一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法

专利名称：：一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法
技术领域：
：本发明涉及一种提取羟基萘醌总色素的方法。
背景技术：
：紫草因对抗病原微生物、消化道平滑肌及血凝有一定影响，并对抗肿瘤、避孕、循环系统及降血糖有显著的作用，所以，紫草已成为一种不可或缺的中草药药材，而经研究表明，紫草中有效成分是"萘醌类色素"，目前提取羟基萘醌总色素效果最好的及最常用的方法为超声萃取法和索氏提取法，但这两种方法却都存在操作复杂且操作时间长，提取不完全(提取量小——提取的羟基萘醌总色素占干燥紫草根的45%52%，纯度低——仅为75%85%)，在操作过程中加入有机溶剂、导致有机溶剂残留使环境受到污染。
发明内容本发明目的是为了解决现有提取羟基萘醌总色素方法存在操作复杂且操作时间长，提取不完全，有机溶剂残留的问题，而提供一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法。超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法按以下步骤实现一、称取经研磨、过筛后的干燥紫草根180.0220.0g，加入95。/。的乙醇1822g，混合均匀后装入1L的萃取釜中，而后对萃取釜、解析釜和贮罐进行加热，均加热至温度为3555'C的条件下开启C02钢瓶，控制C02的流量为1030L/h;二、通过高压泵进行加压，在萃取压力为2030MPa、温度为3555'C的恒温恒压条件下进行循环萃取，然后在解析温度为3555'C、解析压力为48MPa的条件下进行分离，而后在解析釜出料口出料，即得羟基萘醌总色素；其中步骤二中循环萃取次数为4次，每次间隔的时间为O.5lh。本发明超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法的重现性及稳定性均良好，左旋紫草素回收率高达99.0%103.8%。本发明超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法的方法工艺简单、操作容易，整个方法操作时间短。本发明超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法在整个过程中没有添加任何的有机溶剂，方法最后也没有生成有机溶剂，解决了现有方法具有有机溶剂残留的问题，避免的环境污染。采用本发明超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法的提取的羟基萘醌总色素纯度高(高达98%以上)；提取量高(提取的羟基萘醌总色素占干燥紫草根的65.08%67.07%)。具体实施例方式本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。具体实施方式一本实施方式超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法按以下步骤实现一、称取经研磨、过筛后的干燥紫草根180.0220.0g，加入95。/。的乙醇1822g，混合均匀后装入1L的萃取釜中，而后对萃取釜、解析釜和贮罐进行加热，均加热至温度为3555。C的条件下开启C02钢瓶，控制C02的流量为1030L/h;二、通过高压泵进行加压，在萃取压力为2030MPa、温度为3555。C的恒温恒压条件下进行循环萃取，然后在解析温度为3555°C、解析压力为48MPa的条件下进行分离，而后在解析釜出料口出料，即得羟基萘醌总色素；其中步骤二中循环萃取次数为4次，每次间隔的时间为0.5lh。本实施方式所使用的超临界二氧化碳技术是指在临界温度和临界压力以上，且接近临界点状态下的C02作为萃取溶剂，通过改变温度和压力，以达到选择性地提取各种类型化合物的目的。具体实施方式二本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中干燥紫草根过筛的规格为1号筛或2号筛。其它步骤及参数与具体实施方式一相同。具体实施方式三本实施方式与具体实施方式一或二不同的是步骤一中称取经研磨、过筛后的干燥紫草根190.0210.Og。其它步骤及参数与具体实施方式一或二相同。具体实施方式四本实施方式与具体实施方式一或二不同的是步骤一中称取经研磨、过筛后的干燥紫草根195.0205.0g。其它步骤及参数与具体实施方式一或二相同。具体实施方式五本实施方式与具体实施方式一或二不同的是步骤一中称取经研磨、过筛后的干燥紫草根200.Og。其它步骤及参数与具体实施方式一或二相同。具体实施方式六本实施方式与具体实施方式三至五不同的是步骤一中温度为405(TC。其它步骤及参数与具体实施方式三至五相同。具体实施方式七本实施方式与具体实施方式三至五不同的是步骤一中温度为4248。C。其它步骤及参数与具体实施方式三至五相同。具体实施方式八本实施方式与具体实施方式三至五不同的是步骤一中温度为45。C。其它步骤及参数与具体实施方式三至五相同。具体实施方式九本实施方式与具体实施方式一、二、六、七或八不同的是步骤一中C02的流量为1525L/h。其它步骤及参数与具体实施方式一、二、六、七或八相同。具体实施方式十本实施方式与具体实施方式一、二、六、七或八不同的是步骤一中C02的流量为1822L/h。其它步骤及参数与具体实施方式一、二、六、七或八相同。具体实施方式十一本实施方式与具体实施方式一、二、六、七或八不同的是步骤一中C02的流量为20L/h。其它步骤及参数与具体实施方式一、二、六、七或八相同。具体实施方式十二本实施方式与具体实施方式九至十一不同的是步骤二中萃取压力为2228MPa。其它步骤及参数与具体实施方式十或^^一相同。具体实施方式十三本实施方式与具体实施方式九至十一不同的是步骤二中萃取压力为25MPa。其它步骤及参数与具体实施方式十或^^一相同。具体实施方式十四本实施方式与具体实施方式一、二、六、七、八、十二或十三不同的是步骤二中每次间隔的时间为0.60.8h。其它步骤及参数与具体实施方式一、二、六、七、八、十二或十三相同。具体实施方式十五本实施方式与具体实施方式一、二、六、七、八、十二或十三不同的是步骤二中每次间隔的时间为0.7h。其它步骤及参数与具体实施方式一、二、六、七、八、十二或十三相同。具体实施方式十六本实施方式与具体实施方式十四或十五不同的是步骤二中解析温度为405(TC。其它步骤及参数与具体实施方式十四或十五相同。具体实施方式十七本实施方式与具体实施方式十四或十五不同的是步骤二中解析温度为45'C。其它步骤及参数与具体实施方式十四或十五相同。具体实施方式十八本实施方式与具体实施方式一、二、六、七、八、十二、十三、十六或十七不同的是步骤二中解析压力为57MPa。其它步骤及参数与具体实施方式、二、六、七、八、十二、十三、十六或十七相同。具体实施方式十九本实施方式与具体实施方式一、二、六、七、八、十二、十三、十六或十七不同的是步骤二中解析压力为6MPa。其它步骤及参数与具体实施方式、二、六、七、八、十二、十三、十六或十七相同。具体实施方式二十本实施方式超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法按以下步骤实现超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法按以下步骤实现一、称取经研磨、过筛后的干燥紫草根200.0g，加入95。/。的乙醇20g，混合均匀后装入1L的萃取釜中，而后对萃取釜、解析釜和贮罐进行加热，均加热至温度为45'C的条件下开启C02钢瓶，控制C02的流量为20L/h;二、通过高压泵进行加压，在萃取压力为25MPa、温度为45。C的恒温恒压条件下进行循环萃取，然后在解析温度为45'C、解析压力为4MPa的条件下进行分离，而后在解析釜出料口出料，即得羟基萘醌总色素；其中步骤二中循环萃取次数为4次，每次间隔的时间为lh。对紫外-可见分光光度计进行精密度实验——精密量取lmL的对照品溶液(精密称取10.4mg的左旋羟基萘醌总色素对照品，置10mL容量瓶中，加适量的95%乙醇，超声处理使溶解，放冷，力口95%乙醇至刻度，摇匀，即得)，置50mL容量瓶中，力口95%乙醇至刻度，摇匀，即得浓度为20.80yg/mL的左旋羟基萘醌总色素溶液，然后在波长为516nm处重复5次，连续测定，测定结果如表l所示，从表l中可以看出吸光度的RSD为O.16%。表明仪器精密度良好，说明测量结果准确。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>对本实施方式超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法进行重现性实验一将本实施方式得到的羟基萘醌总色素配成溶液，在紫外光为516nm处，测定吸光度，测得各吸光度的RSD为O.16%，从表2中可以表明本实施方式超临界二氧化碳提取紫草的方法重现性良好。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>结合表1和表2中的吸光度的数据可知，采闬本实施方式超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法得到的羟基萘醌总色素的纯度高(高于99%)。对本实施方式超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法进行稳定性实验——取超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素样品配制浓度为20.80yg/mL的供试品溶液，分别在Oh、2h、4h、6h、8h、10h、12h及24h重复测定吸光度，测试结果如表3所示，从表3中可知RSD为<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>对本实施方式超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法进行回收率实验一精密称取5份(超临界二氧化碳提取物即本实施方式得到的羟基萘醌总色素168.60yg——为样品量)，称取5份左旋紫草素对照品(左旋紫草素166.40yg为加入量)，测得左旋紫草素的回收率如表4所示，从表4中可知平均回收率为101.34%，RSD为1.17。/。。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>÷采月目本实施方式超临界二氧化碳方法提，f又得到的羟基萘醌总色素经测得为133.54g，可知提取的羟基萘醌总色素占200.0g的干燥紫草根的66.77%。具体实施方式二十一本实施方式超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法按以下步、过筛后的干燥紫草根200.0g，加入95。/。的乙醇20g，混合均匀后装入1L的萃取釜中，而后对萃取釜、解析釜和贮罐进行加热，均加热至温度为5(TC的条件下开启C02钢瓶，控制C02的流量为15L/h;二、通过高压泵进行加压，在萃取压力为30MPa、温度为5(TC的恒温恒压条件下进行循环萃取，然后在解析温度为45'C、解析压力为6MPa的条件下进行分离，而后在解析釜出料口出料，即得羟基萘醌总色素；其中步骤二中循环萃取次数为4次，每次间隔的时间为0.8h。采用本实施方式超临界二氧化碳提取方法提取得到的羟基萘醌总色素经测得为131.24g，可知提取的羟基萘醌总色素占200.0g的干燥紫草根的65.62%。具体实施方式二十二本实施方式超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法按以下步骤实现一、称取经研磨、过筛后的干燥紫草根190.0g，加入95。/。的乙醇19g，混合均匀后装入1L的萃取釜中，而后对萃取釜、解析釜和贮罐进行加热，均加热至温度为4(TC的条件下开启C02钢瓶，控制C02的流量为25L/h;二、通过高压泵进行加压，在萃取压力为20MPa、温度为4(TC的恒温恒压条件下进行循环萃取，然后在解析温度为55。C、解析压力为8MPa的条件下进行分离，而后在解析釜出料口出料，即得羟基萘醌总色素；其中步骤二中循环萃取次数为4次，每次间隔的时间为O.5h。采用本实施方式超临界二氧化碳提取方法提取得到的羟基萘醌总色素经测得为124.18g，可知提取的羟基萘醌总色素占190.0g的干燥紫草根的65.36%。权利要求1.一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法，其特征在于超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法按以下步骤实现一、称取经研磨、过筛后的干燥紫草根180.0～220.0g，加入95％的乙醇18～22g，然后装入1L的萃取釜中，而后对萃取釜、解析釜和贮罐进行加热，均加热至温度为35～55℃的条件下开启C02钢瓶，控制C02的流量为10～30L/h；二、通过高压泵进行加压，在萃取压力为20～30MPa、温度为35～55℃的恒温恒压条件下进行循环萃取，然后在解析温度为35～55℃、解析压力为4～8MPa的条件下进行分离，而后在解析釜出料口出料，即得羟基萘醌总色素；其中步骤二中循环萃取次数为4次，每次间隔的时间为0.5～1h。2.根据权利要求l所述的一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法，其特征在于步骤一中干燥紫草根过筛的规格为1号筛或2号筛。3.根据权利要求1或2所述的一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法，其特征在于步骤一中称取经研磨、过筛后的干燥紫草根190.0210.0g。4.根据权利要求3所述的一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法，其特征在于步骤一中温度为405(TC。5.根据权利要求l、2或4所述的一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法，其特征在于步骤一中C02的流量为1525L/h。6.根据权利要求5所述的一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法，其特征在于步骤二中萃取压力为2228MPa。7.根据权利要求l、2、4或6所述的一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法，其特征在于步骤二中每次间隔的时间为O.60.8h。8.根据权利要求7所述的一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法，其特征在于步骤二中解析温度为405(TC。9.根据权利要求l、2、4、6或8所述的一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法，其特征在于步骤二中解析压力为57MPa。全文摘要一种超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法，它涉及一种提取羟基萘醌总色素的方法。它解决了现有提取羟基萘醌总色素方法存在操作复杂且操作时间长，提取不完全，有机溶剂残留的问题。提取方法将干燥紫草根及乙醇的混合物加热，在CO₂氛围及中具有萃取压力条件下进行循环萃取，然后再解压进行分离，出料，即得。本发明超临界二氧化碳提取羟基萘醌总色素的方法的重现性及稳定性均良好，左旋紫草素回收率高。本发明方法工艺简单、操作容易，整个方法操作时间短。本发明方法无有机溶剂残留，避免环境污染。采用本发明方法提取的羟基萘醌总色素纯度高达98％以上，提取量高——占干燥紫草根的65.08％～67.07％。文档编号A61P35/00GK101669981SQ20091030913公开日2010年3月17日申请日期2009年10月30日优先权日2009年10月30日发明者晖孙,辉董,华邵申请人:黑龙江中医药大学