鼠李糖乳杆菌LXW-1和或其代谢物在制备预防和或治疗溃疡性结肠炎的产品中的应用

本发明属于微生物，具体涉及一种鼠李糖乳杆菌lxw-1和/或其代谢物在制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎产品中的应用，尤其是在食品、药品、饲料中的应用。

背景技术：

1、溃疡性结肠炎是病因尚未完全明确的、以直肠和结肠的浅表性、非特异性病变为主的肠道疾病，常伴有腹部疼痛、发热、呕吐、腹泻、直肠便血、贫血和体重下降等临床症状。目前，临床上对溃疡性结肠炎大多是采用西药加以控制，但是西药治疗具有一定副作用且价格相对较高。

2、近年来，随着人们对溃疡性结肠炎的深入研究，发现溪黄草、苦豆子等植物所含有的天然活性成分对溃疡性结肠炎均表现出一定的抑制活性，成为预防或者治疗溃疡性结肠炎的研究热点。

3、“是药三分毒”，比如，溪黄草虽然具有一定的清热解毒功效，但长时间服用溪黄草，会产生一定的副作用，且目前溪黄草引起的严重不良症状尚未可知，并且若服用溪黄草不当也会加重肝脏的负担，加重病情，可见，天然植物提取物中所含有的活性成分种类复杂，长期使用的过程中，是否会对机体的其他正常细胞产生一定的损害或者抑制作用，并且这些问题在短时间内并不会暴露出来，换句话说，将中药提取物应用于溃疡性结肠炎存在较大的安全隐患。

4、因此，更深入地研究溃疡性结肠炎的发病机制，以此为依据提供一种安全性更高、效果更好的产品，对于未来在解决溃疡性结肠炎的困扰方面意义重大。

技术实现思路

1、为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种鼠李糖乳杆菌lxw-1和/或其代谢物在制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎产品中的应用。

2、第一方面，本发明提供的一种鼠李糖乳杆菌lxw-1，2024年05月20日保藏于中国典型培养物保藏中心（地址：中国武汉武汉大学），保藏编号为：cctcc no：m 20241017，分类命名为：鼠李糖乳杆菌lxw-1lactobacillus rhamnosus lxw-1。

3、第二方面，本发明提供一种含有第一方面所述的鼠李糖乳杆菌lxw-1和/或其代谢物的产品。

4、第三方面，本发明提供一种第一方面所述的鼠李糖乳杆菌lxw-1和/或其代谢物在制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎的产品中的应用。

5、上述鼠李糖乳杆菌lxw-1和/或其代谢物在上述产品(包括但不限于食品、药品、饲料)的应用中，是作为预防和/或治疗溃疡性结肠炎的产品的活性成分来使用的；当然上述产品还可以包含其它功能的活性成分。

6、优选地，上述的食品、药品、饲料中鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物的含量为0.25～2.0mg/ml时效果较理想，优选的为1.0mg/ml。食品、药品、饲料中还可以包括赋形剂，赋形剂选自黏合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、防腐剂、抗氧化剂、矫味剂、芳香剂、乳化剂、着色剂、增溶剂中的至少一种。

7、优选地，鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物的制备方法如下：

8、s1.在mrs培养基中对鼠李糖乳杆菌lxw-1培养12～48h，获得培养代谢物；

9、s2.采用离心装置对s1中获得的培养代谢物进行离心，分别回收培养液上清液和生物质沉淀部分；

10、s3.向s2中回收获得的生物质沉淀部分中添加0.1～0.2m的碱溶液，并搅拌20～30min，采用离心装置离心处理后，收集细胞裂解上清液；

11、s4.将s2中获得的培养液上清液以及s3中获得的细胞裂解上清液合并，加入柠檬酸和干物质，即制得鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物。

12、优选地，干物质选自麦芽糊精、环糊精中的一种或两种；柠檬酸与干物质的重量比为1：10-20，柠檬酸和干物质的重量之和占合并后液体重量的5-10％。

13、优选地，鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物是通过改善溃疡性结肠炎受试者(如小鼠)的炎性因子水平、紧密连接蛋白的水平、肠道菌群的丰度和多样性中的至少一个方面来起作用的。

14、更优选地，鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物通过改善ht-29、caco-2、colo320dm、dld-1、ls513中至少一株细胞中的炎性因子和紧密连接蛋白的水平来起作用的。

15、优选地，炎症因子选自il-1β、il-6、il-8、il-10、tgf-β、tnf-α中的至少一种。

16、优选地，紧密连接蛋白选自occludin、claudins、jam-1、jam-4、zo-1中的至少一种。

17、本发明的有益效果在于：

18、本发明提供一种能应用于溃疡性结肠炎方面的鼠李糖乳杆菌lxw-1和/或其代谢物，本发明中的实验显示，上述的鼠李糖乳杆菌lxw-1发酵所获得的代谢物在一定程度上能够缓解溃疡性结肠炎，且微生物发酵所需底物成本低，原料易获得，发酵后所获得的代谢物特异性强。更具体来说，本发明优选实施例具有如下优点：

19、(1)通过构建lps诱导的炎症细胞模型，研究鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物对细胞炎性的抑制作用实验，结果显示，当鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物浓度达到1.0mg/ml以上时，细胞上清液中的炎性因子il-1β和il-6的浓度逐渐降低，具有明显的抑炎作用；

20、(2)通过蛋白质印迹法检测紧密连接蛋白的表达量，证明鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物对肌动蛋白β-actin、细胞连接蛋白occludin和zo-1的表达均有明显促进作用，可以提升组织细胞的紧密连接水平；也进一步证明了鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物具有抑制炎性因子的作用；

21、(3)建立肠炎小鼠模型，对小鼠灌胃给与本发明中的鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物，实验结果表明，本发明中的鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物能够减轻dss诱导的小鼠溃疡性结肠炎；组织染色结果显示，本发明中的0.2g/kg和0.4g/kg给药组(鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物)对小鼠的溃疡性结肠炎有显著性改善作用。

技术特征：

1.一种鼠李糖乳杆菌lxw-1，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌lxw-1于2024年05月20日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：cctccno：m 20241017，分类命名为：鼠李糖乳杆菌lxw-1lactobacillus rhamnosus lxw-1。

2.含有如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌lxw-1和/或其代谢物的产品。

3.权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌lxw-1和/或其代谢物在制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎的产品中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的产品为食品、药品、饲料中的任一种。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物由如下步骤制得：

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，s4中所述的干物质选自麦芽糊精、环糊精中的至少一种；柠檬酸与干物质的重量比为1：10-20，柠檬酸和干物质的重量之和占合并后液体重量的5-10％。

7.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌lxw-1的代谢物在所述产品中的含量为0.25～2.0mg/ml。

8.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的鼠李糖乳杆菌lxw-1和/或其代谢物通过改善溃疡性结肠炎受试者的炎性因子水平、紧密连接蛋白的水平、肠道菌群的丰度和多样性中的至少一个方面来起作用。

9.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的鼠李糖乳杆菌lxw-1和/或其代谢物通过改善ht-29、caco-2、colo320dm、dld-1、ls513中至少一株细胞中的炎性因子和紧密连接蛋白的水平来起作用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述炎症因子选自il-1β、il-6、il-8、il-10、tgf-β、tnf-α中的至少一种；所述紧密连接蛋白选自occludin、claudins、jam-1、jam-4、zo-1中的至少一种。

技术总结
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种鼠李糖乳杆菌LXW‑1和/或其代谢物在制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎的产品中的应用。本发明通过筛选获得了一株鼠李糖乳杆菌LXW‑1，所述的鼠李糖乳杆菌LXW‑1于2024年05月20日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为：中国.武汉.武汉大学，保藏编号为：CCTCC NO：M 20241017，分类命名为：鼠李糖乳杆菌LXW‑1Lactobacillus rhamnosus LXW‑1。本发明的研究结果表明，鼠李糖乳杆菌LXW‑1代谢物在≥1.0mg/mL时显著抑制炎性因子IL‑1β和IL‑6。动物实验证实，该代谢物减轻DSS诱导的溃疡性结肠炎，改善肠道病变，降低炎性因子水平，增强肠道细胞连接，展现良好预防与治疗潜力。

技术研发人员：李小伟,管运涛
受保护的技术使用者：清华大学深圳国际研究生院
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23