乳胶颗粒分散液的制作方法
本发明涉及乳胶颗粒分散液。本发明还涉及使用所述分散液通过免疫凝集法检测样本中靶标物质的方法和检测试剂盒。本发明还涉及用于抑制乳胶颗粒沉降的方法。
背景技术：
1、乳胶免疫凝集法(也称为乳胶浊度免疫测定法：ltia)是一种用于生物样品中靶标物质的定性或定量测量的众所周知的方法。上述方法已知为用于光学检测乳胶颗粒的凝集程度的方法，该凝集是由乳胶颗粒表面上携带的抗原或抗体与作为生物样品中的靶标物质的抗体或抗原之间的免疫反应引起的。将携带抗原或抗体的乳胶颗粒分散在缓冲溶液等水性介质中。含有乳胶颗粒的水性介质在下文中被称为乳胶颗粒分散液。根据乳胶免疫凝集法的原理，乳胶颗粒分散液可以用作测量试剂，在下文中称为乳胶试剂。将测量试剂应用于自动分析仪允许轻松快速地测量大量样品。试剂被存储在容器中和自动分析仪的试剂存储器中。从可用性的角度来看，希望在容器放置在试剂存储器中的状态下，试剂的组成在长时间内保持均匀(良好的装载(on-board)稳定性)。
2、然而，在乳胶免疫凝集法的试剂中，当增加乳胶颗粒的粒径以提高灵敏度时，在将试剂填充到容器中之后，乳胶颗粒随着时间的推移而沉降，并且乳胶试剂变得不均匀。当用这种不均匀的乳胶试剂测量样品时，会出现无法获得准确读数的问题。因此，为了使用含有具有大粒径的乳胶颗粒的试剂进行准确的测量，有必要在测量之前通过翻转混合试剂容器或搅拌试剂来将乳胶颗粒重新分散在水性介质中。
3、另一方面，以下是已知的作为用于抑制微粒在试剂中沉降或用于提高微粒的分散性的技术。在专利文献1中，作为抑制与抗原和抗体等反应性物质结合的微粒的沉降的方法，公开了使选自由聚阴离子及其盐、葡聚糖、环糊精、聚乙二醇和甘油组成的组中的至少一种共存于微粒的分散液中的方法。然而，仅证实了对5至100nm的金胶体颗粒的沉降抑制作用，而对乳胶颗粒的沉降抑制作用是未知的。
4、在专利文献2中，描述了在乳胶免疫浊度测量试剂中的一种试剂，其在由携带抗原或抗体的乳胶颗粒的悬浮液组成的乳胶浊度免疫测定用试剂中含有特定量的糖如蔗糖、葡萄糖、海藻糖等以抑制颗粒沉降同时保持高试剂灵敏度。这是一种旨在通过在颗粒悬浮液中加入特定量的糖来增加悬浮液的比重来提高分散性的技术。
5、关于这些糖，本发明人已经研究了其对乳胶颗粒的沉降抑制作用以及对试剂的测量灵敏度的影响。然而，尽管它们已经显示出沉降抑制效果，但由于试剂的测量灵敏度降低，所以出现了新的问题(参见后面描述的实施例中的比较例2、3)。
6、总之，到目前为止，还没有一种技术对试剂性能不产生不良影响，例如降低乳胶免疫凝集试剂的灵敏度，同时抑制乳胶颗粒分散液中颗粒的沉降。
7、引用列表
8、[专利文献]
9、[专利文献1]
10、日本特开号2007-114129
11、[专利文献2]
12、日本特开号11-051938
技术实现思路
1、技术问题
2、本发明的目的是提供一种提高乳胶免疫凝集试剂的灵敏度，同时提高颗粒在乳胶颗粒分散液中的分散性并抑制颗粒沉降的技术。特别地，目的是抑制乳胶颗粒在含有具有大颗粒直径的乳胶颗粒的分散液中的沉降和/或凝集。
3、[问题的解决方案]
4、为了用乳胶免疫凝集试剂进行准确和灵敏的测量，需要有将乳胶颗粒均匀稳定地分散在乳胶试剂中的技术。
5、为了解决上述问题，本发明人进行了深入的研究，发现在携带能够与靶标物质结合的物质的乳胶颗粒分散液中，选自由聚丙烯酸、聚丙烯酸钠、聚环氧乙烷(以下简称peo)和聚-γ-谷氨酸钠组成的组的一种或多种化合物共存，长时间抑制乳胶颗粒的沉降，并且当应用于免疫凝集试剂时，与未添加这些成分的试剂相比，测量灵敏度得以保持或提高，并且完成了本发明。即，本发明包括以下内容。
6、<1>
7、包括水性介质作为分散介质的乳胶颗粒分散液，其中所述乳胶颗粒分散液包括选自由聚丙烯酸、聚丙烯酸钠、聚环氧乙烷和聚-γ-谷氨酸钠组成的组的一种或多种化合物。
8、<2>
9、根据＜1＞所述的乳胶颗粒分散液，其中所述水性介质包括水。
10、<3>
11、根据＜1＞或＜2＞所述的乳胶颗粒分散液，其中所述乳胶颗粒是来自单体成分的聚合物颗粒，所述单体成分包括具有苯乙烯或乙烯基萘结构的单体。
12、<4>
13、根据＜1＞至＜3＞中任一项所述的乳胶颗粒分散液，其中所述乳胶颗粒是携带能够与靶标物质结合的物质的乳胶颗粒。
14、<5>
15、根据＜4＞所述的乳胶颗粒分散液，其中能够与靶标物质结合的物质是靶标物质的抗原或抗体。
16、<6>
17、根据＜1＞至＜5＞中任一项所述的乳胶颗粒分散液，其中所述乳胶颗粒分散液用作免疫凝集试剂。
18、<7>
19、根据＜1＞至＜6＞中任一项所述的乳胶颗粒分散液，其中所述乳胶颗粒的平均粒径为50至1,000nm。
20、<8>
21、根据＜1＞至＜7＞中任一项所述的乳胶颗粒分散液，其中所述乳胶颗粒的含量相对于所述乳胶颗粒分散液的总量为0.01质量％至0.10质量％。
22、<9>
23、用于通过免疫凝集法检测样本中的靶标物质的试剂盒，所述试剂盒包括根据＜1＞至＜8＞中任一项所述的乳胶颗粒分散液。
24、<10>
25、通过免疫凝集法检测样本中的靶标物质的方法，所述方法包括使样本与根据＜1＞至＜8＞中任一项所述的乳胶颗粒分散液接触的步骤。
26、<11>
27、抑制免疫凝集法中携带能够与靶标物质结合的物质的乳胶颗粒沉降的方法，所述方法包括使乳胶颗粒在水性介质中与选自由聚丙烯酸、聚丙烯酸钠、聚环氧乙烷和聚-γ-谷氨酸钠组成的组一种或多种化合物接触的步骤。
28、发明的有益效果
29、根据本发明的乳胶颗粒分散液，由于乳胶颗粒的沉降和/或凝集被抑制，因此当应用于乳胶免疫凝集试剂时，乳胶试剂可以用于测量，而无需通过翻转混合试剂容器、搅拌试剂等来重新分散乳胶颗粒。此外，可以提高使用乳胶颗粒的免疫凝集试剂的装载稳定性。
技术特征：
1.包括水性介质作为分散介质的乳胶颗粒分散液，其中所述乳胶颗粒分散液包括选自由聚丙烯酸、聚丙烯酸钠、聚环氧乙烷和聚-γ-谷氨酸钠组成的组的一种或多种化合物。
2.根据权利要求1所述的乳胶颗粒分散液，其中所述水性介质包括水。
3.根据权利要求1或2所述的乳胶颗粒分散液，其中所述乳胶颗粒是来自单体成分的聚合物颗粒，所述单体成分包括具有苯乙烯或乙烯基萘结构的单体。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的乳胶颗粒分散液，其中所述乳胶颗粒是携带能够与靶标物质结合的物质的乳胶颗粒。
5.根据权利要求4所述的乳胶颗粒分散液，其中能够与靶标物质结合的物质是所述靶标物质的抗原或抗体。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的乳胶颗粒分散液，其中所述乳胶颗粒分散液用作免疫凝集试剂。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的乳胶颗粒分散液，其中所述乳胶颗粒的平均粒径为50至1,000nm。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的乳胶颗粒分散液，其中所述乳胶颗粒的含量相对于所述乳胶颗粒分散液的总量为0.01质量％至0.10质量％。
9.用于通过免疫凝集法检测样本中的靶标物质的试剂盒，其中所述试剂盒包括根据权利要求1-8中任一项所述的乳胶颗粒分散液。
10.通过免疫凝集法检测样本中的靶标物质的方法，其中所述方法包括使样本与根据权利要求1至8中任一项所述的乳胶颗粒分散液接触的步骤。
11.抑制免疫凝集法中携带能够与靶标物质结合的物质的乳胶颗粒沉降的方法，其中所述方法包括使所述乳胶颗粒在水性介质中与一种或多种化合物接触，其中所述化合物选自由聚丙烯酸、聚丙烯酸钠、聚环氧乙烷和聚-γ-谷氨酸钠组成的组。
技术总结
本发明的目的是提供提高乳胶免疫凝集试剂的灵敏度同时抑制乳胶颗粒分散液中颗粒沉降的技术。特别是，提供乳胶颗粒分散液，其能够以足够的灵敏度应用于乳胶免疫凝集试剂，同时抑制在具有大粒径的乳胶颗粒分散液中随着时间的推移发生凝集。也就是说，提供乳胶颗粒分散液，其使用水性介质作为分散介质，并包括选自由聚丙烯酸、聚丙烯酸钠、聚环氧乙烷和聚‑γ‑谷氨酸钠组成的组的一种或多种化合物。本发明还提供了应用乳胶颗粒分散液的免疫凝集试剂。
技术研发人员：藤村建午,坂场义正,安原香知,堀内良介,加贺屋润,高良美乡,石原侑佳,增田雄大
受保护的技术使用者：积水医疗株式会社
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23