达载体、第五方面所述的重组细胞、第六方面的免疫缀合物或第七方面所述的组合物，所述药物用于治疗或者预防bdca2介导的相关疾病。如前所述，该抗体或其抗原结合片段能够有效人以及猴bdca2结合。因此，包含所述抗体或其抗原结合片段等一系列物质的药物同样具有显著的治疗或预防bdca2介导的自身免疫疾病(如，系统性红斑狼疮(sle)、皮肤型红斑狼疮(cle)、硬皮病(ssc)、多发性肌炎和皮肌炎、银屑病、干燥综合征、类风湿性关节炎、格雷夫斯病和桥本氏病等)的作用。

12、在本技术的第十方面，本技术提出了第一方面所述的抗体或其抗原结合片段在制备试剂盒中的用途，所述试剂盒用于检测bdca2。如前所示，该抗体或其抗原结合片段能够有效人以及猴bdca2结合，因此，包含所述抗体或其抗原结合片段的试剂盒可用于有效检测bdca2。在本技术的一些示例中，前述试剂盒可用于科学研究，如定性或定量检测生物样本中的bdca2蛋白。

13、在本技术的第十一方面，本技术提出了一种试剂盒。根据本技术的实施例，所述试剂盒包含第一方面所述的抗体或其抗原结合片段。如前所述，该抗体或其抗原结合片段能够有效人以及猴bdca2结合，因此，包含所述抗体或其抗原结合片段的试剂盒可用于有效检测bdca2。在本技术的一些示例中，所述试剂盒可用于科学研究，如定性或定量检测生物样本中的bdca2蛋白，也可以用于对个体状态进行判断，如获得所述个体的bdca2水平后，判断其bdca2水平是否高于或低于正常水平。

14、本技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本技术的实践了解到。

技术特征：

1.一种抗体或其抗原结合片段，其特征在于，包括：重链互补决定区hcdr，所述hcdr包含选自seq id no:1-12中的至少之一或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述hcdr包括：hcdr1、hcdr2和hcdr3，其中：

3.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，进一步包括：轻链互补决定区lcdr，所述lcdr包括：lcdr1、lcdr2和lcdr3，其中：

4.根据权利要求2或3所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段进一步包括：重链框架区；

5.根据权利要求4所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段进一步包括：重链恒定区；

6.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体包括选自多克隆抗体和单克隆抗体中的至少之一；或

7.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1～6任一项所述的抗体或其抗原结合片段；

8.一种表达载体，其特征在于，携带权利要求7所述的核酸分子。

9.一种制备权利要求1～6任一项所述的抗体或其抗原结合片段的方法，其特征在于，包括：

10.一种重组细胞，其特征在于，所述重组细胞携带权利要求7所述的核酸分子或权利要求8所述的表达载体。

11.一种免疫缀合物，其特征在于，包括：

12.一种组合物，其特征在于，包括：

13.权利要求1～6任一项所述的抗体或其抗原结合片段、携带权利要求7所述的核酸分子、权利要求8所述的表达载体、权利要求10所述的重组细胞、权利要求11所述的免疫缀合物或权利要求12所示的组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或者预防bdca2介导的相关疾病。

14.根据权利要求13所述的用途，其特征在于，所述bdca2介导的相关疾病包括自身免疫疾病；

15.一种药物，其特征在于，包括：权利要求1～6任一项所述的抗体或其抗原结合片段、携带权利要求7所述的核酸分子、权利要求8所述的表达载体、权利要求10所述的重组细胞、权利要求11所述的免疫缀合物或权利要求12所示的组合物，所述药物用于或者预防bdca2介导的相关疾病。

16.根据权利要求15所述的药物，其特征在于，所述bdca2介导的相关疾病包括自身免疫疾病；

17.权利要求1～6任一项所述的抗体或其抗原结合片段在制备试剂盒中的用途，所述试剂盒用于检测bdca2。

18.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含：

19.根据权利要求18所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒用于检测bdca2。

技术总结
本申请提出了一种靶向BDCA2的抗体或其抗原结合片段及其应用，涉及生物技术领域。其中，前述抗体或其抗原结合片段包括：重链互补决定区HCDR，所述HCDR包含选自SEQ ID NO:1‑12中的至少之一或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列。在本申请的一些示例中，前述抗体或其抗原结合片段能够与人以及猴BDCA2结合，有效阻断pDC释放IFN‑α，具有高特异性、亲和力以及溶解度等优势。基于前述抗体或其抗原结合片段制备的药物能够用于有效治疗与pDC及IFN‑α异常相关联的疾病，如自身免疫性疾病。

技术研发人员：秦锁富,危喜玲,尚维,张慧,李会铭
受保护的技术使用者：深圳科兴药业有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23