一种器官组织的快速染色方法
一种器官组织的快速染色方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及器官组织染色领域，具体涉及一种器官组织的快速染色方法。
【背景技术】
[0002]目前，植物制片前需要进行前处理，将植物材料进行切成便于观察的薄片才行，有两种方法进行:一种为徒手切片法、另一种为石蜡切片法。徒手切片是用手持双面刀片或剃刀，将新鲜材料或预先固定好的材料(切前水洗)切成薄片，不经染色或经简单染色后，用水封片作临时装片观察。徒手切片法的优点是不需要复杂的设备，方法简便，制片迅速，而且能观察到植物组织的自然色泽和活体结构，常用于研宄植物解剖结构、细胞组织化学成分，植物资源鉴定等。同时，它具有利于临时观察、能够较快的得到结果的优点。缺点是对于体积过小、太软、太硬的材料则难于切片，而且不能制成连续切片。
[0003]切片法是最常用的一种制片法。其制作过程是:取材一固定一冲洗一脱水一透明—浸錯一包埋一切片一贴片一烤片一脱錯一复水一染色一脱水一透明一封臧。石錯制片是一个连续的操作过程，往往要连续几天才能完成，容易与其它工作发生冲突，也会因前后顺序颠倒或超过了规定的时间，给科研工作带来不小的损失。制片的各个步骤都是互相关联的，如脱水不彻底就会影响到透明的程度，以至影响蜡块的质量，同时还存在染色效果差、稳定性差，速度慢的缺点。
【发明内容】
[0004]为解决上述问题，本发明提供了一种器官组织的快速染色方法，染色效果好，染色所需的时间短，且稳定性高。
[0005]为实现上述目的，本发明采取的技术方案为:
[0006]一种器官组织的快速染色方法，包括如下步骤:
[0007]S1、脱蜡:将组织切片放入染色架依次置于100%二甲苯I和100%二甲苯II中各8min ；
[0008]S2、复水:将组织切片按浓度为100%的二甲苯I 5min、浓度为100%二甲苯II5min、浓度为95 %的酒精5min、浓度为85 %的酒精5min、浓度为75 %的酒精5min的梯度进行复水，将复水后的切片置于自来水中流水冲洗5min ；
[0009]S3、将步骤S2所得的组织切片置于0.2%苏木素染液中染色12分钟，流水冲洗组织切片至组织颜色透亮、切片干净；
[0010]S4、将步骤S3所得的组织切片置于I %盐酸酒精中分化5s，快速拿起，放入烧杯中，流水水洗3min ；
[0011]S5、将分化后的组织切片置于I %氨水中蓝化5s，快速拿起，流水水洗3min ；
[0012]S6、将蓝化后的组织切片放入I %伊红染液中染色3min后，放入盛有自来水的烧杯中，轻微震荡，洗去切片上多余伊红染液；
[0013]S7、脱水:按浓度为75%的酒精1s浓度为85%的酒精30s、浓度为95%的酒精2min、浓度为100%的二甲苯I 5min、浓度为100%的二甲苯II 5min的梯度对组织切片进行脱水，脱水完后将切片放入烘箱5min，加速酒精挥发；
[0014]S8、透明、封片:将烘干的切片依次置于100%二甲苯1、100%二甲苯II各8min，进行透明处理后，进行中性树脂封片。
[0015]本发明的染色结果为肉眼观察组织切片呈紫红色，光镜下观察细胞质呈红色，细胞核呈蓝紫色。
[0016]本发明具有以下有益效果:
[0017]染色效果好，染色所需的时间短，且稳定性高。
【具体实施方式】
[0018]为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0019]本发明实施例提供了一种器官组织的快速染色方法，包括如下步骤:
[0020]S1、脱蜡:将组织切片放入染色架依次置于100%二甲苯I和100%二甲苯II中各8min ；
[0021]S2、复水:将组织切片按浓度为100%的二甲苯I 5min、浓度为100%二甲苯II5min、浓度为95 %的酒精5min、浓度为85 %的酒精5min、浓度为75 %的酒精5min的梯度进行复水，将复水后的切片置于自来水中流水冲洗5min ；
[0022]S3、将步骤S2所得的组织切片置于0.2%苏木素染液中染色12分钟，流水冲洗组织切片至组织颜色透亮、切片干净；
[0023]S4、将步骤S3所得的组织切片置于I %盐酸酒精中分化5s，快速拿起，放入烧杯中，流水水洗3min ；
[0024]S5、将分化后的组织切片置于I %氨水中蓝化5s，快速拿起，流水水洗3min ；
[0025]S6、将蓝化后的组织切片放入I %伊红染液中染色3min后，放入盛有自来水的烧杯中，轻微震荡，洗去切片上多余伊红染液；
[0026]S7、脱水:按浓度为75%的酒精1s浓度为85%的酒精30s、浓度为95%的酒精2min、浓度为100%的二甲苯I 5min、浓度为100%的二甲苯II 5min的梯度对组织切片进行脱水，脱水完后将切片放入烘箱5min，加速酒精挥发；
[0027]S8、透明、封片:将烘干的切片依次置于100%二甲苯1、100%二甲苯II各8min，进行透明处理后，进行中性树脂封片。其染色效果更稳定。
[0028]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种器官组织的快速染色方法，其特征在于，包括如下步骤: S1、脱蜡:将组织切片放入染色架依次置于100%二甲苯I和100% 二甲苯II中各.8min ； S2、复水:将组织切片按浓度为100%的二甲苯I5min、浓度为100%二甲苯II 5min、浓度为95%的酒精5min、浓度为85%的酒精5min、浓度为75%的酒精5min的梯度进行复水，将复水后的切片置于自来水中流水冲洗5min ； S3、将步骤S2所得的组织切片置于0.2%苏木素染液中染色12分钟，流水冲洗组织切片至组织颜色透亮、切片干净； S4、将步骤S3所得的组织切片置于I%盐酸酒精中分化5s，快速拿起，放入烧杯中，流水水洗3min ； S5、将分化后的组织切片置于I%氨水中蓝化5s，快速拿起，流水水洗3min ； S6、将蓝化后的组织切片放入1%伊红染液中染色3min后，放入盛有自来水的烧杯中，轻微震荡，洗去切片上多余伊红染液； S7、脱水:按浓度为75%的酒精1s浓度为85%的酒精30s、浓度为95%的酒精2min、浓度为100%的二甲苯I 5min、浓度为100%的二甲苯II 5min的梯度对组织切片进行脱水，脱水完后将切片放入烘箱5min，加速酒精挥发； S8、透明、封片:将烘干的切片依次置于100%二甲苯1、100%二甲苯II各8min，进行透明处理后，进行中性树脂封片。
【专利摘要】本发明公开了一种器官组织的快速染色方法，包括如下步骤：将组织切片放入染色架依次置于100％二甲苯I和100％二甲苯II中各8min；取出后按100％二甲苯I 5min、100％二甲苯II 5min、95％的酒精5min、85％的酒精5min、75％的酒精5min的梯度进行复水后，用自来水中流水冲洗，置于0.2％苏木素染液中染色后，流水冲洗；置于1％盐酸酒精中分化，快速拿起，放入烧杯中，流水水洗；将分化后的组织切片置于1％氨水中蓝化，快速拿起，流水水洗；将蓝化后的组织切片放入1％伊红染液中染色后，放入盛有自来水的烧杯中，轻微震荡，洗去切片上多余伊红染液；脱水、透明处理后，进行中性树脂封片。本发明染色效果好，染色所需的时间短，且稳定性高。
【IPC分类】G01N1/30
【公开号】CN104897453
【申请号】CN201510296929
【发明人】何敏, 梁晓霞, 刘宁
【申请人】四川农业大学
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月27日
【技术领域】
[0001]本发明涉及器官组织染色领域，具体涉及一种器官组织的快速染色方法。
【背景技术】
[0002]目前，植物制片前需要进行前处理，将植物材料进行切成便于观察的薄片才行，有两种方法进行:一种为徒手切片法、另一种为石蜡切片法。徒手切片是用手持双面刀片或剃刀，将新鲜材料或预先固定好的材料(切前水洗)切成薄片，不经染色或经简单染色后，用水封片作临时装片观察。徒手切片法的优点是不需要复杂的设备，方法简便，制片迅速，而且能观察到植物组织的自然色泽和活体结构，常用于研宄植物解剖结构、细胞组织化学成分，植物资源鉴定等。同时，它具有利于临时观察、能够较快的得到结果的优点。缺点是对于体积过小、太软、太硬的材料则难于切片，而且不能制成连续切片。
[0003]切片法是最常用的一种制片法。其制作过程是:取材一固定一冲洗一脱水一透明—浸錯一包埋一切片一贴片一烤片一脱錯一复水一染色一脱水一透明一封臧。石錯制片是一个连续的操作过程，往往要连续几天才能完成，容易与其它工作发生冲突，也会因前后顺序颠倒或超过了规定的时间，给科研工作带来不小的损失。制片的各个步骤都是互相关联的，如脱水不彻底就会影响到透明的程度，以至影响蜡块的质量，同时还存在染色效果差、稳定性差，速度慢的缺点。
【发明内容】
[0004]为解决上述问题，本发明提供了一种器官组织的快速染色方法，染色效果好，染色所需的时间短，且稳定性高。
[0005]为实现上述目的，本发明采取的技术方案为:
[0006]一种器官组织的快速染色方法，包括如下步骤:
[0007]S1、脱蜡:将组织切片放入染色架依次置于100%二甲苯I和100%二甲苯II中各8min ；
[0008]S2、复水:将组织切片按浓度为100%的二甲苯I 5min、浓度为100%二甲苯II5min、浓度为95 %的酒精5min、浓度为85 %的酒精5min、浓度为75 %的酒精5min的梯度进行复水，将复水后的切片置于自来水中流水冲洗5min ；
[0009]S3、将步骤S2所得的组织切片置于0.2%苏木素染液中染色12分钟，流水冲洗组织切片至组织颜色透亮、切片干净；
[0010]S4、将步骤S3所得的组织切片置于I %盐酸酒精中分化5s，快速拿起，放入烧杯中，流水水洗3min ；
[0011]S5、将分化后的组织切片置于I %氨水中蓝化5s，快速拿起，流水水洗3min ；
[0012]S6、将蓝化后的组织切片放入I %伊红染液中染色3min后，放入盛有自来水的烧杯中，轻微震荡，洗去切片上多余伊红染液；
[0013]S7、脱水:按浓度为75%的酒精1s浓度为85%的酒精30s、浓度为95%的酒精2min、浓度为100%的二甲苯I 5min、浓度为100%的二甲苯II 5min的梯度对组织切片进行脱水，脱水完后将切片放入烘箱5min，加速酒精挥发；
[0014]S8、透明、封片:将烘干的切片依次置于100%二甲苯1、100%二甲苯II各8min，进行透明处理后，进行中性树脂封片。
[0015]本发明的染色结果为肉眼观察组织切片呈紫红色，光镜下观察细胞质呈红色，细胞核呈蓝紫色。
[0016]本发明具有以下有益效果:
[0017]染色效果好，染色所需的时间短，且稳定性高。
【具体实施方式】
[0018]为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0019]本发明实施例提供了一种器官组织的快速染色方法，包括如下步骤:
[0020]S1、脱蜡:将组织切片放入染色架依次置于100%二甲苯I和100%二甲苯II中各8min ；
[0021]S2、复水:将组织切片按浓度为100%的二甲苯I 5min、浓度为100%二甲苯II5min、浓度为95 %的酒精5min、浓度为85 %的酒精5min、浓度为75 %的酒精5min的梯度进行复水，将复水后的切片置于自来水中流水冲洗5min ；
[0022]S3、将步骤S2所得的组织切片置于0.2%苏木素染液中染色12分钟，流水冲洗组织切片至组织颜色透亮、切片干净；
[0023]S4、将步骤S3所得的组织切片置于I %盐酸酒精中分化5s，快速拿起，放入烧杯中，流水水洗3min ；
[0024]S5、将分化后的组织切片置于I %氨水中蓝化5s，快速拿起，流水水洗3min ；
[0025]S6、将蓝化后的组织切片放入I %伊红染液中染色3min后，放入盛有自来水的烧杯中，轻微震荡，洗去切片上多余伊红染液；
[0026]S7、脱水:按浓度为75%的酒精1s浓度为85%的酒精30s、浓度为95%的酒精2min、浓度为100%的二甲苯I 5min、浓度为100%的二甲苯II 5min的梯度对组织切片进行脱水，脱水完后将切片放入烘箱5min，加速酒精挥发；
[0027]S8、透明、封片:将烘干的切片依次置于100%二甲苯1、100%二甲苯II各8min，进行透明处理后，进行中性树脂封片。其染色效果更稳定。
[0028]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种器官组织的快速染色方法，其特征在于，包括如下步骤: S1、脱蜡:将组织切片放入染色架依次置于100%二甲苯I和100% 二甲苯II中各.8min ； S2、复水:将组织切片按浓度为100%的二甲苯I5min、浓度为100%二甲苯II 5min、浓度为95%的酒精5min、浓度为85%的酒精5min、浓度为75%的酒精5min的梯度进行复水，将复水后的切片置于自来水中流水冲洗5min ； S3、将步骤S2所得的组织切片置于0.2%苏木素染液中染色12分钟，流水冲洗组织切片至组织颜色透亮、切片干净； S4、将步骤S3所得的组织切片置于I%盐酸酒精中分化5s，快速拿起，放入烧杯中，流水水洗3min ； S5、将分化后的组织切片置于I%氨水中蓝化5s，快速拿起，流水水洗3min ； S6、将蓝化后的组织切片放入1%伊红染液中染色3min后，放入盛有自来水的烧杯中，轻微震荡，洗去切片上多余伊红染液； S7、脱水:按浓度为75%的酒精1s浓度为85%的酒精30s、浓度为95%的酒精2min、浓度为100%的二甲苯I 5min、浓度为100%的二甲苯II 5min的梯度对组织切片进行脱水，脱水完后将切片放入烘箱5min，加速酒精挥发； S8、透明、封片:将烘干的切片依次置于100%二甲苯1、100%二甲苯II各8min，进行透明处理后，进行中性树脂封片。
【专利摘要】本发明公开了一种器官组织的快速染色方法，包括如下步骤：将组织切片放入染色架依次置于100％二甲苯I和100％二甲苯II中各8min；取出后按100％二甲苯I 5min、100％二甲苯II 5min、95％的酒精5min、85％的酒精5min、75％的酒精5min的梯度进行复水后，用自来水中流水冲洗，置于0.2％苏木素染液中染色后，流水冲洗；置于1％盐酸酒精中分化，快速拿起，放入烧杯中，流水水洗；将分化后的组织切片置于1％氨水中蓝化，快速拿起，流水水洗；将蓝化后的组织切片放入1％伊红染液中染色后，放入盛有自来水的烧杯中，轻微震荡，洗去切片上多余伊红染液；脱水、透明处理后，进行中性树脂封片。本发明染色效果好，染色所需的时间短，且稳定性高。
【IPC分类】G01N1/30
【公开号】CN104897453
【申请号】CN201510296929
【发明人】何敏, 梁晓霞, 刘宁
【申请人】四川农业大学
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月27日
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