一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法
一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，属于粮食加工副产物综合利用技术领域。
【背景技术】
[0002]随着社会的发展及人民物质生活水平的不断提高，人们对健康的关注程度也随之有了较大提升，功能性食品的出现掀起了一股新的研宄开发热潮。其中，功能性低聚糖作为一种功能性食品基料，具有促进双歧杆菌增殖、调节肠道菌群、抑制内毒素、保护肝脏功能、调节肠胃道功能、防治便秘和腹泻、激活免疫、抗衰老、抗肿瘤、降低血清胆固醇、降血压、低能量或无能量、不会引起龋齿等独特的生理功能而被全世界广泛关注。低聚木糖作为一种附加值较高的功能性低聚糖，其选择利用性及对双歧杆菌的增殖作用均优于其他功能性低聚糖。对于低聚木糖的研宄开发，至今日本已有20余年的历史，目前已基本实现工业化，欧洲各国对其开发也竞相升温。我国对低聚木糖的开发研宄始于上世纪九十年代，目前用于低聚木糖制备的原材料主要集中于玉米芯。
[0003]小麦麸皮是小麦制面粉时制粉过程中提取小麦粉和胚芽后的残留部分，是小麦面粉厂的主要加工副产品，以皮层为主(包括果皮、种皮、珠心层和糊粉层)，混入少量的胚芽和未剥刮干净的胚乳，通常占小麦重量的14%-19%。它由小麦的果皮、种皮、糊粉层及少量胚和胚乳组成，富含纤维素和半纤维素，是膳食纤维的主要来源，包含46%的非淀粉多糖，其中阿拉伯木聚糖约为70%，纤维素约为24%，β- (1 — 3) (1 — 4)-葡聚糖约为6%，另外还有少量来自于胚乳和糊粉层的阿糖基半乳糖和葡聚糖以及少量的木聚糖。麦麸还含有4%?5%的植酸和0.4%?1.0%的与植酸相结合的阿魏酸。阿拉伯木聚糖、植酸和阿魏酸是麦麸中的重要生理活性物质，具有保水性、稳定性及抗肿瘤、抗氧化等功能，在食品添加剂和功能性食品开发上有广泛应用。目前小麦麸皮除少许用于制味精、面包及提取麸皮蛋白夕卜，主要用做饲料，经济价值不高。因此，有必要寻找麸皮的其它利用途径，提高麸皮的利用价值。由于小麦麸皮营养丰富，所富含的木聚糖是低聚木糖的良好制备原料，但目前利用麸皮制备低聚木糖主要有NaOH浸提法、酸法干蒸与碱液浸提结合法、KOH浸提法、H2O2与碱液浸提结合法、生物酶解法等，但存在工艺复杂、环境污染严重、木聚糖得率低、木聚糖酶活性低等弊端，因此简化传统酶法制备低聚木糖的工艺，为低聚木糖的制备提供新途径，还能对农作物副产品小麦麸皮加以综合利用，延长农副产品加工链条，使麸皮变废为宝，具有十分重要的社会意义和经济价值。
【发明内容】
[0004]本发明针上述问题，利用微生物发酵和生物酶解技术，提供一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法。
[0005]本发明上述目的是通过以下技术方案予以实现的:
本发明提供一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，其特征在于具体包括以下步骤: (1)粉碎:选取无霉变的麸皮，粉碎过40目筛；
(2)蒸煮:在150°C条件下蒸煮0.5?lh，冷却后调整麸皮与水质量比为1:8?10 ;
(3))超声波辅助酶解去淀粉:调整小麦麸皮悬浮液的pH至5.5?7.5，按小麦麸皮质量比3?5%的比例加入α?淀粉酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度70?80°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，利用碘液检查至淀粉完全水解为止；酶解结束后过滤，滤液为淀粉水解液，向小麦麸皮残渣中加入3?5倍质量比的蒸馏水，得悬浮液，备用；
(4)超声波辅助酶解去蛋白:调整悬浮液的pH至8.0?9.0，按小麦麸皮质量比2?3%的比例加入碱性蛋白酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为60?90min ;酶解结束后灭酶，过滤，滤液为蛋白水解液，向滤渣中加入3?5倍质量比的蒸馏水冲洗2?3次，过滤得小麦麸皮残渣；
(5)生物发酵剂制备:取8?10份沸石、3?5份磷酸二氢妈、6?8份葡萄糖、10?15份米糠、10?15份玉米粉、3?5份菜籽饼、10?15份小麦麸皮、2?3份里氏木霉、I?2份黑曲霉、I?2份酵母菌，混合搅拌均匀；然后用含有2%糖蜜的水溶液将水分调整为35?40%，25°C?30 °C下厌氧发酵3?5d ;
(6)混料:按质量比小麦麸皮残渣100份、生物发酵剂3?5份、纤维素酶0.5?I份、木聚糖酶2?3份比例混合均匀，调整水分至35?40% ；
(7)厌氧发酵:将混合后的混合物控温厌氧发酵2?3d，温度28?32°C，定期搅拌；发酵结束后加入培养基3?5倍质量比的纯净水；
(8)超声波二次辅助酶解:向发酵水洗液中加入麸皮质量比I?2%木聚糖酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为30?60min ；
(9)离心:离心得上清液和固体残渣；固体残渣中加入I?2倍纯净水，搅拌后离心，合并上清液；
(10)酶处理:将上清液调节ρΗ5.0?5.5，加入0.2?0.5%植酸酶、0.3?0.6%甘露聚糖酶，在40?50°C条件下酶解30?60min，酶解结束后灭酶；
(11)醇析:向溶液中逐步加入等体积比的95%乙醇进行沉淀；
(12)烘干粉碎:将获得的沉淀烘干粉碎后即得小麦麸皮木聚糖产品。
[0006]本发明提供一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，其优势在于:(1)通过复合微生物固体发酵和超声波辅助酶解相结合的制备工艺，提升了低聚木糖的得率，每10g麸皮低聚木糖产量达到39.4g，表明一部分纤维素通过微生物发酵和纤维素酶的降解生成低聚木糖，与单一生物酶解法相比较提升31.72%，分析低聚木糖的组成主要为木二糖、木三糖、木四糖；(2)通过超声波辅助酶解去蛋白、淀粉及植酸酶、甘露聚糖酶的酶解，显著提升了低聚木糖产品的纯度，达到98.8%; (3)黑曲霉和里氏木霉是目前已知降解纤维作用最显著的菌株，霉菌与酵母菌混合培养的互惠共生关系使微生物繁殖及产酶能力有较大提高，酵母菌不仅可以起去阻遏作用，而且对真菌的生长有正效，分析原因里氏木霉、黑曲霉等霉菌同化淀粉和纤维素的能力强，可将麸皮的结构性碳水化合物降解为酵母可利用的单糖、双糖等单糖类物质，使酵母得以良好的生长；此外，在多菌混合发酵中，酶促作用生成的糖立即被发酵糖的微生物所利用，这样就维持了降解物的浓度，消除了酶合成作用受到的降解物的阻遏作用，也解除了反应终产物对酶的反馈抑制，缩短了发酵过程；(4)采用固态发酵，生产工艺简单，能耗低、无环境污染、投资小、易于规模化生产。
[0007]本发明提供一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，所得低聚木糖产品品质达到低聚木糖行业标准要求，同时，本发明以小麦加工副产物麸皮作为低聚木糖产品的提取原料，实现了麸皮的高效利用，提高了麸皮的利用价值，具有较好的推广前景。
【具体实施方式】
[0008]实施例1:
一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，具体制备步骤如下:
(1)粉碎:选取无霉变的麸皮，粉碎过40目筛；
(2)蒸煮:在150°C条件下蒸煮0.5h，冷却后调整麸皮与水质量比为1:10 ;
(3))超声波辅助酶解去淀粉:调整小麦麸皮悬浮液的pH至5.5?7.5，按小麦麸皮质量比3%的比例加入α?淀粉酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度70?80°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，利用碘液检查至淀粉完全水解为止；酶解结束后过滤，滤液为淀粉水解液，向小麦麸皮残渣中加入5倍质量比的蒸馏水，得悬浮液，备用；
(4)超声波辅助酶解去蛋白:调整悬浮液的pH至8.0?9.0，按小麦麸皮质量比2%的比例加入碱性蛋白酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为90min ;酶解结束后灭酶，过滤，滤液为蛋白水解液，向滤渣中加入3倍质量比的蒸馏水冲洗3次，过滤得小麦麸皮残渣；
(5)生物发酵剂制备:取8份沸石、5份磷酸二氢钙、6份葡萄糖、15份米糠、10份玉米粉、5份菜籽饼、10份小麦麸皮、2份里氏木霉、I份黑曲霉、I份酵母菌，混合搅拌均匀；然后用含有2%糖蜜的水溶液将水分调整为35?40%，25°C?30°C下厌氧发酵5d ；
(6)混料:按质量比小麦麸皮残渣100份、生物发酵剂3份、纤维素酶0.5份、木聚糖酶2份比例混合均匀，调整水分至35?40% ；
(7)厌氧发酵:将混合后的混合物控温厌氧发酵3d，温度28?32°C，定期搅拌；发酵结束后加入培养基5倍质量比的纯净水；
(8)超声波二次辅助酶解:向发酵水洗液中加入麸皮质量比1%木聚糖酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为60min ；
(9)离心:离心得上清液和固体残渣；固体残渣中加入I倍纯净水，搅拌后离心，合并上清液；
(10)酶处理:将上清液调节pH5.0?5.5，加入0.2%植酸酶、0.3%甘露聚糖酶，在40?50°C条件下酶解60min，酶解结束后灭酶；
(11)醇析:向溶液中逐步加入等体积比的95%乙醇进行沉淀；
(12)烘干粉碎:将获得的沉淀烘干粉碎后即得小麦麸皮木聚糖产品。
[0009]实施例2:
一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，具体制备步骤如下:
(1)粉碎:选取无霉变的麸皮，粉碎过40目筛；
(2)蒸煮:在150°C条件下蒸煮0.8h，冷却后调整麸皮 与水质量比为1:9 ;
(3))超声波辅助酶解去淀粉:调整小麦麸皮悬浮液的pH至5.5?7.5，按小麦麸皮质量比4%的比例加入α?淀粉酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度70?80°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，利用碘液检查至淀粉完全水解为止；酶解结束后过滤，滤液为淀粉水解液，向小麦麸皮残渣中加入4倍质量比的蒸馏水，得悬浮液，备用；
(4)超声波辅助酶解去蛋白:调整悬浮液的pH至8.0?9.0，按小麦麸皮质量比2.5%的比例加入碱性蛋白酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为75min ;酶解结束后灭酶，过滤，滤液为蛋白水解液，向滤渣中加入4倍质量比的蒸馏水冲洗2次，过滤得小麦麸皮残渣；
(5)生物发酵剂制备:取9份沸石、4份磷酸二氢钙、7份葡萄糖、13份米糠、12份玉米粉、4份菜籽饼、12份小麦麸皮、2.5份里氏木霉、1.5份黑曲霉、1.5份酵母菌，混合搅拌均匀；然后用含有2%糖蜜的水溶液将水分调整为35?40%，25°C?30°C下厌氧发酵4d ；
(6)混料:按质量比小麦麸皮残渣100份、生物发酵剂4份、纤维素酶0.75份、木聚糖酶2.5份比例混合均匀，调整水分至35?40% ；
(7)厌氧发酵:将混合后的混合物控温厌氧发酵2.5d，温度28?32°C，定期搅拌；发酵结束后加入培养基4倍质量比的纯净水；
(8)超声波二次辅助酶解:向发酵水洗液中加入麸皮质量比1.5%木聚糖酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为 45min ；
(9)离心:离心得上清液和固体残渣；固体残渣中加入1.5倍纯净水，搅拌后离心，合并上清液；
(10)酶处理:将上清液调节pH5.0?5.5，加入0.4%植酸酶、0.5%甘露聚糖酶，在40?50°C条件下酶解45min，酶解结束后灭酶；
(11)醇析:向溶液中逐步加入等体积比的95%乙醇进行沉淀；
(12)烘干粉碎:将获得的沉淀烘干粉碎后即得小麦麸皮木聚糖产品。
[0010]实施例3:
一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，具体制备步骤如下:
(1)粉碎:选取无霉变的麸皮，粉碎过40目筛；
(2)蒸煮:在150°C条件下蒸煮lh，冷却后调整麸皮与水质量比为1:8;
(3))超声波辅助酶解去淀粉:调整小麦麸皮悬浮液的pH至5.5?7.5，按小麦麸皮质量比5%的比例加入α?淀粉酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度70?80°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，利用碘液检查至淀粉完全水解为止；酶解结束后过滤，滤液为淀粉水解液，向小麦麸皮残渣中加入3倍质量比的蒸馏水，得悬浮液，备用；
(4)超声波辅助酶解去蛋白:调整悬浮液的pH至8.0?9.0，按小麦麸皮质量比3%的比例加入碱性蛋白酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为60min ;酶解结束后灭酶，过滤，滤液为蛋白水解液，向滤渣中加入5倍质量比的蒸馏水冲洗2次，过滤得小麦麸皮残渣；
(5)生物发酵剂制备:取10份沸石、3份磷酸二氢钙、8份葡萄糖、10份米糠、15份玉米粉、3份菜籽饼、15份小麦麸皮、3份里氏木霉、2份黑曲霉、2份酵母菌，混合搅拌均匀；然后用含有2%糖蜜的水溶液将水分调整为35?40%，25°C?30°C下厌氧发酵3d ；
(6)混料:按质量比小麦麸皮残渣100份、生物发酵剂5份、纤维素酶I份、木聚糖酶3份比例混合均匀，调整水分至35?40% ；
(7)厌氧发酵:将混合后的混合物控温厌氧发酵2d，温度28?32°C，定期搅拌；发酵结束后加入培养基5倍质量比的纯净水；
(8)超声波二次辅助酶解:向发酵水洗液中加入麸皮质量比2%木聚糖酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为30min ；
(9)离心:离心得上清液和固体残渣；固体残渣中加入2倍纯净水，搅拌后离心，合并上清液；
(10)酶处理:将上清液调节pH5.0?5.5，加入0.5%植酸酶、0.6%甘露聚糖酶，在40?50°C条件下酶解30min，酶解结束后灭酶；
(11)醇析:向溶液中逐步加入等体积比的95%乙醇进行沉淀；
(12)烘干粉碎:将获得的沉淀烘干粉碎后即得小麦麸皮木聚糖产品。
[0011]本发明提供一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，通过动物试验研宄低聚木糖的功能性，重点研宄了低聚木糖在防止便秘、降低胆固醇、保护肝脏等方面的功效，结果表明:(1)便秘小鼠模型试验表明制得的低聚木糖具有润肠通便功能，经口给予小鼠不同剂量的低聚木糖后，各剂量组均能明显增加小鼠的小肠推进运动，缩短便秘小鼠的首次排便时间，增加便秘小鼠的排便粒数和排便重量，而且在试验过程中各剂量组均未见腹泻现象，说明小鼠给予剂量合理，粪便的形态均为黑褐色颗粒状，与对照组小鼠粪便相比粪便稍软，表面湿润，粪便湿润程度适中，感官正常；(2)通过给小鼠喂食高脂饲料，建立高脂血症小鼠模型，以进行试验研宄。试验结果表明，空白对照组与模型对照组血脂水平在统计学上的差异可以确定造模成功。试验组与模型对照组相比能极显著降低TC、TG、LDL-c、水平(P〈0.01) ; (3)通过对高脂血症小鼠血糖值的测定，由空白对照组与模型对照组比较，说明小鼠血糖模型成立，试验结果表明，低聚木糖对小鼠有较好的降血糖功能，与模型对照组差异显著(ρ〈ο.01) ο
[0012]以上实施例仅用于说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对被发明进行了详细的说明，但对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而对这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
【主权项】
1.一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，其特征在于具体包括以下步骤:(1)粉碎:选取无霉变的麸皮，粉碎过40目筛；(2)蒸煮:在150°C条件下蒸煮0.5?lh，冷却后调整麸皮与水质量比为1:8?10 ;(3))超声波辅助酶解去淀粉:调整小麦麸皮悬浮液的pH至5.5?7.5，按小麦麸皮质量比3?5%的比例加入a?淀粉酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度70?80°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，利用碘液检查至淀粉完全水解为止；酶解结束后过滤，滤液为淀粉水解液，向小麦麸皮残渣中加入3?5倍质量比的蒸馏水，得悬浮液，备用；(4)超声波辅助酶解去蛋白:调整悬浮液的pH至8.0?9.0，按小麦麸皮质量比2?3%的比例加入碱性蛋白酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为60?90min ;酶解结束后灭酶，过滤，滤液为蛋白水解液，向滤渣中加入3?5倍质量比的蒸馏水冲洗2?3次，过滤得小麦麸皮残渣；(5)生物发酵剂制备:取8?10份沸石、3?5份磷酸二氢妈、6?8份葡萄糖、10?15份米糠、10?15份玉米粉、3?5份菜籽饼、10?15份小麦麸皮、2?3份里氏木霉、1?2份黑曲霉、1?2份酵母菌，混合搅拌均匀；然后用含有2%糖蜜的水溶液将水分调整为35?40%，25°C?30 °C下厌氧发酵3?5d ;(6)混料:按质量比小麦麸皮残渣100份、生物发酵剂3?5份、纤维素酶0.5?1份、木聚糖酶2?3份比例混合均匀，调整水分至35?40% ；(7)厌氧发酵:将混合后的混合物控温厌氧发酵2?3d，温度28?32°C，定期搅拌；发酵结束后加入培养基3?5倍质量比的纯净水；(8)超声波二次辅助酶解:向发酵水洗液中加入麸皮质量比1?2%木聚糖酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为30?60min ；(9)离心:离心得上清液和固体残渣；固体残渣中加入1?2倍纯净水，搅拌后离心，合并上清液；(10)酶处理:将上清液调节pH5.0?5.5，加入0.2?0.5%植酸酶、0.3?0.6%甘露聚糖酶，在40?50°C条件下酶解30?60min，酶解结束后灭酶；(11)醇析:向溶液中逐步加入等体积比的95%乙醇进行沉淀；(12)烘干粉碎:将获得的沉淀烘干粉碎后即得小麦麸皮木聚糖产品。
【专利摘要】本发明公开了一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法。本发明以农副产品加工副产物麸皮为原料，利用微生物发酵和生物酶解技术制备具有促双歧杆菌增殖、防止便秘、降低胆固醇、保护肝脏等功效的低聚木糖，所得低聚木糖产品品质达到低聚木糖行业标准要求，实现了麸皮的高效利用，提高了麸皮的利用价值，具有较好的推广前景。本发明优势在于：一是通过复合微生物固体发酵和超声波辅助酶解相结合的制备工艺，提升了低聚木糖的得率；二是通过超声波辅助酶解去蛋白、淀粉及植酸酶、甘露聚糖酶的酶解，显著提升了低聚木糖产品的纯度；三是多菌混合发酵，提高了发酵酶解木聚糖的能力；四是生产工艺简单，能耗低、无环境污染、投资小、易于规模化生产。
【IPC分类】C12P19/14
【公开号】CN104894189
【申请号】CN201510389350
【发明人】侯文燕, 董静静, 赵建伟
【申请人】青岛嘉瑞生物技术有限公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年7月6日...
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，属于粮食加工副产物综合利用技术领域。
【背景技术】
[0002]随着社会的发展及人民物质生活水平的不断提高，人们对健康的关注程度也随之有了较大提升，功能性食品的出现掀起了一股新的研宄开发热潮。其中，功能性低聚糖作为一种功能性食品基料，具有促进双歧杆菌增殖、调节肠道菌群、抑制内毒素、保护肝脏功能、调节肠胃道功能、防治便秘和腹泻、激活免疫、抗衰老、抗肿瘤、降低血清胆固醇、降血压、低能量或无能量、不会引起龋齿等独特的生理功能而被全世界广泛关注。低聚木糖作为一种附加值较高的功能性低聚糖，其选择利用性及对双歧杆菌的增殖作用均优于其他功能性低聚糖。对于低聚木糖的研宄开发，至今日本已有20余年的历史，目前已基本实现工业化，欧洲各国对其开发也竞相升温。我国对低聚木糖的开发研宄始于上世纪九十年代，目前用于低聚木糖制备的原材料主要集中于玉米芯。
[0003]小麦麸皮是小麦制面粉时制粉过程中提取小麦粉和胚芽后的残留部分，是小麦面粉厂的主要加工副产品，以皮层为主(包括果皮、种皮、珠心层和糊粉层)，混入少量的胚芽和未剥刮干净的胚乳，通常占小麦重量的14%-19%。它由小麦的果皮、种皮、糊粉层及少量胚和胚乳组成，富含纤维素和半纤维素，是膳食纤维的主要来源，包含46%的非淀粉多糖，其中阿拉伯木聚糖约为70%，纤维素约为24%，β- (1 — 3) (1 — 4)-葡聚糖约为6%，另外还有少量来自于胚乳和糊粉层的阿糖基半乳糖和葡聚糖以及少量的木聚糖。麦麸还含有4%?5%的植酸和0.4%?1.0%的与植酸相结合的阿魏酸。阿拉伯木聚糖、植酸和阿魏酸是麦麸中的重要生理活性物质，具有保水性、稳定性及抗肿瘤、抗氧化等功能，在食品添加剂和功能性食品开发上有广泛应用。目前小麦麸皮除少许用于制味精、面包及提取麸皮蛋白夕卜，主要用做饲料，经济价值不高。因此，有必要寻找麸皮的其它利用途径，提高麸皮的利用价值。由于小麦麸皮营养丰富，所富含的木聚糖是低聚木糖的良好制备原料，但目前利用麸皮制备低聚木糖主要有NaOH浸提法、酸法干蒸与碱液浸提结合法、KOH浸提法、H2O2与碱液浸提结合法、生物酶解法等，但存在工艺复杂、环境污染严重、木聚糖得率低、木聚糖酶活性低等弊端，因此简化传统酶法制备低聚木糖的工艺，为低聚木糖的制备提供新途径，还能对农作物副产品小麦麸皮加以综合利用，延长农副产品加工链条，使麸皮变废为宝，具有十分重要的社会意义和经济价值。
【发明内容】
[0004]本发明针上述问题，利用微生物发酵和生物酶解技术，提供一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法。
[0005]本发明上述目的是通过以下技术方案予以实现的:
本发明提供一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，其特征在于具体包括以下步骤: (1)粉碎:选取无霉变的麸皮，粉碎过40目筛；
(2)蒸煮:在150°C条件下蒸煮0.5?lh，冷却后调整麸皮与水质量比为1:8?10 ;
(3))超声波辅助酶解去淀粉:调整小麦麸皮悬浮液的pH至5.5?7.5，按小麦麸皮质量比3?5%的比例加入α?淀粉酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度70?80°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，利用碘液检查至淀粉完全水解为止；酶解结束后过滤，滤液为淀粉水解液，向小麦麸皮残渣中加入3?5倍质量比的蒸馏水，得悬浮液，备用；
(4)超声波辅助酶解去蛋白:调整悬浮液的pH至8.0?9.0，按小麦麸皮质量比2?3%的比例加入碱性蛋白酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为60?90min ;酶解结束后灭酶，过滤，滤液为蛋白水解液，向滤渣中加入3?5倍质量比的蒸馏水冲洗2?3次，过滤得小麦麸皮残渣；
(5)生物发酵剂制备:取8?10份沸石、3?5份磷酸二氢妈、6?8份葡萄糖、10?15份米糠、10?15份玉米粉、3?5份菜籽饼、10?15份小麦麸皮、2?3份里氏木霉、I?2份黑曲霉、I?2份酵母菌，混合搅拌均匀；然后用含有2%糖蜜的水溶液将水分调整为35?40%，25°C?30 °C下厌氧发酵3?5d ;
(6)混料:按质量比小麦麸皮残渣100份、生物发酵剂3?5份、纤维素酶0.5?I份、木聚糖酶2?3份比例混合均匀，调整水分至35?40% ；
(7)厌氧发酵:将混合后的混合物控温厌氧发酵2?3d，温度28?32°C，定期搅拌；发酵结束后加入培养基3?5倍质量比的纯净水；
(8)超声波二次辅助酶解:向发酵水洗液中加入麸皮质量比I?2%木聚糖酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为30?60min ；
(9)离心:离心得上清液和固体残渣；固体残渣中加入I?2倍纯净水，搅拌后离心，合并上清液；
(10)酶处理:将上清液调节ρΗ5.0?5.5，加入0.2?0.5%植酸酶、0.3?0.6%甘露聚糖酶，在40?50°C条件下酶解30?60min，酶解结束后灭酶；
(11)醇析:向溶液中逐步加入等体积比的95%乙醇进行沉淀；
(12)烘干粉碎:将获得的沉淀烘干粉碎后即得小麦麸皮木聚糖产品。
[0006]本发明提供一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，其优势在于:(1)通过复合微生物固体发酵和超声波辅助酶解相结合的制备工艺，提升了低聚木糖的得率，每10g麸皮低聚木糖产量达到39.4g，表明一部分纤维素通过微生物发酵和纤维素酶的降解生成低聚木糖，与单一生物酶解法相比较提升31.72%，分析低聚木糖的组成主要为木二糖、木三糖、木四糖；(2)通过超声波辅助酶解去蛋白、淀粉及植酸酶、甘露聚糖酶的酶解，显著提升了低聚木糖产品的纯度，达到98.8%; (3)黑曲霉和里氏木霉是目前已知降解纤维作用最显著的菌株，霉菌与酵母菌混合培养的互惠共生关系使微生物繁殖及产酶能力有较大提高，酵母菌不仅可以起去阻遏作用，而且对真菌的生长有正效，分析原因里氏木霉、黑曲霉等霉菌同化淀粉和纤维素的能力强，可将麸皮的结构性碳水化合物降解为酵母可利用的单糖、双糖等单糖类物质，使酵母得以良好的生长；此外，在多菌混合发酵中，酶促作用生成的糖立即被发酵糖的微生物所利用，这样就维持了降解物的浓度，消除了酶合成作用受到的降解物的阻遏作用，也解除了反应终产物对酶的反馈抑制，缩短了发酵过程；(4)采用固态发酵，生产工艺简单，能耗低、无环境污染、投资小、易于规模化生产。
[0007]本发明提供一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，所得低聚木糖产品品质达到低聚木糖行业标准要求，同时，本发明以小麦加工副产物麸皮作为低聚木糖产品的提取原料，实现了麸皮的高效利用，提高了麸皮的利用价值，具有较好的推广前景。
【具体实施方式】
[0008]实施例1:
一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，具体制备步骤如下:
(1)粉碎:选取无霉变的麸皮，粉碎过40目筛；
(2)蒸煮:在150°C条件下蒸煮0.5h，冷却后调整麸皮与水质量比为1:10 ;
(3))超声波辅助酶解去淀粉:调整小麦麸皮悬浮液的pH至5.5?7.5，按小麦麸皮质量比3%的比例加入α?淀粉酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度70?80°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，利用碘液检查至淀粉完全水解为止；酶解结束后过滤，滤液为淀粉水解液，向小麦麸皮残渣中加入5倍质量比的蒸馏水，得悬浮液，备用；
(4)超声波辅助酶解去蛋白:调整悬浮液的pH至8.0?9.0，按小麦麸皮质量比2%的比例加入碱性蛋白酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为90min ;酶解结束后灭酶，过滤，滤液为蛋白水解液，向滤渣中加入3倍质量比的蒸馏水冲洗3次，过滤得小麦麸皮残渣；
(5)生物发酵剂制备:取8份沸石、5份磷酸二氢钙、6份葡萄糖、15份米糠、10份玉米粉、5份菜籽饼、10份小麦麸皮、2份里氏木霉、I份黑曲霉、I份酵母菌，混合搅拌均匀；然后用含有2%糖蜜的水溶液将水分调整为35?40%，25°C?30°C下厌氧发酵5d ；
(6)混料:按质量比小麦麸皮残渣100份、生物发酵剂3份、纤维素酶0.5份、木聚糖酶2份比例混合均匀，调整水分至35?40% ；
(7)厌氧发酵:将混合后的混合物控温厌氧发酵3d，温度28?32°C，定期搅拌；发酵结束后加入培养基5倍质量比的纯净水；
(8)超声波二次辅助酶解:向发酵水洗液中加入麸皮质量比1%木聚糖酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为60min ；
(9)离心:离心得上清液和固体残渣；固体残渣中加入I倍纯净水，搅拌后离心，合并上清液；
(10)酶处理:将上清液调节pH5.0?5.5，加入0.2%植酸酶、0.3%甘露聚糖酶，在40?50°C条件下酶解60min，酶解结束后灭酶；
(11)醇析:向溶液中逐步加入等体积比的95%乙醇进行沉淀；
(12)烘干粉碎:将获得的沉淀烘干粉碎后即得小麦麸皮木聚糖产品。
[0009]实施例2:
一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，具体制备步骤如下:
(1)粉碎:选取无霉变的麸皮，粉碎过40目筛；
(2)蒸煮:在150°C条件下蒸煮0.8h，冷却后调整麸皮 与水质量比为1:9 ;
(3))超声波辅助酶解去淀粉:调整小麦麸皮悬浮液的pH至5.5?7.5，按小麦麸皮质量比4%的比例加入α?淀粉酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度70?80°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，利用碘液检查至淀粉完全水解为止；酶解结束后过滤，滤液为淀粉水解液，向小麦麸皮残渣中加入4倍质量比的蒸馏水，得悬浮液，备用；
(4)超声波辅助酶解去蛋白:调整悬浮液的pH至8.0?9.0，按小麦麸皮质量比2.5%的比例加入碱性蛋白酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为75min ;酶解结束后灭酶，过滤，滤液为蛋白水解液，向滤渣中加入4倍质量比的蒸馏水冲洗2次，过滤得小麦麸皮残渣；
(5)生物发酵剂制备:取9份沸石、4份磷酸二氢钙、7份葡萄糖、13份米糠、12份玉米粉、4份菜籽饼、12份小麦麸皮、2.5份里氏木霉、1.5份黑曲霉、1.5份酵母菌，混合搅拌均匀；然后用含有2%糖蜜的水溶液将水分调整为35?40%，25°C?30°C下厌氧发酵4d ；
(6)混料:按质量比小麦麸皮残渣100份、生物发酵剂4份、纤维素酶0.75份、木聚糖酶2.5份比例混合均匀，调整水分至35?40% ；
(7)厌氧发酵:将混合后的混合物控温厌氧发酵2.5d，温度28?32°C，定期搅拌；发酵结束后加入培养基4倍质量比的纯净水；
(8)超声波二次辅助酶解:向发酵水洗液中加入麸皮质量比1.5%木聚糖酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为 45min ；
(9)离心:离心得上清液和固体残渣；固体残渣中加入1.5倍纯净水，搅拌后离心，合并上清液；
(10)酶处理:将上清液调节pH5.0?5.5，加入0.4%植酸酶、0.5%甘露聚糖酶，在40?50°C条件下酶解45min，酶解结束后灭酶；
(11)醇析:向溶液中逐步加入等体积比的95%乙醇进行沉淀；
(12)烘干粉碎:将获得的沉淀烘干粉碎后即得小麦麸皮木聚糖产品。
[0010]实施例3:
一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，具体制备步骤如下:
(1)粉碎:选取无霉变的麸皮，粉碎过40目筛；
(2)蒸煮:在150°C条件下蒸煮lh，冷却后调整麸皮与水质量比为1:8;
(3))超声波辅助酶解去淀粉:调整小麦麸皮悬浮液的pH至5.5?7.5，按小麦麸皮质量比5%的比例加入α?淀粉酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度70?80°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，利用碘液检查至淀粉完全水解为止；酶解结束后过滤，滤液为淀粉水解液，向小麦麸皮残渣中加入3倍质量比的蒸馏水，得悬浮液，备用；
(4)超声波辅助酶解去蛋白:调整悬浮液的pH至8.0?9.0，按小麦麸皮质量比3%的比例加入碱性蛋白酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为60min ;酶解结束后灭酶，过滤，滤液为蛋白水解液，向滤渣中加入5倍质量比的蒸馏水冲洗2次，过滤得小麦麸皮残渣；
(5)生物发酵剂制备:取10份沸石、3份磷酸二氢钙、8份葡萄糖、10份米糠、15份玉米粉、3份菜籽饼、15份小麦麸皮、3份里氏木霉、2份黑曲霉、2份酵母菌，混合搅拌均匀；然后用含有2%糖蜜的水溶液将水分调整为35?40%，25°C?30°C下厌氧发酵3d ；
(6)混料:按质量比小麦麸皮残渣100份、生物发酵剂5份、纤维素酶I份、木聚糖酶3份比例混合均匀，调整水分至35?40% ；
(7)厌氧发酵:将混合后的混合物控温厌氧发酵2d，温度28?32°C，定期搅拌；发酵结束后加入培养基5倍质量比的纯净水；
(8)超声波二次辅助酶解:向发酵水洗液中加入麸皮质量比2%木聚糖酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为30min ；
(9)离心:离心得上清液和固体残渣；固体残渣中加入2倍纯净水，搅拌后离心，合并上清液；
(10)酶处理:将上清液调节pH5.0?5.5，加入0.5%植酸酶、0.6%甘露聚糖酶，在40?50°C条件下酶解30min，酶解结束后灭酶；
(11)醇析:向溶液中逐步加入等体积比的95%乙醇进行沉淀；
(12)烘干粉碎:将获得的沉淀烘干粉碎后即得小麦麸皮木聚糖产品。
[0011]本发明提供一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，通过动物试验研宄低聚木糖的功能性，重点研宄了低聚木糖在防止便秘、降低胆固醇、保护肝脏等方面的功效，结果表明:(1)便秘小鼠模型试验表明制得的低聚木糖具有润肠通便功能，经口给予小鼠不同剂量的低聚木糖后，各剂量组均能明显增加小鼠的小肠推进运动，缩短便秘小鼠的首次排便时间，增加便秘小鼠的排便粒数和排便重量，而且在试验过程中各剂量组均未见腹泻现象，说明小鼠给予剂量合理，粪便的形态均为黑褐色颗粒状，与对照组小鼠粪便相比粪便稍软，表面湿润，粪便湿润程度适中，感官正常；(2)通过给小鼠喂食高脂饲料，建立高脂血症小鼠模型，以进行试验研宄。试验结果表明，空白对照组与模型对照组血脂水平在统计学上的差异可以确定造模成功。试验组与模型对照组相比能极显著降低TC、TG、LDL-c、水平(P〈0.01) ; (3)通过对高脂血症小鼠血糖值的测定，由空白对照组与模型对照组比较，说明小鼠血糖模型成立，试验结果表明，低聚木糖对小鼠有较好的降血糖功能，与模型对照组差异显著(ρ〈ο.01) ο
[0012]以上实施例仅用于说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对被发明进行了详细的说明，但对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而对这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
【主权项】
1.一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法，其特征在于具体包括以下步骤:(1)粉碎:选取无霉变的麸皮，粉碎过40目筛；(2)蒸煮:在150°C条件下蒸煮0.5?lh，冷却后调整麸皮与水质量比为1:8?10 ;(3))超声波辅助酶解去淀粉:调整小麦麸皮悬浮液的pH至5.5?7.5，按小麦麸皮质量比3?5%的比例加入a?淀粉酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度70?80°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，利用碘液检查至淀粉完全水解为止；酶解结束后过滤，滤液为淀粉水解液，向小麦麸皮残渣中加入3?5倍质量比的蒸馏水，得悬浮液，备用；(4)超声波辅助酶解去蛋白:调整悬浮液的pH至8.0?9.0，按小麦麸皮质量比2?3%的比例加入碱性蛋白酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为60?90min ;酶解结束后灭酶，过滤，滤液为蛋白水解液，向滤渣中加入3?5倍质量比的蒸馏水冲洗2?3次，过滤得小麦麸皮残渣；(5)生物发酵剂制备:取8?10份沸石、3?5份磷酸二氢妈、6?8份葡萄糖、10?15份米糠、10?15份玉米粉、3?5份菜籽饼、10?15份小麦麸皮、2?3份里氏木霉、1?2份黑曲霉、1?2份酵母菌，混合搅拌均匀；然后用含有2%糖蜜的水溶液将水分调整为35?40%，25°C?30 °C下厌氧发酵3?5d ;(6)混料:按质量比小麦麸皮残渣100份、生物发酵剂3?5份、纤维素酶0.5?1份、木聚糖酶2?3份比例混合均匀，调整水分至35?40% ；(7)厌氧发酵:将混合后的混合物控温厌氧发酵2?3d，温度28?32°C，定期搅拌；发酵结束后加入培养基3?5倍质量比的纯净水；(8)超声波二次辅助酶解:向发酵水洗液中加入麸皮质量比1?2%木聚糖酶，在超声波辅助作用下酶解，酶解温度50?60°C，超声功率300W，期间采用搅拌机匀速搅拌，酶解时间为30?60min ；(9)离心:离心得上清液和固体残渣；固体残渣中加入1?2倍纯净水，搅拌后离心，合并上清液；(10)酶处理:将上清液调节pH5.0?5.5，加入0.2?0.5%植酸酶、0.3?0.6%甘露聚糖酶，在40?50°C条件下酶解30?60min，酶解结束后灭酶；(11)醇析:向溶液中逐步加入等体积比的95%乙醇进行沉淀；(12)烘干粉碎:将获得的沉淀烘干粉碎后即得小麦麸皮木聚糖产品。
【专利摘要】本发明公开了一种从小麦麸皮中提取低聚木糖的方法。本发明以农副产品加工副产物麸皮为原料，利用微生物发酵和生物酶解技术制备具有促双歧杆菌增殖、防止便秘、降低胆固醇、保护肝脏等功效的低聚木糖，所得低聚木糖产品品质达到低聚木糖行业标准要求，实现了麸皮的高效利用，提高了麸皮的利用价值，具有较好的推广前景。本发明优势在于：一是通过复合微生物固体发酵和超声波辅助酶解相结合的制备工艺，提升了低聚木糖的得率；二是通过超声波辅助酶解去蛋白、淀粉及植酸酶、甘露聚糖酶的酶解，显著提升了低聚木糖产品的纯度；三是多菌混合发酵，提高了发酵酶解木聚糖的能力；四是生产工艺简单，能耗低、无环境污染、投资小、易于规模化生产。
【IPC分类】C12P19/14
【公开号】CN104894189
【申请号】CN201510389350
【发明人】侯文燕, 董静静, 赵建伟
【申请人】青岛嘉瑞生物技术有限公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年7月6日...
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