一种大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法
一种大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及杂交方法领域，尤其涉及一种大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法。
【背景技术】
[0002]大额牛(Bos frontalis)，英文名mithun或gayal，是未经人工培育的半野生珍稀牛种，主要分布在印度、缅甸、孟加拉和中国。大额牛在我国，仅分布于云南省独龙江和怒江流域的山区，所因又叫独龙牛，是我国珍稀牛种，2000年列入《World Watch List forDomestic Animal Diversity》。大额牛的染色体2n=58，介于瘤牛(Bos indicus)、黄牛(Bostaurus)的2n=60和云南野牛的2n=56之间，被认为是牛属中独立的一个种，具有抗逆性强、繁殖性能好、生殖年限长、肉用体型较典型、产肉性能好、肉质细嫩等优点，是珍贵的肉牛种质资源和难得的杂交材料。
[0003]牛远缘杂交的杂种优势明显，对养牛业产生重要影响。大额牛与瘤牛、黄牛的种间杂交颇受动物学家的关注。国外研究表明:大额牛与瘤牛、娟姗牛、黑白花奶牛的种间杂交，其杂种优势明显。大额牛公牛与瘤牛母牛杂交获得Jatsha公牛和Jatsham母牛，母牛可育，公牛不育。一方面我国大额牛的种群数量十分有限，加之大额牛与黄牛、瘤牛种间杂交利用的系统研究与应用滞后，纯种大额牛公牛的优良遗传资源长期得不到有效的利用。另一方面我国气候、环境复杂多样，形成了多种类群的黄牛，但黄牛体型偏小、生长速度较慢、个体产品率较低。
【发明内容】
[0004]本发明实施例所要解决的技术问题在于，提供一种通过大额牛与云南黄牛种间杂交，提高杂种牛的生产性能的大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法。
[0005]所述大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法，其特征在于，包括如下步骤:
(1)杂交亲本的选择:父本:年龄4一 8岁、健康、遗传性能稳定、外貌特征明显的优秀大额牛公牛或优秀公牛的冷冻精液;母本:年龄3 —10岁、健康、遗传性能稳定、外貌特征明显、性周期和繁殖机能正常、膘情中等的瘤牛品种如婆罗门牛母牛，普通牛种品种云南黄牛母牛；
(2)自然发情母牛的选择、母牛同期发情处理:自然发情母牛的选择:观察记录母牛的发情时间和发情表现，以确定适时输精时间；母牛同期发情处理:首先对母牛进行妊娠检查，确定空怀后将孕酮阴道栓CUE-MATE?或CIDR ?孕酮阴道栓插入母牛阴道内，第8天一次性注射PG F2a类似物氯前列烯醇0.6 mg /头，第10天撤出CUE-MATE?或CIDR ?，第11-13天撤出CUE-MATE?或CIDR?后24 — 76 h，每天观察发情2 — 3次，每次20min以上，并记录发情时间和发情表现，对发情表现好的进行输精；
(3)配种:人工授精:大额牛冻精的解冻:擦干细管表面的水分，用酒精棉球消毒后用专用细管剪切断封口端，装入输精枪;输精:对发情母牛通过直肠检查判断其发情程度后采用直肠把握输精法进行适时输精，输精部位为子宫体深部输精;或本交，将优秀的大额牛公牛放入黄牛母牛群，公母牛同群饲养，公牛与发情母牛自由交配；
(4)妊娠检查与资料记录:母牛输精后60 — 90 d，通过直肠检查法进行妊娠诊断，确定是否妊娠，并填写妊娠检查记录表。
[0006]所述步骤3中大额牛冻精质量要求:细管冻精规格0.25mL /剂，解冻后精子活力
0.35以上，有效精子数1000万个以上。
[0007]所述步骤3中大额牛冻精的解冻:大额牛细管冻精用37.5°C温水水浴8 — 10 s解冻，擦干细管表面的水分，用酒精棉球消毒后用专用细管剪切断封口端，装入输精枪。
[0008]所述步骤3中对发情母牛通过直肠检查判断其发情程度后采用直肠把握输精法进行适时输精，输精部位为子宫体深部输精;一个情期内平均输精2次/头，输精量0.25 mL/次，共0.5 mL;并填写配种登记表。
[0009]实施本发明实施例，具有如下有益效果:
本发明实施例本发明通过大额牛与云南黄牛种间杂交，提高杂种牛的生产性能。为我国地方良种牛大额牛、瘤牛、黄牛(Bos taurus)资源的合理利用，杂交利用潜能及杂交育种前景，本发明通过母牛同期发情处理后进行人工输精的杂交改良技术，培育的大额牛与婆罗门牛、黄牛种间杂种抗逆性强，生产性能好，肉质好，母牛繁殖性能好，为我国地方良种牛大额牛、瘤牛、黄牛资源的合理利用及杂交育种提供相应的技术支撑。
【具体实施方式】
[0010]为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明作进一步地详细描述。
[0011]本发明实施例大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法，其特征在于，包括如下步骤:
(1)杂交亲本的选择:父本:年龄4一 8岁、健康、遗传性能稳定、外貌特征明显的优秀大额牛公牛或优秀公牛的冷冻精液;母本:年龄3 —10岁、健康、遗传性能稳定、外貌特征明显、性周期和繁殖机能正常、膘情中等的瘤牛品种如婆罗门牛母牛，普通牛种品种云南黄牛母牛；
(2)自然发情母牛的选择、母牛同期发情处理:自然发情母牛的选择:观察记录母牛的发情时间和发情表现，以确定适时输精时间；母牛同期发情处理:首先对母牛进行妊娠检查，确定空怀后将孕酮阴道栓CUE-MATE?或CIDR ?孕酮阴道栓插入母牛阴道内，第8天一次性注射PG F2a类似物氯前列烯醇0.6 mg /头，第10天撤出CUE-MATE?或CIDR ?，第
11-13天撤出CUE-MATE?或CIDR?后24 — 76 h，每天观察发情2 — 3次，每次20min以上，并记录发情时间和发情表现，对发情表现好的进行输精；
(3)配种:大额牛冻精质量要求:由云南省家畜冷冻精液站按国家标准生产，细管冻精规格0.25 mL /剂，解冻后精子活力0.35以上，有效精子数1000万个以上；大额牛冻精的解冻:大额牛细管冻精用37.5°C温水水浴8 —10 s解冻，擦干细管表面的水分，用酒精棉球消毒后用专用细管剪切断封口端，装入输精枪;输精:对发情母牛通过直肠检查判断其发情程度后采用直肠把握输精法进行适时输精，输精部位为子宫体深部输精;一个情期内平均输精2次/头，输精量0.25 11117次，共0.5 mL;并填写配种登记表。
[0012]本交将优秀的大额牛公牛放入黄牛母牛群，公母牛同群饲养，公牛与发情母牛自由交配；
(4)妊娠检查与资 料记录:母牛输精后60 — 90 d，通过直肠检查法进行妊娠诊断，确定是否妊娠，并填写妊娠检查记录表。
[0013]大额牛与瘤牛杂交一代的亲子鉴定
选用大额牛公牛(父本)冷冻精液、瘤牛母牛(母本，婆罗门牛)及其杂种犊牛(F1)的血样，采用酚一氯仿抽提方法制备DNA;选择9个微卫星座位进行PCR扩增，扩增产物用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，硝酸银染色法显色;通过软件识别图中的产物片段大小，计算父子关系相对机会(RCP)值，进行亲权判断。鉴定结果RCP为99.9949%，说明公牛与犊牛具有亲子关系，它们是一个标准的三联体家庭成员，从而证实了杂交的真实性。
[0014]大额牛与瘤牛杂交一代的核型分析
采集父本大额牛、母本婆罗门牛及它们的杂交一代(大婆F1)血液，按单祥年等(1980)的方法进行核型分析。核型分析结果，大额牛、婆罗门牛和大婆F1的染色体数目分别为2n=58(28对常染色体和I对性染色体)、2n=60(29对常染色体和I对性染色体)和2n=59(57条常染色体和2条性染色体，第2对染色体发生了 2/28罗伯逊易位，第28对仅为I条不配对的端着丝点染色体)。
[0015]杂种牛的生长性能
大额牛与瘤牛、黄牛杂交可行，杂交Fi代杂种优势明显，生长发育快，生产性能好，适应性强，母牛可繁育，且繁殖力强，但公牛不育。对大婆杂(婆罗门牛早X大额牛0)、大黄杂牛(云南黄牛早X大额中乃和大西黄杂牛(西门塔尔牛与黄牛杂交早X大额牛0)在初生、6月龄、12月龄、18月龄和24月龄阶段体重指标测定结果表明:大额牛与婆罗门牛杂交^的初生时、6、12和18月龄平均体重分别比大额牛高68.18%、37.12%、45.07%和40.13%; O—18月龄公牛和母牛平均日增重分别比大额牛高35.98%和39.85%;大黄杂分别比云南黄牛高50.90%、23.99%、24.40%、29.56 %和52.85%;初生到24月龄的平均日增重比较，大西黄杂(301.90 g)极显著高于大本杂(264.67 g)和云南黄牛(164.89 g)，大本杂极显著高于云南黄牛。大额牛与云南黄牛杂交F1代的初生、12月龄和24月龄体重的杂种优势率分别达28.21%、3.87%和4.20%。大额牛与婆罗门牛F1公牛4岁的体重可达500 — 750kg，具有良好的生产性能，育肥屠宰率高，肉质优。
[0016]本发明实施例本发明通过大额牛与云南黄牛种间杂交，提高杂种牛的生产性能。为我国地方良种牛大额牛、瘤牛、黄牛(Bos taurus)资源的合理利用，杂交利用潜能及杂交育种前景，本发明通过母牛同期发情处理后进行人工输精的杂交改良技术，培育的大额牛与婆罗门牛、黄牛种间杂种抗逆性强，生产性能好，肉质好，母牛繁殖性能好，为我国地方良种牛大额牛、瘤牛、黄牛资源的合理利用及杂交育种提供相应的技术支撑。
[0017]以上所揭露的仅为本发明一种较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，因此依本发明权利要求所作的等同变化，仍属本发明所涵盖的范围。
【主权项】
1.一种大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法，其特征在于，包括如下步骤: (1)杂交亲本的选择:父本:年龄4一 8岁、健康、遗传性能稳定、外貌特征明显的优秀大额牛公牛或优秀公牛的冷冻精液;母本:年龄3 —10岁、健康、遗传性能稳定、外貌特征明显、性周期和繁殖机能正常、膘情中等的瘤牛品种如婆罗门牛母牛，普通牛种品种云南黄牛母牛； (2)自然发情母牛的选择、母牛同期发情处理:自然发情母牛的选择:观察记录母牛的发情时间和发情表现，以确定适时输精时间；母牛同期发情处理:首先对母牛进行妊娠检查，确定空怀后将孕酮阴道栓CUE-MATE?或CIDR ?孕酮阴道栓插入母牛阴道内，第8天一次性注射PG F2a类似物氯前列烯醇0.6 mg /头，第10天撤出CUE-MATE?或CIDR ?，第11-13天撤出CUE-MATE?或CIDR?后24 — 76 h，每天观察发情2 — 3次，每次20min以上，并记录发情时间和发情表现，对发情表现好的进行输精； (3)配种:人工授精:大额牛冻精的解冻:擦干细管表面的水分，用酒精棉球消毒后用专用细管剪切断封口端，装入输精枪;输精:对发情母牛通过直肠检查判断其发情程度后采用直肠把握输精法进行适时输精，输精部位为子宫体深部输精;或本交，将优秀的大额牛公牛放入黄牛母牛群，公母牛同群饲养，公牛与发情母牛自由交配； (4)妊娠检查与资料记录:母牛输精后60— 90 d，通过直肠检查法进行妊娠诊断，确定是否妊娠，并填写妊娠检查记录表。2.如权利要求1所述的大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法，其特征在于，所述步骤3中大额牛冻精质量要求:细管冻精规格0.25 mL /剂，解冻后精子活力0.35以上，有效精子数1000万个以上。3.如权利要求1所述的大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法，其特征在于，所述步骤3中大额牛冻精的解冻:大额牛细管冻精用37.5°C温水水浴8 —10 s解冻，擦干细管表面的水分，用酒精棉球消毒后用专用细管剪切断封口端，装入输精枪。4.如权利要求1所述的大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法，其特征在于，所述步骤3中对发情母牛通过直肠检查判断其发情程度后采用直肠把握输精法进行适时输精，输精部位为子宫体深部输精;一个情期内平均输精2次/头，输精量0.25 11117次，共0.5 mL;并填写配种登记表。
【专利摘要】本发明实施例提供大额牛（<i>Bos？frontalis</i>）与瘤牛（<i>Bos？indicus</i>）、大额牛与黄牛（<i>Bostauru？s</i>）种间杂交方法，包括杂交亲本的选择、母牛同期发情处理、配种方法、妊娠检查、杂种牛的生长性能以及染色体核型、亲子鉴定方法。本发明培育的大额牛与婆罗门牛、黄牛种间杂种抗逆性强，生产性能好，肉质好，母牛繁殖性能好，但公牛不育。本发明为我国地方良种牛大额牛、瘤牛、黄牛资源的合理利用及杂交育种提供科学依据。
【IPC分类】A01K67/02
【公开号】CN105532569
【申请号】CN201510978004
【发明人】和占星, 张继才, 亏开兴, 王安奎, 黄必志, 金显栋, 刘建勇
【申请人】云南省草地动物科学研究院, 云南省肉牛工程技术研究中心
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2015年12月23日
【技术领域】
[0001]本发明涉及杂交方法领域，尤其涉及一种大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法。
【背景技术】
[0002]大额牛(Bos frontalis)，英文名mithun或gayal，是未经人工培育的半野生珍稀牛种，主要分布在印度、缅甸、孟加拉和中国。大额牛在我国，仅分布于云南省独龙江和怒江流域的山区，所因又叫独龙牛，是我国珍稀牛种，2000年列入《World Watch List forDomestic Animal Diversity》。大额牛的染色体2n=58，介于瘤牛(Bos indicus)、黄牛(Bostaurus)的2n=60和云南野牛的2n=56之间，被认为是牛属中独立的一个种，具有抗逆性强、繁殖性能好、生殖年限长、肉用体型较典型、产肉性能好、肉质细嫩等优点，是珍贵的肉牛种质资源和难得的杂交材料。
[0003]牛远缘杂交的杂种优势明显，对养牛业产生重要影响。大额牛与瘤牛、黄牛的种间杂交颇受动物学家的关注。国外研究表明:大额牛与瘤牛、娟姗牛、黑白花奶牛的种间杂交，其杂种优势明显。大额牛公牛与瘤牛母牛杂交获得Jatsha公牛和Jatsham母牛，母牛可育，公牛不育。一方面我国大额牛的种群数量十分有限，加之大额牛与黄牛、瘤牛种间杂交利用的系统研究与应用滞后，纯种大额牛公牛的优良遗传资源长期得不到有效的利用。另一方面我国气候、环境复杂多样，形成了多种类群的黄牛，但黄牛体型偏小、生长速度较慢、个体产品率较低。
【发明内容】
[0004]本发明实施例所要解决的技术问题在于，提供一种通过大额牛与云南黄牛种间杂交，提高杂种牛的生产性能的大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法。
[0005]所述大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法，其特征在于，包括如下步骤:
(1)杂交亲本的选择:父本:年龄4一 8岁、健康、遗传性能稳定、外貌特征明显的优秀大额牛公牛或优秀公牛的冷冻精液;母本:年龄3 —10岁、健康、遗传性能稳定、外貌特征明显、性周期和繁殖机能正常、膘情中等的瘤牛品种如婆罗门牛母牛，普通牛种品种云南黄牛母牛；
(2)自然发情母牛的选择、母牛同期发情处理:自然发情母牛的选择:观察记录母牛的发情时间和发情表现，以确定适时输精时间；母牛同期发情处理:首先对母牛进行妊娠检查，确定空怀后将孕酮阴道栓CUE-MATE?或CIDR ?孕酮阴道栓插入母牛阴道内，第8天一次性注射PG F2a类似物氯前列烯醇0.6 mg /头，第10天撤出CUE-MATE?或CIDR ?，第11-13天撤出CUE-MATE?或CIDR?后24 — 76 h，每天观察发情2 — 3次，每次20min以上，并记录发情时间和发情表现，对发情表现好的进行输精；
(3)配种:人工授精:大额牛冻精的解冻:擦干细管表面的水分，用酒精棉球消毒后用专用细管剪切断封口端，装入输精枪;输精:对发情母牛通过直肠检查判断其发情程度后采用直肠把握输精法进行适时输精，输精部位为子宫体深部输精;或本交，将优秀的大额牛公牛放入黄牛母牛群，公母牛同群饲养，公牛与发情母牛自由交配；
(4)妊娠检查与资料记录:母牛输精后60 — 90 d，通过直肠检查法进行妊娠诊断，确定是否妊娠，并填写妊娠检查记录表。
[0006]所述步骤3中大额牛冻精质量要求:细管冻精规格0.25mL /剂，解冻后精子活力
0.35以上，有效精子数1000万个以上。
[0007]所述步骤3中大额牛冻精的解冻:大额牛细管冻精用37.5°C温水水浴8 — 10 s解冻，擦干细管表面的水分，用酒精棉球消毒后用专用细管剪切断封口端，装入输精枪。
[0008]所述步骤3中对发情母牛通过直肠检查判断其发情程度后采用直肠把握输精法进行适时输精，输精部位为子宫体深部输精;一个情期内平均输精2次/头，输精量0.25 mL/次，共0.5 mL;并填写配种登记表。
[0009]实施本发明实施例，具有如下有益效果:
本发明实施例本发明通过大额牛与云南黄牛种间杂交，提高杂种牛的生产性能。为我国地方良种牛大额牛、瘤牛、黄牛(Bos taurus)资源的合理利用，杂交利用潜能及杂交育种前景，本发明通过母牛同期发情处理后进行人工输精的杂交改良技术，培育的大额牛与婆罗门牛、黄牛种间杂种抗逆性强，生产性能好，肉质好，母牛繁殖性能好，为我国地方良种牛大额牛、瘤牛、黄牛资源的合理利用及杂交育种提供相应的技术支撑。
【具体实施方式】
[0010]为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明作进一步地详细描述。
[0011]本发明实施例大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法，其特征在于，包括如下步骤:
(1)杂交亲本的选择:父本:年龄4一 8岁、健康、遗传性能稳定、外貌特征明显的优秀大额牛公牛或优秀公牛的冷冻精液;母本:年龄3 —10岁、健康、遗传性能稳定、外貌特征明显、性周期和繁殖机能正常、膘情中等的瘤牛品种如婆罗门牛母牛，普通牛种品种云南黄牛母牛；
(2)自然发情母牛的选择、母牛同期发情处理:自然发情母牛的选择:观察记录母牛的发情时间和发情表现，以确定适时输精时间；母牛同期发情处理:首先对母牛进行妊娠检查，确定空怀后将孕酮阴道栓CUE-MATE?或CIDR ?孕酮阴道栓插入母牛阴道内，第8天一次性注射PG F2a类似物氯前列烯醇0.6 mg /头，第10天撤出CUE-MATE?或CIDR ?，第
11-13天撤出CUE-MATE?或CIDR?后24 — 76 h，每天观察发情2 — 3次，每次20min以上，并记录发情时间和发情表现，对发情表现好的进行输精；
(3)配种:大额牛冻精质量要求:由云南省家畜冷冻精液站按国家标准生产，细管冻精规格0.25 mL /剂，解冻后精子活力0.35以上，有效精子数1000万个以上；大额牛冻精的解冻:大额牛细管冻精用37.5°C温水水浴8 —10 s解冻，擦干细管表面的水分，用酒精棉球消毒后用专用细管剪切断封口端，装入输精枪;输精:对发情母牛通过直肠检查判断其发情程度后采用直肠把握输精法进行适时输精，输精部位为子宫体深部输精;一个情期内平均输精2次/头，输精量0.25 11117次，共0.5 mL;并填写配种登记表。
[0012]本交将优秀的大额牛公牛放入黄牛母牛群，公母牛同群饲养，公牛与发情母牛自由交配；
(4)妊娠检查与资 料记录:母牛输精后60 — 90 d，通过直肠检查法进行妊娠诊断，确定是否妊娠，并填写妊娠检查记录表。
[0013]大额牛与瘤牛杂交一代的亲子鉴定
选用大额牛公牛(父本)冷冻精液、瘤牛母牛(母本，婆罗门牛)及其杂种犊牛(F1)的血样，采用酚一氯仿抽提方法制备DNA;选择9个微卫星座位进行PCR扩增，扩增产物用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，硝酸银染色法显色;通过软件识别图中的产物片段大小，计算父子关系相对机会(RCP)值，进行亲权判断。鉴定结果RCP为99.9949%，说明公牛与犊牛具有亲子关系，它们是一个标准的三联体家庭成员，从而证实了杂交的真实性。
[0014]大额牛与瘤牛杂交一代的核型分析
采集父本大额牛、母本婆罗门牛及它们的杂交一代(大婆F1)血液，按单祥年等(1980)的方法进行核型分析。核型分析结果，大额牛、婆罗门牛和大婆F1的染色体数目分别为2n=58(28对常染色体和I对性染色体)、2n=60(29对常染色体和I对性染色体)和2n=59(57条常染色体和2条性染色体，第2对染色体发生了 2/28罗伯逊易位，第28对仅为I条不配对的端着丝点染色体)。
[0015]杂种牛的生长性能
大额牛与瘤牛、黄牛杂交可行，杂交Fi代杂种优势明显，生长发育快，生产性能好，适应性强，母牛可繁育，且繁殖力强，但公牛不育。对大婆杂(婆罗门牛早X大额牛0)、大黄杂牛(云南黄牛早X大额中乃和大西黄杂牛(西门塔尔牛与黄牛杂交早X大额牛0)在初生、6月龄、12月龄、18月龄和24月龄阶段体重指标测定结果表明:大额牛与婆罗门牛杂交^的初生时、6、12和18月龄平均体重分别比大额牛高68.18%、37.12%、45.07%和40.13%; O—18月龄公牛和母牛平均日增重分别比大额牛高35.98%和39.85%;大黄杂分别比云南黄牛高50.90%、23.99%、24.40%、29.56 %和52.85%;初生到24月龄的平均日增重比较，大西黄杂(301.90 g)极显著高于大本杂(264.67 g)和云南黄牛(164.89 g)，大本杂极显著高于云南黄牛。大额牛与云南黄牛杂交F1代的初生、12月龄和24月龄体重的杂种优势率分别达28.21%、3.87%和4.20%。大额牛与婆罗门牛F1公牛4岁的体重可达500 — 750kg，具有良好的生产性能，育肥屠宰率高，肉质优。
[0016]本发明实施例本发明通过大额牛与云南黄牛种间杂交，提高杂种牛的生产性能。为我国地方良种牛大额牛、瘤牛、黄牛(Bos taurus)资源的合理利用，杂交利用潜能及杂交育种前景，本发明通过母牛同期发情处理后进行人工输精的杂交改良技术，培育的大额牛与婆罗门牛、黄牛种间杂种抗逆性强，生产性能好，肉质好，母牛繁殖性能好，为我国地方良种牛大额牛、瘤牛、黄牛资源的合理利用及杂交育种提供相应的技术支撑。
[0017]以上所揭露的仅为本发明一种较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，因此依本发明权利要求所作的等同变化，仍属本发明所涵盖的范围。
【主权项】
1.一种大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法，其特征在于，包括如下步骤: (1)杂交亲本的选择:父本:年龄4一 8岁、健康、遗传性能稳定、外貌特征明显的优秀大额牛公牛或优秀公牛的冷冻精液;母本:年龄3 —10岁、健康、遗传性能稳定、外貌特征明显、性周期和繁殖机能正常、膘情中等的瘤牛品种如婆罗门牛母牛，普通牛种品种云南黄牛母牛； (2)自然发情母牛的选择、母牛同期发情处理:自然发情母牛的选择:观察记录母牛的发情时间和发情表现，以确定适时输精时间；母牛同期发情处理:首先对母牛进行妊娠检查，确定空怀后将孕酮阴道栓CUE-MATE?或CIDR ?孕酮阴道栓插入母牛阴道内，第8天一次性注射PG F2a类似物氯前列烯醇0.6 mg /头，第10天撤出CUE-MATE?或CIDR ?，第11-13天撤出CUE-MATE?或CIDR?后24 — 76 h，每天观察发情2 — 3次，每次20min以上，并记录发情时间和发情表现，对发情表现好的进行输精； (3)配种:人工授精:大额牛冻精的解冻:擦干细管表面的水分，用酒精棉球消毒后用专用细管剪切断封口端，装入输精枪;输精:对发情母牛通过直肠检查判断其发情程度后采用直肠把握输精法进行适时输精，输精部位为子宫体深部输精;或本交，将优秀的大额牛公牛放入黄牛母牛群，公母牛同群饲养，公牛与发情母牛自由交配； (4)妊娠检查与资料记录:母牛输精后60— 90 d，通过直肠检查法进行妊娠诊断，确定是否妊娠，并填写妊娠检查记录表。2.如权利要求1所述的大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法，其特征在于，所述步骤3中大额牛冻精质量要求:细管冻精规格0.25 mL /剂，解冻后精子活力0.35以上，有效精子数1000万个以上。3.如权利要求1所述的大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法，其特征在于，所述步骤3中大额牛冻精的解冻:大额牛细管冻精用37.5°C温水水浴8 —10 s解冻，擦干细管表面的水分，用酒精棉球消毒后用专用细管剪切断封口端，装入输精枪。4.如权利要求1所述的大额牛与瘤牛、黄牛种间远缘杂交方法，其特征在于，所述步骤3中对发情母牛通过直肠检查判断其发情程度后采用直肠把握输精法进行适时输精，输精部位为子宫体深部输精;一个情期内平均输精2次/头，输精量0.25 11117次，共0.5 mL;并填写配种登记表。
【专利摘要】本发明实施例提供大额牛（<i>Bos？frontalis</i>）与瘤牛（<i>Bos？indicus</i>）、大额牛与黄牛（<i>Bostauru？s</i>）种间杂交方法，包括杂交亲本的选择、母牛同期发情处理、配种方法、妊娠检查、杂种牛的生长性能以及染色体核型、亲子鉴定方法。本发明培育的大额牛与婆罗门牛、黄牛种间杂种抗逆性强，生产性能好，肉质好，母牛繁殖性能好，但公牛不育。本发明为我国地方良种牛大额牛、瘤牛、黄牛资源的合理利用及杂交育种提供科学依据。
【IPC分类】A01K67/02
【公开号】CN105532569
【申请号】CN201510978004
【发明人】和占星, 张继才, 亏开兴, 王安奎, 黄必志, 金显栋, 刘建勇
【申请人】云南省草地动物科学研究院, 云南省肉牛工程技术研究中心
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2015年12月23日
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