一种莲子直链淀粉的提取纯化方法
一种莲子直链淀粉的提取纯化方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物化学领域，具体涉及一种莲子直链淀粉的提取纯化方法。
【背景技术】
[0002] 莲子是睡莲科莲属（Nelum bonucifera Gaertn)植物的果实和种子的总称，主要 分布在江西、福建、湖南、湖北等地，是我国重要的特产资源，具有丰富的营养保健成分和药 理活性。根据《本草纲目》的记载，莲子具有补中养神、止渴去热、安心止痢、交心肾固精气、 强筋骨、补虚损、利耳目、除寒湿及女人带崩等功效。
[0003] 淀粉是莲子的主要成分，占其干物质的50%以上。同大多数植物的淀粉一样，莲子 淀粉也是由直链淀粉和支链淀粉组成。品种不同、来源不同的莲子，其直链淀粉含量差别较 大。莲子直链淀粉含量是影响莲子吸水性、膨胀性、煮制中固体物质的溶解性、颜色、光泽、 粘性和柔软性的主要因素，也是决定食味品质的重要因素。
[0004] 莲子直链淀粉的分子结构是决定其品质和质量的内在因素，分子结构不同，其品 质和质量也不同。而提取纯化方法是影响莲子直链淀粉的分子结构的重要因素，也是影响 其品质和质量的重要因素。在不破坏莲子直链淀粉分子结构的前提下，研宄莲子直链淀粉 的提取纯化方法，不仅有利于研宄莲子淀粉的组成，而且有利于研宄莲子直链淀粉含量与 莲子品质之间的对应关系，从而为莲子品种的选育、莲子资源的开发利用和莲子质量相关 标准的制定提供理论基础。
[0005] 硕士学位论文《六种莲子淀粉的分离及其品质特性研宄》（陶锦鸿，南京师范大学， 2009)公开了一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，即：称取IOg淀粉过40目筛，放入500mL 烧杯中，加少量无水乙醇和蒸馏水，使样品湿润，在加入〇. 5mol/L的NaOH 350mL，沸水浴 中加热搅拌20~30min至完全分散，冷却后离心（4000r/min，20min)，去沉淀，再以2mol/ L HCl调至中性。加入IOOmL正丁醇和异戊醇（体积比3:1)混合液，然后在沸水浴中加热 搅拌IOmin至溶液透明，冷却至室温，移入4°C冰箱静置24后离心（4000r/min，20min)，得 到的沉淀即为粗直链淀粉（Am)，上清液为粗支链淀粉溶液（Ap)。沉淀中加入200mL正丁醇 饱和水溶液，然后在沸水浴中加热搅拌至溶液分散透明，冷却至室温，在4°C冰箱24h，离心 (4000r/min，20min)，得到沉淀，重复上述操作5次后，收集所得到的沉淀物浸于无水乙醇 中24h，并用无水乙醇洗涤数次，在40°C下干燥，即得直链淀粉（Am)样品。
[0006] 然而，在实际的生产过程中，上述莲子直链淀粉的提取纯化方法的步骤复杂、效率 较低，制备周期长，很难实现规模化生产。
[0007] 因此，在不破坏莲子直链淀粉分子结构的前提下，研宄如何提高莲子直链淀粉的 提取纯化方法的效率，缩短工艺时间，对于莲子直链淀粉的规模化生产具有非常重要的意 义。
【发明内容】
[0008] 为此，本发明所要解决的是现有的莲子直链淀粉的提取纯化方法的步骤复杂、效 率较低、制备周期长、不易实现规模化生产的技术问题，从而提出工艺简单、易实现规模化 生产、产率高、纯度高的一种莲子直链淀粉的提取纯化方法。
[0009] 为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案来实现的：
[0010] 本发明一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0011] (1)称取莲子淀粉10重量份，加入〇. 30-0. 40体积份0. 5-0. 8mol/L的氢氧化钠溶 液，加热搅拌15-25min，至完全分散，冷却至室温；
[0012] (2)将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为4000-18000r/min，离心 时间为15_25min，取上清液，用I. 0-2. Omol/L盐酸调至pH为6. 0-7. 0 ;
[0013] (3)向所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0. 06-0. 10体 积份，加热搅拌10_20min，冷却至室温，2-4°C静置20-30h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进 行离心，离心速度为4000-18000r/min，离心时间为5_15min，得沉淀物A ;
[0014] (4)将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为4000-18000r/ min，离心时间为5-15min，得沉淀物B ;
[0015] (5)将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，加热搅拌10-20min，冷却至室温， 2-4°C静置20-30h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为4000-1800()r/min， 离心时间为5-15min，得沉淀物C ;
[0016] (6)将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，加热搅拌，反复纯化4-6次，得沉淀 物D ;
[0017] (7)将所述沉淀物D用乙醇洗涤2-5次，干燥，即得莲子直链淀粉；
[0018] 所述重量份与体积份的关系为g/L。
[0019] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（2)、步骤（3)、步骤（4)和 步骤（5)的至少一个步骤中，所述离心速度为10000-18000r/min。
[0020] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（1)中，所述氢氧化钠溶 液的浓度为〇· 6mol/L或0· 7mol/L〇
[0021] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（1)、步骤（3)、步骤（5)和 步骤（6)中，所述加热为沸水浴加热。
[0022] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（3)和步骤（5)中，所述静 置的时间为24h。
[0023] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（3)中，所述正丁醇/异戊 醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，所述正丁醇/异戊醇的混合液与所述步骤 (2)制备的反应液的体积比为I :5. 25-6. 125。
[0024] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（7)中，所述干燥采用冷 冻干燥法或真空干燥法。
[0025] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（1)中，所述莲子淀粉通 过如下步骤制得：
[0026] (a)将莲子干燥后，粉碎，过50-300目筛，得莲子粉；
[0027] (b)称取所述莲子粉40重量份，加入0. 1-0. 3体积份0. 05-0. 2mol/L氢氧化钠溶 液，搅拌，静置过夜；
[0028] (c)将所述步骤（b)制备的反应液的上层弃去，下层沉淀用0. 08-0. 12体积份的水 洗涤2-4次，至上层溶液为无色；
[0029] (d)将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为2000-4000r/min，离心时 间为5-15min，将上层溶液弃去，得沉淀物E ;
[0030] (e)将所述沉淀物E用0. 04-0. 06体积份乙醚洗涤2-4次，得沉淀物F ;
[0031] (f)称取10重量份的所述沉淀物F，加入0· 05-0. 2mol/L氢氧化钠溶液0· 04-0. 06 体积份，搅拌，30-70°C加热10_30min，弃去上层溶液；
[0032] (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水0. 04-0. 06体积份，离心，离心速度为 2000-4000r/min，离心时间为5-15min，弃去上层溶液，得沉淀物G ;
[0033] (h)将所述沉淀物G用水洗涤，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，30-50°C干燥， 即得所述莲子淀粉；
[0034] 所述重量份与体积份的关系为g/L。
[0035] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（b)和步骤（f)中，所述氢 氧化钠溶液的浓度为〇. lmol/L。
[0036] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（d)和/或所述步骤（g) 中，所述离心速度为3000r/min。
[0037] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（h)中，所述干燥为减压 干燥。
[0038] 本发明的上述技术方案相比现有技术具有以下优点：
[0039] 根据《玉米直链淀粉的制备及其特性》的记载，⑴在碱性溶液中，淀粉分子上羟 基的质子被解离，淀粉分子带负电，分子间相互排斥，随着碱浓度的增大，这种斥力也相应 增强，最终导致螺旋区的展开甚至分子降解；（2)在高速离心力作用下，使得淀粉分子的构 象尤其是直链淀粉的分子结构发生改变，导致直链淀粉与碘分子的结合能力下降，所以直 链淀粉的蓝值降低。结合《六种莲子淀粉的分离及其品性特性研宄》这篇论文可知，根据 上述技术教导，本领域技术人员形成了一种技术偏见：提高NaOH溶液的浓度和提高离心速 率，将破坏莲子直链淀粉的分子结构，导致直链淀粉与碘分子的结合能力下降，进而导致莲 子直链淀粉的蓝值降低。现有技术中的莲子直链淀粉的提取纯化方法，往往步骤复杂、效率 较低、制备周期长、不易实现规模化生产。
[0040] 本发明莲子直链淀粉的提取纯化方法，申请人克服了上述技术偏见，通过大量的 创造性劳动发现，以干莲子制备所得的莲子淀粉为原料，通过优化离心速率和NaOH溶液的 浓度等，在不破坏莲子直链淀粉分子结构的前提下，提高了效率、缩短了操作时间、 有利于 莲子直链淀粉的规模化生产，而且所提取纯化得到的莲子直链淀粉纯度高（约94% )，可以 作为莲子直链淀粉含量测定方法的标准。
【附图说明】
[0041] 为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合 附图，对本发明作进一步详细的说明，其中：
[0042] 图1是本发明实施例3提取纯化的莲子直链淀粉经加碘显色后的吸收光谱图。
【具体实施方式】
[0043] 1仪器与试剂
[0044] I. 1 仪器
[0045] 离心机日立CR22G III ;真空干燥箱；冷冻干燥机；水浴锅；酸度计；冰箱。
[0046] 1.2 试剂
[0047] 莲子由江西省广昌县白莲科学研宄所提供；
[0048] 氢氧化钠、盐酸、异丙醇、正丁醇、乙醚、碘化钾、碘酸钾、无水乙醇均为市售品，分 析纯；水为蒸馏水。
[0049] 实骀例1
[0050] 碘-莲子直链淀粉的吸收光谱
[0051] 称取实施例3提取纯化的莲子直链淀粉100mg，加入到IOOmL烧杯中，加入95 %乙 醇1.0 mL浸润样品，然后加 1.0 mol/L氢氧化钠溶液9mL，样品在85°C水浴上加热，直到样品 完全分散，冷却并用水稀释定容到IOOmL容量瓶中，剧烈振摇lmin，备用。
[0052] 取上述制备的lmg/mL莲子直链淀粉溶液2mL，加0. 09mol/L氢氧化钠溶液3mL，加 50mL水稀释，再加入lmol/L乙酸溶液ImL和碘试剂lmL，用水定容至100mL，显色lOmin，用 分光光度计扫描500nm-800nm区间的吸收光谱，结果如图1所示。
[0053] 由图1可知，实施例3提取纯化的莲子直链淀粉的最大吸收波长为631nm，与文献 报道的莲子直链淀粉的最大吸收波长一致。这表明，实施例3提取纯化的产物为莲子直链 淀粉。
[0054] 实骀例2
[0055] 莲子直链淀粉含量的测定
[0056] 称取0. 1000 g实施例3提取纯化的莲子直链淀粉，加入0.5mol/L氢氧化钠溶 液10mL，在沸水浴中分散。再加入2mol/L盐酸21. 5mL，在沸水浴中回流水解2h，按GB/ T5513-2008测定还原糖，乘以0. 9即得淀粉含量。
[0057] 经测定，实施例3提取纯化的莲子直链淀粉，以原样计淀粉含量为88. 5%，以干基 计淀粉含量为93. 7 %，其中的粗蛋白、灰分和脂肪含量三项之和小于1 %，纯度较高，可以 作为莲子直链淀粉含量测定方法的标准。
[0058] 实骀例3
[0059] 莲子直链淀粉碘结合量的测定
[0060] 分别取实施例3、对比例1、对比例7和对比例8提取纯化的莲子直链淀粉 0. 1000g，加入至IOOmL容量瓶中，加几滴无水乙醇湿润后，再加入0. 5mol/L氢氧化钠溶液 10mL，置沸水浴完全分散，冷却后加水定容到刻度。吸取5mL (相当于含直链淀粉5mg)分散 液于200mL烧杯中，加85mL水、lmol/L盐酸5mL和0. 4mol/L碘化钾溶液5mL。把烧杯置于 电磁搅拌器上，将铂电极和甘汞电极插入液面下，用碘酸钾标准溶液滴定，每次滴加0. lmL， 加后Imin读取毫伏数。滴定终点用二次微商法计算，计算公式为：直链淀粉碘结合量（％ ) =0· 6346XVX100/m〇
[0061] 式中：m-莲子直链淀粉质量，mg ;V-8. 34X 10_4mol/L碘酸钾溶液滴定体积，mL ; 0. 6346-每毫升8. 34X 10 4mol/L鹏酸钟溶液相当于0. 6346mg的鹏。
[0062] 表1莲子直链淀粉的碘结合量测定结果
[0063]
[0064] 碘结合量的测定结果如表1所示。由表1可知，实施例3提取纯化的莲子直链淀 粉的碘结合量最大，远高于对比例1、7、8中所提取纯化的莲子直链淀粉的碘结合量。这表 明，实施例3的提取纯化方法对莲子直链淀粉的分子结构影响最小。
[0065] 实骀例4
[0066] 莲子直链淀粉蓝值的测定
[0067] 分别取实施例3、对比例1、对比例7和对比例8提取纯化的莲子直链淀粉0. lg，制 成浓度为lmg/mL的溶液。
[0068] 取上述制备的lmg/mL莲子直链淀粉溶液lmL，加35mL水，用0. 05mol/L的盐酸溶 液调节卩!1至3.0，加2%碘-碘化钾0.51^，定容到5〇1^，充分混匀，2〇1^11后用分光光度计 于500nm-700nm扫描，最高峰处的波长为最大吸收波长，该处的吸光度记为Amax。
[0069] 计算公式如下：蓝值=Amax X 4/样品的浓度。式中，样品的浓度的单位为 mg/IOOmL〇
[0070] 表2莲子直链淀粉的蓝值的测定结果
[0071]
[0072] 莲子直链淀粉的蓝值测定4吉果如表12所示。1?表2可知，实施例3提取纯化的莲 子直链淀粉的蓝值最大，远高于对比例1、7、8中所提取纯化的莲子直链淀粉的蓝值。这表 明，实施例3的提取纯化方法对莲子直链淀粉的分子结构影响最小。
[0073] 实验例5
[0074] 莲子直链淀粉吸光度的测定
[0075] 分别取实施例3、对比例1、对比例2、对比例3、对比例4、对比例5、对比例6、对比 例7和对比例8提取纯化的莲子直链淀粉各0. lg，加碘显色后，测定其吸光度，结果如表3 所示。
[0076] 表3莲子直链淀粉的吸光度的测定结果
[0077]
[0079] 由表3可知，实施例3提取纯化的莲子直链淀粉的吸光度最大。这表明，实施例3 的提取纯化方法对莲子直链淀粉的分子结构影响最小。
[0080] 本发明莲子直链淀粉的提取纯化方法，以干莲子制备所得的莲子淀粉为原料，通 过优化离心速率和NaOH溶液的浓度等，在不破坏莲子直链淀粉分子结构的前提下，提高了 效率、缩短了操作时间、有利于莲子直链淀粉的规模化生产，而且所提取纯化得到的莲子直 链淀粉纯度高（约94% )，可以作为莲子直链淀粉含量测定方法的标准。
[0081] 实施例1
[0082] 本实施例一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0083] (a)将莲子干燥后，粉碎，过50目筛，得莲子粉；
[0084] (b)称取所述莲子粉40g，加入0.1 L的0. 2mol/L氢氧化钠溶液，搅拌，静置过夜；
[0085] (c)将所述步骤（b)制备的反应液的上层弃去，下层沉淀用0. 08L的水洗涤4次， 至上层溶液为无色；
[0086] (d)将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为2000r/min，离心时间为 15min，将上层溶液弃去，得沉淀物E ;
[0087] (e)将所述沉淀物E用0. 04L乙醚洗涤4次，得沉淀物F ;
[0088] (f)称取IOg的所述沉淀物F，加入0· 05mol/L氢氧化钠溶液0· 06L，搅拌，30°C加 热30min，弃去上层溶液；
[0089] (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水0. 04L，离心，离心速度为2000r/min， 离心时间为15min，弃去上层溶液，得沉淀物G ;
[0090] (h)将所述沉淀物G用水洗涤，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，30°C减压干 燥，即得所述莲子淀粉；
[0091] (1)称取莲子淀粉10g，加入0. 30L的0. 8mol/L的氢氧化钠溶液，沸水浴加热搅拌 15min，至完全分散，冷却至室温；
[0092] (2)将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为4000r/min，离心时间为 25min，取上清液，用1.0 mol/L盐酸调至pH为6. 0 ;
[0093] (3)向0. 32L所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0. 06L， 所述正丁醇/异戊醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，沸水浴加热搅拌20min， 冷却至室温，2°C静置30h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为4000r/min， 离心时间为15min，得沉淀物A ;
[0094] (4)将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为4000r/min，离心 时间为15min，得沉淀物B ;
[0095] (5)将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌lOmin，冷却至室 温，2°C静置30h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为4000r/min，离心时间 为15min，得沉淀物C ;
[0096] (6)将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌，反复纯化4次，得 沉淀物D ;
[0097] (7)将所述沉淀物D用乙醇洗涤2次，冷冻干燥法干燥，即得莲子直链淀粉。
[0098] 实施例2
[0099] 本实施例一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0100] (a)将莲子干燥后，粉碎，过300目筛，得莲子粉；
[0101] (b)称取所述莲子粉40g，加入0. 3L的0. 05mol/L氢氧化钠溶液，搅拌，静置过夜；
[0102] (c)将所述步骤（b)制备的反应液 的上层弃去，下层沉淀用0. 12L的水洗涤2次， 至上层溶液为无色；
[0103] (d)将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为4000r/min，离心时间为 5min，将上层溶液弃去，得沉淀物E ;
[0104] (e)将所述沉淀物E用0· 06L乙醚洗涤2次，得沉淀物F ;
[0105] (f)称取IOg的所述沉淀物F，加入0· 2mol/L氢氧化钠溶液0· 04L，搅拌，70°C加热 lOmin，弃去上层溶液；
[0106] (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水〇· 06L，离心，离心速度为4000r/min， 离心时间为5min，弃去上层溶液，得沉淀物G ;
[0107] (h)将所述沉淀物G用水洗绦，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，50°C减压干 燥，即得所述莲子淀粉；
[0108] (1)称取莲子淀粉10g，加入0. 40L的0. 5mol/L的氢氧化钠溶液，沸水浴加热搅拌 25min，至完全分散，冷却至室温；
[0109] (2)将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为18000r/min，离心时间为 15min，取上清液，用2. 0mol/L盐酸调至pH为7. 0 ;
[0110] (3)向0. 61L所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0. 10L， 所述正丁醇/异戊醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，沸水浴加热搅拌l〇min， 冷却至室温，4 °C静置20h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为18000r/ min，离心时间为5min，得沉淀物A ;
[0111] (4)将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为18000r/min，离 心时间为5min，得沉淀物B ;
[0112] (5)将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，加热搅拌20min，冷却至室温，4°C 静置20h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为18000r/min，离心时间为 5min，得沉淀物C ;
[0113] (6)将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌，反复纯化6次，得 沉淀物D ;
[0114] (7)将所述沉淀物D用乙醇洗涤5次，冷冻干燥法干燥，即得莲子直链淀粉。
[0115] 实施例3
[0116] 本实施例一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0117] (a)将莲子干燥后，粉碎，过60目筛，得莲子粉；
[0118] (b)称取所述莲子粉40g，加入0· 2L的0· lmol/L氢氧化钠溶液，搅拌，静置过夜；
[0119] (c)将所述步骤（b)制备的反应液的上层弃去，下层沉淀用0.1 L的水洗涤2次，至 上层溶液为无色；
[0120] (d)将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为3000r/min，离心时间为 lOmin，将上层溶液弃去，得沉淀物E ;
[0121] (e)将所述沉淀物E用0. 05L乙醚洗涤3次，得沉淀物F ;
[0122] (f)称取IOg的所述沉淀物F，加入0. lmol/L氢氧化钠溶液0. 05L，搅拌，50°C加热 20min，弃去上层溶液；
[0123] (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水0· 05L，离心，离心速度为3000r/min， 离心时间为lOmin，弃去上层溶液，得沉淀物G ;
[0124] (h)将所述沉淀物G用水洗绦，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，40 °C减压干 燥，即得所述莲子淀粉；
[0125] (1)称取莲子淀粉10g，加入0. 35L的0. 6mol/L的氢氧化钠溶液，沸水浴加热搅拌 20min，至完全分散，冷却至室温；
[0126] (2)将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为7000r/min，离心时间为 20min，取上清液，用I. 5mol/L盐酸调至pH为6. 5 ;
[0127] (3)向0. 46L所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0. 08L， 所述正丁醇/异戊醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，沸水浴加热搅拌15min， 冷却至室温，3 °C静置24h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为16000r/ min，离心时间为10min，得沉淀物A ;
[0128] (4)将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为12000r/min，离 心时间为5min，得沉淀物B ;
[0129] (5)将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌15min，冷却至室 温，3°C静置24h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为16000r/min，离心时 间为10min，得沉淀物C ;
[0130] (6)将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌，反复纯化5次，得 沉淀物D ;
[0131] (7)将所述沉淀物D用乙醇洗涤4次，冷冻干燥法干燥，即得莲子直链淀粉。
[0132] 实施例4
[0133] 本实施例一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0134] (a)将莲子干燥后，粉碎，过60目筛，得莲子粉；
[0135] (b)称取所述莲子粉40g，加入0. 2L的0. lmol/L氢氧化钠溶液，搅拌，静置过夜；
[0136] (c)将所述步骤（b)制备的反应液的上层弃去，下层沉淀用0.1 L的水洗涤2次，至 上层溶液为无色；
[0137] (d)将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为3000r/min，离心时间为 lOmin，将上层溶液弃去，得沉淀物E ;
[0138] (e)将所述沉淀物E用0· 05L乙醚洗涤2次，得沉淀物F ;
[0139] (f)称取IOg的所述沉淀物F，加入0. lmol/L氢氧化钠溶液0. 05L，搅拌，50°C加热 20min，弃去上层溶液；
[0140] (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水0. 05L，离心，离心速度为3000r/min， 离心时间为lOmin，弃去上层溶液，得沉淀物G ;
[0141] (h)将所述沉淀物G用水洗绦，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，40 °C减压干 燥，即得所述莲子淀粉；
[0142] (1)称取莲子淀粉10g，加入0. 35L的0. 6mol/L的氢氧化钠溶液，沸水浴加热搅拌 20min，至完全分散，冷却至室温；
[0143] (2)将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为18000r/min，离心时间为 20min，取上清液，用I. 5mol/L盐酸调至pH为6. 5 ;
[0144] (3)向0. 46L所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0. 08L， 所述正丁醇/异戊醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，沸水浴加热搅拌15min， 冷却至室温，3 °C静置24h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为18000r/ min，离心时间为10min，得沉淀物A ;
[0145] (4)将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为18000r/min，离 心时间为5min，得沉淀物B ;
[0146] (5)将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌15min，冷却至室 温，3°C静置24h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为18000r/min，离心时 间为10min，得沉淀物C ;
[0147] (6)将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌，反复纯化5次，得 沉淀物D ;
[0148] (7)将所述沉淀物D用乙醇洗涤4次，冷冻干燥法干燥，即得莲子直链淀粉。
[0149] 实施例5
[0150] 本实施例一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0151] (a)将莲子干燥后，粉碎，过60目筛，得莲子粉；
[0152] (b)称取所述莲子粉40g，加入0. 2L的0. lmol/L氢氧化钠溶液，搅拌，静置过夜；
[0153] (c)将所述步骤（b)制备的反应液的上层弃去，下层沉淀用0.1 L的水洗涤2次，至 上层溶液为无色；
[0154] (d)将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为3000r/min，离心时间为 10min，将上层溶液弃去，得沉淀物E ;
[0155] (e)将所述沉淀物E用0. 05L乙醚洗涤2次，得沉淀物F ;
[0156] (f)称取IOg的所述沉淀物F，加入0. lmol/L氢氧化钠溶液0. 05L，搅拌，50°C加热 20min，弃去上层溶液；
[0157] (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水0. 05L，离心，离心速度为3000r/min， 离心时间为lOmin，弃去上层溶液，得沉淀物G ;
[0158] (h)将所述沉淀物G用水洗绦，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，40°C减压干 燥，即得所述莲子淀粉；
[0159] (1)称取莲子淀粉10g，加入0. 35L的0. 6mol/L的氢氧化钠溶液，沸水浴加热搅拌 20min，至完全分散，冷却至室温 ；
[0160] (2)将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为10000r/min，离心时间为 20min，取上清液，用I. 5mol/L盐酸调至pH为6. 5 ;
[0161] (3)向0. 46L所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0. 08L， 所述正丁醇/异戊醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，沸水浴加热搅拌15min， 冷却至室温，3 °C静置24h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为10000r/ min，离心时间为10min，得沉淀物A ;
[0162] (4)将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为10000r/min，离 心时间为5min，得沉淀物B ;
[0163] (5)将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌15min，冷却至室 温，3°C静置24h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为10000r/min，离心时 间为10min，得沉淀物C ;
[0164] (6)将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌，反复纯化5次，得 沉淀物D ;
[0165] (7)将所述沉淀物D用乙醇洗涤4次，冷冻干燥法干燥，即得莲子直链淀粉。
[0166] 对比例1
[0167] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（1)中氢氧化钠溶液的浓度为〇.7mol/L。
[0168] 对比例2
[0169] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（7)中采用真空干燥法干燥。
[0170] 对比例3
[0171] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（2)、步骤（3)、步骤（4)和步骤（5)中，离 心速度均为3000r/min。
[0172] 对比例4
[0173] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（2)、步骤（3)、步骤（4)和步骤（5)中，离 心速度均为4000r/min。
[0174] 对比例5
[0175] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（2)、步骤（3)、步骤（4)和步骤（5)中，离 心速度均为5000r/min。
[0176] 对比例6
[0177] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（2)、步骤（3)、步骤（4)和步骤（5)中，离 心速度均为16000r/min。
[0178] 对比例7
[0179] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（1)中氢氧化钠溶液的浓度为〇.4mol/L。
[0180] 对比例8
[0181] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（1)中氢氧化钠溶液的浓度为〇.5mol/L。
[0182] 显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对 于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或 变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或 变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
【主权项】
1. 一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 称取莲子淀粉10重量份，加入0. 30-0. 40体积份0. 5-0. 8mol/L的氢氧化钠溶液， 加热搅拌15-25min，至完全分散，冷却至室温； (2) 将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为4000-18000r/min，离心时间 为15-25min，取上清液，用L0-2.Omol/L盐酸调至pH为6. 0-7. 0 ; (3) 向所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0.06-0. 10体积份， 加热搅拌10_20min，冷却至室温，2-4°C静置20-30h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离 心，离心速度为4000-18000r/min，离心时间为5_15min，得沉淀物A; (4) 将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为4000-18000r/min，离 心时间为5-15min，得沉淀物B; (5) 将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，加热搅拌10-20min，冷却至室温，2-4°C 静置20-30h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为4000-1800()r/min，离心 时间为5-15min，得沉淀物C; (6) 将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，加热搅拌，反复纯化4-6次，得沉淀物 D； (7) 将所述沉淀物D用乙醇洗涤2-5次，干燥，即得莲子直链淀粉； 所述重量份与体积份的关系为g/L。2. 根据权利要求1所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤（2)、 步骤（3)、步骤（4)和步骤（5)的至少一个步骤中，所述离心速度为10000-18000r/min。3. 根据权利要求1或2所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤 (1)中，所述氢氧化钠溶液的浓度为〇. 6mol/L或0. 7mol/L。4. 根据权利要求1-3任一项所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述 步骤（1)、步骤（3)、步骤（5)和步骤(6)中，所述加热为沸水浴加热。5. 根据权利要求1-4任一项所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述 步骤（3)和步骤（5)中，所述静置的时间为24h。6. 根据权利要求1-5任一项所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述 步骤（3)中，所述正丁醇/异戊醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，所述正丁醇 /异戊醇的混合液与所述步骤（2)制备的反应液的体积比为I:5. 25-6. 125。7. 根据权利要求1-6任一项所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述 步骤（7)中，所述干燥采用冷冻干燥法或真空干燥法。8. 根据权利要求1-7任一项所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述 步骤（1)中，所述莲子淀粉通过如下步骤制得： (a) 将莲子干燥后，粉碎，过50-300目筛，得莲子粉； (b) 称取所述莲子粉40重量份，加入0. 1-0. 3体积份0. 05-0. 2mol/L氢氧化钠溶液，搅 拌，静置过夜； (c) 将所述步骤（b)制备的反应液的上层弃去，下层沉淀用0. 08-0. 12体积份的水洗涤 2-4次，至上层溶液为无色； (d) 将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为2000-4000r/min，离心时间为 5-15min，将上层溶液弃去，得沉淀物E; (e) 将所述沉淀物E用0. 04-0. 06体积份乙醚洗涤2-4次，得沉淀物F; (f) 称取10重量份的所述沉淀物F，加入0. 05-0. 2mol/L氢氧化钠溶液0. 04-0. 06体 积份，搅拌，30-70°C加热10_30min，弃去上层溶液； (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水0.04-0. 06体积份，离心，离心速度为 2000-4000r/min，离心时间为5-15min，弃去上层溶液，得沉淀物G; (h) 将所述沉淀物G用水洗涤，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，30-50°C干燥，即得 所述莲子淀粉； 所述重量份与体积份的关系为g/L。9. 根据权利要求8所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤（b)和 步骤（f)中，所述氢氧化钠溶液的浓度为〇.lmol/L。10. 根据权利要求8或9所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤 (d)和/或所述步骤（g)中，所述离心速度为3000r/min;所述步骤（h)中，所述干燥为减压 干燥。
【专利摘要】本发明属于生物化学领域，具体涉及莲子直链淀粉的提取纯化方法。本发明所要解决的是现有的莲子直链淀粉的提取纯化方法的步骤复杂、效率较低、制备周期长、不易实现规模化生产的技术问题，从而提出一种工艺简单、易实现规模化生产、产率高、纯度高的莲子直链淀粉的提取纯化方法。本发明莲子直链淀粉的提取纯化方法，以干莲子制备所得的莲子淀粉为原料，通过优化离心速率和NaOH溶液的浓度等，在不破坏莲子直链淀粉分子结构的前提下，提高了效率、缩短了操作时间、有利于莲子直链淀粉的规模化生产，而且所提取纯化得到的莲子直链淀粉纯度高(约94％)，可以作为莲子直链淀粉含量测定方法的标准。
【IPC分类】C08B30/20
【公开号】CN104892777
【申请号】CN201510263729
【发明人】戴廷灿, 涂田华, 陆文英, 李伟红, 董秋洪, 廖且根, 魏爱花, 杨良波, 谢克强
【申请人】江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月22日
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物化学领域，具体涉及一种莲子直链淀粉的提取纯化方法。
【背景技术】
[0002] 莲子是睡莲科莲属（Nelum bonucifera Gaertn)植物的果实和种子的总称，主要 分布在江西、福建、湖南、湖北等地，是我国重要的特产资源，具有丰富的营养保健成分和药 理活性。根据《本草纲目》的记载，莲子具有补中养神、止渴去热、安心止痢、交心肾固精气、 强筋骨、补虚损、利耳目、除寒湿及女人带崩等功效。
[0003] 淀粉是莲子的主要成分，占其干物质的50%以上。同大多数植物的淀粉一样，莲子 淀粉也是由直链淀粉和支链淀粉组成。品种不同、来源不同的莲子，其直链淀粉含量差别较 大。莲子直链淀粉含量是影响莲子吸水性、膨胀性、煮制中固体物质的溶解性、颜色、光泽、 粘性和柔软性的主要因素，也是决定食味品质的重要因素。
[0004] 莲子直链淀粉的分子结构是决定其品质和质量的内在因素，分子结构不同，其品 质和质量也不同。而提取纯化方法是影响莲子直链淀粉的分子结构的重要因素，也是影响 其品质和质量的重要因素。在不破坏莲子直链淀粉分子结构的前提下，研宄莲子直链淀粉 的提取纯化方法，不仅有利于研宄莲子淀粉的组成，而且有利于研宄莲子直链淀粉含量与 莲子品质之间的对应关系，从而为莲子品种的选育、莲子资源的开发利用和莲子质量相关 标准的制定提供理论基础。
[0005] 硕士学位论文《六种莲子淀粉的分离及其品质特性研宄》（陶锦鸿，南京师范大学， 2009)公开了一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，即：称取IOg淀粉过40目筛，放入500mL 烧杯中，加少量无水乙醇和蒸馏水，使样品湿润，在加入〇. 5mol/L的NaOH 350mL，沸水浴 中加热搅拌20~30min至完全分散，冷却后离心（4000r/min，20min)，去沉淀，再以2mol/ L HCl调至中性。加入IOOmL正丁醇和异戊醇（体积比3:1)混合液，然后在沸水浴中加热 搅拌IOmin至溶液透明，冷却至室温，移入4°C冰箱静置24后离心（4000r/min，20min)，得 到的沉淀即为粗直链淀粉（Am)，上清液为粗支链淀粉溶液（Ap)。沉淀中加入200mL正丁醇 饱和水溶液，然后在沸水浴中加热搅拌至溶液分散透明，冷却至室温，在4°C冰箱24h，离心 (4000r/min，20min)，得到沉淀，重复上述操作5次后，收集所得到的沉淀物浸于无水乙醇 中24h，并用无水乙醇洗涤数次，在40°C下干燥，即得直链淀粉（Am)样品。
[0006] 然而，在实际的生产过程中，上述莲子直链淀粉的提取纯化方法的步骤复杂、效率 较低，制备周期长，很难实现规模化生产。
[0007] 因此，在不破坏莲子直链淀粉分子结构的前提下，研宄如何提高莲子直链淀粉的 提取纯化方法的效率，缩短工艺时间，对于莲子直链淀粉的规模化生产具有非常重要的意 义。
【发明内容】
[0008] 为此，本发明所要解决的是现有的莲子直链淀粉的提取纯化方法的步骤复杂、效 率较低、制备周期长、不易实现规模化生产的技术问题，从而提出工艺简单、易实现规模化 生产、产率高、纯度高的一种莲子直链淀粉的提取纯化方法。
[0009] 为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案来实现的：
[0010] 本发明一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0011] (1)称取莲子淀粉10重量份，加入〇. 30-0. 40体积份0. 5-0. 8mol/L的氢氧化钠溶 液，加热搅拌15-25min，至完全分散，冷却至室温；
[0012] (2)将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为4000-18000r/min，离心 时间为15_25min，取上清液，用I. 0-2. Omol/L盐酸调至pH为6. 0-7. 0 ;
[0013] (3)向所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0. 06-0. 10体 积份，加热搅拌10_20min，冷却至室温，2-4°C静置20-30h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进 行离心，离心速度为4000-18000r/min，离心时间为5_15min，得沉淀物A ;
[0014] (4)将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为4000-18000r/ min，离心时间为5-15min，得沉淀物B ;
[0015] (5)将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，加热搅拌10-20min，冷却至室温， 2-4°C静置20-30h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为4000-1800()r/min， 离心时间为5-15min，得沉淀物C ;
[0016] (6)将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，加热搅拌，反复纯化4-6次，得沉淀 物D ;
[0017] (7)将所述沉淀物D用乙醇洗涤2-5次，干燥，即得莲子直链淀粉；
[0018] 所述重量份与体积份的关系为g/L。
[0019] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（2)、步骤（3)、步骤（4)和 步骤（5)的至少一个步骤中，所述离心速度为10000-18000r/min。
[0020] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（1)中，所述氢氧化钠溶 液的浓度为〇· 6mol/L或0· 7mol/L〇
[0021] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（1)、步骤（3)、步骤（5)和 步骤（6)中，所述加热为沸水浴加热。
[0022] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（3)和步骤（5)中，所述静 置的时间为24h。
[0023] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（3)中，所述正丁醇/异戊 醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，所述正丁醇/异戊醇的混合液与所述步骤 (2)制备的反应液的体积比为I :5. 25-6. 125。
[0024] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（7)中，所述干燥采用冷 冻干燥法或真空干燥法。
[0025] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（1)中，所述莲子淀粉通 过如下步骤制得：
[0026] (a)将莲子干燥后，粉碎，过50-300目筛，得莲子粉；
[0027] (b)称取所述莲子粉40重量份，加入0. 1-0. 3体积份0. 05-0. 2mol/L氢氧化钠溶 液，搅拌，静置过夜；
[0028] (c)将所述步骤（b)制备的反应液的上层弃去，下层沉淀用0. 08-0. 12体积份的水 洗涤2-4次，至上层溶液为无色；
[0029] (d)将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为2000-4000r/min，离心时 间为5-15min，将上层溶液弃去，得沉淀物E ;
[0030] (e)将所述沉淀物E用0. 04-0. 06体积份乙醚洗涤2-4次，得沉淀物F ;
[0031] (f)称取10重量份的所述沉淀物F，加入0· 05-0. 2mol/L氢氧化钠溶液0· 04-0. 06 体积份，搅拌，30-70°C加热10_30min，弃去上层溶液；
[0032] (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水0. 04-0. 06体积份，离心，离心速度为 2000-4000r/min，离心时间为5-15min，弃去上层溶液，得沉淀物G ;
[0033] (h)将所述沉淀物G用水洗涤，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，30-50°C干燥， 即得所述莲子淀粉；
[0034] 所述重量份与体积份的关系为g/L。
[0035] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（b)和步骤（f)中，所述氢 氧化钠溶液的浓度为〇. lmol/L。
[0036] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（d)和/或所述步骤（g) 中，所述离心速度为3000r/min。
[0037] 本发明上述莲子直链淀粉的提取纯化方法中，所述步骤（h)中，所述干燥为减压 干燥。
[0038] 本发明的上述技术方案相比现有技术具有以下优点：
[0039] 根据《玉米直链淀粉的制备及其特性》的记载，⑴在碱性溶液中，淀粉分子上羟 基的质子被解离，淀粉分子带负电，分子间相互排斥，随着碱浓度的增大，这种斥力也相应 增强，最终导致螺旋区的展开甚至分子降解；（2)在高速离心力作用下，使得淀粉分子的构 象尤其是直链淀粉的分子结构发生改变，导致直链淀粉与碘分子的结合能力下降，所以直 链淀粉的蓝值降低。结合《六种莲子淀粉的分离及其品性特性研宄》这篇论文可知，根据 上述技术教导，本领域技术人员形成了一种技术偏见：提高NaOH溶液的浓度和提高离心速 率，将破坏莲子直链淀粉的分子结构，导致直链淀粉与碘分子的结合能力下降，进而导致莲 子直链淀粉的蓝值降低。现有技术中的莲子直链淀粉的提取纯化方法，往往步骤复杂、效率 较低、制备周期长、不易实现规模化生产。
[0040] 本发明莲子直链淀粉的提取纯化方法，申请人克服了上述技术偏见，通过大量的 创造性劳动发现，以干莲子制备所得的莲子淀粉为原料，通过优化离心速率和NaOH溶液的 浓度等，在不破坏莲子直链淀粉分子结构的前提下，提高了效率、缩短了操作时间、 有利于 莲子直链淀粉的规模化生产，而且所提取纯化得到的莲子直链淀粉纯度高（约94% )，可以 作为莲子直链淀粉含量测定方法的标准。
【附图说明】
[0041] 为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合 附图，对本发明作进一步详细的说明，其中：
[0042] 图1是本发明实施例3提取纯化的莲子直链淀粉经加碘显色后的吸收光谱图。
【具体实施方式】
[0043] 1仪器与试剂
[0044] I. 1 仪器
[0045] 离心机日立CR22G III ;真空干燥箱；冷冻干燥机；水浴锅；酸度计；冰箱。
[0046] 1.2 试剂
[0047] 莲子由江西省广昌县白莲科学研宄所提供；
[0048] 氢氧化钠、盐酸、异丙醇、正丁醇、乙醚、碘化钾、碘酸钾、无水乙醇均为市售品，分 析纯；水为蒸馏水。
[0049] 实骀例1
[0050] 碘-莲子直链淀粉的吸收光谱
[0051] 称取实施例3提取纯化的莲子直链淀粉100mg，加入到IOOmL烧杯中，加入95 %乙 醇1.0 mL浸润样品，然后加 1.0 mol/L氢氧化钠溶液9mL，样品在85°C水浴上加热，直到样品 完全分散，冷却并用水稀释定容到IOOmL容量瓶中，剧烈振摇lmin，备用。
[0052] 取上述制备的lmg/mL莲子直链淀粉溶液2mL，加0. 09mol/L氢氧化钠溶液3mL，加 50mL水稀释，再加入lmol/L乙酸溶液ImL和碘试剂lmL，用水定容至100mL，显色lOmin，用 分光光度计扫描500nm-800nm区间的吸收光谱，结果如图1所示。
[0053] 由图1可知，实施例3提取纯化的莲子直链淀粉的最大吸收波长为631nm，与文献 报道的莲子直链淀粉的最大吸收波长一致。这表明，实施例3提取纯化的产物为莲子直链 淀粉。
[0054] 实骀例2
[0055] 莲子直链淀粉含量的测定
[0056] 称取0. 1000 g实施例3提取纯化的莲子直链淀粉，加入0.5mol/L氢氧化钠溶 液10mL，在沸水浴中分散。再加入2mol/L盐酸21. 5mL，在沸水浴中回流水解2h，按GB/ T5513-2008测定还原糖，乘以0. 9即得淀粉含量。
[0057] 经测定，实施例3提取纯化的莲子直链淀粉，以原样计淀粉含量为88. 5%，以干基 计淀粉含量为93. 7 %，其中的粗蛋白、灰分和脂肪含量三项之和小于1 %，纯度较高，可以 作为莲子直链淀粉含量测定方法的标准。
[0058] 实骀例3
[0059] 莲子直链淀粉碘结合量的测定
[0060] 分别取实施例3、对比例1、对比例7和对比例8提取纯化的莲子直链淀粉 0. 1000g，加入至IOOmL容量瓶中，加几滴无水乙醇湿润后，再加入0. 5mol/L氢氧化钠溶液 10mL，置沸水浴完全分散，冷却后加水定容到刻度。吸取5mL (相当于含直链淀粉5mg)分散 液于200mL烧杯中，加85mL水、lmol/L盐酸5mL和0. 4mol/L碘化钾溶液5mL。把烧杯置于 电磁搅拌器上，将铂电极和甘汞电极插入液面下，用碘酸钾标准溶液滴定，每次滴加0. lmL， 加后Imin读取毫伏数。滴定终点用二次微商法计算，计算公式为：直链淀粉碘结合量（％ ) =0· 6346XVX100/m〇
[0061] 式中：m-莲子直链淀粉质量，mg ;V-8. 34X 10_4mol/L碘酸钾溶液滴定体积，mL ; 0. 6346-每毫升8. 34X 10 4mol/L鹏酸钟溶液相当于0. 6346mg的鹏。
[0062] 表1莲子直链淀粉的碘结合量测定结果
[0063]
[0064] 碘结合量的测定结果如表1所示。由表1可知，实施例3提取纯化的莲子直链淀 粉的碘结合量最大，远高于对比例1、7、8中所提取纯化的莲子直链淀粉的碘结合量。这表 明，实施例3的提取纯化方法对莲子直链淀粉的分子结构影响最小。
[0065] 实骀例4
[0066] 莲子直链淀粉蓝值的测定
[0067] 分别取实施例3、对比例1、对比例7和对比例8提取纯化的莲子直链淀粉0. lg，制 成浓度为lmg/mL的溶液。
[0068] 取上述制备的lmg/mL莲子直链淀粉溶液lmL，加35mL水，用0. 05mol/L的盐酸溶 液调节卩!1至3.0，加2%碘-碘化钾0.51^，定容到5〇1^，充分混匀，2〇1^11后用分光光度计 于500nm-700nm扫描，最高峰处的波长为最大吸收波长，该处的吸光度记为Amax。
[0069] 计算公式如下：蓝值=Amax X 4/样品的浓度。式中，样品的浓度的单位为 mg/IOOmL〇
[0070] 表2莲子直链淀粉的蓝值的测定结果
[0071]
[0072] 莲子直链淀粉的蓝值测定4吉果如表12所示。1?表2可知，实施例3提取纯化的莲 子直链淀粉的蓝值最大，远高于对比例1、7、8中所提取纯化的莲子直链淀粉的蓝值。这表 明，实施例3的提取纯化方法对莲子直链淀粉的分子结构影响最小。
[0073] 实验例5
[0074] 莲子直链淀粉吸光度的测定
[0075] 分别取实施例3、对比例1、对比例2、对比例3、对比例4、对比例5、对比例6、对比 例7和对比例8提取纯化的莲子直链淀粉各0. lg，加碘显色后，测定其吸光度，结果如表3 所示。
[0076] 表3莲子直链淀粉的吸光度的测定结果
[0077]
[0079] 由表3可知，实施例3提取纯化的莲子直链淀粉的吸光度最大。这表明，实施例3 的提取纯化方法对莲子直链淀粉的分子结构影响最小。
[0080] 本发明莲子直链淀粉的提取纯化方法，以干莲子制备所得的莲子淀粉为原料，通 过优化离心速率和NaOH溶液的浓度等，在不破坏莲子直链淀粉分子结构的前提下，提高了 效率、缩短了操作时间、有利于莲子直链淀粉的规模化生产，而且所提取纯化得到的莲子直 链淀粉纯度高（约94% )，可以作为莲子直链淀粉含量测定方法的标准。
[0081] 实施例1
[0082] 本实施例一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0083] (a)将莲子干燥后，粉碎，过50目筛，得莲子粉；
[0084] (b)称取所述莲子粉40g，加入0.1 L的0. 2mol/L氢氧化钠溶液，搅拌，静置过夜；
[0085] (c)将所述步骤（b)制备的反应液的上层弃去，下层沉淀用0. 08L的水洗涤4次， 至上层溶液为无色；
[0086] (d)将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为2000r/min，离心时间为 15min，将上层溶液弃去，得沉淀物E ;
[0087] (e)将所述沉淀物E用0. 04L乙醚洗涤4次，得沉淀物F ;
[0088] (f)称取IOg的所述沉淀物F，加入0· 05mol/L氢氧化钠溶液0· 06L，搅拌，30°C加 热30min，弃去上层溶液；
[0089] (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水0. 04L，离心，离心速度为2000r/min， 离心时间为15min，弃去上层溶液，得沉淀物G ;
[0090] (h)将所述沉淀物G用水洗涤，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，30°C减压干 燥，即得所述莲子淀粉；
[0091] (1)称取莲子淀粉10g，加入0. 30L的0. 8mol/L的氢氧化钠溶液，沸水浴加热搅拌 15min，至完全分散，冷却至室温；
[0092] (2)将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为4000r/min，离心时间为 25min，取上清液，用1.0 mol/L盐酸调至pH为6. 0 ;
[0093] (3)向0. 32L所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0. 06L， 所述正丁醇/异戊醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，沸水浴加热搅拌20min， 冷却至室温，2°C静置30h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为4000r/min， 离心时间为15min，得沉淀物A ;
[0094] (4)将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为4000r/min，离心 时间为15min，得沉淀物B ;
[0095] (5)将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌lOmin，冷却至室 温，2°C静置30h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为4000r/min，离心时间 为15min，得沉淀物C ;
[0096] (6)将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌，反复纯化4次，得 沉淀物D ;
[0097] (7)将所述沉淀物D用乙醇洗涤2次，冷冻干燥法干燥，即得莲子直链淀粉。
[0098] 实施例2
[0099] 本实施例一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0100] (a)将莲子干燥后，粉碎，过300目筛，得莲子粉；
[0101] (b)称取所述莲子粉40g，加入0. 3L的0. 05mol/L氢氧化钠溶液，搅拌，静置过夜；
[0102] (c)将所述步骤（b)制备的反应液 的上层弃去，下层沉淀用0. 12L的水洗涤2次， 至上层溶液为无色；
[0103] (d)将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为4000r/min，离心时间为 5min，将上层溶液弃去，得沉淀物E ;
[0104] (e)将所述沉淀物E用0· 06L乙醚洗涤2次，得沉淀物F ;
[0105] (f)称取IOg的所述沉淀物F，加入0· 2mol/L氢氧化钠溶液0· 04L，搅拌，70°C加热 lOmin，弃去上层溶液；
[0106] (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水〇· 06L，离心，离心速度为4000r/min， 离心时间为5min，弃去上层溶液，得沉淀物G ;
[0107] (h)将所述沉淀物G用水洗绦，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，50°C减压干 燥，即得所述莲子淀粉；
[0108] (1)称取莲子淀粉10g，加入0. 40L的0. 5mol/L的氢氧化钠溶液，沸水浴加热搅拌 25min，至完全分散，冷却至室温；
[0109] (2)将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为18000r/min，离心时间为 15min，取上清液，用2. 0mol/L盐酸调至pH为7. 0 ;
[0110] (3)向0. 61L所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0. 10L， 所述正丁醇/异戊醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，沸水浴加热搅拌l〇min， 冷却至室温，4 °C静置20h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为18000r/ min，离心时间为5min，得沉淀物A ;
[0111] (4)将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为18000r/min，离 心时间为5min，得沉淀物B ;
[0112] (5)将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，加热搅拌20min，冷却至室温，4°C 静置20h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为18000r/min，离心时间为 5min，得沉淀物C ;
[0113] (6)将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌，反复纯化6次，得 沉淀物D ;
[0114] (7)将所述沉淀物D用乙醇洗涤5次，冷冻干燥法干燥，即得莲子直链淀粉。
[0115] 实施例3
[0116] 本实施例一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0117] (a)将莲子干燥后，粉碎，过60目筛，得莲子粉；
[0118] (b)称取所述莲子粉40g，加入0· 2L的0· lmol/L氢氧化钠溶液，搅拌，静置过夜；
[0119] (c)将所述步骤（b)制备的反应液的上层弃去，下层沉淀用0.1 L的水洗涤2次，至 上层溶液为无色；
[0120] (d)将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为3000r/min，离心时间为 lOmin，将上层溶液弃去，得沉淀物E ;
[0121] (e)将所述沉淀物E用0. 05L乙醚洗涤3次，得沉淀物F ;
[0122] (f)称取IOg的所述沉淀物F，加入0. lmol/L氢氧化钠溶液0. 05L，搅拌，50°C加热 20min，弃去上层溶液；
[0123] (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水0· 05L，离心，离心速度为3000r/min， 离心时间为lOmin，弃去上层溶液，得沉淀物G ;
[0124] (h)将所述沉淀物G用水洗绦，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，40 °C减压干 燥，即得所述莲子淀粉；
[0125] (1)称取莲子淀粉10g，加入0. 35L的0. 6mol/L的氢氧化钠溶液，沸水浴加热搅拌 20min，至完全分散，冷却至室温；
[0126] (2)将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为7000r/min，离心时间为 20min，取上清液，用I. 5mol/L盐酸调至pH为6. 5 ;
[0127] (3)向0. 46L所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0. 08L， 所述正丁醇/异戊醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，沸水浴加热搅拌15min， 冷却至室温，3 °C静置24h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为16000r/ min，离心时间为10min，得沉淀物A ;
[0128] (4)将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为12000r/min，离 心时间为5min，得沉淀物B ;
[0129] (5)将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌15min，冷却至室 温，3°C静置24h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为16000r/min，离心时 间为10min，得沉淀物C ;
[0130] (6)将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌，反复纯化5次，得 沉淀物D ;
[0131] (7)将所述沉淀物D用乙醇洗涤4次，冷冻干燥法干燥，即得莲子直链淀粉。
[0132] 实施例4
[0133] 本实施例一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0134] (a)将莲子干燥后，粉碎，过60目筛，得莲子粉；
[0135] (b)称取所述莲子粉40g，加入0. 2L的0. lmol/L氢氧化钠溶液，搅拌，静置过夜；
[0136] (c)将所述步骤（b)制备的反应液的上层弃去，下层沉淀用0.1 L的水洗涤2次，至 上层溶液为无色；
[0137] (d)将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为3000r/min，离心时间为 lOmin，将上层溶液弃去，得沉淀物E ;
[0138] (e)将所述沉淀物E用0· 05L乙醚洗涤2次，得沉淀物F ;
[0139] (f)称取IOg的所述沉淀物F，加入0. lmol/L氢氧化钠溶液0. 05L，搅拌，50°C加热 20min，弃去上层溶液；
[0140] (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水0. 05L，离心，离心速度为3000r/min， 离心时间为lOmin，弃去上层溶液，得沉淀物G ;
[0141] (h)将所述沉淀物G用水洗绦，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，40 °C减压干 燥，即得所述莲子淀粉；
[0142] (1)称取莲子淀粉10g，加入0. 35L的0. 6mol/L的氢氧化钠溶液，沸水浴加热搅拌 20min，至完全分散，冷却至室温；
[0143] (2)将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为18000r/min，离心时间为 20min，取上清液，用I. 5mol/L盐酸调至pH为6. 5 ;
[0144] (3)向0. 46L所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0. 08L， 所述正丁醇/异戊醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，沸水浴加热搅拌15min， 冷却至室温，3 °C静置24h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为18000r/ min，离心时间为10min，得沉淀物A ;
[0145] (4)将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为18000r/min，离 心时间为5min，得沉淀物B ;
[0146] (5)将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌15min，冷却至室 温，3°C静置24h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为18000r/min，离心时 间为10min，得沉淀物C ;
[0147] (6)将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌，反复纯化5次，得 沉淀物D ;
[0148] (7)将所述沉淀物D用乙醇洗涤4次，冷冻干燥法干燥，即得莲子直链淀粉。
[0149] 实施例5
[0150] 本实施例一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0151] (a)将莲子干燥后，粉碎，过60目筛，得莲子粉；
[0152] (b)称取所述莲子粉40g，加入0. 2L的0. lmol/L氢氧化钠溶液，搅拌，静置过夜；
[0153] (c)将所述步骤（b)制备的反应液的上层弃去，下层沉淀用0.1 L的水洗涤2次，至 上层溶液为无色；
[0154] (d)将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为3000r/min，离心时间为 10min，将上层溶液弃去，得沉淀物E ;
[0155] (e)将所述沉淀物E用0. 05L乙醚洗涤2次，得沉淀物F ;
[0156] (f)称取IOg的所述沉淀物F，加入0. lmol/L氢氧化钠溶液0. 05L，搅拌，50°C加热 20min，弃去上层溶液；
[0157] (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水0. 05L，离心，离心速度为3000r/min， 离心时间为lOmin，弃去上层溶液，得沉淀物G ;
[0158] (h)将所述沉淀物G用水洗绦，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，40°C减压干 燥，即得所述莲子淀粉；
[0159] (1)称取莲子淀粉10g，加入0. 35L的0. 6mol/L的氢氧化钠溶液，沸水浴加热搅拌 20min，至完全分散，冷却至室温 ；
[0160] (2)将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为10000r/min，离心时间为 20min，取上清液，用I. 5mol/L盐酸调至pH为6. 5 ;
[0161] (3)向0. 46L所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0. 08L， 所述正丁醇/异戊醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，沸水浴加热搅拌15min， 冷却至室温，3 °C静置24h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为10000r/ min，离心时间为10min，得沉淀物A ;
[0162] (4)将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为10000r/min，离 心时间为5min，得沉淀物B ;
[0163] (5)将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌15min，冷却至室 温，3°C静置24h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为10000r/min，离心时 间为10min，得沉淀物C ;
[0164] (6)将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，沸水浴加热搅拌，反复纯化5次，得 沉淀物D ;
[0165] (7)将所述沉淀物D用乙醇洗涤4次，冷冻干燥法干燥，即得莲子直链淀粉。
[0166] 对比例1
[0167] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（1)中氢氧化钠溶液的浓度为〇.7mol/L。
[0168] 对比例2
[0169] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（7)中采用真空干燥法干燥。
[0170] 对比例3
[0171] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（2)、步骤（3)、步骤（4)和步骤（5)中，离 心速度均为3000r/min。
[0172] 对比例4
[0173] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（2)、步骤（3)、步骤（4)和步骤（5)中，离 心速度均为4000r/min。
[0174] 对比例5
[0175] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（2)、步骤（3)、步骤（4)和步骤（5)中，离 心速度均为5000r/min。
[0176] 对比例6
[0177] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（2)、步骤（3)、步骤（4)和步骤（5)中，离 心速度均为16000r/min。
[0178] 对比例7
[0179] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（1)中氢氧化钠溶液的浓度为〇.4mol/L。
[0180] 对比例8
[0181] 本实施例莲子直链淀粉的提取纯化方法与实施例3莲子直链淀粉的提取纯化方 法的各步骤的操作参数均相同，区别仅在于：步骤（1)中氢氧化钠溶液的浓度为〇.5mol/L。
[0182] 显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对 于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或 变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或 变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
【主权项】
1. 一种莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 称取莲子淀粉10重量份，加入0. 30-0. 40体积份0. 5-0. 8mol/L的氢氧化钠溶液， 加热搅拌15-25min，至完全分散，冷却至室温； (2) 将所述步骤（1)制备的反应液进行离心，离心速度为4000-18000r/min，离心时间 为15-25min，取上清液，用L0-2.Omol/L盐酸调至pH为6. 0-7. 0 ; (3) 向所述步骤（2)制备的反应液中加入正丁醇/异戊醇的混合液0.06-0. 10体积份， 加热搅拌10_20min，冷却至室温，2-4°C静置20-30h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离 心，离心速度为4000-18000r/min，离心时间为5_15min，得沉淀物A; (4) 将所述沉淀物A用饱和正丁醇水溶液洗涤、离心，离心速度为4000-18000r/min，离 心时间为5-15min，得沉淀物B; (5) 将所述沉淀物B置于饱和正丁醇水溶液中，加热搅拌10-20min，冷却至室温，2-4°C 静置20-30h，将上层溶液弃去，将下层沉淀进行离心，离心速度为4000-1800()r/min，离心 时间为5-15min，得沉淀物C; (6) 将所述沉淀物C置于饱和正丁醇水溶液中，加热搅拌，反复纯化4-6次，得沉淀物 D； (7) 将所述沉淀物D用乙醇洗涤2-5次，干燥，即得莲子直链淀粉； 所述重量份与体积份的关系为g/L。2. 根据权利要求1所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤（2)、 步骤（3)、步骤（4)和步骤（5)的至少一个步骤中，所述离心速度为10000-18000r/min。3. 根据权利要求1或2所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤 (1)中，所述氢氧化钠溶液的浓度为〇. 6mol/L或0. 7mol/L。4. 根据权利要求1-3任一项所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述 步骤（1)、步骤（3)、步骤（5)和步骤(6)中，所述加热为沸水浴加热。5. 根据权利要求1-4任一项所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述 步骤（3)和步骤（5)中，所述静置的时间为24h。6. 根据权利要求1-5任一项所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述 步骤（3)中，所述正丁醇/异戊醇的混合液中正丁醇和异戊醇的体积比为1:1，所述正丁醇 /异戊醇的混合液与所述步骤（2)制备的反应液的体积比为I:5. 25-6. 125。7. 根据权利要求1-6任一项所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述 步骤（7)中，所述干燥采用冷冻干燥法或真空干燥法。8. 根据权利要求1-7任一项所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述 步骤（1)中，所述莲子淀粉通过如下步骤制得： (a) 将莲子干燥后，粉碎，过50-300目筛，得莲子粉； (b) 称取所述莲子粉40重量份，加入0. 1-0. 3体积份0. 05-0. 2mol/L氢氧化钠溶液，搅 拌，静置过夜； (c) 将所述步骤（b)制备的反应液的上层弃去，下层沉淀用0. 08-0. 12体积份的水洗涤 2-4次，至上层溶液为无色； (d) 将所述步骤（c)制备的反应液进行离心，离心速度为2000-4000r/min，离心时间为 5-15min，将上层溶液弃去，得沉淀物E; (e) 将所述沉淀物E用0. 04-0. 06体积份乙醚洗涤2-4次，得沉淀物F; (f) 称取10重量份的所述沉淀物F，加入0. 05-0. 2mol/L氢氧化钠溶液0. 04-0. 06体 积份，搅拌，30-70°C加热10_30min，弃去上层溶液； (g)向所述步骤（f)制备的反应液中加入水0.04-0. 06体积份，离心，离心速度为 2000-4000r/min，离心时间为5-15min，弃去上层溶液，得沉淀物G; (h) 将所述沉淀物G用水洗涤，至上层溶液的pH为7. 0,得沉淀物H，30-50°C干燥，即得 所述莲子淀粉； 所述重量份与体积份的关系为g/L。9. 根据权利要求8所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤（b)和 步骤（f)中，所述氢氧化钠溶液的浓度为〇.lmol/L。10. 根据权利要求8或9所述的莲子直链淀粉的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤 (d)和/或所述步骤（g)中，所述离心速度为3000r/min;所述步骤（h)中，所述干燥为减压 干燥。
【专利摘要】本发明属于生物化学领域，具体涉及莲子直链淀粉的提取纯化方法。本发明所要解决的是现有的莲子直链淀粉的提取纯化方法的步骤复杂、效率较低、制备周期长、不易实现规模化生产的技术问题，从而提出一种工艺简单、易实现规模化生产、产率高、纯度高的莲子直链淀粉的提取纯化方法。本发明莲子直链淀粉的提取纯化方法，以干莲子制备所得的莲子淀粉为原料，通过优化离心速率和NaOH溶液的浓度等，在不破坏莲子直链淀粉分子结构的前提下，提高了效率、缩短了操作时间、有利于莲子直链淀粉的规模化生产，而且所提取纯化得到的莲子直链淀粉纯度高(约94％)，可以作为莲子直链淀粉含量测定方法的标准。
【IPC分类】C08B30/20
【公开号】CN104892777
【申请号】CN201510263729
【发明人】戴廷灿, 涂田华, 陆文英, 李伟红, 董秋洪, 廖且根, 魏爱花, 杨良波, 谢克强
【申请人】江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月22日
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