以嘧啶化合物为有效成分的医药组合物的制作方法
以嘧啶化合物为有效成分的医药组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及W喀晚化合物或其可药用盐为有效成分的、与FGFR4相关的癌的治疗 用医药组合物，作为另一方式，设及W喀晚化合物或其可药用盐为有效成分的、与FGF19相 关的癌的治疗用医药组合物，作为又另一方式，设及W喀晚化合物或其可药用盐为有效成 分的、FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物。
【背景技术】
[0002] 由成纤维细胞生长因子(FGF)及其受体成纤维细胞生长因子受体(FGFR)形成的信 号通路是生成进展中从早期胚胎形成起至各种器官形成为止的阶段中具有最重要功能的 信号通路之一。编码FGF的基因存在18种，编码FGFR的基因存在4种(FGFR1~4)，由各种类型 的细胞表达，与细胞增殖、分化和生存相关。已知FGF19为FGFR4的生理配体，饭后由小肠分 泌，并且已知通过肝脏的FGFR4来控制胆固醇的分解代谢(Nat Rev Drug Discov.2009 Mar; 8(3): 235-53)。另外，近年来，已经不出FGF19与包括肝癌、大肠癌在内的多种癌相关 (Cancer Cell.2011,19(3):347-58、0ncogene.2008Jan 3;27(l):85-97、Adv E邱 Med Biol.2012;728:183-94)。
[0003] 原发性的肝癌根据组织学分类被分为肝实质细胞癌、胆管细胞癌和肝母细胞瘤 等，肝实质细胞癌占原发性肝癌的约90%。肝实质细胞癌为预后不良的难治性癌症之一，尤 其是占诊断为肝实质细胞癌的患者的70%的不能外科切除的肝癌患者的5年生存率约为 1 0 %。即使外科切除后，1年内也有约2 5 %、5年内也有约8 0 %的患者复发 (化t.Rev.Gastroenterol .Hepatol .6,423-432(2009) ,(^incer M化Ct 2010,Treatment Architecture US(2011),National Cancer Institute,Physician Data Query(2012), GLOBOCAN 2008,IARC. http://globocan.iarc.fr/)。日本、美国、欧洲(法国、德国、意大利、 西班牙、英国）的肝癌治疗对象患者约为10万人(Cancer MPact 2010)。另外，肝癌治疗对象 患者在东南亚尤其多见，推测全世界的新患者数约为75万人（GL0B0CAN 2008， International Agency for Research on Cancer)〇
[0004] 作为不能外科切除的肝癌的分子祀向药物，唯一承认有sorafenib，生存期间从 7.9个月延长至10.7个月（1^化邑1116(1.2008化124;359(4):378-90)。
[0005] 近年来，已经做出了 W下报道:该报道提出FGF19基因扩增与肝实质细胞癌有关 (Cancer Cell .2011，19(3) :347-58)。根据该报道，肝实质细胞癌的14%在染色体llql3.3 区域中确认到基因扩增，在该区域中包含FGF19基因。另外，对于作为FGF19基因扩增阳性肝 实质细胞癌细胞株的化H-7细胞，通过在其培养液中添加 FGF19中和抗体，抑制了细胞增殖。 另外，给予FGF19中和抗体使皮下携带有化H-7细胞的裸鼠中的肿瘤生长得到抑制（Cancer Cell. 2011,19(3) :347-58)。此外，有W下报道:该报道提出，过表达FGF19的转基因小鼠自 然发展成肝癌(Am J化thol.2002Jun; 160(6) :2295-307)、FGF19在肝癌患者的肿瘤部位高 度表达且高度表达患者群预后不良（BMC Cancer. 2012化b 6; 12(1): 56)等、其他FGF19与肝 癌的关联。
[0006] 另一方面，提出了过表达FGF19的转基因小鼠的肝癌发病被编码FGFR4的基因缺陷 抑审ij，因此FGF19通过FGFR4与肝癌发病相关(PLoS 〇116.2012;7巧）：636713)。此夕1'，示出了： 通过WRNAi效应抑制FGF19基因扩增阳性肝实质细胞癌细胞株的FGFR4表达、或者通过在培 养液中添加 FGFR4中和抗体从而抑制FGFR4的功能，由此抑制了细胞增殖（CanC er Discov.2012Dec；2(12):1118-33^BMC Cancer.2012 Feb 6；12:56^PLoS One.2012；7(5): 636713)。运些报道教导了 W下可能性:对于具有FGF19基因扩增的肝实质细胞癌患者的治 疗，FGFR4抑制剂是有效的。
[0007] 近年来，报道了各种癌种类的发病中FGF信号的重要性，进行了 FGFR或FGF选择性 抑制剂的开发（化ture Reviews Cancer 2010，10，116-129、J.Med.^em.2011，54,7066-7083、AACR 2011,No.1643AstraZeneca)。
[0008] 报道了下式(Xl)的化合物示出各种激酶抑制，可用作癌及屯、肌梗塞等的血管障碍 治疗剂（专利文献1)。在该文献的表2中披露了某些化合物对化S、VEGFR、EphB4、PDGF祕和 FGFRl的激酶抑制的试验结果，披露了FGFRl抑制活性的ICso值比1000 nM大，与其他激酶活性 抑制相比弱。另外，该文献中没有披露作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物。
[0009] [化学式1]
[001 U (式中，A各自为CH、N等，B各自为CH等，Al为0、CR2等，A2为NR、0等，Ro为H等，R为H等， 1^1为键、0等，L2为键、C广Cs烷基等，Ri为二兀至六兀杂环等，而且Re、Rf为C广Cs烷基、径烷基 等。其他符号参考该公报。）
[0012]报道了下式(X2)的化合物显示出Abl抑制作用，对于各种癌有用（专利文献2)。然 而，该文献中没有关于FGFR抑制作用的具体记载。此外，该文献中没有披露作为本发明的医 药组合物的有效成分的化合物。
[OOU][化学式2]
[0015] (式中，G为CH等，A为3-径基苯基等，Y为乙締基或亚乙基。其他符号参考该公报。）
[0016] 报道 了下式(X3)的化合物对于由 Sr C、VEGFR2、Ye S、Fyn、Lck、Ab 1、PDGFR、EGFR 及 RET构成的各种激酶具有抑制作用，可W用于治疗癌、血管障碍等(专利文献3)。然而，该文 献中没有披露对于FGFR的抑制作用。此外，该文献中没有披露作为本发明的医药组合物的 有效成分的化合物。
[0017] [化学式3]
[0019] 试中，Gi表示可被取代的芳基、可被取代的杂芳基等，Li表示0、50、5〇2、可被取代 的烷基等，L2表不可被取代的烷基、杂环等，Al表不键、0、C(Ra)2等，As表不NRa、0等，Ra表不H 等。其他符号参考该公报。）
[0020] 在本申请最早的优先权日之后公开的文献(专利文献4)中披露了下式(X4)的化合 物作为与FGFRlJ和/或村目关的各种癌，例如与FGFRl相关的肺癌或激素疗法抵抗性的乳 癌、与FGFR2相关的胃癌、S阴性乳腺癌或子宫内膜癌、W及与FGFR3相关的膀脫癌及成胶质 母细胞瘤的治疗剂是有用的。而且，在该文献中将作为本发明的医药组合物的有效成分的 化合物作为实施例化合物具体公开，但是关于FGFR4抑制作用和对肝癌的作用没有公开。
[0021] [化学式4]
[0023] (式中的符号参考该公报。）
[0024] 现有技术文献 [00巧]专利文献
[00%] 专利文献1:国际公开第WO 2006/101977号小册子
[0027] 专利文献2:国际公开第WO 2007/056075号小册子
[0028] 专利文献3:国际公开第WO 2008/008234号小册子 [00巧]专利文献4:国际公开第WO 2013/129369号小册子
【发明内容】
[0030] 发明所要解决的课题
[0031] 提供一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，作为另一方式与FGF19相关的癌 的治疗用医药组合物，作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物。
[0032] 解决课题的手段
[0033] 本发明人W制备与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，作为另一方式与FGF19相 关的癌的治疗用医药组合物，作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合 物为目的，对于具有FGFR4抑制作用的化合物进行了深入探讨，结果发现，特定的喀晚化合 物或其可药用盐具有优异的FGFR4抑制作用，W运些化合物为有效成分的医药组合物作为 与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合 物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物是有用的，从而完成了本 发明。
[0034] 旨P，本发明设及一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、作为另一方式与 FGF19相关的癌的治疗用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医 药组合物，其包含5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基赃 嗦-1-基)赃晚-1-基]苯基}喀晚-2-胺下有时称为"化合物A"。）、2-[4-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基}氨基)-lH-化挫-1-基化醇m下有时称为"化合物 B"。）、（2R)-3-[4-( {5-[ (2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基）氧基]喀晚-2-基}氨基比挫-1-基]丙烷-1,2-二醇下有时称为"化合物护。）、5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧 基]-N-[4-(4-甲基赃嗦-1-基）苯基]喀晚-2-胺m下有时称为"化合物护。）或5-[(2,6-二 氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-U-甲基-5-[(4-甲基赃嗦-1-基）甲基]-IH-化挫-3-基}喀 晚-2-胺（W下有时称为"化合物E"。）或其可药用盐、W及赋形剂。
[0035] 需要说明的是，本发明的医药组合物所设及的化合物A、化合物B、化合物C、化合物 D和化合物E为上述专利文献4中具体记载的化合物。
[0036] 另外，本发明包括与FGFR4相关的癌的治疗剂、作为另一方式与FGF19相关的癌的 治疗剂、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌治疗剂，其包含化合物A、化合物B、化合物 C、化合物D或化合物E、或它们的可药用盐。
[0037] 另外，本发明设及化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或它们的可药 用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗 用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物中的用途;化 合物A、化合物B、化合物C、 化合物D或化合物E、或它们的可药用盐在与FGFR4相关的癌的治 疗、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌治疗 中的用途;用于治疗与FGFR4相关的癌、作为另一方式用于治疗与FGF19相关的癌、作为又另 一方式用于治疗FGF19基因扩增阳性肝癌的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物 E、或它们的可药用盐；W及与FGFR4相关的癌的治疗方法、作为另一方式与FGF19相关的癌 的治疗方法、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌治疗方法，其包括向对象施用有效量 的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或它们的可药用盐。需要说明的是，"对 象"是指需要该治疗的人或其他动物，作为某一方式，为需要该治疗的人。
[003引发明的效果
[0039] 作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化 合物E、或它们的可药用盐具有FGFR4抑制作用，可W用作与FGFR4相关的癌的治疗用医药组 合物、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩 增阳性肝癌的治疗用医药组合物的有效成分。
【具体实施方式】
[0040] W下详细说明本发明。
[0041 ] 5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基）氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基赃嗦-1- 基)赃晚-1-基]苯基}喀晚-2-胺(化合物A)的化学结构如下所示。
[0042][化学式引
[0044] (式中，Me表示甲基。需要说明的是，关于其W下的化学式，同样地Me也表示甲基。）
[0045] 另外，2-[4-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基}氨基)-lH-化 挫-1-基]乙醇(化合物B)的化学结构如下所示。
[0046] [化学式6]
[004引此外，（2R)-3-[4-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基}氨基)-IH-化挫-1-基]丙烷-1,2-二醇(化合物C)的化学结构如下所示。
[0049][化学式7]
[0051 ] 此外，5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[4-(4-甲基赃嗦-1-基）苯基] 喀晚-2-胺(化合物D)的化学结构如下所示。
[0化2][化学式引
[0054] 此外，5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]甲基-5-[(4-甲基赃嗦-1-基）甲基]-IH-化挫-3-基}喀晚-2-胺(化合物E)的化学结构如下所示。
[0055] [化学式9]
[0057]"与FGFR4相关的癌"是指FGFR4的激活与癌的发病、进展相关的癌。例如，是指发生 作为FGFR4的配体的FGF19的基因扩增（Cancer Cell. 2011,19(3): 347-58)、或表达增强的 癌（Oncogene. 2008 化n 3; 27( 1): 85-97)、或FGFR4的激活突变（例如，具有从 WGenBank登 录号:NM_002011.3定义的FGFR4亚型1的535号的天冬酷胺到天冬氨酸或赖氨酸的突变、从 第550号的鄉氨酸到亮氨酸或谷氨酸的突变的癌（J Clin Invest.2009 Nov; 119(11): 3395-407)、具有从第376号的酪氨酸到半脫氨酸的突变的癌（Oncogene. 2010 Mar 11;29 (10) :1543-52.)、具有从第712号的脯氨酸到苏氨酸的突变的癌（Proc化tl Acad Sci USA.2013 Jul 8化油址ead of print PMID:23836671))等。
[005引"与FGF19相关的癌"是指发生FGF19的基因扩增或表达增强的癌。基因扩增的诊断 可W使用FISH(巧光原位杂交)法、阵列比较基因组杂交法等利用了杂交的方法、或数字化 PCR(聚合物酶链反应)法的PCR法等多种方法。
[0059] "FGF19基因扩增阳性肝癌"是指在肝癌患者中，FGF19基因区域扩增的患者中的肝 癌。FGF19基因扩增阳性肝癌的患者与FGF19基因没有扩增的患者或者正常人相比， FGF19mRNA和/或FGF19蛋白质的表达量增强，因此也可W WFGF19mRNA和/或FGF19蛋白质为 指标进行诊断。作为一例，FGF19mRNA表达可通过PCR法或核酸杂交法来测定。组织中的 FGF19蛋白质可通过免疫组织化学法等（PLoS One.2012;7(5):e36713、0ncogene.2008 Jan 3 ; 2 7 ( I) : 8 5 - 9 7 )检：J则，血液中的F G FI 9蛋白质可通过酶联免疫吸附测定法（B M C 化nce;r.2012Feb 6;12(1):56)检测。
[0060] 本发明的一些方式在下面示出。
[0061] (1-1)-种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物A或其可药用盐、 W及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物A或 其可药用盐、W及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合 物，其包含化合物A或其可药用盐、W及赋形剂。
[0062] (1-2)化合物A或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用 途。作为另一方式，化合物A或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中 的用途。作为又另一方式，化合物A或其可药用盐在制造 FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医 药组合物中的用途。
[0063] (1-3)化合物A或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式， 化合物A或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物A或其 可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
[0064] (1-4)-种化合物A或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方 式，一种化合物A或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化 合物A或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
[0065] (1-5)-种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物A或其可药用盐 施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物A或 其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括 将有效量的化合物A或其可药用盐施用给对象。
[0066] (2-1)-种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物B或其可药用盐、 W及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物B或 其可药用盐、W及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合 物，其包含化合物B或其可药用盐、W及赋形剂。
[0067] (2-2)化合物B或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用 途。作为另一方式，化合物B或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中 的用途。作为又另一方式，化合物B或其可药用盐在制造 FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医 药组合物中的用途。
[0068] (2-3)化合物B或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式， 化合物B或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物B或其 可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
[0069] (2-4)-种化合物B或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方 式，一种化合物B或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化 合物B或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
[0070] (2-5)-种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物B或其可药用盐 施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物B或 其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括 将有效量的化合物B或其可药用盐施用给对象。
[0071] (3-1)-种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物C或其可药用盐、 W及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物C或 其可药用盐、W及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合 物，其包含化合物C或其可药用盐、W及赋形剂。
[0072] (3-2)化合物C或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用 途。作为另一方式，化合物C或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中 的用途。作为又另一方式，化合物C或其可药用盐在制造 FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医 药组合物中的用途。
[0073] (3-3)化合物C或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式， 化合物C或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物C或其 可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
[0074] (3-4)-种化合物C或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方 式，一种化合物C或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化 合物C或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
[0075] (3-5)-种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物C或其可药用盐 施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物C或 其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括 将有效量的化合物C或其可药用盐施用给对象。
[0076] (4-1)-种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物D或其可药用盐、 W及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物D或 其可药用盐、W及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合 物，其包含化合物D或其可药用盐、W及赋形剂。
[0077] (4-2)化合物D或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用 途。作为另一方式，化合物D或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中 的用途。作为又另一方式，化合物D或其可药用盐在制造 FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医 药组合物中的用途。
[0078] (4-3)化合物D或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式， 化合物D或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物D或其 可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
[0079] (4-4)-种化合物D或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方 式，一种化合物D或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化 合物D或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
[0080] (4-5)-种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物D或其可药用盐 施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物D或 其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括 将有效量的化合物D或其可药用盐施用给对象。
[0081] (5-1)-种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物E或其可药用盐、 W及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物E或 其可药用盐、W及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合 物，其包含化合物E或其可药用盐、W及赋形剂。
[0082] (5-2)化合物E或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用 途。作为另一方式，化合物E或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中 的用途。作为又另一方式，化合物E或其可药用盐在制造 FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医 药组合物中的用途。
[0083] (5-3)化合物E或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式， 化合物E或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物E或其 可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
[0084] (5-4)-种化合物E或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方 式，一种化合物E或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化 合物E或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
[0085] (5-5)-种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物E或其可药用盐 施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物E或 其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括 将有效量的化合物E或其可药用盐施用给对象。
[0086] 此外，"化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E的可药用盐"是指化合物A、 化合物B、化合物C、化合物D或化合物E的酸加成盐，具体来说，可W举出与盐酸、氨漠酸、氨 舰酸、硫酸、硝酸、憐酸等的无机酸，或与甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、班巧酸、富马酸、马 来酸、乳酸、苹果酸、苦杏仁酸、酒石酸、二苯甲酯基酒石酸、二甲苯酷基酒石酸、巧樣酸、甲 横酸、乙横酸、苯横酸、P-甲苯横酸、天冬氨酸、谷氨酸等有机酸的酸加成盐。需要说明的是， "化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E"包括化合物A、化合物B、化合物C、化合物D 或化合物E的溶剂合物，具体而言，例如水合物和乙醇合物。
[0087] 需要说明的是，作为"化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可药用 盐"的某些方式，可W举出没有形成盐的游离碱（71)-八一乂），即化合物A、化合物B、化合 物C、化合物D或化合物E，作为另一方式，为化合物A，作为又另一方式，为化合物B，作为又另 一方式，为化合物C，作为又另一方式，为化合物D，作为又另一方式，为化合物E。
[0088] 含有化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可药用盐作为有效成分 的医药组合物可W使用本领域常用的赋形剂（即药用赋形剂和药用载体等），并通过常用的 方法来制备。
[0089] 给药可W为通过片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液体制剂等的口服给药，或者 通过静脉内等的注射剂、栓剂、经皮用液体制剂、经皮贴剂、经粘膜液体制剂等的非经口给 药中的任意一种形式。
[0090] 作为用于经口给药的固体组合物，可W使用片剂、散剂、颗粒剂等。在运样的固体 组合物中，将1种或巧巾W上的有效成分与至少一种惰性赋形剂混合。按照常规方法，组合物 也可W含有惰性添加剂，例如润滑剂或崩解剂、稳定剂、溶解助剂。根据需要，片剂或丸剂也 可W用糖衣或者胃溶性或肠溶性物质的膜进行包衣。
[0091] 用于经口给药的液体组合物包括可药用的乳液剂、溶液剂、悬浮剂、糖浆剂或馳剂 等，并且含有通常可使用的惰性稀释剂，例如纯化水或乙醇。除了惰性稀释剂W外，该液体 组合物中也可W含有诸如增溶剂、润湿剂、悬浮剂之类的助剂、甜味剂、矫味剂、芳香剂、防 腐剂。
[0092] 用于非经口给药的注射剂包括无菌的水性或非水性溶液制剂、悬浮剂或乳液剂。 作为水性溶剂，包括(例如)注射用蒸馈水或生理盐水。作为非水性溶剂，例如有乙醇之类的 醇类。运样的组合物还可W含有等渗剂、防腐剂、润湿剂、乳化剂、分散剂、稳定剂、或溶解助 剂。例如，可W采用通过可截留细菌的过滤器进行过滤、添加杀菌剂或者进行福射的方法来 对所述组合物进行灭菌。此外，也可W将运些组合物制成无菌的固体组合物，在使用前将其 溶解或混悬于无菌水或无菌的注射用溶剂中而使用。
[0093] 通常口服给药时，1天的给药量按体重约为0 . OOlmg/kg~lOOmg/kg，优选为 O.Olmg/kg~30mg/kg，更优选为0.1 mg/kg~lOmg/kg，并将该给药量1次服用或分2次~4次 服用。静脉内给药时，1天的给药量按体重约为O.OOOlmg/kg~lOmg/kg是适当的，并将该给 药量分为每日一次至多次给药。而且，使用经粘膜剂时，按体重约为0.OOlmg/kg~IOOmg/ kg，分为每日一次至多次给药。应考虑症状、年龄、性别等，根据每个患者的情况，来适当地 决定给药量。
[0094] 虽然根据给药路径、剂型、给药部位、赋形剂或添加剂的种类而不同，但本发明的 医药组合物含有0.01至100重量％、作为一个方式0.01至50重量％的作为有效成分的巧中或 其W上的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可药用盐。
[00M]本发明的医药组合物可W与被认为对癌(尤其是与FGFR4相关的癌、与FGF19相关 的癌、FGF19基因扩增阳性肝癌或肝癌)表现出有效性的各种治疗剂或预防剂并用。在并用 时，可W同时给药，或者分别连续给药、或按所希望的时间间隔给药。同时给药时的制剂可 W是配合剂，也可W分别制成制剂。
[0096] 实施例
[0097] 下面将化合物A、化合物B、化合物C、化合物D及化合物E的制造方法作为制造例示 出。需要说明的是，运些化合物的制造方法不仅限于W下示出的具体制造例的制造方法，也 可W通过运些制造方法的组合、或本领域技术人员显而易见的方法来制造。此外，运些化合 物也可W通过前述专利文献4中记载的方法或者W其为标准的方法来制造。
[009引审雌例1化合物A的制造
[0099] (1)将3,5-二甲氧基苯甲酸甲醋（Ig)和乙腊(20血)的混合物用冰冷却，加入N-氣-N'-(氯甲基)=乙二胺双（四氣棚酸盐）（4.09g)，在室溫下揽拌整夜。向反应混合物中加入 饱和碳酸氨钢水溶液，用乙酸乙醋萃取。用饱和食盐水洗涂有机层，加入无水硫酸儀和碱性 硅胶，揽拌30分钟后，过滤。将滤液减压浓缩，之后用硅胶柱色谱（乙酸乙醋/己烧)纯化残留 物，得到2，6-二氣-3，5-二甲氧基苯甲酸甲醋(292mg)。
[0100] MS化SI+):233[(M+H)+].
[0101] (2)将2,6-二氣-3,5-二甲氧基苯甲酸甲醋（IOg)和四氨巧喃(57血)的混合物用冰 冷却，加入棚氨化裡(3.OmoVL四氨巧喃溶液，43mL)之后，在室溫下揽拌65小时。将反应混 合物再次用冰冷却，进一步加入棚氨化裡(3.Omol/L四氨巧喃溶液，14.4mL)，在室溫下揽拌 22小时。将反应混合物用冰冷却，并缓缓加入到冰水（300mL)中。进一步缓缓加入浓盐酸 (25mL)，在室溫下揽拌1小时。用甲苯/乙酸乙醋（1:1)萃取，用饱和碳酸氨钢水溶液和饱和 食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸儀干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，得到（2，6-二氣-3，5-二甲氧基苯基）甲醇(8.67g)。
[0102] MS(EI+):204[(M)"].
[0103] (3)将（2,6-二氣-3,5-二甲氧基苯基）甲醇（1.71g)、S乙胺（2.57mL)和四氨巧喃 (34.2mL)的混合物用冰冷却，加入甲横酷氯(716化)后，揽拌1小时。滤除不溶物后，将滤液 减压浓缩。向残余物中加水，用乙酸乙醋萃取。用饱和食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸儀 干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，得到甲横酸2，6-二氣-3，5-二甲氧基苄基醋(2.32g)。
[0104] NMR(DMS0-d6):3.24(3H,s),3.88(6H,s),5.30(2H,s),7.12(lH,t J = 8.4Hz).
[0105] (4)向2-氯-5-?基喀晚(4.38g)、甲横酸2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基醋（7.89g) 和N，N-二甲基甲酯胺(78.9mL)的混合物中加入碳酸钟(9.27g)后，在60°C下揽拌1小时。向 反应混合物中加入水后，在冰冷却下揽拌30分钟。过滤收集生成的固体，用水洗涂后，减压 干燥，得到2-氯-5-[ (2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚(8.53g)。
[0106] MS(APCI/ESI+):317[(M+H)+].
[0107] (5)在氣气氛下，于室溫下向2-氯-5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚 (1.03邑）、3-甲氧基-4-[4-(4-甲基赃嗦-1-基)赃晚-1-基]苯胺（1.29邑）、1，1'-联糞-2,2'-二基双（二苯基麟）（609mg)、碳酸飽（3.19g)及二嗯烧（20.6mL)的混合物中加入乙酸钮 (146mg)，在100°C下揽拌4小时。向反应混合物中加入水，用乙酸乙醋萃取。用饱和食盐水洗 涂有机层，并用无水硫酸儀干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，将残余物用硅胶柱色谱(氯仿/ 甲醇/浓氨水)纯化，之后用碱性硅胶柱色谱（乙酸乙醋)纯化后，用乙酸乙醋、之后用乙醇固 化，得到5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基赃嗦-I-基） 赃晚-1-基]苯基}喀晚-2-胺(化合物A:830mg)。
[010 引 MS(ESI+):585[(M+H) + ].
[0109] 醒R(DMS0-d6):1.45-1.60(2H，m)，1.73-1.84(2H，m)，2.14(3H，s)，2.17-2.58 alH，m)，3.24-3.36(2H，m)，3.75(3H，s)，3.87(細，s)，5.16(2H，s)，6.79(lH，d，J = 8.細z)， 7.07(lH,t J = 8.4Hz), 7.24( lH,ddJ = 8.8,2.4Hz), 7.32( lH,dJ = 2.4Hz),8.29(2H,s), 9.21(lH,s).
[0110] 制造例2化合物B的制造
[0111] (I)在氣气氛下，于室溫下向用与制造例1(4)相同的方法制造的2-氯-5-[(2,6-二 氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚(800mg)、2-(4-氨基-lH-化挫-1-基）乙醇(642mg)、l，^-联糞-2,2'-二基双(二苯基麟）（472mg)、碳酸飽(2.47g)及二嗯烧a6mU的混合物中加入醋 酸钮（113mg)，在100°C下揽拌6小时。向反应混合物中加入水和氯仿，滤除不溶物后，用氯仿 萃取滤液。用饱和食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸儀干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，用娃 胶柱色谱(氯仿/甲醇)纯化残余物，得到2-[4-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基] 喀晚-2-基傷基)-lH-化挫-1-基化醇(化合物B: 139mg)。
[0112] MS化SI+):408[(M+H)+].
[011引 匪R(DMS0-d6) :3.69(2H，dd，J=ll .0,5.6Hz)，3.87(6H，s)，4.07(2H，t，J = 5.6Hz) ,4.83( lH，t, J = 5.4Hz)，5.14(2H，s) ,7.07( lH，t，J = 8.4Hz) ,7.45( lH，d, J = 0.細z)，7.88(lH，d，J = 0.細z)，8.26(2Hs)，9.20(lH，s).
[0114] 制造例3化合物C的制造
[0115] (I)在氣气氛下，于室溫下向用与制造例1(4)相同的方法制造的2-氯-5-[(2,6-二 氣-3,5-二甲氧基苄基）氧基]喀晚（1.33g)、l-(四氨-2H-化喃-2-基）-lH-化挫-4-胺 (913mg)、l，r-联糞-2,2'-二基双(二苯基麟）（785mg)、乙酸钮（189mg)及二嗯烧(26.6mL) 的混合物中加入碳酸飽(4.11 g )，在100°C下揽拌4小时。向反应混合物中加入水，用乙酸乙 醋萃取。用饱和食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸钢干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，用硅胶 柱色谱（乙酸乙醋/己烧)纯化残余物，得到5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[l-(四氨-2H-化喃-2-基)-IH-化挫-4-基]喀晚-2-胺（1.73g)。
[0116] MS(APCI/ESI+):448[(M+H) + ].
[0117] (2)向 5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[l-(四氨-2H-化喃-2-基)-lH-化挫-4-基]喀晚-2-胺(3.59g)及甲醇（20mL)的混合物中加入氯化氨(4mol/L二嗯烧溶液， 40mL)，在室溫下揽拌6小时。将反应混合物减压浓缩后，向残余物中加入饱和碳酸氨钢水溶 液。过滤收集生成的固体，用二乙酸洗涂后，减压干燥，得到5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基节 基)氧基]-N-QH-化挫-4-基)喀晚-2-胺(2.9邑）。
[0118] MS(APCI/ESI+):364[(M+H) + ].
[0119] (3)向5-[ (2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基）氧基]-N-UH-化挫-4-基）喀晚-2-胺 (50mg)、碳酸钟(57mg)及N，N-二甲基甲酯胺（ImL)的混合物中加入4-甲基苯横酸[(4S)-2， 2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]甲醋（IlSmg)，在60°C下揽拌1小时，并在110°C下揽拌4天。 向反应混合物中加入水，用乙酸乙醋萃取。用饱和食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸儀干燥 后，过滤。将滤液减压浓缩后，将得到的残余物用硅胶柱色谱（乙酸乙醋/己烧)纯化，得到5-
[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-(l-{ [(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]甲 基} -IH-化挫-4-基)喀晚-2-胺(39mg)。
[0120] MS(APCI/ESI+):478[(M+H)"].
[0121] (4)向5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-a-{[(4R)-2,2-二甲基-l，3-二氧戊环-4-基]甲基} -IH-化挫-4-基)喀晚-2-胺(45mg)及四氨巧喃（2mL)的混合物中加入 盐酸（lmol/L、lmU，在50°C下揽拌3小时。向反应混合物中加入饱和碳酸氨钢水溶液，用氯 仿萃取。用饱和食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸钢干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，用硅胶 柱色谱(氯仿/甲醇）纯化残余物后，用乙酸乙醋固化，得到（2R)-3-[4-({5-[(2,6-二氣-3， 5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基傷基)-lH-化挫-1-基]丙烷-1,2-二醇(化合物C:25mg)。
[0122] MS化SI+):438[(M+H)+].
[0123] NMR(DMS0-d6):3.23-3.38(2H,m),3.72-3.80(lH，m),3.84-3.96(7H,m),4.15(1H, dd J=13.8,4.1Hz)，4.67(lH，t J = 5.細z)，4.91(lH，dJ = 5.3Hz)，5.14(2H，s)，7.06(lH， t，J = 8.4Hz) ,7.45(lH，d, J = O.細z) ,7.87(lH，d, J = O.細z),8.26(2H，s) ,9.21(lH，s).
[0124] 审雌例4化合物D的制造
[0125] (I)在氣气氛下，于室溫下向用与制造例1(4)相同的方法制造的2-氯-5-[(2,6-二 氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚（150mg)、4-(4-甲基赃嗦-1-基）苯胺（l〇9mg)、l，r-联 糞-2,2'-二基双仁苯基麟）（88mg)、碳酸飽(463mg)及二嗯烧(3mL)的混合物中加入醋酸钮 (21mg)，在100°C下揽拌4小时。向反应混合物中加入水，并用乙酸乙醋萃取。用饱和食盐水 洗涂有机层，并用无水硫酸儀干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱(氯仿/甲醇/浓 氨水)纯化残余物后，用乙酸乙醋和二异丙酸固化，得到5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基） 氧基]-N-[ 4-(4-甲基赃嗦-1 -基)苯基]喀晚-2-胺(化合物D: 156mg)。
[0126] MS化SI+):472[(M+H)+].
[0127] NMR(DMS0-d6):2.21(3H，s)，2.41-2.48(4H，m)，2.98-3.08(4H，m)，3.87(細，s)， 5.15(2H,s),6.81-6.90(2H,m),7.07(lH,t J = 8.4Hz),7.47-7.55(2H,m),8.26(2H,s), 9.15(lH，s).
[012引审雌例5化合物E的制造
[01巧](1)向（1-甲基-3-硝基-IH-化挫-5-基）甲醇（398mg)、3，4-二氨-2H-化喃（459化） 及乙酸乙醋（SmL)的混合物中加入P-甲苯横酸一水合物(96mg)，在室溫下揽拌1.5小时。进 一步加入3,4-二氨-2H-化喃(459化)及P-甲苯横酸一水合物(96mg)，并在室溫下揽拌1.5小 时。向反应混合物中加入水，并用乙酸乙醋萃取。用饱和食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸 钢干燥后，过滤。将滤液减压浓缩后，用硅胶柱色谱（己烧/乙酸乙醋)纯化残余物，得到1-甲 基-3-硝基-5-[(四氨-2H-化喃-2-基氧基）甲基]-IH-化挫（487mg)。
[0130] MS(APCI/ESI+):242[(M+H)"].
[0131] (2)向1-甲基-3-硝基-5-[(四氨-2H-化喃-2-基氧基）甲基]-IH-化挫（487mg)、四 氨巧喃(4.9mU及乙醇(4.9mU的混合物中加入10%钮-碳(含水、50mg)。在氨氛围下揽拌12 小时后，滤去不溶物。将滤液减压浓缩，得到1-甲基-5-[(四氨-2H-化喃-2-基氧基）甲基]-IH-化挫-3-胺（426mg)。
[0132] MS(APCI/ESI+):212[(M+H)"].
[0133] (3)按与制造例3(1)同样的方法，使用1-甲基-5-[(四氨-2H-化喃-2-基氧基）甲 基]-IH-化挫-3-胺及用与制造例1(4)相同的方法制造的2-氯-5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧 基苄基)氧基]喀晚为原料，得到5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-U-甲基-5-[(四氨-2H-化喃-2-基氧基）甲基]-IH-化挫-3-基}喀晚-2-胺。
[0134] MS(APCI/ESI+):492[(M+H)"].
[0135] (4)向5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-Il-甲基-5-[(四氨-2H-化喃- 2-基氧基）甲基]-IH-化挫-3-基}喀晚-2-胺（706mg)和甲醇（SmL)的混合物中加入氯化氨 (4mol/L二嗯烧溶液、8mL)，并在室溫下揽拌3小时。将反应混合物减压浓缩后，向残余物中 加入饱和碳酸氨钢水溶液，用氯仿萃取。用无水硫酸钢干燥有机层后，过滤。将滤液减压浓 缩，用硅胶柱色谱（乙酸乙醋/己烧)纯化残余物后，用乙醇固化，得到[3-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基傷基)-1-甲基-IH-化挫-5-基]甲醇(444mg)。
[0136] MS化SI+):408[(M+H)+].
[0137] (5)将[3-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基}氨基)-1-甲基-IH-化挫-5-基]甲醇(350mg)、S乙胺(359化）、二氯甲烧(7mL)及四氨巧喃(7mL)的混合物用 冰冷却，加入甲横酷氯（120化)之后，在室溫下揽拌3小时。向反应混合物中加入水和乙酸乙 醋，过滤收集生成的固体后，减压干燥，得到甲横酸[3-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基节 基)氧基]喀晚-2-基傷基)-1-甲基-IH-化挫-5-基]甲醋(218mg)。
[013 引 Mffi(CDCl3):2.96(3H，s)，3.85(3H，s)，3.89(W，s)，5.16(2H，s)，5.25(2H，s)， 6.68(lH,t J = 8. OHz), 6.91( lH,s), 7.63( lH,brs), 8.24(2H,s).
[0139] (6)向甲横酸[3-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基}氨基)-1-甲基-1H-化挫-5-基]甲醋(795mg)和N-甲基化咯烧酬（15.9血)的混合物中加入1 -甲基赃嗦 (9(n化），在80°C下揽拌2小时。向反应混合物中加入水和饱和碳酸氨钢水溶液，过滤收集生 成的固体后，用氯仿萃取滤液。用无水硫酸钢干燥有机层后，过滤。将滤液减压浓缩，将残余 物与先前过滤收集的固体合并后，用硅胶柱色谱(氯仿/甲醇)纯化，接下来用碱性硅胶柱色 谱化酸乙醋/甲醇）纯化后，用乙醇/二异丙酸固化，得到5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基节 基)氧基] -N-U-甲基-5-[ (4-甲基赃嗦-1-基）甲基]-IH-化挫-3-基}喀晚-2-胺(化合物E: 168mg)。
[0140] MS化SI+):490[(M+H)+].
[0141] Mffi(DMS0-d6):2.14(3H，s)，2.18-2.53(W，m)，3.45(2H，s)，3.67(3H，s)，3.87 (6H,s),5.15(2H,s),6.46(lH,s),7.06(lH,t J = 8.4Hz),8.26(2H,s),9.42(lH,s).
[0142] 本发明的医药组合物的药理效果通过W下实施例来确认。
[0143] 试验例1FGFR4酶活性检测
[0144] 酶活性检测使用人重组FGFR4(力瓜十八斗才公司，产品目录编号：08CBS-0716C)。 测定法的概要如下所示。
[0145] 用二甲基亚讽(DMSO)溶解被验化合物，W使得DMSO浓度成为2%的方式用反应缓 冲液（100nMHEPES(pH7.5)、0.003%化iji-35、0.004%Tween20、0.5mMDTT、10mM MgCl 2)稀释，制备化合物溶液。向384孔板Iwel 1中，
[0146] (1)添加化合物溶液化L，
[0147] (2)添加化L用反应稀释液稀释过的FGFR4酶(3ngAiL)，
[014引 （3)20分钟后添加巧光底物肤水溶液（组成为IOOmM HEPES(pH 7.5)、0.003% Brij-35、0.004%Tween 20、0.5mM DTT、10mM MgCl2、3.75]iM substrate-FX-peptide 30 (Perkin Elmer产品编号760430)、750tiM ATP)4化，
[0149] (4)于室溫下使之反应30分钟(检测时的被验化合物终浓度为lOnM)。
[01加](5)加入15化/well的20mM抓TA溶液使反应停止后，用LabChip EZ Reader (Perkin Elmer)测定通过FGFR4的激酶反应而生成的憐酸化底物肤量。
[0151] 将未添加被验化合物(仅加入DMSO)的well的测定值设为0%抑制，将未添加 FGFR4 酶的we 11的测定值设为100 %抑制，算出各化合物在1 OnM下的FGFR4酶抑制率。即，FGFR^I 抑制率通过<FGFR4酶抑制率（％)〉= [ I-K添加被验化合物的well的测定值〉-<未添加 FGFR4酶的we 11的测定值〉} / {<未添加被验化合物(仅添加 DMSO)的wel 1的测定值〉-<未添加 FGFR4酶的well的测定值〉}]X100算出。其结果示于表1。
[0152] [表 1]
[0153] 各被验化合物（1 OnM)的FGFR4激酶活性抑制率
[0155] 由W上结果可W确认，作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、 化合物C、化合物D和化合物巧巧制了 FGFR4的激酶活性。
[0156] 试验例2FGFR19基因扩增阳性肝癌细胞化地-7)的增殖检测
[0157] 化H-7细胞为报告了FGF19基因扩增的肝实质细胞癌细胞株(Cancer cell. 2011， 19(3):347-58)。
[015引将化H-7细胞（购自t二一7シ哥^工シス研究資源パシ夕，JCRB0403)W500细 胞/9化L/well逐一接种到96孔聚苯乙締制平底板上，第二天添加被验化合物溶液（I^L) (被验化合物溶液的最终浓度为37nM，DMS0的最终浓度为0.1 % )。添加被验化合物溶液五天 后，使用CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay(Promega)通过ARV0X3 (Perkin Elmer)测定化H-7细胞的细胞数。将未添加被验化合物(仅加入DMSO)的well的测 定值设为0 %抑制，将未接种细胞(仅培养基）的wel 1的测定值设为100 %抑制，算出各被验 化合物在37nM下的增殖抑制率。即，通过<増殖抑制率（％ )〉=[ I-K添加被验化合物的well 的测定值〉-< 未接种细胞（仅培养基）的well的测定值〉}/{<未添加被验化合物（仅添加 DMSO)的well的测定值〉-<未接种细胞(仅培养基)的well的测定值〉}] X 100算出。将其结果 示于表2。
[0159] [表 2]
[0160] 各被验化合物(37nM)的化H-7细胞增殖抑制率
[0162] 从W上结果可W确认，作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、 化合物C、化合物D及化合物巧巧制了 FGFl 9基因扩增的肝癌细胞的增殖。
[0163] 试验例3FGF19基因扩增阳性肝癌细胞化地-7)皮下移植小鼠模型抗肿瘤试验
[0164] 向裸鼠（CAnN. Cg-Foxnlnu/CrlCrl j(nu/nu):日本予中一/レスリパ一，雄性，4-5周 龄）右腹侧皮下移植3 X 106cells/0.1 mUPBS和Matrigel Wl: 1悬浮的溶液）的HuH-7细胞。 从移植开始到约3周后，按照肿瘤体积和体重实施分组。各被验化合物给予组由4或5只小鼠 构成，各组的平均肿瘤体积为147-180mm 3。将被验化合物使用0.5%甲基纤维素水溶液制成 悬浊液，每日一次连续经口给药。关于被验化合物的给予量，化合物C设为0.3mg/kg/day，化 合物A、化合物B、化合物D及化合物E设为Img/kg/day，在给药开始日（第0天)和最终测定日 (化合物E为第9天，化合物A、化合物C及化合物D为第10天，化合物B为第13天)测定肿瘤体 积。关于肿瘤体积，用游标卡尺测定短径、长径，W (肿瘤体积mm3 )=(短径mm X短径mm X长 径mm)/2算出。另外，将未添加被验化合物的组（即仅给予0.5%甲基纤维素水溶液)作为对 照组，将对照组的最终测定日设为各化合物的最终测定日的同日（关于针对化合物E的对照 组为第9天，关于针对化合物A、化合物C及化合物D的对照组为第10天，关于针对化合物B的 对照组为第13天）。各被验化合物的肿瘤增殖抑制率通过<肿瘤増殖抑制率（％ )〉= <1-(被 验化合物给予组肿瘤体积增加量/对照组肿瘤体积增加量)〉X 100算出。肿瘤体积增加量W (肿瘤体积增加量）=(各组的最终测定日的肿瘤体积)-(各组第0天的肿瘤体积)算出。其结 果在表3中不出。
[01 化][表 3]
[0166]化H-7细胞皮下移植小鼠模型中的肿瘤增殖抑制率
[0168] 从W上结果可W确认，作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、 化合物C、化合物D及化合物巧巧制了皮下移植有FGF19基因扩增阳性肝癌细胞的动物模型中 肝癌的生长。
[0169] 试验例1至3的结果示出，化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可 药用盐抑制了 FGFR4的激酶活性，对于与FGFR4或FGF19相关的各种癌(尤其是肝癌，作为一 个方式FGF19基因扩增阳性肝癌）的增殖抑制是有用的。
[0170] 工业实用性
[0171] 作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化 合物E、或其可药用盐具有FGFR4抑制作用，可用作与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、 作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性 肝癌治疗用医药组合物的有效成分。
【主权项】
1. 一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含5-[ (2，6-二氟-3，5-二甲氧基苄 基)氧基]-N_{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]苯基}嘧啶-2-胺、2-[4-({5_ [(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]啼啶-2-基}氨基)-1!1-吡唑-卜基]乙醇、（21〇-3-[4-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1!1-吡唑-1-基]丙烷-1，2-二 醇、5-[(2,6_二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-2-胺或 5-[ (2，6_二氟-3，5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{ 1-甲基-5-[ (4-甲基哌嗪-1-基）甲基]-1H-吡 唑-3-基}嘧啶-2-胺或其可药用盐、以及赋形剂。2. 根据权利要求1所述的医药组合物，其中与FGFR4相关的癌为与FGF19相关的癌。3. 根据权利要求1所述的医药组合物，其中与FGFR4相关的癌为FGF19基因扩增阳性肝 癌。4. 根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含5-[(2,6_二氟-3,5-二甲氧 基苄基)氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]苯基}嘧啶-2-胺或其可 药用盐、以及赋形剂。5.根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含2-[4-({5-[(2,6_二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]乙醇或其可药用盐、以及赋形剂。6. 根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含（2R)-3-[4-({5-[(2,6-二 氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]丙烷-1，2-二醇或其可药用 盐、以及赋形剂。7. 根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含5-[(2,6_二氟-3,5-二甲氧 基苄基)氧基]-N-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-2-胺或其可药用盐、以及赋形剂。8.根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含5-[(2,6_二氟-3,5-二甲氧 基苄基)氧基]-N-{1-甲基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基）甲基]-1H-吡唑-3-基}嘧啶-2-胺或其可 药用盐、以及赋形剂。
【专利摘要】本发明提供一种与FGFR4相关的癌、与FGF19相关的癌或FGF？19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物。本发明人对具有FGFR抑制作用的化合物进行了研究，确认到特定的嘧啶化合物具有FGFR4抑制作用，含有这些化合物作为有效成分的医药组合物对于与FGFR4相关的癌、作为另一方式与FGF19相关的癌、作为又另一方式FGF？19基因扩增阳性肝癌具有治疗效果，从而完成了本发明。
【IPC分类】A61P43/00, A61K31/506, A61P1/16, A61P35/00
【公开号】CN105492009
【申请号】CN201480047119
【发明人】二见崇史, 竹下留美
【申请人】安斯泰来制药株式会社
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2014年8月27日
【公告号】CA2922352A1, EP3040072A1, US20160199371, WO2015030021A1
【技术领域】
[0001] 本发明设及W喀晚化合物或其可药用盐为有效成分的、与FGFR4相关的癌的治疗 用医药组合物，作为另一方式，设及W喀晚化合物或其可药用盐为有效成分的、与FGF19相 关的癌的治疗用医药组合物，作为又另一方式，设及W喀晚化合物或其可药用盐为有效成 分的、FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物。
【背景技术】
[0002] 由成纤维细胞生长因子(FGF)及其受体成纤维细胞生长因子受体(FGFR)形成的信 号通路是生成进展中从早期胚胎形成起至各种器官形成为止的阶段中具有最重要功能的 信号通路之一。编码FGF的基因存在18种，编码FGFR的基因存在4种(FGFR1~4)，由各种类型 的细胞表达，与细胞增殖、分化和生存相关。已知FGF19为FGFR4的生理配体，饭后由小肠分 泌，并且已知通过肝脏的FGFR4来控制胆固醇的分解代谢(Nat Rev Drug Discov.2009 Mar; 8(3): 235-53)。另外，近年来，已经不出FGF19与包括肝癌、大肠癌在内的多种癌相关 (Cancer Cell.2011,19(3):347-58、0ncogene.2008Jan 3;27(l):85-97、Adv E邱 Med Biol.2012;728:183-94)。
[0003] 原发性的肝癌根据组织学分类被分为肝实质细胞癌、胆管细胞癌和肝母细胞瘤 等，肝实质细胞癌占原发性肝癌的约90%。肝实质细胞癌为预后不良的难治性癌症之一，尤 其是占诊断为肝实质细胞癌的患者的70%的不能外科切除的肝癌患者的5年生存率约为 1 0 %。即使外科切除后，1年内也有约2 5 %、5年内也有约8 0 %的患者复发 (化t.Rev.Gastroenterol .Hepatol .6,423-432(2009) ,(^incer M化Ct 2010,Treatment Architecture US(2011),National Cancer Institute,Physician Data Query(2012), GLOBOCAN 2008,IARC. http://globocan.iarc.fr/)。日本、美国、欧洲(法国、德国、意大利、 西班牙、英国）的肝癌治疗对象患者约为10万人(Cancer MPact 2010)。另外，肝癌治疗对象 患者在东南亚尤其多见，推测全世界的新患者数约为75万人（GL0B0CAN 2008， International Agency for Research on Cancer)〇
[0004] 作为不能外科切除的肝癌的分子祀向药物，唯一承认有sorafenib，生存期间从 7.9个月延长至10.7个月（1^化邑1116(1.2008化124;359(4):378-90)。
[0005] 近年来，已经做出了 W下报道:该报道提出FGF19基因扩增与肝实质细胞癌有关 (Cancer Cell .2011，19(3) :347-58)。根据该报道，肝实质细胞癌的14%在染色体llql3.3 区域中确认到基因扩增，在该区域中包含FGF19基因。另外，对于作为FGF19基因扩增阳性肝 实质细胞癌细胞株的化H-7细胞，通过在其培养液中添加 FGF19中和抗体，抑制了细胞增殖。 另外，给予FGF19中和抗体使皮下携带有化H-7细胞的裸鼠中的肿瘤生长得到抑制（Cancer Cell. 2011,19(3) :347-58)。此外，有W下报道:该报道提出，过表达FGF19的转基因小鼠自 然发展成肝癌(Am J化thol.2002Jun; 160(6) :2295-307)、FGF19在肝癌患者的肿瘤部位高 度表达且高度表达患者群预后不良（BMC Cancer. 2012化b 6; 12(1): 56)等、其他FGF19与肝 癌的关联。
[0006] 另一方面，提出了过表达FGF19的转基因小鼠的肝癌发病被编码FGFR4的基因缺陷 抑审ij，因此FGF19通过FGFR4与肝癌发病相关(PLoS 〇116.2012;7巧）：636713)。此夕1'，示出了： 通过WRNAi效应抑制FGF19基因扩增阳性肝实质细胞癌细胞株的FGFR4表达、或者通过在培 养液中添加 FGFR4中和抗体从而抑制FGFR4的功能，由此抑制了细胞增殖（CanC er Discov.2012Dec；2(12):1118-33^BMC Cancer.2012 Feb 6；12:56^PLoS One.2012；7(5): 636713)。运些报道教导了 W下可能性:对于具有FGF19基因扩增的肝实质细胞癌患者的治 疗，FGFR4抑制剂是有效的。
[0007] 近年来，报道了各种癌种类的发病中FGF信号的重要性，进行了 FGFR或FGF选择性 抑制剂的开发（化ture Reviews Cancer 2010，10，116-129、J.Med.^em.2011，54,7066-7083、AACR 2011,No.1643AstraZeneca)。
[0008] 报道了下式(Xl)的化合物示出各种激酶抑制，可用作癌及屯、肌梗塞等的血管障碍 治疗剂（专利文献1)。在该文献的表2中披露了某些化合物对化S、VEGFR、EphB4、PDGF祕和 FGFRl的激酶抑制的试验结果，披露了FGFRl抑制活性的ICso值比1000 nM大，与其他激酶活性 抑制相比弱。另外，该文献中没有披露作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物。
[0009] [化学式1]
[001 U (式中，A各自为CH、N等，B各自为CH等，Al为0、CR2等，A2为NR、0等，Ro为H等，R为H等， 1^1为键、0等，L2为键、C广Cs烷基等，Ri为二兀至六兀杂环等，而且Re、Rf为C广Cs烷基、径烷基 等。其他符号参考该公报。）
[0012]报道了下式(X2)的化合物显示出Abl抑制作用，对于各种癌有用（专利文献2)。然 而，该文献中没有关于FGFR抑制作用的具体记载。此外，该文献中没有披露作为本发明的医 药组合物的有效成分的化合物。
[OOU][化学式2]
[0015] (式中，G为CH等，A为3-径基苯基等，Y为乙締基或亚乙基。其他符号参考该公报。）
[0016] 报道 了下式(X3)的化合物对于由 Sr C、VEGFR2、Ye S、Fyn、Lck、Ab 1、PDGFR、EGFR 及 RET构成的各种激酶具有抑制作用，可W用于治疗癌、血管障碍等(专利文献3)。然而，该文 献中没有披露对于FGFR的抑制作用。此外，该文献中没有披露作为本发明的医药组合物的 有效成分的化合物。
[0017] [化学式3]
[0019] 试中，Gi表示可被取代的芳基、可被取代的杂芳基等，Li表示0、50、5〇2、可被取代 的烷基等，L2表不可被取代的烷基、杂环等，Al表不键、0、C(Ra)2等，As表不NRa、0等，Ra表不H 等。其他符号参考该公报。）
[0020] 在本申请最早的优先权日之后公开的文献(专利文献4)中披露了下式(X4)的化合 物作为与FGFRlJ和/或村目关的各种癌，例如与FGFRl相关的肺癌或激素疗法抵抗性的乳 癌、与FGFR2相关的胃癌、S阴性乳腺癌或子宫内膜癌、W及与FGFR3相关的膀脫癌及成胶质 母细胞瘤的治疗剂是有用的。而且，在该文献中将作为本发明的医药组合物的有效成分的 化合物作为实施例化合物具体公开，但是关于FGFR4抑制作用和对肝癌的作用没有公开。
[0021] [化学式4]
[0023] (式中的符号参考该公报。）
[0024] 现有技术文献 [00巧]专利文献
[00%] 专利文献1:国际公开第WO 2006/101977号小册子
[0027] 专利文献2:国际公开第WO 2007/056075号小册子
[0028] 专利文献3:国际公开第WO 2008/008234号小册子 [00巧]专利文献4:国际公开第WO 2013/129369号小册子
【发明内容】
[0030] 发明所要解决的课题
[0031] 提供一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，作为另一方式与FGF19相关的癌 的治疗用医药组合物，作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物。
[0032] 解决课题的手段
[0033] 本发明人W制备与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，作为另一方式与FGF19相 关的癌的治疗用医药组合物，作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合 物为目的，对于具有FGFR4抑制作用的化合物进行了深入探讨，结果发现，特定的喀晚化合 物或其可药用盐具有优异的FGFR4抑制作用，W运些化合物为有效成分的医药组合物作为 与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合 物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物是有用的，从而完成了本 发明。
[0034] 旨P，本发明设及一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、作为另一方式与 FGF19相关的癌的治疗用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医 药组合物，其包含5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基赃 嗦-1-基)赃晚-1-基]苯基}喀晚-2-胺下有时称为"化合物A"。）、2-[4-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基}氨基)-lH-化挫-1-基化醇m下有时称为"化合物 B"。）、（2R)-3-[4-( {5-[ (2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基）氧基]喀晚-2-基}氨基比挫-1-基]丙烷-1,2-二醇下有时称为"化合物护。）、5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧 基]-N-[4-(4-甲基赃嗦-1-基）苯基]喀晚-2-胺m下有时称为"化合物护。）或5-[(2,6-二 氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-U-甲基-5-[(4-甲基赃嗦-1-基）甲基]-IH-化挫-3-基}喀 晚-2-胺（W下有时称为"化合物E"。）或其可药用盐、W及赋形剂。
[0035] 需要说明的是，本发明的医药组合物所设及的化合物A、化合物B、化合物C、化合物 D和化合物E为上述专利文献4中具体记载的化合物。
[0036] 另外，本发明包括与FGFR4相关的癌的治疗剂、作为另一方式与FGF19相关的癌的 治疗剂、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌治疗剂，其包含化合物A、化合物B、化合物 C、化合物D或化合物E、或它们的可药用盐。
[0037] 另外，本发明设及化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或它们的可药 用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗 用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物中的用途;化 合物A、化合物B、化合物C、 化合物D或化合物E、或它们的可药用盐在与FGFR4相关的癌的治 疗、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌治疗 中的用途;用于治疗与FGFR4相关的癌、作为另一方式用于治疗与FGF19相关的癌、作为又另 一方式用于治疗FGF19基因扩增阳性肝癌的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物 E、或它们的可药用盐；W及与FGFR4相关的癌的治疗方法、作为另一方式与FGF19相关的癌 的治疗方法、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性肝癌治疗方法，其包括向对象施用有效量 的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或它们的可药用盐。需要说明的是，"对 象"是指需要该治疗的人或其他动物，作为某一方式，为需要该治疗的人。
[003引发明的效果
[0039] 作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化 合物E、或它们的可药用盐具有FGFR4抑制作用，可W用作与FGFR4相关的癌的治疗用医药组 合物、作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩 增阳性肝癌的治疗用医药组合物的有效成分。
【具体实施方式】
[0040] W下详细说明本发明。
[0041 ] 5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基）氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基赃嗦-1- 基)赃晚-1-基]苯基}喀晚-2-胺(化合物A)的化学结构如下所示。
[0042][化学式引
[0044] (式中，Me表示甲基。需要说明的是，关于其W下的化学式，同样地Me也表示甲基。）
[0045] 另外，2-[4-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基}氨基)-lH-化 挫-1-基]乙醇(化合物B)的化学结构如下所示。
[0046] [化学式6]
[004引此外，（2R)-3-[4-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基}氨基)-IH-化挫-1-基]丙烷-1,2-二醇(化合物C)的化学结构如下所示。
[0049][化学式7]
[0051 ] 此外，5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[4-(4-甲基赃嗦-1-基）苯基] 喀晚-2-胺(化合物D)的化学结构如下所示。
[0化2][化学式引
[0054] 此外，5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]甲基-5-[(4-甲基赃嗦-1-基）甲基]-IH-化挫-3-基}喀晚-2-胺(化合物E)的化学结构如下所示。
[0055] [化学式9]
[0057]"与FGFR4相关的癌"是指FGFR4的激活与癌的发病、进展相关的癌。例如，是指发生 作为FGFR4的配体的FGF19的基因扩增（Cancer Cell. 2011,19(3): 347-58)、或表达增强的 癌（Oncogene. 2008 化n 3; 27( 1): 85-97)、或FGFR4的激活突变（例如，具有从 WGenBank登 录号:NM_002011.3定义的FGFR4亚型1的535号的天冬酷胺到天冬氨酸或赖氨酸的突变、从 第550号的鄉氨酸到亮氨酸或谷氨酸的突变的癌（J Clin Invest.2009 Nov; 119(11): 3395-407)、具有从第376号的酪氨酸到半脫氨酸的突变的癌（Oncogene. 2010 Mar 11;29 (10) :1543-52.)、具有从第712号的脯氨酸到苏氨酸的突变的癌（Proc化tl Acad Sci USA.2013 Jul 8化油址ead of print PMID:23836671))等。
[005引"与FGF19相关的癌"是指发生FGF19的基因扩增或表达增强的癌。基因扩增的诊断 可W使用FISH(巧光原位杂交)法、阵列比较基因组杂交法等利用了杂交的方法、或数字化 PCR(聚合物酶链反应)法的PCR法等多种方法。
[0059] "FGF19基因扩增阳性肝癌"是指在肝癌患者中，FGF19基因区域扩增的患者中的肝 癌。FGF19基因扩增阳性肝癌的患者与FGF19基因没有扩增的患者或者正常人相比， FGF19mRNA和/或FGF19蛋白质的表达量增强，因此也可W WFGF19mRNA和/或FGF19蛋白质为 指标进行诊断。作为一例，FGF19mRNA表达可通过PCR法或核酸杂交法来测定。组织中的 FGF19蛋白质可通过免疫组织化学法等（PLoS One.2012;7(5):e36713、0ncogene.2008 Jan 3 ; 2 7 ( I) : 8 5 - 9 7 )检：J则，血液中的F G FI 9蛋白质可通过酶联免疫吸附测定法（B M C 化nce;r.2012Feb 6;12(1):56)检测。
[0060] 本发明的一些方式在下面示出。
[0061] (1-1)-种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物A或其可药用盐、 W及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物A或 其可药用盐、W及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合 物，其包含化合物A或其可药用盐、W及赋形剂。
[0062] (1-2)化合物A或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用 途。作为另一方式，化合物A或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中 的用途。作为又另一方式，化合物A或其可药用盐在制造 FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医 药组合物中的用途。
[0063] (1-3)化合物A或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式， 化合物A或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物A或其 可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
[0064] (1-4)-种化合物A或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方 式，一种化合物A或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化 合物A或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
[0065] (1-5)-种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物A或其可药用盐 施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物A或 其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括 将有效量的化合物A或其可药用盐施用给对象。
[0066] (2-1)-种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物B或其可药用盐、 W及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物B或 其可药用盐、W及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合 物，其包含化合物B或其可药用盐、W及赋形剂。
[0067] (2-2)化合物B或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用 途。作为另一方式，化合物B或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中 的用途。作为又另一方式，化合物B或其可药用盐在制造 FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医 药组合物中的用途。
[0068] (2-3)化合物B或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式， 化合物B或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物B或其 可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
[0069] (2-4)-种化合物B或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方 式，一种化合物B或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化 合物B或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
[0070] (2-5)-种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物B或其可药用盐 施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物B或 其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括 将有效量的化合物B或其可药用盐施用给对象。
[0071] (3-1)-种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物C或其可药用盐、 W及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物C或 其可药用盐、W及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合 物，其包含化合物C或其可药用盐、W及赋形剂。
[0072] (3-2)化合物C或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用 途。作为另一方式，化合物C或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中 的用途。作为又另一方式，化合物C或其可药用盐在制造 FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医 药组合物中的用途。
[0073] (3-3)化合物C或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式， 化合物C或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物C或其 可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
[0074] (3-4)-种化合物C或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方 式，一种化合物C或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化 合物C或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
[0075] (3-5)-种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物C或其可药用盐 施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物C或 其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括 将有效量的化合物C或其可药用盐施用给对象。
[0076] (4-1)-种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物D或其可药用盐、 W及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物D或 其可药用盐、W及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合 物，其包含化合物D或其可药用盐、W及赋形剂。
[0077] (4-2)化合物D或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用 途。作为另一方式，化合物D或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中 的用途。作为又另一方式，化合物D或其可药用盐在制造 FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医 药组合物中的用途。
[0078] (4-3)化合物D或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式， 化合物D或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物D或其 可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
[0079] (4-4)-种化合物D或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方 式，一种化合物D或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化 合物D或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
[0080] (4-5)-种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物D或其可药用盐 施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物D或 其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括 将有效量的化合物D或其可药用盐施用给对象。
[0081] (5-1)-种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物E或其可药用盐、 W及赋形剂。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物，其包含化合物E或 其可药用盐、W及赋形剂。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医药组合 物，其包含化合物E或其可药用盐、W及赋形剂。
[0082] (5-2)化合物E或其可药用盐在制造与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物中的用 途。作为另一方式，化合物E或其可药用盐在制造与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物中 的用途。作为又另一方式，化合物E或其可药用盐在制造 FGF19基因扩增阳性肝癌治疗用医 药组合物中的用途。
[0083] (5-3)化合物E或其可药用盐在与FGFR4相关的癌的治疗中的用途。作为另一方式， 化合物E或其可药用盐在与FGF19相关的癌的治疗中的用途。作为又另一方式，化合物E或其 可药用盐在FGF19基因扩增阳性肝癌治疗中的用途。
[0084] (5-4)-种化合物E或其可药用盐，其用于与FGFR4相关的癌的治疗。作为另一方 式，一种化合物E或其可药用盐，其用于与FGF19相关的癌的治疗。作为又另一方式，一种化 合物E或其可药用盐，其用于FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗。
[0085] (5-5)-种与FGFR4相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物E或其可药用盐 施用给对象。作为另一方式，一种与FGF19相关的癌的治疗方法，包括将有效量的化合物E或 其可药用盐施用给对象。作为又另一方式，一种FGF19基因扩增阳性肝癌的治疗方法，包括 将有效量的化合物E或其可药用盐施用给对象。
[0086] 此外，"化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E的可药用盐"是指化合物A、 化合物B、化合物C、化合物D或化合物E的酸加成盐，具体来说，可W举出与盐酸、氨漠酸、氨 舰酸、硫酸、硝酸、憐酸等的无机酸，或与甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、班巧酸、富马酸、马 来酸、乳酸、苹果酸、苦杏仁酸、酒石酸、二苯甲酯基酒石酸、二甲苯酷基酒石酸、巧樣酸、甲 横酸、乙横酸、苯横酸、P-甲苯横酸、天冬氨酸、谷氨酸等有机酸的酸加成盐。需要说明的是， "化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E"包括化合物A、化合物B、化合物C、化合物D 或化合物E的溶剂合物，具体而言，例如水合物和乙醇合物。
[0087] 需要说明的是，作为"化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可药用 盐"的某些方式，可W举出没有形成盐的游离碱（71)-八一乂），即化合物A、化合物B、化合 物C、化合物D或化合物E，作为另一方式，为化合物A，作为又另一方式，为化合物B，作为又另 一方式，为化合物C，作为又另一方式，为化合物D，作为又另一方式，为化合物E。
[0088] 含有化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可药用盐作为有效成分 的医药组合物可W使用本领域常用的赋形剂（即药用赋形剂和药用载体等），并通过常用的 方法来制备。
[0089] 给药可W为通过片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液体制剂等的口服给药，或者 通过静脉内等的注射剂、栓剂、经皮用液体制剂、经皮贴剂、经粘膜液体制剂等的非经口给 药中的任意一种形式。
[0090] 作为用于经口给药的固体组合物，可W使用片剂、散剂、颗粒剂等。在运样的固体 组合物中，将1种或巧巾W上的有效成分与至少一种惰性赋形剂混合。按照常规方法，组合物 也可W含有惰性添加剂，例如润滑剂或崩解剂、稳定剂、溶解助剂。根据需要，片剂或丸剂也 可W用糖衣或者胃溶性或肠溶性物质的膜进行包衣。
[0091] 用于经口给药的液体组合物包括可药用的乳液剂、溶液剂、悬浮剂、糖浆剂或馳剂 等，并且含有通常可使用的惰性稀释剂，例如纯化水或乙醇。除了惰性稀释剂W外，该液体 组合物中也可W含有诸如增溶剂、润湿剂、悬浮剂之类的助剂、甜味剂、矫味剂、芳香剂、防 腐剂。
[0092] 用于非经口给药的注射剂包括无菌的水性或非水性溶液制剂、悬浮剂或乳液剂。 作为水性溶剂，包括(例如)注射用蒸馈水或生理盐水。作为非水性溶剂，例如有乙醇之类的 醇类。运样的组合物还可W含有等渗剂、防腐剂、润湿剂、乳化剂、分散剂、稳定剂、或溶解助 剂。例如，可W采用通过可截留细菌的过滤器进行过滤、添加杀菌剂或者进行福射的方法来 对所述组合物进行灭菌。此外，也可W将运些组合物制成无菌的固体组合物，在使用前将其 溶解或混悬于无菌水或无菌的注射用溶剂中而使用。
[0093] 通常口服给药时，1天的给药量按体重约为0 . OOlmg/kg~lOOmg/kg，优选为 O.Olmg/kg~30mg/kg，更优选为0.1 mg/kg~lOmg/kg，并将该给药量1次服用或分2次~4次 服用。静脉内给药时，1天的给药量按体重约为O.OOOlmg/kg~lOmg/kg是适当的，并将该给 药量分为每日一次至多次给药。而且，使用经粘膜剂时，按体重约为0.OOlmg/kg~IOOmg/ kg，分为每日一次至多次给药。应考虑症状、年龄、性别等，根据每个患者的情况，来适当地 决定给药量。
[0094] 虽然根据给药路径、剂型、给药部位、赋形剂或添加剂的种类而不同，但本发明的 医药组合物含有0.01至100重量％、作为一个方式0.01至50重量％的作为有效成分的巧中或 其W上的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可药用盐。
[00M]本发明的医药组合物可W与被认为对癌(尤其是与FGFR4相关的癌、与FGF19相关 的癌、FGF19基因扩增阳性肝癌或肝癌)表现出有效性的各种治疗剂或预防剂并用。在并用 时，可W同时给药，或者分别连续给药、或按所希望的时间间隔给药。同时给药时的制剂可 W是配合剂，也可W分别制成制剂。
[0096] 实施例
[0097] 下面将化合物A、化合物B、化合物C、化合物D及化合物E的制造方法作为制造例示 出。需要说明的是，运些化合物的制造方法不仅限于W下示出的具体制造例的制造方法，也 可W通过运些制造方法的组合、或本领域技术人员显而易见的方法来制造。此外，运些化合 物也可W通过前述专利文献4中记载的方法或者W其为标准的方法来制造。
[009引审雌例1化合物A的制造
[0099] (1)将3,5-二甲氧基苯甲酸甲醋（Ig)和乙腊(20血)的混合物用冰冷却，加入N-氣-N'-(氯甲基)=乙二胺双（四氣棚酸盐）（4.09g)，在室溫下揽拌整夜。向反应混合物中加入 饱和碳酸氨钢水溶液，用乙酸乙醋萃取。用饱和食盐水洗涂有机层，加入无水硫酸儀和碱性 硅胶，揽拌30分钟后，过滤。将滤液减压浓缩，之后用硅胶柱色谱（乙酸乙醋/己烧)纯化残留 物，得到2，6-二氣-3，5-二甲氧基苯甲酸甲醋(292mg)。
[0100] MS化SI+):233[(M+H)+].
[0101] (2)将2,6-二氣-3,5-二甲氧基苯甲酸甲醋（IOg)和四氨巧喃(57血)的混合物用冰 冷却，加入棚氨化裡(3.OmoVL四氨巧喃溶液，43mL)之后，在室溫下揽拌65小时。将反应混 合物再次用冰冷却，进一步加入棚氨化裡(3.Omol/L四氨巧喃溶液，14.4mL)，在室溫下揽拌 22小时。将反应混合物用冰冷却，并缓缓加入到冰水（300mL)中。进一步缓缓加入浓盐酸 (25mL)，在室溫下揽拌1小时。用甲苯/乙酸乙醋（1:1)萃取，用饱和碳酸氨钢水溶液和饱和 食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸儀干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，得到（2，6-二氣-3，5-二甲氧基苯基）甲醇(8.67g)。
[0102] MS(EI+):204[(M)"].
[0103] (3)将（2,6-二氣-3,5-二甲氧基苯基）甲醇（1.71g)、S乙胺（2.57mL)和四氨巧喃 (34.2mL)的混合物用冰冷却，加入甲横酷氯(716化)后，揽拌1小时。滤除不溶物后，将滤液 减压浓缩。向残余物中加水，用乙酸乙醋萃取。用饱和食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸儀 干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，得到甲横酸2，6-二氣-3，5-二甲氧基苄基醋(2.32g)。
[0104] NMR(DMS0-d6):3.24(3H,s),3.88(6H,s),5.30(2H,s),7.12(lH,t J = 8.4Hz).
[0105] (4)向2-氯-5-?基喀晚(4.38g)、甲横酸2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基醋（7.89g) 和N，N-二甲基甲酯胺(78.9mL)的混合物中加入碳酸钟(9.27g)后，在60°C下揽拌1小时。向 反应混合物中加入水后，在冰冷却下揽拌30分钟。过滤收集生成的固体，用水洗涂后，减压 干燥，得到2-氯-5-[ (2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚(8.53g)。
[0106] MS(APCI/ESI+):317[(M+H)+].
[0107] (5)在氣气氛下，于室溫下向2-氯-5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚 (1.03邑）、3-甲氧基-4-[4-(4-甲基赃嗦-1-基)赃晚-1-基]苯胺（1.29邑）、1，1'-联糞-2,2'-二基双（二苯基麟）（609mg)、碳酸飽（3.19g)及二嗯烧（20.6mL)的混合物中加入乙酸钮 (146mg)，在100°C下揽拌4小时。向反应混合物中加入水，用乙酸乙醋萃取。用饱和食盐水洗 涂有机层，并用无水硫酸儀干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，将残余物用硅胶柱色谱(氯仿/ 甲醇/浓氨水)纯化，之后用碱性硅胶柱色谱（乙酸乙醋)纯化后，用乙酸乙醋、之后用乙醇固 化，得到5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基赃嗦-I-基） 赃晚-1-基]苯基}喀晚-2-胺(化合物A:830mg)。
[010 引 MS(ESI+):585[(M+H) + ].
[0109] 醒R(DMS0-d6):1.45-1.60(2H，m)，1.73-1.84(2H，m)，2.14(3H，s)，2.17-2.58 alH，m)，3.24-3.36(2H，m)，3.75(3H，s)，3.87(細，s)，5.16(2H，s)，6.79(lH，d，J = 8.細z)， 7.07(lH,t J = 8.4Hz), 7.24( lH,ddJ = 8.8,2.4Hz), 7.32( lH,dJ = 2.4Hz),8.29(2H,s), 9.21(lH,s).
[0110] 制造例2化合物B的制造
[0111] (I)在氣气氛下，于室溫下向用与制造例1(4)相同的方法制造的2-氯-5-[(2,6-二 氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚(800mg)、2-(4-氨基-lH-化挫-1-基）乙醇(642mg)、l，^-联糞-2,2'-二基双(二苯基麟）（472mg)、碳酸飽(2.47g)及二嗯烧a6mU的混合物中加入醋 酸钮（113mg)，在100°C下揽拌6小时。向反应混合物中加入水和氯仿，滤除不溶物后，用氯仿 萃取滤液。用饱和食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸儀干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，用娃 胶柱色谱(氯仿/甲醇)纯化残余物，得到2-[4-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基] 喀晚-2-基傷基)-lH-化挫-1-基化醇(化合物B: 139mg)。
[0112] MS化SI+):408[(M+H)+].
[011引 匪R(DMS0-d6) :3.69(2H，dd，J=ll .0,5.6Hz)，3.87(6H，s)，4.07(2H，t，J = 5.6Hz) ,4.83( lH，t, J = 5.4Hz)，5.14(2H，s) ,7.07( lH，t，J = 8.4Hz) ,7.45( lH，d, J = 0.細z)，7.88(lH，d，J = 0.細z)，8.26(2Hs)，9.20(lH，s).
[0114] 制造例3化合物C的制造
[0115] (I)在氣气氛下，于室溫下向用与制造例1(4)相同的方法制造的2-氯-5-[(2,6-二 氣-3,5-二甲氧基苄基）氧基]喀晚（1.33g)、l-(四氨-2H-化喃-2-基）-lH-化挫-4-胺 (913mg)、l，r-联糞-2,2'-二基双(二苯基麟）（785mg)、乙酸钮（189mg)及二嗯烧(26.6mL) 的混合物中加入碳酸飽(4.11 g )，在100°C下揽拌4小时。向反应混合物中加入水，用乙酸乙 醋萃取。用饱和食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸钢干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，用硅胶 柱色谱（乙酸乙醋/己烧)纯化残余物，得到5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[l-(四氨-2H-化喃-2-基)-IH-化挫-4-基]喀晚-2-胺（1.73g)。
[0116] MS(APCI/ESI+):448[(M+H) + ].
[0117] (2)向 5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[l-(四氨-2H-化喃-2-基)-lH-化挫-4-基]喀晚-2-胺(3.59g)及甲醇（20mL)的混合物中加入氯化氨(4mol/L二嗯烧溶液， 40mL)，在室溫下揽拌6小时。将反应混合物减压浓缩后，向残余物中加入饱和碳酸氨钢水溶 液。过滤收集生成的固体，用二乙酸洗涂后，减压干燥，得到5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基节 基)氧基]-N-QH-化挫-4-基)喀晚-2-胺(2.9邑）。
[0118] MS(APCI/ESI+):364[(M+H) + ].
[0119] (3)向5-[ (2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基）氧基]-N-UH-化挫-4-基）喀晚-2-胺 (50mg)、碳酸钟(57mg)及N，N-二甲基甲酯胺（ImL)的混合物中加入4-甲基苯横酸[(4S)-2， 2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]甲醋（IlSmg)，在60°C下揽拌1小时，并在110°C下揽拌4天。 向反应混合物中加入水，用乙酸乙醋萃取。用饱和食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸儀干燥 后，过滤。将滤液减压浓缩后，将得到的残余物用硅胶柱色谱（乙酸乙醋/己烧)纯化，得到5-
[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-(l-{ [(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]甲 基} -IH-化挫-4-基)喀晚-2-胺(39mg)。
[0120] MS(APCI/ESI+):478[(M+H)"].
[0121] (4)向5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-a-{[(4R)-2,2-二甲基-l，3-二氧戊环-4-基]甲基} -IH-化挫-4-基)喀晚-2-胺(45mg)及四氨巧喃（2mL)的混合物中加入 盐酸（lmol/L、lmU，在50°C下揽拌3小时。向反应混合物中加入饱和碳酸氨钢水溶液，用氯 仿萃取。用饱和食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸钢干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，用硅胶 柱色谱(氯仿/甲醇）纯化残余物后，用乙酸乙醋固化，得到（2R)-3-[4-({5-[(2,6-二氣-3， 5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基傷基)-lH-化挫-1-基]丙烷-1,2-二醇(化合物C:25mg)。
[0122] MS化SI+):438[(M+H)+].
[0123] NMR(DMS0-d6):3.23-3.38(2H,m),3.72-3.80(lH，m),3.84-3.96(7H,m),4.15(1H, dd J=13.8,4.1Hz)，4.67(lH，t J = 5.細z)，4.91(lH，dJ = 5.3Hz)，5.14(2H，s)，7.06(lH， t，J = 8.4Hz) ,7.45(lH，d, J = O.細z) ,7.87(lH，d, J = O.細z),8.26(2H，s) ,9.21(lH，s).
[0124] 审雌例4化合物D的制造
[0125] (I)在氣气氛下，于室溫下向用与制造例1(4)相同的方法制造的2-氯-5-[(2,6-二 氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚（150mg)、4-(4-甲基赃嗦-1-基）苯胺（l〇9mg)、l，r-联 糞-2,2'-二基双仁苯基麟）（88mg)、碳酸飽(463mg)及二嗯烧(3mL)的混合物中加入醋酸钮 (21mg)，在100°C下揽拌4小时。向反应混合物中加入水，并用乙酸乙醋萃取。用饱和食盐水 洗涂有机层，并用无水硫酸儀干燥后，过滤。将滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱(氯仿/甲醇/浓 氨水)纯化残余物后，用乙酸乙醋和二异丙酸固化，得到5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基） 氧基]-N-[ 4-(4-甲基赃嗦-1 -基)苯基]喀晚-2-胺(化合物D: 156mg)。
[0126] MS化SI+):472[(M+H)+].
[0127] NMR(DMS0-d6):2.21(3H，s)，2.41-2.48(4H，m)，2.98-3.08(4H，m)，3.87(細，s)， 5.15(2H,s),6.81-6.90(2H,m),7.07(lH,t J = 8.4Hz),7.47-7.55(2H,m),8.26(2H,s), 9.15(lH，s).
[012引审雌例5化合物E的制造
[01巧](1)向（1-甲基-3-硝基-IH-化挫-5-基）甲醇（398mg)、3，4-二氨-2H-化喃（459化） 及乙酸乙醋（SmL)的混合物中加入P-甲苯横酸一水合物(96mg)，在室溫下揽拌1.5小时。进 一步加入3,4-二氨-2H-化喃(459化)及P-甲苯横酸一水合物(96mg)，并在室溫下揽拌1.5小 时。向反应混合物中加入水，并用乙酸乙醋萃取。用饱和食盐水洗涂有机层，并用无水硫酸 钢干燥后，过滤。将滤液减压浓缩后，用硅胶柱色谱（己烧/乙酸乙醋)纯化残余物，得到1-甲 基-3-硝基-5-[(四氨-2H-化喃-2-基氧基）甲基]-IH-化挫（487mg)。
[0130] MS(APCI/ESI+):242[(M+H)"].
[0131] (2)向1-甲基-3-硝基-5-[(四氨-2H-化喃-2-基氧基）甲基]-IH-化挫（487mg)、四 氨巧喃(4.9mU及乙醇(4.9mU的混合物中加入10%钮-碳(含水、50mg)。在氨氛围下揽拌12 小时后，滤去不溶物。将滤液减压浓缩，得到1-甲基-5-[(四氨-2H-化喃-2-基氧基）甲基]-IH-化挫-3-胺（426mg)。
[0132] MS(APCI/ESI+):212[(M+H)"].
[0133] (3)按与制造例3(1)同样的方法，使用1-甲基-5-[(四氨-2H-化喃-2-基氧基）甲 基]-IH-化挫-3-胺及用与制造例1(4)相同的方法制造的2-氯-5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧 基苄基)氧基]喀晚为原料，得到5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-U-甲基-5-[(四氨-2H-化喃-2-基氧基）甲基]-IH-化挫-3-基}喀晚-2-胺。
[0134] MS(APCI/ESI+):492[(M+H)"].
[0135] (4)向5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-Il-甲基-5-[(四氨-2H-化喃- 2-基氧基）甲基]-IH-化挫-3-基}喀晚-2-胺（706mg)和甲醇（SmL)的混合物中加入氯化氨 (4mol/L二嗯烧溶液、8mL)，并在室溫下揽拌3小时。将反应混合物减压浓缩后，向残余物中 加入饱和碳酸氨钢水溶液，用氯仿萃取。用无水硫酸钢干燥有机层后，过滤。将滤液减压浓 缩，用硅胶柱色谱（乙酸乙醋/己烧)纯化残余物后，用乙醇固化，得到[3-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基傷基)-1-甲基-IH-化挫-5-基]甲醇(444mg)。
[0136] MS化SI+):408[(M+H)+].
[0137] (5)将[3-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基}氨基)-1-甲基-IH-化挫-5-基]甲醇(350mg)、S乙胺(359化）、二氯甲烧(7mL)及四氨巧喃(7mL)的混合物用 冰冷却，加入甲横酷氯（120化)之后，在室溫下揽拌3小时。向反应混合物中加入水和乙酸乙 醋，过滤收集生成的固体后，减压干燥，得到甲横酸[3-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基节 基)氧基]喀晚-2-基傷基)-1-甲基-IH-化挫-5-基]甲醋(218mg)。
[013 引 Mffi(CDCl3):2.96(3H，s)，3.85(3H，s)，3.89(W，s)，5.16(2H，s)，5.25(2H，s)， 6.68(lH,t J = 8. OHz), 6.91( lH,s), 7.63( lH,brs), 8.24(2H,s).
[0139] (6)向甲横酸[3-({5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基苄基)氧基]喀晚-2-基}氨基)-1-甲基-1H-化挫-5-基]甲醋(795mg)和N-甲基化咯烧酬（15.9血)的混合物中加入1 -甲基赃嗦 (9(n化），在80°C下揽拌2小时。向反应混合物中加入水和饱和碳酸氨钢水溶液，过滤收集生 成的固体后，用氯仿萃取滤液。用无水硫酸钢干燥有机层后，过滤。将滤液减压浓缩，将残余 物与先前过滤收集的固体合并后，用硅胶柱色谱(氯仿/甲醇)纯化，接下来用碱性硅胶柱色 谱化酸乙醋/甲醇）纯化后，用乙醇/二异丙酸固化，得到5-[(2,6-二氣-3,5-二甲氧基节 基)氧基] -N-U-甲基-5-[ (4-甲基赃嗦-1-基）甲基]-IH-化挫-3-基}喀晚-2-胺(化合物E: 168mg)。
[0140] MS化SI+):490[(M+H)+].
[0141] Mffi(DMS0-d6):2.14(3H，s)，2.18-2.53(W，m)，3.45(2H，s)，3.67(3H，s)，3.87 (6H,s),5.15(2H,s),6.46(lH,s),7.06(lH,t J = 8.4Hz),8.26(2H,s),9.42(lH,s).
[0142] 本发明的医药组合物的药理效果通过W下实施例来确认。
[0143] 试验例1FGFR4酶活性检测
[0144] 酶活性检测使用人重组FGFR4(力瓜十八斗才公司，产品目录编号：08CBS-0716C)。 测定法的概要如下所示。
[0145] 用二甲基亚讽(DMSO)溶解被验化合物，W使得DMSO浓度成为2%的方式用反应缓 冲液（100nMHEPES(pH7.5)、0.003%化iji-35、0.004%Tween20、0.5mMDTT、10mM MgCl 2)稀释，制备化合物溶液。向384孔板Iwel 1中，
[0146] (1)添加化合物溶液化L，
[0147] (2)添加化L用反应稀释液稀释过的FGFR4酶(3ngAiL)，
[014引 （3)20分钟后添加巧光底物肤水溶液（组成为IOOmM HEPES(pH 7.5)、0.003% Brij-35、0.004%Tween 20、0.5mM DTT、10mM MgCl2、3.75]iM substrate-FX-peptide 30 (Perkin Elmer产品编号760430)、750tiM ATP)4化，
[0149] (4)于室溫下使之反应30分钟(检测时的被验化合物终浓度为lOnM)。
[01加](5)加入15化/well的20mM抓TA溶液使反应停止后，用LabChip EZ Reader (Perkin Elmer)测定通过FGFR4的激酶反应而生成的憐酸化底物肤量。
[0151] 将未添加被验化合物(仅加入DMSO)的well的测定值设为0%抑制，将未添加 FGFR4 酶的we 11的测定值设为100 %抑制，算出各化合物在1 OnM下的FGFR4酶抑制率。即，FGFR^I 抑制率通过<FGFR4酶抑制率（％)〉= [ I-K添加被验化合物的well的测定值〉-<未添加 FGFR4酶的we 11的测定值〉} / {<未添加被验化合物(仅添加 DMSO)的wel 1的测定值〉-<未添加 FGFR4酶的well的测定值〉}]X100算出。其结果示于表1。
[0152] [表 1]
[0153] 各被验化合物（1 OnM)的FGFR4激酶活性抑制率
[0155] 由W上结果可W确认，作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、 化合物C、化合物D和化合物巧巧制了 FGFR4的激酶活性。
[0156] 试验例2FGFR19基因扩增阳性肝癌细胞化地-7)的增殖检测
[0157] 化H-7细胞为报告了FGF19基因扩增的肝实质细胞癌细胞株(Cancer cell. 2011， 19(3):347-58)。
[015引将化H-7细胞（购自t二一7シ哥^工シス研究資源パシ夕，JCRB0403)W500细 胞/9化L/well逐一接种到96孔聚苯乙締制平底板上，第二天添加被验化合物溶液（I^L) (被验化合物溶液的最终浓度为37nM，DMS0的最终浓度为0.1 % )。添加被验化合物溶液五天 后，使用CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay(Promega)通过ARV0X3 (Perkin Elmer)测定化H-7细胞的细胞数。将未添加被验化合物(仅加入DMSO)的well的测 定值设为0 %抑制，将未接种细胞(仅培养基）的wel 1的测定值设为100 %抑制，算出各被验 化合物在37nM下的增殖抑制率。即，通过<増殖抑制率（％ )〉=[ I-K添加被验化合物的well 的测定值〉-< 未接种细胞（仅培养基）的well的测定值〉}/{<未添加被验化合物（仅添加 DMSO)的well的测定值〉-<未接种细胞(仅培养基)的well的测定值〉}] X 100算出。将其结果 示于表2。
[0159] [表 2]
[0160] 各被验化合物(37nM)的化H-7细胞增殖抑制率
[0162] 从W上结果可W确认，作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、 化合物C、化合物D及化合物巧巧制了 FGFl 9基因扩增的肝癌细胞的增殖。
[0163] 试验例3FGF19基因扩增阳性肝癌细胞化地-7)皮下移植小鼠模型抗肿瘤试验
[0164] 向裸鼠（CAnN. Cg-Foxnlnu/CrlCrl j(nu/nu):日本予中一/レスリパ一，雄性，4-5周 龄）右腹侧皮下移植3 X 106cells/0.1 mUPBS和Matrigel Wl: 1悬浮的溶液）的HuH-7细胞。 从移植开始到约3周后，按照肿瘤体积和体重实施分组。各被验化合物给予组由4或5只小鼠 构成，各组的平均肿瘤体积为147-180mm 3。将被验化合物使用0.5%甲基纤维素水溶液制成 悬浊液，每日一次连续经口给药。关于被验化合物的给予量，化合物C设为0.3mg/kg/day，化 合物A、化合物B、化合物D及化合物E设为Img/kg/day，在给药开始日（第0天)和最终测定日 (化合物E为第9天，化合物A、化合物C及化合物D为第10天，化合物B为第13天)测定肿瘤体 积。关于肿瘤体积，用游标卡尺测定短径、长径，W (肿瘤体积mm3 )=(短径mm X短径mm X长 径mm)/2算出。另外，将未添加被验化合物的组（即仅给予0.5%甲基纤维素水溶液)作为对 照组，将对照组的最终测定日设为各化合物的最终测定日的同日（关于针对化合物E的对照 组为第9天，关于针对化合物A、化合物C及化合物D的对照组为第10天，关于针对化合物B的 对照组为第13天）。各被验化合物的肿瘤增殖抑制率通过<肿瘤増殖抑制率（％ )〉= <1-(被 验化合物给予组肿瘤体积增加量/对照组肿瘤体积增加量)〉X 100算出。肿瘤体积增加量W (肿瘤体积增加量）=(各组的最终测定日的肿瘤体积)-(各组第0天的肿瘤体积)算出。其结 果在表3中不出。
[01 化][表 3]
[0166]化H-7细胞皮下移植小鼠模型中的肿瘤增殖抑制率
[0168] 从W上结果可W确认，作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、 化合物C、化合物D及化合物巧巧制了皮下移植有FGF19基因扩增阳性肝癌细胞的动物模型中 肝癌的生长。
[0169] 试验例1至3的结果示出，化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化合物E、或其可 药用盐抑制了 FGFR4的激酶活性，对于与FGFR4或FGF19相关的各种癌(尤其是肝癌，作为一 个方式FGF19基因扩增阳性肝癌）的增殖抑制是有用的。
[0170] 工业实用性
[0171] 作为本发明的医药组合物的有效成分的化合物A、化合物B、化合物C、化合物D或化 合物E、或其可药用盐具有FGFR4抑制作用，可用作与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物、 作为另一方式与FGF19相关的癌的治疗用医药组合物、作为又另一方式FGF19基因扩增阳性 肝癌治疗用医药组合物的有效成分。
【主权项】
1. 一种与FGFR4相关的癌的治疗用医药组合物，其包含5-[ (2，6-二氟-3，5-二甲氧基苄 基)氧基]-N_{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]苯基}嘧啶-2-胺、2-[4-({5_ [(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]啼啶-2-基}氨基)-1!1-吡唑-卜基]乙醇、（21〇-3-[4-({5-[(2,6-二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1!1-吡唑-1-基]丙烷-1，2-二 醇、5-[(2,6_二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]-N-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-2-胺或 5-[ (2，6_二氟-3，5-二甲氧基苄基)氧基]-N-{ 1-甲基-5-[ (4-甲基哌嗪-1-基）甲基]-1H-吡 唑-3-基}嘧啶-2-胺或其可药用盐、以及赋形剂。2. 根据权利要求1所述的医药组合物，其中与FGFR4相关的癌为与FGF19相关的癌。3. 根据权利要求1所述的医药组合物，其中与FGFR4相关的癌为FGF19基因扩增阳性肝 癌。4. 根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含5-[(2,6_二氟-3,5-二甲氧 基苄基)氧基]-N-{3-甲氧基-4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]苯基}嘧啶-2-胺或其可 药用盐、以及赋形剂。5.根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含2-[4-({5-[(2,6_二氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]乙醇或其可药用盐、以及赋形剂。6. 根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含（2R)-3-[4-({5-[(2,6-二 氟-3,5-二甲氧基苄基)氧基]嘧啶-2-基}氨基)-1H-吡唑-1-基]丙烷-1，2-二醇或其可药用 盐、以及赋形剂。7. 根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含5-[(2,6_二氟-3,5-二甲氧 基苄基)氧基]-N-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-2-胺或其可药用盐、以及赋形剂。8.根据权利要求1至3中任一项所述的医药组合物，其包含5-[(2,6_二氟-3,5-二甲氧 基苄基)氧基]-N-{1-甲基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基）甲基]-1H-吡唑-3-基}嘧啶-2-胺或其可 药用盐、以及赋形剂。
【专利摘要】本发明提供一种与FGFR4相关的癌、与FGF19相关的癌或FGF？19基因扩增阳性肝癌的治疗用医药组合物。本发明人对具有FGFR抑制作用的化合物进行了研究，确认到特定的嘧啶化合物具有FGFR4抑制作用，含有这些化合物作为有效成分的医药组合物对于与FGFR4相关的癌、作为另一方式与FGF19相关的癌、作为又另一方式FGF？19基因扩增阳性肝癌具有治疗效果，从而完成了本发明。
【IPC分类】A61P43/00, A61K31/506, A61P1/16, A61P35/00
【公开号】CN105492009
【申请号】CN201480047119
【发明人】二见崇史, 竹下留美
【申请人】安斯泰来制药株式会社
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2014年8月27日
【公告号】CA2922352A1, EP3040072A1, US20160199371, WO2015030021A1
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