质谱检测用的疏水性浓缩靶板的制作方法

质谱检测用的疏水性浓缩靶板的制作方法
【技术领域】
[0001] 本实用新型设及一种用于MALDI-T0F质谱检测用的疏水性浓缩祀板。通过疏水性 浓缩祀板的使用来实现MLDI-T0F质谱检测中灵敏度，分辨率和重复性的提升，属于质谱 检测领域。
【背景技术】
[0002] MALDI-T0FMS是MatrixAssistedLaserDeso;rptionIonizationTimeof Fli曲tMassSpectrometry的英文缩写，即基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱，它是 近年来发展起来的一种软电离新型有机质谱，通过引入基质分子，使待测分子不产生碎片， 解决了非挥发性和热不稳定性生物大分子解吸离子化的问题，是分析难挥发的有机物质的 重要手段之一。MALDI-T0F在世界范围内得到了突飞猛进的发展，并广泛应用于生物技术 和制药企业的药物开发、科研领域的生物分析和化学检测W及安全部口的核福射、化学物 质和生物病原体的监测等。
[0003] MLDI-T0F的原理是：当用一定强度的激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜， 基质从激光中吸收能量，样品解吸附，基质-样品之间发生电荷转移使得样品分子电离，电 离的样品在电场作用下加速飞过飞行管道，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测，即 测定离子的质量电荷之比（M/Z)与离子的飞行时间成正比来检测离子。MLDI-T0F-的中 屯、技术就是依据样品的质荷比（m/z)的不同来进行检测，并测得样品分子的分子量。根据 MLDI-T0F的原理，MLDI-T0F具有灵敏度高、准确度高、分辨率高、图谱简明、质量范围广 及速度快等特点，在操作上制样简便、可微量化、大规模、并行化和高度自动化处理待检生 物样品，而且在测定生物大分子和合成高聚物应用方面有特殊的优越性。近年来已成为检 测和鉴定多肤、蛋白质、多糖、核巧酸、糖蛋白、高聚物W及多种合成聚合物的强有力工具。 如应用MLDI-T0F测定蛋白质酶解的肤质量指纹图谱（PMF)、源后裂解（PSD)碎片离子图 谱、并结合质谱网络数据库检索，可获得多肤、蛋白质的序列。应用MLDI-T0F对基因组单 核巧酸多态性（SNPs)进行分析检测，可区分和鉴别相对分子质量达7, 000左右(含20多个 碱基)、仅存在1个碱基差别的不同DNA。特别值得指出的是，MLDI-T0F已成为生命科学 领域蛋白质组研究中必不可缺的重要关键技术之一。
[0004] MLDI-T0F可W解决当前蛋白组学中W下几种潜在的挑战，即生物标记物的发 现、分子诊断研发、蛋白质高通量分析和蛋白质组图谱，但绝不局限于此，MLDI-T0FMS应 用于生物标记物的发现和在分子层次上对疾病机理进行揭示，从而被应用于分子诊断、目 标治疗W及个性化用药，将为人们更完整地提示生长、发育和代谢调控等生命活动的规律 和严重疾病的发生机理，为人类进行疾病的诊断防治和新药开发提供重要的理论基础。采 用MLDI-T0FMS进行血清等生物样品分离、多肤谱快速扫描和疾病特征峰测序，研究人类 重要生理和病理过程中重要生物标志物谱实验确证和分析技术，可获得若干与人类重大疾 病相关的重要生物标志物谱，应用于重大疾病的早期预警和病程判断。如用于发现恶性肿 瘤血清标志物谱，创建具有自主知识产权的我国常见恶性肿瘤人群的"血清质谱多肤谱"， 获得肿瘤早期预警、病程判断的质谱数据标准，发展用于"血清质谱多肤谱"疾病相关数据 挖掘的生物信息学工具和疾病诊断软件，可应用于临床并推向市场。无论对于科研领域、医 疗系统，还是生物市场皆具有广阔的前景。
[0005]MLDI-T0F由于具备快速分析、操作简易、自动化、样品用量少和高通量等特点， 可直接检测血清、血浆、尿液、脑脊液、关节腔滑液、支气管洗脱液、细胞裂解液、组织提取物 和各种分泌物，应用MLDI-TCFS形成规模化的重大疾病、重要生物资源的蛋白质组学、蛋 白质组指纹图谱或质谱肤图研究技术平台，可建立具有独立知识产权的蛋白质组数据库， 发现疾病的相关蛋白谱和具有重要应用前景的生物标记分子谱，W揭示疾病的发生机制， 作为早期诊断、分子分型、疗效及预后判断的依据，并找出可能成为新药设计的分子祀点， 为疾病提供新的治疗方案。基于MLDI-T0F的蛋白质组图谱、质谱肤图、生物标记物谱等分 析诊断的发展将是分子医学领域的一场革命，它不仅提供了一种新的诊断方法，并且具有 很高的可行性，它可在数分钟时间内从微量血液中测出上万个结果并对其进行分析。
[0006]由于目前国内MLDI-T0F的检测主要采用的是普通金属祀板，不能满足质谱检测 中高分辨率，高灵敏度和高重复性的要求。随着MLDI-T0F在科学研究W及临床诊断上的 日益广泛的运用，目前急需一种能够满足质谱检测中高分辨率，高灵敏度和高重复性要求 的祀板，为研究工作W及疾病的快速诊断提供有力支撑。

【发明内容】

[0007]本实用新型针对MLDI-T0F检测中对高分辨率，高灵敏度和高重复性的要求，通 过利用疏水性薄膜的优点，创造性发明了用于MALDI-T0F检测的疏水性浓缩祀板。
[0008] 该实用新型的思路在将疏水性材料的浓缩效果和普通金属祀板结合制成疏水性 浓缩祀板来代替金属祀板，应用于MLDI-T0F检测，从而提高了高分辨率，高灵敏度和高重 复性；同时拥有普通金属祀板的承载样品与基质的混合物的功能和样品定位功能。
[0009]因此，本实用新型的目的是提供一种用于MLDI-T0F检测中承载并定位样品的祀 板。其结构包括：
[0010] (1)直径l-3mm的样品祀环；
[0011] (2)与样品室匹配的纯角，其形状与MALDI-T0F样品室底部相契合；
[001引 0)祀板主体；
[0013] (4)由疏水性材料制成的祀板表面覆膜。
[0014]在W上任一项的实施方案中，祀板主体的材料选自不诱钢或侣合金。在W上任一 项的实施方案中，覆膜可W采用锻膜或涂料的方式完成，例如锻上或贴上聚丙締，聚己締之 类大分子聚合物的疏水性材料所指的薄膜，或是涂上含氧烷基聚合物类的疏水涂料。其中， 覆膜的作用是针对样品来间接提高检测结果的灵敏度，分辨率和重复性。
[0015]在另一个W上任一的实施方案中，样品的定位作用是通过祀环和祀板上的数字与 英文字母的关联来实现的，其中祀板左侧的横排标识为A-H，祀板上方的竖列标识为1-12， 通过不同的横排和竖列标识的组合，W定位不同的样品。
[0016]在另一个W上任一实施方案中，所述不诱钢或侣合金祀板拥有导电能力。
[0017] 技术效果
[0018] 1)增加了疏水性表面覆膜，有效的富集了样品，降低了样品量需求并提高检测结 果的灵敏度，分辨率和重复性；
[0019] 2)覆膜，样品祀环均可根据不同样品需求更改，扩大了适用范围的同时还提高了 对样品的针对性。
【附图说明】 [0020] ；
[0021] 图1 ;祀板主体的俯视图，其中祀板左侧的横排标识为A-H，祀板上方的竖列标识 为1-12,通过不同的横排和竖列标识的组合，W定位不同的样品。
[0022] 图2 ;祀板主体和样品室底部的契合关系示意图。其中上图为祀板主体，下图为样 品室底部，圆圈位置表示纯角。
[002引图3 ;疏水性浓缩祀板点样后的质谱效果图。
[0024] 图4;常规金属祀板点样后的质谱效果图
【具体实施方式】
[00巧]实施例1 ;疏水性浓缩祀板的点样W及质谱检测效果
[0026] 将制好的样品用移液器吸取一定量后直接点到疏水性浓缩祀板上，等到样品变干 后将疏水性浓缩祀板放入MALDI-T0F质谱仪中开始检验。质谱检测效果如图3所示。
[0027] 实施例2 ;金属祀板的点样W及质谱检测效果
[002引将制好的样品用移液器吸取一定量后直接点到普通祀板上，再将调配好的基质点 到样品上，等到样品和基质的混合物变干后将祀板放入MLDI-T0F质谱仪中开始检验。质 谱检测效果如图4所示。
[0029] 实施例3;疏水性浓缩祀板和金属祀板的点样W及质谱检测效果比较
[0030] 将制好的样品用移液器吸取一定量后分别直接点到两种祀板上，再将调配好的基 质点到样品上，等到样品和基质的混合物变干后将祀板放入MLDI-T0F质谱仪中开始检 验。重复试验20次并用进行统计学分析，分析结果如表1所示。
[0031] 多肤提取物所选出峰的样本标准偏差结果 [00321
【主权项】
1. 一种用于质谱检测的疏水性浓缩靶板，其结构包括： (1) 直径l-3mm的样品革巴环； (2) 与样品室匹配的钝角，其形状与MALDI-TOF样品室底部相契合； (3) 靶板主体； (4) 由疏水性材料制成的靶板表面覆膜。
2. 权利要求1的所述的浓缩靶板，其特征在于靶板主体的材料选自不锈钢或铝合金。
3. 权利要求1的所述的浓缩靶板，其特征在于表面覆膜采用镀膜或涂料的方式完成。
4. 权利要求1的所述的浓缩靶板，其特征在于靶板左侧的横排标识为A-H，靶板上方的 竖列标识为1-12,通过不同的横排和竖列标识的组合，以承载和定位不同的样品。
【专利摘要】本实用新型提供一种用于MALDI-TOF质谱检测的疏水性浓缩靶板，其结构包括：(1)直径1-3mm的样品靶环；(2)与样品室匹配的钝角，其形状与MALDI-TOF样品室底部相契合；(3)由不锈钢或铝合金制成的靶板主体；(4)由疏水性材料制成的靶板表面覆膜。本实用新型提高了MALDI-TOF的检验灵敏度，分辨率和重复性。
【IPC分类】G01N27-64, G01N1-40
【公开号】CN204613150
【申请号】CN201520142252
【发明人】李云鹏, 马庆伟, 林燕
【申请人】北京毅新博创生物科技有限公司
【公开日】2015年9月2日
【申请日】2015年3月13日