一种制备高纯度6’-o-反式桂皮酰梓醇的方法
一种制备高纯度6’-o-反式桂皮酰梓醇的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种用聚酰胺为吸附材料进行常压洗脱制得高纯度6' -0-反式桂皮 酰梓醇的方法，属于医药技术领域。
【背景技术】
[0002] 胡黄连为我国的传统中药，是玄参科植物胡黄连的干燥根茎，应用历史悠久，疗效 确切。主要功效清热，凉血，燥湿。治疳疾，惊痫，泻痢，劳热骨蒸，自汗，盗汗，吐血，衄血，火 目艮，痔瘘，疮疡。6' -0-反式桂皮酰梓醇是胡黄连的主要有效成分之一，具有抗菌、保肝利 胆和保护神经细胞的作用。
[0003] 已有的制备6' -0-反式桂皮酰梓醇的专利有二，其一（专利号：201310618996. 8) 主要技术为采用高压制备液相进行分离制得高纯度的6' -0-反式桂皮酰梓醇，此法上样 量小、效率低、耗材昂贵，增加了 6' -0-反式桂皮酰梓醇的生产成本；另一专利(专利号： 200710164321. 5)所用溶剂为丙酮，丙酮易燃、易挥发，有毒，为后期的残留检查带来麻烦， 同时也不利于工业化生产过程中的劳动保护。本技术采用常压方法，上样量大、成本低、效 率高，采用无毒性溶剂等优点，特别适用于大规模工业化生产。
[0004] 6' -0-反式桂皮酰梓醇的结构式为：
【发明内容】
[0005] 采用专利（专利号：201110400683. 6)所介绍的10-香荚酰梓醇制备的方法制备 10-香荚酰梓醇后所剩的提取物为原料，加适量硅胶拌样，进行硅胶柱层析分离，湿法装柱， 干法上样，用乙酸乙酯为洗脱溶剂洗脱，初期洗脱杂质，继续洗脱可得到纯度不低于70%的 6' -〇-反式桂皮酰梓醇。
[0006] 聚酰胺柱洗脱：将所得的纯度不低于70%的6' -0-反式桂皮酰梓醇转为水液上聚 酰胺柱，用水洗脱，初期洗脱液无6' -0-反式桂皮酰梓醇，继续洗，收集洗脱液即可得到纯 度不低于90%的6' -0-反式桂皮酰梓醇。
[0007] 本发明含量测定用HPLC检测方法为： 标准样品液的配制 精密称取5mg 6' -0-反式桂皮酰梓醇对照品置于50ml的容量瓶中，加水，超声溶解定 容，作为标准样品液，浓度为〇. lmg/ml。
[0008] 测试样品液的配制 精密称取5mg 6'-0_反式桂皮酰梓醇样品置于50ml的容量瓶中，加水，超声溶解定容， 作为测试样品液，浓度为0. lmg/ml。
[0009] 检测条件： 流动相：乙腈一水一冰醋酸（25:75:0. 5)经混合，过滤，脱气后使用；色谱柱：0DS-C18 柱4. 6X250mm，流速：0. 8ml/min，进样体积：20ul，检测波长：282nm，6'-〇-反式桂皮酰梓 醇保留时间：为12. 5-15min。
[0010]
【具体实施方式】： 以下实施例对本发明作具体说明，对本发明的技术方案做进一步描述，但是本发明的 保护范围并不限于这些实施例所包含内容。
[0011] 实施例1。
[0012] 1)装柱：聚酰胺20g，95%乙醇浸泡，除去气泡后装柱，继续用95%乙醇洗脱，洗至 洗脱液澄清透明；再用酸碱交替处理，最后水洗至中性即可。
[0013] 2)上样：取适量硅胶柱处理后的6'-0-反式桂皮酰梓醇转为水液上聚酰胺柱，含 6' -0-反式桂皮酰梓醇0. 5g。
[0014] 3)洗脱：用水为溶剂洗脱，每IOml收集一次，用高效液相跟踪监测，前30ml (第 一个柱床）无6' -0-反式桂皮酰梓醇；40ml - 60ml (第二柱床）洗下6' -0-反式桂皮酰梓 醇，纯度不低于90%，约占上样量的50% ;继续洗直至无6' -0-反式桂皮酰梓醇。
[0015] 4)取步骤3收集的6' -0-反式桂皮酰梓醇不低于90%的流出液回收溶剂，减压 蒸干即得6' -〇-反式桂皮酰梓醇粉末，称重得质量为0. 28g，纯度93%。
[0016] 5)聚酰胺柱再生：用95%乙醇洗，洗至乙醇无色，再用水替换柱中乙醇即可。
[0017] 实施例2。
[0018] 1)装柱：聚酰胺3kg装大柱，95%乙醇浸泡，除去气泡后装柱，继续用95%乙醇洗 脱，洗至洗脱液澄清透明；再用酸碱交替处理，最后水洗至中性备用。
[0019] 2)上样：取适量硅胶柱处理后的6' -0-反式桂皮酰梓醇水液1600ml上聚酰胺 柱，含6' -0-反式桂皮酰梓醇50g。
[0020] 3)洗脱：水为洗脱液洗脱，每800ml收集一次，用高效液相跟踪监测，前8000ml (第一个柱床）无6' -0-反式桂皮酰梓醇；9000ml - 16000ml (第二柱床）洗下6' -0-反式 桂皮酰梓醇，纯度不低于90%，约占上样量的85% ;继续洗直至无6' -0-反式桂皮酰梓醇即 可。
[0021] 4)取步骤3收集的6' -0-反式桂皮酰梓醇不低于90%的流出液回收溶剂，减压 蒸干即得6' -〇-反式桂皮酰梓醇粉末，称重得质量为42. 5g，纯度92%。
[0022] 5)聚酰胺柱再生：用95%乙醇洗，洗至乙醇无色，再用水替换柱中乙醇即可。
【主权项】
1. 常压柱层析制备高纯度6' -O-反式桂皮酰梓醇，其特征在于，常压条件下以制备 10-香荚酰梓醇后所剩的提取物为原料，硅胶柱层析结合聚酰胺柱层析制备含量不低于 90%的高纯度6' -0-反式桂皮酰梓醇。2. 如权利要求1中所述的高纯度6' -0-反式桂皮酰梓醇制备方法，其特征在于，所用 吸附材料为聚酰胺。3. 如权利要求1所述的高纯度6' -0-反式桂皮酰梓醇制备方法，其特征在于，初期采 用硅胶柱层析，洗脱液为乙酸乙酯、无水乙醇或二者一定比例混合。4. 如权利要求1中所述的高纯度6' -0-反式桂皮酰梓醇制备方法，其特征在于，层析 聚酰胺做固定相、水做流动相，进行常压柱层析。5. 如权利要求1中所述的高纯度6' -0-反式桂皮酰梓醇制备方法，其特征在于，所用 聚酰胺为20-100目。6. 如权利要求1中所述的高纯度6' -0-反式桂皮酰梓醇制备方法，其特征在于，每 100mL聚酰胺上样品（按纯品计）5g以下。
【专利摘要】本发明涉及一种高纯度6’-O-反式桂皮酰梓醇的制备方法，所用原料为采用专利（专利号：201110400683.6）“10-香荚酰梓醇制备的方法” 所介绍的制备10-香荚酰梓醇后所剩的提取物，经初步分离后，以硅胶为固定相，用洗脱剂进行洗脱分离，回收溶剂转为水液，以聚酰胺为固定相，水洗脱，即可得纯度不低于90%的6’-O-反式桂皮酰梓醇，拓展了6’-O-反式桂皮酰梓醇的分离提纯方法。本技术采用常压方法，成本低，效率高，特别适用于大规模工业化生产。
【IPC分类】C07H1/06, C07H17/04
【公开号】CN104892699
【申请号】CN201510224528
【发明人】刘文卉, 刘培冉, 杨涛, 贺灵剑, 李啸然, 孙士青
【申请人】济南东源生物医药技术有限公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月5日
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种用聚酰胺为吸附材料进行常压洗脱制得高纯度6' -0-反式桂皮 酰梓醇的方法，属于医药技术领域。
【背景技术】
[0002] 胡黄连为我国的传统中药，是玄参科植物胡黄连的干燥根茎，应用历史悠久，疗效 确切。主要功效清热，凉血，燥湿。治疳疾，惊痫，泻痢，劳热骨蒸，自汗，盗汗，吐血，衄血，火 目艮，痔瘘，疮疡。6' -0-反式桂皮酰梓醇是胡黄连的主要有效成分之一，具有抗菌、保肝利 胆和保护神经细胞的作用。
[0003] 已有的制备6' -0-反式桂皮酰梓醇的专利有二，其一（专利号：201310618996. 8) 主要技术为采用高压制备液相进行分离制得高纯度的6' -0-反式桂皮酰梓醇，此法上样 量小、效率低、耗材昂贵，增加了 6' -0-反式桂皮酰梓醇的生产成本；另一专利(专利号： 200710164321. 5)所用溶剂为丙酮，丙酮易燃、易挥发，有毒，为后期的残留检查带来麻烦， 同时也不利于工业化生产过程中的劳动保护。本技术采用常压方法，上样量大、成本低、效 率高，采用无毒性溶剂等优点，特别适用于大规模工业化生产。
[0004] 6' -0-反式桂皮酰梓醇的结构式为：
【发明内容】
[0005] 采用专利（专利号：201110400683. 6)所介绍的10-香荚酰梓醇制备的方法制备 10-香荚酰梓醇后所剩的提取物为原料，加适量硅胶拌样，进行硅胶柱层析分离，湿法装柱， 干法上样，用乙酸乙酯为洗脱溶剂洗脱，初期洗脱杂质，继续洗脱可得到纯度不低于70%的 6' -〇-反式桂皮酰梓醇。
[0006] 聚酰胺柱洗脱：将所得的纯度不低于70%的6' -0-反式桂皮酰梓醇转为水液上聚 酰胺柱，用水洗脱，初期洗脱液无6' -0-反式桂皮酰梓醇，继续洗，收集洗脱液即可得到纯 度不低于90%的6' -0-反式桂皮酰梓醇。
[0007] 本发明含量测定用HPLC检测方法为： 标准样品液的配制 精密称取5mg 6' -0-反式桂皮酰梓醇对照品置于50ml的容量瓶中，加水，超声溶解定 容，作为标准样品液，浓度为〇. lmg/ml。
[0008] 测试样品液的配制 精密称取5mg 6'-0_反式桂皮酰梓醇样品置于50ml的容量瓶中，加水，超声溶解定容， 作为测试样品液，浓度为0. lmg/ml。
[0009] 检测条件： 流动相：乙腈一水一冰醋酸（25:75:0. 5)经混合，过滤，脱气后使用；色谱柱：0DS-C18 柱4. 6X250mm，流速：0. 8ml/min，进样体积：20ul，检测波长：282nm，6'-〇-反式桂皮酰梓 醇保留时间：为12. 5-15min。
[0010]
【具体实施方式】： 以下实施例对本发明作具体说明，对本发明的技术方案做进一步描述，但是本发明的 保护范围并不限于这些实施例所包含内容。
[0011] 实施例1。
[0012] 1)装柱：聚酰胺20g，95%乙醇浸泡，除去气泡后装柱，继续用95%乙醇洗脱，洗至 洗脱液澄清透明；再用酸碱交替处理，最后水洗至中性即可。
[0013] 2)上样：取适量硅胶柱处理后的6'-0-反式桂皮酰梓醇转为水液上聚酰胺柱，含 6' -0-反式桂皮酰梓醇0. 5g。
[0014] 3)洗脱：用水为溶剂洗脱，每IOml收集一次，用高效液相跟踪监测，前30ml (第 一个柱床）无6' -0-反式桂皮酰梓醇；40ml - 60ml (第二柱床）洗下6' -0-反式桂皮酰梓 醇，纯度不低于90%，约占上样量的50% ;继续洗直至无6' -0-反式桂皮酰梓醇。
[0015] 4)取步骤3收集的6' -0-反式桂皮酰梓醇不低于90%的流出液回收溶剂，减压 蒸干即得6' -〇-反式桂皮酰梓醇粉末，称重得质量为0. 28g，纯度93%。
[0016] 5)聚酰胺柱再生：用95%乙醇洗，洗至乙醇无色，再用水替换柱中乙醇即可。
[0017] 实施例2。
[0018] 1)装柱：聚酰胺3kg装大柱，95%乙醇浸泡，除去气泡后装柱，继续用95%乙醇洗 脱，洗至洗脱液澄清透明；再用酸碱交替处理，最后水洗至中性备用。
[0019] 2)上样：取适量硅胶柱处理后的6' -0-反式桂皮酰梓醇水液1600ml上聚酰胺 柱，含6' -0-反式桂皮酰梓醇50g。
[0020] 3)洗脱：水为洗脱液洗脱，每800ml收集一次，用高效液相跟踪监测，前8000ml (第一个柱床）无6' -0-反式桂皮酰梓醇；9000ml - 16000ml (第二柱床）洗下6' -0-反式 桂皮酰梓醇，纯度不低于90%，约占上样量的85% ;继续洗直至无6' -0-反式桂皮酰梓醇即 可。
[0021] 4)取步骤3收集的6' -0-反式桂皮酰梓醇不低于90%的流出液回收溶剂，减压 蒸干即得6' -〇-反式桂皮酰梓醇粉末，称重得质量为42. 5g，纯度92%。
[0022] 5)聚酰胺柱再生：用95%乙醇洗，洗至乙醇无色，再用水替换柱中乙醇即可。
【主权项】
1. 常压柱层析制备高纯度6' -O-反式桂皮酰梓醇，其特征在于，常压条件下以制备 10-香荚酰梓醇后所剩的提取物为原料，硅胶柱层析结合聚酰胺柱层析制备含量不低于 90%的高纯度6' -0-反式桂皮酰梓醇。2. 如权利要求1中所述的高纯度6' -0-反式桂皮酰梓醇制备方法，其特征在于，所用 吸附材料为聚酰胺。3. 如权利要求1所述的高纯度6' -0-反式桂皮酰梓醇制备方法，其特征在于，初期采 用硅胶柱层析，洗脱液为乙酸乙酯、无水乙醇或二者一定比例混合。4. 如权利要求1中所述的高纯度6' -0-反式桂皮酰梓醇制备方法，其特征在于，层析 聚酰胺做固定相、水做流动相，进行常压柱层析。5. 如权利要求1中所述的高纯度6' -0-反式桂皮酰梓醇制备方法，其特征在于，所用 聚酰胺为20-100目。6. 如权利要求1中所述的高纯度6' -0-反式桂皮酰梓醇制备方法，其特征在于，每 100mL聚酰胺上样品（按纯品计）5g以下。
【专利摘要】本发明涉及一种高纯度6’-O-反式桂皮酰梓醇的制备方法，所用原料为采用专利（专利号：201110400683.6）“10-香荚酰梓醇制备的方法” 所介绍的制备10-香荚酰梓醇后所剩的提取物，经初步分离后，以硅胶为固定相，用洗脱剂进行洗脱分离，回收溶剂转为水液，以聚酰胺为固定相，水洗脱，即可得纯度不低于90%的6’-O-反式桂皮酰梓醇，拓展了6’-O-反式桂皮酰梓醇的分离提纯方法。本技术采用常压方法，成本低，效率高，特别适用于大规模工业化生产。
【IPC分类】C07H1/06, C07H17/04
【公开号】CN104892699
【申请号】CN201510224528
【发明人】刘文卉, 刘培冉, 杨涛, 贺灵剑, 李啸然, 孙士青
【申请人】济南东源生物医药技术有限公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月5日
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