一种治疗痛风、肾病的植物提取物的制备方法及用途的制作方法
专利名称：一种治疗痛风、肾病的植物提取物的制备方法及用途的制作方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，涉及从大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英 文名Large-Leaved Amazon Sword)的提取物制备方法及该提取物在医药领域中的用途，尤 其是在制备预防与治疗与痛风、肾有关的疾病的药物方面的应用及制剂的制备。
背景技术：
大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large-Leaved Amazon Sword)为 一种泽泻科泽苔草属植物，其产地为中国长江中下游及以南地区。现代研究表明，痛风是一组嘌呤代谢紊乱所致的一种疾病，是细小针尖状的尿酸 盐的慢性沉积，其临床表现为高尿酸盐结晶而引起的痛风性关节炎和关节畸形，它会让你 周身局部出现红、肿、热、痛的症状，俗语说痛风痛起来真要命。只有饱受痛风煎熬的人才 会有如此深的感觉，如不及时治疗，会引起痛风性肾炎，尿酸肾结石，以及性功能减退，高血 压等多种并发症。痛风病因是长期嘌呤代谢障碍，血尿酸增高引起。如果血中尿酸浓度长 期高于这个饱和点，医学上称为“高尿酸血症”。而目前为止，痛风目前未见临床治疗特效 药，秋水仙碱、别嘌呤醇、丙黄舒是最常用的，效果并不稳定，而肾病也是具有高尿酸血症的 疾病，文献有报道中药对痛风有较好的作用，但多数只具有改善症状的作用。因此需找治疗痛风有效药物是世界各国医药研究者共同研究课题。
发明内容
本发明致力于从天然产物中需找更安全更有效的治疗痛风、肾病药物及营养 补充剂，在大叶皇冠活性物质研究中，从泽泻科泽苔草属植物大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus,英文名Large-Leaved Amazon Sword)得到水提取物、醇提物及黄酮类化合 物跟皂苷类化合物，同时药效学试验证明其具有明显降低血尿酸的作用，从而完成了本发 明。本发明的目的是要提供一种新的用于痛风、肾病治疗的溶剂提取物、黄酮类、皂苷 类化合物，为研发预防与治疗痛风、肾病的新药提供先导物，尤其是用于预防与治疗与痛风 有关的高尿酸血症、急性痛风关节炎反复发作、痛风石沉积、痛风石性慢性关节炎、痛风性 肾结石、肾损害有关疾病或与嘌呤代谢障碍有关疾病，包括肾病等疾病。本发明是通过以下技术方案完成的，具体内容包括黄酮类化合物的提取分离，皂 苷类化合物的提取分离、水提取物、溶剂提取物提取方法、药效研究及用途。所述的黄酮类 化合物的提取物、皂苷类化合物、水提取物、溶剂提取物提取是以泽泻科泽苔草属植物大叶 皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large-Leaved Amazon Sword)为原料，经水、有 机溶剂或水和有机溶剂混合溶剂加热或常温浸泡提取，得到相应提取物，以及对上述提取 物采用不同粒度的分离柱分离、纯化所得黄酮类、皂苷类化合物，分离柱层析所用载体为各 种粒度规格的硅胶、氧化铝、聚酰胺、ODS中的一种或几种；有机溶剂包括单一有机溶剂与 有机溶剂混合溶剂及水，提取温度为ioo°c。
具体而言，本发明的目的是通过以下方案来实现的1)水溶物提取本发明采用泽泻科泽苔草属植物大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名Large-Leaved Amazon Sword)，干燥后用水加热提取，得到本发明水 提取物。2)乙醇可溶物提取本发明采用本发明采用泽泻科泽苔草属植物大叶皇冠 (Echinodorusmacrophyllus，英文名 Large-Leaved Amazon Sword)，干燥后用 95% 乙酉享力口 热回流提取得到。3)黄酮类成分、皂苷类成分提取本发明采用本发明采用泽泻科泽苔草属植物大 叶皇冠(Echinodorus macrophyllus,英文名 Large-Leaved Amazon Sword),/K提物经水饱 和正丁醇萃取后得到本发明正丁醇提取物；乙醇提取液减压回收为乙醇浸膏，再将此提取 物用0DS、聚酰胺、硅胶柱层析分离纯化得到本发明黄酮类化合物跟皂苷类化合物。所述提取分离得到各部分化合物用于制备调节和治疗痛风疾病、肾病药物。所述分离提纯得到水提取物、正丁醇提取物、黄酮类及皂苷类化合物可单独或与 其他有效成分或有效部位或有效提取物的组合使用，用于制备治疗痛风相关疾病及肾病药 物。
具体实施例方式下面结合具体实施例，对本发明作进一步的说明，但本发明的内容并不仅仅局限 于所列举的实施例，试验用大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名Large-Leaved AmazonSword)，于2009年采集于中国本土。实施例1取大卩十皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large—Leaved Amazon Sword), 用水加热提取三次，水量量分别为大叶皇冠重量的8-12倍，提取时间分别为60-120分钟， 提取液浓缩回收为密度1. 1——1. 6的浸膏。实施例2取大卩十皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large—Leaved Amazon Sword), 用水加热提取三次，水量量分别为大叶皇冠重量的8-12倍，提取时间分别为60-120分钟， 提取液浓缩回收为密度1. 1——1.6的浸膏，用水饱和正丁醇萃取的正丁醇部位，减压回收 正丁醇至干，得到正丁醇可溶部分。实施例3取泽泻科大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large -Leaved Amazon Sword)，用乙醇加热回流提取三次，乙醇量分别为大叶皇冠重量的8-12倍，提取时间分别 为60-120分钟，提取液减压浓缩回收溶剂至于，得到乙醇可溶部分浸膏。实施例4取泽 写禾斗大口十皇冠 Echinodorus macrophyllus，英文名 Large -Leaved Amazon Sword)，用乙醇加热回流提取三次，乙醇量分别为大叶皇冠重量的12、10、8倍，提取时间分 别为120分钟、60分钟、60分钟，提取液减压浓缩回收溶剂至干，浸膏用硅胶拌样，上硅胶 柱，用乙酸乙酯、石油醚、正己烷、丙酮多次柱层析分离后得到黄酮类化合物。实施例5
取泽泻科大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large -Leaved Amazon Sword)，用水加热提取三次，水量量分别为大叶皇冠重量的8-12倍，提取时间分别为 60-120分钟，提取液浓缩回收为密度1. 1——1.6的浸膏，用水饱和正丁醇萃取的正丁醇部 位，减压回收正丁醇至干，得到正丁醇可溶浸膏。浸膏硅胶拌样，用丙酮、乙酸乙酯进行硅胶 柱层析，洗脱液浓缩至干，所得浸膏再用聚酰胺柱层析，洗脱溶剂用丙酮、乙酸乙酯、洗脱， 得黄酮类化合物。实施例6取泽 写禾斗大口十皇冠 Echinodorus macrophyllus，英文名 Large -Leaved Amazon Sword) 3公斤，用乙酸乙酯加热回流提取，乙酸乙酯量分别为大叶皇冠重量的12、10、8倍， 提取时间分别为60分钟、50分钟、30分钟，提取液减压浓缩至干，浸膏硅胶拌样，用乙酸乙 酯、进行硅胶柱层析，洗脱液浓缩至干，浸膏再用聚酰胺柱层析，洗脱溶剂用乙酸乙酯、正己 烷、石油醚洗脱，黄酮类与皂苷类化合物。实施例7降尿酸作用根据现代医学研究发现，痛风及肾病都可使血尿酸增高，因此降低血尿酸可有效 的治疗痛风及肾病。我们试验采用次黄嘌呤诱发小鼠高尿酸血症模型，观察大叶皇冠水提物、95 %乙 醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物对小鼠高尿酸血症的影响。结果显示，大叶皇冠水提物、 95 %乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合大、中、小剂量每日给药一次，连续给药15次，各剂量 组均能明显降低高尿酸血症小鼠血清中的尿酸含量。结果表明，大叶皇冠水提物、95%乙醇 提取物、黄酮类、皂苷类化合物对次黄嘌呤诱导的小鼠高尿酸血症具有明显的降低作用，说 明大叶皇冠对小鼠的高尿酸血症有明显的治疗作用。实施例8痛风性急性关节炎实验采用尿酸盐诱导的大鼠足趾肿胀模型，观察了大叶皇冠水提物、95%乙醇提 取物、黄酮类、皂苷类化合物对大鼠足趾肿胀的抗炎作用。结果显示，模型组动物足趾注射 尿酸盐后，1小时后即开始出现明显的肿胀，2-4小时最明显，6小时肿胀程度逐渐减轻。大 鼠灌胃分别给予大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物大、中、小剂量， 各剂量组具有显著减轻尿酸盐诱导的足趾肿胀的作用，各剂量组动物在给予致炎剂后的 2-4小时的两个时间点的足趾肿胀程度均比模型组显著降低，抗炎作用可持续至致炎后6 小时，结果表明，大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物可明显减轻尿酸 盐所致的足趾肿胀程度，说明对痛风性关节肿胀具有抗炎作用。实施例9水负荷大鼠利尿作用本实验采用水负荷模型大鼠，观察了大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、 皂苷类化合物大、中、小剂量对大鼠利尿作用的影响。结果显示，模型组动物水负荷后，1-2 小时排尿量明显增加，大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物各剂量组 均能明显增强水负荷后大鼠的尿排出量，在药后1- 作用明显。大叶皇冠水提物、95% 乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物各剂量组在药后2小时内排尿量分别为水负荷量的25. 34,21. 45、14. 8%，6小时内的尿排出总量占摄水量的131. 26、135. 7和106. 8%，夏拜尔 茶能使水负荷大鼠的尿排出总量在6小时之内超出水负荷量的100%。说明大叶皇冠水提 物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物的利尿作用明确。实施例10极性毒性试验大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物分别给小鼠灌胃给药， 一日内给药2次，剂量达IOOg生药· kg-Ι动物未出现明显的中毒症状，未出现呼吸抑制、 惊厥、抽搐等反应。药后观察14日，所有动物均存活，动物的一般情况、行为、活动、皮毛等 均未见异常，动物给药后当天粪便稍软但均成形，未见稀便，次日后所有动物粪便均恢复正 常。给药组雌性和雄性动物体重增长均与对照组相近，大体解剖未见脏器异常病变。因此 大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物均对对小鼠灌胃给药的最大耐受 量为IOOg生药/kg，相当于人日饮用剂量的300倍。在此剂量下未见明显毒性反应。实施例11片剂的制备取大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物，加药用辅料淀粉、硬脂酸镁等适量，充分混 勻后，压片，制成每片含上述化合物或者衍生物IOOmg的片剂供口服使用。取大叶皇冠黄酮类、皂苷类化合物，加药用辅料淀粉、硬脂酸镁等适量，充分混勻 后，压片，制成每片含上述化合物或者衍生物IOOmg的片剂供口服使用。实施例12胶囊剂的制备取大叶皇冠水提物、95 %乙醇提取物，加药用辅料淀粉适量，充分混勻后装入胶 囊，制成每粒含上述新化合物或者衍生物50mg的胶囊剂供口服使用。取大叶皇冠黄酮类、皂苷类化合物，加药用辅料淀粉适量，充分混勻后装入胶囊， 制成每粒含上述新化合物或者衍生物50mg的胶囊剂供口服使用。实施例13颗粒剂的制备取大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物加药用辅料淀粉适 量，制成颗粒剂。实施例14注射剂的制备取大时皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物，加注射用纯净水及 聚山梨酯80适量，制成每250ml含IOOml上述新化合物或者衍生物的注射液供经脉点滴使用。实施例15注射用粉针剂的制备取大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物，加注射用水溶性药 用辅料适量，制成注射用粉针剂。
权利要求
1.一种治疗痛风、肾病的植物提取物的制备方法及用途，其特征在于从泽泻科泽苔草 属植物大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large-Leaved Amazon Sword)得到 水提取物、醇提物及黄酮类化合物跟皂苷类化合物，及上述提取物及制剂在医药领域中的 用途，尤其是在制备预防与治疗与痛风、肾有关的疾病的药物方面的应用及制剂的制备。
2.权利要求1所述提取物的制备方法，其特征在于以泽泻科泽苔草属植物大叶皇冠 (Echinodorus macrophyllus，英文名 Large—Leaved Amazon Sword)为原 14，经水、有 剂或水和有机溶剂混合溶剂加热或常温浸泡提取，用不同载体柱层析分离。
3.权利要求2所述的制备方法，其特征在于用有机溶剂或水或有机溶剂和水的混合溶 剂提取，所得提取物分离柱层析所用载体为各种粒度规格的硅胶、氧化铝、聚酰胺、ODS中的 一种或几种；有机溶剂包括单一有机溶剂与有机溶剂混合溶剂。
4.权利要求2所述的制备方法，其特征在提取温度为90-120°C。
5.权力要求2所述的制备方法，其特征在于水、有机溶剂或水跟有机溶剂混合溶剂 类为泽泻科泽苔草属植物大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名Large-Leaved Amazon Sword)重量的 4-12 倍。
6.权利要求1所述的提取物，其特征在于大叶皇冠(Echinodorusmacrophyllus，英文 名Large-Leaved Amazon Sword)为原料，用乙醇加热回流提取三次，提取液减压浓缩回收 溶剂至干，浸膏用硅胶拌样，上硅胶柱，用单一有机溶剂或不同极性有机溶剂混合溶剂多次 柱层析分离后得到。
7.权利要求5所述的提取物，其特征在于乙醇量为大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus,Large-Leaved Amazon Sword) ；Sfi白勺 4—12 {音。
8.权利要求5所述的提取物，其特征在于提取时间为60-120分钟。
9.权利要求5所述的提取物，其所用分离载体为各种粒度规格的硅胶、氧化铝、聚酰 胺、ODS中的一种或几种；洗脱溶剂为有机溶剂包括单一有机溶剂与有机溶剂混合溶剂。
10.权利要求1所述的化合物，其特征在于以大叶皇冠(Echinodorusmacrophyllus, 英文名Large-Leaved Amazon Sword)为原料，用水加热回流提取，提取液减压浓缩至密度 为0. 9-1. 3的浸膏，浸膏用水饱和正丁醇萃取后用不同载体分离纯化
11.权利要求9所述的提取物，其特征在于水量为大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus,Large-Leaved Amazon Sword) ；Sfi白勺 4—12 {音。
12.权利要求9所述的化合物，其特征在于提取时间为30-60分钟，提取温度为 80-100°C，提取次数为2-3次，水饱和正丁醇萃取次数为3-10次。
13.权利要求9所述的提取物，其特征在于所用载体为硅胶、氧化铝、聚酰胺、ODS中的 一种或几种；洗脱溶剂为有机溶剂包括单一有机溶剂与有机溶剂混合溶剂。。
14.权利要求1所述提取物与医学上可接受的药用辅料组成的药物组合物及其制剂。
15.权利要求13所述的制剂，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、注射用粉针剂或水针剂。
16.权利要求1所述提取物在制备预防与治疗与痛风、肾有关的有关疾病的药物中的 用途。
17.权利要求15所述的用途，其特征在于所述疾病包括与具有高尿酸血症相关的痛 风病、肾病等疾病。
全文摘要
本发明涉及天然药物化学领域，公开了从泽泻科泽苔草属植物大叶皇冠(Echinodorusmacrophyllus，英文名Large-Leaved Amazon Sword)得到水提取物、醇提物及黄酮类化合物跟皂苷类化合物的痛风及肾病的提取物，以及上述提取物制备方法及在医药领域中的用途，尤其在制备预防、治疗与高尿血酸症相关的痛风、肾病的药物方面的用途。
文档编号A61P19/06GK102106938SQ20091026005
公开日2011年6月29日 申请日期2009年12月24日 优先权日2009年12月24日
发明者王亚非 申请人:王亚非
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，涉及从大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英 文名Large-Leaved Amazon Sword)的提取物制备方法及该提取物在医药领域中的用途，尤 其是在制备预防与治疗与痛风、肾有关的疾病的药物方面的应用及制剂的制备。
背景技术：
大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large-Leaved Amazon Sword)为 一种泽泻科泽苔草属植物，其产地为中国长江中下游及以南地区。现代研究表明，痛风是一组嘌呤代谢紊乱所致的一种疾病，是细小针尖状的尿酸 盐的慢性沉积，其临床表现为高尿酸盐结晶而引起的痛风性关节炎和关节畸形，它会让你 周身局部出现红、肿、热、痛的症状，俗语说痛风痛起来真要命。只有饱受痛风煎熬的人才 会有如此深的感觉，如不及时治疗，会引起痛风性肾炎，尿酸肾结石，以及性功能减退，高血 压等多种并发症。痛风病因是长期嘌呤代谢障碍，血尿酸增高引起。如果血中尿酸浓度长 期高于这个饱和点，医学上称为“高尿酸血症”。而目前为止，痛风目前未见临床治疗特效 药，秋水仙碱、别嘌呤醇、丙黄舒是最常用的，效果并不稳定，而肾病也是具有高尿酸血症的 疾病，文献有报道中药对痛风有较好的作用，但多数只具有改善症状的作用。因此需找治疗痛风有效药物是世界各国医药研究者共同研究课题。
发明内容
本发明致力于从天然产物中需找更安全更有效的治疗痛风、肾病药物及营养 补充剂，在大叶皇冠活性物质研究中，从泽泻科泽苔草属植物大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus,英文名Large-Leaved Amazon Sword)得到水提取物、醇提物及黄酮类化合 物跟皂苷类化合物，同时药效学试验证明其具有明显降低血尿酸的作用，从而完成了本发 明。本发明的目的是要提供一种新的用于痛风、肾病治疗的溶剂提取物、黄酮类、皂苷 类化合物，为研发预防与治疗痛风、肾病的新药提供先导物，尤其是用于预防与治疗与痛风 有关的高尿酸血症、急性痛风关节炎反复发作、痛风石沉积、痛风石性慢性关节炎、痛风性 肾结石、肾损害有关疾病或与嘌呤代谢障碍有关疾病，包括肾病等疾病。本发明是通过以下技术方案完成的，具体内容包括黄酮类化合物的提取分离，皂 苷类化合物的提取分离、水提取物、溶剂提取物提取方法、药效研究及用途。所述的黄酮类 化合物的提取物、皂苷类化合物、水提取物、溶剂提取物提取是以泽泻科泽苔草属植物大叶 皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large-Leaved Amazon Sword)为原料，经水、有 机溶剂或水和有机溶剂混合溶剂加热或常温浸泡提取，得到相应提取物，以及对上述提取 物采用不同粒度的分离柱分离、纯化所得黄酮类、皂苷类化合物，分离柱层析所用载体为各 种粒度规格的硅胶、氧化铝、聚酰胺、ODS中的一种或几种；有机溶剂包括单一有机溶剂与 有机溶剂混合溶剂及水，提取温度为ioo°c。
具体而言，本发明的目的是通过以下方案来实现的1)水溶物提取本发明采用泽泻科泽苔草属植物大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名Large-Leaved Amazon Sword)，干燥后用水加热提取，得到本发明水 提取物。2)乙醇可溶物提取本发明采用本发明采用泽泻科泽苔草属植物大叶皇冠 (Echinodorusmacrophyllus，英文名 Large-Leaved Amazon Sword)，干燥后用 95% 乙酉享力口 热回流提取得到。3)黄酮类成分、皂苷类成分提取本发明采用本发明采用泽泻科泽苔草属植物大 叶皇冠(Echinodorus macrophyllus,英文名 Large-Leaved Amazon Sword),/K提物经水饱 和正丁醇萃取后得到本发明正丁醇提取物；乙醇提取液减压回收为乙醇浸膏，再将此提取 物用0DS、聚酰胺、硅胶柱层析分离纯化得到本发明黄酮类化合物跟皂苷类化合物。所述提取分离得到各部分化合物用于制备调节和治疗痛风疾病、肾病药物。所述分离提纯得到水提取物、正丁醇提取物、黄酮类及皂苷类化合物可单独或与 其他有效成分或有效部位或有效提取物的组合使用，用于制备治疗痛风相关疾病及肾病药 物。
具体实施例方式下面结合具体实施例，对本发明作进一步的说明，但本发明的内容并不仅仅局限 于所列举的实施例，试验用大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名Large-Leaved AmazonSword)，于2009年采集于中国本土。实施例1取大卩十皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large—Leaved Amazon Sword), 用水加热提取三次，水量量分别为大叶皇冠重量的8-12倍，提取时间分别为60-120分钟， 提取液浓缩回收为密度1. 1——1. 6的浸膏。实施例2取大卩十皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large—Leaved Amazon Sword), 用水加热提取三次，水量量分别为大叶皇冠重量的8-12倍，提取时间分别为60-120分钟， 提取液浓缩回收为密度1. 1——1.6的浸膏，用水饱和正丁醇萃取的正丁醇部位，减压回收 正丁醇至干，得到正丁醇可溶部分。实施例3取泽泻科大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large -Leaved Amazon Sword)，用乙醇加热回流提取三次，乙醇量分别为大叶皇冠重量的8-12倍，提取时间分别 为60-120分钟，提取液减压浓缩回收溶剂至于，得到乙醇可溶部分浸膏。实施例4取泽 写禾斗大口十皇冠 Echinodorus macrophyllus，英文名 Large -Leaved Amazon Sword)，用乙醇加热回流提取三次，乙醇量分别为大叶皇冠重量的12、10、8倍，提取时间分 别为120分钟、60分钟、60分钟，提取液减压浓缩回收溶剂至干，浸膏用硅胶拌样，上硅胶 柱，用乙酸乙酯、石油醚、正己烷、丙酮多次柱层析分离后得到黄酮类化合物。实施例5
取泽泻科大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large -Leaved Amazon Sword)，用水加热提取三次，水量量分别为大叶皇冠重量的8-12倍，提取时间分别为 60-120分钟，提取液浓缩回收为密度1. 1——1.6的浸膏，用水饱和正丁醇萃取的正丁醇部 位，减压回收正丁醇至干，得到正丁醇可溶浸膏。浸膏硅胶拌样，用丙酮、乙酸乙酯进行硅胶 柱层析，洗脱液浓缩至干，所得浸膏再用聚酰胺柱层析，洗脱溶剂用丙酮、乙酸乙酯、洗脱， 得黄酮类化合物。实施例6取泽 写禾斗大口十皇冠 Echinodorus macrophyllus，英文名 Large -Leaved Amazon Sword) 3公斤，用乙酸乙酯加热回流提取，乙酸乙酯量分别为大叶皇冠重量的12、10、8倍， 提取时间分别为60分钟、50分钟、30分钟，提取液减压浓缩至干，浸膏硅胶拌样，用乙酸乙 酯、进行硅胶柱层析，洗脱液浓缩至干，浸膏再用聚酰胺柱层析，洗脱溶剂用乙酸乙酯、正己 烷、石油醚洗脱，黄酮类与皂苷类化合物。实施例7降尿酸作用根据现代医学研究发现，痛风及肾病都可使血尿酸增高，因此降低血尿酸可有效 的治疗痛风及肾病。我们试验采用次黄嘌呤诱发小鼠高尿酸血症模型，观察大叶皇冠水提物、95 %乙 醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物对小鼠高尿酸血症的影响。结果显示，大叶皇冠水提物、 95 %乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合大、中、小剂量每日给药一次，连续给药15次，各剂量 组均能明显降低高尿酸血症小鼠血清中的尿酸含量。结果表明，大叶皇冠水提物、95%乙醇 提取物、黄酮类、皂苷类化合物对次黄嘌呤诱导的小鼠高尿酸血症具有明显的降低作用，说 明大叶皇冠对小鼠的高尿酸血症有明显的治疗作用。实施例8痛风性急性关节炎实验采用尿酸盐诱导的大鼠足趾肿胀模型，观察了大叶皇冠水提物、95%乙醇提 取物、黄酮类、皂苷类化合物对大鼠足趾肿胀的抗炎作用。结果显示，模型组动物足趾注射 尿酸盐后，1小时后即开始出现明显的肿胀，2-4小时最明显，6小时肿胀程度逐渐减轻。大 鼠灌胃分别给予大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物大、中、小剂量， 各剂量组具有显著减轻尿酸盐诱导的足趾肿胀的作用，各剂量组动物在给予致炎剂后的 2-4小时的两个时间点的足趾肿胀程度均比模型组显著降低，抗炎作用可持续至致炎后6 小时，结果表明，大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物可明显减轻尿酸 盐所致的足趾肿胀程度，说明对痛风性关节肿胀具有抗炎作用。实施例9水负荷大鼠利尿作用本实验采用水负荷模型大鼠，观察了大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、 皂苷类化合物大、中、小剂量对大鼠利尿作用的影响。结果显示，模型组动物水负荷后，1-2 小时排尿量明显增加，大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物各剂量组 均能明显增强水负荷后大鼠的尿排出量，在药后1- 作用明显。大叶皇冠水提物、95% 乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物各剂量组在药后2小时内排尿量分别为水负荷量的25. 34,21. 45、14. 8%，6小时内的尿排出总量占摄水量的131. 26、135. 7和106. 8%，夏拜尔 茶能使水负荷大鼠的尿排出总量在6小时之内超出水负荷量的100%。说明大叶皇冠水提 物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物的利尿作用明确。实施例10极性毒性试验大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物分别给小鼠灌胃给药， 一日内给药2次，剂量达IOOg生药· kg-Ι动物未出现明显的中毒症状，未出现呼吸抑制、 惊厥、抽搐等反应。药后观察14日，所有动物均存活，动物的一般情况、行为、活动、皮毛等 均未见异常，动物给药后当天粪便稍软但均成形，未见稀便，次日后所有动物粪便均恢复正 常。给药组雌性和雄性动物体重增长均与对照组相近，大体解剖未见脏器异常病变。因此 大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物均对对小鼠灌胃给药的最大耐受 量为IOOg生药/kg，相当于人日饮用剂量的300倍。在此剂量下未见明显毒性反应。实施例11片剂的制备取大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物，加药用辅料淀粉、硬脂酸镁等适量，充分混 勻后，压片，制成每片含上述化合物或者衍生物IOOmg的片剂供口服使用。取大叶皇冠黄酮类、皂苷类化合物，加药用辅料淀粉、硬脂酸镁等适量，充分混勻 后，压片，制成每片含上述化合物或者衍生物IOOmg的片剂供口服使用。实施例12胶囊剂的制备取大叶皇冠水提物、95 %乙醇提取物，加药用辅料淀粉适量，充分混勻后装入胶 囊，制成每粒含上述新化合物或者衍生物50mg的胶囊剂供口服使用。取大叶皇冠黄酮类、皂苷类化合物，加药用辅料淀粉适量，充分混勻后装入胶囊， 制成每粒含上述新化合物或者衍生物50mg的胶囊剂供口服使用。实施例13颗粒剂的制备取大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物加药用辅料淀粉适 量，制成颗粒剂。实施例14注射剂的制备取大时皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物，加注射用纯净水及 聚山梨酯80适量，制成每250ml含IOOml上述新化合物或者衍生物的注射液供经脉点滴使用。实施例15注射用粉针剂的制备取大叶皇冠水提物、95%乙醇提取物、黄酮类、皂苷类化合物，加注射用水溶性药 用辅料适量，制成注射用粉针剂。
权利要求
1.一种治疗痛风、肾病的植物提取物的制备方法及用途，其特征在于从泽泻科泽苔草 属植物大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名 Large-Leaved Amazon Sword)得到 水提取物、醇提物及黄酮类化合物跟皂苷类化合物，及上述提取物及制剂在医药领域中的 用途，尤其是在制备预防与治疗与痛风、肾有关的疾病的药物方面的应用及制剂的制备。
2.权利要求1所述提取物的制备方法，其特征在于以泽泻科泽苔草属植物大叶皇冠 (Echinodorus macrophyllus，英文名 Large—Leaved Amazon Sword)为原 14，经水、有 剂或水和有机溶剂混合溶剂加热或常温浸泡提取，用不同载体柱层析分离。
3.权利要求2所述的制备方法，其特征在于用有机溶剂或水或有机溶剂和水的混合溶 剂提取，所得提取物分离柱层析所用载体为各种粒度规格的硅胶、氧化铝、聚酰胺、ODS中的 一种或几种；有机溶剂包括单一有机溶剂与有机溶剂混合溶剂。
4.权利要求2所述的制备方法，其特征在提取温度为90-120°C。
5.权力要求2所述的制备方法，其特征在于水、有机溶剂或水跟有机溶剂混合溶剂 类为泽泻科泽苔草属植物大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus，英文名Large-Leaved Amazon Sword)重量的 4-12 倍。
6.权利要求1所述的提取物，其特征在于大叶皇冠(Echinodorusmacrophyllus，英文 名Large-Leaved Amazon Sword)为原料，用乙醇加热回流提取三次，提取液减压浓缩回收 溶剂至干，浸膏用硅胶拌样，上硅胶柱，用单一有机溶剂或不同极性有机溶剂混合溶剂多次 柱层析分离后得到。
7.权利要求5所述的提取物，其特征在于乙醇量为大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus,Large-Leaved Amazon Sword) ；Sfi白勺 4—12 {音。
8.权利要求5所述的提取物，其特征在于提取时间为60-120分钟。
9.权利要求5所述的提取物，其所用分离载体为各种粒度规格的硅胶、氧化铝、聚酰 胺、ODS中的一种或几种；洗脱溶剂为有机溶剂包括单一有机溶剂与有机溶剂混合溶剂。
10.权利要求1所述的化合物，其特征在于以大叶皇冠(Echinodorusmacrophyllus, 英文名Large-Leaved Amazon Sword)为原料，用水加热回流提取，提取液减压浓缩至密度 为0. 9-1. 3的浸膏，浸膏用水饱和正丁醇萃取后用不同载体分离纯化
11.权利要求9所述的提取物，其特征在于水量为大叶皇冠(Echinodorus macrophyllus,Large-Leaved Amazon Sword) ；Sfi白勺 4—12 {音。
12.权利要求9所述的化合物，其特征在于提取时间为30-60分钟，提取温度为 80-100°C，提取次数为2-3次，水饱和正丁醇萃取次数为3-10次。
13.权利要求9所述的提取物，其特征在于所用载体为硅胶、氧化铝、聚酰胺、ODS中的 一种或几种；洗脱溶剂为有机溶剂包括单一有机溶剂与有机溶剂混合溶剂。。
14.权利要求1所述提取物与医学上可接受的药用辅料组成的药物组合物及其制剂。
15.权利要求13所述的制剂，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、注射用粉针剂或水针剂。
16.权利要求1所述提取物在制备预防与治疗与痛风、肾有关的有关疾病的药物中的 用途。
17.权利要求15所述的用途，其特征在于所述疾病包括与具有高尿酸血症相关的痛 风病、肾病等疾病。
全文摘要
本发明涉及天然药物化学领域，公开了从泽泻科泽苔草属植物大叶皇冠(Echinodorusmacrophyllus，英文名Large-Leaved Amazon Sword)得到水提取物、醇提物及黄酮类化合物跟皂苷类化合物的痛风及肾病的提取物，以及上述提取物制备方法及在医药领域中的用途，尤其在制备预防、治疗与高尿血酸症相关的痛风、肾病的药物方面的用途。
文档编号A61P19/06GK102106938SQ20091026005
公开日2011年6月29日 申请日期2009年12月24日 优先权日2009年12月24日
发明者王亚非 申请人:王亚非
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