一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物及其制备方法
一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物合成技术领域，具体涉及一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物 及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 多发性骨髓瘤是发生在血浆细胞中的血癌，它通常生长在骨髓、大多数的骨骼海 绵软组织内，血细胞由骨髓生产。根据美国癌症协会预测，2012年将有21700人被诊断出患 有多发性骨髓瘤，10710将死于送种疾病。
[0003] 美国食品和药物管理局7月20日批准Kyprolis (卡非佐米，又称Carfilzomib)用 于此前至少经过两个优先疗法包括万河（测替佐米）和免疫调节剂治疗的多发性骨髓瘤患 者的治疗。通过对266例事先接受了测替佐米和沙利度胺治疗的多发性骨髓瘤复发患者进 行的临床研究，对Kyprolis的安全性和有效性进行了评估。在超过30%的参加研究者中 观察到的最常见副作用有疲劳、低血细胞计数和血小板水平、气短、腹泻、发烧。观察到的与 Kypro 1 i S有关的严重副作用包括必脏衰竭和呼吸急促。
[0004] 卡非佐米化学名称为：
[0005] N-{(2S)-2-[(mo^holin-4-ylacetyl)amino]-4-pheny]_butanoyl}-L-leu(：yl-N -{(2S)-4-methyl-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopentan-2-yl}-L-phenylalani namide,分子式；CwH日?N日〇7,分子量：719. 9,结构式如下：
[0006]
[0007] 卡非佐米是一种四肤基环氧骨架蛋白酶体抑制剂不可逆地结合至20S蛋白酶体 含苏氨酸N-端活性部位，蛋白水解的核必颗粒26S蛋白酶体。Carfilzom化在体外实体瘤和 血液系统肿瘤细胞有抗增殖和诱导调亡活性。在动物中，carfilzomib抑制在血液和组织中 蛋白酶体活性并在多发性骨髓瘤、血液和实体瘤模型中延迟肿瘤生长。
[0008] 卡非佐米几乎不溶于水，极微溶于酸性条件，不易做成液体制剂长期存放，大大的 限制了在临床中的应用，冻干制剂是较理想的剂型。目前上市的Kyprolis是由60mg卡非 佐米、3000mg礙了基離-目-环糊精和57. 7mg巧樣酸组成的无菌注射粉针剂，虽然礙了基 離-目-环糊精形成的包合物在一定程度上提高了药物的溶解性，但药物在溶液中非常不 稳定，在室温（15-3(rC)最多只能稳定4小时，送就要求最好在低温下输液，而现实条件不 能完全保证药品的安全性。另外，由于该处方包括礙了基-目-环糊精，对于长期连续用药 的患者来说，由于大量的礙了基-目-环糊精进入人体血液，存在安全性隐患。该无菌注射 粉针剂的pH值为3. 5,先用29ml无菌注射用水溶解，取给药剂量再用50ml 5 %葡萄糖注射 液稀释后2至10分钟完成静脉输液，由于输液的抑值偏低，输液速度偏快，不仅给患者带 来刺激疼痛感，更会引起血管疫李和静脉炎。因此需要一种新型卡非佐米药物。
【发明内容】
[0009] 为了解决W上问题，本发明引入了脂质体技术，脂质体是由磯脂和胆固醇构成的 具有双分子层的微型泡囊体，药物可包封于类脂质双分子层内，具有增加药物溶解性、降低 药物毒性、提高药物稳定性、提高药物祀向性和生物利用度等优点。
[0010] 本发明的目的在于提供一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物及其制备方法，将 药物包裹于脂质体并冷冻干燥，得到的卡非佐米脂质体冻干组合物在冻干前后抑值和粒 径变化均稳定、包封率保持稳定，在88% W上，冻干后水复溶性较好，水复溶后的粒径均匀， 冻干前后粒径均在100~300nm范围内，呈球形或类球形，外观圆整均匀，用5%葡萄糖溶液 稀释后稳定性和安全性更好
[0011] 具体而言，本发明提供的一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于按 重量份计算，包括W下组分：
[0012] 卡非佐米，5~20份，优选5~15,更优选5~10份；
[0013] 抗氧化剂，0. 1~1份，优选0. 1~0. 8份，更优选0. 1~0. 5份；
[0014] 抑值调节剂，1~5份，优选1~4份，更优选1~3份；
[0015] 磯脂类，40~100份，优选50~80份，更优选50~60份；
[0016] 胆固醇，5~20份，优选5~15份，更优选5~10份；
[0017] 冻干保护剂，5~25份，优选5~20份，更优选10~15份。
[0018] 所述组合物还包括有机溶剂和缓冲溶液。所述有机溶剂为氯仿或无水己離；所述 缓冲溶液为磯酸盐缓冲液。
[0019] 所述磯脂类选自高纯度蛋黄卵磯脂、高纯度氨化蛋黄卵磯脂、高纯度氨化大豆卵 磯脂化SPC)、1，2-二油醜基卵磯脂值0PC)、二踪搁酸磯脂醜胆碱值PPC)、二硬脂醜磯脂 醜胆碱值SPC)、二癸醜基卵磯脂值DPC)、二月桂醜基卵磯脂值LPC)、二肉豆護醜基卵磯脂 值MPC) U-肉豆護醜基-2-踪搁醜基卵磯脂（MPPC)、1-肉豆護醜基-2-硬脂醜基卵磯脂 (MSPC)中的一种或几种；优先的选自高纯度蛋黄卵磯脂、高纯度氨化蛋黄卵磯脂、二硬脂 醜磯脂醜胆碱值SPC)、二肉豆護醜基卵磯脂值MPC) U-肉豆護醜基-2-硬脂醜基卵磯脂 (MSPC)中的一种或几种；最优先的选自高纯度氨化蛋黄卵磯脂和）和二硬脂醜磯脂醜胆碱 值SPC)中的一种或两种。
[0020] 此外，在本发明的组合物中，磯脂的纯度直接影响脂质体的稳定性，不同磯脂水合 后会产生不同形态，胆碱磯脂最易形成脂质体，而溶血磯脂、己醇胺磯脂等易形成胶束及锥 形分子，磯脂中非胆碱磯脂的含量过高，会使脂质体膜不稳定及出现脂质体、胶束等多相混 合物。因此为了提高药物的包封率和脂质体的稳定性，上述磯脂类的纯度均在98% W上，本 申请所述的高纯度指纯度在98% W上。
[0021] 脂溶性药物主要分散到脂质体膜上，药物的比例越高，则包封率会较高，但同时载 药量会降低。为了达到较高的包封率和合适的载药量，本发明选择卡非佐米与所述脂质体 的重量之比为1:2~1:20,脂质体重量包括磯脂类、胆固醇和抗氧化剂。
[0022] 磯脂化学性质活泼，常温下暴露在空气中容易被氧化变质，加入一定比例的胆固 醇溶液能起到稳定脂质体化学性质，改善脂质体分子结构，使脂质体被氧化速率显著降低， 同时起到改善脂质体膜的通透性及流动性，但当胆固醇比例过大时，组成的脂质体的磯脂 的量太少，一方面脂质体微囊膜形成困难，另一方面所形成的脂质体膜也会变的不牢固，过 高胆固醇使得脂质体膜亲水性太强，膜容易破坏，包含物将容易渗漏出来，同时脂质体的粒 径会随胆固醇的含量增加而先增加后减小，为了解决W上问题，本发明选择磯脂类与胆固 醇的重量之比为2:1~20:1。
[0023] 所述抗氧化剂选自维生素E和维生素C中的一种或两种。脂质体在制备过程中容 易氧化，加入一定的抗氧化剂对脂质体起到保护的作用，提高脂质体的稳定性，提高了包封 率，相应的减少了渗透率。
[0024] 所述的抑调节剂选自巧樣酸、醋酸、盐酸、稀盐酸或氨氧化钢中的一种或几种，优 先的选自巧樣酸或氨氧化钢。
[0025] 所述冻干保护剂选自乳糖、甘露醇、山梨醇、海藻糖、藏糖和葡聚糖的两种或两种 W上，优选海藻糖和乳糖的混合物。脂质体混悬液冻干前后粒径很难把握，冻干复溶性差， 粒径很容易变大，外观容易塌陷，为了保证脂质体冻干后具有好的复溶性，粒径与冻干前变 化不大，外观成疏松块状或粉末状，本发明采用至少两种冻干保护剂，包裹药物的脂质体 (包括药物、脂质类、胆固醇和抗氧化剂）的重量是冻干保护剂的2~28. 2倍。
[0026] 本发明还提供了一种制备所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的方法，其特 征在于包括W下步骤：
[0027] 1)巧[J备多室脂质体混悬液
[0028] 按薄膜分散法将药物包裹于脂质体形成薄膜，倒入水相（如缓冲溶液），振摇后形 成0/W乳状多室脂质体混悬液；
[002引。制备单室脂质体
[0030] 将步骤1)制备的多室脂质体混悬液经过高压均质法或通过细胞粉碎机制备成粒 径100~300皿的单室脂质体，用抑调节剂将抑值调为3. 0~6. 5,优选3. 8~6. 5,最优 选 4. 0 ~5. 0 ;
[0031] 3)制备卡非佐米脂质体冻干粉
[0032] 将步骤2)制备的单室脂质体加入冻干保护剂，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻 干粉。
[0033] 其中步骤1)薄膜形成如下：
[0034] 首先通过在30~45C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有机溶剂，用氮气吹 干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机溶剂除尽。
[003引其中步骤2)中，高压均质的控制参数为温度5~35。压力20~ SOMPa,循环次数 为5~15次；细胞粉碎机的控制参数为温度5~35。功率100~400W，超声时间为1~ 10分钟。
[0036] 其中步骤3)中，冻干保护剂W溶于磯酸盐缓冲液的形式加入。
[0037] 此外，冻干工艺直接影响脂质体冻干品的质量好坏，不适合的冻干工艺使得出的 样品外观容易塌陷、不规则，复溶性差，粒径大，为了得出最佳的脂质体冻干样品，本发明的 步骤3)采用W下冻干工艺：
[0038] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；
[0039] 第二阶段，逐级升温干燥，-25°C保持化，-IOC保持化，-3°C保持IOh ;
[0040] 第H阶段，1(TC保持化，25C保持化。
[0041] 具体而言，本发明提供的一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的制备方法如 下：
[0042] 称取磯脂类和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離溶解完全，加入卡非佐 米原料粉末溶解完全，在30~45C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有机溶剂，在瓶内 壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机溶剂除尽，加入 含有抗氧化剂的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于55~8(TC水浴振摇1~ 2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用抑调节剂将乳液混悬 液抑值调为3. 0~6. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的冻干保护剂，振摇10~40分钟溶解完 全，分装于小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。高压均质的控制参数为温度5~ 35°C，压力20~SOMPa,循环次数为5~15次；细胞粉碎机的控制参数为温度5~35°C，功 率100~400W，超声时间为1~10分钟。
[0043] 本发明引入了脂质体技术，提供了一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物及其制 备方法，将药物包裹于脂质体并冷冻干燥，得到的卡非佐米脂质体冻干组合物在冻干前后 抑值和粒径变化均稳定、包封率保持稳定，在88% W上，冻干后水复溶性较好，水复溶后的 粒径均匀，冻干前后粒径均在100~300nm范围内，颗粒呈球形或类球形，外观圆整均匀，用 5%葡萄糖溶液稀释后稳定性和安全性更好。
【具体实施方式】
[0044] 下面通过实施例对本发明作进一步的详细说明，旨在用于说明本发明而非限定本 发明。应当指出，对于本领域技术人员而言，在不脱离本发明原理的前提下，还可W对本发 明进行若干改进和修饰，送些改进和修饰也同样落入本发明的保护范围之内。
[0045] 实施例一（药物30-100mg) 1000个剂量单位
[0046] 1.处方
[0047]
[0048] 2.制备工艺
[0049] 称取高纯度氨化蛋黄卵磯脂和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離溶解完 全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在4(TC的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有机溶 剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机溶 剂除尽，加入含有维生素E的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于7(TC水浴振 摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用抑调节剂将乳 液混悬液抑值调为4. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的冻干保护剂，用磯酸盐缓冲液定容至 5000ml，振摇30分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。 高压均质的控制参数为温度25C，压力60MPa，循环次数为10次；细胞粉碎机的控制参数为 温度30°C，功率200W，超声时间为5分钟。
[0050] 3.冻干工艺
[0051] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25C保持化，-IOC保持化，-3C保持IOh ;第H阶段，1(TC保持化，25C保 持化。
[005引 对比实施例一
[0053] A第一阶段冻干工艺对比
[0054] 1.处方
[00 巧]
[0056] 2.制备工艺
[0057] 称取高纯度氨化蛋黄卵磯脂和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離溶解完 全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在4(TC的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有机溶 剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机溶 剂除尽，加入含有维生素E的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于7(TC水浴振 摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用抑调节剂将乳 液混悬液抑值调为4. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的冻干保护剂，用磯酸盐缓冲液定容至 5000ml，振摇30分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。 高压均质的控制参数为温度25C，压力60MPa，循环次数为10次；细胞粉碎机的控制参数为 温度30°C，功率200W，超声时间为5分钟。
[0058] 3.冻干工艺
[0059] 第一阶段，慢速降温预冻，2小时内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段，逐 级升温干燥，-25°C保持化，-IOC保持化，-3°C保持IOh ;第H阶段，10°C保持化，25°C保持 6h。
[0060] 对比实施例一
[0061] B第二阶段冻干工艺对比
[0062] 1.处方
[0063]
[0064] 2.制备工艺
[0065] 称取高纯度氨化蛋黄卵磯脂和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離溶解完 全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在4(TC的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有机溶 剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机溶 剂除尽，加入含有维生素E的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于7(TC水浴振 摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用抑调节剂将乳 液混悬液抑值调为4. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的冻干保护剂，用磯酸盐缓冲液定容至 5000ml，振摇30分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。 高压均质的控制参数为温度25°C，压力60MPa，循环次数为10次；细胞粉碎机的控制参数为 温度30°C，功率200W，超声时间为5分钟。
[0066] 3.冻干工艺
[0067] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 升温干燥，-3°C保持22h ;第H阶段，1(TC保持化，25C保持化。
[0068] 实施例二
[0069] 1.处方
[0070]
[0071] 2.制备工艺
[0072] 称取二硬脂醜磯脂醜胆碱值SPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離 溶解完全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在38C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净 有机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有 机溶剂除尽，加入含有维生素E的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于6(TC水 浴振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用巧樣酸将乳 液混悬液抑值调为5. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的藏糖和甘露醇溶液，用磯酸盐缓冲液 定容至5000ml，振摇35分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体 冻干粉。高压均质的控制参数为温度3(TC，压力50MPa，循环次数为12次；细胞粉碎机的控 制参数为温度2(TC，功率300W，超声时间为8分钟。
[0073] 3.冻干工艺
[0074] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25C保持化，-IOC保持化，-3C保持IOh ;第H阶段，1(TC保持化，25C保 持化。
[00巧]对比实施例二
[007引药物；脂质体重量比为1:25
[0077] 1.处方
[0078]
[0079] 2.制备工艺
[0080] 称取二硬脂醜磯脂醜胆碱值SPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離 溶解完全，加入卡 非佐米原料粉末溶解完全，在38C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净 有机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有 机溶剂除尽，加入含有维生素E的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于6(TC水 浴振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用巧樣酸将乳 液混悬液抑值调为5. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的藏糖和甘露醇溶液，用磯酸盐缓冲液 定容至5000ml，振摇35分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体 冻干粉。高压均质的控制参数为温度3(TC，压力50MPa，循环次数为12次；细胞粉碎机的控 制参数为温度2(TC，功率300W，超声时间为8分钟。
[0081] 3.冻干工艺
[0082] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25°C保持化，-IOC保持化，-3°C保持IOh ;第H阶段，10°C保持化，25°C保 持化。
[008引 实施例S
[0084] 1.处方
[0085]
[0086] 2.制备工艺
[0087] 称取高纯度氨化大豆卵磯脂化SPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己 離溶解完全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在45C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除 净有机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保 有机溶剂除尽，加入含有维生素C的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于75C 水浴振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用巧樣酸将 乳液混悬液pH值调为4. 0,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的冻干保护剂，振摇40分钟溶解完全， 分装于小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。高压均质的控制参数为温度15C，压力 30MPa，循环次数为15次；细胞粉碎机的控制参数为温度15°C，功率250W，超声时间为5分 钟。
[0088] 3.冻干工艺
[0089] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25°C保持化，-IOC保持化，-3°C保持IOh ;第H阶段，10°C保持化，25°C保 持化。
[0090] 对比实施例S
[0091] 磯脂；胆固醇比为30:1
[0092] 1.处方
[0093]
[0094]
[0095] 2.制备工艺
[0096] 称取高纯度氨化大豆卵磯脂化SPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己 離溶解完全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在45C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除 净有机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保 有机溶剂除尽，加入含有维生素C的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于75C 水浴振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用巧樣酸将 乳液混悬液pH值调为4. 0,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的冻干保护剂，振摇40分钟溶解完全， 分装于小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。高压均质的控制参数为温度15C，压力 30MPa，循环次数为15次；细胞粉碎机的控制参数为温度15°C，功率250W，超声时间为5分 钟。
[0097] 3.冻干工艺
[0098] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25°C保持化，-IOC保持化，-3°C保持IOh ;第H阶段，10°C保持化，25°C保 持化。
[009引 实施例四
[0100] 1.处方
[0101]
[0102]
[0103] 2.制备工艺
[0104] 称取二踪搁酸磯脂醜胆碱值PPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離 溶解完全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在30的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有 机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机 溶剂除尽，加入含有维生素C的磯酸盐缓冲溶液（p册.8)，摇匀，静置20分钟，于8(TC水浴 振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用巧樣酸/氨氧 化钢将乳液混悬液抑值调为3. 8,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径 在100~300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的山梨醇和乳糖溶液，振摇10 分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。高压均质的控 制参数为温度l〇°C，压力SOMPa,循环次数为5次；细胞粉碎机的控制参数为温度35C，功 率400W，超声时间为10分钟。
[0105] 3.冻干工艺
[0106] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25°C保持化，-IOC保持化，-3°C保持IOh ;第H阶段，10°C保持化，25°C保 持化。
[0107] 实施例五 [010引 1.处方
[0109]
[0110]
[01川 2.巧[J备工艺
[0112] 称取二月桂醜基卵磯脂值LPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離溶 解完全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在35C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有 机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机 溶剂除尽，加入含有抗氧化剂的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于55C水浴 振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用巧樣酸/氨氧 化钢将乳液混悬液抑值调为6. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径 在100~300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的海藻糖和甘露醇溶液，振摇 40分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。高压均质的 控制参数为温度2(TC，压力40MPa，循环次数为15次；细胞粉碎机的控制参数为温度1(TC， 功率100W，超声时间为10分钟。
[011引 3.冻干工艺
[0114] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25C保持化，-IOC保持化，-3C保持IOh ;第H阶段，1(TC保持化，25C保 持化。
[011引 实施例六
[0116] 1.处方
[0117]
[011 引
[011引 2.巧[J备工艺
[0120] 称取1-肉豆護醜基-2-踪搁醜基卵磯脂（MPPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯 仿或无水己離溶解完全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在4(TC的温度下用旋转蒸发器 减压旋蒸除净有机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10 分钟W确保有机溶剂除尽，加入维生素E的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟， 于8(TC水浴振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用 抑调节剂将乳液混悬液抑值调为3. 8,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制 粒径在100~300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的乳糖和葡聚糖溶液，振 摇10分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。高压均质 的控制参数为温度fTC，压力20MPa，循环次数为15次；细胞粉碎机的控制参数为温度fTC， 功率400W，超声时间为1分钟。
[0121] 3.冻干工艺
[0122] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25C保持化，-IOC保持化，-3C保持IOh ;第H阶段，1(TC保持化，25C保 持化。
[0123] 实施例走
[0124] 卡非佐米脂质体冻干组合物的质量评价及评价方法
[0125] 显微形态观察：将W上实施例制得的脂质体粉末加水复溶，观察复溶情况，再加适 当水稀释，用2%磯鹤酸溶液负染，用透射电镜观察粒子情况。
[0126] 粒径及其分布：将W上实施例制得的冻干前的脂质体混悬液和冻干复溶后的脂质 体稀释液，分别用激光散射粒度分析仪测定脂质体平均粒径。
[0127] 包封率测定；分别取 适量W上实施例制得的卡非佐米脂质体组合物混悬液和冻干 粉，置超滤浓缩管中（Vivaspin 2超滤离必管2000MWC0)，脂质体被截留在上层膜上，游离 药物在浓缩管下层离必液中，离必速度SOOOrpm,离必5分钟，收集离必液，加水到上层膜， 摇晃几次，再离必，收集离必液，如此重复H次，合并离必液，分别取适量卡非佐米脂质体组 合物混悬液和离必液，测定药物总浓度和游离药物浓度，包封率计算公式为包封率=W游/ W总 X100%。
[0128] 渗漏率测定；分别取W上实施例制得的卡非佐米脂质体组合物混悬液和冻干粉 密封于踪色瓶中，25C条件下放置，定时取样，测其渗漏率。按测包封率的方法测定胆存 一定时间后脂质体渗漏出来的游离药物量W1，另将胆存前测定的脂质体的游离药物量记 为W2,由脂质体胆存前的包封率，计算胆存前包封的药物量W包。渗漏率=[(W1-W2)/W 包]X100%。
[0129] W上实施例的检测结果如下：
[0130]
[0132] 从上述实施例的检测结果可W看出，实施例一是较好的结果数据，对比实施一 A 的预冻采用的是慢冻的方式，得出的脂质体冻干组合物粒径较大，超过300nm，包封率和渗 漏率也不符合发明的要求；对比实施例一 B的第二冻干阶段采用的是直接升温过程，得出 的脂质体组合物外观塌陷，显微镜显示圆整不均匀，包封率和渗漏率也不符合发明要求。对 比实施例二是采用药脂比为1:25的处方制备的脂质体组合物，与实施例二对比，得出的脂 质体冻干组合物包封率较低，说明要想包封率高，药物的比例就要越高。对比实施例H是采 用磯脂类；胆固醇比为30:1的处方制备的脂质体组合物，与实施例H对比，得出的脂质体 冻干组合物包封率和渗漏率均较大，说明胆固醇比例低时，脂质体不稳定。实施例四、五、六 结果较好。
[0133] 实施例八
[0134] 卡非佐米脂质体组合物冻干粉的稳定性考察
[0135] 取W上实施例制得的卡非佐米脂质体组合物冻干粉和市售的Kyprolis普通粉针 先用29ml水复溶，取15ml用5%的葡萄糖稀释至50ml，分别存放于2~8°C和室温（15~ 3(TC )，在化、地、化、1化、24K4化时间点取样检测有关物质和含量，有关物质和含量均按 HPLC法测定。
[0139] 从上述结果可W看出，不在本发明范围内的对比实施例A和B、对比实施例二和对 比实施例H得出的结果较差，含量和有关物质降解较快，市售Kyprolis粉针在2~8°C保存 时间为24小时，室温（15~30°C )条件下保存4小时；对比于市售Kyprolis粉针，本发明 的实施例一、二、H、四、五和六在2~8°C能保存48小时，室温（15~30°C )条件下能保存 24小时，有关物质总杂质含量< 5%，含量> 95%。
【主权项】
1. 一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于按重量份计算，包括以下组 分： 卡非佐米，5~20份，优选5~15,更优选5~10份； 抗氧化剂，0. 1~1份，优选0. 1~0. 8份，更优选0. 1~0. 5份； pH值调节剂，1~5份，优选1~4份，更优选1~3份； 磷脂类，40~100份，优选50~80份，更优选50~60份； 胆固醇，5~20份，优选5~15份，更优选5~10份； 冻干保护剂，5~25份，优选5~20份，更优选10~15份。2. 根据权利要求1所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述组合物还包括有机溶剂和缓冲溶液。3. 根据权利要求2所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述有机溶剂为氯仿或无水乙醚； 所述缓冲溶液为磷酸盐缓冲液。4. 根据权利要求1所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述磷脂类的纯度在98%以上。5. 根据权利要求4所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述磷脂类为胆碱磷脂、溶血磷脂、乙醇胺磷脂。6. 根据权利要求5所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述磷脂类选自蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、1，2_二油酰基卵磷 月旨、二棕榈酸磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二癸酰基卵磷脂、二月桂酰基卵磷脂、二肉 豆蘧酰基卵磷脂、1-肉豆蘧酰基-2-棕榈酰基卵磷脂、1-肉豆蘧酰基-2-硬脂酰基卵磷脂 中的一种或几种； 优先的选自蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蘧酰基卵磷 月旨、1-肉豆蘧酰基-2-硬脂酰基卵磷脂中的一种或几种； 最优先的选自氢化蛋黄卵磷脂和二硬脂酰磷脂酰胆碱中的一种或两种。7. 根据权利要求1所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 磷脂类、胆固醇和抗氧化剂组成脂质体，卡非佐米与所述脂质体的重量之比为1:2~ 1:20。8. 根据权利要求1或7所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 其中所述磷脂类与胆固醇的重量之比为2:1~20:1。9. 根据权利要求1所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述抗氧化剂选自维生素 E和维生素 C中的一种或两种。10. 根据权利要求1所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述的pH调节剂选自柠檬酸、醋酸、盐酸、稀盐酸或氢氧化纳中的一种或几种，优选选 自柠檬酸或氢氧化纳。11. 根据权利要求1所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述冻干保护剂选自乳糖、甘露醇、山梨醇、海藻糖、蔗糖和葡聚糖的两种或两种以上， 优选海藻糖和乳糖的混合物。12. 根据权利要求11所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 包裹药物的脂质体包括药物、脂质类、胆固醇和抗氧化剂，其重量是冻干保护剂的2~ 28. 2 倍。13. -种制备如权利要求1~12所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的方法，其 特征在于包括以下步骤： 1) 制备多室脂质体混悬液 按薄膜分散法将药物包裹于脂质体形成薄膜，倒入水相，振摇后形成0/W乳状多室脂 质体混悬液； 2) 制备单室脂质体 将步骤1)制备的多室脂质体混悬液经过高压均质法或通过细胞粉碎机制备成粒径 100~300nm的单室脂质体，用pH调节剂将pH值调为3. 0~6. 5,优选3. 8~6. 5,最优选 4. 0 ~5. 0 ; 3) 制备卡非佐米脂质体冻干粉 将步骤2)制备的单室脂质体加入冻干保护剂，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。14. 根据权利要求13所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的方法，其特征在于： 其中步骤3)中，冻干保护剂以溶于磷酸盐缓冲液的形式加入。15. 根据权利要求13所述的制备卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的方法，其特征在 于： 其中步骤3)采用以下冻干工艺： 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从20°C降至_45°C，_45°C保持5h ; 第二阶段，逐级升温干燥，_25°C保持6h，-1(TC保持6h，-3°C保持10h ; 第三阶段，KTC保持2h，25°C保持6h。16. 根据权利要求13所述的制备卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的方法，其特征在 于： 其中步骤2)中，高压均质的控制参数为温度5~35°C，压力20~80MPa，循环次数为 5~15次；细胞粉碎机的控制参数为温度5~35°C，功率100~400W，超声时间为1~10 分钟。17. 根据权利要求13所述的制备卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的方法，其特征在 于： 其中步骤1)薄膜形成如下： 首先通过在30~45°C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有机溶剂，用氮气吹干或 继续负压旋蒸10分钟以确保有机溶剂除尽。18. 权利要求1-12所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物在制备用于治疗多发性 骨髓瘤的药物中的用途。
【专利摘要】本发明属于药物合成技术领域，具体涉及一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物及其制备方法。本发明的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其按重量份计算，包括以下组分：卡非佐米，5～20份；抗氧化剂，0.1～1份；pH值调节剂，1～5份；磷脂类，40～100份；胆固醇，5～20份；冻干保护剂，5～25份。本发明的制备方法包括步骤：1)制备多室脂质体混悬液；2)制备单室脂质体；3)制备卡非佐米脂质体冻干粉。本发明得到的卡非佐米脂质体冻干组合物在冻干前后pH值和粒径变化均稳定、包封率保持稳定，冻干后水复溶性较好，水复溶后的粒径均匀，颗粒呈球形或类球形，外观圆整均匀。
【IPC分类】A61K47/22, A61K38/08, A61P35/00, A61K47/26, A61K47/28, A61K9/19, A61K47/24
【公开号】CN105497871
【申请号】CN201410497889
【发明人】徐春莲, 刘建, 马亚平, 袁建成
【申请人】深圳翰宇药业股份有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2014年9月25日
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物合成技术领域，具体涉及一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物 及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 多发性骨髓瘤是发生在血浆细胞中的血癌，它通常生长在骨髓、大多数的骨骼海 绵软组织内，血细胞由骨髓生产。根据美国癌症协会预测，2012年将有21700人被诊断出患 有多发性骨髓瘤，10710将死于送种疾病。
[0003] 美国食品和药物管理局7月20日批准Kyprolis (卡非佐米，又称Carfilzomib)用 于此前至少经过两个优先疗法包括万河（测替佐米）和免疫调节剂治疗的多发性骨髓瘤患 者的治疗。通过对266例事先接受了测替佐米和沙利度胺治疗的多发性骨髓瘤复发患者进 行的临床研究，对Kyprolis的安全性和有效性进行了评估。在超过30%的参加研究者中 观察到的最常见副作用有疲劳、低血细胞计数和血小板水平、气短、腹泻、发烧。观察到的与 Kypro 1 i S有关的严重副作用包括必脏衰竭和呼吸急促。
[0004] 卡非佐米化学名称为：
[0005] N-{(2S)-2-[(mo^holin-4-ylacetyl)amino]-4-pheny]_butanoyl}-L-leu(：yl-N -{(2S)-4-methyl-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopentan-2-yl}-L-phenylalani namide,分子式；CwH日?N日〇7,分子量：719. 9,结构式如下：
[0006]
[0007] 卡非佐米是一种四肤基环氧骨架蛋白酶体抑制剂不可逆地结合至20S蛋白酶体 含苏氨酸N-端活性部位，蛋白水解的核必颗粒26S蛋白酶体。Carfilzom化在体外实体瘤和 血液系统肿瘤细胞有抗增殖和诱导调亡活性。在动物中，carfilzomib抑制在血液和组织中 蛋白酶体活性并在多发性骨髓瘤、血液和实体瘤模型中延迟肿瘤生长。
[0008] 卡非佐米几乎不溶于水，极微溶于酸性条件，不易做成液体制剂长期存放，大大的 限制了在临床中的应用，冻干制剂是较理想的剂型。目前上市的Kyprolis是由60mg卡非 佐米、3000mg礙了基離-目-环糊精和57. 7mg巧樣酸组成的无菌注射粉针剂，虽然礙了基 離-目-环糊精形成的包合物在一定程度上提高了药物的溶解性，但药物在溶液中非常不 稳定，在室温（15-3(rC)最多只能稳定4小时，送就要求最好在低温下输液，而现实条件不 能完全保证药品的安全性。另外，由于该处方包括礙了基-目-环糊精，对于长期连续用药 的患者来说，由于大量的礙了基-目-环糊精进入人体血液，存在安全性隐患。该无菌注射 粉针剂的pH值为3. 5,先用29ml无菌注射用水溶解，取给药剂量再用50ml 5 %葡萄糖注射 液稀释后2至10分钟完成静脉输液，由于输液的抑值偏低，输液速度偏快，不仅给患者带 来刺激疼痛感，更会引起血管疫李和静脉炎。因此需要一种新型卡非佐米药物。
【发明内容】
[0009] 为了解决W上问题，本发明引入了脂质体技术，脂质体是由磯脂和胆固醇构成的 具有双分子层的微型泡囊体，药物可包封于类脂质双分子层内，具有增加药物溶解性、降低 药物毒性、提高药物稳定性、提高药物祀向性和生物利用度等优点。
[0010] 本发明的目的在于提供一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物及其制备方法，将 药物包裹于脂质体并冷冻干燥，得到的卡非佐米脂质体冻干组合物在冻干前后抑值和粒 径变化均稳定、包封率保持稳定，在88% W上，冻干后水复溶性较好，水复溶后的粒径均匀， 冻干前后粒径均在100~300nm范围内，呈球形或类球形，外观圆整均匀，用5%葡萄糖溶液 稀释后稳定性和安全性更好
[0011] 具体而言，本发明提供的一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于按 重量份计算，包括W下组分：
[0012] 卡非佐米，5~20份，优选5~15,更优选5~10份；
[0013] 抗氧化剂，0. 1~1份，优选0. 1~0. 8份，更优选0. 1~0. 5份；
[0014] 抑值调节剂，1~5份，优选1~4份，更优选1~3份；
[0015] 磯脂类，40~100份，优选50~80份，更优选50~60份；
[0016] 胆固醇，5~20份，优选5~15份，更优选5~10份；
[0017] 冻干保护剂，5~25份，优选5~20份，更优选10~15份。
[0018] 所述组合物还包括有机溶剂和缓冲溶液。所述有机溶剂为氯仿或无水己離；所述 缓冲溶液为磯酸盐缓冲液。
[0019] 所述磯脂类选自高纯度蛋黄卵磯脂、高纯度氨化蛋黄卵磯脂、高纯度氨化大豆卵 磯脂化SPC)、1，2-二油醜基卵磯脂值0PC)、二踪搁酸磯脂醜胆碱值PPC)、二硬脂醜磯脂 醜胆碱值SPC)、二癸醜基卵磯脂值DPC)、二月桂醜基卵磯脂值LPC)、二肉豆護醜基卵磯脂 值MPC) U-肉豆護醜基-2-踪搁醜基卵磯脂（MPPC)、1-肉豆護醜基-2-硬脂醜基卵磯脂 (MSPC)中的一种或几种；优先的选自高纯度蛋黄卵磯脂、高纯度氨化蛋黄卵磯脂、二硬脂 醜磯脂醜胆碱值SPC)、二肉豆護醜基卵磯脂值MPC) U-肉豆護醜基-2-硬脂醜基卵磯脂 (MSPC)中的一种或几种；最优先的选自高纯度氨化蛋黄卵磯脂和）和二硬脂醜磯脂醜胆碱 值SPC)中的一种或两种。
[0020] 此外，在本发明的组合物中，磯脂的纯度直接影响脂质体的稳定性，不同磯脂水合 后会产生不同形态，胆碱磯脂最易形成脂质体，而溶血磯脂、己醇胺磯脂等易形成胶束及锥 形分子，磯脂中非胆碱磯脂的含量过高，会使脂质体膜不稳定及出现脂质体、胶束等多相混 合物。因此为了提高药物的包封率和脂质体的稳定性，上述磯脂类的纯度均在98% W上，本 申请所述的高纯度指纯度在98% W上。
[0021] 脂溶性药物主要分散到脂质体膜上，药物的比例越高，则包封率会较高，但同时载 药量会降低。为了达到较高的包封率和合适的载药量，本发明选择卡非佐米与所述脂质体 的重量之比为1:2~1:20,脂质体重量包括磯脂类、胆固醇和抗氧化剂。
[0022] 磯脂化学性质活泼，常温下暴露在空气中容易被氧化变质，加入一定比例的胆固 醇溶液能起到稳定脂质体化学性质，改善脂质体分子结构，使脂质体被氧化速率显著降低， 同时起到改善脂质体膜的通透性及流动性，但当胆固醇比例过大时，组成的脂质体的磯脂 的量太少，一方面脂质体微囊膜形成困难，另一方面所形成的脂质体膜也会变的不牢固，过 高胆固醇使得脂质体膜亲水性太强，膜容易破坏，包含物将容易渗漏出来，同时脂质体的粒 径会随胆固醇的含量增加而先增加后减小，为了解决W上问题，本发明选择磯脂类与胆固 醇的重量之比为2:1~20:1。
[0023] 所述抗氧化剂选自维生素E和维生素C中的一种或两种。脂质体在制备过程中容 易氧化，加入一定的抗氧化剂对脂质体起到保护的作用，提高脂质体的稳定性，提高了包封 率，相应的减少了渗透率。
[0024] 所述的抑调节剂选自巧樣酸、醋酸、盐酸、稀盐酸或氨氧化钢中的一种或几种，优 先的选自巧樣酸或氨氧化钢。
[0025] 所述冻干保护剂选自乳糖、甘露醇、山梨醇、海藻糖、藏糖和葡聚糖的两种或两种 W上，优选海藻糖和乳糖的混合物。脂质体混悬液冻干前后粒径很难把握，冻干复溶性差， 粒径很容易变大，外观容易塌陷，为了保证脂质体冻干后具有好的复溶性，粒径与冻干前变 化不大，外观成疏松块状或粉末状，本发明采用至少两种冻干保护剂，包裹药物的脂质体 (包括药物、脂质类、胆固醇和抗氧化剂）的重量是冻干保护剂的2~28. 2倍。
[0026] 本发明还提供了一种制备所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的方法，其特 征在于包括W下步骤：
[0027] 1)巧[J备多室脂质体混悬液
[0028] 按薄膜分散法将药物包裹于脂质体形成薄膜，倒入水相（如缓冲溶液），振摇后形 成0/W乳状多室脂质体混悬液；
[002引。制备单室脂质体
[0030] 将步骤1)制备的多室脂质体混悬液经过高压均质法或通过细胞粉碎机制备成粒 径100~300皿的单室脂质体，用抑调节剂将抑值调为3. 0~6. 5,优选3. 8~6. 5,最优 选 4. 0 ~5. 0 ;
[0031] 3)制备卡非佐米脂质体冻干粉
[0032] 将步骤2)制备的单室脂质体加入冻干保护剂，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻 干粉。
[0033] 其中步骤1)薄膜形成如下：
[0034] 首先通过在30~45C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有机溶剂，用氮气吹 干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机溶剂除尽。
[003引其中步骤2)中，高压均质的控制参数为温度5~35。压力20~ SOMPa,循环次数 为5~15次；细胞粉碎机的控制参数为温度5~35。功率100~400W，超声时间为1~ 10分钟。
[0036] 其中步骤3)中，冻干保护剂W溶于磯酸盐缓冲液的形式加入。
[0037] 此外，冻干工艺直接影响脂质体冻干品的质量好坏，不适合的冻干工艺使得出的 样品外观容易塌陷、不规则，复溶性差，粒径大，为了得出最佳的脂质体冻干样品，本发明的 步骤3)采用W下冻干工艺：
[0038] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；
[0039] 第二阶段，逐级升温干燥，-25°C保持化，-IOC保持化，-3°C保持IOh ;
[0040] 第H阶段，1(TC保持化，25C保持化。
[0041] 具体而言，本发明提供的一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的制备方法如 下：
[0042] 称取磯脂类和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離溶解完全，加入卡非佐 米原料粉末溶解完全，在30~45C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有机溶剂，在瓶内 壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机溶剂除尽，加入 含有抗氧化剂的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于55~8(TC水浴振摇1~ 2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用抑调节剂将乳液混悬 液抑值调为3. 0~6. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的冻干保护剂，振摇10~40分钟溶解完 全，分装于小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。高压均质的控制参数为温度5~ 35°C，压力20~SOMPa,循环次数为5~15次；细胞粉碎机的控制参数为温度5~35°C，功 率100~400W，超声时间为1~10分钟。
[0043] 本发明引入了脂质体技术，提供了一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物及其制 备方法，将药物包裹于脂质体并冷冻干燥，得到的卡非佐米脂质体冻干组合物在冻干前后 抑值和粒径变化均稳定、包封率保持稳定，在88% W上，冻干后水复溶性较好，水复溶后的 粒径均匀，冻干前后粒径均在100~300nm范围内，颗粒呈球形或类球形，外观圆整均匀，用 5%葡萄糖溶液稀释后稳定性和安全性更好。
【具体实施方式】
[0044] 下面通过实施例对本发明作进一步的详细说明，旨在用于说明本发明而非限定本 发明。应当指出，对于本领域技术人员而言，在不脱离本发明原理的前提下，还可W对本发 明进行若干改进和修饰，送些改进和修饰也同样落入本发明的保护范围之内。
[0045] 实施例一（药物30-100mg) 1000个剂量单位
[0046] 1.处方
[0047]
[0048] 2.制备工艺
[0049] 称取高纯度氨化蛋黄卵磯脂和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離溶解完 全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在4(TC的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有机溶 剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机溶 剂除尽，加入含有维生素E的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于7(TC水浴振 摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用抑调节剂将乳 液混悬液抑值调为4. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的冻干保护剂，用磯酸盐缓冲液定容至 5000ml，振摇30分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。 高压均质的控制参数为温度25C，压力60MPa，循环次数为10次；细胞粉碎机的控制参数为 温度30°C，功率200W，超声时间为5分钟。
[0050] 3.冻干工艺
[0051] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25C保持化，-IOC保持化，-3C保持IOh ;第H阶段，1(TC保持化，25C保 持化。
[005引 对比实施例一
[0053] A第一阶段冻干工艺对比
[0054] 1.处方
[00 巧]
[0056] 2.制备工艺
[0057] 称取高纯度氨化蛋黄卵磯脂和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離溶解完 全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在4(TC的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有机溶 剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机溶 剂除尽，加入含有维生素E的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于7(TC水浴振 摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用抑调节剂将乳 液混悬液抑值调为4. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的冻干保护剂，用磯酸盐缓冲液定容至 5000ml，振摇30分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。 高压均质的控制参数为温度25C，压力60MPa，循环次数为10次；细胞粉碎机的控制参数为 温度30°C，功率200W，超声时间为5分钟。
[0058] 3.冻干工艺
[0059] 第一阶段，慢速降温预冻，2小时内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段，逐 级升温干燥，-25°C保持化，-IOC保持化，-3°C保持IOh ;第H阶段，10°C保持化，25°C保持 6h。
[0060] 对比实施例一
[0061] B第二阶段冻干工艺对比
[0062] 1.处方
[0063]
[0064] 2.制备工艺
[0065] 称取高纯度氨化蛋黄卵磯脂和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離溶解完 全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在4(TC的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有机溶 剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机溶 剂除尽，加入含有维生素E的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于7(TC水浴振 摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用抑调节剂将乳 液混悬液抑值调为4. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的冻干保护剂，用磯酸盐缓冲液定容至 5000ml，振摇30分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。 高压均质的控制参数为温度25°C，压力60MPa，循环次数为10次；细胞粉碎机的控制参数为 温度30°C，功率200W，超声时间为5分钟。
[0066] 3.冻干工艺
[0067] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 升温干燥，-3°C保持22h ;第H阶段，1(TC保持化，25C保持化。
[0068] 实施例二
[0069] 1.处方
[0070]
[0071] 2.制备工艺
[0072] 称取二硬脂醜磯脂醜胆碱值SPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離 溶解完全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在38C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净 有机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有 机溶剂除尽，加入含有维生素E的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于6(TC水 浴振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用巧樣酸将乳 液混悬液抑值调为5. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的藏糖和甘露醇溶液，用磯酸盐缓冲液 定容至5000ml，振摇35分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体 冻干粉。高压均质的控制参数为温度3(TC，压力50MPa，循环次数为12次；细胞粉碎机的控 制参数为温度2(TC，功率300W，超声时间为8分钟。
[0073] 3.冻干工艺
[0074] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25C保持化，-IOC保持化，-3C保持IOh ;第H阶段，1(TC保持化，25C保 持化。
[00巧]对比实施例二
[007引药物；脂质体重量比为1:25
[0077] 1.处方
[0078]
[0079] 2.制备工艺
[0080] 称取二硬脂醜磯脂醜胆碱值SPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離 溶解完全，加入卡 非佐米原料粉末溶解完全，在38C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净 有机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有 机溶剂除尽，加入含有维生素E的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于6(TC水 浴振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用巧樣酸将乳 液混悬液抑值调为5. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的藏糖和甘露醇溶液，用磯酸盐缓冲液 定容至5000ml，振摇35分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体 冻干粉。高压均质的控制参数为温度3(TC，压力50MPa，循环次数为12次；细胞粉碎机的控 制参数为温度2(TC，功率300W，超声时间为8分钟。
[0081] 3.冻干工艺
[0082] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25°C保持化，-IOC保持化，-3°C保持IOh ;第H阶段，10°C保持化，25°C保 持化。
[008引 实施例S
[0084] 1.处方
[0085]
[0086] 2.制备工艺
[0087] 称取高纯度氨化大豆卵磯脂化SPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己 離溶解完全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在45C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除 净有机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保 有机溶剂除尽，加入含有维生素C的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于75C 水浴振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用巧樣酸将 乳液混悬液pH值调为4. 0,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的冻干保护剂，振摇40分钟溶解完全， 分装于小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。高压均质的控制参数为温度15C，压力 30MPa，循环次数为15次；细胞粉碎机的控制参数为温度15°C，功率250W，超声时间为5分 钟。
[0088] 3.冻干工艺
[0089] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25°C保持化，-IOC保持化，-3°C保持IOh ;第H阶段，10°C保持化，25°C保 持化。
[0090] 对比实施例S
[0091] 磯脂；胆固醇比为30:1
[0092] 1.处方
[0093]
[0094]
[0095] 2.制备工艺
[0096] 称取高纯度氨化大豆卵磯脂化SPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己 離溶解完全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在45C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除 净有机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保 有机溶剂除尽，加入含有维生素C的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于75C 水浴振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用巧樣酸将 乳液混悬液pH值调为4. 0,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径在100~ 300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的冻干保护剂，振摇40分钟溶解完全， 分装于小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。高压均质的控制参数为温度15C，压力 30MPa，循环次数为15次；细胞粉碎机的控制参数为温度15°C，功率250W，超声时间为5分 钟。
[0097] 3.冻干工艺
[0098] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25°C保持化，-IOC保持化，-3°C保持IOh ;第H阶段，10°C保持化，25°C保 持化。
[009引 实施例四
[0100] 1.处方
[0101]
[0102]
[0103] 2.制备工艺
[0104] 称取二踪搁酸磯脂醜胆碱值PPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離 溶解完全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在30的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有 机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机 溶剂除尽，加入含有维生素C的磯酸盐缓冲溶液（p册.8)，摇匀，静置20分钟，于8(TC水浴 振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用巧樣酸/氨氧 化钢将乳液混悬液抑值调为3. 8,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径 在100~300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的山梨醇和乳糖溶液，振摇10 分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。高压均质的控 制参数为温度l〇°C，压力SOMPa,循环次数为5次；细胞粉碎机的控制参数为温度35C，功 率400W，超声时间为10分钟。
[0105] 3.冻干工艺
[0106] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25°C保持化，-IOC保持化，-3°C保持IOh ;第H阶段，10°C保持化，25°C保 持化。
[0107] 实施例五 [010引 1.处方
[0109]
[0110]
[01川 2.巧[J备工艺
[0112] 称取二月桂醜基卵磯脂值LPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯仿或无水己離溶 解完全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在35C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有 机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10分钟W确保有机 溶剂除尽，加入含有抗氧化剂的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟，于55C水浴 振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用巧樣酸/氨氧 化钢将乳液混悬液抑值调为6. 5,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制粒径 在100~300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的海藻糖和甘露醇溶液，振摇 40分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。高压均质的 控制参数为温度2(TC，压力40MPa，循环次数为15次；细胞粉碎机的控制参数为温度1(TC， 功率100W，超声时间为10分钟。
[011引 3.冻干工艺
[0114] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25C保持化，-IOC保持化，-3C保持IOh ;第H阶段，1(TC保持化，25C保 持化。
[011引 实施例六
[0116] 1.处方
[0117]
[011 引
[011引 2.巧[J备工艺
[0120] 称取1-肉豆護醜基-2-踪搁醜基卵磯脂（MPPC)和胆固醇于梨形瓶中，加适量氯 仿或无水己離溶解完全，加入卡非佐米原料粉末溶解完全，在4(TC的温度下用旋转蒸发器 减压旋蒸除净有机溶剂，在瓶内壁形成一层均匀的薄膜后，用氮气吹干或继续负压旋蒸10 分钟W确保有机溶剂除尽，加入维生素E的磯酸盐缓冲溶液（P册.8)，摇匀，静置20分钟， 于8(TC水浴振摇1~2小时洗膜，直至薄膜完全水化得到0/W乳状多室脂质体混悬液，用 抑调节剂将乳液混悬液抑值调为3. 8,置于高压均质机中均质或细胞粉碎机中超声，控制 粒径在100~300nm，得到小单室脂质体，加入溶于磯酸盐缓冲液的乳糖和葡聚糖溶液，振 摇10分钟溶解完全，分装于1000个小瓶，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。高压均质 的控制参数为温度fTC，压力20MPa，循环次数为15次；细胞粉碎机的控制参数为温度fTC， 功率400W，超声时间为1分钟。
[0121] 3.冻干工艺
[0122] 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从2(TC降至-45C，-45C保持化；第二阶段， 逐级升温干燥，-25C保持化，-IOC保持化，-3C保持IOh ;第H阶段，1(TC保持化，25C保 持化。
[0123] 实施例走
[0124] 卡非佐米脂质体冻干组合物的质量评价及评价方法
[0125] 显微形态观察：将W上实施例制得的脂质体粉末加水复溶，观察复溶情况，再加适 当水稀释，用2%磯鹤酸溶液负染，用透射电镜观察粒子情况。
[0126] 粒径及其分布：将W上实施例制得的冻干前的脂质体混悬液和冻干复溶后的脂质 体稀释液，分别用激光散射粒度分析仪测定脂质体平均粒径。
[0127] 包封率测定；分别取 适量W上实施例制得的卡非佐米脂质体组合物混悬液和冻干 粉，置超滤浓缩管中（Vivaspin 2超滤离必管2000MWC0)，脂质体被截留在上层膜上，游离 药物在浓缩管下层离必液中，离必速度SOOOrpm,离必5分钟，收集离必液，加水到上层膜， 摇晃几次，再离必，收集离必液，如此重复H次，合并离必液，分别取适量卡非佐米脂质体组 合物混悬液和离必液，测定药物总浓度和游离药物浓度，包封率计算公式为包封率=W游/ W总 X100%。
[0128] 渗漏率测定；分别取W上实施例制得的卡非佐米脂质体组合物混悬液和冻干粉 密封于踪色瓶中，25C条件下放置，定时取样，测其渗漏率。按测包封率的方法测定胆存 一定时间后脂质体渗漏出来的游离药物量W1，另将胆存前测定的脂质体的游离药物量记 为W2,由脂质体胆存前的包封率，计算胆存前包封的药物量W包。渗漏率=[(W1-W2)/W 包]X100%。
[0129] W上实施例的检测结果如下：
[0130]
[0132] 从上述实施例的检测结果可W看出，实施例一是较好的结果数据，对比实施一 A 的预冻采用的是慢冻的方式，得出的脂质体冻干组合物粒径较大，超过300nm，包封率和渗 漏率也不符合发明的要求；对比实施例一 B的第二冻干阶段采用的是直接升温过程，得出 的脂质体组合物外观塌陷，显微镜显示圆整不均匀，包封率和渗漏率也不符合发明要求。对 比实施例二是采用药脂比为1:25的处方制备的脂质体组合物，与实施例二对比，得出的脂 质体冻干组合物包封率较低，说明要想包封率高，药物的比例就要越高。对比实施例H是采 用磯脂类；胆固醇比为30:1的处方制备的脂质体组合物，与实施例H对比，得出的脂质体 冻干组合物包封率和渗漏率均较大，说明胆固醇比例低时，脂质体不稳定。实施例四、五、六 结果较好。
[0133] 实施例八
[0134] 卡非佐米脂质体组合物冻干粉的稳定性考察
[0135] 取W上实施例制得的卡非佐米脂质体组合物冻干粉和市售的Kyprolis普通粉针 先用29ml水复溶，取15ml用5%的葡萄糖稀释至50ml，分别存放于2~8°C和室温（15~ 3(TC )，在化、地、化、1化、24K4化时间点取样检测有关物质和含量，有关物质和含量均按 HPLC法测定。
[0139] 从上述结果可W看出，不在本发明范围内的对比实施例A和B、对比实施例二和对 比实施例H得出的结果较差，含量和有关物质降解较快，市售Kyprolis粉针在2~8°C保存 时间为24小时，室温（15~30°C )条件下保存4小时；对比于市售Kyprolis粉针，本发明 的实施例一、二、H、四、五和六在2~8°C能保存48小时，室温（15~30°C )条件下能保存 24小时，有关物质总杂质含量< 5%，含量> 95%。
【主权项】
1. 一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于按重量份计算，包括以下组 分： 卡非佐米，5~20份，优选5~15,更优选5~10份； 抗氧化剂，0. 1~1份，优选0. 1~0. 8份，更优选0. 1~0. 5份； pH值调节剂，1~5份，优选1~4份，更优选1~3份； 磷脂类，40~100份，优选50~80份，更优选50~60份； 胆固醇，5~20份，优选5~15份，更优选5~10份； 冻干保护剂，5~25份，优选5~20份，更优选10~15份。2. 根据权利要求1所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述组合物还包括有机溶剂和缓冲溶液。3. 根据权利要求2所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述有机溶剂为氯仿或无水乙醚； 所述缓冲溶液为磷酸盐缓冲液。4. 根据权利要求1所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述磷脂类的纯度在98%以上。5. 根据权利要求4所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述磷脂类为胆碱磷脂、溶血磷脂、乙醇胺磷脂。6. 根据权利要求5所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述磷脂类选自蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、1，2_二油酰基卵磷 月旨、二棕榈酸磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二癸酰基卵磷脂、二月桂酰基卵磷脂、二肉 豆蘧酰基卵磷脂、1-肉豆蘧酰基-2-棕榈酰基卵磷脂、1-肉豆蘧酰基-2-硬脂酰基卵磷脂 中的一种或几种； 优先的选自蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蘧酰基卵磷 月旨、1-肉豆蘧酰基-2-硬脂酰基卵磷脂中的一种或几种； 最优先的选自氢化蛋黄卵磷脂和二硬脂酰磷脂酰胆碱中的一种或两种。7. 根据权利要求1所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 磷脂类、胆固醇和抗氧化剂组成脂质体，卡非佐米与所述脂质体的重量之比为1:2~ 1:20。8. 根据权利要求1或7所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 其中所述磷脂类与胆固醇的重量之比为2:1~20:1。9. 根据权利要求1所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述抗氧化剂选自维生素 E和维生素 C中的一种或两种。10. 根据权利要求1所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述的pH调节剂选自柠檬酸、醋酸、盐酸、稀盐酸或氢氧化纳中的一种或几种，优选选 自柠檬酸或氢氧化纳。11. 根据权利要求1所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 所述冻干保护剂选自乳糖、甘露醇、山梨醇、海藻糖、蔗糖和葡聚糖的两种或两种以上， 优选海藻糖和乳糖的混合物。12. 根据权利要求11所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其特征在于： 包裹药物的脂质体包括药物、脂质类、胆固醇和抗氧化剂，其重量是冻干保护剂的2~ 28. 2 倍。13. -种制备如权利要求1~12所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的方法，其 特征在于包括以下步骤： 1) 制备多室脂质体混悬液 按薄膜分散法将药物包裹于脂质体形成薄膜，倒入水相，振摇后形成0/W乳状多室脂 质体混悬液； 2) 制备单室脂质体 将步骤1)制备的多室脂质体混悬液经过高压均质法或通过细胞粉碎机制备成粒径 100~300nm的单室脂质体，用pH调节剂将pH值调为3. 0~6. 5,优选3. 8~6. 5,最优选 4. 0 ~5. 0 ; 3) 制备卡非佐米脂质体冻干粉 将步骤2)制备的单室脂质体加入冻干保护剂，冷冻干燥制成卡非佐米脂质体冻干粉。14. 根据权利要求13所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的方法，其特征在于： 其中步骤3)中，冻干保护剂以溶于磷酸盐缓冲液的形式加入。15. 根据权利要求13所述的制备卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的方法，其特征在 于： 其中步骤3)采用以下冻干工艺： 第一阶段，快速降温预冻，90分钟内从20°C降至_45°C，_45°C保持5h ; 第二阶段，逐级升温干燥，_25°C保持6h，-1(TC保持6h，-3°C保持10h ; 第三阶段，KTC保持2h，25°C保持6h。16. 根据权利要求13所述的制备卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的方法，其特征在 于： 其中步骤2)中，高压均质的控制参数为温度5~35°C，压力20~80MPa，循环次数为 5~15次；细胞粉碎机的控制参数为温度5~35°C，功率100~400W，超声时间为1~10 分钟。17. 根据权利要求13所述的制备卡非佐米药物的脂质体冻干组合物的方法，其特征在 于： 其中步骤1)薄膜形成如下： 首先通过在30~45°C的温度下用旋转蒸发器减压旋蒸除净有机溶剂，用氮气吹干或 继续负压旋蒸10分钟以确保有机溶剂除尽。18. 权利要求1-12所述的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物在制备用于治疗多发性 骨髓瘤的药物中的用途。
【专利摘要】本发明属于药物合成技术领域，具体涉及一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物及其制备方法。本发明的卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其按重量份计算，包括以下组分：卡非佐米，5～20份；抗氧化剂，0.1～1份；pH值调节剂，1～5份；磷脂类，40～100份；胆固醇，5～20份；冻干保护剂，5～25份。本发明的制备方法包括步骤：1)制备多室脂质体混悬液；2)制备单室脂质体；3)制备卡非佐米脂质体冻干粉。本发明得到的卡非佐米脂质体冻干组合物在冻干前后pH值和粒径变化均稳定、包封率保持稳定，冻干后水复溶性较好，水复溶后的粒径均匀，颗粒呈球形或类球形，外观圆整均匀。
【IPC分类】A61K47/22, A61K38/08, A61P35/00, A61K47/26, A61K47/28, A61K9/19, A61K47/24
【公开号】CN105497871
【申请号】CN201410497889
【发明人】徐春莲, 刘建, 马亚平, 袁建成
【申请人】深圳翰宇药业股份有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2014年9月25日
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