Hcvns3-ns4a蛋白酶抑制的制作方法
专利名称：Hcv ns3-ns4a蛋白酶抑制的制作方法
技术领域：
本发明涉及抑制丝氨酸蛋白酶、特别是抑制丙型肝炎病毒NS3-NS4A蛋白酶活性的化合物。这些化合物通过干扰HCV生命周期发挥作用，并且是有用的抗病毒药。本发明进而涉及既可离体应用也可给予HCV感染病人的组合物。本发明也涉及给病人施用本发明组合物治疗HCV感染的方法。
背景技术：
丙型肝炎病毒(“HCV”)感染是一个备受关注的人类医学问题。估计全球有3% 的人血清流行，故HCV被认为是大多数非甲非乙型肝炎病例的致病因子[Alberti A等.丙型肝炎的自然史.J Hepatology. 1999，31 (Suppl. 1) :17 M]。单单在美国约有4百万人可能被感染[Alter MJ等.美国病毒性肝炎的流行病学.Gastroenterol Clin North Am， 1994,23 :437 455 ;Alter MJ.美国的 HCV 感染.J Hepatology, 1999, 31 (Suppl 1) :88 91]。首次暴露于HCV，仅约20%感染者发展成临床急性肝炎，而其他人表现出感染自发消退。可是在几乎70%病例中HCV确立了能持续几十年的慢性感染[Iwarson S.慢性肝炎的自然病程.FEMS Microbiology Reviews，1994，14 :201 204 ;Lavanchy D 等·丙型肝炎的全球监督和管理.J Viral !fepatitiS，1999，6 :35 47]。这通常会造成复发和进行性恶化的肝脏炎症，常常会导致更严重的疾病状态如肝硬化和肝细胞癌[Kew MC.丙型肝炎和肝细胞癌.FEMS Microbiology Reviews，1994，14 :211 220 ;Saito I 等.HCV 感染伴发肝细胞癌.Proc Natl Acad Sci USA，1990，87 :6547 6549]。遗憾的是，对慢性HCV使人衰弱的进程尚无普遍有效的治疗方法。HCV基因组编码一种3010 3033个氨基酸的多聚蛋白[Choo QL等.HCV的多样性与基因组成.Proc Natl Acad Sci USA，1991，88 :2451 2455 ;Kato N 等·日本非甲非乙型肝炎病人的人类HCV基因组的分子克隆.ProcNatl Acad Sci USA, 1990,87 :9524 9528 ；Takamizawa A等·从人携带者中分离得到HCV基因组的结构和组织.J Virol, 1991, 65 :1105 1113]。推测这种HCV非结构性(NS)蛋白为病毒复制提供了必需的催化机制。NS蛋白由多聚蛋白的蛋白裂解而来[Bartenschlager R等.HCV的非结构性蛋白3 编码切割NS3/4和NS4/5接头所需的丝氨酸型蛋白酶.J Virol, 1993,67 :3835 3844 ； Grakoui A等.HCV编码的丝氨酸蛋白酶的特征蛋白酶依赖性多聚蛋白切割位点的测定.J Virol. 1993，67 :沘32 沘43 ；Grakoui A等.HCV多聚蛋白裂解产物的表达和鉴定.J Virol, 1993,67 :1385 1395 ；Tomei L等.NS3是HCV多聚蛋白加工所需的丝氨酸蛋白酶.J Virol,1993,67 :4017 4026]。HCV NS3包含丝氨酸蛋白酶活性，它可帮助加工处理大多数病毒酶，因此被认为对病毒复制和感染性是必需的。HCV NS3丝氨酸蛋白酶对病毒复制是必需的，因为催化三联体的取代导致在黑猩猩上感染性的丧失[Kolylchalov AA等.HCV编码的酶活性和3’非翻译区RNA保守元件是体内病毒复制所必需的.J Virol, 2000, 74 :2046 2051]。已知NS3的头181个氨基酸(病毒多聚蛋白的1027 1207残基)含有NS3的丝氨酸蛋白酶区域，能加工处理HCV多聚蛋白所有4个下游位点[Lin C等.HCV NS3丝氨酸蛋白酶反式裂解要求和加工动力学· J Virol, 1994，68，8147 8157]。HCV NS3丝氨酸蛋白酶及其相关辅助因子NS4A帮助加工病毒非结构性蛋白区成为包括所有病毒酶在内的各非结构性蛋白。这种加工类似于人免疫缺陷病毒天冬氨酰蛋白酶所进行的加工，此酶也涉及病毒蛋白的加工。抑制病毒蛋白加工的HIV蛋白酶抑制剂，对人是有效的抗病毒药，提示阻断病毒生命周期的这一阶段可导致具有治疗作用的活性药物产生。因此它是发现药物的有吸引力的靶标。现有技术描述了几种潜在的HCV蛋白酶抑制剂[PCT公开号W002/18369， WO 02/08244, WO 00/09558, WO 00/09543, WO 99/64442， W099/07733, WO 99/07734， WO 99/50230, WO 98/46630, WO 98/17679 和 W097/43310，美国专利 5，990, 276，Llinas-Brunet M等.Bioorg Med Chem Lett, 1998,8 :1713 18 ；Han W等.Bioorg Med Chem Lett, 2000, 10 711 13 ；Dunsdon R 等.Bioorg Med Chem Lett,2000,10 :1571 79 ；Llinas-Brunet M等.Bioorg Med Chem Lett, 2000,10 :2267 70和 LaPlante S等.Bioorg Med ChemLett, 2000，10 :2271 74]。不清楚这些化合物是否具有成为可接受药物的合适特征。而且发现那些抑制剂即使不是全部，也大多数是将基因型1 (la或lb)NS3-4A丝氨酸蛋白酶用作靶标。可是HCV存在有各种基因型，而且每种基因型中又有各种亚型。例如目前已知有11种 (编号1 11)主要HCV基因型，尽管其他人将它们分成6种主要基因型。每种基因型又进一步细分成各种亚型(la lc，2a 2c，3a 3b，4a 4e，5a，6a，7a 7b，8a 8b，9a， IOa和Ila)。亚型的流行性在全球范围内有如下变化
权利要求
1.抑制基因型-2丙型肝炎病毒(HCV)NS3-NS4A蛋白酶的方法，该方法包括将该蛋白酶与有效量的VX-950或其药学上可接受的盐接触以抑制该蛋白酶的活性。
2.抑制HCV基因型-3NS3-NS4A蛋白酶的方法，该方法包括将该蛋白酶与有效量的 VX-950或其药学上可接受的盐接触以抑制该蛋白酶的活性。
3.治疗患者HCV基因型-2感染的方法，该方法包括给予患者VX-950或其药学上可接受的盐。
4.治疗患者HCV基因型-3感染的方法，该方法包括给予患者VX-950或其药学上可接受的盐。
5.如权利要求3或4所述的方法，包括给予所述患者另一种物质的附加步骤，所述物质选自免疫调节剂、细胞色素P45抑制剂、抗病毒剂、HCV蛋白酶的第二抑制剂、HCV生命周期另一靶点的抑制剂、或它们的组合；其中所述另一种物质是作为VX-950的同一剂型的一部分或作为分开的剂型给予的。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述免疫调节剂为α-、β-或Y-干扰素或胸腺素；所述抗病毒剂为利巴韦林、金刚烷胺或替比夫定；或所述HCV生命周期另一靶点的抑制剂是HCV螺旋酶、聚合酶或金属蛋白酶的抑制剂。
7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述细胞色素ρ450抑制剂是利托那韦。
8.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述另一种物质是VX-497。
9.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述另一种物质是干扰素。
10.消除或减少生物样品或医药或实验室设备基因型-2或基因型-3HCV污染的方法， 该方法包括将所述生物样品或医药或实验室设备与VX-950接触的步骤。
11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述样品或设备选自体液、生物组织、外科设备、外科服装、实验室设备、实验室服装、血液或其他体液收集器具、血液或其他体液储备材料。
12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述体液为血液。
13.抑制HCV基因型-2NS3-NS4A蛋白酶的组合物，包括i)抑制HCV基因型-2NS3-NS4A蛋白酶有效量的VX-950或其药学上可接受的盐；和ii)可接受的载体、佐剂或赋形剂。
14.抑制HCV基因型-3NS3-NS4A蛋白酶的组合物，包括i)抑制HCV基因型-3NS3-NS4A蛋白酶有效量的VX-950或其药学上可接受的盐；和ii)可接受的载体、佐剂或赋形剂。
15.如权利要求13或14所述的组合物，其特征在于，所述组合物配制成用于对患者给药的形式。
16.如权利要求15所述的组合物，其特征在于，所述载体、佐剂或赋形剂是药学上可接受的载体、佐剂或赋形剂。
17.如权利要求16所述的组合物，其特征在于，所述组合物包括另一种物质，所述物质选自免疫调节剂、细胞色素P450抑制剂、抗病毒剂、HCV蛋白酶的第二抑制剂、HCV生命周期另一靶点的抑制剂、细胞色素P450抑制剂、或它们的组合。
18.如权利要求17所述的组合物，其特征在于，所述免疫调节剂为α-、β-或Y-干扰素或胸腺素；所述抗病毒剂为利巴韦林、金刚烷胺或替比夫定；或所述HCV生命周期另一靶点的抑制剂是HCV螺旋酶、聚合酶或金属蛋白酶的抑制剂。
19.如权利要求17所述的组合物，其特征在于，所述细胞色素p450抑制剂是利托那韦。
20.如权利要求17所述的组合物，其特征在于，所述另一种物质是VX-497。
21.如权利要求17所述的组合物，其特征在于，所述另一种物质是干扰素。
全文摘要
本发明涉及抑制非基因型1丙型肝炎病毒(HCV)NS3-NS4A蛋白酶的活性。更具体地涉及抑制HCV基因型-2或HCV基因型-3中该蛋白酶的活性。本发明的方法采用的抑制剂通过干扰HCV生命周期而起作用，并且也是有用的抗病毒剂。本发明还涉及包含这种化合物的组合物，这种化合物既可离体使用，也可给予罹患基因型-2或基因型-3HCV感染的患者。本发明还涉及通过给予包含本发明化合物的组合物对患者的HCV感染进行治疗。
文档编号A61K45/00GK102160891SQ20091026256
公开日2011年8月24日 申请日期2005年9月30日 优先权日2004年10月1日
发明者C·林, W·P·泰勒 申请人:威特克斯医药股份有限公司
技术领域：
本发明涉及抑制丝氨酸蛋白酶、特别是抑制丙型肝炎病毒NS3-NS4A蛋白酶活性的化合物。这些化合物通过干扰HCV生命周期发挥作用，并且是有用的抗病毒药。本发明进而涉及既可离体应用也可给予HCV感染病人的组合物。本发明也涉及给病人施用本发明组合物治疗HCV感染的方法。
背景技术：
丙型肝炎病毒(“HCV”)感染是一个备受关注的人类医学问题。估计全球有3% 的人血清流行，故HCV被认为是大多数非甲非乙型肝炎病例的致病因子[Alberti A等.丙型肝炎的自然史.J Hepatology. 1999，31 (Suppl. 1) :17 M]。单单在美国约有4百万人可能被感染[Alter MJ等.美国病毒性肝炎的流行病学.Gastroenterol Clin North Am， 1994,23 :437 455 ;Alter MJ.美国的 HCV 感染.J Hepatology, 1999, 31 (Suppl 1) :88 91]。首次暴露于HCV，仅约20%感染者发展成临床急性肝炎，而其他人表现出感染自发消退。可是在几乎70%病例中HCV确立了能持续几十年的慢性感染[Iwarson S.慢性肝炎的自然病程.FEMS Microbiology Reviews，1994，14 :201 204 ;Lavanchy D 等·丙型肝炎的全球监督和管理.J Viral !fepatitiS，1999，6 :35 47]。这通常会造成复发和进行性恶化的肝脏炎症，常常会导致更严重的疾病状态如肝硬化和肝细胞癌[Kew MC.丙型肝炎和肝细胞癌.FEMS Microbiology Reviews，1994，14 :211 220 ;Saito I 等.HCV 感染伴发肝细胞癌.Proc Natl Acad Sci USA，1990，87 :6547 6549]。遗憾的是，对慢性HCV使人衰弱的进程尚无普遍有效的治疗方法。HCV基因组编码一种3010 3033个氨基酸的多聚蛋白[Choo QL等.HCV的多样性与基因组成.Proc Natl Acad Sci USA，1991，88 :2451 2455 ;Kato N 等·日本非甲非乙型肝炎病人的人类HCV基因组的分子克隆.ProcNatl Acad Sci USA, 1990,87 :9524 9528 ；Takamizawa A等·从人携带者中分离得到HCV基因组的结构和组织.J Virol, 1991, 65 :1105 1113]。推测这种HCV非结构性(NS)蛋白为病毒复制提供了必需的催化机制。NS蛋白由多聚蛋白的蛋白裂解而来[Bartenschlager R等.HCV的非结构性蛋白3 编码切割NS3/4和NS4/5接头所需的丝氨酸型蛋白酶.J Virol, 1993,67 :3835 3844 ； Grakoui A等.HCV编码的丝氨酸蛋白酶的特征蛋白酶依赖性多聚蛋白切割位点的测定.J Virol. 1993，67 :沘32 沘43 ；Grakoui A等.HCV多聚蛋白裂解产物的表达和鉴定.J Virol, 1993,67 :1385 1395 ；Tomei L等.NS3是HCV多聚蛋白加工所需的丝氨酸蛋白酶.J Virol,1993,67 :4017 4026]。HCV NS3包含丝氨酸蛋白酶活性，它可帮助加工处理大多数病毒酶，因此被认为对病毒复制和感染性是必需的。HCV NS3丝氨酸蛋白酶对病毒复制是必需的，因为催化三联体的取代导致在黑猩猩上感染性的丧失[Kolylchalov AA等.HCV编码的酶活性和3’非翻译区RNA保守元件是体内病毒复制所必需的.J Virol, 2000, 74 :2046 2051]。已知NS3的头181个氨基酸(病毒多聚蛋白的1027 1207残基)含有NS3的丝氨酸蛋白酶区域，能加工处理HCV多聚蛋白所有4个下游位点[Lin C等.HCV NS3丝氨酸蛋白酶反式裂解要求和加工动力学· J Virol, 1994，68，8147 8157]。HCV NS3丝氨酸蛋白酶及其相关辅助因子NS4A帮助加工病毒非结构性蛋白区成为包括所有病毒酶在内的各非结构性蛋白。这种加工类似于人免疫缺陷病毒天冬氨酰蛋白酶所进行的加工，此酶也涉及病毒蛋白的加工。抑制病毒蛋白加工的HIV蛋白酶抑制剂，对人是有效的抗病毒药，提示阻断病毒生命周期的这一阶段可导致具有治疗作用的活性药物产生。因此它是发现药物的有吸引力的靶标。现有技术描述了几种潜在的HCV蛋白酶抑制剂[PCT公开号W002/18369， WO 02/08244, WO 00/09558, WO 00/09543, WO 99/64442， W099/07733, WO 99/07734， WO 99/50230, WO 98/46630, WO 98/17679 和 W097/43310，美国专利 5，990, 276，Llinas-Brunet M等.Bioorg Med Chem Lett, 1998,8 :1713 18 ；Han W等.Bioorg Med Chem Lett, 2000, 10 711 13 ；Dunsdon R 等.Bioorg Med Chem Lett,2000,10 :1571 79 ；Llinas-Brunet M等.Bioorg Med Chem Lett, 2000,10 :2267 70和 LaPlante S等.Bioorg Med ChemLett, 2000，10 :2271 74]。不清楚这些化合物是否具有成为可接受药物的合适特征。而且发现那些抑制剂即使不是全部，也大多数是将基因型1 (la或lb)NS3-4A丝氨酸蛋白酶用作靶标。可是HCV存在有各种基因型，而且每种基因型中又有各种亚型。例如目前已知有11种 (编号1 11)主要HCV基因型，尽管其他人将它们分成6种主要基因型。每种基因型又进一步细分成各种亚型(la lc，2a 2c，3a 3b，4a 4e，5a，6a，7a 7b，8a 8b，9a， IOa和Ila)。亚型的流行性在全球范围内有如下变化
权利要求
1.抑制基因型-2丙型肝炎病毒(HCV)NS3-NS4A蛋白酶的方法，该方法包括将该蛋白酶与有效量的VX-950或其药学上可接受的盐接触以抑制该蛋白酶的活性。
2.抑制HCV基因型-3NS3-NS4A蛋白酶的方法，该方法包括将该蛋白酶与有效量的 VX-950或其药学上可接受的盐接触以抑制该蛋白酶的活性。
3.治疗患者HCV基因型-2感染的方法，该方法包括给予患者VX-950或其药学上可接受的盐。
4.治疗患者HCV基因型-3感染的方法，该方法包括给予患者VX-950或其药学上可接受的盐。
5.如权利要求3或4所述的方法，包括给予所述患者另一种物质的附加步骤，所述物质选自免疫调节剂、细胞色素P45抑制剂、抗病毒剂、HCV蛋白酶的第二抑制剂、HCV生命周期另一靶点的抑制剂、或它们的组合；其中所述另一种物质是作为VX-950的同一剂型的一部分或作为分开的剂型给予的。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述免疫调节剂为α-、β-或Y-干扰素或胸腺素；所述抗病毒剂为利巴韦林、金刚烷胺或替比夫定；或所述HCV生命周期另一靶点的抑制剂是HCV螺旋酶、聚合酶或金属蛋白酶的抑制剂。
7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述细胞色素ρ450抑制剂是利托那韦。
8.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述另一种物质是VX-497。
9.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述另一种物质是干扰素。
10.消除或减少生物样品或医药或实验室设备基因型-2或基因型-3HCV污染的方法， 该方法包括将所述生物样品或医药或实验室设备与VX-950接触的步骤。
11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述样品或设备选自体液、生物组织、外科设备、外科服装、实验室设备、实验室服装、血液或其他体液收集器具、血液或其他体液储备材料。
12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述体液为血液。
13.抑制HCV基因型-2NS3-NS4A蛋白酶的组合物，包括i)抑制HCV基因型-2NS3-NS4A蛋白酶有效量的VX-950或其药学上可接受的盐；和ii)可接受的载体、佐剂或赋形剂。
14.抑制HCV基因型-3NS3-NS4A蛋白酶的组合物，包括i)抑制HCV基因型-3NS3-NS4A蛋白酶有效量的VX-950或其药学上可接受的盐；和ii)可接受的载体、佐剂或赋形剂。
15.如权利要求13或14所述的组合物，其特征在于，所述组合物配制成用于对患者给药的形式。
16.如权利要求15所述的组合物，其特征在于，所述载体、佐剂或赋形剂是药学上可接受的载体、佐剂或赋形剂。
17.如权利要求16所述的组合物，其特征在于，所述组合物包括另一种物质，所述物质选自免疫调节剂、细胞色素P450抑制剂、抗病毒剂、HCV蛋白酶的第二抑制剂、HCV生命周期另一靶点的抑制剂、细胞色素P450抑制剂、或它们的组合。
18.如权利要求17所述的组合物，其特征在于，所述免疫调节剂为α-、β-或Y-干扰素或胸腺素；所述抗病毒剂为利巴韦林、金刚烷胺或替比夫定；或所述HCV生命周期另一靶点的抑制剂是HCV螺旋酶、聚合酶或金属蛋白酶的抑制剂。
19.如权利要求17所述的组合物，其特征在于，所述细胞色素p450抑制剂是利托那韦。
20.如权利要求17所述的组合物，其特征在于，所述另一种物质是VX-497。
21.如权利要求17所述的组合物，其特征在于，所述另一种物质是干扰素。
全文摘要
本发明涉及抑制非基因型1丙型肝炎病毒(HCV)NS3-NS4A蛋白酶的活性。更具体地涉及抑制HCV基因型-2或HCV基因型-3中该蛋白酶的活性。本发明的方法采用的抑制剂通过干扰HCV生命周期而起作用，并且也是有用的抗病毒剂。本发明还涉及包含这种化合物的组合物，这种化合物既可离体使用，也可给予罹患基因型-2或基因型-3HCV感染的患者。本发明还涉及通过给予包含本发明化合物的组合物对患者的HCV感染进行治疗。
文档编号A61K45/00GK102160891SQ20091026256
公开日2011年8月24日 申请日期2005年9月30日 优先权日2004年10月1日
发明者C·林, W·P·泰勒 申请人:威特克斯医药股份有限公司
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