酰肼类化合物、其制备方法及用图
酰肼类化合物、其制备方法及用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及II型糖尿病的治疗的药物领域。更具体地讲，本发明涉及对II型糖 尿病有治疗作用的一类含酰肼结构的GPR119激动剂、其制备方法以及在制药上的用途。
【背景技术】
[0002] 糖尿病日益严重地威胁着人类的健康。在当今美国，大约有1600万人正在忍受着 糖尿病带来的痛苦。一型糖尿病也被称为胰岛素依赖型糖尿病，属于自身免疫性疾病。它 是由于能产生胰岛素的胰腺胰岛β细胞被自身免疫系统破坏而引起的，目前世界上对此 病并没有治愈方法，因此患者必须接受胰岛素注射治疗。倘若不注射胰岛素，细胞将无法吸 收葡萄糖获取能量。一型糖尿病的相关症状通常出现于儿童期及青少年期。由于病程通常 较急，病症明显，会促使患者主动寻求医疗手段的帮助。二型糖尿病也被称为非胰岛素依赖 型糖尿病，表现为患者缺乏足够的能力控制自身血糖水平。二型糖尿病其是由胰岛素分泌 不足或者胰岛素抵抗（指身体组织不能恰当地对体内分泌的胰岛素作出响应）引起的，也 就是说二型糖尿病患者要么是自身分泌的胰岛素不够多，要么是不能有效地使用自身分泌 的胰岛素。很多因素都可以导致胰岛素抵抗的出现和发展，包括遗传、肥胖、高龄和长期高 血糖等。尽管二型糖尿病可能出现在各个年龄段，但普遍发生在成年人身上，所以有时它也 被叫做成年型糖尿病。然而值得注意的是，近年来二型糖尿病的发病率在儿童群体中攀升。
[0003] 在糖尿病患者身上，血液和尿液里葡萄糖的含量升高，导致多尿、口渴、饥饿，以及 脂肪和蛋白质代谢等一系列问题。如果不加以诊治，糖尿病会引起失明、坏疽，乃至肾衰竭 和心脏病等各种危及生命的并发症。
[0004] 二型糖尿病患者大约占糖尿病患者总数的90% -95%。在当今西方社会，约有6% 的成年人患有二型糖尿病，在美国每年导致193, 000人的死亡，在所有死亡原因中居第七 位。在世界范围内，超过1. 5亿人受到II型糖尿病的困扰，而这一数字预计在2025年翻番。 尽管某些人是因为遗传的因素而易患糖尿病，目前病例的攀升主要是由久坐的生活方式、 高热量饮食，以及发达国家中普遍的肥胖所导致。大概80%的二型糖尿病患者是显著超重 的。现在患上此病的年轻人正日益增多。目前二型糖尿病在国际上已经被公认为在21世 纪对人类健康的重大威胁之一。
[0005] 目前，人们对二型糖尿病有程度不同的治疗方案。最基本的方案是饮食和锻炼的 结合，在此基础上也可以配合药物治疗。目前治疗糖尿病的所用的药物，除了胰岛素外，具 体来说还有以下几种：胰岛素促分泌剂，譬如磺酰脲类药物，它能提高胰腺β-细胞分泌胰 岛素的量；降血糖药，譬如metformin，它能降低肝脏产出葡萄糖的量；过氧化物酶增殖体 活化受体-γ (PPAR-γ)激动剂，譬如格列酮类药物，它能增强胰岛素的作用；还有α -糖苷 酶抑制剂，它能阻碍肠内葡萄糖的产出。然而，现有的治疗药物还有一些不足的方面，包括 低血糖的副作用，体重增加，耐药性的出现，胃肠道问题，以及水肿。大概49%的二型糖尿病 患者需要口服药物治疗，大概40%的患者需要注射胰岛素并可能同时使用口服药物，然后 大概10%的患者会只使用饮食和锻炼来控制病情。
[0006] 为了能将新的更有效的疗法推向市场，目前有几个领域的研宄正在进行。其方向 主要包括：减少肝糖的过量生产，增强胰岛素向细胞传递吸收葡萄糖信号的通路，增加受葡 萄糖促进的肝脏β -细胞的胰岛素分泌，以及力图解决肥胖及伴随的脂肪代谢与积累方面 的问题。
[0007] GPRl 19是一个特别的革巴点，它是G蛋白偶联受体里rhodopsin家族中的一员。除了 被称作"GPR119"外，它还有其它标识，包括但不限于RUP3, Snorf25,19AJ，AXOR 20和PS1。 GPR119主要表达于胰腺组织中的胰岛β细胞和PP细胞，以及肠道L细胞（分泌GLP-1)和 K细胞[分泌葡萄糖依赖性促胰岛素多肽（GIP)]。科学实验已经证实，激动GPR119能提高 细胞内环磷酸腺苷（cAMP)浓度，激发细胞内的刺激-分泌偶联，从而增加葡萄糖依赖性的 GLP-1 和膜岛素的分泌。参见 T. Soga et al·，Biochemical and Biophysical Research Communications, 2005, 326, 744-751，里面一些有关于GPRl 19的文献。最近也有科学报道， GPRl 19激动剂可减少人肠道L细胞的凋亡。
[0008] 在二型糖尿病患者身上里，尽管GLP-I的分泌量减少了，GLP-I对于β -细胞的活 性依然保持，因此最近有很多针对GLP-I的研宄。这些研宄表明了 GLP-I除了能刺激机体 葡萄糖依赖性地分泌胰岛素外，还有别的降血糖机制，这包括但不限于：抑制餐后胰高血糖 激素的分泌，降低吸收营养到血液中的速率，以及通过减少食量来帮助控制体重。研宄结果 表明，提高GLP-I分泌量的疗法能够适用于各种症状和失调，包括但不限于代谢紊乱、胃肠 道紊乱、炎症、心理疾病、抑郁，以及神经精神疾病包括但不限于糖尿病（一型和二型）、代 谢综合症、肥胖、食欲不振/过旺、消瘦、紧张、易怒、心肌缺血/再灌注损伤、老年痴呆症，以 及其他中枢神经系统的疾病。
[0009] 然而，由于GLP-I会迅速地被蛋白酶DPP-IV降解，外源性GLP-I在临床治疗上的 应用受到很大限制。据文献报导，有几种用来治疗二型糖尿病的GLP-I的类似物正处于开 发阶段，它们都是经过修饰的多肽，比人自身分泌的GLP-I有更长的半衰期而活性类似。其 中以BYETTA为商品名销售的药物是这类新药中第一个被FDA批准上市的。然而，这些类似 物需要通过注射使用，这当然不及一个口服的能增加 GLP-I分泌的药物更令人满意。市面 上确有口服的DPP-IV抑制剂，它能减少GLP-I的降解从而提高GLP-I水平，譬如以JANUVIA 为商品名投放到市场的sitagliptin。不过倘若有一个药物能同时作用于L-细胞和β-细 胞，促进GLP-I和胰岛素的内源性分泌，对二型糖尿病的治疗会有更多益处，更有前途。
[0010] 本发明发现了一类GPR119的激动剂，它通过提高GIP，GLP-I和胰岛素的水平， 从而在一定程度上提高机体对葡萄糖的处理能力。不仅如此，研宄表明GPR119激动剂，例 如本发明中的分子，能非葡萄糖依赖性地促进肠促胰岛素的分泌。多肽GIP和GLP-I都是 肠促胰岛素，在过去的20年中，有大量的论文报导GIP和GLP-I具有多种多样的生理作 用。例如见 Perry，T.et al·，Curr. Alzheimer Res. ,2005, 377-385。当人体摄入营养物 质后，肠内分泌细胞K和L细胞会分别分泌GIP和GLP-I。尽管控制GLP-I分泌的机制尚 不清楚，进餐后短时间内GLP-I水平的迅速上升也许可以归因于GIP所参与的激素刺激的 神经传导，而一段时间后GLP-I水平的持续上升也许是由小肠末梢和结肠里的营养物质对 L-细胞的直接活化引起的。GIP和GLP-I是强效的促进剂，能增强身体对升高的血糖作出 的反应，提高胰岛素的分泌。然而，在二型糖尿病患者身上显示出，尽管GLP-I促胰岛素分 泌的作用依然保持，GIP的促胰岛素分泌作用下降。令人不解的是，二型糖尿病患者对一 次多量注入的GIP依然有良好的反应，只是对持续少量注入的方式失去敏感度（Meier et al.，Diabetes，2004, 53, S220-S224)，故此GIP活性下降的确切原因目前尚不清楚。最近的 研宄还表明，给〇b/ob小鼠持续施用一种长效的GIP的脂肪酸衍生物14天，有助于其维持 葡萄糖的体内平衡（Irwin N. et al. J. Med. Chem.，49, 1047-1054)。
[0011] 由此可见，GPR119激动剂具有应用在治疗糖尿病和相关联症状上的价值，尤其是 对于二型糖尿病，肥胖，葡萄糖耐受不良，胰岛素抵抗，代谢综合征X，高血脂，血胆脂醇过 多，以及动脉硬化症。
[0012] 本发明公开了一类含酰肼结构的GPR119激动剂，这些化合物可用于制备治疗II 型糖尿病的药物。
【发明内容】
[0013] 本发明的一个目的是提供一种具有通式I的良好活性的GPR119激动剂。
[0014] 本发明的另一个目的是提供制备具有通式I的化合物的方法。
[0015] 本发明的再一个目的是提供含有通式I的化合物作为有效成分在治疗II型糖尿 病方面的应用。
[0016] 现结合本发明的目的对本
【发明内容】
进行具体描述。
[0017] 本发明具有通式（I)的ik合物旦有下抹结构式，
[0018] 其中，X选自卤素取代基。
[0019] 优选通式⑴的化合物具有以下结构，
[0020]
[0021] 本发明所述通式（I)化合物通过以下路线合成：
[0022] 化合物II和化合物III在发生取代反应，生成化合物IV ;化合物IV与水合肼反 应，生成化合物V ;化合物V与化合物VI反应，生成I ;其中，X的定义如前所述。
[0023] 本发明所述通式I化合物具有GPR119的激动作用，可作为有效成分用于制备II 型糖尿病的治疗药物。本发明所述通式I化合物的活性是通过受体结合试验来验证的。
[0024] 本发明的通式I化合物在相当宽的剂量范围内是有效的。例如每天服用的剂量约 在Img-1000 mg/人范围内，分为一次或数次给药。实际服用本发明通式I化合物的剂量可 由医生根据有关的情况来决定。
【具体实施方式】
[0025] 下面结合实施例对本发明作进一步的说明。需要说明的是，下述实施例仅是用于 说明，而并非用于限制本发明。本领域技术人员根据本发明的教导所做出的各种变化均应 在本申请权利要求所要求的保护范围之内。
[0026] 实施例1化合物I-I的合成
[0027]
[0028] A.化合物IV-I的合成
[0029] 化合物 II-I (0· 68g, IOmmol)和化合物 III (L 95g, IOmmol)溶于 20mL 干燥的 DMF 中，室温下搅拌，加入固体碳酸钾（4. 15g，30mmol)和0.5g KI，而后在80°C下搅拌，直到反 应完成（约5小时）。反应混合物倾倒入150mL冰水中，使用50mLX3的CH2Cl 2萃取，合并 萃取相，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到的 残余物使用柱层析纯化，得到化合物IV-1，白色固体，ESI-MS，m/z = 183([M+H]+)。
[0030] B.化合物V-I的合成
[0031] 化合物IV-UL 28g，7mmol)溶于15mL无水乙醇中，室温下搅拌，加入ImL 80%的 水合肼，所得反应混合物而后在室温下搅拌，直到反应完成（TLC，5小时以内）。反应混合 物直接在旋转蒸发仪上蒸干，得到的残余物直接柱层析纯化，得到化合物V-1，白色固体， ESI-MS，m/z = 169([M+H]+)〇
[0032] C.化合物I-I的合成
[0033] 化合物V-I (0. 67g，4mmol)和三乙胺（I. 21g，12mmol)溶于IOmL干燥的二氯甲烷 中，冰水浴冷却下搅拌，慢慢滴加 VI-I (0. 84g，4_〇1)和ImL干燥的二氯甲烷制成的溶液， 滴加完毕后，反应混合物在室温下搅拌1小时，TLC显示反应完成。反应混合物倾倒入IOOmL 冰水中，使用50mLX 3的CH2Cl2萃取，合并萃取相，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去 干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到的残余物使用柱层析纯化，得到化合物1-1，白色固 体，ESI-MS, m/z = 343 ([M+H] +)。
[0034] 实施例2-9
[0035] 参照实施例1的方法，合成了下列化合物。
[0036]
[0037] 实施例9化合物D-I的合成
[0038] 为进一步说明本发明化合物的有益效果，申请人记载了申请人研宄但尚未公开的 化合物D-I及药理数据。
[0039]
[0040」 Α·化合物IV-I的合成
[0041] 化合物 II-I (0· 68g, lOmmol)和化合物 III (L 95g, lOmmol)溶于 20mL 干燥的 DMF 中，室温下搅拌，加入固体碳酸钾（4. 15g，30mmol)和0.5g KI，而后在80°C下搅拌，直到反 应完成（约5小时）。反应混合物倾倒入150mL冰水中，使用50mLX 3的CH2C12萃取，合并 萃取相，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到的 残余物使用柱层析纯化，得到化合物IV-1，白色固体，ESI-MS，m/z = 183([M+H]+)。
[0042] Β·化合物V-I的合成 化合物IV-UL 28g，7mmol)溶于15mL无水乙醇中，室温下搅拌，加入ImL 80%的水合 肼，所得反应混合物而后在室温下搅拌，直到反应完成（TLC，5小时以内）。反应混合物直接 在旋转蒸发仪上蒸干，得到的残余物直接柱层析纯化，得到化合物V-1，白色固体，ESI-MS， m/z = 169([M+H]+)〇
[0043] C.化合物D-I的合成 化合物V-1(0. 67g，4mmol)和三乙胺（1.21g，12mmol)溶于IOmL干燥的二氯甲烷中， 冰水浴冷却下搅拌，慢慢滴加 VI-9 (0. 71g，4_〇1)和ImL干燥的二氯甲烷制成的溶液，滴加 完毕后，反应混合物在室温下搅拌1小时，TLC显示反应完成。反应混合物倾倒入IOOmL冰 水中，使用50mLX3的CH2C12萃取，合并萃取相，用盐水洗绦，无水硫酸钠干燥。抽滤除去 干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到的残余物使用柱层析纯化，得到化合物D-1，白色固 体，ESI-MS, m/z = 309 ([M+H] +)。
[0044] 实施例10化合物体外对GPRl 19的激动实骀
[0045] 将编码FLAG附加表位、人GPRl 19的前198个氨基酸和小鼠受体的C末端137个 氨基酸的3个拷贝的人-小鼠嵌合GPR119表达构建体克隆至四环素可诱导载体pcDNA5/ FRT/TO(Invitrogen#V6520-20)中，其包含耐潮霉素的标记物。通过将此构建体稳定整合至 表达四环素抑制子的特异性宿主细胞系Flp-In-T-Rex-HEK293 (Invitrogen)的基因组中， 实现精密控制的受体表达。一旦产生稳定的耐潮霉素的细胞系，将细胞在37°C维持于加湿 的5 % 0)2气氛和培养基中。该培养基由补充有2mM L-谷氨酰胺、10 %胎牛血清、200 μ g/ml 潮霉素 B和15μg/ml稻瘟素（blasticidin)的达尔伯克改良伊格尔培养基（Dulbecco' s modified Eagle' s medium) (DMEM，Invitrogen)组成。
[0046] 在进行cAMP累积测定48小时之前，将稳定表达嵌合人/小鼠 GPRl 19构建体的细 胞以4X IO3细胞/孔的密度接种至384孔聚-D-赖氨酸涂布的固体白板（BD第35-6661 号）中，并使其于37°C在加湿的5% CO2气氛和补充有1 μ g/ml四环素的培养基中生长以诱 发受体表达。在测定当天，移除培养基并于37°C在加湿5% CO2气氛和20 μ 1/孔测定缓冲 液（具有Ca2+和Mg2+的磷酸盐缓冲盐水、12mM葡萄糖、0.1 mM异丁基-甲基-黄嘌呤、0. 1% 不含脂肪酸的牛血清白蛋白）中将细胞孵育50min，该测定缓冲液具有期望浓度的从溶解 在二甲亚砜（DMSO)中的浓缩储液添加的化合物以在测定中得到1% DMSO的最终浓度。使 用CisBio均相时间分辨荧光（HTRF)测定试剂盒，遵循制造商的规程测量cAMP累积。简 而言之，向每个孔中各自添加10 μ IcAMP-HTRF荧光检测试剂，且将样品于室温孵育40min。 在320nm激发焚光且在665nm和620nm使用Envision仪器（Perkin Elmer)测量。计算 665/620的荧光比并通过从cAMP标准曲线内插将其转化为每一孔中的cAMP的纳摩尔浓度。 采用Excel/XLfit软件（Microsoft和IDBS)利用四参数对数曲线拟合方程计算浓度-应 答曲线和EC 5tl。
[0047] 测试结果见下表。
[0048]
[0049] 从上表结果可以看出，本发明的化合物是很好的GPRl 19激动剂，可用于制备治疗 II型糖尿病药物。
【主权项】
1. 具有通式I结构的化合物，其中，X选自卤素取代基。2. 权利要求1所定义的通式I化合物，选自：3. 合成权利要求1-2任一所定义的属于通式I的化合物的方法：化合物II和化合物III在发生取代反应，生成化合物IV ;化合物IV与水合肼反应，生 成化合物V ;化合物V与化合物VI反应，生成I ;其中，X的定义如权利要求1-2任一所述。4. 权利要求1-2之一所定义的通式I化合物在制备治疗2型糖尿病药物方面的应用。
【专利摘要】本发明涉及与II型糖尿病相关的药物领域。具体而言，本发明涉及一类含酰肼结构的GPR119激动剂、其制备方法以及在制备2型糖尿病药物中的应用。其中，X选自卤素取代基。
【IPC分类】C07D233/56, A61P3/10
【公开号】CN104892517
【申请号】CN201510351853
【发明人】蔡子洋
【申请人】佛山市赛维斯医药科技有限公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月23日
【技术领域】
[0001] 本发明涉及II型糖尿病的治疗的药物领域。更具体地讲，本发明涉及对II型糖 尿病有治疗作用的一类含酰肼结构的GPR119激动剂、其制备方法以及在制药上的用途。
【背景技术】
[0002] 糖尿病日益严重地威胁着人类的健康。在当今美国，大约有1600万人正在忍受着 糖尿病带来的痛苦。一型糖尿病也被称为胰岛素依赖型糖尿病，属于自身免疫性疾病。它 是由于能产生胰岛素的胰腺胰岛β细胞被自身免疫系统破坏而引起的，目前世界上对此 病并没有治愈方法，因此患者必须接受胰岛素注射治疗。倘若不注射胰岛素，细胞将无法吸 收葡萄糖获取能量。一型糖尿病的相关症状通常出现于儿童期及青少年期。由于病程通常 较急，病症明显，会促使患者主动寻求医疗手段的帮助。二型糖尿病也被称为非胰岛素依赖 型糖尿病，表现为患者缺乏足够的能力控制自身血糖水平。二型糖尿病其是由胰岛素分泌 不足或者胰岛素抵抗（指身体组织不能恰当地对体内分泌的胰岛素作出响应）引起的，也 就是说二型糖尿病患者要么是自身分泌的胰岛素不够多，要么是不能有效地使用自身分泌 的胰岛素。很多因素都可以导致胰岛素抵抗的出现和发展，包括遗传、肥胖、高龄和长期高 血糖等。尽管二型糖尿病可能出现在各个年龄段，但普遍发生在成年人身上，所以有时它也 被叫做成年型糖尿病。然而值得注意的是，近年来二型糖尿病的发病率在儿童群体中攀升。
[0003] 在糖尿病患者身上，血液和尿液里葡萄糖的含量升高，导致多尿、口渴、饥饿，以及 脂肪和蛋白质代谢等一系列问题。如果不加以诊治，糖尿病会引起失明、坏疽，乃至肾衰竭 和心脏病等各种危及生命的并发症。
[0004] 二型糖尿病患者大约占糖尿病患者总数的90% -95%。在当今西方社会，约有6% 的成年人患有二型糖尿病，在美国每年导致193, 000人的死亡，在所有死亡原因中居第七 位。在世界范围内，超过1. 5亿人受到II型糖尿病的困扰，而这一数字预计在2025年翻番。 尽管某些人是因为遗传的因素而易患糖尿病，目前病例的攀升主要是由久坐的生活方式、 高热量饮食，以及发达国家中普遍的肥胖所导致。大概80%的二型糖尿病患者是显著超重 的。现在患上此病的年轻人正日益增多。目前二型糖尿病在国际上已经被公认为在21世 纪对人类健康的重大威胁之一。
[0005] 目前，人们对二型糖尿病有程度不同的治疗方案。最基本的方案是饮食和锻炼的 结合，在此基础上也可以配合药物治疗。目前治疗糖尿病的所用的药物，除了胰岛素外，具 体来说还有以下几种：胰岛素促分泌剂，譬如磺酰脲类药物，它能提高胰腺β-细胞分泌胰 岛素的量；降血糖药，譬如metformin，它能降低肝脏产出葡萄糖的量；过氧化物酶增殖体 活化受体-γ (PPAR-γ)激动剂，譬如格列酮类药物，它能增强胰岛素的作用；还有α -糖苷 酶抑制剂，它能阻碍肠内葡萄糖的产出。然而，现有的治疗药物还有一些不足的方面，包括 低血糖的副作用，体重增加，耐药性的出现，胃肠道问题，以及水肿。大概49%的二型糖尿病 患者需要口服药物治疗，大概40%的患者需要注射胰岛素并可能同时使用口服药物，然后 大概10%的患者会只使用饮食和锻炼来控制病情。
[0006] 为了能将新的更有效的疗法推向市场，目前有几个领域的研宄正在进行。其方向 主要包括：减少肝糖的过量生产，增强胰岛素向细胞传递吸收葡萄糖信号的通路，增加受葡 萄糖促进的肝脏β -细胞的胰岛素分泌，以及力图解决肥胖及伴随的脂肪代谢与积累方面 的问题。
[0007] GPRl 19是一个特别的革巴点，它是G蛋白偶联受体里rhodopsin家族中的一员。除了 被称作"GPR119"外，它还有其它标识，包括但不限于RUP3, Snorf25,19AJ，AXOR 20和PS1。 GPR119主要表达于胰腺组织中的胰岛β细胞和PP细胞，以及肠道L细胞（分泌GLP-1)和 K细胞[分泌葡萄糖依赖性促胰岛素多肽（GIP)]。科学实验已经证实，激动GPR119能提高 细胞内环磷酸腺苷（cAMP)浓度，激发细胞内的刺激-分泌偶联，从而增加葡萄糖依赖性的 GLP-1 和膜岛素的分泌。参见 T. Soga et al·，Biochemical and Biophysical Research Communications, 2005, 326, 744-751，里面一些有关于GPRl 19的文献。最近也有科学报道， GPRl 19激动剂可减少人肠道L细胞的凋亡。
[0008] 在二型糖尿病患者身上里，尽管GLP-I的分泌量减少了，GLP-I对于β -细胞的活 性依然保持，因此最近有很多针对GLP-I的研宄。这些研宄表明了 GLP-I除了能刺激机体 葡萄糖依赖性地分泌胰岛素外，还有别的降血糖机制，这包括但不限于：抑制餐后胰高血糖 激素的分泌，降低吸收营养到血液中的速率，以及通过减少食量来帮助控制体重。研宄结果 表明，提高GLP-I分泌量的疗法能够适用于各种症状和失调，包括但不限于代谢紊乱、胃肠 道紊乱、炎症、心理疾病、抑郁，以及神经精神疾病包括但不限于糖尿病（一型和二型）、代 谢综合症、肥胖、食欲不振/过旺、消瘦、紧张、易怒、心肌缺血/再灌注损伤、老年痴呆症，以 及其他中枢神经系统的疾病。
[0009] 然而，由于GLP-I会迅速地被蛋白酶DPP-IV降解，外源性GLP-I在临床治疗上的 应用受到很大限制。据文献报导，有几种用来治疗二型糖尿病的GLP-I的类似物正处于开 发阶段，它们都是经过修饰的多肽，比人自身分泌的GLP-I有更长的半衰期而活性类似。其 中以BYETTA为商品名销售的药物是这类新药中第一个被FDA批准上市的。然而，这些类似 物需要通过注射使用，这当然不及一个口服的能增加 GLP-I分泌的药物更令人满意。市面 上确有口服的DPP-IV抑制剂，它能减少GLP-I的降解从而提高GLP-I水平，譬如以JANUVIA 为商品名投放到市场的sitagliptin。不过倘若有一个药物能同时作用于L-细胞和β-细 胞，促进GLP-I和胰岛素的内源性分泌，对二型糖尿病的治疗会有更多益处，更有前途。
[0010] 本发明发现了一类GPR119的激动剂，它通过提高GIP，GLP-I和胰岛素的水平， 从而在一定程度上提高机体对葡萄糖的处理能力。不仅如此，研宄表明GPR119激动剂，例 如本发明中的分子，能非葡萄糖依赖性地促进肠促胰岛素的分泌。多肽GIP和GLP-I都是 肠促胰岛素，在过去的20年中，有大量的论文报导GIP和GLP-I具有多种多样的生理作 用。例如见 Perry，T.et al·，Curr. Alzheimer Res. ,2005, 377-385。当人体摄入营养物 质后，肠内分泌细胞K和L细胞会分别分泌GIP和GLP-I。尽管控制GLP-I分泌的机制尚 不清楚，进餐后短时间内GLP-I水平的迅速上升也许可以归因于GIP所参与的激素刺激的 神经传导，而一段时间后GLP-I水平的持续上升也许是由小肠末梢和结肠里的营养物质对 L-细胞的直接活化引起的。GIP和GLP-I是强效的促进剂，能增强身体对升高的血糖作出 的反应，提高胰岛素的分泌。然而，在二型糖尿病患者身上显示出，尽管GLP-I促胰岛素分 泌的作用依然保持，GIP的促胰岛素分泌作用下降。令人不解的是，二型糖尿病患者对一 次多量注入的GIP依然有良好的反应，只是对持续少量注入的方式失去敏感度（Meier et al.，Diabetes，2004, 53, S220-S224)，故此GIP活性下降的确切原因目前尚不清楚。最近的 研宄还表明，给〇b/ob小鼠持续施用一种长效的GIP的脂肪酸衍生物14天，有助于其维持 葡萄糖的体内平衡（Irwin N. et al. J. Med. Chem.，49, 1047-1054)。
[0011] 由此可见，GPR119激动剂具有应用在治疗糖尿病和相关联症状上的价值，尤其是 对于二型糖尿病，肥胖，葡萄糖耐受不良，胰岛素抵抗，代谢综合征X，高血脂，血胆脂醇过 多，以及动脉硬化症。
[0012] 本发明公开了一类含酰肼结构的GPR119激动剂，这些化合物可用于制备治疗II 型糖尿病的药物。
【发明内容】
[0013] 本发明的一个目的是提供一种具有通式I的良好活性的GPR119激动剂。
[0014] 本发明的另一个目的是提供制备具有通式I的化合物的方法。
[0015] 本发明的再一个目的是提供含有通式I的化合物作为有效成分在治疗II型糖尿 病方面的应用。
[0016] 现结合本发明的目的对本
【发明内容】
进行具体描述。
[0017] 本发明具有通式（I)的ik合物旦有下抹结构式，
[0018] 其中，X选自卤素取代基。
[0019] 优选通式⑴的化合物具有以下结构，
[0020]
[0021] 本发明所述通式（I)化合物通过以下路线合成：
[0022] 化合物II和化合物III在发生取代反应，生成化合物IV ;化合物IV与水合肼反 应，生成化合物V ;化合物V与化合物VI反应，生成I ;其中，X的定义如前所述。
[0023] 本发明所述通式I化合物具有GPR119的激动作用，可作为有效成分用于制备II 型糖尿病的治疗药物。本发明所述通式I化合物的活性是通过受体结合试验来验证的。
[0024] 本发明的通式I化合物在相当宽的剂量范围内是有效的。例如每天服用的剂量约 在Img-1000 mg/人范围内，分为一次或数次给药。实际服用本发明通式I化合物的剂量可 由医生根据有关的情况来决定。
【具体实施方式】
[0025] 下面结合实施例对本发明作进一步的说明。需要说明的是，下述实施例仅是用于 说明，而并非用于限制本发明。本领域技术人员根据本发明的教导所做出的各种变化均应 在本申请权利要求所要求的保护范围之内。
[0026] 实施例1化合物I-I的合成
[0027]
[0028] A.化合物IV-I的合成
[0029] 化合物 II-I (0· 68g, IOmmol)和化合物 III (L 95g, IOmmol)溶于 20mL 干燥的 DMF 中，室温下搅拌，加入固体碳酸钾（4. 15g，30mmol)和0.5g KI，而后在80°C下搅拌，直到反 应完成（约5小时）。反应混合物倾倒入150mL冰水中，使用50mLX3的CH2Cl 2萃取，合并 萃取相，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到的 残余物使用柱层析纯化，得到化合物IV-1，白色固体，ESI-MS，m/z = 183([M+H]+)。
[0030] B.化合物V-I的合成
[0031] 化合物IV-UL 28g，7mmol)溶于15mL无水乙醇中，室温下搅拌，加入ImL 80%的 水合肼，所得反应混合物而后在室温下搅拌，直到反应完成（TLC，5小时以内）。反应混合 物直接在旋转蒸发仪上蒸干，得到的残余物直接柱层析纯化，得到化合物V-1，白色固体， ESI-MS，m/z = 169([M+H]+)〇
[0032] C.化合物I-I的合成
[0033] 化合物V-I (0. 67g，4mmol)和三乙胺（I. 21g，12mmol)溶于IOmL干燥的二氯甲烷 中，冰水浴冷却下搅拌，慢慢滴加 VI-I (0. 84g，4_〇1)和ImL干燥的二氯甲烷制成的溶液， 滴加完毕后，反应混合物在室温下搅拌1小时，TLC显示反应完成。反应混合物倾倒入IOOmL 冰水中，使用50mLX 3的CH2Cl2萃取，合并萃取相，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去 干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到的残余物使用柱层析纯化，得到化合物1-1，白色固 体，ESI-MS, m/z = 343 ([M+H] +)。
[0034] 实施例2-9
[0035] 参照实施例1的方法，合成了下列化合物。
[0036]
[0037] 实施例9化合物D-I的合成
[0038] 为进一步说明本发明化合物的有益效果，申请人记载了申请人研宄但尚未公开的 化合物D-I及药理数据。
[0039]
[0040」 Α·化合物IV-I的合成
[0041] 化合物 II-I (0· 68g, lOmmol)和化合物 III (L 95g, lOmmol)溶于 20mL 干燥的 DMF 中，室温下搅拌，加入固体碳酸钾（4. 15g，30mmol)和0.5g KI，而后在80°C下搅拌，直到反 应完成（约5小时）。反应混合物倾倒入150mL冰水中，使用50mLX 3的CH2C12萃取，合并 萃取相，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到的 残余物使用柱层析纯化，得到化合物IV-1，白色固体，ESI-MS，m/z = 183([M+H]+)。
[0042] Β·化合物V-I的合成 化合物IV-UL 28g，7mmol)溶于15mL无水乙醇中，室温下搅拌，加入ImL 80%的水合 肼，所得反应混合物而后在室温下搅拌，直到反应完成（TLC，5小时以内）。反应混合物直接 在旋转蒸发仪上蒸干，得到的残余物直接柱层析纯化，得到化合物V-1，白色固体，ESI-MS， m/z = 169([M+H]+)〇
[0043] C.化合物D-I的合成 化合物V-1(0. 67g，4mmol)和三乙胺（1.21g，12mmol)溶于IOmL干燥的二氯甲烷中， 冰水浴冷却下搅拌，慢慢滴加 VI-9 (0. 71g，4_〇1)和ImL干燥的二氯甲烷制成的溶液，滴加 完毕后，反应混合物在室温下搅拌1小时，TLC显示反应完成。反应混合物倾倒入IOOmL冰 水中，使用50mLX3的CH2C12萃取，合并萃取相，用盐水洗绦，无水硫酸钠干燥。抽滤除去 干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到的残余物使用柱层析纯化，得到化合物D-1，白色固 体，ESI-MS, m/z = 309 ([M+H] +)。
[0044] 实施例10化合物体外对GPRl 19的激动实骀
[0045] 将编码FLAG附加表位、人GPRl 19的前198个氨基酸和小鼠受体的C末端137个 氨基酸的3个拷贝的人-小鼠嵌合GPR119表达构建体克隆至四环素可诱导载体pcDNA5/ FRT/TO(Invitrogen#V6520-20)中，其包含耐潮霉素的标记物。通过将此构建体稳定整合至 表达四环素抑制子的特异性宿主细胞系Flp-In-T-Rex-HEK293 (Invitrogen)的基因组中， 实现精密控制的受体表达。一旦产生稳定的耐潮霉素的细胞系，将细胞在37°C维持于加湿 的5 % 0)2气氛和培养基中。该培养基由补充有2mM L-谷氨酰胺、10 %胎牛血清、200 μ g/ml 潮霉素 B和15μg/ml稻瘟素（blasticidin)的达尔伯克改良伊格尔培养基（Dulbecco' s modified Eagle' s medium) (DMEM，Invitrogen)组成。
[0046] 在进行cAMP累积测定48小时之前，将稳定表达嵌合人/小鼠 GPRl 19构建体的细 胞以4X IO3细胞/孔的密度接种至384孔聚-D-赖氨酸涂布的固体白板（BD第35-6661 号）中，并使其于37°C在加湿的5% CO2气氛和补充有1 μ g/ml四环素的培养基中生长以诱 发受体表达。在测定当天，移除培养基并于37°C在加湿5% CO2气氛和20 μ 1/孔测定缓冲 液（具有Ca2+和Mg2+的磷酸盐缓冲盐水、12mM葡萄糖、0.1 mM异丁基-甲基-黄嘌呤、0. 1% 不含脂肪酸的牛血清白蛋白）中将细胞孵育50min，该测定缓冲液具有期望浓度的从溶解 在二甲亚砜（DMSO)中的浓缩储液添加的化合物以在测定中得到1% DMSO的最终浓度。使 用CisBio均相时间分辨荧光（HTRF)测定试剂盒，遵循制造商的规程测量cAMP累积。简 而言之，向每个孔中各自添加10 μ IcAMP-HTRF荧光检测试剂，且将样品于室温孵育40min。 在320nm激发焚光且在665nm和620nm使用Envision仪器（Perkin Elmer)测量。计算 665/620的荧光比并通过从cAMP标准曲线内插将其转化为每一孔中的cAMP的纳摩尔浓度。 采用Excel/XLfit软件（Microsoft和IDBS)利用四参数对数曲线拟合方程计算浓度-应 答曲线和EC 5tl。
[0047] 测试结果见下表。
[0048]
[0049] 从上表结果可以看出，本发明的化合物是很好的GPRl 19激动剂，可用于制备治疗 II型糖尿病药物。
【主权项】
1. 具有通式I结构的化合物，其中，X选自卤素取代基。2. 权利要求1所定义的通式I化合物，选自：3. 合成权利要求1-2任一所定义的属于通式I的化合物的方法：化合物II和化合物III在发生取代反应，生成化合物IV ;化合物IV与水合肼反应，生 成化合物V ;化合物V与化合物VI反应，生成I ;其中，X的定义如权利要求1-2任一所述。4. 权利要求1-2之一所定义的通式I化合物在制备治疗2型糖尿病药物方面的应用。
【专利摘要】本发明涉及与II型糖尿病相关的药物领域。具体而言，本发明涉及一类含酰肼结构的GPR119激动剂、其制备方法以及在制备2型糖尿病药物中的应用。其中，X选自卤素取代基。
【IPC分类】C07D233/56, A61P3/10
【公开号】CN104892517
【申请号】CN201510351853
【发明人】蔡子洋
【申请人】佛山市赛维斯医药科技有限公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月23日
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