一种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法及用图
一种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法及用图
【专利说明】-种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法及用途
[0001] 本申请为申请号为CN201210260628. 6的发明专利的分案申请。
技术领域
[0002] 本发明属于医药化工领域，涉及一种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法 及用途。
【背景技术】
[0003] 心脑血管疾病是当今我国和世界发达国家发病率最高的疾病，其致死致残率高居 各类疾病之首，而动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS)是心脑血管疾病的主要病理基础。 脂质代谢紊乱尤其是胆固醇代谢紊乱是公认的主要危险因子。据WHO预测，到2020年因 心血管疾病而引起死亡的人数将增加到约250万/年，其中大多直接与血脂异常有关。在 过去十多年间，在降低血浆低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C)的水平、减少与心血管疾病有关 的症状和降低重大心血管事件的风险中，他汀类药物都表现出重要作用。此类药物包括许 多重镑炸弹级产品，如辉瑞公司（Pfizer)的阿托伐他汀（atorvastatin，立普妥，Lipitor) 和默克公司（Merck)的辛伐他汀（simvastatin，舒降之，Zocor)。但他汀类药物也仅能 降低 20 % - 40 % 的心血管事件（Brugts JJ, Yetgin T, Hoeks SE, et al. The benefits of statins in people without established cardiovascular disease but with cardiovascular risk factors:meta-analysis of randomised controlled trials[J]. BMJ，2009, 338:b2376.)，所以，心血管疾病仍是危害人类健康的主要杀手。要进一步降低心 血管疾病的危害，在降低LDL-C的同时必须从预防和/或逆转AS的新的治疗靶点出发来寻 找具有新作用机制的药物。
[0004] 长期的临床研宄表明，高密度脂蛋白的胆固醇含量（HDL-C)与动脉粥样硬化的发 生发展呈反向相关。HDL的抗动脉粥样硬化作用除其具有的抗氧化、抗炎作用外，很重要的 一个原因是HDL是胆固醇逆转运（reverse cholesterol transfer, RCT)的主要携带者。 1996年Acton等发现肝细胞上的膜受体SR-BI可选择性摄取利用HDL-C中的胆固醇酯， 第一次确认B族I型清道夫受体（Scavenger receptor class B type I，SR-ΒΙ)是具有 功能的高密度脂蛋白受体（Acton SL, Rigotti A, Landschulz KT，et al. Identification of scavenger receptor SR-BI as a high density lipoprotein receptor[J]· Scien ce，1996, 271 (5248) :518-520.)。人类SR-BI (hSR-BI)是作为CD36膜蛋白超家族以及溶酶 体整合膜蛋白相关蛋白被独立发现的，所以又称为CLA-I (⑶36and UMPII Analogous-Ι)。 近年来，高密度脂蛋白在动脉粥样硬化中的作用已成为研宄热点，相关研宄逐步揭示HDL 受体介导的胆固醇逆转运机制使得外周组织中不便于调节和利用的的胆固醇可以转运 到肝脏进行处置代谢，进而可能使动脉粥样硬化脂质斑块的形成通过胆固醇的逆转运方 式得到缓解甚至逆转。近年来的研宄结果表明，SR-BI/CLA-1参与外周组织中胆固醇的 流出和肝脏中胆固醇的选择性摄取，在胆固醇逆转运的初始和终末步骤中都起着关键作 用，被认为是发现新型心血管药物的潜在祀标（Acton SL, Kozarsky KF, Rigotti A. The HDL receptor SR-BI: a new therapeutic target for atherosclerosis ? [J]. Mol Med Today, 1999, 5(12):518-524)。
【发明内容】
[0005] 本发明人经过深入的研宄和大量的实验，发现了一类异羟肟酸类衍生物，并且惊 奇地发现，这些化合物能够有效地调节CLA-I的活性和/或水平，具有作为防治心脑血管疾 病（例如动脉粥样硬化）药物的前景。由此提供了下述发明：
[0006] 本发明的一个方面涉及式II所示的化合物，或其可药用盐，
[0007]
[0008] 其中，
[0009] R'选自C6 - 12芳基、取代的C6 - 12芳基、C6 - 12芳氧基、和取代的C6 - 12 芳氧基，
[0010] m 为 1、2、或 3;
[0011] 所述的取代基选自卤素原子、Cl 一 6烷基、Cl 一 6烷氧基、氨基、和Cl 一 6烷基 氨基，并且所述取代基为一个或多个（即所述的取代各自独立地为被选自卤素原子、Cl 一 6 烷基、Cl 一 6烷氧基、氨基、和Cl 一 6烷基氨基中的任意一个或多个相同或不同的取代基 所取代）。
[0012] 根据本发明的任一项所述的化合物，或其可药用盐，其中，
[0013] R和R'分别独立地选自苯基、取代的苯基、苄基、取代的苄基、苯乙基、取代的苯乙 基、苯丙基、以及取代的苯丙基。
[0014] 根据本发明的任一项所述的化合物，或其可药用盐，其中，其中所述取代基在苯环 上的邻位、间位、或对位。
[0015] 根据本发明的任一项所述的化合物，或其可药用盐，其中，
[0016] 所述卤素为氟、氯、溴、或碘，所述Cl 一 6烷氧基为甲氧基或乙氧基，所述Cl 一 6 烷基氨基为二甲氨基或二乙氨基。
[0017] 根据本发明的任一项所述的化合物，或其可药用盐，其选自如下的表1所示化合 物，或其可药用盐：
[0018] 表1 :符合式II的部分具体化合物
[0019]
[0020]
[0021] 本发明的另一方面涉及上面任一项所述的化合物的制备方法，包括下述步骤：
[0022]
[0023] 其中，
[0024] a表示I-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC)，与产物相对应的胺 类化合物，CH2Cl 2;
[0025] b 表示 NH2OH · HCl，NaOH，MeOH ;
[0026] c表示NaHCO3，与产物相对应的胺类化合物，CH3CN ;R'、m分别如上面的任一项所 述。
[0027] 本领域人员能够理解，术语"与产物相对应的胺类化合物"或"相应的胺"是化学合 成中相关反应过程的通用和惯常描述，亦可见于本领域文献的报道；对该术语的理解，应结 合前后反应过程，即根据目的产物的不同，用于给合成的产物引入R-胺基或R'_胺基，其中 符号R或R'具有本发明上述的任一项的含义；"产物相对应的胺类化合物"或"相应的胺" 包括但不限于本发明的实施例中所描述的苯胺、3-氯苯胺、4-甲氧基苄胺，等等。
[0028] 另外，如文中所述"a表示1-(3-二甲氨基丙基）-3_乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC)， 与产物相对应的胺类化合物，CH 2Cl2"实际上表示反应加入了 EDC，与产物相对应的胺类化合 物和CH2Cl2。对于b和c也可做类似理解。
[0029] 本发明的再一方面涉及一种药物组合物，其包含本发明中任一项所述的化合物或 其可药用盐；可选地，还包括药学上可接受的载体或辅料。
[0030] 通常本发明的药物组合物含有0. 1 - 90重量％的式I或式II化合物和/或其药 学上可接受的盐。药物组合物可根据本领域已知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可 将式I或式II化合物和/或其药学上可接受的盐与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/ 或辅剂结合，制成可作为人用的适当的施用形式或剂量形式。
[0031] 本发明的式I或式II化合物和/或其药学上可接受的盐或者本发明的药物组合 物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘 膜、皮肤、腹膜或直肠等。给药剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬 剂、乳剂、颗粒剂、脂质体、透皮剂、口含片、栓剂、冻干粉针剂等。可以是普通制剂、缓释制 剂、控释制剂及各种微粒给药系统。为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域 公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、 甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合 剂，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、 明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，例如干 燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯、山梨糖醇脂肪 酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，例如蔗糖 、三硬脂酸甘油 酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，例如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，例如滑石粉、 二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包 衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。为了将给药单元制成 丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如 葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高岭土、滑石粉等；粘 合剂如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀 粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。为了将给药单元制成栓剂，可 以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如聚乙二醇、卵磷脂、可可脂、高 级醇、高级醇的酯、明胶、半合成甘油酯等。为了将给药单元制成胶囊，将有效成分式I化合 物或其立体异构体与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明明胶囊或软 胶囊中。也可将有效成分式I或式II化合物和/或其药学上可接受的盐或者本发明的药物 组合物制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。 为了将给药单元制成注射用制剂，如溶液剂、乳剂、冻干粉针剂和混悬剂，可以使用本领域 常用的所有稀释剂，例如，水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的 异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中 添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、PH调节剂等。
[0032] 此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或 其它材料。
[0033] 本发明的式I或式II化合物和/或其药学上可接受的盐或者本发明的药物组合 物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物 的性别、年龄、体重及个体反应，所用的具体化合物，给药途径及给药次数等。上述剂量可以 单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药。
[0034] 本文所用的术语"组合物"意指包括包含指定量的各指定成分的产品，以及直接或 间接从指定量的各指定成分的组合产生的任何产品。
[0035] 可改变本发明药物组合物中各活性成分的实际剂量水平，以便所得的活性化合物 量能有效针对具体患者、组合物和给药方式得到所需的治疗反应。剂量水平须根据具体化 合物的活性、给药途径、所治疗病况的严重程度以及待治疗患者的病况和既往病史来选定。 但是，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐 增加剂量，直到得到所需的效果。
[0036] 本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的化合物或其可药用盐在制备调节 CLA-I活性或CLA-I水平的药物或试剂或者调节血脂水平或总胆固醇水平的药物中的用 途。所述调节CLA-I活性包括上调CLA-I活性。所述调节CLA-I水平包括提高CLA-I水平。 所述调节血脂水平包括降低血脂水平。所述调节总胆固醇水平包括降低总胆固醇水平。
[0037] 本发明的再一方面涉及一种在体内或体外调节CLA-I活性或CLA-I水平的方法， 包括使用有效量的本发明中任一项所述的化合物或其可药用盐的步骤。
[0038] 本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的化合物或其可药用盐在制备治疗 和/或预防和/或辅助治疗心脑血管疾病、抗炎、体重控制（减轻体重、维持体重）或者抗 肿瘤的药物中的用途；具体地，所述心脑血管疾病选自动脉粥样硬化、高血脂症、高胆固醇 血症、急性心肌梗死、脑卒中以及冠心病。
[0039] 本发明的再一方面涉及一种治疗和/或预防和/或辅助治疗心脑血管疾病、抗炎、 体重控制（减轻体重、维持体重）或者抗肿瘤的方法，包括给予有效量的本发明中任一项所 述的化合物或其可药用盐的步骤。具体地，所述心脑血管疾病选自动脉粥样硬化、高血脂 症、高胆固醇血症、急性心肌梗死、脑卒中以及冠心病。
[0040] 当用于上述治疗和/或预防和/或辅助治疗时，治疗和/或预防有效量的一种本 发明的化合物或其可药用盐可以以纯形式应用，或者以药学可接受的酯或前药形式（在存 在这些形式的情况下）应用。或者，所述化合物可以以含有该目的化合物与一种或多种药 物可接受赋形剂的药物组合物给药。词语"预防和/或治疗有效量"的本发明化合物指以 适用于任何医学预防和/或治疗的合理效果/风险比治疗障碍的足够量的化合物。但应 认识到，本发明化合物和组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决 定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所 治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体化合物的活性；所采用的具体组合物；患 者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体化合物的给药时间、给药途径和 排泄率；治疗持续时间；与所采用的具体化合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域 公知的类似因素。例如，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求 的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。一般说来，本发明的化合物用于哺乳动 物特别是人的剂量可以介于0. 〇〇l-l〇〇〇mg/kg体重/天，例如介于0. 01-100mg/kg体重/ 天，例如介于〇. 〇l-l〇mg/kg体重/天。
[0041] 根据本发明的化合物可以有效地预防和/或治疗本发明所述的各种疾病或病症。
[0042] 在本发明中，术语"C1-6烷基"是指具有1-6个碳原子的直链或支链烷基，例如甲 基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、异戊基、新戊基、己基、2-己 基、3-己基、3-甲基戊基等。
[0043] 术语"C1-6烷氧基"，是指具有1-6个碳原子的直链或支链烷氧基，例如甲氧基、乙 氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、氧戊基、异氧戊基、新戊 氧基、己氧基、2-己氧基、3-氧己基、3-甲基戊氧基等。
[0044] 术语"C1-6烷基氨基"，是指C1-6烷基上任一碳位或多碳位上含有一个或多个氨 基。C1-4烷基氨基或C1-3烷基氨基也可做类似理解。
[0045] 术语"C6 - 12芳基"术语"C5-20芳基"的例子包括苯基、苄基、苯乙基、苯丙基， 等等。这些芳基可以被烷基（例如C1-6烷基）或烷氧基（例如C1-6烷氧基）或卤素原子 取代。取代基可以在苯环的邻位、间位、或对位。
[0046] 术语"C6 - 12芳氧基"的例子包括苄氧基等。这些芳氧基可以被一个或多个烷氧 基（例如C1-6烷氧基）或烷基（例如C1-6烷基）或卤素原子取代。取代基可以在苯环的 邻位、间位、或对位。
[0047] 发明的有益效果
[0048] 本发明的化合物能够有效地调节CLA-I的活性和/或水平，具有作为防治心脑血 管疾病（例如动脉粥样硬化）、抗炎、体重控制（减轻体重、维持体重）或者抗肿瘤药物的前 景。
【具体实施方式】
[0049] 下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会 理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体 条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为 可以通过市购获得的常规产品。
[0050] 实施例1 :N-羟基-4-{[(苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺（化合物1)的制 备
[0051] 1)溴乙酰苯胺的制备
[0052] 溴乙酸（2. 78g，20.0 mmol)溶于 CH2C12(20.0 ml)中，冷至-5 °C，力卩入已0(：· HCl (3. 84g，20.0 mmol)，然后滴加入苯胺（I. 86g，20.0 mmol)的 CH2Cl2 (10.0 ml)溶液，反应液 自然升至室温，搅拌过夜。
[0053] 反应液中加入lmol/L HCl (30ml)洗，5% Na2HC03 (30ml)洗，饱和食盐水洗。有机 相用无水硫酸钠干燥。浓缩得到粗产物，收率约60%。不必纯化，直接用于下步反应。
[0054] 2)4_[(苯甲酰甲胺基）_甲基]-苯甲酸甲酯的制备
[0055] 5-苯胺基甲酰-戊酸甲醋（I. 18g, 5. Ommol)溶于甲醇中（50mL)，加入盐酸轻胺 (I. 40g，20.0 mmol)降温至至0°C，滴加入8mol/L的NaOH(IOmL)溶液，室温搅拌1 - 2小时。
[0056] 0°C下向溶液中滴加入lmol/L HCl (50mL)调Ph = 7 - 8,溶液减压浓缩，过MCI GEL 20Y柱（水/甲醇）纯化，得到黄色固体
[0057] 溴乙酰苯胺（10.0 mmol)，4-(胺甲基）苯甲酸甲醋盐酸盐（2. 02g, 10.0 mmol)和碳 酸氢钾（I. 50g，15. Ommol)溶于乙腈（100mL)中，溶液回流搅拌3 - 4小时。
[0058] 减压浓缩，残余物加入水和乙酸乙酯分液，有机相 中加入HCl溶液（lmol/L)，析出 沉淀，过滤，固体用水洗，得到粗产物，收率约50 %。不必纯化，直接用于下步反应。
[0059] 3)N_羟基_4-{[(苯甲酰甲基）_胺基]甲基}苯甲酰胺的制备
[0060] 4_[(苯甲酰甲胺基）-甲基]-苯甲酸甲醋（149mg, 0. 5mmol)溶于甲醇中（5mL)， 加入盐酸轻胺（14〇11^，2.〇1111]1〇1)降温至至0<€，滴加入81]1〇1凡的似0!1(11]1]^)溶液，室温搅拌 1 一 2小时。
[0061] 0 °C下向溶液中滴加入lmol/L HCl (50mL)调Ph = 7 - 8,溶液减压浓缩，过 MCI GEL 20Y柱（水/甲醇）纯化，得到白色固体71. 3mg，收率：47.7% ;m.p. 124-126 °C · lHNMR(DMS0-d6, 400MHz，δ ppm) 3. 26 (2H，s，CHfO)，3. 77 (2H，s，NHCH2)，7. 01-7. 71 (9H ，m，Ar-H)，9· 80 (1H，s，⑶NH) · MS (ESI) m/z : 300 (M+H) +· HRMS (ESI) m/z : (M+H) +calcd. for C16H18N3O3j 334. 0953 ；found, 334. 0952〇
[0062] 实施例2 :化合物2 - 15的制备
[0063] 实施例2中分别制备了化合物2 - 15。化合物2 - 15的制备步骤与实施例1中 化合物1的制备步骤相同，除了所用原料有所区别。不同之处如下面的表2所示：
[0064] 表2 :化合物2 - 15的制备步骤与实施例10的区别
[0065]
[0066] 实施例3 :化合物I - 15的结构验证
[0067] 如下面的表3所示。
[0068] 表3 :化合物1 一 15的核磁共振数据
[0069]
[0070]
[0071]
[0072] 实施例4 :肝细胞!fepG2中CLA-I启动子活性上调实验
[0073] 1.试剂和材料
[0074] 试验样品：化合物1 - 15。
[0075] 阳性对照：SAHA和TSA (均购自Sigma公司）。
[0076] 所有测试的化合物都经过HPLC筛选，纯度大于95%，试验浓度均为10 μ g/mL。
[0077] CLAP-Luc !fepG2细胞为本实验室构建的含有CLA-I的启动子的荧光素酶报告基 因的HepG2细胞（构建方法可以采用本领域人员知悉的方法，例如可以参考刘晓辉，洪斌， 王丽非，杨媛，司书毅，李元；人高密度脂蛋白受体表达上调剂筛选模型的建立[J].中国医 学科学院学报，2004,26(4):354-358。）。
[0078] 2.实验方法和步骤
[0079] 检测化合物对CLA-I的启动子（CLA-lpromoter，CLAP)活性的影响。
[0080] 将CLAP-Luc H印G2细胞以5X IO4个/孔接种于96孔细胞培养板中，约6h待 细胞贴壁后，分别换为含浓度为10 μ g/ml化合物1-15的无血清培养液。另设含终浓度 0· 1% DMSO(溶剂）培养基的孔做空白对照。继续于37°C，5% CO2条件下培养18h后，通 过测定各化合物组处理细胞的荧光素酶表达活性，计算化合物对CLA-I启动子的平均上调 倍数。对上调倍数明显的化合物进行量效关系研宄，分析系列稀释的化合物浓度与启动子 活性（荧光素酶表达活性）之间的关系，计算EC50。具体操作步骤参考Luciferase Assay System(Promega)的说明书。
[0081] 3.实验结果如下面的表4所示。
[0082] 表4 :化合物1 - 15对CLA-I启动子活性的平均上调倍数
[0083]
[0084] 以上研宄结果表明，本发明的化合物效果与辛伐他汀组药效相似，能够有效地降 低血浆总胆固醇，具有抗动脉粥样硬化作用。
[0085] 最后需要指出的是，以上实施例仅用于帮助本领域技术人员理解本发明的实质， 不用作对本发明保护范围的限制。
【主权项】
1. 式II所示的化合物，或其可药用盐，其中， R'选自C6 _ 12芳基、取代的C 6 _ 12芳基、C 6 _ 12芳氧基、和取代的C 6_ 12芳氧基， m 为 1、2、或 3 ; 所述的取代各自独立地为被选自卤素原子、C1 _ 6烷基、C i _ 6烷氧基、氣基、和C i _ 6烷基 氨基中的任意一个或多个取代基所取代。2. 根据权利要求1所述的化合物，或其可药用盐，其中， R'分别独立地选自苯基、取代的苯基、苄基、取代的苄基、苯乙基、取代的苯乙基、苯丙 基、以及取代的苯丙基。3. 根据权利要求1或2任一所述的化合物，或其可药用盐，其中，其中所述取代基在苯 环上的邻位、间位、或对位。4. 根据权利要求1或2任一所述的化合物，或其可药用盐，其中， 所述卤素为氟、氯、溴、或碘，所述Cp6烷氧基为甲氧基或乙氧基，所述C P6烷基氨基 为二甲氨基或二乙氨基。5. 根据权利要求1或2所述的化合物，或其可药用盐，其选自如下的化合物： N-羟基-4-{[(苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(2-氯苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(3-氯苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(4-氯苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(2-甲氧基苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(3,4-二甲氧基苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(4-二甲胺基苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(4-甲氧基苯乙酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(苯丙酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(3,4-二甲氧基苯丙酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(2-氯苯甲酰甲基）-胺基]乙基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(4-氯苯甲酰甲基）-胺基]乙基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(4-甲氧基苯甲酰甲基）-胺基]乙基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(3,4-二甲氧基苯甲酰甲基）-胺基]乙基}苯甲酰胺，和 N-羟基-4-{[(4-甲氧基苯乙酰甲基）-胺基]乙基}苯甲酰胺； 或其可药用盐。6. 权利要求1至5中任一项所述的化合物的制备方法，包括下述步骤：其中， a表示1-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，与产物相对应的胺类化合物， CH2Cl2; b 表示 NH2OH · HCl，NaOH，MeOH ; c表示NaHCO3，与产物相对应的胺类化合物，CH3CN ; R'、m分别如权利要求1至5中任一项所述。7. -种药物组合物，其包含权利要求1至5中任一项所述的化合物或其可药用盐，优选 的，其还包括药学上可接受的载体或辅料。8. 权利要求1至5中任一项所述的化合物或其可药用盐在制备调节CLA-I活性或 CLA-I水平的药物或者调节血脂水平或总胆固醇水平的药物中的用途。9. 一种在体内或体外调节CLA-I活性或CLA-I水平的方法，包括使用有效量的权利要 求1至5中任一项所述的化合物或其可药用盐的步骤。10. 权利要求1至5中任一项所述的化合物或其可药用盐在制备治疗和/或预防和/ 或辅助治疗心脑血管疾病、抗炎、体重控制（减轻体重、维持体重）或者抗肿瘤的药物中的 用途；具体地，所述心脑血管疾病选自动脉粥样硬化、高血脂症、高胆固醇血症、急性心肌梗 死、脑卒中以及冠心病。
【专利摘要】本发明涉及一种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法及用途。本发明的化合物能够有效地调节CLA-1的活性和/或水平，具有作为防治心脑血管疾病(例如动脉粥样硬化)、抗炎、体重控制(减轻体重、维持体重)或者抗肿瘤药物的前景。所述化合物结构如下式所示：其中，R’选自C6－12芳基、取代的C6－12芳基、C6－12芳氧基、和取代的C6－12芳氧基，m为1、2、或3；所述的取代各自独立地为被选自卤素原子、C1－6烷基、C1－6烷氧基、氨基、和C1－6烷基氨基中的任意一个或多个取代基所取代。
【IPC分类】A61P9/10, A61P35/00, C07C259/10, A61P29/00, A61P3/06, A61K31/167, A61K31/166, A61P3/04, A61P9/00, A61P3/00, A61K31/165, C07C259/06
【公开号】CN104892457
【申请号】CN201510155995
【发明人】洪斌, 陈晓芳, 王丽, 杜郁, 贾晓健, 杨媛
【申请人】中国医学科学院医药生物技术研究所
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2012年7月25日
【公告号】CN102898332A, CN102898332B
【专利说明】-种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法及用途
[0001] 本申请为申请号为CN201210260628. 6的发明专利的分案申请。
技术领域
[0002] 本发明属于医药化工领域，涉及一种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法 及用途。
【背景技术】
[0003] 心脑血管疾病是当今我国和世界发达国家发病率最高的疾病，其致死致残率高居 各类疾病之首，而动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS)是心脑血管疾病的主要病理基础。 脂质代谢紊乱尤其是胆固醇代谢紊乱是公认的主要危险因子。据WHO预测，到2020年因 心血管疾病而引起死亡的人数将增加到约250万/年，其中大多直接与血脂异常有关。在 过去十多年间，在降低血浆低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C)的水平、减少与心血管疾病有关 的症状和降低重大心血管事件的风险中，他汀类药物都表现出重要作用。此类药物包括许 多重镑炸弹级产品，如辉瑞公司（Pfizer)的阿托伐他汀（atorvastatin，立普妥，Lipitor) 和默克公司（Merck)的辛伐他汀（simvastatin，舒降之，Zocor)。但他汀类药物也仅能 降低 20 % - 40 % 的心血管事件（Brugts JJ, Yetgin T, Hoeks SE, et al. The benefits of statins in people without established cardiovascular disease but with cardiovascular risk factors:meta-analysis of randomised controlled trials[J]. BMJ，2009, 338:b2376.)，所以，心血管疾病仍是危害人类健康的主要杀手。要进一步降低心 血管疾病的危害，在降低LDL-C的同时必须从预防和/或逆转AS的新的治疗靶点出发来寻 找具有新作用机制的药物。
[0004] 长期的临床研宄表明，高密度脂蛋白的胆固醇含量（HDL-C)与动脉粥样硬化的发 生发展呈反向相关。HDL的抗动脉粥样硬化作用除其具有的抗氧化、抗炎作用外，很重要的 一个原因是HDL是胆固醇逆转运（reverse cholesterol transfer, RCT)的主要携带者。 1996年Acton等发现肝细胞上的膜受体SR-BI可选择性摄取利用HDL-C中的胆固醇酯， 第一次确认B族I型清道夫受体（Scavenger receptor class B type I，SR-ΒΙ)是具有 功能的高密度脂蛋白受体（Acton SL, Rigotti A, Landschulz KT，et al. Identification of scavenger receptor SR-BI as a high density lipoprotein receptor[J]· Scien ce，1996, 271 (5248) :518-520.)。人类SR-BI (hSR-BI)是作为CD36膜蛋白超家族以及溶酶 体整合膜蛋白相关蛋白被独立发现的，所以又称为CLA-I (⑶36and UMPII Analogous-Ι)。 近年来，高密度脂蛋白在动脉粥样硬化中的作用已成为研宄热点，相关研宄逐步揭示HDL 受体介导的胆固醇逆转运机制使得外周组织中不便于调节和利用的的胆固醇可以转运 到肝脏进行处置代谢，进而可能使动脉粥样硬化脂质斑块的形成通过胆固醇的逆转运方 式得到缓解甚至逆转。近年来的研宄结果表明，SR-BI/CLA-1参与外周组织中胆固醇的 流出和肝脏中胆固醇的选择性摄取，在胆固醇逆转运的初始和终末步骤中都起着关键作 用，被认为是发现新型心血管药物的潜在祀标（Acton SL, Kozarsky KF, Rigotti A. The HDL receptor SR-BI: a new therapeutic target for atherosclerosis ? [J]. Mol Med Today, 1999, 5(12):518-524)。
【发明内容】
[0005] 本发明人经过深入的研宄和大量的实验，发现了一类异羟肟酸类衍生物，并且惊 奇地发现，这些化合物能够有效地调节CLA-I的活性和/或水平，具有作为防治心脑血管疾 病（例如动脉粥样硬化）药物的前景。由此提供了下述发明：
[0006] 本发明的一个方面涉及式II所示的化合物，或其可药用盐，
[0007]
[0008] 其中，
[0009] R'选自C6 - 12芳基、取代的C6 - 12芳基、C6 - 12芳氧基、和取代的C6 - 12 芳氧基，
[0010] m 为 1、2、或 3;
[0011] 所述的取代基选自卤素原子、Cl 一 6烷基、Cl 一 6烷氧基、氨基、和Cl 一 6烷基 氨基，并且所述取代基为一个或多个（即所述的取代各自独立地为被选自卤素原子、Cl 一 6 烷基、Cl 一 6烷氧基、氨基、和Cl 一 6烷基氨基中的任意一个或多个相同或不同的取代基 所取代）。
[0012] 根据本发明的任一项所述的化合物，或其可药用盐，其中，
[0013] R和R'分别独立地选自苯基、取代的苯基、苄基、取代的苄基、苯乙基、取代的苯乙 基、苯丙基、以及取代的苯丙基。
[0014] 根据本发明的任一项所述的化合物，或其可药用盐，其中，其中所述取代基在苯环 上的邻位、间位、或对位。
[0015] 根据本发明的任一项所述的化合物，或其可药用盐，其中，
[0016] 所述卤素为氟、氯、溴、或碘，所述Cl 一 6烷氧基为甲氧基或乙氧基，所述Cl 一 6 烷基氨基为二甲氨基或二乙氨基。
[0017] 根据本发明的任一项所述的化合物，或其可药用盐，其选自如下的表1所示化合 物，或其可药用盐：
[0018] 表1 :符合式II的部分具体化合物
[0019]
[0020]
[0021] 本发明的另一方面涉及上面任一项所述的化合物的制备方法，包括下述步骤：
[0022]
[0023] 其中，
[0024] a表示I-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC)，与产物相对应的胺 类化合物，CH2Cl 2;
[0025] b 表示 NH2OH · HCl，NaOH，MeOH ;
[0026] c表示NaHCO3，与产物相对应的胺类化合物，CH3CN ;R'、m分别如上面的任一项所 述。
[0027] 本领域人员能够理解，术语"与产物相对应的胺类化合物"或"相应的胺"是化学合 成中相关反应过程的通用和惯常描述，亦可见于本领域文献的报道；对该术语的理解，应结 合前后反应过程，即根据目的产物的不同，用于给合成的产物引入R-胺基或R'_胺基，其中 符号R或R'具有本发明上述的任一项的含义；"产物相对应的胺类化合物"或"相应的胺" 包括但不限于本发明的实施例中所描述的苯胺、3-氯苯胺、4-甲氧基苄胺，等等。
[0028] 另外，如文中所述"a表示1-(3-二甲氨基丙基）-3_乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC)， 与产物相对应的胺类化合物，CH 2Cl2"实际上表示反应加入了 EDC，与产物相对应的胺类化合 物和CH2Cl2。对于b和c也可做类似理解。
[0029] 本发明的再一方面涉及一种药物组合物，其包含本发明中任一项所述的化合物或 其可药用盐；可选地，还包括药学上可接受的载体或辅料。
[0030] 通常本发明的药物组合物含有0. 1 - 90重量％的式I或式II化合物和/或其药 学上可接受的盐。药物组合物可根据本领域已知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可 将式I或式II化合物和/或其药学上可接受的盐与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/ 或辅剂结合，制成可作为人用的适当的施用形式或剂量形式。
[0031] 本发明的式I或式II化合物和/或其药学上可接受的盐或者本发明的药物组合 物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘 膜、皮肤、腹膜或直肠等。给药剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬 剂、乳剂、颗粒剂、脂质体、透皮剂、口含片、栓剂、冻干粉针剂等。可以是普通制剂、缓释制 剂、控释制剂及各种微粒给药系统。为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域 公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、 甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合 剂，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、 明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，例如干 燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯、山梨糖醇脂肪 酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，例如蔗糖 、三硬脂酸甘油 酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，例如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，例如滑石粉、 二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包 衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。为了将给药单元制成 丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如 葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高岭土、滑石粉等；粘 合剂如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀 粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。为了将给药单元制成栓剂，可 以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如聚乙二醇、卵磷脂、可可脂、高 级醇、高级醇的酯、明胶、半合成甘油酯等。为了将给药单元制成胶囊，将有效成分式I化合 物或其立体异构体与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明明胶囊或软 胶囊中。也可将有效成分式I或式II化合物和/或其药学上可接受的盐或者本发明的药物 组合物制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。 为了将给药单元制成注射用制剂，如溶液剂、乳剂、冻干粉针剂和混悬剂，可以使用本领域 常用的所有稀释剂，例如，水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的 异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中 添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、PH调节剂等。
[0032] 此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或 其它材料。
[0033] 本发明的式I或式II化合物和/或其药学上可接受的盐或者本发明的药物组合 物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物 的性别、年龄、体重及个体反应，所用的具体化合物，给药途径及给药次数等。上述剂量可以 单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药。
[0034] 本文所用的术语"组合物"意指包括包含指定量的各指定成分的产品，以及直接或 间接从指定量的各指定成分的组合产生的任何产品。
[0035] 可改变本发明药物组合物中各活性成分的实际剂量水平，以便所得的活性化合物 量能有效针对具体患者、组合物和给药方式得到所需的治疗反应。剂量水平须根据具体化 合物的活性、给药途径、所治疗病况的严重程度以及待治疗患者的病况和既往病史来选定。 但是，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐 增加剂量，直到得到所需的效果。
[0036] 本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的化合物或其可药用盐在制备调节 CLA-I活性或CLA-I水平的药物或试剂或者调节血脂水平或总胆固醇水平的药物中的用 途。所述调节CLA-I活性包括上调CLA-I活性。所述调节CLA-I水平包括提高CLA-I水平。 所述调节血脂水平包括降低血脂水平。所述调节总胆固醇水平包括降低总胆固醇水平。
[0037] 本发明的再一方面涉及一种在体内或体外调节CLA-I活性或CLA-I水平的方法， 包括使用有效量的本发明中任一项所述的化合物或其可药用盐的步骤。
[0038] 本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的化合物或其可药用盐在制备治疗 和/或预防和/或辅助治疗心脑血管疾病、抗炎、体重控制（减轻体重、维持体重）或者抗 肿瘤的药物中的用途；具体地，所述心脑血管疾病选自动脉粥样硬化、高血脂症、高胆固醇 血症、急性心肌梗死、脑卒中以及冠心病。
[0039] 本发明的再一方面涉及一种治疗和/或预防和/或辅助治疗心脑血管疾病、抗炎、 体重控制（减轻体重、维持体重）或者抗肿瘤的方法，包括给予有效量的本发明中任一项所 述的化合物或其可药用盐的步骤。具体地，所述心脑血管疾病选自动脉粥样硬化、高血脂 症、高胆固醇血症、急性心肌梗死、脑卒中以及冠心病。
[0040] 当用于上述治疗和/或预防和/或辅助治疗时，治疗和/或预防有效量的一种本 发明的化合物或其可药用盐可以以纯形式应用，或者以药学可接受的酯或前药形式（在存 在这些形式的情况下）应用。或者，所述化合物可以以含有该目的化合物与一种或多种药 物可接受赋形剂的药物组合物给药。词语"预防和/或治疗有效量"的本发明化合物指以 适用于任何医学预防和/或治疗的合理效果/风险比治疗障碍的足够量的化合物。但应 认识到，本发明化合物和组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决 定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所 治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体化合物的活性；所采用的具体组合物；患 者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体化合物的给药时间、给药途径和 排泄率；治疗持续时间；与所采用的具体化合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域 公知的类似因素。例如，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求 的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。一般说来，本发明的化合物用于哺乳动 物特别是人的剂量可以介于0. 〇〇l-l〇〇〇mg/kg体重/天，例如介于0. 01-100mg/kg体重/ 天，例如介于〇. 〇l-l〇mg/kg体重/天。
[0041] 根据本发明的化合物可以有效地预防和/或治疗本发明所述的各种疾病或病症。
[0042] 在本发明中，术语"C1-6烷基"是指具有1-6个碳原子的直链或支链烷基，例如甲 基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、异戊基、新戊基、己基、2-己 基、3-己基、3-甲基戊基等。
[0043] 术语"C1-6烷氧基"，是指具有1-6个碳原子的直链或支链烷氧基，例如甲氧基、乙 氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、氧戊基、异氧戊基、新戊 氧基、己氧基、2-己氧基、3-氧己基、3-甲基戊氧基等。
[0044] 术语"C1-6烷基氨基"，是指C1-6烷基上任一碳位或多碳位上含有一个或多个氨 基。C1-4烷基氨基或C1-3烷基氨基也可做类似理解。
[0045] 术语"C6 - 12芳基"术语"C5-20芳基"的例子包括苯基、苄基、苯乙基、苯丙基， 等等。这些芳基可以被烷基（例如C1-6烷基）或烷氧基（例如C1-6烷氧基）或卤素原子 取代。取代基可以在苯环的邻位、间位、或对位。
[0046] 术语"C6 - 12芳氧基"的例子包括苄氧基等。这些芳氧基可以被一个或多个烷氧 基（例如C1-6烷氧基）或烷基（例如C1-6烷基）或卤素原子取代。取代基可以在苯环的 邻位、间位、或对位。
[0047] 发明的有益效果
[0048] 本发明的化合物能够有效地调节CLA-I的活性和/或水平，具有作为防治心脑血 管疾病（例如动脉粥样硬化）、抗炎、体重控制（减轻体重、维持体重）或者抗肿瘤药物的前 景。
【具体实施方式】
[0049] 下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会 理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体 条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为 可以通过市购获得的常规产品。
[0050] 实施例1 :N-羟基-4-{[(苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺（化合物1)的制 备
[0051] 1)溴乙酰苯胺的制备
[0052] 溴乙酸（2. 78g，20.0 mmol)溶于 CH2C12(20.0 ml)中，冷至-5 °C，力卩入已0(：· HCl (3. 84g，20.0 mmol)，然后滴加入苯胺（I. 86g，20.0 mmol)的 CH2Cl2 (10.0 ml)溶液，反应液 自然升至室温，搅拌过夜。
[0053] 反应液中加入lmol/L HCl (30ml)洗，5% Na2HC03 (30ml)洗，饱和食盐水洗。有机 相用无水硫酸钠干燥。浓缩得到粗产物，收率约60%。不必纯化，直接用于下步反应。
[0054] 2)4_[(苯甲酰甲胺基）_甲基]-苯甲酸甲酯的制备
[0055] 5-苯胺基甲酰-戊酸甲醋（I. 18g, 5. Ommol)溶于甲醇中（50mL)，加入盐酸轻胺 (I. 40g，20.0 mmol)降温至至0°C，滴加入8mol/L的NaOH(IOmL)溶液，室温搅拌1 - 2小时。
[0056] 0°C下向溶液中滴加入lmol/L HCl (50mL)调Ph = 7 - 8,溶液减压浓缩，过MCI GEL 20Y柱（水/甲醇）纯化，得到黄色固体
[0057] 溴乙酰苯胺（10.0 mmol)，4-(胺甲基）苯甲酸甲醋盐酸盐（2. 02g, 10.0 mmol)和碳 酸氢钾（I. 50g，15. Ommol)溶于乙腈（100mL)中，溶液回流搅拌3 - 4小时。
[0058] 减压浓缩，残余物加入水和乙酸乙酯分液，有机相 中加入HCl溶液（lmol/L)，析出 沉淀，过滤，固体用水洗，得到粗产物，收率约50 %。不必纯化，直接用于下步反应。
[0059] 3)N_羟基_4-{[(苯甲酰甲基）_胺基]甲基}苯甲酰胺的制备
[0060] 4_[(苯甲酰甲胺基）-甲基]-苯甲酸甲醋（149mg, 0. 5mmol)溶于甲醇中（5mL)， 加入盐酸轻胺（14〇11^，2.〇1111]1〇1)降温至至0<€，滴加入81]1〇1凡的似0!1(11]1]^)溶液，室温搅拌 1 一 2小时。
[0061] 0 °C下向溶液中滴加入lmol/L HCl (50mL)调Ph = 7 - 8,溶液减压浓缩，过 MCI GEL 20Y柱（水/甲醇）纯化，得到白色固体71. 3mg，收率：47.7% ;m.p. 124-126 °C · lHNMR(DMS0-d6, 400MHz，δ ppm) 3. 26 (2H，s，CHfO)，3. 77 (2H，s，NHCH2)，7. 01-7. 71 (9H ，m，Ar-H)，9· 80 (1H，s，⑶NH) · MS (ESI) m/z : 300 (M+H) +· HRMS (ESI) m/z : (M+H) +calcd. for C16H18N3O3j 334. 0953 ；found, 334. 0952〇
[0062] 实施例2 :化合物2 - 15的制备
[0063] 实施例2中分别制备了化合物2 - 15。化合物2 - 15的制备步骤与实施例1中 化合物1的制备步骤相同，除了所用原料有所区别。不同之处如下面的表2所示：
[0064] 表2 :化合物2 - 15的制备步骤与实施例10的区别
[0065]
[0066] 实施例3 :化合物I - 15的结构验证
[0067] 如下面的表3所示。
[0068] 表3 :化合物1 一 15的核磁共振数据
[0069]
[0070]
[0071]
[0072] 实施例4 :肝细胞!fepG2中CLA-I启动子活性上调实验
[0073] 1.试剂和材料
[0074] 试验样品：化合物1 - 15。
[0075] 阳性对照：SAHA和TSA (均购自Sigma公司）。
[0076] 所有测试的化合物都经过HPLC筛选，纯度大于95%，试验浓度均为10 μ g/mL。
[0077] CLAP-Luc !fepG2细胞为本实验室构建的含有CLA-I的启动子的荧光素酶报告基 因的HepG2细胞（构建方法可以采用本领域人员知悉的方法，例如可以参考刘晓辉，洪斌， 王丽非，杨媛，司书毅，李元；人高密度脂蛋白受体表达上调剂筛选模型的建立[J].中国医 学科学院学报，2004,26(4):354-358。）。
[0078] 2.实验方法和步骤
[0079] 检测化合物对CLA-I的启动子（CLA-lpromoter，CLAP)活性的影响。
[0080] 将CLAP-Luc H印G2细胞以5X IO4个/孔接种于96孔细胞培养板中，约6h待 细胞贴壁后，分别换为含浓度为10 μ g/ml化合物1-15的无血清培养液。另设含终浓度 0· 1% DMSO(溶剂）培养基的孔做空白对照。继续于37°C，5% CO2条件下培养18h后，通 过测定各化合物组处理细胞的荧光素酶表达活性，计算化合物对CLA-I启动子的平均上调 倍数。对上调倍数明显的化合物进行量效关系研宄，分析系列稀释的化合物浓度与启动子 活性（荧光素酶表达活性）之间的关系，计算EC50。具体操作步骤参考Luciferase Assay System(Promega)的说明书。
[0081] 3.实验结果如下面的表4所示。
[0082] 表4 :化合物1 - 15对CLA-I启动子活性的平均上调倍数
[0083]
[0084] 以上研宄结果表明，本发明的化合物效果与辛伐他汀组药效相似，能够有效地降 低血浆总胆固醇，具有抗动脉粥样硬化作用。
[0085] 最后需要指出的是，以上实施例仅用于帮助本领域技术人员理解本发明的实质， 不用作对本发明保护范围的限制。
【主权项】
1. 式II所示的化合物，或其可药用盐，其中， R'选自C6 _ 12芳基、取代的C 6 _ 12芳基、C 6 _ 12芳氧基、和取代的C 6_ 12芳氧基， m 为 1、2、或 3 ; 所述的取代各自独立地为被选自卤素原子、C1 _ 6烷基、C i _ 6烷氧基、氣基、和C i _ 6烷基 氨基中的任意一个或多个取代基所取代。2. 根据权利要求1所述的化合物，或其可药用盐，其中， R'分别独立地选自苯基、取代的苯基、苄基、取代的苄基、苯乙基、取代的苯乙基、苯丙 基、以及取代的苯丙基。3. 根据权利要求1或2任一所述的化合物，或其可药用盐，其中，其中所述取代基在苯 环上的邻位、间位、或对位。4. 根据权利要求1或2任一所述的化合物，或其可药用盐，其中， 所述卤素为氟、氯、溴、或碘，所述Cp6烷氧基为甲氧基或乙氧基，所述C P6烷基氨基 为二甲氨基或二乙氨基。5. 根据权利要求1或2所述的化合物，或其可药用盐，其选自如下的化合物： N-羟基-4-{[(苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(2-氯苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(3-氯苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(4-氯苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(2-甲氧基苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(3,4-二甲氧基苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(4-二甲胺基苯甲酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(4-甲氧基苯乙酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(苯丙酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(3,4-二甲氧基苯丙酰甲基）-胺基]甲基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(2-氯苯甲酰甲基）-胺基]乙基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(4-氯苯甲酰甲基）-胺基]乙基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(4-甲氧基苯甲酰甲基）-胺基]乙基}苯甲酰胺， N-羟基-4-{[(3,4-二甲氧基苯甲酰甲基）-胺基]乙基}苯甲酰胺，和 N-羟基-4-{[(4-甲氧基苯乙酰甲基）-胺基]乙基}苯甲酰胺； 或其可药用盐。6. 权利要求1至5中任一项所述的化合物的制备方法，包括下述步骤：其中， a表示1-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，与产物相对应的胺类化合物， CH2Cl2; b 表示 NH2OH · HCl，NaOH，MeOH ; c表示NaHCO3，与产物相对应的胺类化合物，CH3CN ; R'、m分别如权利要求1至5中任一项所述。7. -种药物组合物，其包含权利要求1至5中任一项所述的化合物或其可药用盐，优选 的，其还包括药学上可接受的载体或辅料。8. 权利要求1至5中任一项所述的化合物或其可药用盐在制备调节CLA-I活性或 CLA-I水平的药物或者调节血脂水平或总胆固醇水平的药物中的用途。9. 一种在体内或体外调节CLA-I活性或CLA-I水平的方法，包括使用有效量的权利要 求1至5中任一项所述的化合物或其可药用盐的步骤。10. 权利要求1至5中任一项所述的化合物或其可药用盐在制备治疗和/或预防和/ 或辅助治疗心脑血管疾病、抗炎、体重控制（减轻体重、维持体重）或者抗肿瘤的药物中的 用途；具体地，所述心脑血管疾病选自动脉粥样硬化、高血脂症、高胆固醇血症、急性心肌梗 死、脑卒中以及冠心病。
【专利摘要】本发明涉及一种异羟肟酸类衍生物、其药物组合物、制备方法及用途。本发明的化合物能够有效地调节CLA-1的活性和/或水平，具有作为防治心脑血管疾病(例如动脉粥样硬化)、抗炎、体重控制(减轻体重、维持体重)或者抗肿瘤药物的前景。所述化合物结构如下式所示：其中，R’选自C6－12芳基、取代的C6－12芳基、C6－12芳氧基、和取代的C6－12芳氧基，m为1、2、或3；所述的取代各自独立地为被选自卤素原子、C1－6烷基、C1－6烷氧基、氨基、和C1－6烷基氨基中的任意一个或多个取代基所取代。
【IPC分类】A61P9/10, A61P35/00, C07C259/10, A61P29/00, A61P3/06, A61K31/167, A61K31/166, A61P3/04, A61P9/00, A61P3/00, A61K31/165, C07C259/06
【公开号】CN104892457
【申请号】CN201510155995
【发明人】洪斌, 陈晓芳, 王丽, 杜郁, 贾晓健, 杨媛
【申请人】中国医学科学院医药生物技术研究所
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2012年7月25日
【公告号】CN102898332A, CN102898332B
最新回复(0)