一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法与流程
本发明涉及药品质量分析控制，具体的，涉及一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法。
背景技术：
1、枇杷止咳胶囊由枇杷叶、罂粟壳、百部、白前、桑白皮、桔梗和薄荷等7味药材经提取加工制成，具有止咳化痰的作用，用于痰热蕴肺所致的咳嗽、咯痰和支气管炎。该药现行质控标准主要是《中国药典》2020版（一部），标准中含量测定仅控制罂粟壳中磷酸可待因的含量，这导致检测指标少，难以有效控制枇杷止咳胶囊的整体质量。
2、中药指纹图谱是通过一系列现代分析技术，如色谱、光谱以及质谱等，对中药或中药制剂中的化学成分进行全面检测和表征，从而得到一种能够反映其整体性化学特征的图谱。这种图谱不仅包含了中药中的活性组分，还反映了其复杂的化学组成和相互作用关系，是一种全面反映中药或中药制剂整体化学特性的质量分析方法。
3、中国专利cn113945660a公开了一种强力枇杷露的特征图谱的构建方法。但由于强力枇杷露和枇杷止咳胶囊这两种成药处方中各药味比例不同，且合剂和胶囊剂处方工艺差别大，其构建方法得到的特征图谱对于枇杷止咳胶囊并不适用。
4、鉴于此，为了提高对枇杷止咳胶囊整体质量的评控，研发一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法具有重要意义。
技术实现思路
1、本发明提出一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法，解决了相关技术中难以有效评控枇杷止咳胶囊整体质量的问题。
2、本发明的技术方案如下：
3、本发明提出一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：对供试品溶液、对照品溶液、对照药材溶液、阳性药材溶液和阴性药材溶液进行uplc检测，得到枇杷止咳胶囊的指纹图谱；
4、所述uplc检测时，以乙腈为流动相a，以体积分数为0.05%~0.2%的磷酸水溶液为流动相b，采用梯度洗脱，所述梯度洗脱的洗脱程序为：
5、
6、作为进一步的技术方案，所述uplc检测时，色谱柱为c18色谱柱。
7、作为进一步的技术方案，所述uplc检测时，柱温为25~45℃，优选地柱温为30℃。
8、作为进一步的技术方案，所述uplc检测时，检测波长为200~210nm，优选地检测波长为210nm。
9、作为进一步的技术方案，所述uplc检测时，流速为0.2~0.4ml/min，优选地流速为0.3ml/min。
10、作为进一步的技术方案，所述uplc检测时，进样体积为1~5μl，优选地进样体积为1μl。
11、作为进一步的技术方案，所述对照品溶液中的对照品包括磷酸可待因、绿原酸、桑皮苷a、新绿原酸和隐绿原酸。
12、作为进一步的技术方案，所述对照药材溶液中的对照药材包括枇杷叶对照药材、罂粟壳对照药材、桑白皮对照药材、百部对照药材、白前对照药材和桔梗对照药材。
13、作为进一步的技术方案，所述阳性药材溶液中的阳性药材包括以下重量份的组分：枇杷叶34.2g、罂粟壳2.5g、百部7.5g、白前4.5g、桑白皮3.0g、桔梗2.9g、薄荷脑0.08g，各组分用量均为2020版《中国药典》中枇杷止咳胶囊处方量的1/10。
14、作为进一步的技术方案，所述阳性药材的制备方法为2020版《中国药典》中枇杷止咳胶囊的制法，具体为以上七味，除薄荷脑外，其余枇杷叶等六味，加水煎煮二次，每次3小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，加入适量淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；另取薄荷脑，用少量乙醇溶解后喷入，混匀，即得。
15、作为进一步的技术方案，所述阴性药材溶液中的阴性药材包括缺枇杷叶阴性药材、缺罂粟壳阴性药材、缺百部阴性药材、缺白前阴性药材、缺桑白皮阴性药材和缺桔梗阴性药材。
16、作为进一步的技术方案，所述缺枇杷叶阴性药材包括以下重量份的组分：罂粟壳2.5g、百部7.5g、白前4.5g、桑白皮3.0g、桔梗2.9g、薄荷脑0.08g，以上六味，除薄荷脑外，其余罂粟壳等五味，加水煎煮二次，每次3小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，加入适量淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；另取薄荷脑，用少量乙醇溶解后喷入，混匀，即得。
17、作为进一步的技术方案，所述缺罂粟壳阴性药材包括以下重量份的组分：枇杷叶34.2g、百部7.5g、白前4.5g、桑白皮3.0g、桔梗2.9g、薄荷脑0.08g，以上六味，除薄荷脑外，其余枇杷叶等五味，加水煎煮二次，每次3小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，加入适量淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；另取薄荷脑，用少量乙醇溶解后喷入，混匀，即得。
18、作为进一步的技术方案，所述缺百部阴性药材包括以下重量份的组分：枇杷叶34.2g、罂粟壳2.5g、白前4.5g、桑白皮3.0g、桔梗2.9g、薄荷脑0.08g，以上六味，除薄荷脑外，其余枇杷叶等五味，加水煎煮二次，每次3小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，加入适量淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；另取薄荷脑，用少量乙醇溶解后喷入，混匀，即得。
19、作为进一步的技术方案，所述缺白前阴性药材包括以下重量份的组分：枇杷叶34.2g、罂粟壳2.5g、百部7.5g、桑白皮3.0g、桔梗2.9g、薄荷脑0.08g，以上六味，除薄荷脑外，其余枇杷叶等五味，加水煎煮二次，每次3小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，加入适量淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；另取薄荷脑，用少量乙醇溶解后喷入，混匀，即得。
20、作为进一步的技术方案，所述缺桑白皮阴性药材包括以下重量份的组分：枇杷叶34.2g、罂粟壳2.5g、百部7.5g、白前4.5g、桔梗2.9g、薄荷脑0.08g，以上六味，除薄荷脑外，其余枇杷叶等五味，加水煎煮二次，每次3小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，加入适量淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；另取薄荷脑，用少量乙醇溶解后喷入，混匀，即得。
21、作为进一步的技术方案，所述缺桔梗阴性药材包括以下重量份的组分：枇杷叶34.2g、罂粟壳2.5g、百部7.5g、白前4.5g、桑白皮3.0g、薄荷脑0.08g，以上六味，除薄荷脑外，其余枇杷叶等五味，加水煎煮二次，每次3小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，加入适量淀粉，混匀，干燥，粉碎，过筛；另取薄荷脑，用少量乙醇溶解后喷入，混匀，即得。
22、作为进一步的技术方案，所述供试品溶液的制备方法，包括以下步骤：精密称定研细混匀后的枇杷止咳胶囊内容物，精密加入甲醇，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再次称定重量，用甲醇补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
23、作为进一步的技术方案，所述对照品溶液的制备方法，包括以下步骤：分别精密称定磷酸可待因、绿原酸、桑皮苷a、新绿原酸和隐绿原酸，分别加入甲醇，摇匀，制得各对照品溶液。
24、作为进一步的技术方案，所述对照药材溶液的制备方法，包括以下步骤：分别精密称定枇杷叶对照药材、罂粟壳对照药材、桑白皮对照药材、百部对照药材、白前对照药材和桔梗对照药材，分别加水煎煮，滤过，滤液蒸干，向残渣中加入甲醇，超声处理，滤过，取续滤液，制得各对照药材溶液。
25、作为进一步的技术方案，所述阳性药材溶液的制备方法为：精密称定研细混匀后的阳性药材，精密加入甲醇，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再次称定重量，用甲醇补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
26、作为进一步的技术方案，所述阴性药材溶液的制备方法为：分别精密称定缺枇杷叶阴性药材、缺罂粟壳阴性药材、缺百部阴性药材、缺白前阴性药材、缺桑白皮阴性药材和缺桔梗阴性药材，分别精密加入甲醇，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再次称定重量，用甲醇补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，制得各阴性药材溶液。
27、本发明还提出一种枇杷止咳胶囊对照指纹图谱的构建方法，采用所述的构建方法构建10批次以上的枇杷止咳胶囊指纹图谱后，在中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）中生成。
28、本发明中，枇杷止咳胶囊对照指纹图谱可以比较不同厂家生产的枇杷止咳胶囊在处方工艺、化学成分和稳定性等方面的差异，可以整体评估枇杷止咳胶囊质量的均一性，进一步提高对枇杷止咳胶囊整体质量的评控。
29、作为进一步的技术方案，所述枇杷止咳胶囊对照指纹图谱中，含有10个共有峰，2号峰为磷酸可待因，5号峰为新绿原酸，6号峰为绿原酸，7号峰为隐绿原酸，8号峰为桑皮苷a。
30、本发明中，枇杷止咳胶囊对照指纹图谱中确定了10个共有峰，分别来源于罂粟壳的磷酸可待因，枇杷叶的新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸，桑白皮的桑皮苷a，通过对枇杷止咳胶囊中的多组分进行测定，有助于进一步提高对枇杷止咳胶囊整体质量的评控。
31、本发明还提出所述的一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法在枇杷止咳胶囊质量检测中的应用。
32、本发明的工作原理及有益效果为：
33、本发明中，在构建枇杷止咳胶囊指纹图谱时，采用合格药材制作检测试剂，保证了质量控制的基准，可有效地评价枇杷止咳胶囊的一致性。枇杷止咳胶囊中，枇杷叶的主要成分为酚酸类、罂粟壳和百部的主要成分为生物碱类、桑白皮的主要成分为黄酮类、桔梗的主要成分为皂苷类。由于枇杷止咳胶囊化学组成复杂、化学成分差异显著，尤其是主要成分的极性差异大，通过设置合理的流动相和梯度洗脱程序，使色谱可同时呈现多种极性化合物，色谱信息更丰富更全面，且重复性、稳定性和精密度好，有利于对枇杷止咳胶囊的整体质量进行评控。
技术特征：
1.一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：对供试品溶液、对照品溶液、对照药材溶液、阳性药材溶液和阴性药材溶液进行uplc检测，得到枇杷止咳胶囊的指纹图谱；
2.根据权利要求1所述的一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述uplc检测时，色谱柱为c18色谱柱。
3.根据权利要求1所述的一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述uplc检测时，柱温为25~45℃。
4.根据权利要求1所述的一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述uplc检测时，检测波长为200~210nm。
5.根据权利要求1所述的一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述uplc检测时，流速为0.2~0.4ml/min。
6.根据权利要求1所述的一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述对照品溶液中的对照品包括磷酸可待因、绿原酸、桑皮苷a、新绿原酸和隐绿原酸；
7.根据权利要求1所述的一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述阳性药材溶液中的阳性药材包括以下重量份的组分：枇杷叶34.2g、罂粟壳2.5g、百部7.5g、白前4.5g、桑白皮3.0g、桔梗2.9g、薄荷脑0.08g。
8.一种枇杷止咳胶囊对照指纹图谱的构建方法，其特征在于，采用权利要求1~7任意一项所述的构建方法构建10批次以上的枇杷止咳胶囊指纹图谱后，在中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）中生成。
9.根据权利要求8所述的一种枇杷止咳胶囊对照指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述枇杷止咳胶囊对照指纹图谱中，含有10个共有峰，2号峰为磷酸可待因，5号峰为新绿原酸，6号峰为绿原酸，7号峰为隐绿原酸，8号峰为桑皮苷a。
10.根据权利要求1~7任意一项所述的一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法在枇杷止咳胶囊质量检测中的应用。
技术总结
本发明涉及药品质量分析控制技术领域，提出了一种枇杷止咳胶囊指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：对供试品溶液、对照品溶液、对照药材溶液、阳性药材溶液和阴性药材溶液进行UPLC检测，得到枇杷止咳胶囊的指纹图谱。通过上述技术方案，解决了相关技术中难以有效评控枇杷止咳胶囊整体质量的问题。
技术研发人员：冯云,雷蓉,郝晓飞,刘永利,王银红,赵桂铃,周亚楠,白洁,曹春琪
受保护的技术使用者：河北省药品医疗器械检验研究院（河北省化妆品检验研究中心）
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23