一种新的r-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的纯化处理工艺的制作方法
一种新的r-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的纯化处理工艺的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于有机合成技术领域，涉及腺嘌呤和R-碳酸丙烯酯制备R-9- (2-羟丙 基）腺嘌呤的纯化处理工艺技术领域。
【背景技术】
[0002] R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤是合成泰诺福韦酯的关键中间体，泰诺福韦酯是用于治 疗HIV-I感染的核苷酸类逆转录酶抑制剂。其用量越来越大，用途也越来越广泛。目前有 很多关于R-9- (2-羟丙基)腺嘌呤的专利和文献报道：专利有CN103408548,其方法是将腺 嘌呤和乙酸酐反应生成二乙酰腺嘌呤，再经过和R-碳酸丙烯酯反应、碱性条件下水解掉乙 酰基得到最终产品，乙酰保护法达90%收率，但是这种方法产生了大量废酸和无机盐，步骤 多，操作繁琐，不适合工业化生产；文献有药学实践杂志2009年第27卷第1期，泰诺福韦 的合成工艺改进，其后处理是加入甲苯结晶出粗品未经纯化直接进入下一步，这种方法浪 费下一步的原料，使下步产品难分离，降低了下一步的收率；Organic Process Research & Development 2010，14，1194 - 1201 ? Process Improvements for the Manufacture of Tenofovir Disoproxil Fumarate at Commercial Scale 中，其后处理方法是用甲醇、异丙 醇和DMF混合溶剂结晶，收率65. 9%，纯度97. 8%。泰诺福韦酯的产业化生产工艺中用甲苯乙 醇重结晶，纯度98%收率73%，异构体在2%左右。这一反应由于选择性差，反应本身必然会 生成5-10%左右的异构体，由于异构体比较难分离，大部分文献及专利没有在这一步纯化， 直接将粗品烘干投入下一步，不仅增加了下一步的分离难度，且异构体能参与下一步的反 应，浪费下一步的原料，增加了生产成本。本发明的后处理方法简单，树脂色谱柱可重复利 用多次而不影响分离效果，洗脱剂可反复循环套用，大大降低了分离成本，得到两种产品， 产品纯度高，异构体含量低，废水少，有利于工业化生产。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种新的R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤的纯化处理方法，其特征 在于： 步骤一：获得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品 将反应完的R-9- (2-羟丙基)腺嘌呤的溶液减压条件下蒸出70~80%左右的DMF溶剂， 加入有机溶剂，搅拌均匀，(TC保温2 h，过滤得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品。
[0004] 步骤二：装柱、预处理 称取一定质量的PRP-6A树脂，倒入玻璃层析柱中，用乙醇反复冲洗3次使柱子压实且 无气泡，柱体均匀，再用乙酸乙酯反复冲洗3次，最后用乙醇置换出乙酸乙酯至测试无乙酸 乙酯为止，柱子装好备用。
[0005] 步骤三：上样 将R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤粗品溶于少量水中，倒入PRP-6A树脂色谱柱，至样品溶液 完全吸附到树脂上为上样完毕。
[0006] 步骤四：洗脱 配制70180%的乙醇水作为洗脱剂，倒入树脂层析柱内，用空气泵加压洗脱，流速控制 在15ml/min，用接收瓶每100mL依次接受洗脱液，HPLC检测每瓶中产品的含量。。
[0007] 步骤五：浓缩 将纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤和异构体分别收集在一起，减压条件下浓 缩至干，蒸出的乙醇水回收套用，得到纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤白色结晶粉 末和纯度大于99%的异构体。
[0008] 步骤六：洗柱 用90%以上的乙醇水冲洗柱子至滴下液体无产品检出，说明PRP-6A树脂层析柱已冲洗 干净，可以下一次继续使用。
[0009] 上述步骤一中，有机溶剂可以是甲苯、二甲苯等；有机溶剂与残余DMF溶剂体积比 为 1:4~1:8,优选 1:6。
[0010] 上述步骤二中，PRP-6A树脂质量（g)与粗品质量（g)比为40:1~80~1，优选50:1，装 柱溶剂可以是甲醇和乙醇，优选乙醇，树脂层析柱高度与上样吸附的树脂高度应大于5:1。
[0011] 上述步骤四中，洗脱液流速控制在10~30ml/min，优选15ml/min，接收液每瓶 50~220ml，优选 100ml。
[0012] 上述步骤五中，洗柱用的溶剂可以是90%以上的甲醇水或乙醇水等。
[0013] 上述发明PRP-6A树脂柱可重复循环使用六次或更多次而不影响分离效果。
[0014] 本发明中，使用PRP-6A树脂色谱柱分离R-9-( 2-羟丙基)腺嘌呤粗品，得到了高纯 度的R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤，且具有吸附脱色作用，且将副产品异构体也纯化出来，树脂 色谱柱可重复利用多次二不影响分离效果，洗脱剂可反复循环套用，大大降低了分离成本； 副产品在不久的将来也可能会有其他很高的使用价值，本发明得到了两种高纯度和外观的 产品，总收率达到90%以上，因此，本发明有很高的实用价值，可以进行工业化生产。
[0015] 具体实施案例。
[0016] 实施例1 步骤一：获得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品 将100 g的腺嘌呤（〇· 74 mol)和氢氧化钠2. 35 g (0· 058 mol)分别加入到500 ml的 DMF中，室温搅拌20 min，加入R-碳酸丙烯酯96. 5g (0. 946 mol)，升温至120~130°C保温 反应16 h ; HPLC检测反应完，将反应完的R-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的溶液减压条件下蒸出70~80% 左右的DMF溶剂，加入300ml甲苯，搅拌均匀，0度保温2 h，过滤，烘干，得R-9- (2-羟丙基） 腺嘌呤粗品136g，粗品收率95. 7%，纯度90. 8%，异构体8. 0%。
[0017] 步骤二：装柱、预处理 称取一 150g的PRP-6A树脂，倒入玻璃层析柱中，用乙醇反复冲洗3次使柱子压实且无 气泡，树脂高度28cm，柱体均匀，再用乙酸乙酯反复冲洗3次，最后用乙醇置换出乙酸乙酯 至测试无乙酸乙酯为止，柱子装好备用。
[0018] 步骤三：上样 将R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤粗品6 g溶于少量水20 ml中，倒入PRP-6A树脂层析柱， 至样品溶液完全吸附到树脂色谱柱上为上样完毕。
[0019] 步骤四：洗脱 配制80%的乙醇水作为洗脱剂，倒入树脂层析柱内，用空气泵加压洗脱，流速控制在 15ml/min，用接收瓶每100mL依次接受洗脱液，HPLC检测每瓶中产品的含量。
[0020] 步骤五：浓缩 将纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤和异构体分别收集在一起，减压条件下浓 缩至干，蒸出的乙醇水回收套用，得到纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤白色结晶粉 末5. Og和纯度大于99%的异构体4. 7g，色谱分离收率为产品92. 9%和异构体97. 9%。
[0021] 步骤六：洗柱 用90%的乙醇水冲洗柱子至滴下液体无产品检出，说明PRP-6A树脂色谱柱已冲洗干 净，可以下一次继续使用。
[0022] 步 骤六：重复步骤三至步骤六，循环过柱6次 其结果如下表格1所示：
注：上面表格1中，纵向为六次色谱分离实验结果，收率为色谱分离收率，纯度为HPLC 面积积分纯度。
[0023] 实施例2 步骤一：获得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品 腺嘌呤投料量改为500 g，操作同实施例1步骤一，得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品 675g，粗品收率95. 1%，纯度91. 9%，异构体7. 8%。
[0024] 步骤二：装柱、预处理 称取I. 5kg的PRP-6A树脂，倒入玻璃层析柱中，用甲醇反复冲洗3次使柱子压实且无 气泡，树脂高度50 cm，柱体均匀，再用乙酸乙酯反复冲洗3次，最后用甲醇置换出乙酸乙酯 至测试无乙酸乙酯为止，色谱柱装好备用。
[0025] 步骤三：上样 将R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤粗品60 g溶于少量水（200ml)中，倒入PRP-6A树脂色谱 柱，至样品溶液完全吸附到树脂色谱柱上为上样完毕。
[0026] 步骤四：洗脱 配制75%的甲醇水作为洗脱剂，倒入树脂色谱柱内，用空气泵加压洗脱，流速控制在 25ml/min，用接收瓶每200ml依次接受洗脱液，HPLC检测每瓶中产品的含量。
[0027] 步骤五：浓缩 将纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤和异构体分别收集在一起，减压条件下浓 缩至干，蒸出的乙醇水回收套用，得到纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤白色结晶粉 末51. 5g和纯度大于99%的异构体4. 7 g，过柱收率为产品92. 9%和异构体97. 9%。
[0028] 步骤六：洗柱 同实施例1步骤六。
[0029] 步骤七：重复步骤三至步骤六，循环过柱6次 其结果如下表格2所示：
注：上面表格2中，纵向为六次色谱分离实验结果，收率为色谱分离收率，纯度为HPLC 面积积分纯度。
[0030] 实施例3 步骤一：获得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品 腺嘌呤投料量改为5 kg，操作同实施例1步骤一，得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品6. 85 kg，粗品收率96. 4%，纯度90. 7%，异构体8. 2%。
[0031] 步骤二：装柱、预处理 PRP-6A树脂质量为25 kg操作步骤同实施例1步骤二。
[0032] 步骤三：上样 上样量为I kg，操作同实施例1步骤三。
[0033] 步骤四：洗脱 配制80%的乙醇水作为洗脱剂，倒入树脂色谱柱内，用空气泵加压洗脱，流速控制在 150ml/min，用接收瓶每500ml依次接受洗脱液，HPLC检测每瓶中产品的含量。
[0034] 步骤五：浓缩 将纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤和异构体分别收集在一起，减压条件下浓 缩至干，蒸出的乙醇水回收套用，得到纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤白色结晶粉 末892 g和纯度大于99%的异构体75 g，过柱收率为产品98. 3%和异构体91. 4%。
[0035] 步骤六：洗柱 同实施例1步骤六。
[0036] 步骤七：重复步骤三至步骤六，循环过柱6次 其结果如下表格3所示：
注：上面表格3中，纵向为六次色谱分离实验结果，收率为色谱分离收率，纯度为HPLC 面积积分纯度。
[0037] 以上所述仅为本发明的较佳的实施例而已，并不用以限制本发明，在此不一一列 举实施例，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改，等同替换，微小改进等，均应包 含在本发明的保护范围内。
【主权项】
1. 一种新的9-(2-羟丙基）腺嘌呤的分离纯化工艺，其特征在于步骤如下： (1) 将反应完的R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤的溶液减压条件下蒸出部分DMF溶剂，加入 有机溶剂，搅拌均匀，〇°C保温2h，过滤得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品； (2) 称取一定质量的PRP-6A树脂，倒入玻璃层析柱中，用乙醇反复冲洗3次使柱子压实 且无气泡，柱体均匀，再用乙酸乙酯反复冲洗3次，最后用乙醇置换出乙酸乙酯至测试无乙 酸乙酯为止，柱子装好备用； (3) 将R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤粗品溶于少量水中，倒入PRP-6A树脂色谱柱，至样品 溶液完全吸附到树脂色谱柱上为上样完毕； (4) 配制70180%的乙醇水作为洗脱剂，倒入树脂色谱柱内，用空气泵加压洗脱，HPLC 检测每瓶中产品的含量； (5) 将纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤和异构体分别收集在一起，减压条件下 浓缩至干，蒸出的乙醇水回收循环套用，得到纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤白色 结晶粉末和纯度大于99%的异构体； (6) 用90%以上的乙醇水冲洗柱子至滴下液体无产品检出，说明PRP-6A树脂色谱柱已 冲洗干净，可以下一次继续使用。2. 如上述权利要求1步骤（1)中，有机溶剂可以是甲苯、二甲苯等；DMF蒸出体积约为 DMF投料量的70~80%，有机溶剂与残余DMF溶剂体积比为1:4~1:8,优选1:6。3. 如上述权利要求1步骤（2)中，色谱树脂可以PRP-6A树脂或PRP-6B树脂，PRP-6A 树脂质量（g)与粗品质量（g)比为40:1~80~1，优选50:1，装柱溶剂可以是甲醇和乙醇，优 选乙醇，树脂色谱柱高度与上样吸附的树脂高度应大于5:1。4. 如上述权利要求1步骤（3冲粗品质量（g)与水的质量（g)比为1:2~1:8,优选1:3。5. 如上述权利要求1步骤（4)中，洗脱液流速控制在15~150ml/min，接收液每瓶 50~500ml，根据柱子粗细及填料量多少而不同。6. 如上述权利要求1步骤（5)中，洗柱用的溶剂可以是90%以上的甲醇水或乙醇水等。7. 按上述权利要求1得到了纯度大于99%的R-9- (2-羟丙基)腺嘌呤和纯度大于99% 的异构体，总收率达到90%以上，PRP-6A树脂色谱柱可重复循环使用六次或更多次而不影 响分离效果。
【专利摘要】本发明涉及一种新的R-9-（2-羟丙基）腺嘌呤的纯化处理工艺，R-9-（2-羟丙基）腺嘌呤由腺嘌呤和R-碳酸丙烯酯在碱性条件下制得，本发明中将反应后的溶剂DMF减压蒸出套用，向剩余物中加甲苯析出粗品，粗品收率大于90%，然后粗品用PRP-6A树脂色谱分离，洗脱剂为乙醇水，首先洗脱下来的是异构体II，其次洗脱下来的是R-9-（2-羟丙基）腺嘌呤I，分别收集两种产品的洗脱液，减压浓缩蒸干，得白色结晶粉沫R-9-(2-羟丙基)腺嘌呤I，纯度大于99%，分离收率大于90%，异构体II纯度大于99%，分离收率大于90%。本发明工艺处理简单，树脂色谱柱可重复利用多次而不影响分离效果，洗脱剂可反复循环套用，大大降低了分离成本，得到两种产品，产品纯度高，总收率大于80%，产生废水少，适合工业化生产。
【IPC分类】C07D473/34
【公开号】CN104892613
【申请号】CN201510266011
【发明人】王育才, 苏华强, 韩建星, 刘爱香
【申请人】洛阳德胜生物科技股份有限公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月23日
【技术领域】
[0001] 本发明属于有机合成技术领域，涉及腺嘌呤和R-碳酸丙烯酯制备R-9- (2-羟丙 基）腺嘌呤的纯化处理工艺技术领域。
【背景技术】
[0002] R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤是合成泰诺福韦酯的关键中间体，泰诺福韦酯是用于治 疗HIV-I感染的核苷酸类逆转录酶抑制剂。其用量越来越大，用途也越来越广泛。目前有 很多关于R-9- (2-羟丙基)腺嘌呤的专利和文献报道：专利有CN103408548,其方法是将腺 嘌呤和乙酸酐反应生成二乙酰腺嘌呤，再经过和R-碳酸丙烯酯反应、碱性条件下水解掉乙 酰基得到最终产品，乙酰保护法达90%收率，但是这种方法产生了大量废酸和无机盐，步骤 多，操作繁琐，不适合工业化生产；文献有药学实践杂志2009年第27卷第1期，泰诺福韦 的合成工艺改进，其后处理是加入甲苯结晶出粗品未经纯化直接进入下一步，这种方法浪 费下一步的原料，使下步产品难分离，降低了下一步的收率；Organic Process Research & Development 2010，14，1194 - 1201 ? Process Improvements for the Manufacture of Tenofovir Disoproxil Fumarate at Commercial Scale 中，其后处理方法是用甲醇、异丙 醇和DMF混合溶剂结晶，收率65. 9%，纯度97. 8%。泰诺福韦酯的产业化生产工艺中用甲苯乙 醇重结晶，纯度98%收率73%，异构体在2%左右。这一反应由于选择性差，反应本身必然会 生成5-10%左右的异构体，由于异构体比较难分离，大部分文献及专利没有在这一步纯化， 直接将粗品烘干投入下一步，不仅增加了下一步的分离难度，且异构体能参与下一步的反 应，浪费下一步的原料，增加了生产成本。本发明的后处理方法简单，树脂色谱柱可重复利 用多次而不影响分离效果，洗脱剂可反复循环套用，大大降低了分离成本，得到两种产品， 产品纯度高，异构体含量低，废水少，有利于工业化生产。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种新的R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤的纯化处理方法，其特征 在于： 步骤一：获得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品 将反应完的R-9- (2-羟丙基)腺嘌呤的溶液减压条件下蒸出70~80%左右的DMF溶剂， 加入有机溶剂，搅拌均匀，(TC保温2 h，过滤得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品。
[0004] 步骤二：装柱、预处理 称取一定质量的PRP-6A树脂，倒入玻璃层析柱中，用乙醇反复冲洗3次使柱子压实且 无气泡，柱体均匀，再用乙酸乙酯反复冲洗3次，最后用乙醇置换出乙酸乙酯至测试无乙酸 乙酯为止，柱子装好备用。
[0005] 步骤三：上样 将R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤粗品溶于少量水中，倒入PRP-6A树脂色谱柱，至样品溶液 完全吸附到树脂上为上样完毕。
[0006] 步骤四：洗脱 配制70180%的乙醇水作为洗脱剂，倒入树脂层析柱内，用空气泵加压洗脱，流速控制 在15ml/min，用接收瓶每100mL依次接受洗脱液，HPLC检测每瓶中产品的含量。。
[0007] 步骤五：浓缩 将纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤和异构体分别收集在一起，减压条件下浓 缩至干，蒸出的乙醇水回收套用，得到纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤白色结晶粉 末和纯度大于99%的异构体。
[0008] 步骤六：洗柱 用90%以上的乙醇水冲洗柱子至滴下液体无产品检出，说明PRP-6A树脂层析柱已冲洗 干净，可以下一次继续使用。
[0009] 上述步骤一中，有机溶剂可以是甲苯、二甲苯等；有机溶剂与残余DMF溶剂体积比 为 1:4~1:8,优选 1:6。
[0010] 上述步骤二中，PRP-6A树脂质量（g)与粗品质量（g)比为40:1~80~1，优选50:1，装 柱溶剂可以是甲醇和乙醇，优选乙醇，树脂层析柱高度与上样吸附的树脂高度应大于5:1。
[0011] 上述步骤四中，洗脱液流速控制在10~30ml/min，优选15ml/min，接收液每瓶 50~220ml，优选 100ml。
[0012] 上述步骤五中，洗柱用的溶剂可以是90%以上的甲醇水或乙醇水等。
[0013] 上述发明PRP-6A树脂柱可重复循环使用六次或更多次而不影响分离效果。
[0014] 本发明中，使用PRP-6A树脂色谱柱分离R-9-( 2-羟丙基)腺嘌呤粗品，得到了高纯 度的R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤，且具有吸附脱色作用，且将副产品异构体也纯化出来，树脂 色谱柱可重复利用多次二不影响分离效果，洗脱剂可反复循环套用，大大降低了分离成本； 副产品在不久的将来也可能会有其他很高的使用价值，本发明得到了两种高纯度和外观的 产品，总收率达到90%以上，因此，本发明有很高的实用价值，可以进行工业化生产。
[0015] 具体实施案例。
[0016] 实施例1 步骤一：获得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品 将100 g的腺嘌呤（〇· 74 mol)和氢氧化钠2. 35 g (0· 058 mol)分别加入到500 ml的 DMF中，室温搅拌20 min，加入R-碳酸丙烯酯96. 5g (0. 946 mol)，升温至120~130°C保温 反应16 h ; HPLC检测反应完，将反应完的R-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的溶液减压条件下蒸出70~80% 左右的DMF溶剂，加入300ml甲苯，搅拌均匀，0度保温2 h，过滤，烘干，得R-9- (2-羟丙基） 腺嘌呤粗品136g，粗品收率95. 7%，纯度90. 8%，异构体8. 0%。
[0017] 步骤二：装柱、预处理 称取一 150g的PRP-6A树脂，倒入玻璃层析柱中，用乙醇反复冲洗3次使柱子压实且无 气泡，树脂高度28cm，柱体均匀，再用乙酸乙酯反复冲洗3次，最后用乙醇置换出乙酸乙酯 至测试无乙酸乙酯为止，柱子装好备用。
[0018] 步骤三：上样 将R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤粗品6 g溶于少量水20 ml中，倒入PRP-6A树脂层析柱， 至样品溶液完全吸附到树脂色谱柱上为上样完毕。
[0019] 步骤四：洗脱 配制80%的乙醇水作为洗脱剂，倒入树脂层析柱内，用空气泵加压洗脱，流速控制在 15ml/min，用接收瓶每100mL依次接受洗脱液，HPLC检测每瓶中产品的含量。
[0020] 步骤五：浓缩 将纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤和异构体分别收集在一起，减压条件下浓 缩至干，蒸出的乙醇水回收套用，得到纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤白色结晶粉 末5. Og和纯度大于99%的异构体4. 7g，色谱分离收率为产品92. 9%和异构体97. 9%。
[0021] 步骤六：洗柱 用90%的乙醇水冲洗柱子至滴下液体无产品检出，说明PRP-6A树脂色谱柱已冲洗干 净，可以下一次继续使用。
[0022] 步 骤六：重复步骤三至步骤六，循环过柱6次 其结果如下表格1所示：
注：上面表格1中，纵向为六次色谱分离实验结果，收率为色谱分离收率，纯度为HPLC 面积积分纯度。
[0023] 实施例2 步骤一：获得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品 腺嘌呤投料量改为500 g，操作同实施例1步骤一，得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品 675g，粗品收率95. 1%，纯度91. 9%，异构体7. 8%。
[0024] 步骤二：装柱、预处理 称取I. 5kg的PRP-6A树脂，倒入玻璃层析柱中，用甲醇反复冲洗3次使柱子压实且无 气泡，树脂高度50 cm，柱体均匀，再用乙酸乙酯反复冲洗3次，最后用甲醇置换出乙酸乙酯 至测试无乙酸乙酯为止，色谱柱装好备用。
[0025] 步骤三：上样 将R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤粗品60 g溶于少量水（200ml)中，倒入PRP-6A树脂色谱 柱，至样品溶液完全吸附到树脂色谱柱上为上样完毕。
[0026] 步骤四：洗脱 配制75%的甲醇水作为洗脱剂，倒入树脂色谱柱内，用空气泵加压洗脱，流速控制在 25ml/min，用接收瓶每200ml依次接受洗脱液，HPLC检测每瓶中产品的含量。
[0027] 步骤五：浓缩 将纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤和异构体分别收集在一起，减压条件下浓 缩至干，蒸出的乙醇水回收套用，得到纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤白色结晶粉 末51. 5g和纯度大于99%的异构体4. 7 g，过柱收率为产品92. 9%和异构体97. 9%。
[0028] 步骤六：洗柱 同实施例1步骤六。
[0029] 步骤七：重复步骤三至步骤六，循环过柱6次 其结果如下表格2所示：
注：上面表格2中，纵向为六次色谱分离实验结果，收率为色谱分离收率，纯度为HPLC 面积积分纯度。
[0030] 实施例3 步骤一：获得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品 腺嘌呤投料量改为5 kg，操作同实施例1步骤一，得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品6. 85 kg，粗品收率96. 4%，纯度90. 7%，异构体8. 2%。
[0031] 步骤二：装柱、预处理 PRP-6A树脂质量为25 kg操作步骤同实施例1步骤二。
[0032] 步骤三：上样 上样量为I kg，操作同实施例1步骤三。
[0033] 步骤四：洗脱 配制80%的乙醇水作为洗脱剂，倒入树脂色谱柱内，用空气泵加压洗脱，流速控制在 150ml/min，用接收瓶每500ml依次接受洗脱液，HPLC检测每瓶中产品的含量。
[0034] 步骤五：浓缩 将纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤和异构体分别收集在一起，减压条件下浓 缩至干，蒸出的乙醇水回收套用，得到纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤白色结晶粉 末892 g和纯度大于99%的异构体75 g，过柱收率为产品98. 3%和异构体91. 4%。
[0035] 步骤六：洗柱 同实施例1步骤六。
[0036] 步骤七：重复步骤三至步骤六，循环过柱6次 其结果如下表格3所示：
注：上面表格3中，纵向为六次色谱分离实验结果，收率为色谱分离收率，纯度为HPLC 面积积分纯度。
[0037] 以上所述仅为本发明的较佳的实施例而已，并不用以限制本发明，在此不一一列 举实施例，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改，等同替换，微小改进等，均应包 含在本发明的保护范围内。
【主权项】
1. 一种新的9-(2-羟丙基）腺嘌呤的分离纯化工艺，其特征在于步骤如下： (1) 将反应完的R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤的溶液减压条件下蒸出部分DMF溶剂，加入 有机溶剂，搅拌均匀，〇°C保温2h，过滤得R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤粗品； (2) 称取一定质量的PRP-6A树脂，倒入玻璃层析柱中，用乙醇反复冲洗3次使柱子压实 且无气泡，柱体均匀，再用乙酸乙酯反复冲洗3次，最后用乙醇置换出乙酸乙酯至测试无乙 酸乙酯为止，柱子装好备用； (3) 将R-9- (2-羟丙基）腺嘌呤粗品溶于少量水中，倒入PRP-6A树脂色谱柱，至样品 溶液完全吸附到树脂色谱柱上为上样完毕； (4) 配制70180%的乙醇水作为洗脱剂，倒入树脂色谱柱内，用空气泵加压洗脱，HPLC 检测每瓶中产品的含量； (5) 将纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤和异构体分别收集在一起，减压条件下 浓缩至干，蒸出的乙醇水回收循环套用，得到纯度大于99%的R-9-(2-羟丙基）腺嘌呤白色 结晶粉末和纯度大于99%的异构体； (6) 用90%以上的乙醇水冲洗柱子至滴下液体无产品检出，说明PRP-6A树脂色谱柱已 冲洗干净，可以下一次继续使用。2. 如上述权利要求1步骤（1)中，有机溶剂可以是甲苯、二甲苯等；DMF蒸出体积约为 DMF投料量的70~80%，有机溶剂与残余DMF溶剂体积比为1:4~1:8,优选1:6。3. 如上述权利要求1步骤（2)中，色谱树脂可以PRP-6A树脂或PRP-6B树脂，PRP-6A 树脂质量（g)与粗品质量（g)比为40:1~80~1，优选50:1，装柱溶剂可以是甲醇和乙醇，优 选乙醇，树脂色谱柱高度与上样吸附的树脂高度应大于5:1。4. 如上述权利要求1步骤（3冲粗品质量（g)与水的质量（g)比为1:2~1:8,优选1:3。5. 如上述权利要求1步骤（4)中，洗脱液流速控制在15~150ml/min，接收液每瓶 50~500ml，根据柱子粗细及填料量多少而不同。6. 如上述权利要求1步骤（5)中，洗柱用的溶剂可以是90%以上的甲醇水或乙醇水等。7. 按上述权利要求1得到了纯度大于99%的R-9- (2-羟丙基)腺嘌呤和纯度大于99% 的异构体，总收率达到90%以上，PRP-6A树脂色谱柱可重复循环使用六次或更多次而不影 响分离效果。
【专利摘要】本发明涉及一种新的R-9-（2-羟丙基）腺嘌呤的纯化处理工艺，R-9-（2-羟丙基）腺嘌呤由腺嘌呤和R-碳酸丙烯酯在碱性条件下制得，本发明中将反应后的溶剂DMF减压蒸出套用，向剩余物中加甲苯析出粗品，粗品收率大于90%，然后粗品用PRP-6A树脂色谱分离，洗脱剂为乙醇水，首先洗脱下来的是异构体II，其次洗脱下来的是R-9-（2-羟丙基）腺嘌呤I，分别收集两种产品的洗脱液，减压浓缩蒸干，得白色结晶粉沫R-9-(2-羟丙基)腺嘌呤I，纯度大于99%，分离收率大于90%，异构体II纯度大于99%，分离收率大于90%。本发明工艺处理简单，树脂色谱柱可重复利用多次而不影响分离效果，洗脱剂可反复循环套用，大大降低了分离成本，得到两种产品，产品纯度高，总收率大于80%，产生废水少，适合工业化生产。
【IPC分类】C07D473/34
【公开号】CN104892613
【申请号】CN201510266011
【发明人】王育才, 苏华强, 韩建星, 刘爱香
【申请人】洛阳德胜生物科技股份有限公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月23日
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