苍耳子鼻炎滴丸的质量控制方法

专利名称：：苍耳子鼻炎滴丸的质量控制方法
技术领域：
：本发明属于药物制剂的质量控制
技术领域：
，特别涉及一种苍耳子鼻炎滴丸的质量控制方法。
背景技术：
：苍耳子鼻炎滴丸是根据苍耳子鼻炎胶囊进行改剂而来的新剂型药物。苍耳子鼻炎胶囊收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十四册中，具有疏风、清肺热、通鼻穷、止头痛的功效;用于风热型鼻疾，包括急、慢性鼻炎，鼻窦炎，过敏性鼻炎等。苍耳子鼻炎胶囊是以苍耳子浸膏粉180g、石膏浸膏粉l.76g、白芷浸膏粉62.lg、冰片30g、辛夷花挥发油4ml、薄荷脑15g、辛夷花浸膏粉72.2g、黄芩浸膏粉25.3g为原料制得的胶囊制剂，其制备方法为除辛夷花挥发油外，冰片、薄荷脑与适量淀粉混合，研成细粉，与上述各浸膏粉混合，喷入辛夷花挥发油，充分混匀，过筛，装入胶囊，制成1000粒，即得。通过发明人改剂后的苍耳子鼻炎滴丸，是以苍耳子油2.14g、石膏浸膏粉O.125g、白芷浸膏粉2.98g、冰片2.14g、辛夷挥发油0.29ml、薄荷脑l.07g、辛夷浸膏粉3.44g、黄芩浸膏粉1.81g为原料制得的滴丸制剂，其制备方法为取聚乙二醇600028.66g，加热使熔融，加入冰片、薄荷脑至全溶，再加入各药物浸膏粉、苍耳子油和辛夷挥发油，搅拌、混匀，滴入冷却剂甲基硅油中，制成1000丸，包薄膜衣，即得。上述苍耳子鼻炎滴丸的配方中各种浸膏粉或挥发油的制备方法分别如下1.黄芩浸膏粉取黄芩加8倍量水煎煮二次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓縮至相对密度l.13-1.15(75-85。C测定)，用盐酸调pH值至1-2，于8(TC保温1小时，静置，滤过，沉淀物用水洗至中性，在6(TC烘干，粉碎，过六号筛，即得黄芩浸膏粉。2.苍耳子油取苍耳子粉碎成粗粉，加入5倍量的乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，加10倍量水搅拌，静置后取油层，即得苍耳子油。3.辛夷挥发油和辛夷浸膏粉取辛夷置挥发油提取器中加入10倍量水提取挥发油3小时，将挥发油另器保存(即得辛夷挥发油)。残渣加8倍量水煎煮二次，每次1.5小时，滤过，滤液浓縮干燥(60-8CTC)，粉碎，过六号筛，即得辛夷浸膏粉。4.白芷浸膏粉将白芷加8倍量水煎煮二次，每次1.5小时，静置，滤过，合并滤液，浓縮至相对密度1.23-1.25(75-85。C测定)，加乙醇使含醇量达45%，混匀，静置过夜，取上清液回收乙醇，浓縮干燥(60-8CTC)，粉碎，过六号筛，即得白芷浸膏粉。5.石膏浸膏粉将石膏加8倍量水煎煮二次，每次2小时，静置，滤过，滤液浓縮干燥(60-8CTC)，粉碎，过六号筛，即得石膏浸膏粉。药典中记载苍耳子鼻炎胶囊的质量控制方法中，除应符合胶囊剂项下有关的各项规定外，只对黄芩、白芷、辛夷花、苍耳子、冰片等五味进行了薄层色谱定性鉴别，却没有任何含量测定指标。作为其改剂产品的苍耳子鼻炎滴丸，通常情况下，可参考原剂型的质量标准。但是，由于药品质量问题与人类健康紧密相关，如今对药品质量控制的要求也越来越高，安全和疗效同等重要；很显然，原来仅限于薄层色谱定性鉴别的苍耳子鼻炎胶囊的质量控制方法对于苍耳子鼻炎滴丸的质量控制是不够准确可靠的，不符合现代医药发展的需要，有待于进一步提高。
发明内容本发明的主要目的是提供一种苍耳子鼻炎滴丸的质量控制方法，在原剂型药物苍耳子鼻炎胶囊只进行薄层色谱定性鉴别的基础上，增加含量测定方法及相应的含量指标，使苍耳子鼻炎滴丸的质量控制准确有效，从而更有利于确保其临床疗效的发挥。本发明解决其技术问题所采用的技术方案是苍耳子鼻炎滴丸的质量控制方法，采用高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)对黄芩苷(CnH^On)进行含量测定，确定相应的含量指标；相关条件及操作方法如下色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为47:53:0.2的甲醇-水-磷酸溶液为流动相，流速lml/min;检测波长为280nm;柱温4(TC。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加30-70%甲醇(指甲醇水溶液，体积百分比，下同)制成每lml含黄芩苷约40-50yg的溶液，即得。供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸O.4-0.6g，精密称定，置50ml量瓶中，加30-70%甲醇30-50ml，超声处理或加热回流提取30-60分钟，放冷，加入同浓度甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密吸取lml续滤液，置10ml量瓶中，加入同浓度甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，根据测定结果进行计算，即得苍耳子鼻炎滴丸中黄芩苷的含量。苍耳子鼻炎滴丸中，含黄芩苷(CnH^0n)重量百分比为1.86-4.79%。除对黄芩苷进行含量测定外，还可对原料药材黄芩、白芷、辛夷、苍耳子、冰片等五味进行薄层色谱(TLC)定性鉴别，操作方法分别如下(1)、黄芩和白芷TLC鉴别:A、供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸5g，加质量百分比浓度为9.5-10.5。/。的稀盐酸20ml，加热回流提取l小时，放冷，滤过，滤液用乙醚振摇提取2次，每次20ml，水溶液备用，合并乙醚提取液，用水洗至中性，挥干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液I;B、对照药材溶液的制备取黄芩对照药材、白芷对照药材各lg，同供试品溶液制备方法制成黄芩对照药材溶液和白芷对照药材溶液；C、薄层鉴别照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB，下同)试验，吸取上述供试品溶液I、黄芩对照药材溶液和白芷对照药材溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10:3:1:2，体积比，下同)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与白芷对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；再喷以2%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与黄芩对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)、辛夷TLC鉴别A、供试品溶液的制备取"(1)、黄芩和白芷TLC鉴别"制备供试品溶液时的备用水溶液，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，用水洗至中性，乙酸乙酯提取液浓縮至2ml，作为供试品溶液II;B、对照药材溶液的制备取辛夷对照药材lg，磨碎，加质量百分比浓度为9.5-10.5。/。的稀盐酸20ml，加热回流提取1小时，放冷，滤过，取滤液，自"用乙酸乙酯提取2次"起，同供试品溶液制备方法制成辛夷对照药材溶液。C、薄层鉴别照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液II和辛夷对照药材溶液各10y1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸(8:2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与辛夷对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)、苍耳子TLC鉴别A、供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸4g，置锥形瓶中，加10X氢氧化钠液20ml，加热回流提取l小时，滤过，滤液用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，用水洗至中性，回收乙酸乙酯并浓縮至2ml，作为供试品溶液m;B、对照药材溶液的制备取苍耳子对照药材lg，同供试品溶液制备方法制成苍耳子对照药材溶液。C、薄层鉴别照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液m和苍耳子对照药材溶液各10y1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸(16:4:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中熏5-10分钟；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(4)、冰片TLC鉴别A、供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸O.2-0.25g，加乙醇3ml，超声提取5分钟，取出，静置，取上清液作为供试品溶液IV;B、对照品溶液的制备取冰片对照品，加乙醇制成每lml含10mg的溶液，作为冰片对照品溶液；C、薄层鉴别照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液IV和冰片对照品溶液各5y1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-三氯甲烷(15:2:6)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。苍耳子鼻炎滴丸的各原料药材中苍耳子含苍耳苷(Xanthostrumarin)等苷类；白芷含欧前胡素、异欧前胡素、佛手柑内酯等香豆素类；辛夷含枸缘醛、丁香油酚等；黄芩含黄芩苷、黄芩素等黄酮类化合物；石膏主要成分为含水硫酸钙；冰片主要成分是龙脑；薄荷脑主要成分即为薄荷脑。通过逐一分析比较及探索性的试验研究，本发明初步筛选出拟对黄芩提取物中的主要有效成分黄芩苷进行含量测定。再通过大量文献分析及试验研究，进一步从薄层层析-紫外分光光度法、薄层扫描法、高效液相色谱法、超临界流体层析法、胶束动电层析法等黄芩苷的含量测定方法中进行筛选，最终确定了以高效液相色谱法对黄芩提取物中主要有效成分黄芩苷进行含量测定。为了尽可能准确的测定出黄芩苷在苍耳子鼻炎滴丸中的含量，从而更精确的控制药物质量，保证药物的临床疗效，发明人对药物的前处理方法及色谱条件等进行了大量的试验研究及对比分析，现将一些主要的研究情况略举如下(1)仪器与试药高效液相色谱仪日本岛津LC-10AT;SPD-10AVP紫外检测器；LC2000数据工作站(中国科学院成都分院);Kromasilds柱(4.6X250mm，5ym);3200超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司)。黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号715-200211)。(2)色谱条件及系统适应性试验色谱条件的选择最终选定流动相甲醇-水-磷酸(47:53:0.2，体积比)；波长280nm，柱温40。C，流量1.Oml/min。色谱柱的选择Kromasilds柱(4.6X250mm，5ym)进行分析的分离效果最好，理论塔板数高。(3)对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品11.2mg，置50ml量瓶中，以50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液(224yg/ml)。精密吸取贮备液2ml，转移至10ml量瓶中，以50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每lml含黄芩苷44.8yg的对照品溶液。(4)提取条件的考察通过对药典中含有黄芩的制剂(包括黄芩药材)含量测定项下的供试品溶液制备方法进行研究，发现一般采用甲醇、50%甲醇、乙醇、70%乙醇进行提取；但是，由于不同制剂不同辅料可能对提取效果产生某些不定的影响，其适宜于茉一特定药物制剂的提取溶剂也不能任意选择。因此，为了找到适合苍耳子鼻炎滴丸的提取溶剂，发明人对上述四种溶剂的提取效果进行了比较，并研究了不同溶剂提取、提取方式和提取时间等因素对提取效果的影响。①提取溶剂的考察取苍耳子鼻炎滴丸样品(批号小试041101)约0.5g，共4份，精密称定，置50ml量瓶中，分别加入50%甲醇、甲醇、乙醇、70。/。乙醇各45ml，超声处理(功率不低于150W)30分钟，用相应溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密吸取lml续滤液，置10ml量瓶中，用相应溶剂稀释至刻度，摇匀，即得四种不同溶剂的样品溶液。及对照品溶液各10yl，注入高效液相色谱仪，测定，结果见下述表l。表l不同溶剂提取样品中黄芩苷含量提取溶剂样品中黄芩苷含量(mg/g)50%甲醇41.32甲醇33.3870%乙醇39.13乙醇37.13以上结果表明，以50%甲醇、70%乙醇溶液作为溶剂提取效果较好，尤以50%甲醇更好。②不同浓度溶剂的提取考察取苍耳子鼻炎滴丸样品(批号小试041101)约0.5g，共2份，分别精密称定，置250ml圆底烧瓶中，精密加入30%、70。/。甲醇各50ml，称定重量，超声处理(功率不低于150W)30分钟，放置至室温，再称定重量，用相同溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取lml续滤液，置10ml量瓶中，用相同溶剂稀释至刻度，摇匀，即得样品溶液。精密吸取上述样品溶液及对照品溶液各10yl，注入高效液相色谱仪，测定，与50%甲醇提取的结果进行比较，结果见下述表2。表2不同浓度溶剂提取的样品中黄芩苷含量提取方法30%甲醇70%甲醇50%甲醇黄芩苷含量(mg/g)40.9741.0841.32^以上结果表明，用30%甲醇和70%甲醇溶剂提取的样品，结果差异不大，都适用于样品制备。③提取方式的考察取苍耳子鼻炎滴丸样品(批号小试041101)约O.5g，精密称定，置250ml圆底烧瓶中，精密加入50。/。甲醇50ml，称定重量，加热回流提取30分钟，放置至室温，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取lml续滤液，置10ml量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得用加热回流提取方式得到的样品溶液。精密吸取上述样品溶液及对照品溶液各10yl，注入高效液相色谱仪，测定，与超声提取的结果进行比较，结果见下述表3。表3不同提取方法样品中黄芩苷含量<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>以上结果表明，两种方法提取的样品，结果差异不大，以超声提取法操作更为方便。④提取时间的考察取苍耳子鼻炎滴丸样品约O.5g，共3份，精密称定，置50ml量瓶中，加入50。/。甲醇45ml，分别超声处理(功率不低于150W)20、40、60分钟，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密吸取lml续滤液，置10ml量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。精密取上述溶液和对照品溶液10yl，注入高效液相色谱仪，用正文方法测定，结果见下述表4。表4提取时间的考察试验<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>提取30min后含量基本稳定，综合考虑，可选择提取时间为30-60min。综上所述，苍耳子鼻炎滴丸供试品溶液的制备方法为取苍耳子鼻炎滴丸O.4-0.6g，精密称定，置50ml量瓶中，加入30-70。/。甲醇30-50ml，超声处理30-60分钟，用同浓度甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密吸取lml续滤液，置10ml量瓶中，用同浓度甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。下述试验中采用的供试品溶液制备方法为取苍耳子鼻炎滴丸O.4-0.6g，取O.10g，精密称定，置50ml量瓶中，力n50。/。甲醇45ml，超声处理(功率250W，频率50KHz)30分钟，放冷，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，离心，即得。⑤精密度实验精密吸取黄芩苷对照品溶液(44.8yg/ml)10yl，注入液相色谱仪，按前述色谱条件进行分析，重复测定5次，测定峰面积，结果见下述表5。表5精密度试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由表5可见，黄芩苷对照品峰面积的RSD〈2"/。，精密度良好。⑥重复性试验取苍耳子鼻炎滴丸(批号小试0411Q1)平行6次试验，按前述方法分别制备样品供试品溶液与对照品溶液，并进行含量测定，结果下述表6。表6重复性试验结果次数I^^^^^平均值RSD(%)^黄苳苷含量(mg/g)^41.2641.83^40.53^41.24^40.8441.06^41.127IT(^由表6可见，黄芩苷含量平均值为41.127mg/g，RSD为1.07。/。，重复性好。⑦供试品溶液稳定性试验取苍耳子鼻炎滴丸供试品溶液，分别在第0、2、4、6、8小时进样，每次10ul，记录峰面积积分值，结果见下述表7。表7样品溶液稳定性试验结果时间(h)02468RSD(%)峰面积积分值279094027723802791679281282927991790.79由表7可见，RSD为0.79%，表明供试品溶液中黄芩苷在8小时内测定有良好稳定性。与现有技术相比，本发明的有益效果是本发明提供了苍耳子鼻炎滴丸中黄芩苷的含量测定方法，并采用更适用于苍耳子鼻炎滴丸的样品处理方法(供试品溶液的制备方法)，使苍耳子鼻炎滴丸的质量控制更为准确有效，从而更有利于确保其临床疗效的发挥；并且该含量测定方法操作简单，结果准确，精密度、重复性、稳定性等良好。进一步提供的黄芩苷含量指标及薄层色谱鉴定方法等，可进一步提高苍耳子鼻炎滴丸的质量可控性。具体实施例方式下面结合具体实施方式对本发明作进一步的详细描述。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。实施例l本实施例为采用本发明方法对10批苍耳子鼻炎滴丸(批号041201、041202、041203、041204、041205、041206、041207、041208、041209、041210，均由四川禾邦阳光制药股份有限公司提供)进行黄芩苷含量测定，具体方法如下色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(47:53:0.2，体积比)溶液为流动相，流速lml/min;检测波长为280nm;柱温4CTC。理论板数按黄芩苷峰计算不低于2500。对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，力阳0%甲醇制成每11111含黄芩苷约45yg的溶液，即得。供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸O.4-0.6g，精密称定，置50ml量瓶中，力阳0%甲醇45ml，超声处理(功率160W，频率50KHz)30分钟，放冷，力阳0%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密吸取lml续滤液，置10ml量瓶中，力阳0%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，根据测定结果进行计算，即得苍耳子鼻炎滴丸中黄芩苷(CnH^On)的含量，结果见下述表8。表8样品中黄芩苷含量测定结果表IPI黄芩苷含量(mg/丸)平均值(mg/丸)0412011.541.531.540412021.731.751.740412031.851.891.870412042.032.092.060412051.942.011.980412061.471.481.480412071.421.471.450412081.831.841.840412091.391.391.390412100.910.870.89实施例2本实施例为采用本发明方法对10批苍耳子鼻炎滴丸(批号041201、041202、041203、041204、041205、041206、041207、041208、041209、041210，均由四川禾邦阳光制药股份有限公司提供)进行TLC鉴别，具体方法如下(1)、黄芩和白芷TLC鉴别:A、供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸5g，加质量百分比浓度为10。/。的稀盐酸20ml，加热回流提取l小时，放冷，滤过，滤液用乙醚振摇提取2次，每次20ml，水溶液备用，合并乙醚提取液，用水洗至中性，挥干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液I;另取缺黄芩和白芷药材的阴性样品5g，同法制得阴性供试品溶液I;B、对照药材溶液的制备取黄芩对照药材、白芷对照药材各lg，同供试品溶液制备方法制成黄芩对照药材溶液和白芷对照药材溶液；C、薄层鉴别照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB，下同)试验，吸取上述供试品溶液I、阴性供试品溶液I、黄芩对照药材溶液和白芷对照药材溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10:3:1:2，体积比，下同)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；结果各批次供试品色谱中，在与白芷对照药材色谱相应的位置上，均显相同颜色的荧光斑点；再喷以2%三氯化铁乙醇溶液，各批次供试品色谱中，在与黄芩对照药材色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点；阴性供试品色谱中无相应的斑点。(2)、辛夷TLC鉴别A、供试品溶液的制备取"(1)、黄芩和白芷TLC鉴别"制备供试品溶液时的备用水溶液，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，用水洗至中性，乙酸乙酯提取液浓縮至2ml，作为供试品溶液II;另取缺辛夷药材的阴性样品5g，同法制得阴性供试品溶液II;B、对照药材溶液的制备取辛夷对照药材lg，磨碎，加质量百分比浓度为10。/。的稀盐酸20ml，加热回流提取l小时，放冷，滤过，取滤液，自"用乙酸乙酯提取2次"起，同供试品溶液制备方法制成辛夷对照药材溶液。C、薄层鉴别照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液II、阴性供试品溶液II和辛夷对照药材溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸(8:2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；结果各批次供试品色谱中，在与辛夷对照药材色谱相应的位置上，均显相同颜色的荧光斑点；阴性供试品色谱中无相应的斑点。(3)、苍耳子TLC鉴别A、供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸4g，置锥形瓶中，加10X氢氧化钠液20ml，加热回流提取l小时，滤过，滤液用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，用水洗至中性，回收乙酸乙酯并浓縮至2ml，作为供试品溶液m;另取缺苍耳子药材的阴性样品4g，同法制得阴性供试品溶液m;B、对照药材溶液的制备取苍耳子对照药材lg，同供试品溶液制备方法制成苍耳子对照药材溶液。C、薄层鉴别照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液m、阴性供试品溶液m和苍耳子对照药材溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸(16:4:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中熏5-10分钟；结果各批次供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点；阴性供试品色谱中无相应的斑点。(4)、冰片TLC鉴别A、供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸5丸(约0.215g)，加乙醇3ml，超声提取5分钟，取出，静置，取上清液作为供试品溶液IV;另取缺冰片药材的阴性样品5丸，同法制得阴性供试品溶液IV;B、对照品溶液的制备取冰片对照品，加乙醇制成每lml含10mg的溶液，作为冰片对照品溶液；C、薄层鉴别照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液IV、阴性供试品溶液IV和冰片对照品溶液各5yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-三氯甲烷(15:2:6)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；结果各批次供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点；阴性供试品色谱中无相应的斑点。权利要求1.苍耳子鼻炎滴丸的质量控制方法，其特征在于采用高效液相色谱法对黄芩苷进行含量测定，相关条件及操作方法如下色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸溶液为流动相，流速1ml/min；检测波长为280nm；柱温40℃；对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品，加30-70％甲醇制成每1ml含黄芩苷40-50μg的溶液，即得；供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸0.4-0.6g，精密称定，置50ml量瓶中，加30-70％甲醇30-50ml，超声处理或加热回流提取30-60分钟，放冷，用同浓度甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液1ml，置10ml量瓶中，加入同浓度甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，根据测定结果进行计算，即得苍耳子鼻炎滴丸中黄芩苷的含量。2.根据权利要求l所述的苍耳子鼻炎滴丸的质量控制方法，其特征在于所述的苍耳子鼻炎滴丸中，黄芩苷的重量百分含量为l.86-4.79%。3.根据权利要求1或2所述的苍耳子鼻炎滴丸的质量控制方法，其特征在于还进行黄芩和白芷TLC鉴别，操作方法如下A、供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸5g，加质量百分比浓度为9.5-10.5。/。的稀盐酸20ml，加热回流提取l小时，放冷，滤过，滤液用乙醚振摇提取2次，每次20ml，水溶液备用，合并乙醚提取液，用水洗至中性，挥干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液I;B、对照药材溶液的制备取黄芩对照药材、白芷对照药材各lg，同供试品溶液制备方法制成黄芩对照药材溶液和白芷对照药材溶液；C、薄层鉴别吸取上述供试品溶液I、黄芩对照药材溶液和白芷对照药材溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为10:3:l:2的甲苯-乙酸乙酉^甲醇-甲酸溶液为展开齐lJ，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与白芷对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；再喷以2%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与黄芩对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。4根据权利要求1或2所述的苍耳子鼻炎滴丸的质量控制方法，其特征在于还进行辛夷TLC鉴别，操作方法如下A、供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸5g，加质量百分比浓度为9.5-10.5。/。的稀盐酸20ml，加热回流提取l小时，放冷，滤过，滤液用乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并水溶液，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，用水洗至中性，乙酸乙酯提取液浓縮至2ml，作为供试品溶液II;B、对照药材溶液的制备取辛夷对照药材lg，磨碎，加质量百分比浓度为9.5-10.5。/。的稀盐酸20ml，加热回流提取1小时，放冷，滤过，取滤液，自"用乙酸乙酯提取2次"起，同供试品溶液制备方法制成辛夷对照药材溶液。C、薄层鉴别照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液II和辛夷对照药材溶液各10y1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为8:2:l的甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与辛夷对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。5根据权利要求1或2所述的苍耳子鼻炎滴丸的质量控制方法，其特征在于还进行苍耳子TLC鉴别，操作方法如下A、供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸4g，置锥形瓶中，加10X氢氧化钠液20ml，加热回流提取l小时，滤过，滤液用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，用水洗至中性，回收乙酸乙酯并浓縮至2ml，作为供试品溶液m;B、对照药材溶液的制备取苍耳子对照药材lg，同供试品溶液制备方法制成苍耳子对照药材溶液。C、薄层鉴别照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液m和苍耳子对照药材溶液各10y1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为16:4:l的甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中熏5-10分钟；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。6根据权利要求1或2所述的苍耳子鼻炎滴丸的质量控制方法，其特征在于还进行冰片TLC鉴别，操作方法如下A、供试品溶液的制备取苍耳子鼻炎滴丸O.2-0.25g，加乙醇3ml，超声提取5分钟，取出，静置，取上清液作为供试品溶液IV;B、对照品溶液的制备取冰片对照品，加乙醇制成每lml含10mg的溶液，作为冰片对照品溶液；C、薄层鉴别照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液IV和冰片对照品溶液各5y1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15:2:6的环己烷-乙酸乙酉^三氯甲烷溶液为展开齐IJ，展开，取出，晾干，喷以5%磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。全文摘要本发明公开了一种苍耳子鼻炎滴丸的质量控制方法，采用高效液相色谱法对黄芩苷进行含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸溶液为流动相，流速1ml/min；检测波长为280nm；柱温40℃；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，根据测定结果进行计算，即得苍耳子鼻炎滴丸中黄芩苷的含量。该质量控制方法提供了苍耳子鼻炎滴丸中黄芩苷的含量测定方法，使苍耳子鼻炎滴丸的质量控制更为准确有效，从而更有利于确保其临床疗效的发挥；并且该含量测定方法操作简单，结果准确，精密度、重复性、稳定性等良好。文档编号A61K36/185GK101647863SQ20091030629公开日2010年2月17日申请日期2009年8月28日优先权日2009年8月28日发明者伍江蓉,刘文旭,波宋,悦张,华肖申请人:四川禾邦阳光制药股份有限公司