用于改善记忆表现的益智组合物的制作方法

用于改善记忆表现的益智组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及益智组合物及其用途，例如刺激认知。更具体地，本发明提供了新的组 合物，其包含选自西那卡塞、巴氯芬、阿坎酸、美西律、磺胺异噁唑和托拉塞米中的至少两种 药物，其用于在有所需要的受试者中增强记忆和心理功能如警戒、注意力（attention)、推 理、集中力（concentration)、学习或语言加工。
【背景技术】
[0002] 在快速发展的社会中，随着更多地一直暴露于饱和信息和对精神表现方面的需 求，存在着对能够维持心理功能，如记忆、认知、智力、动机、注意力和集中力的药物的日 益增长的需求，甚至对健康人来说也是如此。这种药物名为益智药、智能保健药（smart drugs)、记忆增强剂、认知增强剂和智力增强剂，其包括药品，补充剂，营养制品和功能性食 品[1]。益智药的主要特点是增强学习和记忆获得（memory acquisition)，以及使得习得 行为抵抗易于损害它们的药剂，以及保护大脑免受各种物理或化学损伤，并最终促进信息 在脑半球间的流动并有效增强（tonic)皮质/皮层下机制[2]。也期待精神药物不存在常 见的负面药理学作用，因为这些药物专门用于健康的患者，包括年轻和年老的患者。通常开 发了改善健康个体的认知工作的表现的这些药物，用于在患有神经精神障碍和脑损伤的患 者中治疗认知能力丧失和提高生活质量[3]。
[0003] 面临社会的压力，越来越多的人被促使使用通常处方用于治疗致残疾病的药物， 目的仅仅是提高他们的工作和效率潜力，而没有考虑滥用所述药物引起的潜在的副作用或 成瘾性。这类药物或补充剂日益增长的市场需求使得若干非处方的药物或膳食补充剂为消 费者可用，但经科学明确证实对记忆或相关心理功能不具有任何正面作用。
[0004] 益智药的作用的精确机制是未知的。广泛的研宄揭示了各种药理学作用。假设的 是，它们通过改变神经化学物质（如神经递质、酶和激素）的脑供给的利用度（这通过改善 脑的供氧来实现）或刺激神经生长来发挥作用。
[0005] 益智药属于多种不同的类别，它们如下：传统草药，维生素和补充剂，消遣性毒品 (recreational drug)，西坦类药物（racetams)，兴奋剂，多巴胺能药，集中力和记忆增强药 物（胆碱能药，GABA阻滞剂，谷氨酸受体活化剂（glutamate activator)，磷酸二醋酶抑制 剂，a -2A肾上腺素受体激动剂），5-轻色胺能药物，抗抑郁药，适应原（adaptogenic)(抗 应激）药和情绪稳定剂，改善血流和代谢功能的血管扩张剂，组胺激动剂（实验性的），抗氧 化剂和神经保护药物，激素和二次增强剂（secondary enhancers)。
[0006] 吡拉西坦，属于西坦类药物的类别，是首次发现的益智药并且在许多国家许可用 于肌阵挛、中风和轻度认知缺损。吡拉西坦属于已经开发的毒理学安全的药物。例如，已 经报道吡拉西坦的两周给药方案在健康大学生中增强了语言记忆[4]。还显示与典型的安 定药组合时在精神分裂症患者中的治疗效果[5]。其他药物表现了对认知功能的改善，如 d-环丝氨酸对焦虑症[6]，左乙拉西坦对癫痫[7, 8]和酒精戒断[9]，以及多奈哌齐对智力 低下[10]的改善等。但大多数这类药物都不能避免有害的副作用。
[0007] 巴氯芬，是一种GABAb受体激动剂，已知诱发啮齿类动物的顺行性遗忘 (anterograde amnesia) [11]。最近，已经报道了一位在张力障碍治疗的过程中接受巴氯芬 鞘内滴注的女性的遗忘症的复发[12]。类似地，关于阿坎酸对健康的年轻人类受试者的效 果的临床研宄表明阿坎酸损害自由回忆，支持了阿坎酸损害记忆功能的这一假设[13]。
[0008] 如本申请所示，发明人已经发现了具体药物的组合，其对于体内刺激认知是有效 的，特别是在健康受试者中，并代表了新的、改进的、安全和有效的益智药。
[0009] 发明概述
[0010] 本发明的一个目的在于一种组合物，其包含选自巴氯芬、阿坎酸、西那卡塞、美西 律、磺胺异噁唑和托拉塞米或它们的盐、前药、衍生物或持续释放制剂中的至少两种药物的 组合，用作在有所需要的受试者中的认知功能的刺激剂。
[0011] 本发明的另一目的在于在有所需要的受试者中刺激认知的方法，所述方法包括给 予所述受试者选自以下的至少两种药物的组合：巴氯芬、阿坎酸、西那卡塞、美西律、磺胺异 噁唑和托拉塞米，或它们的盐、前药、衍生物或持续释放制剂。
[0012] 在优选的实施方案中，用于本发明的组合物包含选自下述的药物的组合：
[0013] -巴氯芬和阿坎酸，
[0014] -美西律和西那卡塞，
[0015] -巴氯芬和托拉塞米，或
[0016] -磺胺异噁唑和托拉塞米。
[0017] 本发明特别适于在所述受试者中刺激（例如改善、增强或增加）记忆、学习、推理、 警戒、注意力、集中力、语言加工，和/或应付社会职业负担的能力。
[0018] 本发明特别适用于下述的健康受试者：其不具有疾病的已知临床征兆（特别是未 患有血管性痴呆、老年痴呆、与年龄有关的记忆缺损、阿尔茨海默氏病、路易体痴呆或轻度 认知缺损的受试者）的受试者，以及仅需要改善或刺激认知能力（无论是暂时的还是较长 时间段的）的受试者。
[0019] 本发明还可用于治疗性或预防性方案，用在正在或已经遭受影响认知的特定障碍 或面临患有所述障碍的风险的受试者中，所述障碍如精神障碍，智力低下，化学品诱导的记 忆障碍或遗忘症，饮食或代谢缺陷，学习、语言、计算和/或阅读障碍，或药物戒断。
[0020] 本发明可用于哺乳动物受试者，优选人类受试者。
【附图说明】
[0021] 图1:巴氯芬和阿坎酸组合在显著改善小鼠的学习和工作记忆表现(在T型迷宫 交替任务中）方面是有效的，无论所测试的浓度是多少（参见表4)，且无论治疗的持续时间 是多长（从持续7天（深灰色条）至2小时（浅灰色条）然后进行试验；黑色条：给予媒介 物的动物；* :显著不同于媒介物，ANOVA和Dunnett检验）。
[0022] 胤么巴氯芬和阿坎酸，当组合时并仅在试验前2小时给药一次时，协同作用于改 善学习和工作记忆表现（在T型迷宫交替任务中）。在非常低的剂量（深灰色条）观察到 巴氯芬（BCL)和阿坎酸（ACP)组合的显著的正面作用，而在所述浓度，针对单独使用所述分 子的任一种未观察到显著的改善（阴影条）。（* :显著不同于给予媒介物的动物（黑色条）， Student T检验；ns:没有显著不同于媒介物）。黑色条：给予媒介物的动物。
[0023] 麗玉本发明的组合物在东莨菪碱诱导的遗忘症模型中，在长期剂量方案中（在试 验前治疗7天）改善学习和工作记忆表现。与给予媒介物的、东莨菪碱处置的动物（深灰 色条）相比，记忆丧失的防止为从11%至37% (浅灰色条）。黑色条：给予媒介物的动物。
[0024] 麗土在东莨菪碱诱发的遗忘症中记忆表现的改善。与给予媒介物的、东莨菪碱处 置的动物（深灰色条）相比，在仅从试验前夜开始治疗的动物中，工作记忆显著提高。当它 们被给予巴氯芬-阿坎酸组合（浅灰色条）时，在东莨菪碱处置的动物中学习和记忆表现 的损失减少14%至44%。黑色条：给予媒介物的动物。
[0025] 图5:在察觉彳千备试骑(detection task test，DET)中年轻受试者表现得比老年 受试者好。在都给予了安慰剂的年轻组（实心方形）和老年组（实心圆）的DET中评分原 始数据（Lmn，表现速度）被描绘为实验时间表的函数。最好的表现对应于最低的评分。如 所预料的那样，在年轻受试者中的认知表现要比老年受试者好。
[0026] 里立巴氯芬-阿坎酸组合改善了健康受试者的认知功能。在给予氯芬-阿坎酸 (实心方形，实线）或给予安慰剂（空心方形，虚线）的年轻组中，DET(Lmn，表现速度，其降 低对应于表现的改善）的从基线变化的评分被描绘为实验时间表的函数。给予巴氯芬-阿 坎酸组合的受试者表现得比给予安慰剂的受试者好。在整个治疗持续期间在经治疗的年龄 组中观察到表现的改善。
[0027] 里1:在Cogstate'H人知试验中的表现与混合化合物的血浆浓度相关。观察到在第 10天给药5小时后在受试者血样中阿坎酸的血浆浓度（水平轴）与在第10天给药6小时 后认知试验的复合评分（垂直轴）之间的正相关（r，皮尔森相关性检验）。
[0028] B 8：ERP数据与混合化合物的血浆浓度相关。观察到在第10天给药1. 5小时后 巴氯芬的血浆浓度与在第10天给药6小时后ERP复合评分之间的正相关（r，皮尔森相关性 检验）。
[0029] B 9：ERP数据与混合化合物的血浆浓度相关。观察到在第10天给药1. 5小时后 阿坎酸的血浆浓度与在第10天从给药后6小时采集ERP测量时的ERP复合评分之间的正 相关（r，皮尔森相关性检验）。
[0030] 图10:巴氯芬-阿坎酸组合有效降低东莨菪碱诱发的认知缺损。在Groton迷宫 学习试验（GMLT)中的评分原始数据沿着垂直轴绘制。评分的增加对应于GMLT中表现的下 降。东莨菪碱（在H3给予）在安慰剂处置的受试者（圆圈，虚线）中诱发了认知表现的迅 速降低，这在注射东莨菪碱后持续约6小时（H9)。巴氯芬-阿坎酸混合物（方形，灰色线） 在这一时期有效降低东莨菪碱对认知表现的有害作用。在对应于巴氯芬和阿坎酸的较高的 血浆浓度的时间窗中观察到认知评分的显著改善（水平轴下的阴影条，深色：较高的血浆 浓度，浅色：较低的血衆浓度）。
[0031] 发明详述
[0032] 本发明涉及用于在受试者中改善或刺激记忆和相关心理功能的组合物和方法。更 具体地，本发明披露了包含至少以下的一种组合的组合物作为有效改善哺乳动物的记忆和 相关心理功能的益智药的用途：
[0033] -巴氯芬和阿坎酸，
[0034] -美西律和西那卡塞，
[0035] -巴氯芬和托拉塞米，或
[0036] -磺胺异噁唑和托拉塞米。
[0037] 记忆（或者更精确地学习和记忆现象）是一个针对复杂的大脑过程的通用术语， 由大脑感知的各种信息通过它被存储，编码和记起（retrieve)。记忆是来自由生物体接收 的所有种类信息的存储：运动，语言，视觉，情感，气味等。生理学上，这些过程源于突触响应 的增强（通过调节突触强度和突触形成现象，称为长时程增强效应）以及源于通过创立神 经元连接的神经元网络的致密化。科学家在短时程记忆（也称为工作记忆）和长时程记忆 之间进行了区分。短时程记忆是信息的短暂保留（持续几分钟到几小时），其容量是有限 的。长时程记忆允许的更多的信息的存储并且这持续无限期的时间（如寿命一样长）。已 经发现长时程记忆本身由往往是相互关联的不同亚型的记忆组成。这两种类型的记忆之间 的转换被称为记忆巩固，并且是不同的脑区域之间连接的加强的结果和来自这些不同区域 的信息的整合的结果。从短时到长时程记忆的转换通常由神经元的重复刺激引发。海马区 已经显示出在巩固过程中的关键作用：在酗酒者中观察到的海马区容量的变更已与他们经 常经历的认知和记忆缺损相关联。
[0038] 记忆力的丧失通常归因于较少被刺激或较不活跃的神经元突触的强度的功能活 动依赖性减少。过量的新信息（需要加强先前突触或创造新的突触），也可能会削弱其他旧 的信息，从而意味着以前存储的信息被遗忘。相反地，没有能力来存储更多的信息可能是因 为存在过量较旧的信息。因此，存储或应付高流量的数据的环境因素可能影响记忆和相关 心理功能。
[0039] 其他因素，如睡眠不足，应激，情绪状态，精神疾病（psychiatric disease)，药物 滥用或服用药物已知影响记忆和相关心理功能，特别是通过削弱或加强突触来影响信息存 储。
[0040] 本发明人出人意料的发现，包含选自巴氯芬、阿坎酸、西那卡塞、美西律、磺胺异噁 唑和托拉塞米组合的至少两种药物的组合物在体内增强不同任务的记忆表现（意味着短 时或长时程记忆以及相关的心理功能）方面是特别有效的。
[0041] 在本发明的上下文中术语"记忆"包括短时和长时程记忆。
[0042] 在本发明的上下文中，术语"心理功能"包括涉及到或可维持记忆过程如集中力、 警戒、注意力、学习、推理或语言加工的认知任务。
[0043] 虽然出于改善任何哺乳动物的记忆和/或心理功能的目的可使用本发明的组合 物，但是应当认为，这样的改善在下述的健康人中是特别期望的：他们需要面对高表现的要 求，愿意改善或维持他们的表现和他们的认知健康（wellness)。这种人例如为需要按时或 长期提高他们的记忆、学习或警戒表现的人，如学生、护理人员、飞行员（pilot line)，或更 普遍地需要面对精神疲劳、睡眠不足、每天的精神应激、职业性应激，或需要处理多任务活 动的人。换言之，本发明的组合物被指定用于需要面对社会职业负担的人。其还涉及具 有记忆问题（complaint)的其他人，例如，在激素变化或失调期间经历记忆丧失的女性，例 如在怀孕时、产后、在围绝经期或绝经期。普遍接受的是，即便是认知表现的小百分比增加 也可导致功能结果的显著改善（参见"Brain science, addiction and drugs"，report of the Academy of medical Sciences(UK), 2008)。因为这些人是健康人，他们未患有血管性 痴呆、老年痴呆、与年龄有关的记忆缺损、阿尔茨海默氏病、路易体痴呆或轻度认知缺损。 [0044] 需要所述刺激或改善的其他人是正在经历损害他们的记忆和/或记忆相关的心 理功能的病症或面临经历所述病症的风险的人。由此，本发明的目的不是治疗所述记忆缺 损性病症的病因学起因，而是向正在经历所述病症或障碍或面临经历所述病症或障碍的风 险的人提供他们身体健康的改善，这通过改善他们的记忆和/或记忆相关功能来实现。 [0045] 这类人例如为：
[0046]-接受对记忆带来负面影响的有毒物质的治疗或暴露于所述有毒物质的人，如滥 用药物（如可卡因，海洛因，大麻，安非他明等），暴露于重金属（如铅，铝，汞等），药物如巴 比妥类、苯二氮草类、抗胆碱能药（如东莨菪碱），麻醉剂（如丙泊酚），他汀类药物（如阿 伐他汀，罗苏伐他汀或辛伐他汀），或者一些抗癫痫药物（如卡马西平），第一代抗组胺能药 物等的人。描述为诱导记忆丧失的一些药物特别地由Tannenbaum等人[14]列出。
[0047]-正在经历药物戒断的人。
[0048]-患有甲状腺病症，从而导致甲状腺功能减退或甲状腺功能亢进，特别是甲状腺功 能减退的人。
[0049]-患有与智力低下相关的障碍的人，所述障碍选自：鲁宾斯坦-泰比综合征、格雷 格综合征、阿佩尔综合征、安格尔曼综合征、科-勒二氏综合征，雷特氏综合征、脆性X综合 征或威廉氏综合征。
[0050] -遭受病理性学习、语言、计算和/或阅读困难（例如，计算障碍，工整书写困难或 诵读困难）的人，特别是儿童。
[0051] -患有精神疾病如抑郁症、精神障碍（如自闭症或精神分裂症）、注意力缺陷多动 障碍，焦虑症或强迫症的人。
[0052] -患有以下疾病的人：饮食缺陷（由例如肥胖症治疗手术、营养不足或营养不良、 不完全肠外营养、利尿疗法、药物摄取等导致），或慢性疾病（如感染，慢性腹泻，腹部疾病， 克罗恩病），导致代谢缺陷如铁缺乏症、维生素缺乏症等，例如，硫胺（维生素 BI)缺乏症 (例如科萨科夫综合征、韦尼克脑病）、维生素 B6缺乏症、维生素 B12缺乏症，或遗传代谢缺 陷（如导致智力低下的苯丙酮尿症）。
[0053] 如本申请所用，这类人未患有血管性痴呆、老年痴呆、与年龄有关的记忆缺损、阿 尔茨海默氏病、路易体痴呆或轻度认知缺损。
[0054] 如本申请使用的术语"改善"是指与先前测量或参考数据相比，记忆和/或相关心 理功能表现的增加。这种在记忆和/或记忆相关的心理功能的表现可使用本领域熟知的若 干记忆和认知试验来测量。应该理解的是，所述"改善"也可以是在经历任何上述病症或活 动的受试者中，与先前水平相比，维持所述表现，否则预期所述病症或活动会导致所述记忆 和/或相关心理功能的表现的弱化。
[0055] 如本申请所用，在正在遭受或已经遭受认知缺陷病症或障碍的受试者中"治疗"记 忆缺损包括，在如上定义的有所需要的受试者中治疗、防止、预防、延迟或降低记忆缺损和/ 或记忆相关的心理功能缺陷。
[0056] 在本发明的上下文中，特定的药物或化合物的名称意味着不仅包括具体命名的分 子，而且还包括任何化学纯度的其任何药学上可接受的盐，水合物，衍生物，异构体，外消旋 体，缀合物，前药或衍生物。
[0057] 术语"组合或组合治疗/疗法"表示其中一种或多种化合物和/或药物被共同给 药于受试者，以引起生物效应的治疗。在根据本发明的组合疗法中，至少两种药物可以一起 或分开、同时或依次给予。另外，本发明的一种或多种化合物和/或药物可以通过 不同的途 径和方案给药。因此，尽管组合的药物可以配制在一起，它们也可以单独配制。
[0058] 如本申请使用的术语"前药"是指本发明化合物的功能性衍生物（或前体），当将 其给药于生物系统中时，由于一个或多个自发的化学反应、一个或多个酶催化的化学反应 和/或一个或多个代谢性化学反应而生成所述化合物。前药通常的结构为X-药物，其中X 是一种惰性载体部分，且药物是活性化合物。通常，所述前药缺乏活性或比所述药物活性 低，而所述药物在体内从载体中释放。前药通常是无活性的或比所得的药物活性低，并且可 以用于例如改善药物的物理化学性质，靶向药物至特定的组织，改善药物的药代动力学和 药效学性质和/或减少不希望的副作用。适用于前药设计的一些常见的官能团包括但不限 于，羧基、羟基、胺、磷酸酯/膦酸酯和羰基基团。通常通过对这些基团进行修饰产生的前药 包括但不限于，酯、碳酸酯、氨基甲酸酯、酰胺和磷酸酯。选择合适前药的具体的技术指导是 公知常识[15-19]。此外，前药的制备可以通过本领域技术人员已知的常规方法来进行。可 用于合成其他前药的方法描述于关于所述主题的众多综述[15, 20-25]中。例如，普阿氯芬 (arbaclofen placarbil)在ChemID plus Advance数据库（网址：chem. sis. nlm. nih. gov/ chemidplus/)中列出，且普阿氯芬是公知的巴氯芬的前药[26,27])。
[0059] 术语化合物的"衍生物"包括任何分子，其在功能和/或结构上与所述化合物相 关，如这种化合物的酸、酰胺、酯、醚、乙酰化变体、羟基化变体，或（C1-C6)烷基化变体。术 语"衍生物"还包括已失去如上面列出的一个或多个取代基的结构上相关的化合物。例 如，高牛磺酸（homotaurine)是阿坎酸的脱乙酰化衍生物。化合物的优选衍生物是与所述 化合物具有相当大程度的相似性的分子，如通过已知方法所确定的那样。与母体分子类 似的化合物以及它们的相似性指数可见于若干数据库如PubChem(http: //pubchem. ncbi. nlm. nih. gov/search/)或 DrugBank(http://www. drugbank. ca/) 〇 在一个更优选的实施 方案中，衍生物应具有与母体药物之间的大于0. 4,优选大于0. 5,更优选大于0. 6,甚至 更优选大于〇. 7的Tanimoto相似性指数。Tanimoto相似性指数广泛用于测量两个分子 间的结构相似性。Tanimoto相似性指数可通过软件计算，如Small Molecule Subgraph Detector [28, 29]，可在线获得（http: //www. ebi. ac. uk/thornton-srv/software/SMSD/)。 优选的衍生物应在结构上和功能上与母体化合物相关，即，它们也应保留母体药物的至少 部分活性。
[0060] 术语衍生物还包括药物的代谢物，例如在给药于生物体后，通常通过专门的酶体 系由所述药物的一种或多种（生物化学）修饰或加工产生的分子，并且所述分子显示或保 留了所述药物的生物学活性。已经披露代谢物产生了母体药物的很大的治疗作用。在一个 具体实施方案中，如本申请使用的"代谢物"表示保留母体药物的至少部分活性的经修饰或 加工的药物。
[0061] 术语"盐"是指本发明化合物的药学上可接受的和相对无毒性的无机或有机酸加 成盐。药用盐的形成在于将酸性、碱性或两性药物分子与抗衡离子配对以建立药物的盐形 式。广泛的化学物质可用于中和反应。本发明的药学上可接受的盐由此包括通过使作为 碱起作用的主要化合物与无机或有机酸反应而成盐的那些盐，例如，乙酸、硝酸、酒石酸、盐 酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、樟脑磺酸、草酸、马来酸、琥珀酸或柠檬酸的盐。本发明的药学上可 接受的盐还包括主要化合物作为酸发挥作用且与合适的碱形成的那些盐，例如钠、钾、钙、 镁、铵或胆碱的盐。尽管给定的有效成分的大多数盐是生物等价物，但它们中的一些可具 有增加的溶解度或生物利用度性质。如今盐的选择是药物开发过程中常见的标准操作，如 H. Stahl和C. G Wermuth在他们的手册[30]中教导的那样。
[0062] 在优选的实施方案中，化合物的名称意味着命名化合物本身，以及其任何药学上 可接受的盐、水合物、异构体、外消旋体、酯或醚。
[0063] 在一个更优选的实施方案中，化合物的名称意味着命名化合物本身（具体地命 名）以及其任何药学上可接受的盐。
[0064] 在一个具体实施方案中，使用化合物的持续释放制剂。
[0065] 如上文所讨论的那样，本发明涉及特定的药物组合物，其对牵涉到记忆过程的记 忆和相关心理功能具有有力的、出人意料的作用。这些药物组合因此代表了在有所需要的 受试者中改善记忆的新途径。更具体地，本发明披露了组合物，其包含选自西那卡塞、巴氯 芬、阿坎酸、美西律、磺胺异噁唑和托拉塞米的至少两种药物，其在体内提供了对记忆和记 忆-相关心理功能表现的显著的、协同的作用。
[0066] 事实上，如实验部分中所示，本发明的组合疗法可大大地改善受试者的学习和记 忆表现。具体地，本发明人出人意料地发现，本发明的组合对短时和长时程记忆具有有力 的、出人意料的正面作用，无论是在健康受试者中还是在经历认知缺陷病症的受试者中。针 对药物诱发的遗忘症，它们也显示了这样的作用。尽管在本发明人发现的剂量下单独使用 是有效的，实施例也显示本发明的组合疗法在非常低的剂量下也是有效的，在所述非常低 的剂量下，单独的药物并不能赋予学习和记忆表现的任何改善。这些结果是显著的、特别有 益的，因为在这样的低剂量下，任何可能的副作用（如果有）都可能得以避免。
[0067] 上述药物的示例性CAS编号提供于下表1中。表1还以非限制性方式例示了用在 本发明组合物中的这些化合物的常见的盐、外消旋体、前药、代谢物或衍生物。
[0068] 表 1
[0069]
[0070] 巴氯芬前药的具体实例由Hanafi等人[31]给出，他们指出巴氯芬酯和氨基甲 酸酯针对CNS靶向作用是特别关注的。因此，所述前药特别适于本发明的组合物。前述 的普阿氯芬也是熟知的前药，由此可用于代替发明的组合物中的巴氯芬。巴氯芬的其他 前药可见于以下专利申请：W02010102071, US2009197958、W02009096985、W02009061934、 W02008086492、US2009216037、W02005066122、US2011021571、W02003077902、 W02010120370。
[0071] 阿坎酸的有用前药如泛解酸醋新戊醋基磺酰醋（pantoic acid ester neopentyl sulfonyl esters)、新戊醋基磺酰醋前药或掩蔽的甲酸新戊醋基磺酰醋前药 特别地在 W02009033069、W02009033061、W02009033054、W02009052191、W02009033079、 US 2009/0099253、US 2009/0069419、US 2009/0082464、US 2009/0082440 和 US 2009/0076147 中列出。
[0072] 在一个实施方案中，本发明涉及选自西那卡塞、巴氯芬、阿坎酸、美西律、磺胺异噁 唑和托拉塞米的至少两种药物在制备用于在有所需要的受试者中改善记忆和/或记忆相 关的心理功能的药物中的用途。
[0073] 在一个具体实施方案中，本发明涉及包含选自西那卡塞、巴氯芬、阿坎酸、美西律、 磺胺异噁唑和托拉塞米的至少两种药物的组合物，其用于在有所需要的受试者中改善记忆 和相关心理功能。
[0074] 在另一个实施方案中，本发明涉及在有所需要的受试者中改善记忆和/或心理功 能的方法，所述方法包括给予所述受试者选自西那卡塞、巴氯芬、阿坎酸、美西律、磺胺异噁 唑和托拉塞米的至少两种药物。
[0075] 在优选的实施方案中，本发明涉及包含选自西那卡塞、巴氯芬、阿坎酸、美西律、磺 胺异噁唑和托拉塞米的至少两种药物的组合物用于在有所需要的受试者中增加记忆、学 习、注意力、推理、集中力、语言加工或警戒表现的用途。
[0076] 在另一个优选的实施方案中，本发明涉及包含选自西那卡塞、巴氯芬、阿坎酸、美 西律、磺胺异噁唑和托拉塞米的至少两种药物的组合物用于在有所需要的受试者中改善短 时和/或长时程记忆的用途。
[0077] 在另一个实施方案中，本发明涉及包含选自西那卡塞、巴氯芬、阿坎酸、美西律、磺 胺异噁唑和托拉塞米的至少两种药物的组合物，其用于在正在遭受或已经遭受如上定义的 认知缺陷病症或障碍的受试者中或在面临遭受其风险的受试者中改善记忆和心理功能。
[0078] 在一个具体实施方案中，本发明涉及一种组合物用于在有所需要的受试者中改 善记忆和心理功能的用途，所述组合物包含选自以下的至少一种药物组合：
[0079] -巴氯芬和阿坎酸，
[0080] -美西律和西那卡塞，
[0081] -巴氯芬和托拉塞米，或
[0082] -磺胺异噁唑和托拉塞米。
[0083] 在一个具体实施方案中，本发明涉及一种组合物用于在有所需要的受试者中改善 短时和/或长时程记忆的用途，所述组合物包含选自以下的至少一种药物组合：
[0084] -巴氯芬和阿坎酸，
[0085] -美西律和西那卡塞，
[0086] -巴氯芬和托拉塞米，或
[0087] -磺胺异噁唑和托拉塞米。
[0088] 在一个另外的实施方案中，本发明涉及一种组合物用于在有所需要的受试者中增 加记忆、学习、注意力、推理、集中力、语言加工或警戒表现的用途，所述组合物包含选自以 下的至少一种药物组合：
[0089] -巴氯芬和阿坎酸，
[0090] -美西律和西那卡塞，
[0091] -巴氯芬和托拉塞米，或
[0092] -磺胺异噁唑和托拉塞米。
[0093] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种组合物用于在患有导致甲状腺功能减退或 甲状腺功能亢进的甲状腺病症的受试者中预防或治疗记忆和/或心理功能受损的用途，所 述组合物包含选自以下的至少一种药物组合：
[0094] -巴氯芬和阿坎酸，
[0095] -美西律和西那卡塞，
[0096] -巴氯芬和托拉塞米，或
[0097] -磺胺异噁唑和托拉塞米。
[0098] 在另一个实施方案中，本发明涉及包含选自以下的至少一种药物组合的组合物：
[0099] -巴氯芬和阿坎酸，
[0100] -美西律和西那卡塞，
[0101] -巴氯芬和托拉塞米，或
[0102] -磺胺异噁唑和托拉塞米，
[0103] 其用于在正在遭受或已经遭受精神障碍的受试者中或在面临遭受其风险的受试 者中预防或治疗记忆和/或心理功能受损，所述精神障碍选自抑郁症、精神障碍（如自闭症 或精神分裂症）、注意力缺陷多动障碍、焦虑症或强迫症。
[0104] 在另一个实施方案中，本发明涉及包含选自以下的至少一种药物组合的组合物：
[0105] -巴氯芬和阿坎酸，
[0106] -美西律和西那卡塞，
[0107] -巴氯芬和托拉塞米，或
[0108] -磺胺异噁唑和托拉塞米，
[0109] 其用于在患有与智力低下相关的障碍的受试者中预防或治疗记忆和/或心理功 能受损，所述障碍选自：鲁宾斯坦-泰比综合征、格雷格综合征、阿佩尔综合征、安格尔曼综 合征、科-勒二氏综合征、雷特氏综合征、脆性X综合征或威廉氏综合征。
[0110] 在另一个实施方案中，本发明涉及包含选自以下的至少一种药物组合的组合物：
[0111] -巴氯芬和阿坎酸，
[0112] -美西律和西那卡塞，
[0113] -巴氯芬和托拉塞米，或
[0114] -磺胺异噁唑和托拉塞米，
[0115] 其用于在患有饮食或代谢缺陷、进行治疗或暴露于有毒物质的受试者中预防或治 疗记忆和/或心理功能受损。
[0116] 本发明还涉及包含选自以下的至少一种药物组合的组合物：
[0117] -巴氯芬和阿坎酸，
[0118] -美西律和西那卡塞，
[0119] -巴氯芬和托拉塞米，或
[0120] -磺胺异噁唑和托拉塞米，
[0121] 其用于在遭受病理性学习、语言、计算和/或阅读困难（例如，计算障碍，工整书写 困难或诵读困难）的受试者中预防或治疗记忆和/或心理功能受损。
[0122] 上述组合物可单独使用或可进一步与其他化合物组合。鉴于此，在一个具体实施 方案中，本发明的组合物可进一步包含选自以下的至少一种化合物：甲硫咪唑、丙胺卡因、 二羟丙茶碱、阿的平、甘珀酸、氨基己酸、卡麦角林、乙胺嗪、西那卡塞、桂利嗪、依普利酮、非 诺多泮、来氟米特、左西孟旦、舒洛地特、特比萘芬、唑尼沙胺、依托咪酯、苯乙双胍、曲美他 嗪、美西律、艾芬地尔、莫西沙星、溴隐亭或托拉塞米。每种这些化合物的示例性CAS编号以 非限制性方式示于下表2中：
[0123] 表 2
[0124]

[0125] 因此，本发明的组合物可包含2、3、4、5或多种活性化合物，其可以按照单一剂型、 分别或依次给予受试者（同时地给予），为的是赋予更大的作用。如在实验部分中所示，甚 至在注射本发明的组合物一小时以内也注意到了记忆和相关心理功能的改善。
[0126] 上述组合物也可进一步与已知或怀疑对受试者的记忆和/或记忆相关的心理功 能具有任何有益作用的其他化合物组合。这些其他化合物可以是改善的植物提取物（例如 银杏提取物），天然化合物（如维生素、脂肪酸、异黄酮），最初开发用于治疗认知障碍的药 物如西坦类药物（例如左乙拉西坦、吡拉西坦、普拉西坦、阿尼西坦，或奥拉西坦）或乙酰胆 碱酯酶抑制剂（例如多奈哌齐、利凡斯的明、加兰他敏）。
[0127] 本发明的组合物由此可包含已知或怀疑对记忆表现具有任何有益作用的1、2、3、 4、5或多种添加性成分、提取物或药物。如上所述，所述组合物的化合物可按照单一剂型、分 别或依次给予受试者（同时地给予），为的是赋予更大的作用。
[0128] 更优选地，一种所述其他化合物为西坦类药物，其选自左乙拉西坦、吡拉西坦、普 拉西坦、阿尼西坦或奥拉西坦。甚至更优选地所述西坦类药物选自左乙拉西坦或吡拉西坦。
[0129] 鉴于此，本发明的一个优选的实施方案为包含选自巴氯芬、阿坎酸、西那卡塞、美 西律、磺胺异噁唑或托拉塞米的至少两种药物的组合，并组合有至少左乙拉西坦或吡拉西 坦，用于在有所需要的受试者中改善记忆和心理功能。
[0130] 本发明的一个优选的实施方案更具体地涉及包含巴氯芬和阿坎酸的组合物，并组 合有选自左乙拉西坦或吡拉西坦的至少一种化合物。
[0131] 在另一个特别优选的实施方案中，所述其他化合物为乙酰胆碱酯酶抑制剂，其选 自多奈哌齐、利凡斯的明或加兰他敏。在乙酰胆碱酯酶抑制剂中，多奈哌齐是特别优选的。
[0132] 相应地，在优选的实施方案中，本发明涉及包含选自巴氯芬、阿坎酸、西那卡塞、美 西律、磺胺异噁唑或托拉塞米的至少两种化合物的组合物，并组合有多奈哌齐，用于在有所 需要的受试者中预防或治疗记忆和/或心理功能受损。
[0133] 每种这些化合物的示例性CAS编号以非限制性方式示于下表3中：
[0134] 表 3
[0135]
[0136] 记忆康复训练期是加强的记忆和/或认知训练，其目的在于使用完整的脑区域补 偿损伤的区域，从而抵消短时程记忆缺陷或重新组织记忆过程。所述治疗特别用于改善已 经经历脑损伤或脑手术的受试者的记忆和记忆相关的心理功能。鉴于此，在这些训练期间， 本发明的组合物是特别适于稳定和增强触发的突触突起（synaptic processes)的目的。因 此，在一个具体实施方案中，本发明由此涉及使用本发明的组合物增强所述记忆康复训练 期的功效。在一个更具体实施方案中，本发明的组合物在恰好所述训练期之前给予或在整 个康复期长期给予。
[0137] 在预防有毒物质或药物对记忆表现的潜在有害作用的具体实施方案中，在暴露于 所述一种或多种有毒物质或药物前至少2小时，优选24小时将本发明的组合物给予受试 者。在另一个实施方案中，在暴露于一种或多种有毒物质或药物时，按照定期的间隔一直持 续给予本发明的组合物，为的是维持所述组合物中活性化合物在受试者中的有效水平。
[0138] 作为受试者进行本发明的治疗所需要的功能，所述治疗可以在家中、医生的办公 室、诊所、医院的门诊部或医院提供，以便医生可以密切观察到治疗的效果并做出所需的任 何调整。
[0139] 治疗的持续时间也取决于受试者的需要，受试者的年龄和健康状况，以及受试者 如何响应于治疗。组合的各组分的剂量，给药频率和给药方式可以独立地控制。例如，一 种药物可以口服给药，而 第二种药物可以肌内给药。组合疗法可以按照开始-结束周期 (on-and-off cycle)提供，所述周期包括休息期，从而使得患者的身体有机会从任何尚未 预见的副作用恢复。药物也可以配制在一起，使得一次给药递送所有药物。
[0140] 组合中每种药物的给药可以是任何合适的方式，所述方式导致药物与其他组分组 合时的浓度能够改善受试者的记忆和相关心理功能表现。
[0141] 尽管组合中的药物可能像纯化学品一样来给药，但优选的是将它们以药物组合物 形式提供，所述药物组合物在上下文中也被称为药物制剂。可能的组合物包括适合于口服， 直肠，局部（包括透皮，口腔和舌下），或肠胃外（包括皮下，肌内，静脉内和皮内）给药的那 些组合物。
[0142] 更常见的是，这些药物制剂以"患者用品包（patient packs) "的形式被开处方给 受试者，所述患者用品包在单一包装中含有多个剂量单位或者用于给药计量的单位剂量的 其他方式，用于在不同的治疗期使用，所述单一包装通常为泡罩包装。"患者用品包"具有优 于传统处方的优点，其中药剂师从散装供应品（bulk supply)中划分患者的药品供应，由此 患者一直获得患者用品包中包含的包装说明书，这在传统处方中通常是缺失的。将包装说 明书包含在内已经显示改善了患者对医师指示的顺应性。由此，本发明还包括本申请如上 所述的药物制剂，并组合有适于所述药物制剂的包装材料。在这样的患者用品包中，用于组 合治疗的制剂的预期用途可通过说明书、装置（facilities)、规定（provisions)、适应性 修改（adaptations)和/或其他方式推断，用以帮助使用最适于治疗的制剂。这样的措施 使得患者用品包特别适合且适应于用本发明的组合进行治疗的用途。
[0143] 所述药物可按照任何合适的量包含在任何合适的载体物质中。药物的存在量按照 组合物的总重量计可高达99重量％。该组合物可以以剂量形式提供，其适于口服、肠胃外 (例如静脉内、肌内）、直肠、皮肤、鼻、阴道、吸入、皮肤（贴片）或眼部给药途径。由此，组 合物可以呈例如片剂、胶囊、丸剂、粉剂、颗粒剂、混悬剂、乳剂、溶液、包括水凝胶在内的凝 胶剂、糊剂、软膏、霜剂（cream)、膏药（plaster)、浸液（drenches)、渗透递送装置、栓剂、灌 肠剂、注射剂、植入物、喷雾剂或气雾剂的形式。
[0144] 药物组合物可根据常规药学实践配制（参见例如Remington:The Science and Practice of Pharmacy (20th ed. ), ed.A.R.Gennaro,Lippincott Williams &Wilkins, 2000 和 Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick and J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, New York)。
[0145] 可配制本发明的药物组合物，以便在给药时基本上立即释放活性药物或者在给药 后任何预定的时间或时间段释放活性药物。
[0146] 控制释放制剂包括（i)在延长的时间段在体内建立基本上恒定的药物浓度的制 剂；（ii)在预定的滞后时间在延长的时间段在体内建立基本上恒定的药物浓度的制剂； (iii)通过在体内维持相对恒定的、有效的药物水平，同时使得与活性药物的血浆水平的波 动相关的不期望的副作用最小化，从而在预定的时间段维持药物作用的制剂；（iv)通过例 如邻近或在患病组织或器官中的控制释放组合物的空间放置（placement)从而定位药物 作用的制剂；及（V)通过使用载体或化学衍生物以递送药物至特定的靶细胞类型，从而靶 向药物作用的制剂。
[0147] 呈控制释放制剂形式的药物的给药在以下情况中是特别优选的，在所述情况中述 药物具有（i)窄的治疗指数（即，导致有害副作用或毒性反应的血浆浓度和产生治疗效果 的血浆浓度之间的差别小；一般而言，治疗指数TI被定义为半数致死量（LD50)与半数有效 量（ED 50)的比率）；（ii)在胃肠道中窄的吸收窗；或（iii)非常短的生物半衰期，使得在 一天中需要频繁给药，以维持在治疗水平的血浆水平。
[0148] 可以进行众多策略中的任一种，为的是获得其中有关药物的释放速率超过代谢速 率的控制释放。控制释放可以通过适当选择各种制剂参数和成分（包括例如各种类型的控 制释放组合物和包衣）来获得。由此，所述药物用适当的赋形剂配制成药物组合物，所述药 物组合物在给药后，以受控的方式（单一或多个单位片剂或胶囊组合物、油溶液、混悬剂、 乳剂、微胶囊、微球、纳米颗粒、贴剂和脂质体）释放药物。
[0149] 用于口服的固体剂塑
[0150] 用于口服的制剂包括片剂，其含有与无毒性的药学上可接受的赋形剂混合的本发 明的组合物。这些赋形剂可以是，例如，惰性稀释剂或填充剂（例如蔗糖、微晶纤维素、包括 马铃薯淀粉在内的淀粉、碳酸钙、氯化钠、磷酸钙、硫酸钙，或磷酸钠）；制粒剂和崩解剂（例 如包括微晶纤维素在内的纤维素衍生物、包括马铃薯淀粉在内的淀粉、羧甲基纤维素钠、藻 酸盐或藻酸）；粘合剂（例如阿拉伯胶、藻酸、藻酸钠、明胶、淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、 羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二 醇）；和润滑剂、助流剂，和抗粘附剂（例如硬脂酸、二氧化硅，或滑石）。其他药学上可接受 的赋形剂可以是着色剂、调味剂、增塑剂、保湿剂、缓冲剂等。
[0151] 所述片剂可以是未包衣的或它们可通过已知技术包衣，任选地延长在胃肠道的崩 解和吸收，由此历时较长的时间段提供持续作用。所述包衣可以按照预定方式（例如，为 了获得控制释放制剂）适于释放活性药物物质，或者其可以适于直到通过胃之后才释放活 性药物物质（肠溶包衣）。所述包衣可以是糖衣，薄膜包衣（例如基于羟丙基甲基纤维素， 甲基纤维素，甲基羟乙基纤维素，羟丙基纤维素，羧甲基纤维素，丙烯酸酯共聚物，聚乙二醇 和/或聚乙烯吡咯烷酮），或肠溶包衣（例如基于甲基丙烯酸共聚物，乙酸邻苯二甲酸纤维 素，羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯，乙酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯，聚乙酸乙烯邻苯二 甲酸酯，虫胶，和/或乙基纤维素）。可以采用时间延迟材料，例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂 酸甘油酯。
[0152] 固体片剂组合物可包括包衣，所述包衣适于保护组合物免受不希望的化学 变化（例如释放活性药物物质之前的化学降解）。所述包衣可如Encyclopedia of Pharmaceutical Technology所述类似的方式施用在固体剂型上。
[0153] 药物可以在片剂中混合在一起，或者也可以分隔开。例如，第一药物包含在片剂内 部，且第二药物在外部，使得在释放第一药物之前第二药物的大部分就被释放。
[0154] 用于口服的制剂还可以呈现为咀嚼片剂，或呈现为硬明胶胶囊，其中活性成分与 惰性固体稀释剂（例如马铃薯淀粉，微晶纤维素，碳酸钙，磷酸钙或高岭土）混合，或呈现为 软明胶混合胶囊，其中活性成分与水性或油性介质，例如液体石蜡或橄榄油混合。粉剂和颗 粒剂可以按照常规方式使用在上文片剂和胶囊剂标题下提到的成分来制备。
[0155] 用于口服的控制释放组合物可以例如构建为通过控制活性药物物质的溶出和/ 或扩散来释放活性药物。
[0156] 溶出或扩散控制释放可以通过对药物的片剂、胶囊剂、丸剂或颗粒制剂进行适当 的包衣来实现，或通过将药物掺入到适合的基质中来实现。控制释放包衣可以包括一种 或多种上文提及的包衣物质，例如虫胶、蜂赌、糖赌（glycowax)、蓖麻赌（castor wax)、 巴西棕榈蜡、硬脂醇、单硬脂酸甘油酯、二硬脂酸甘油酯、棕榈酰硬脂酸甘油酯（glycerol palmitostearate)、乙基纤维素、丙烯酸树脂、dl-聚乳酸、乙酸丁酸纤维素、聚氯乙烯、聚乙 酸乙烯酯、乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯、聚甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸2-羟 基酯、甲基丙烯酸酯水凝胶、1，3-丁二醇、甲基丙烯酸羟乙酯和/或聚乙二醇。在控制释 放基质制剂中，基质材料还可包括，例如水合甲基纤维素、巴西棕榈蜡和硬脂醇、聚羧乙烯 934、硅酮、三硬脂酸甘油醋、丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸甲醋、聚氯乙烯、聚乙稀，和/或卤化 氟碳化合物（halogenated fluorocarbon) 〇
[0157] 含有要求保护的组合的一种或多种药物的控制释放组合物也可以呈漂浮片剂 (buoyant tablet)或漂浮胶囊（即，在口服给药后，在一定时间内漂浮在胃内容物的顶部 的片剂或胶囊）的形式。一种或多种药物的漂浮片剂制剂可以通过对一种或多种药物的混 合物与赋形剂和20-75% w/w的水胶体进行制粒来制备，所述水胶体如羟乙基纤维素，羟丙 基纤维素，或羟丙基甲基纤维素。所获得的颗粒然后可以被压缩成片剂。在与胃液接触后， 片剂在其表面周围形成基本上不透水的凝胶屏障。这种凝胶屏障参与维持小于1的密度， 从而允许片剂保持漂浮在胃液中。
[0158] 用于口服给药的液体
[0159] 适于通过添加水制备水性混悬液的粉剂、可分散粉剂或颗粒剂是用于口服给药的 便利的剂型。作为混悬剂的制剂提供了与分散剂或润湿剂、助悬剂和一种或多种防腐剂混 合的活性成分。合适的助悬剂是例如，羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，藻酸钠等等。
[0160] 肠胃外组合物
[0161] 虽然口服给药是特别优选的，所述药物组合物还可以考虑到患者的健康状况在肠 胃外给药。可能的是，按照含有常规的无毒性的药学上可接受的载体和辅料的剂型、制剂的 形式或经由合适的递送装置和植入物进行注射、输注或植入（静脉内、肌内、皮下等）。所述 制剂和所述组合物的制备是药物制剂领域中的技术人员熟知的。
[0162] 用于肠胃外使用的组合物可以以单位剂型来提供（例如在单剂量安瓿中），或在 含有几个剂量且可加入合适的防腐剂（见下文）的小瓶中提供。该组合物可以是溶液，混 悬液，乳液，输注装置或用于植入的递送装置的形式，或者它可以作为干粉的形式存在，在 使用前与水或另一种合适的媒介物重新配制（reconstituted)。除了一种或多种活性药物 外，所述组合物可以包括合适的肠胃外可接受的载体和/或赋形剂。所述一种或多种活性 药物可掺入到微球，微胶囊，纳米颗粒，脂质体等中，用于控制释放。所述组合物可以包括助 悬剂，增溶剂，稳定剂，pH调节剂，和/或分散剂。
[0163] 根据本发明的药物组合物可以呈适于无菌注射的形式。为了制备这样的组合物， 将一种或多种合适的活性药物溶解或悬浮在肠胃外可接受的液体媒介物中。可采用的可接 受的媒介物和溶剂包括水（通过加入适量的盐酸、氢氧化钠或适合的缓冲液调节至合适的 PH值的水），1，3-丁二醇，林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。水性制剂也可以含有一种或多种 防腐剂（例如对羟基苯甲酸甲醋，对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯）。在药物之 一略溶或微溶于水的情况下，可以添加溶解增强剂或增溶剂，或者该溶剂可以包括10-60% w/w的丙二醇等。
[0164] 控制释放肠胃外组合物可以是水性混悬剂，微球，微胶囊，磁性微球，油溶液，油性 混悬剂或乳液的形式。或者，一种或多种活性药物可以掺入到生物相容的载体，脂质体，纳 米颗粒，植入物或输注装置中。用于制备微球和/或微胶囊的材料为例如可生物降解的/ 可生物蚀解的聚合物如丙交醋乙交醋共聚物（polygalactin)，聚（氰基丙稀酸异丁醋），聚 (2-羟基乙基-L-谷氨酰胺）。配制控制释放肠胃外制剂时可以使用的生物相容性载体是 糖类（例如葡聚糖），蛋白质（例如白蛋白），脂蛋白或抗体。用于植入物的材料可以是不 可生物降解的（例如聚二甲基硅氧烷）或可生物降解的（例如聚（己内酯），聚（乙醇酸） 或聚（原酸酯））。
[0165] 供诜涂径
[0166] 虽然其他给药途径以及其他制剂是不太优选和不太方便的，但也可涵盖所述给药 途径和制剂。在口服给药化合物相对于受试者的整体健康状况是困难的情况下，也可以使 用它们。在这方面，就直肠应用而言，组合物的合适的剂型包括栓剂（乳液或混悬液类型） 和直肠明胶胶囊（溶液或混悬液）。在典型的栓剂制剂中，一种或多种活性药物与适当的药 学上可接受的栓剂基质如可可脂、酯化的脂肪酸、甘油明胶和各种水溶性或可分散性基质 如聚乙二醇等混合。可掺入各种添加剂、增强剂或表面活性剂。
[0167] 所述药物组合物还可以以含有常规无毒性的药学上可接受的载体和赋形剂的剂 型或制剂（包括微球和脂质体）局部给药于皮肤上用于经皮吸收。所述制剂包括霜剂，软 膏，洗剂，搽剂（Iiniments)，凝胶剂，水凝胶，溶液，混悬液，棒剂（stick)，喷雾剂，糊剂，膏 药和其他类型的经皮药物递送系统。所述药学上可接受的载体或赋形剂可以包括乳化剂， 抗氧化剂，缓冲剂，防腐剂，保湿剂，渗透增强剂，螯合剂，凝胶形成剂，软膏基质，香料和皮 肤保护剂。
[0168] 所述防腐剂，保湿剂，渗透增强剂可以是对羟基苯甲酸酯，如对羟基苯甲酸甲酯或 对羟基苯甲酸丙酯，以及苯扎氯铵，甘油，丙二醇，脲等。
[0169] 在针对待治疗的身体的一部分上或所述部分附近进行局部给药时，也可以使用用 于局部给药至皮肤上的上述药物组合物。所述组合物可适于直接应用或通过特殊药物递送 装置的方式应用，如敷料或膏药，垫，海绵，条，或其他形式的合适的柔性材料。
[0170] 剂量和治疗持续时间
[0171] 应该理解的是，组合的药物可以同时给药（无论是在相同或不同的药物制剂中） 或依次给药。如果为依次给药，在给药第二种（或附加）活性成分时的延迟不应该达到失 去活性成分的组合的有效效果的益处的程度。根据本说明书的组合的最低要求是，预期所 述组合用于组合使用，且具有活性成分的组合的有效效果的益处。组合的预期用途可通过 装置、规定、适应性修改和/或其他方式推断，以帮助使用本发明的组合。
[0172] 本发明的组合中药物的治疗有效量包括例如，有效增强学习和记忆表现或预防或 降低这些表现的量。
[0173] 尽管本发明的活性药物可以以分份剂量给药，例如每日两次或三次，组合中每种 药物的每日一剂量是优选的，其中在单一药物组合物（单位剂量形式）中所有药物的每日 一剂量是最优选的。
[0174] 给药可以是每天一至数次，持续数天至数年，甚至可能对患者终生给药。慢性或至 少周期性重复的给药在大多数情况下是指明的。
[0175] 术语"单位剂量形式"是指适合作为单一剂量用于人类受试者的物理上离散的单 位（如胶囊，片，或装药的注射器筒），每个单位含有经计算产生所需治疗效果的一种或多 种活性物质的预定量，以及结合有所需的药物载体。
[0176] 在优选的单位剂量组合物中每种药物的量取决于若干因素，包括给药方法、患者 的体重和年龄、受试者的需要、考虑到所述受试者的一般健康状况的潜在副作用的风险。此 外，关于具体受试者的药物基因组学（基因型对药代动力学，药效学或治疗的功效分布的 影响）的信息可能会影响使用的剂量。
[0177] 除了当响应于具体的状况之外，在可能需要较高的剂量时，所述组合中每种药物 的优选剂量将通常处于不超过通常针对长期维持治疗开处方的剂量或在3期临床研宄中 被证实是安全的剂量范围之内。
[0178] 本发明的一个显著的优点是，组合疗法中每种化合物可以按照低剂量使用，而在 组合时对受试者产生相当大的临床益处。在单独的化合物具有低的效果或不具有效果的剂 量下，所述组合疗法可能实际上是有效的。因此，本发明的一个具体的优点在于使用每种化 合物的亚适量剂量的能力，所述亚适量剂量即低于通常开处方的治疗剂量的剂量，优选1/2 的治疗剂量、更优选1/3、1/4、1/5,或甚至更优选地1/10的治疗剂量。在具体的实例中，使 用的剂量低至1/20、1/30、1/50、1/100或甚至更低的治疗剂量。
[0179] 在这样的亚治疗剂量下，化合物将不表现出副作用，而根据本发明的一种或多种 组合对于改善如上述所定义的记忆和相关心理功能是完全优有效的。
[0180] 优选的剂量对应于通常针对长期维持治疗开处方的剂量的1%至高达50%的量。
[0181] 最优选的剂量可对应于通常针对长期维持治疗开处方的剂量的〇. 1 %至高达 10%的量。
[0182] 用于本发明的药物剂量的具体实例（指的是实际上有活性的部分，不考虑所使用 的盐）提供在下面：
[0183] -阿坎酸：0. 1至500mg/天，优选少于250mg每天，更优选地少于IOOmg/天，甚至 更优选地少于IOmg/天，所述剂量特别适于口服给药。
[0184] -巴氯芬：0· 01至200mg每天，优选少于150mg每天，更优选地少于70mg/天，甚至 更优选地少于35mg/天，所述剂量特别适于口服给药。
[0185] -美西律：口服，约6至120mg每天，优选少于60mg每天，更优选地少于30mg每天， 所述剂量特别适于口服给药，
[0186] -托拉塞米：口月艮，约0. 05至4mg每天，优选少于2m g每天，更优选地少于Img每 天，所述剂量特别适于口服给药，
[0187] -磺胺异噁挫：口服，约20至800mg每天，优选少于400mg每天，更优选地少于 200mg每天，所述剂量特别适于口服给药，
[0188] -西那卡塞：口服，约0. 3至36mg每天，优选少于20mg每天，更优选地少于IOmg每 天，所述剂量特别适于口服给药。
[0189] -氨基己酸：口服，约0.1 g至2. 4g每天，
[0190] -溴隐亭：口服，约0· 01至IOmg每天，
[0191] -乙胺嘆：口月艮，约0· 6至600mg每天，
[0192] -卡麦角林：口服，约1至10 μ g每天，
[0193] -桂利嘆：口服，约0· 6至23mg每天，
[0194] -二轻丙茶碱：口服，约9至320mg每天，
[0195] -依普利酮：口服，约0· 25至IOmg每天，
[0196] -艾芬地尔：口服，约0.4至6mg每天，
[0197] -来氟米特：口服，约0· 1至IOmg每天，
[0198] -左西孟坦：口服，约0· 04至0· 8mg每天，
[0199] -莫西沙星：口服，约4至40mg每天，
[0200] -苯乙双胍：口服，约0· 25至15mg每天，
[0201] -阿的平：口服，约1至30mg每天，
[0202] -舒洛地希：口服，约0· 05至40mg每天，
[0203] -特比萘芬：口服，约2.5至25mg每天，
[0204] -曲美他嘆：口月艮，约0· 4至6mg每天，
[0205] -挫尼沙胺：口服，约0· 5至50mg每天。
[0206] 当所述组合物仅包含巴氯芬和阿坎酸作为活性成分时，这两种化合物可以不同 的比率使用，例如所包含的阿坎酸钙/巴氯芬重量比为〇. 05至1000 (w/w)，优选0. 05至 100 (w/w)，更优选地0. 05至50 (w/w)。优选的实施方案中，阿坎酸妈/巴氯芬比率为1/15。 在另一个实施方案中，阿坎酸钙/巴氯芬比率为4/3或甚至为8/3。
[0207] 在一个实施方案中，给予Img阿坎酸钙作为每日剂量。在另一个实施方案中，给予 40mg阿坎酸作为每日剂量。在其他实施方案中，所述每日剂量为80mg。
[0208] 应该理解的是，实际给药的药物量将由医师根据有关的情况决定，所述情况包括 待治疗的一种或多种病症，待给药的确切组合物，个体患者的年龄、体重和响应，患者的症 状的严重程度，以及所选择的给药途径。因此，上述剂量范围旨在对本申请的教导提供一般 性指导和支持，但并不意在限制本发明的范围。
[0209] 出于阐述的目的给出以下实施例，而不是进行限制。 实施例
[0210] 所有的动物操作按照现有的法律和规程进行（1987年10月19日的法令第87-848 号：1988年4月实施，将指南86/609/EC引入法国法律中，由第2001年5月29日的法令第 2001-464号和2001年6月20日的决定修正）。
[0211] I.在动物中的记忆改善
[0212] 在健康动物中，使用通常用于学习和记忆表现测量的不同试验评价短时和长时程 记忆。
[0213] A.在健康动物中的短时和长时程记忆增强。
[0214] 使用11月龄C57B1/6小鼠。它们被分组圈养（每个笼子5-10只小鼠）并保持 在具有受控的温度（21_22°C )和颠倒的亮-暗循环（12h/12h ;开灯：17:30-05:30 ;关灯： 05:30-17:30)的房间中，自由进食和进水。
[0215] 1)化合物的给药
[0216] 在恰好在每次强饲法或腹膜内给药之前将药物溶于水中新鲜配制，并保持搅拌。
[0217] 本发明的药物剂量示例于表4中。针对阿坎酸钙，所指明的剂量是指分子的盐的 剂量。
[0218] 表 4
[0219]
[0220] 多奈哌齐（即一种乙酰胆碱酯酶抑制剂）被用作内部阳性对照。它通常是在记忆 试验前30分钟腹膜内给药一次。
[0221] 化合物的长期给药，在试验前给药7天
[0222] 在第0天和第7天，将药物组合或媒介物溶液每日两次给药（上午8:00和下午 6:00)。一个动物组在早上8:00接受多奈哌齐（参照化合物0. 3mg/kg)，在下午6:00接受 媒介物。
[0223] 在第8天，在给药药物组合或媒介物溶液后2小时，测试所有动物在T型迷宫试验 中交替表现的百分比（％)。
[0224] 在试验前1天给药化合物
[0225] 在试验前夜，在早上8:00和下午6:00给药药物组合或媒介物溶液。一个动物组 在早上8:00接受多奈哌齐（参照化合物0. 3mg/kg)，在下午6:00接受媒介物。在试验当 天，在进行试验前2小时，将药物组合或媒介物给予动物。
[0226] 化合物的急性给药：在试验前2小时给药一次
[0227] 在试验当天，在进行试验前2小时，对动物给药一个剂量的药物组合、单独的药物 或媒介物。
[0228] 2)短时程记忆的改善：
[0229] 在T塑诛宮试骀中的夺替百分比
[0230] 自发性交替是在一系列连续运行的T型迷宫中啮齿动物改变自由选择的先天倾 向[32]。这种连续的过程依赖于短时程记忆。
[0231] 针对不同的治疗持续时间（在试验前7天、1天、2小时）评价给药组合对短时程 记忆的效果。
[0232] 实验在早上8:00和下午3:00之间在红色光条件下进行，因为小鼠被保持在颠倒 的亮暗周期（light cycle)中。在该试验中，尽可能减少动物处理和对操作者的可见性 (visibility)〇
[0233] T型迷宫装置由灰色的树脂玻璃（Plexiglas)制成，其具有主体（55cm长xlOcm宽 x20cm高）和位于相对于主体呈90°角的两个臂（30cm长xlOcm宽x20cm高）。通过滑动 门将起始盒（start box) (15cm长xlOcm宽）与主体分开。在强迫选择交替任务期间也提 供滑动门以关闭具体的臂[33]。
[0234] 实验规程由一个单一的时段组成，其开始于1个"强迫选择"试验，接着是14个 "自由选择"试验。在第一个"强迫选择"试验中，将动物在起始臂中限制5秒，然后将其释 放同时通过关闭滑动门来阻挡左终点臂（goal arm)或右终点臂。然后动物会探索打开的 臂并返回起始臂。此时，所述动物已经完成强迫选择试验。动物返回起始位置之后，立即打 开左或右终点门，允许动物在左终点臂和右终点臂之间自由选择（"自由选择"试验）。每 次动物选择终点臂时，关闭相对的臂以强迫动物返回起始臂。一旦动物返回起始臂，打开所 有的终点门以允许开始另一轮的自由选择试验。当动物将其四个爪置于臂中时，认为所述 动物进入了选择的臂。一旦进行了 14个自由选择试验或经过了 15分钟（无论哪个事件先 发生），则一个时段终止并从迷宫中移走动物。
[0235] 在每个动物之间用酒精（70° )清洗装置。将尿和粪便从迷宫中移除。
[0236] 结果
[0237] 自发性交替的百分比如下计算：将自发性交替的次数除以自由选择试验的次数。 一次交替被定义为历经连续的选择期间2个不同的臂的演替（succession)(例如次序 右-左-右代表2次交替）。
[0238] 在结果数据上进行了方差分析（ANOVA)。应用邓奈特氏检验（Dunnett' s test) 或斯氏检验（student' s test)确定差异的显著性。
[0239] 本发明的组合在所给药的动物中对于改善自发性交替是有效的（表5)。
[0240] 表 5
[0241]
[0242] +:改善；未改善。
[0243] 图1清楚地表明，在巴氯芬和阿坎酸组合的任意测试剂量（参见表4)下，本发明 的组合对于增强动物的记忆表现都是有效的。针对长期治疗观察到高达62%的学习和记忆 表现的显著增强，而针对进行急性治疗的小鼠观察到57%的学习和记忆表现的显著增强。
[0244] 此外，包含巴氯芬和阿坎酸的组合物在非常低剂量的混合剂量4和5对于改善小 鼠的学习和记忆表现是有效的，如图2所示。
[0245] 值得注意的是，本发明的组合非常快速地起作用，因为甚至在试验前2小时给药 一次且浓度低至剂量5 (阿坎酸妈0. 0128mg/kg，巴氯芬0. 192mg/kg，图2)时也观察到了记 忆表现的改善。
[0246] 令人惊讶的是，即使在非常低的剂量也观察到的药物之间重要的协同作用（图 2)，而在这些剂量在所述药物单独给药时，没有显示出对动物表现任何显著的正面作用。
[0247] 对水诛.宫中的位置的延迟ITIj配（Delay matching to place in the Water Maze) (苧间工作记忆）：
[0248] 应用相同的给药方案。测试所有动物的学习和空间短时程记忆。
[0249] 水迷宫是一个圆形池（直径140cm，高度40cm)。针对每个测试严格重现水的温 度即23±1°C、光照强度、房间外部线索（水槽、形成反差的海报（contrasted poster)、架 子），和水不透明度。透明树脂玻璃防滑平台（直径10cm)在采集过程中浸没在水面之下。 该试验测量动物的唤起（retrieve)和保留所了解到的信息的能力，其为平台的位置与池 外的基准（benchmark)的函数。
[0250] 使用 Videotrack 软件（Viewpoint, Champagne-au-Mont-d'Or, France)记录游泳， 其中轨迹被分析为潜伏期和间距。该软件将池子分成四个象限。
[0251] 通过每天改变平台位置并通过使用2分钟训练试验间间隔（training inter trial interval)具体地测定空间工作记忆。训练包括在3天期间每天游泳四次，试验间间 隔为2分钟。随机选择设置在象限之间的界限的起始位置，且每个动物被允许游泳90秒以 发现平台。一旦发现平台，在20秒内将所述动物留在所述平台上。计算历时3天的每次游 泳试验的中位潜伏期。它表示动物的学习和空间短时程记忆表现。
[0252] 对于用本发明的组合物治疗的动物的空间工作记忆的表现，注意到了正性结果。
[0253] 3)长时程记忆的改善：
[0254] a)在水诛宮的位詈学习（参照记忆，「331)
[0255] 动物饲养和给药方案如同上文详述的那样。水迷宫是一个圆形池（直径140cm，高 度40cm)。严格重现水的温度（23土1°C)、光照强度、房间外部线索（水槽、形成反差的海 报、架子），和水不透明度（使用碳酸钙的混悬液获得）。在池子的四方点（N，E，S，W)定义 四个出发位置（departure position)。透明树脂玻璃防滑平台（直径IOcm)在采集过程 中可浸没在水面之下。在所有参照记忆操作期间将所述平台置于NW象限的中心。训练包 括在5天期间每天游泳三次，试验间间隔为20分钟。将动物分批测试，每批10个个体（对 应于一个笼子）。每天随机选择起始位置，且每个动物被允许游泳90秒以发现平台。使用 秒表测量游泳持续时间。一旦发现平台，在20秒内将所述动物留在所述平台上。如果动物 在90秒内未到达平台，则将动物轻轻地放在平台上并将其在平台上保持20秒。针对整个 治疗组计算每个训练日的中位潜伏期并表示为平均值土S. E. M。
[0256] 为了确定动物的学习和长时程记忆表现，在末次游泳24小时后进行探针试验。移 除平台并允许每只动物自由游泳60秒。它们在头部进行了黑色无毒性的染料的斑点染色， 以便通过视频跟踪进行检测。使用Videotrack软件（Viewpoint, Champagne-au-Mont-d'Or ,France)记录游泳，其中轨迹被分析为潜伏期和间距。该软件根据起始位置将池子分成四 个象限。每只小鼠以平衡的次序从远离平台所在地的两个位置之一出发。确定在每个象限 中花费的时间。在采集期间在包含平台的象限中花费的时间是动物的长时程记忆表现的度 量。
[0257] 针对本发明的组合物观察到长时程记忆的改善（表6)。
[0258] 表 6
[0259]
[0260] + :时间增加；-：时间未增加
[0261] b)步入潜伏期试骑（step through latency)
[0262] 步入潜伏期试验是用于评估学习和记忆的恐惧加重试验。在该试验中，受试者学 习任何避免先前传递了厌恶刺激（如足部电击）的环境。在训练（学习）阶段24小时后 进行停留试验，所述停留试验是动物的长时程记忆表现的指标。
[0263] 该装置是具有两个隔室（15x20x15cm高）的盒子，一个具白色聚氯乙烯壁的隔室 被照亮，另一个用黑色聚氯乙稀壁和网格地板（grid floor)变暗。闸门（guillotine door) 将每个隔室分割开。在实验期间将60W的灯置于白色隔室上部装置灯上方40cm。使用电 击发生器扰频器（Lafayette Instruments, Lafayette, USA)向网格地板给予乱序的足部电 击（0. 3mA，共3秒）。在训练阶段闸门最初是关闭的。将每只小鼠置于白色隔室中。5秒 后，所述门升起。当大鼠进入黑暗隔室并将其所有爪子置于网格地板上之后，所述门关闭， 并给予足部电击3秒。记录步入潜伏期即进入黑暗隔室所花费的潜伏期和发声的次数。训 练24小时后进行停留试验。将每只大鼠再次置于白色隔室中。5秒后门升起，记录步入潜 伏期和逃脱潜伏期即返回白色隔室所花费的时间长达300秒。
[0264] 进入黑暗隔室的潜伏期解释为对动物的学习和记忆能力的度量。
[0265] c)结果
[0266] 针对巴氯芬和阿坎酸治疗的动物观察到正性结果，这表明本发明的组合物对于改 善长时程记忆是有效的。
[0267] B.在药物诱发的遗忘症期间的记忆改善
[0268] 药物诱发的遗忘症通过注射强力的遗忘药（amnestic drug)东莨菪碱至小鼠中引 起。这种药物诱发暂时遗忘症：在药物的活性窗期间记忆永久丧失或者至少大幅减少，但一 旦药物逐渐消失，记忆不再受到影响。
[0269] 基本上如上所述，以T型迷宫试验的交替百分比的形式、用4-5周龄的⑶-1小鼠 测试了本发明的组合物抵抗东莨菪碱诱发的遗忘症从而保护短时程记忆的能力。
[0270] 进行试验以评价所述组合在长期剂量（图3,每天两次，持续7天，以及在试验前2 小时）和较短期的预防性剂量（实验前一天给药两次，以及在试验前2小时；图4)对诱发 的遗忘症的保护效果。
[0271] 东莨菪碱在浓度为0. lmg/mL的盐水中制备，并且以lOml/kg的剂量体积腹膜内注 射。这得到lmg/kg的剂量。该剂量是指药物的盐（即东莨菪碱盐酸盐）形式的剂量，而不 是所述分子本身的剂量。
[0272] 在试验当天，在试验前2小时，将动物给予本发明的药物组合。在进行试验前30 分钟，给予动物东莨菪碱。
[0273] 结果
[0274] 如前所述计算自发性交替的百分比。结果报告于下表7和图3和4中。
[0275] 表 7
[0276]

[0277] + :改善；-:未改善。
[0278] 结果显示本发明的组合有效提高用东莨菪碱处置的动物的表现，无论是长期给药 (表7,图3)还是从诱发遗忘症前一天开始给药（表7,图4)。
[0279] 此外，对于巴氯芬-阿坎酸组合的所有测试的浓度，都注意到表现的改善。
[0280] II.在人类受试者中的记忆和认知试验
[0281] 本发明的组合物在健康人类受试者中有效改善记忆。目前通过临床试验评价巴氯 芬和阿坎酸组合在改善记忆或记忆相关的心理功能中的功效。该研宄按照欧洲药品管理局 (European Medicines Agency) ICH-E6 (Rl)指南的建议和与公共卫生法相关的法国法律第 2004-806号（2004年8月9日）进行。
[0282] A.健康受试者中的认知功能的测量
[0283] 该研宄对具有12位年龄在18至45岁的年轻健康男性志愿者的年龄组（"年轻 组"）进行。将年龄组随机化，以便有8位受试者服用活性药物和4位受试者服用安慰剂。
[0284] 给予了安慰剂的具有4位老年受试者的年龄组（"老年组"）用于验证实验设置。
[0285] 1)剂量方案
[0286] 治疗的持续时间为10天。作为组合疗法同时口服给予巴氯芬和阿坎酸。
[0287] 尽管与通常的治疗剂量相比本申请以低剂量测试，但是逐渐增加剂量的 (up-titration)剂量方案是期望的，以渐 进性增加每日递送的巴氯芬的剂量，由此对可能 的巴氯芬诱发的副作用（即使它们不可能有副作用）进行限制。
[0288] 作为剂量方案，每位受试者通过口服途径被给予以下治疗：
[0289] -第-1天：不给予药物或安慰剂
[0290] -第1天：6mg巴氯芬和0· 4mg阿坎酸，或安慰剂，在早上；
[0291] -第2天：6mg巴氯芬和0· 4mg阿坎酸，或安慰剂，每日两次（早、晚）；
[0292] -第3天：6mg巴氯芬和(X4mg阿坎酸，或安慰剂，在早上；以及12mg巴氯芬和 0. 8mg阿坎酸，或安慰剂，在晚上；
[0293] -第4天：12mg巴氯芬和0.8mg阿坎酸或，安慰剂，每日两次（早，晚）；
[0294] -第5天到第9天：15mg巴氯芬和Img阿坎酸，或安慰剂，每日两次（早，晚）；
[0295] -第10天：15mg巴氯芬和Img阿坎酸，或安慰剂，在早上。
[0296] 2)认知试验和电生理学测量
[0297] 下述的试验允许评价本发明的组合物对受试者的记忆的效果。在该试验自始至终 使用CogStatexi开发的四种认知试验以及认知事件相关性电位（ERP)的电生理学测量。这 些测试是在第-1天（不给予药物和安慰剂）、第1天（在给药6小时后）、第9天（给药 前）和第10天（在给药6小时后）进行。关于认知试验，结果表示为在研宄的基线和每个 时间点之间的表现的平均变化。这种试验可以容易地在个人计算机上进行。
[0298] a)警觉和视觉注意力表现的评价：鉴别试验
[0299] 屏幕上的前置任务（pre-task)指令询问："纸牌（card)是红色的吗？ "试验监督 者向受试者阅读来自试验监督者脚本的完整指令。开始任务时，试验监督者或受试者必须 按下"回车"键。纸牌被呈现在屏幕的中心。该纸牌将翻转过来，使之面朝上。一旦呈现纸 牌，受试者必须决定该纸牌是否为红色。如果是红色，他们应该按下"是"，如果它不是红色， 他们应该按下"否"。
[0300] 受试者进行练习直到他们达到所需数目的响应，或直到练习期满。然后，在屏幕上 呈现真正的试验的指令。试验监督者或受试者必须按下"回车"键以开始真正的试验。
[0301] 鼓励受试者尽量快速完成并且尽量精确。例如，受试者在纸牌翻转之前应该尝试 不去按下"是"或"否"键。如果他们犯错，他们将会听到错误提示音。确定正确响应的百 分比。
[0302] b)视觉学习和记忆：单张纸牌学习试验
[0303] 屏幕上的前置任务指令询问："在该任务之前你曾见过这张纸牌吗？ "试验监督者 向受试者阅读来自试验监督者脚本的完整指令。开始任务时，试验监督者或受试者必须按 下"回车"键。纸牌被呈现在屏幕的中心。一旦呈现纸牌，受试者必须决定在该任务之前是 否曾见过同一张纸牌。因此第一个答案总是"否"。
[0304] 每次显露出纸牌时，受试者必须决定在该任务之前他们是否被展示过那张纸牌并 通过按下"是"或"否"键来响应。如果做出了不正确的响应（例如当纸牌之前被呈现过时， 按下了"否"），则听到错误提示音。
[0305] 一旦完成了练习（达到所需次数的响应或者时间到了），屏幕上的指令和试验监 督者告诉受试者真正的试验现在开始。试验监督者或受试者必须按下"回车"键以开始真 正的试验。
[0306] 鼓励受试者尽量快速完成并且尽量精确。例如，在纸牌翻转之前他应该尝试不去 按下"是"或"否"键，并且他应该尝试并记住在该任务中呈现的所有的纸牌。如果他犯错， 他将会听到错误提示音（error sound) 〇
[0307] 确定正确响应的百分比。
[0308] c)心理运动功能和处理速度：察觉任务（DET)
[0309] 屏幕上的前置任务指令询问："纸牌翻转了吗？ "试验监督者向受试者阅读来自试 验监督者脚本的完整指令。开始任务时，试验监督者或受试者必须按下"回车"键。纸牌被 呈现在屏幕的中心。该纸牌将翻转过来，使之面朝上。一旦呈现纸牌，受试者必须按下"是" 键。纸牌将移动到这幅纸牌的后面，一旦下一张纸牌翻转过来，受试者必须按下"是"键，如 此反复。
[0310] 受试者进行练习直到他们达到所需数目的响应，或直到练习期满。然后，在屏幕上 呈现真正的试验的指令。试验监督者或受试者必须按下"回车"键以开始真正的试验。
[0311] 鼓励受试者尽量快速完成并且尽量精确。例如，受试者在纸牌翻转之前应该尝试 不去按下"是"键。如果受试者这样做了或者没有响应于翻转过来的纸牌，他将会听到错误 提不音。
[0312] 结果表示为表现速度的平均值（Lmn，正确响应的反应时间的LoglO的平均值）。
[0313] d)执行功能和空间问题解决：Groton迷宫学习任务（GMLT)
[0314] 在计算机触摸屏上对受试者展示10x10网格的瓦片。一个28步路径（28-step pathway)隐藏在这些100个可能位置中。起点指示为左上角的蓝色瓦片，终点位置是网格 的右下角的具有红色圆圈的瓦片。受试者被指示从开始位置向终点（右下角）移动一步， 然后继续，一次一个瓦片。
[0315] 受试者通过用输入笔（stylus)触摸邻近他们当前位置的瓦片来移动。每次做出 移动后，计算机通过显露出绿色的对勾来提示这是正确的（即这是在所述路径中的下一 步）或通过显露出红色的叉来提示这是不正确的（即这不是在所述路径中的下一步，或受 试者破坏了规则，见下文）。若选择是不正确的（即显露出红色的叉），则受试者必须触摸 上一次正确的位置（即上一次显露出的绿色对勾），然后做出不同的瓦片选择以便向终点 前进。
[0316] 当移动通过隐藏的迷宫时，要求受试者坚持两个规则。首先，受试者不能呈对角线 移动或连续两次触摸同一块瓦片。其次，受试者不能沿着路径向后移动（例如移动回到显 示了绿色对勾、并且他们曾移动到达的位置）。
[0317] 若受试者选择了不属于隐藏路径的一部分的瓦片，且瓦片选择符合规则，则这被 记录为不同类型的错误（例如不违反规则）。这可能是由于偶然（首次通过迷宫）或是由 于随后尝试的路径的错误记忆。
[0318] 受试者基于该尝试错误（trial and error)反馈学习通过迷宫的所述28步路径。 一旦完成，他们被送回起始位置并重复任务，通常再需4次来试着记忆他们刚完成的路径。
[0319] 就该任务而言存在20个良好匹配的交替形式，这些以伪随机次序选择，以确保在 整个研宄中没有受试者会在任何两个不同的试验阶段完成相同的隐藏路径。
[0320] 用于本研宄的、通过GMLT试验方式测量的标准为：
[0321] -表现的效率（efficiency of performance) :mps
[0322] -任务的持续（duration of task) :dur
[0323] -错误的总数：ter
[0324] 〇per (持续动作）
[0325] 〇rer (破坏规则的错误）
[0326] 〇 Ier (合乎规则的错误数（legal numbers of errors))
[0327] -正确移动的数目：cmv
[0328] -返回前面的错误：rth
[0329] 这4个认知试验中的数据（参见a、b、c、d)各自独立地分析或合并在一起在"复 合" Cogstate 平分中分析。
[0330] e)反映注意力的感知事件：事件相关电位（ERP)
[0331] ERP在评价认知过程时具有广泛的应用，这是因为结果独立于使用的刺激且因为 它们基于刺激处理提供信息，即使没有行动上的改变是可感知的。与行动认知试验相比时， 它们通常被视为更加无偏的试验。
[0332] 来自三个头皮部位（额：Fz，中央：Cz，头顶部：Pz)的记录数据根据国际10/20标 准收集起来作为参考，两个连接电极连接到右和左耳垂（A1-A2)。认知任务需要关注奇数刺 激，并根据特定规程对它们进行计数。
[0333] 受试者接受随机顺序的声刺激，且ERP测量由oddballs (具有N200和P300亚组 分潜伏期和振幅）发出的P300波，这反映了注意力。具有受损的认知的受试者对较低的振 幅表现出延迟的信号。
[0334] 将针对这三种部分的概括性数据的评分作为ERP "复合"评分给出。
[0335] 3)结果
[0336] a)验证研宄
[0337] 认知行为试验的实验设置通过比较未治疗的老年组和年轻组中获得的结果来检 验。注意到年轻组和老年组之间认知表现的明显差异，如图5中所示的DET试验中所阐明 的那样。年轻组与老年组相比显示了较高的知表现，这与一般的年龄相关的认知衰退一致。
[0338] b)本发明的组合有效改善健康年轻受试者的认知表现
[0339] 认知试骀中表现的改善
[0340] 已发现与未治疗的受试者相比，本发明的组合在经治疗的健康年轻人类受试者中 有效改善认知功能。巴氯芬-阿坎酸治疗的受试者显示了其认知表现的改善，如图6的DET 试验所示，这种改善在整个治疗过程中一直持续。
[0341] 记忆和记忆相关的心理功能的改善与药物的血浆浓度相关
[0342] 在临床试验的框架中建立了巴氯芬和阿坎酸的药效学。确定了"出现最大血浆浓 度的时间"(Tmax)，其出现在给药阿坎酸1. 5-2小时后以及给药巴氯芬1. 5小时后。由此可 以考虑所述组合的Tmax为每种药物同时给药1. 5-2小时后。
[0343] 在第10天，给予所述药物组合，并在给药6小时后进行Cogstate1<:试验。如图7中 所示，观察到阿坎酸的血浆浓度（给药5小时后）与年轻组中登记的复合Cogstate?评分的 水平之间的正性和显著相关（皮尔森相关性检验）（图7,相关系数=0. 706 ;p值=0. 003)。
[0344] 当考察记忆和相关心理功能的电生理学组分时也观察到所述相关。事实上，如图8 和9中报告的那样，在第10天观察到在给药1. 5小时后（大约对应于Tmax)巴氯芬和阿坎 酸的血浆浓度相对于ERP潜伏期复合评分（在给药6小时后测量）的特别显著的相关（皮 尔森相关性检验）：两种药物的血浆浓度都与ERP中较短的潜伏期正相关（阿坎酸，图9,相 关系数=0. 735 ;p值=0. 002 ;巴氯芬，图8,相关系数=0. 57 ;p值=0. 027)。表现最好的 受试者是在1. 5小时观察到更高血浆浓度的那些。
[0345] 这些相关强调了以下事实：在经治疗的健康年轻受试者中认知表现的改善实际上 与本发明的组合物有关。
[0346] 因此，上述结果显示巴氯芬和阿坎酸组合在改善健康年轻受试者的认知表现中的 功效。
[0347] B.在经受化学诱发的认知缺损的人中记忆和相关功能的改善
[0348] 东莨菪碱诱发的认知衰退是用于模拟暴露于若干物质时可能被诱发的认知缺陷 的模型。如上针对动物所述，当给予志愿者时该药物诱发短暂的和可逆的认知缺损[34]。
[0349] 使用A部分中说明的认知Groton迷宫学习任务试验对受试者的认知表现进行测 试。
[0350] 1)剂量方案
[0351] 年龄在20岁到45岁的20位年轻健康男性志愿者被招募到这项研宄中。
[0352] 进行随机化、2因素交叉的（2-way cross-over)、双盲、安慰剂对照的研宄。该研 宄有两个不同的部分，每个部分包括住院40小时且彼此间隔7天作为清除期（wash out period)。巴氯芬和阿坎酸同时口服使用。
[0353] 作为剂量方案，根据以下治疗通过口服途径对受试者进行给药：
[0354] -在第1天在亚急性给药中每位受试者口服接受巴氯芬（6mg)和阿坎酸（0. 4mg) 混合物，或安慰剂，一日两次，并且在试验当天（第2天）在H3在注射东莨菪碱前以单次剂 量给药。
[0355] -在第2天在H3,皮下注射0. 5mg东莨菪碱。
[0356] 2)试验设计
[0357] 对受损的认知的效果通过在GMLT试验中测量以下特征来探宄：
[0358] -表现的效率：mps
[0359] -错误的总数：ter
[0360] -任务的持续：dur
[0361] 认知Groton迷宫学习任务试验在第1天（训练）以及在第2天Η0、Η2· 5、Η4、Η5· 5、 Η7和Η9以及第3天Η24进行。
[0362] 3)巴氯芬和阿坎酸组合改善了东莨菪碱诱发的认知缺陷
[0363] 对于GMLT试验的mps、ter和dur组分中的每种，获得了类似的数据。将来自 Groton迷宫学习试验（GMLT)的数据在"复合"GMLT评分中合并在一起，其呈现于图10中。
[0364] 已知东莨菪碱在给药后最快30分钟就起作用，其作用持续约6小时。已知它的 Tmax为约3小时[34]。这些数据对应于在未治疗的受试者中观察到的GMLT试验中的表现 短暂衰退（图10,圆圈，虚线）。
[0365] 与给予安慰剂的受试者相比，观察到巴氯芬-阿坎酸治疗的受试者的认知表现的 改善。这种改善在对应于巴氯芬和阿坎酸的Tmax的时间段（约H5. 5附近）是特别显著的 (图10,灰色区域）。
[0366] 因此，巴氯芬和阿坎酸组合有效抵抗东莨菪碱诱发的认知缺损。
[0367] 本发明的组合由此有效逆转由于暴露于损害记忆的有毒物质或药物导致的记忆 缺损。
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【主权项】
1. 组合物在健康受试者中刺激认知功能的用途，所述组合物包含选自以下的至少两种 药物的组合：巴氯芬、阿坎酸、西那卡塞、美西律、磺胺异噁唑和托拉塞米，或它们中的一种 或多种盐、一种或多种前药、一种或多种衍生物或一种或多种持续释放制剂。2. 权利要求1的用途，其中所述认知功能选自记忆、学习、推理、警戒、注意力、集中力、 语言加工和/或应付社会职业负担的能力。3. 权利要求2的用途，其中所述记忆为短时程记忆和/或长时程记忆。4. 前述权利要求中任一项的用途，其中所述组合物包含选自以下的药物的组合： -巴氯芬和阿坎酸， -美西律和西那卡塞， -巴氯芬和托拉塞米，或 -磺胺异噁挫和托拉塞米。5. 前述权利要求中任一项的用途，其中所述组合物包含巴氯芬和阿坎酸的组合。6. 权利要求5的用途，其中所述组合物包含巴氯芬和阿坎酸作为仅有的活性剂。7. 前述权利要求中任一项的用途，其中所述组合物还包含药学上可接受的载体或赋形 剂。8. 前述权利要求中任一项的用途，其中在所述组合物中的药物一起、分开或依次配制 或给药。9. 前述权利要求中任一项的用途，其中将所述组合物重复给药于所述受试者。10. 权利要求1-9中任一项的用途，其中所述健康受试者需要记忆、学习或警戒表现的 短暂刺激。11. 权利要求1-9中任一项的用途，其中所述健康受试者显示出由激素变化或失调引 起的短暂记忆丧失，如在怀孕时、产后、在围绝经期或绝经期。12. 权利要求1或4-9中任一项的组合物，其用于在暴露于对记忆具有潜在的负面影响 的治疗或给药方案的受试者中或面临暴露于所述治疗或给药方案风险的受试者中治疗记 忆和/或记忆相关的心理功能受损，所述治疗或给药方案例如毒性试剂、药物戒断或饮食 缺陷。13. 权利要求1或4-9中任一项的组合物，其用于在正在遭受或已经遭受学习、语言、计 算和/或阅读困难例如，计算障碍，工整书写困难或诵读困难的受试者中或在面临遭受所 述困难的风险的受试者中治疗所述困难。14. 权利要求1或4-9中任一项的组合物，其用于正在遭受或已经遭受精神障碍、智力 低下或甲状腺功能减退的受试者中或在面临遭受精神障碍、智力低下或甲状腺功能减退的 风险的受试者中治疗记忆和/或记忆相关的心理功能受损。15. 用于权利要求14的用途的组合物，其中所述智力低下选自鲁宾斯坦-泰比综合征、 格雷格综合征、阿佩尔综合征、安格尔曼综合征、科-勒二氏综合征、雷特氏综合征、脆性X 综合征或威廉氏综合征。16. 用于权利要求14的用途的组合物，其中所述精神障碍选自抑郁症、精神障碍、注意 力缺陷多动障碍、焦虑症或强迫症。17. 用于权利要求12的用途的组合物，其中所述毒性试剂选自重金属、苯二氮,草类、巴 比妥类、抗惊厥剂、第一代抗组胺能药物、抗胆碱能药、他汀类药物和麻醉剂。18. 用于权利要求12-17中任一项的用途的组合物，其中记忆为短时程记忆和/或长时 程记忆。19. 用于权利要求12-17中任一项的用途的组合物，其中记忆相关的心理功能为学习、 推理、警戒、注意力、集中力、语言加工和/或应付社会职业负担的能力。
【专利摘要】本发明涉及用于改善记忆和相关功能如警戒、注意力、集中力、学习和语言加工的组合物和方法。更具体地，本发明涉及包含选自西那卡塞、巴氯芬、阿坎酸、美西律、磺胺异噁唑和托拉塞米中的至少两种药物的组合物，其用于在健康受试者中或罹患对记忆具有负面影响的病症或障碍的患者中增强记忆和相关功能。
【IPC分类】A61P43/00, A61P25/16, A61K31/635, A61P25/18, A61P39/02, A61K31/135, A61P25/24, A61K31/44, A61K31/195, A61K31/137, A61K31/185, A61P25/00, A61P25/36
【公开号】CN104884053
【申请号】CN201380052487
【发明人】D.科恩, S.纳比罗克金, I.查马科夫
【申请人】法奈克斯公司
【公开日】2015年9月2日
【申请日】2013年9月4日
【公告号】CA2883691A1, EP2705841A1, EP2892519A1, US20150224092, WO2014037412A1