五女山冰葡萄酒hplc指纹图谱的构建方法
五女山冰葡萄酒hplc指纹图谱的构建方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，特别涉及五女山冰葡萄酒的指纹图谱的构建，属于食品分析技术领域。
【背景技术】
[0002]冰葡萄酒也称冰果酒，为酒中极品。由于冰冻条件苛刻其产量极少，所以冰葡萄酒为世界上最昂贵的酒种之一。由于其制作工艺独特，所以冰葡萄酒具有异于其它葡萄酒的独特风味，是独一无二的葡萄佳酿。葡萄酒质量的好坏与人们的身体健康密切相关，是食品质量控制的一个重要组成部分。葡萄酒的成分复杂，不能仅用一种成分来评价酒的质量以及作为酒产品的鉴定指标。近年来，葡萄酒质量检测及分析逐渐成为新的研究热点，指纹图谱技术被广泛应用于这一研究领域，葡萄酒的指纹图谱是指酒样本经光谱或色谱等现代分析技术手段获得的酒的特征图谱。对于成分复杂的葡萄酒，指纹图谱具有系统性、特征性和重复性，能展现出葡萄酒质量控制标准的整体性与模糊性。构建冰葡萄酒的指纹图谱，不仅能确立品牌冰葡萄酒的标志性指纹图谱，同时可以甄别冰葡萄酒的真伪，因此该检测方法得到了国际上的认可。
[0003]现今国内对葡萄酒指纹图谱的研究主要集中在葡萄酒香气成分上，但是单一的香气成分不足以对葡萄酒的品质进行全面的衡量，且产生的香气成分的特征指纹图谱差异性不强，无法有效的对葡萄酒产地和质量进行甄别。
[0004]根据目前的研究，对葡萄酒的指纹图谱的建立及质量判别研究，主要采用整酒萃取的方法得到图谱，如现有技术中还有通过HPLC-MS法建立葡萄酒黄酮类物质成分的指纹图谱，利用GC-MS法建立进口葡萄酒香气成份的指纹图谱，通过两种指纹图谱对进口葡萄酒的产地进行溯源和品质评定的相关报道(CN 103217487B)，但是该方法存在操作繁琐，需使用大量有机溶剂等问题。如HPLC-MS检测时，处理30g葡萄酒样品，需分次使用60mL乙酸乙酯，然后在40°C减压浓缩至近干，用3mL甲醇溶解，用于HPLC-MS检测。处理25g葡萄酒样品，需分次使用60mL 二氯甲烷，然后在45°C水浴氮气吹至lmL，用于GC-MS检测。检测的色谱条件程序升温的初始温度为40°C，保持3min，但样品处理时是在45°C下去溶剂，检测的初始温度为40°C没有意义。该两种方法均使用大量的有机溶剂，在去溶剂的过程中酒样品中的轻组分一并被去掉，使所得的萃取样品的代表性较差，同时也存在着由于使用大量的有机溶剂(两倍或两倍以上于样品的量)，溶剂中比重重的杂质会遗留在萃取的酒样品中，反而会干扰最终指纹谱图。
[0005]因此如何精准的得到冰葡萄酒的指纹图谱一直是本领域的难题。
【发明内容】
[0006]本发明为了解决现有技术中冰葡萄酒的指纹图谱准确性不高的问题，提供了一种用于五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，实现五女山冰葡萄酒的识别，确立其HPLC标志性指纹图谱。该方法简单快速，准确性高。
[0007]本发明的技术构思是这样的:由于冰葡萄酒香气很大，其香气成分基本存在于蒸汽中，因此发明人仅通过对蒸汽成分进行分析利用HPLC构建冰葡萄酒的指纹图谱。本发明无需添加任何有机溶剂进行萃取，通过蒸馏的方法得到冰葡萄酒的指纹图谱。为了避免指纹图谱中出现的较多谱峰对特种酒的特征信息的遮掩，使指纹图谱更具产品特点，图谱清晰、可辨，本发明采用蒸馏的方法，将冰葡萄酒通过蒸馏取其从初馏点开始的部分馏分酒，将馏分酒过膜，利用HPLC方法获得冰葡萄酒的指纹图谱。
[0008]本发明的技术要点是:将冰葡萄酒蒸馏，收集初馏点?102°C馏分，用HPLC构建指纹图谱。
[0009]进一步的，指纹图谱构建方法的具体步骤为:
[0010](1)收集馏分:取冰葡萄酒蒸馏，收集初馏点?102°C馏分；
[0011 ] (2)向馏分酒中装入已干燥的NaCl粉末，过0.45μπι膜后，用于HPLC分析；
[0012](3)指纹图谱构建:用HPLC方法获得冰葡萄酒的指纹图谱。
[0013]优选的，馏分与NaCl粉末的比例为(2?4)ml:lg。
[0014]作为本发明一个优选的实施例，HPLC条件:Hypers i 1 0DS(2.5ymX5.0mmX 250mm)色谱柱，流动相甲醇与0.5%甲酸比例为20:80，流速0.8111171^11，进样量2(^1^，检测波长284nm，柱箱温度30°C。
[0015]优选的，所述的冰葡萄酒为五女山橡木桶装冰葡萄酒。
[0016]收集馏分的温度与指纹图谱的准确性密切相关，因为冰葡萄酒中含有水分会造成图谱干扰，而由于冰葡萄酒的成分复杂，40°C蒸汽中就能检测出近59种成分。因此需要从初馏点至102°C的范围内收集馏分，在馏分酒过0.45πιμ膜前加入NaCl粉末的作用也是吸收水分，将收集到的馏分酒进行处理2h，然后过0.45πιμ膜。
[0017]与现有技术相比，本发明的有益效果是:本发明指纹图谱的构建方法简单、快速，无需添加有机溶剂进行萃取，指纹图谱准确性高，重复性好，图谱清晰、可辨，具有很强的差异性，可广泛应用于五女山冰葡萄酒的质量甄别。
【附图说明】
[0018]图1是辽宁五女山米兰酒业有限公司2013年、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分的HPLC图谱；其中，1、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒，2、2013年生产的橡木桶装冰葡萄酒；
[0019]图2是2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒馏分酒样6次实验所得图谱，图中:从a?f分别为第1次测试图谱、第2次测试图谱、…、第6次测试图谱；
[0020]图3是国产1#冰葡萄酒和2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分的HPLC图谱;其中，1、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒，3、国产1#冰葡萄酒；
[0021]图4是国产2#冰葡萄酒和2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分的HPLC图谱;其中，1、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒，4、国产2#冰葡萄酒；
[0022]图5是进口冰葡萄酒1#和2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分的HPLC图谱，其中，1、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒，5、进口 1#冰葡萄酒；
[0023]图6是进口冰葡萄酒2#和2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分的HPLC图谱，其中，1、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒，6、进口 2#冰葡萄酒。
【具体实施方式】
[0024]下面结合实施例对本发明做进一步说明，但不用于限制本发明的保护范围，下述实施例中如无特殊说明，所采用的实验方法均为常规方法，所用材料、试剂等均可从生物或化学公司购买。作为优选本发明采用日本岛津公司HPLC仪。
[0025]本发明可以甄别出冰葡萄酒与其他冰酒，特别是对于辽宁省桓仁冰酒产区生产的五女山冰葡萄酒。本发明可以使用辽 宁五女山米兰酒业有限公司任一种冰葡萄酒进行指纹图谱的构建，作为优选，下述实施例中所用五女山冰葡萄酒为辽宁五女山米兰酒业有限公司于2013年、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒。辽宁省本溪市桓仁县辽宁五女山米兰酒业有限公司从加拿大引进栽培的威代尔(Vidal)葡萄制作冰葡萄酒，本实施例针对桓仁县辽宁五女山米兰酒业有限公司橡木桶装冰葡萄酒构建指纹谱图，获得其指纹图谱。
[0026]本实施例所采用的国产1#是张裕威代尔(黄金冰谷)产自辽宁张裕冰酒酒庄有限公司；
[0027]国产2#是莫高冰葡萄酒(水晶冰)产自甘肃省武威市凉州区黄羊镇新河街1号；
[0028]进口1#是黑塔金冰酒产自德国莱茵肯德曼酒厂；
[0029]进口 2#是威代尔2005VQA白冰酒产自加拿大哈伯庄园酒庄。
[0030]实施例1
[0031](1)收集馏分:取70mL冰葡萄酒蒸馏，收集初馏点?102°C馏分；
[0032 ] (2)向馈分酒中装入已干燥的NaCl粉末1 g，2h后过0.45ηιμ膜，用于HPLC分析；
[0033](3)指纹图谱构建:用HPLC测定各不同的冰葡萄酒的HPLC图谱，获得各冰葡萄酒的指纹图谱。
[0034]HPLC 条件:
[0035]Hypers il 0DS(2.5μηι X 5.0mm X 250mm)色谱柱，流动相甲醇与Ο.5 %甲酸比例为20:80,流速0.8mL/min，进样量20yL，检测波长284nm，柱箱温度30°C。
[0036]辽宁五女山米兰酒业有限公司2013年、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分HPLC图谱如图1所示。由图1可见，两个年份的酒的总离子流图基本一致。
[0037]将辽宁五女山米兰酒业有限公司2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒馏分酒样进行6次实验所得图谱见图2。由图2可见，6次测定结果图谱完全吻合，说明本方法可靠、重复性好。
[0038]实施例2
[0039]五女山橡木桶装冰葡萄酒与市售国产冰葡萄酒HPLC指纹图谱的对比。
[0040](1)收集馏分:取70mL橡木桶装冰葡萄酒和市售的国产1#、国产2#冰葡萄酒蒸馏，分别收集初馏点?102°C馏分；
[0041 ] (2)向馈分酒中装入已干燥的NaCl粉末1 g，2h后过0.45ηιμ膜，用于HPLC分析；
[0042](3)指纹图谱构建:用HPLC测定各不同的冰葡萄酒的HPLC图谱，获得各冰葡萄酒的指纹图谱。
[0043]HPLC 条件:
[0044]Hypers il 0DS(2.5μηι X 5.0mm X 250mm)色谱柱，流动相甲醇与Ο.5 %甲酸比例为20:80,流速0.8mL/min，进样量20yL，检测波长284nm，柱箱温度30°C。
[0045]国产冰葡萄酒1#和2014年五女山橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分总离子流图如图3所示。由图3可见国产1#冰葡萄酒和五女山橡木桶装冰葡萄酒馏分酒样的HPLC指纹图谱均有一定的差异。
[0046]国产冰葡萄酒2#和2014年五女山橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分总离子流图如图4所示。由图4可见国产2#冰葡萄酒和五女山橡木桶装冰葡萄酒馏分酒样的HPLC指纹图谱均有一定的差异。
[0047]实施例3
[0048]五女山橡木桶装冰葡萄酒与市售进口冰葡萄酒HPLC总离子流图指纹图谱的对比。
[0049](1)收集馏分:取70mL橡木桶装冰葡萄酒和市售的进口 1#、进口 2#冰葡萄酒蒸馏，分别收集初馏点?102°C馏分；
[0050](2)向馏分酒中装入已干燥的NaCl粉末lg，2h后过0.45πιμ膜，用于HPLC分析；
[0051 ] (3)指纹图谱构建:用HPLC测定各不同的冰葡萄酒的HPLC图谱，获得各冰葡萄酒的指纹图谱。
[0052]HPLC 条件:
[0053]Hypers il 0DS(2.5μηι X 5.0mm X 250mm)色谱柱，流动相甲醇与0.5 %甲酸比例为20:80,流速0.8mL/min，进样量20yL，检测波长284nm，柱箱温度30°C。
[0054]进口冰葡萄酒1#和2014年五女山橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分总离子流图如图5所示。由图5可见进口 1#冰葡萄酒和五女山橡木桶装冰葡萄酒馏分酒样的HPLC指纹图谱均有一定的差异。
[0055]进口冰葡萄酒2#和2014年五女山橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分总离子流图如图6所示。由图6可见进口 2#冰葡萄酒和五女山橡木桶装冰葡萄酒馏分酒样的HPLC指纹图谱均有一定的差异。
【主权项】
1.五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，将冰葡萄酒蒸馏，收集初馏点?102°C馏分，用HPLC构建指纹图谱。2.根据权利要求1所述的五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤具体为: (1)收集馏分:取冰葡萄酒蒸馏，收集初馏点?102°C馏分； (2)向馈分酒中装入已干燥的NaCl粉末，过0.45μηι膜后，用于HPLC分析； (3)指纹图谱构建:用HPLC方法获得冰葡萄酒的指纹图谱。3.根据权利要求1所述的五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，馈分与NaCl粉末的比例为(2?4)ml: lg。4.根据权利要求1所述的五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，HPLC条件:Hypersil 0DS(2.5μηιX 5.0mmX 250mm)色谱柱，流动相甲醇与0.5%甲酸比例为20:80，流速0.8mL/min，进样量20yL，检测波长284nm，柱箱温度30°C。5.根据权利要求1所述的五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述的冰葡萄酒为五女山橡木桶装冰葡萄酒。
【专利摘要】本发明涉及冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，特别涉及五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，属于食品分析技术领域。本发明的技术要点是：将冰葡萄酒蒸馏，收集初馏点～102℃馏分，用HPLC构建指纹图谱。与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明指纹图谱的构建方法简单、快速，无需添加有机溶剂进行萃取，指纹图谱准确性高，重复性好，图谱清晰、可辨，具有很强的差异性，可广泛应用于五女山冰葡萄酒的质量甄别。
【IPC分类】G01N30/12
【公开号】CN105486783
【申请号】CN201511020598
【发明人】胡文忠, 祝鸿洲, 姜波, 姜爱丽, 田密霞, 冯可, 萨仁高娃, 白雪, 孙录
【申请人】大连民族大学, 辽宁五女山米兰酒业有限公司
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年12月30日
【技术领域】
[0001]本发明涉及冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，特别涉及五女山冰葡萄酒的指纹图谱的构建，属于食品分析技术领域。
【背景技术】
[0002]冰葡萄酒也称冰果酒，为酒中极品。由于冰冻条件苛刻其产量极少，所以冰葡萄酒为世界上最昂贵的酒种之一。由于其制作工艺独特，所以冰葡萄酒具有异于其它葡萄酒的独特风味，是独一无二的葡萄佳酿。葡萄酒质量的好坏与人们的身体健康密切相关，是食品质量控制的一个重要组成部分。葡萄酒的成分复杂，不能仅用一种成分来评价酒的质量以及作为酒产品的鉴定指标。近年来，葡萄酒质量检测及分析逐渐成为新的研究热点，指纹图谱技术被广泛应用于这一研究领域，葡萄酒的指纹图谱是指酒样本经光谱或色谱等现代分析技术手段获得的酒的特征图谱。对于成分复杂的葡萄酒，指纹图谱具有系统性、特征性和重复性，能展现出葡萄酒质量控制标准的整体性与模糊性。构建冰葡萄酒的指纹图谱，不仅能确立品牌冰葡萄酒的标志性指纹图谱，同时可以甄别冰葡萄酒的真伪，因此该检测方法得到了国际上的认可。
[0003]现今国内对葡萄酒指纹图谱的研究主要集中在葡萄酒香气成分上，但是单一的香气成分不足以对葡萄酒的品质进行全面的衡量，且产生的香气成分的特征指纹图谱差异性不强，无法有效的对葡萄酒产地和质量进行甄别。
[0004]根据目前的研究，对葡萄酒的指纹图谱的建立及质量判别研究，主要采用整酒萃取的方法得到图谱，如现有技术中还有通过HPLC-MS法建立葡萄酒黄酮类物质成分的指纹图谱，利用GC-MS法建立进口葡萄酒香气成份的指纹图谱，通过两种指纹图谱对进口葡萄酒的产地进行溯源和品质评定的相关报道(CN 103217487B)，但是该方法存在操作繁琐，需使用大量有机溶剂等问题。如HPLC-MS检测时，处理30g葡萄酒样品，需分次使用60mL乙酸乙酯，然后在40°C减压浓缩至近干，用3mL甲醇溶解，用于HPLC-MS检测。处理25g葡萄酒样品，需分次使用60mL 二氯甲烷，然后在45°C水浴氮气吹至lmL，用于GC-MS检测。检测的色谱条件程序升温的初始温度为40°C，保持3min，但样品处理时是在45°C下去溶剂，检测的初始温度为40°C没有意义。该两种方法均使用大量的有机溶剂，在去溶剂的过程中酒样品中的轻组分一并被去掉，使所得的萃取样品的代表性较差，同时也存在着由于使用大量的有机溶剂(两倍或两倍以上于样品的量)，溶剂中比重重的杂质会遗留在萃取的酒样品中，反而会干扰最终指纹谱图。
[0005]因此如何精准的得到冰葡萄酒的指纹图谱一直是本领域的难题。
【发明内容】
[0006]本发明为了解决现有技术中冰葡萄酒的指纹图谱准确性不高的问题，提供了一种用于五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，实现五女山冰葡萄酒的识别，确立其HPLC标志性指纹图谱。该方法简单快速，准确性高。
[0007]本发明的技术构思是这样的:由于冰葡萄酒香气很大，其香气成分基本存在于蒸汽中，因此发明人仅通过对蒸汽成分进行分析利用HPLC构建冰葡萄酒的指纹图谱。本发明无需添加任何有机溶剂进行萃取，通过蒸馏的方法得到冰葡萄酒的指纹图谱。为了避免指纹图谱中出现的较多谱峰对特种酒的特征信息的遮掩，使指纹图谱更具产品特点，图谱清晰、可辨，本发明采用蒸馏的方法，将冰葡萄酒通过蒸馏取其从初馏点开始的部分馏分酒，将馏分酒过膜，利用HPLC方法获得冰葡萄酒的指纹图谱。
[0008]本发明的技术要点是:将冰葡萄酒蒸馏，收集初馏点?102°C馏分，用HPLC构建指纹图谱。
[0009]进一步的，指纹图谱构建方法的具体步骤为:
[0010](1)收集馏分:取冰葡萄酒蒸馏，收集初馏点?102°C馏分；
[0011 ] (2)向馏分酒中装入已干燥的NaCl粉末，过0.45μπι膜后，用于HPLC分析；
[0012](3)指纹图谱构建:用HPLC方法获得冰葡萄酒的指纹图谱。
[0013]优选的，馏分与NaCl粉末的比例为(2?4)ml:lg。
[0014]作为本发明一个优选的实施例，HPLC条件:Hypers i 1 0DS(2.5ymX5.0mmX 250mm)色谱柱，流动相甲醇与0.5%甲酸比例为20:80，流速0.8111171^11，进样量2(^1^，检测波长284nm，柱箱温度30°C。
[0015]优选的，所述的冰葡萄酒为五女山橡木桶装冰葡萄酒。
[0016]收集馏分的温度与指纹图谱的准确性密切相关，因为冰葡萄酒中含有水分会造成图谱干扰，而由于冰葡萄酒的成分复杂，40°C蒸汽中就能检测出近59种成分。因此需要从初馏点至102°C的范围内收集馏分，在馏分酒过0.45πιμ膜前加入NaCl粉末的作用也是吸收水分，将收集到的馏分酒进行处理2h，然后过0.45πιμ膜。
[0017]与现有技术相比，本发明的有益效果是:本发明指纹图谱的构建方法简单、快速，无需添加有机溶剂进行萃取，指纹图谱准确性高，重复性好，图谱清晰、可辨，具有很强的差异性，可广泛应用于五女山冰葡萄酒的质量甄别。
【附图说明】
[0018]图1是辽宁五女山米兰酒业有限公司2013年、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分的HPLC图谱；其中，1、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒，2、2013年生产的橡木桶装冰葡萄酒；
[0019]图2是2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒馏分酒样6次实验所得图谱，图中:从a?f分别为第1次测试图谱、第2次测试图谱、…、第6次测试图谱；
[0020]图3是国产1#冰葡萄酒和2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分的HPLC图谱;其中，1、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒，3、国产1#冰葡萄酒；
[0021]图4是国产2#冰葡萄酒和2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分的HPLC图谱;其中，1、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒，4、国产2#冰葡萄酒；
[0022]图5是进口冰葡萄酒1#和2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分的HPLC图谱，其中，1、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒，5、进口 1#冰葡萄酒；
[0023]图6是进口冰葡萄酒2#和2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分的HPLC图谱，其中，1、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒，6、进口 2#冰葡萄酒。
【具体实施方式】
[0024]下面结合实施例对本发明做进一步说明，但不用于限制本发明的保护范围，下述实施例中如无特殊说明，所采用的实验方法均为常规方法，所用材料、试剂等均可从生物或化学公司购买。作为优选本发明采用日本岛津公司HPLC仪。
[0025]本发明可以甄别出冰葡萄酒与其他冰酒，特别是对于辽宁省桓仁冰酒产区生产的五女山冰葡萄酒。本发明可以使用辽 宁五女山米兰酒业有限公司任一种冰葡萄酒进行指纹图谱的构建，作为优选，下述实施例中所用五女山冰葡萄酒为辽宁五女山米兰酒业有限公司于2013年、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒。辽宁省本溪市桓仁县辽宁五女山米兰酒业有限公司从加拿大引进栽培的威代尔(Vidal)葡萄制作冰葡萄酒，本实施例针对桓仁县辽宁五女山米兰酒业有限公司橡木桶装冰葡萄酒构建指纹谱图，获得其指纹图谱。
[0026]本实施例所采用的国产1#是张裕威代尔(黄金冰谷)产自辽宁张裕冰酒酒庄有限公司；
[0027]国产2#是莫高冰葡萄酒(水晶冰)产自甘肃省武威市凉州区黄羊镇新河街1号；
[0028]进口1#是黑塔金冰酒产自德国莱茵肯德曼酒厂；
[0029]进口 2#是威代尔2005VQA白冰酒产自加拿大哈伯庄园酒庄。
[0030]实施例1
[0031](1)收集馏分:取70mL冰葡萄酒蒸馏，收集初馏点?102°C馏分；
[0032 ] (2)向馈分酒中装入已干燥的NaCl粉末1 g，2h后过0.45ηιμ膜，用于HPLC分析；
[0033](3)指纹图谱构建:用HPLC测定各不同的冰葡萄酒的HPLC图谱，获得各冰葡萄酒的指纹图谱。
[0034]HPLC 条件:
[0035]Hypers il 0DS(2.5μηι X 5.0mm X 250mm)色谱柱，流动相甲醇与Ο.5 %甲酸比例为20:80,流速0.8mL/min，进样量20yL，检测波长284nm，柱箱温度30°C。
[0036]辽宁五女山米兰酒业有限公司2013年、2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分HPLC图谱如图1所示。由图1可见，两个年份的酒的总离子流图基本一致。
[0037]将辽宁五女山米兰酒业有限公司2014年生产的橡木桶装冰葡萄酒馏分酒样进行6次实验所得图谱见图2。由图2可见，6次测定结果图谱完全吻合，说明本方法可靠、重复性好。
[0038]实施例2
[0039]五女山橡木桶装冰葡萄酒与市售国产冰葡萄酒HPLC指纹图谱的对比。
[0040](1)收集馏分:取70mL橡木桶装冰葡萄酒和市售的国产1#、国产2#冰葡萄酒蒸馏，分别收集初馏点?102°C馏分；
[0041 ] (2)向馈分酒中装入已干燥的NaCl粉末1 g，2h后过0.45ηιμ膜，用于HPLC分析；
[0042](3)指纹图谱构建:用HPLC测定各不同的冰葡萄酒的HPLC图谱，获得各冰葡萄酒的指纹图谱。
[0043]HPLC 条件:
[0044]Hypers il 0DS(2.5μηι X 5.0mm X 250mm)色谱柱，流动相甲醇与Ο.5 %甲酸比例为20:80,流速0.8mL/min，进样量20yL，检测波长284nm，柱箱温度30°C。
[0045]国产冰葡萄酒1#和2014年五女山橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分总离子流图如图3所示。由图3可见国产1#冰葡萄酒和五女山橡木桶装冰葡萄酒馏分酒样的HPLC指纹图谱均有一定的差异。
[0046]国产冰葡萄酒2#和2014年五女山橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分总离子流图如图4所示。由图4可见国产2#冰葡萄酒和五女山橡木桶装冰葡萄酒馏分酒样的HPLC指纹图谱均有一定的差异。
[0047]实施例3
[0048]五女山橡木桶装冰葡萄酒与市售进口冰葡萄酒HPLC总离子流图指纹图谱的对比。
[0049](1)收集馏分:取70mL橡木桶装冰葡萄酒和市售的进口 1#、进口 2#冰葡萄酒蒸馏，分别收集初馏点?102°C馏分；
[0050](2)向馏分酒中装入已干燥的NaCl粉末lg，2h后过0.45πιμ膜，用于HPLC分析；
[0051 ] (3)指纹图谱构建:用HPLC测定各不同的冰葡萄酒的HPLC图谱，获得各冰葡萄酒的指纹图谱。
[0052]HPLC 条件:
[0053]Hypers il 0DS(2.5μηι X 5.0mm X 250mm)色谱柱，流动相甲醇与0.5 %甲酸比例为20:80,流速0.8mL/min，进样量20yL，检测波长284nm，柱箱温度30°C。
[0054]进口冰葡萄酒1#和2014年五女山橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分总离子流图如图5所示。由图5可见进口 1#冰葡萄酒和五女山橡木桶装冰葡萄酒馏分酒样的HPLC指纹图谱均有一定的差异。
[0055]进口冰葡萄酒2#和2014年五女山橡木桶装冰葡萄酒初馏点?102°C馏分总离子流图如图6所示。由图6可见进口 2#冰葡萄酒和五女山橡木桶装冰葡萄酒馏分酒样的HPLC指纹图谱均有一定的差异。
【主权项】
1.五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，将冰葡萄酒蒸馏，收集初馏点?102°C馏分，用HPLC构建指纹图谱。2.根据权利要求1所述的五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤具体为: (1)收集馏分:取冰葡萄酒蒸馏，收集初馏点?102°C馏分； (2)向馈分酒中装入已干燥的NaCl粉末，过0.45μηι膜后，用于HPLC分析； (3)指纹图谱构建:用HPLC方法获得冰葡萄酒的指纹图谱。3.根据权利要求1所述的五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，馈分与NaCl粉末的比例为(2?4)ml: lg。4.根据权利要求1所述的五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，HPLC条件:Hypersil 0DS(2.5μηιX 5.0mmX 250mm)色谱柱，流动相甲醇与0.5%甲酸比例为20:80，流速0.8mL/min，进样量20yL，检测波长284nm，柱箱温度30°C。5.根据权利要求1所述的五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述的冰葡萄酒为五女山橡木桶装冰葡萄酒。
【专利摘要】本发明涉及冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，特别涉及五女山冰葡萄酒HPLC指纹图谱的构建方法，属于食品分析技术领域。本发明的技术要点是：将冰葡萄酒蒸馏，收集初馏点～102℃馏分，用HPLC构建指纹图谱。与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明指纹图谱的构建方法简单、快速，无需添加有机溶剂进行萃取，指纹图谱准确性高，重复性好，图谱清晰、可辨，具有很强的差异性，可广泛应用于五女山冰葡萄酒的质量甄别。
【IPC分类】G01N30/12
【公开号】CN105486783
【申请号】CN201511020598
【发明人】胡文忠, 祝鸿洲, 姜波, 姜爱丽, 田密霞, 冯可, 萨仁高娃, 白雪, 孙录
【申请人】大连民族大学, 辽宁五女山米兰酒业有限公司
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年12月30日
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