一种微流控生物芯片检测装置及制备方法
一种微流控生物芯片检测装置及制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种微流控生物芯片检测装置及制备方法。
【背景技术】
[0002]目前市场上体外诊断产品技术主要有免疫印迹和酶联免疫诊断技术(ELISA)，通过抗原与抗体之间的相互作用来检测相应抗原或抗体的存在，从而达到诊断某种疾病的目的。
[0003]免疫印迹法是一种在生命科学领域被广泛应用的蛋白质鉴定技术，测试需要经过电泳、转印和检测等步骤，操作步骤复杂，并且每次只能用一种血清以防造成污染，干扰测试结果，该装置容易出现假阴性的结果。
[0004]ELISA是免疫测定技术中应用最广的，利用孔板作为固相载体来测定抗原或抗体的一种技术。ELISA试剂盒检测已用于很多种疾病的诊断，实践证明是行之有效的。但是目前市场上出售的ELISA试剂盒大部分都是单一指标的检测，检测时间长，费用高，给患者带来较重的经济负担；另外，由于平行样品检测的延迟而导致实验结果出现差异，给诊断增加难度，延长了诊断时间，给医生和患者带来困惑，影响了早期疾病诊断和治疗。
[0005]以上两种产品检测成本较高，耗时长，信息的完整性和结果的准确性得不到确切的保证。而现实生活中经常需要对多种样本中的不同物质进行检测，才能获得样本的完整信息，必须快速且准确地获得这些信息，才能减少实验误差，保证数据的可信度。
[0006]专利CN 101526520B公开了一种生物样品的检测方法及装置，虽然可以实现多个样品的多种指标的检测，然而其生物分子包被在底板上，无论是制样还是检测时第一平板与第二平板均不能产生相对移动，否则会破坏第二平板上的生物分子，因此，对实验要求严格，从而也难保证检测质量。另外，利用其装置进行制样和检测时，由于其第一平板不得不处于活动中，需要手动移动位置，导致其制样及检测位置难以保持一致，进而使得检测时难以使用仪器自动对检测结果进行准确读取。此外，由于其第一平板不得不处于活动中，无法固定，使得其应用场合受限，仅适合实验室中少量样品的临时检测，无法工业批量生产应用；同时，由于其第一平板需要处于活动状态，难以实现与第二平板的密封结合，导致其制样或检测时难以消除样液交叉影响(污染)的问题，影响检测结果的稳定性；而且由于其第一平板需要处于活动状态，难以避免外界对其制备样品的影响，因此检测条件要求严格、并且要求从制样到检测在短期内快速完成，以减小外界对检测结果稳定性的影响。
[0007]针对上述不足，亟待开发一种操作简单、检测结果稳定可靠的检测方法和装置。
【发明内容】
[0008]本发明的目的在于提供一种操作简单、检测结果稳定可靠的微流控生物芯片检测装置及其制备方法。
[0009]为实现上述目的，本发明的具体方案如下:
[0010]本发明提供一种微流控生物芯片检测装置，所述检测装置包括沟槽板、底板；所述沟槽板包括第一表面和与第一表面相对的第二表面，并且通过所述第一表面与所述底板密封结合；所述沟槽板的第一表面上设有至少一条不交叉的沟槽，每条沟槽均与所述沟槽板的第一表面的边界之间留有距离，并且每条沟槽中设有至少一个检测点，每个检测点上分别负载有一种捕获用分子；所述沟槽板的第二表面上设有槽口，所述槽口设置于所述第二表面上与每条沟槽两端相对应的位置，并与所述沟槽连通，用于向每条沟槽中添加待测试样品。
[0011]在本发明中，所述密封结合指的是所述第一表面与所述底板之间紧密且沟槽中的物质(样品)难以在两者之间的界面处留存的结合，避免多个沟槽之间物质的交叉影响。在一个优先实施方式中，所述第一表面与所述底板之间通过热键合、超声键合或机械固定方式实现密封结合。
[0012]在本发明中，为了有利于所述第一表面与所述底板之间的密封结合，优选地，所述沟槽板和底板同时为平板，或者为带有相匹配弧度的板材。
[0013]根据本发明的检测装置，优选地，每条沟槽中设有至少两个检测点，所述的至少两个检测点上分别负载有不同的捕获用分子，从而可以同时检测多个指标。优选地，所述捕获用分子选自抗原、抗体或探针。
[0014]根据本发明的检测装置，优选地，所述沟槽的宽度为100-5000 μ m，所述沟槽的深度为100-5000 μ m ;所述检测点位于所述沟槽的底部。
[0015]在本发明中，所述检测点由能够吸附捕获用分子的材料制成，例如选自普通玻璃、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯、有机玻璃、聚二甲基硅氧烷、或者它们经活性基团改性后的材料。在一种实施方式中，所述检测点是由直接组成所述沟槽底面的区域所形成的位置点，此时捕获用分子直接负载在所述沟槽的底面上；在另一种实施方式中，所述检测点是由其他附着于所述沟槽底面上的物体所形成的位置点，例如所述检测点可以是由带颜色的材料附着在沟槽中的预定位置形成的，从而便于点样且有利于沟槽板材料的选择(例如选择疏水材料)，有利于后续检测时样液的清洗，其中所述物体在沟槽内的附着方式可以有多种，为本领域所熟知，这里不再赘述。
[0016]在本发明的一种实施方式中，所述第一表面上设有一条不交叉的沟槽。在本发明的另一种实施方式中，所述第一表面上设有至少两条不交叉的沟槽，从而可以同时对多个样品的多个指标进行检测。优选地，所述沟槽呈S型或蛇形。
[0017]在本发明中，所述槽口用于向每条沟槽中添加待测试样品，优选地，所述槽口呈锥形，其呈锥形的底部与所述沟槽连通，更有利于加样及清理；优选地，所述槽口位于所述第二表面上的上端直径为1.5-5mm，进一步优选为2_4mm，更优选为2.5-3.5mm。
[0018]根据本发明所述的检测装置，优选地，所述第二表面上还设有密封层，用于封闭所述槽口，由于槽口均集中设置于第二表面上，因此密封容易。
[0019]本发明还提供了一种上述检测装置的制备方法，包括如下步骤:
[0020]a、在沟槽板的第一表面上形成至少一条沟槽，并在所述沟槽板的第二表面上与每条沟槽两端相对应的位置开设槽口，所述槽口与所述沟槽连通，以便于向沟槽中添加待测试样品；
[0021]b、将至少一种捕获用分子通过点样方式分别点在沟槽中的预定位置，以形成至少一个负载有一种捕获用分子的检测点；
[0022]C、将所述底板与所述沟槽板的第一表面密封结合，得到所述检测装置。
[0023]本发明还提供了一种利用上述检测装置进行生物检测的方法，包括:
[0024]第一步:通过所述沟槽一端的槽口向所述沟槽内注入待检测样品；
[0025]第二步:对所述待检测样品与负载在所述检测点上的捕获用分子的相互作用进行检测。在一种实施方式中，所述第二步为对所述待检测样品与负载在所述检测点上的捕获用分子的相互作用进行显色或发光检测；进一步优选地，在所述第二步中，直接通过仪器对检测点的显色或发光结果进行阅读。
[0026]与现有技术相比，本发明具有以下优点:
[0027]1、本发明的检测装置将抗原或抗体等生物分子采用点样方式制备在沟槽中，与传统的平板包被制样相比，制备工艺简单，并且由于生物分子制备在沟槽中，因此沟槽板还可以对样品起到一定的保护作用，无论是在后续与底板密封结合时还是后续使用时，点样制备的生物分子检测点均不会受到机械损伤，因此质量更稳定。
[0028]2、本发明的检测装置在制备时，样品通过点样的方式点在沟槽中的预定位置，与现有技术中在平板上制备样品时样品检测位置难以准备保证相比，不仅有利于工业批量化、标准化生产以降低成本，而且在后续检测时有利于直接通过仪器对沟槽板上预定位置(检测点)的检测信息进行自动读取，从而在提高工作效率的同时确保所读取的检测信息的可靠性。
[0029]3、本发明的检测装置中生物分子点在沟槽中，不与底板接触，受底板在沟槽板与底板的键合(如热键合，超声键合，机械固定等)时其可以承受更激烈的条件，因此，在后续沟槽板与底板的键合中不会受影响，生产工艺更简单，更易实现规模化生产。
[0030]4、本发明的检测装置中，由于沟槽与所述沟槽板的第一表面的边界之间留有距离(即所述沟槽并不与上述边界相交，例如不小于Imm的距离)，再加上所述底 板的密封结合，从而使得所述沟槽仅通过所述槽口与外界连通，因此，本发明的检测装置在生产、包装、存储和使用过程中，均可以少受外界影响；本发明的检测装置还可以进一步在所述第二表面简单地设置密封层(比如密封薄膜)即可密封槽口，从而实现沟槽的可靠密封，以保证生物分子制样的稳定性，进而提高检测结果的可靠性。
[0031]5、本发明的检测装置在进行检测时，从槽口注样和洗液，简单快捷，容易量化，并且由于从槽口注样，多余的样液会汇聚在沟槽另一端的槽口处，便于清理，当沟槽板上设有多条沟槽时不易发生交叉影响；并且由于底板与沟槽板通过热键合、超声键合或机械固定等手段密封结合，在检测时可以有效避免样液在沟槽板与底板之间交叉影响；同时，由于使用时操作步骤简单快捷、易控，因此检测结果更稳定，便于大规模推广应用。
[0032]6、本发明的检测装置的沟槽内有不同的抗原、抗体或探针，可以同时获得多种样本的多个指标，即同时检测，使得实验尽量在相同条件下完成，大大提高了实验的精确度；同时，本发明装置可以批量生产，成本较低，降低了患者的经济负担，适合大规模的推广使用。
【附图说明】
[0033]图1微流控生物芯片检测装置的点样示意图；
[0034]图2微流控生物芯片检测装置的封接示意图；
[0035]图3本发明的微流控生物芯片检测装置示意图；
[0036]图4实施例5的检测结果；
[0037]图5实施例6的检测结果；
[0038]图6实施例7的检测结果；
[0039]图7实施例8的检测结果。
【具体实施方式】
[0040]以下将结合附图对本发明进行更详细的说明。
[0041]图1-3给出了本发明的微流控生物芯片检测装置及其制备、使用过程。本发明的微流控生物芯片检测装置包括沟槽板1、底板2 ;所述沟槽板I包括第一表面11和与第一表面11相对的第二表面12，并且通过所述第一表面11与所述底板2密封结合；所述沟槽板I的第一表面11上设有至少一条不交叉的沟槽3，每条沟槽3均与所述沟槽板I的第一表面11的边界之间留有距离，并且每条沟槽3中设有至少一个检测点(图中未示出)，每个检测点上分别负载有一种捕获用分子；所述沟槽板I的第二表面12上设有槽口 4，所述槽口 4设置于所述第二表面12上与每条沟槽3两端相对应的位置，并与所述沟槽3连通，用于向每条沟槽3中添加待测试样品。
[0042]在一个优选实施例中，所述槽口 4呈锥形，其呈锥形的底部与所述沟槽3连通，更有利于加样及清理；优选地，所述槽口 3位于所述第二表面12上的上端直径为1.5-5mm，进一步优选为2-4_，更优选为2.5-3.5mmο在一个实施例中，所述第二表面12上还设有密封层，用于封闭所述槽口 4，由于槽口 4均集中设置于第二表面12上，因此密封容易。
[0043]具体制备时，在沟槽板I上形成至少一条沟槽3，捕获用分子可以通过点样器5点在沟槽3中形成检测点，将点好样的沟槽板I和底板2封接(密封结合)，以便在沟槽3与底板2之间形成管道，从而组合成微流控芯片检测装置。使用时，在该装置槽口 4处加入样本和各种检测试剂进行检测。
[0044]在本发明的装置中，所述沟槽板I和底板2可为平板，也可为带有相匹配弧度的弯曲形状。沟槽板I和底板2的材质可以为有机材质或玻璃等，例如选自普通玻璃、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯、有机玻璃、聚二甲基硅氧烷及它们经活性基团改性后的材料。
[0045]另外，为了更进一步提高管道的封闭性，还可考虑在沟槽板I和底板2之间设置至少一层软膜，所述软膜的材质主要为PDMS(聚二甲基硅氧烷)材质，将PDMS与固化剂按照10:1的比例进行混合，浇注成膜后，90°C条件下固化30min即可制备。本发明的软膜的材质的实例包括道康宁sylgard 184。
[0046]在本发明的装置中，沟槽板I的沟槽3包括N (N彡I)条不交叉的通道，沟槽宽度为100-5000 μπι，槽口深度为100-5000 μπι，沟槽的长度可根据实际要求进行设计；进一步优选地，沟槽宽度为200-1500 μ m，沟槽深度为200-1500 μ m ;更优选地，沟槽深度为400-600 μ m，与常规方法相比，有利于减小样品用量，例如样品用量可以低至20 μ L，有利于检测。
[0047]在本发明的装置中，沟槽3表面可以不做修饰，也可以根据捕获用分子性质的不同进行修饰，使得捕获用分子更容易结合到其表面。
[0048]在本发明的装置中，所述沟槽3的每条通道中设有至少两个检测点，其分别负载有不同的捕获用分子。检测点之间的间距为0.3-10mm，优选为l-5mm，更优选为l-2mm。这样可以保证测试效率，并保证各个检测点不会相互影响而降低检测灵敏度。
[0049]在本发明中，沟槽板I的沟槽3是通过机械加工、注塑、光刻蚀、软刻蚀制备而成。沟槽板I与底板2可通过热键合、超声键合或机械固定等方法将两者结合，但不仅仅局限于上述方法，任意一种可将两者粘合起来的方法都在本发明的保护之内。
[0050]在本发明中，沟槽3的检测点负载有不同的捕获用分子，通过点样方式将捕获用分子负载在沟槽3中。本发明的捕获用分子包括但不局限于抗原、抗体、和/或探针；捕获用分子在检测点处的负载结合方式包括但不局限于化学键，分子间相互作用力等；点样方式可采用点样仪或手工点样，操作简单方便。例如，采用B1dot XYZ3060点样仪从左到右依次在沟槽板的沟槽内点样，具体点样参数为点间距可以为0.3-10mm，优选为l_5mm，更优选为l-2mm ;液滴量可以为1-1OOOnl，优选为30_800nl，更优选为50_100nl ;针尖距离沟槽板3的距离在2mm以内，点样时间控制在0.6-0.9ms，点样后室温敞口放置一段时间，例如l_2h左右，以使提高结合质量。另外，由于批量生产，因此可以控制生产间环境，使检测装置在适宜条件下密封结合或封装。
[0051]使用时，进行检测的方式包括但不局限于CCD和扫描仪，信号产生方式包括但不局限于化学发光、荧光和显色。
[0052]在本发明中，根据待检血清、检测目标、试剂和标记物的种类和性质，以及对显色结果的需要，可以选择以下不同的方式:
[0053]1、夹心法:根据实验要求采用双抗体或双抗原夹心法，利用此装置中的已知抗原或抗体，加入未标记的样品(含有抗体或抗原)进行相互作用，最后加入标记的抗原或抗体，进行显色或发光检测，有信号处为阳性，无信号处为阴性，可根据显色或发光强度进行定量研宄。
[0054]2、间接法:此装置中已知的试剂，如抗原，加入未标记的样品(例如抗体)进行相互作用，最后加入标记的二抗进行显色或化学发光检测，有信号处为阳性，无信号处为阴性，可根据显色或发光强度进行定量研宄。
[0055]3、竞争法:此装置中已知的抗原或抗体，在样品中加入已知的标记的抗原或抗体，与未标记的抗原或抗体进行混合，已知的抗原或抗体竞争性的与沟槽内的抗体或抗原相互作用，加入底物，信号强处为阴性，没有信号或信号弱处为阳性，可根据显色或发光强度进行定量研宄。
[0056]以下将结合实施例对本发明进行详细描述。
[0057]实施例1-芯片制备
[0058]取聚苯乙烯板，采用注塑法在其一面上刻画I条宽度为1000 μπι的S形沟槽，其中沟槽深度为200 μ m，这样沟槽板制备完成，在另一面的对应位置形成槽口 ；配制好AFP (甲胎蛋白)抗体、CEA(癌胚抗原)抗体、CA125(糖链抗原125)抗体的点样液(简称样液)(其中AFP抗体、CEA抗体、CA125抗体的浓度均为20 μ g/ml)，采用B1dot XYZ3060点样仪从左到右依次在沟槽板的沟槽内点样，具体点样参数为点间距为2mm，液滴量为50nl，针尖距离点样板的距离在2mm以内，点样时间控制在0.6-0.9ms，点样后室温敞口放置l_2h左右；另取与沟槽板同样尺寸的聚苯乙烯板作为底板，将沟槽板与底板采用机械法封接，得到微流控芯片检测装置。
[0059]实施例2-芯片制备
[0060]取聚二甲基娃氧烧板，采用机 械加工法在其一面上刻画I条宽度为100 μπι的S状沟槽，其中沟槽深度为400 μ m，在另一面的对应位置形成槽口，这样沟槽板制备完成；配置好乙肝表面抗体、甲肝表面抗体、丙肝表面抗体的点样液(其中乙肝表面抗体、甲肝表面抗体、丙肝表面抗体的浓度均为30 μ g/ml)，用B1dot XYZ3060点样仪从左到右依次在沟槽板的沟槽内点样，具体点样参数为点间距为2mm，液滴量为50nl，针尖距离点样板的距离在2mm以内，点样时间控制在0.6-0.9ms，点样后室温敞口放置l_2h左右；另取与沟槽板同样尺寸的聚二甲基硅氧烷作为底板，将沟槽板与底板采用超声波焊接法封接，得到微流控芯片检测装置。
[0061]实施例3-芯片制备
[0062]取有机玻璃板，采用软刻蚀法在其一面上刻画I条宽度为5000 μ m弯状沟槽，其中沟槽深度为800 μ m，在另一面的对应位置形成槽口，这样沟槽板制备完成；配置好AFP抗体、CEA抗体、PSA (前列腺特异性抗原)抗体、CA125糖链抗原抗体、CA19-9糖抗原抗体和CA15-3糖链抗原抗体的点样液(其中AFP抗体、CEA抗体、PSA抗体、CA125糖链抗原抗体、CA19-9糖抗原抗体和CA15-3糖链抗原抗体的浓度均为30 μ g/ml)，用移液器移取配置好的点样液从左到右依次在沟槽板的沟槽内点样，具体点样参数为点间距为2_，液滴量为500nl，接触式点样，点样后室温敞口放置l-2h左右；另取与沟槽板同样尺寸的有机玻璃板作为底板，将沟槽板与底板采用机械固定法封接，得到微流控芯片检测装置。
[0063]实施例4-芯片制备
[0064]取聚氯乙烯板，采用光刻蚀法在其一面上刻画I条宽度为1000 μ m S形沟槽，其中沟槽深度为1000 μ m，在另一面的对应位置形成槽口，这样沟槽板制备完成；配置好浓度为20 μ g/ml的甲肝抗原、乙肝抗原和丙肝抗原的点样液(其中甲肝抗原、乙肝抗原和丙肝抗原的浓度均为20 μ g/ml)，用移液器移取点样液从左到右依次在沟槽板的沟槽内点样，具体点样参数为点间距为2mm，液滴量为500nl，接触式点样，点样后室温敞口放置l_2h左右?’另取与沟槽板同样尺寸的聚氯乙烯板作为底板，将沟槽板与底板采用超声波焊接法封接，得到微流控芯片检测装置。
[0065]实施例5-芯片应用
[0066]通过实施例1中制备的检测装置的槽口向沟槽中加入浓度均为75ng/ml的AFP，CEA、CA125的标准品，室温反应30min，吸除剩余标准品，加入酶标抗体，室温反应30min，清洗3次，排干管道，加入发光液(Millipore Western Blot化学发光HRP底物ECL发光液，货号:WSKLS0050，下同)，将芯片放入芯片阅读仪(仪器厂家:北京原平皓生物技术有限公司，型号:tanon 5200)进行检测。测试结果见图4，从图中我们可以看出各指标均呈现阳性(发光部分即为阳性)，该装置可同时测定AFP、CEA、CA125，相对于单项的ELISA法，大大缩短了检测时间，降低了检测成本，并且可实现自动化，简化了操作步骤。
[0067]实施例6-芯片应用
[0068]通过实施例2中制备的检测装置的槽口向沟槽中加入浓度依次(从左到右)为9.375ng/ml、18.75ng/ml、37.5ng/ml的乙肝、甲肝、丙肝的标准品，室温反应30min，吸除剩余标准品，加入酶标抗体，室温反应30min，清洗3次，排干管道，加入发光液，将芯片放入芯片阅读仪进行检测。测试结果见图5，从图中我们可以看出各指标均呈现阳性(发光部分即为阳性)，随着标准品浓度的增大，发光强度增强，该装置可同时测定乙肝、甲肝和丙肝。
[0069]实施例7-芯片应用
[0070]通过实施例3中制备的检测装置的槽口向沟槽中加入浓度均为18.75ng/ml的AFP、CEA、PSA(前列腺特异性抗原)、CA125糖链抗原、CA19-9糖抗原和CA15-3糖链抗原的混合标准品，室温反应30min，吸除剩余标准品，加入酶标抗体，室温反应30min，清洗3次，排干管道，加入发光液，将芯片放入芯片阅读仪进行检测。测试结果见图6，从图中我们可以看出各指标均呈现阳性(发光部分即为阳性)，该装置可同时测定AFP、CEA、PSA、CA125、CA 19-9和CA15-3的相关抗体。
[0071]实施例8-芯片应用
[0072]通过实施例5中制备的检测装置的槽口向沟槽中加入浓度均为37.5ng/ml的甲肝、乙肝和丙肝抗体标准品，室温反应30min，吸除剩余标准品，加入酶标抗体，室温反应30min，清洗3次，排干管道，加入发光液，将芯片放入芯片阅读仪进行检测。测试结果见图7，从图中我们可以看出各指标均呈现阳性(发光部分即为阳性)，该装置可同时测定甲肝、乙肝和丙肝的相关抗体。
【主权项】
1.一种微流控生物芯片检测装置，其特征在于，所述检测装置包括沟槽板、底板；所述沟槽板包括第一表面和与第一表面相对的第二表面，并且通过所述第一表面与所述底板密封结合；所述沟槽板的第一表面上设有至少一条不交叉的沟槽，每条沟槽均与所述沟槽板的第一表面的边界之间留有距离，并且每条沟槽中设有至少一个检测点，每个检测点上分别负载有一种捕获用分子；所述沟槽板的第二表面上设有槽口，所述槽口设置于所述第二表面上与每条沟槽两端相对应的位置，并与所述沟槽连通，用于向每条沟槽中添加待测试样品。2.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于，每条沟槽中设有至少两个检测点，所述的至少两个检测点上分别负载有不同的捕获用分子；优选地，所述捕获用分子选自抗原、抗体或探针。3.根据权利要求1或2所述的检测装置，其特征在于，所述检测点由能够吸附捕获用分子的材料制成；优选为选自普通玻璃、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯、有机玻璃、聚二甲基硅氧烷、或者它们经活性基团改性后的材料。4.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于，所述沟槽的宽度为100-5000μ m，所述沟槽的深度为100-5000 μm ;所述检测点位于所述沟槽的底部。5.根据权利要求1或4所述的检测装置，其特征在于，所述检测点是由直接组成所述沟槽底面的区域所形成的位置点，或者是由其他附着于所述沟槽底面上的物体所形成的位置点。6.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于，所述第一表面上设有一条不交叉的沟槽，或者所述第一表面上设有至少两条不交叉的沟槽；优选地，所述沟槽呈S型或蛇形。7.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于，所述沟槽板和底板同为平板，或者为带有相匹配弧度的板材。8.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于，所述槽口呈锥形，其锥形底部与所述沟槽连通；优选地，所述第二表面上还设有密封层，用于封闭所述槽口。9.根据权利要求1-8中任一项所述的检测装置的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: a、在沟槽板的第一表面上形成至少一条沟槽，并在所述沟槽板的第二表面上与每条沟槽两端相对应的位置开设槽口，所述槽口与所述沟槽连通，以便于向沟槽中添加待测试样品; b、将至少一种捕获用分子通过点样方式分别点在沟槽中的预定位置，以形成至少一个负载有一种捕获用分子的检测点； C、将所述底板与所述沟槽板的第一表面密封结合，得到所述检测装置。10.一种利用权利要求1-8中任一项所述的检测装置进行生物检测的方法，包括: 第一步:通过所述沟槽一端的槽口向所述沟槽内注入待检测样品； 第二步:对所述待检测样品与负载在所述检测点上的捕获用分子的相互作用进行检测。
【专利摘要】本发明公开了一种微流控生物芯片检测装置及制备方法。该检测装置主要是由沟槽板、底板、沟槽和槽口组成，所述沟槽内设有检测点。该检测装置制备、使用简单，适于大规模生产、应用，并且检测结果稳定可靠。
【IPC分类】G01N33/50, G01N21/76, G01N21/78
【公开号】CN104897654
【申请号】CN201510294370
【发明人】蓝海, 蓝洋, 张洪涛, 杨文兴, 时圣涛, 任方萍
【申请人】北京纳迅科技有限公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月2日
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种微流控生物芯片检测装置及制备方法。
【背景技术】
[0002]目前市场上体外诊断产品技术主要有免疫印迹和酶联免疫诊断技术(ELISA)，通过抗原与抗体之间的相互作用来检测相应抗原或抗体的存在，从而达到诊断某种疾病的目的。
[0003]免疫印迹法是一种在生命科学领域被广泛应用的蛋白质鉴定技术，测试需要经过电泳、转印和检测等步骤，操作步骤复杂，并且每次只能用一种血清以防造成污染，干扰测试结果，该装置容易出现假阴性的结果。
[0004]ELISA是免疫测定技术中应用最广的，利用孔板作为固相载体来测定抗原或抗体的一种技术。ELISA试剂盒检测已用于很多种疾病的诊断，实践证明是行之有效的。但是目前市场上出售的ELISA试剂盒大部分都是单一指标的检测，检测时间长，费用高，给患者带来较重的经济负担；另外，由于平行样品检测的延迟而导致实验结果出现差异，给诊断增加难度，延长了诊断时间，给医生和患者带来困惑，影响了早期疾病诊断和治疗。
[0005]以上两种产品检测成本较高，耗时长，信息的完整性和结果的准确性得不到确切的保证。而现实生活中经常需要对多种样本中的不同物质进行检测，才能获得样本的完整信息，必须快速且准确地获得这些信息，才能减少实验误差，保证数据的可信度。
[0006]专利CN 101526520B公开了一种生物样品的检测方法及装置，虽然可以实现多个样品的多种指标的检测，然而其生物分子包被在底板上，无论是制样还是检测时第一平板与第二平板均不能产生相对移动，否则会破坏第二平板上的生物分子，因此，对实验要求严格，从而也难保证检测质量。另外，利用其装置进行制样和检测时，由于其第一平板不得不处于活动中，需要手动移动位置，导致其制样及检测位置难以保持一致，进而使得检测时难以使用仪器自动对检测结果进行准确读取。此外，由于其第一平板不得不处于活动中，无法固定，使得其应用场合受限，仅适合实验室中少量样品的临时检测，无法工业批量生产应用；同时，由于其第一平板需要处于活动状态，难以实现与第二平板的密封结合，导致其制样或检测时难以消除样液交叉影响(污染)的问题，影响检测结果的稳定性；而且由于其第一平板需要处于活动状态，难以避免外界对其制备样品的影响，因此检测条件要求严格、并且要求从制样到检测在短期内快速完成，以减小外界对检测结果稳定性的影响。
[0007]针对上述不足，亟待开发一种操作简单、检测结果稳定可靠的检测方法和装置。
【发明内容】
[0008]本发明的目的在于提供一种操作简单、检测结果稳定可靠的微流控生物芯片检测装置及其制备方法。
[0009]为实现上述目的，本发明的具体方案如下:
[0010]本发明提供一种微流控生物芯片检测装置，所述检测装置包括沟槽板、底板；所述沟槽板包括第一表面和与第一表面相对的第二表面，并且通过所述第一表面与所述底板密封结合；所述沟槽板的第一表面上设有至少一条不交叉的沟槽，每条沟槽均与所述沟槽板的第一表面的边界之间留有距离，并且每条沟槽中设有至少一个检测点，每个检测点上分别负载有一种捕获用分子；所述沟槽板的第二表面上设有槽口，所述槽口设置于所述第二表面上与每条沟槽两端相对应的位置，并与所述沟槽连通，用于向每条沟槽中添加待测试样品。
[0011]在本发明中，所述密封结合指的是所述第一表面与所述底板之间紧密且沟槽中的物质(样品)难以在两者之间的界面处留存的结合，避免多个沟槽之间物质的交叉影响。在一个优先实施方式中，所述第一表面与所述底板之间通过热键合、超声键合或机械固定方式实现密封结合。
[0012]在本发明中，为了有利于所述第一表面与所述底板之间的密封结合，优选地，所述沟槽板和底板同时为平板，或者为带有相匹配弧度的板材。
[0013]根据本发明的检测装置，优选地，每条沟槽中设有至少两个检测点，所述的至少两个检测点上分别负载有不同的捕获用分子，从而可以同时检测多个指标。优选地，所述捕获用分子选自抗原、抗体或探针。
[0014]根据本发明的检测装置，优选地，所述沟槽的宽度为100-5000 μ m，所述沟槽的深度为100-5000 μ m ;所述检测点位于所述沟槽的底部。
[0015]在本发明中，所述检测点由能够吸附捕获用分子的材料制成，例如选自普通玻璃、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯、有机玻璃、聚二甲基硅氧烷、或者它们经活性基团改性后的材料。在一种实施方式中，所述检测点是由直接组成所述沟槽底面的区域所形成的位置点，此时捕获用分子直接负载在所述沟槽的底面上；在另一种实施方式中，所述检测点是由其他附着于所述沟槽底面上的物体所形成的位置点，例如所述检测点可以是由带颜色的材料附着在沟槽中的预定位置形成的，从而便于点样且有利于沟槽板材料的选择(例如选择疏水材料)，有利于后续检测时样液的清洗，其中所述物体在沟槽内的附着方式可以有多种，为本领域所熟知，这里不再赘述。
[0016]在本发明的一种实施方式中，所述第一表面上设有一条不交叉的沟槽。在本发明的另一种实施方式中，所述第一表面上设有至少两条不交叉的沟槽，从而可以同时对多个样品的多个指标进行检测。优选地，所述沟槽呈S型或蛇形。
[0017]在本发明中，所述槽口用于向每条沟槽中添加待测试样品，优选地，所述槽口呈锥形，其呈锥形的底部与所述沟槽连通，更有利于加样及清理；优选地，所述槽口位于所述第二表面上的上端直径为1.5-5mm，进一步优选为2_4mm，更优选为2.5-3.5mm。
[0018]根据本发明所述的检测装置，优选地，所述第二表面上还设有密封层，用于封闭所述槽口，由于槽口均集中设置于第二表面上，因此密封容易。
[0019]本发明还提供了一种上述检测装置的制备方法，包括如下步骤:
[0020]a、在沟槽板的第一表面上形成至少一条沟槽，并在所述沟槽板的第二表面上与每条沟槽两端相对应的位置开设槽口，所述槽口与所述沟槽连通，以便于向沟槽中添加待测试样品；
[0021]b、将至少一种捕获用分子通过点样方式分别点在沟槽中的预定位置，以形成至少一个负载有一种捕获用分子的检测点；
[0022]C、将所述底板与所述沟槽板的第一表面密封结合，得到所述检测装置。
[0023]本发明还提供了一种利用上述检测装置进行生物检测的方法，包括:
[0024]第一步:通过所述沟槽一端的槽口向所述沟槽内注入待检测样品；
[0025]第二步:对所述待检测样品与负载在所述检测点上的捕获用分子的相互作用进行检测。在一种实施方式中，所述第二步为对所述待检测样品与负载在所述检测点上的捕获用分子的相互作用进行显色或发光检测；进一步优选地，在所述第二步中，直接通过仪器对检测点的显色或发光结果进行阅读。
[0026]与现有技术相比，本发明具有以下优点:
[0027]1、本发明的检测装置将抗原或抗体等生物分子采用点样方式制备在沟槽中，与传统的平板包被制样相比，制备工艺简单，并且由于生物分子制备在沟槽中，因此沟槽板还可以对样品起到一定的保护作用，无论是在后续与底板密封结合时还是后续使用时，点样制备的生物分子检测点均不会受到机械损伤，因此质量更稳定。
[0028]2、本发明的检测装置在制备时，样品通过点样的方式点在沟槽中的预定位置，与现有技术中在平板上制备样品时样品检测位置难以准备保证相比，不仅有利于工业批量化、标准化生产以降低成本，而且在后续检测时有利于直接通过仪器对沟槽板上预定位置(检测点)的检测信息进行自动读取，从而在提高工作效率的同时确保所读取的检测信息的可靠性。
[0029]3、本发明的检测装置中生物分子点在沟槽中，不与底板接触，受底板在沟槽板与底板的键合(如热键合，超声键合，机械固定等)时其可以承受更激烈的条件，因此，在后续沟槽板与底板的键合中不会受影响，生产工艺更简单，更易实现规模化生产。
[0030]4、本发明的检测装置中，由于沟槽与所述沟槽板的第一表面的边界之间留有距离(即所述沟槽并不与上述边界相交，例如不小于Imm的距离)，再加上所述底 板的密封结合，从而使得所述沟槽仅通过所述槽口与外界连通，因此，本发明的检测装置在生产、包装、存储和使用过程中，均可以少受外界影响；本发明的检测装置还可以进一步在所述第二表面简单地设置密封层(比如密封薄膜)即可密封槽口，从而实现沟槽的可靠密封，以保证生物分子制样的稳定性，进而提高检测结果的可靠性。
[0031]5、本发明的检测装置在进行检测时，从槽口注样和洗液，简单快捷，容易量化，并且由于从槽口注样，多余的样液会汇聚在沟槽另一端的槽口处，便于清理，当沟槽板上设有多条沟槽时不易发生交叉影响；并且由于底板与沟槽板通过热键合、超声键合或机械固定等手段密封结合，在检测时可以有效避免样液在沟槽板与底板之间交叉影响；同时，由于使用时操作步骤简单快捷、易控，因此检测结果更稳定，便于大规模推广应用。
[0032]6、本发明的检测装置的沟槽内有不同的抗原、抗体或探针，可以同时获得多种样本的多个指标，即同时检测，使得实验尽量在相同条件下完成，大大提高了实验的精确度；同时，本发明装置可以批量生产，成本较低，降低了患者的经济负担，适合大规模的推广使用。
【附图说明】
[0033]图1微流控生物芯片检测装置的点样示意图；
[0034]图2微流控生物芯片检测装置的封接示意图；
[0035]图3本发明的微流控生物芯片检测装置示意图；
[0036]图4实施例5的检测结果；
[0037]图5实施例6的检测结果；
[0038]图6实施例7的检测结果；
[0039]图7实施例8的检测结果。
【具体实施方式】
[0040]以下将结合附图对本发明进行更详细的说明。
[0041]图1-3给出了本发明的微流控生物芯片检测装置及其制备、使用过程。本发明的微流控生物芯片检测装置包括沟槽板1、底板2 ;所述沟槽板I包括第一表面11和与第一表面11相对的第二表面12，并且通过所述第一表面11与所述底板2密封结合；所述沟槽板I的第一表面11上设有至少一条不交叉的沟槽3，每条沟槽3均与所述沟槽板I的第一表面11的边界之间留有距离，并且每条沟槽3中设有至少一个检测点(图中未示出)，每个检测点上分别负载有一种捕获用分子；所述沟槽板I的第二表面12上设有槽口 4，所述槽口 4设置于所述第二表面12上与每条沟槽3两端相对应的位置，并与所述沟槽3连通，用于向每条沟槽3中添加待测试样品。
[0042]在一个优选实施例中，所述槽口 4呈锥形，其呈锥形的底部与所述沟槽3连通，更有利于加样及清理；优选地，所述槽口 3位于所述第二表面12上的上端直径为1.5-5mm，进一步优选为2-4_，更优选为2.5-3.5mmο在一个实施例中，所述第二表面12上还设有密封层，用于封闭所述槽口 4，由于槽口 4均集中设置于第二表面12上，因此密封容易。
[0043]具体制备时，在沟槽板I上形成至少一条沟槽3，捕获用分子可以通过点样器5点在沟槽3中形成检测点，将点好样的沟槽板I和底板2封接(密封结合)，以便在沟槽3与底板2之间形成管道，从而组合成微流控芯片检测装置。使用时，在该装置槽口 4处加入样本和各种检测试剂进行检测。
[0044]在本发明的装置中，所述沟槽板I和底板2可为平板，也可为带有相匹配弧度的弯曲形状。沟槽板I和底板2的材质可以为有机材质或玻璃等，例如选自普通玻璃、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯、有机玻璃、聚二甲基硅氧烷及它们经活性基团改性后的材料。
[0045]另外，为了更进一步提高管道的封闭性，还可考虑在沟槽板I和底板2之间设置至少一层软膜，所述软膜的材质主要为PDMS(聚二甲基硅氧烷)材质，将PDMS与固化剂按照10:1的比例进行混合，浇注成膜后，90°C条件下固化30min即可制备。本发明的软膜的材质的实例包括道康宁sylgard 184。
[0046]在本发明的装置中，沟槽板I的沟槽3包括N (N彡I)条不交叉的通道，沟槽宽度为100-5000 μπι，槽口深度为100-5000 μπι，沟槽的长度可根据实际要求进行设计；进一步优选地，沟槽宽度为200-1500 μ m，沟槽深度为200-1500 μ m ;更优选地，沟槽深度为400-600 μ m，与常规方法相比，有利于减小样品用量，例如样品用量可以低至20 μ L，有利于检测。
[0047]在本发明的装置中，沟槽3表面可以不做修饰，也可以根据捕获用分子性质的不同进行修饰，使得捕获用分子更容易结合到其表面。
[0048]在本发明的装置中，所述沟槽3的每条通道中设有至少两个检测点，其分别负载有不同的捕获用分子。检测点之间的间距为0.3-10mm，优选为l-5mm，更优选为l-2mm。这样可以保证测试效率，并保证各个检测点不会相互影响而降低检测灵敏度。
[0049]在本发明中，沟槽板I的沟槽3是通过机械加工、注塑、光刻蚀、软刻蚀制备而成。沟槽板I与底板2可通过热键合、超声键合或机械固定等方法将两者结合，但不仅仅局限于上述方法，任意一种可将两者粘合起来的方法都在本发明的保护之内。
[0050]在本发明中，沟槽3的检测点负载有不同的捕获用分子，通过点样方式将捕获用分子负载在沟槽3中。本发明的捕获用分子包括但不局限于抗原、抗体、和/或探针；捕获用分子在检测点处的负载结合方式包括但不局限于化学键，分子间相互作用力等；点样方式可采用点样仪或手工点样，操作简单方便。例如，采用B1dot XYZ3060点样仪从左到右依次在沟槽板的沟槽内点样，具体点样参数为点间距可以为0.3-10mm，优选为l_5mm，更优选为l-2mm ;液滴量可以为1-1OOOnl，优选为30_800nl，更优选为50_100nl ;针尖距离沟槽板3的距离在2mm以内，点样时间控制在0.6-0.9ms，点样后室温敞口放置一段时间，例如l_2h左右，以使提高结合质量。另外，由于批量生产，因此可以控制生产间环境，使检测装置在适宜条件下密封结合或封装。
[0051]使用时，进行检测的方式包括但不局限于CCD和扫描仪，信号产生方式包括但不局限于化学发光、荧光和显色。
[0052]在本发明中，根据待检血清、检测目标、试剂和标记物的种类和性质，以及对显色结果的需要，可以选择以下不同的方式:
[0053]1、夹心法:根据实验要求采用双抗体或双抗原夹心法，利用此装置中的已知抗原或抗体，加入未标记的样品(含有抗体或抗原)进行相互作用，最后加入标记的抗原或抗体，进行显色或发光检测，有信号处为阳性，无信号处为阴性，可根据显色或发光强度进行定量研宄。
[0054]2、间接法:此装置中已知的试剂，如抗原，加入未标记的样品(例如抗体)进行相互作用，最后加入标记的二抗进行显色或化学发光检测，有信号处为阳性，无信号处为阴性，可根据显色或发光强度进行定量研宄。
[0055]3、竞争法:此装置中已知的抗原或抗体，在样品中加入已知的标记的抗原或抗体，与未标记的抗原或抗体进行混合，已知的抗原或抗体竞争性的与沟槽内的抗体或抗原相互作用，加入底物，信号强处为阴性，没有信号或信号弱处为阳性，可根据显色或发光强度进行定量研宄。
[0056]以下将结合实施例对本发明进行详细描述。
[0057]实施例1-芯片制备
[0058]取聚苯乙烯板，采用注塑法在其一面上刻画I条宽度为1000 μπι的S形沟槽，其中沟槽深度为200 μ m，这样沟槽板制备完成，在另一面的对应位置形成槽口 ；配制好AFP (甲胎蛋白)抗体、CEA(癌胚抗原)抗体、CA125(糖链抗原125)抗体的点样液(简称样液)(其中AFP抗体、CEA抗体、CA125抗体的浓度均为20 μ g/ml)，采用B1dot XYZ3060点样仪从左到右依次在沟槽板的沟槽内点样，具体点样参数为点间距为2mm，液滴量为50nl，针尖距离点样板的距离在2mm以内，点样时间控制在0.6-0.9ms，点样后室温敞口放置l_2h左右；另取与沟槽板同样尺寸的聚苯乙烯板作为底板，将沟槽板与底板采用机械法封接，得到微流控芯片检测装置。
[0059]实施例2-芯片制备
[0060]取聚二甲基娃氧烧板，采用机 械加工法在其一面上刻画I条宽度为100 μπι的S状沟槽，其中沟槽深度为400 μ m，在另一面的对应位置形成槽口，这样沟槽板制备完成；配置好乙肝表面抗体、甲肝表面抗体、丙肝表面抗体的点样液(其中乙肝表面抗体、甲肝表面抗体、丙肝表面抗体的浓度均为30 μ g/ml)，用B1dot XYZ3060点样仪从左到右依次在沟槽板的沟槽内点样，具体点样参数为点间距为2mm，液滴量为50nl，针尖距离点样板的距离在2mm以内，点样时间控制在0.6-0.9ms，点样后室温敞口放置l_2h左右；另取与沟槽板同样尺寸的聚二甲基硅氧烷作为底板，将沟槽板与底板采用超声波焊接法封接，得到微流控芯片检测装置。
[0061]实施例3-芯片制备
[0062]取有机玻璃板，采用软刻蚀法在其一面上刻画I条宽度为5000 μ m弯状沟槽，其中沟槽深度为800 μ m，在另一面的对应位置形成槽口，这样沟槽板制备完成；配置好AFP抗体、CEA抗体、PSA (前列腺特异性抗原)抗体、CA125糖链抗原抗体、CA19-9糖抗原抗体和CA15-3糖链抗原抗体的点样液(其中AFP抗体、CEA抗体、PSA抗体、CA125糖链抗原抗体、CA19-9糖抗原抗体和CA15-3糖链抗原抗体的浓度均为30 μ g/ml)，用移液器移取配置好的点样液从左到右依次在沟槽板的沟槽内点样，具体点样参数为点间距为2_，液滴量为500nl，接触式点样，点样后室温敞口放置l-2h左右；另取与沟槽板同样尺寸的有机玻璃板作为底板，将沟槽板与底板采用机械固定法封接，得到微流控芯片检测装置。
[0063]实施例4-芯片制备
[0064]取聚氯乙烯板，采用光刻蚀法在其一面上刻画I条宽度为1000 μ m S形沟槽，其中沟槽深度为1000 μ m，在另一面的对应位置形成槽口，这样沟槽板制备完成；配置好浓度为20 μ g/ml的甲肝抗原、乙肝抗原和丙肝抗原的点样液(其中甲肝抗原、乙肝抗原和丙肝抗原的浓度均为20 μ g/ml)，用移液器移取点样液从左到右依次在沟槽板的沟槽内点样，具体点样参数为点间距为2mm，液滴量为500nl，接触式点样，点样后室温敞口放置l_2h左右?’另取与沟槽板同样尺寸的聚氯乙烯板作为底板，将沟槽板与底板采用超声波焊接法封接，得到微流控芯片检测装置。
[0065]实施例5-芯片应用
[0066]通过实施例1中制备的检测装置的槽口向沟槽中加入浓度均为75ng/ml的AFP，CEA、CA125的标准品，室温反应30min，吸除剩余标准品，加入酶标抗体，室温反应30min，清洗3次，排干管道，加入发光液(Millipore Western Blot化学发光HRP底物ECL发光液，货号:WSKLS0050，下同)，将芯片放入芯片阅读仪(仪器厂家:北京原平皓生物技术有限公司，型号:tanon 5200)进行检测。测试结果见图4，从图中我们可以看出各指标均呈现阳性(发光部分即为阳性)，该装置可同时测定AFP、CEA、CA125，相对于单项的ELISA法，大大缩短了检测时间，降低了检测成本，并且可实现自动化，简化了操作步骤。
[0067]实施例6-芯片应用
[0068]通过实施例2中制备的检测装置的槽口向沟槽中加入浓度依次(从左到右)为9.375ng/ml、18.75ng/ml、37.5ng/ml的乙肝、甲肝、丙肝的标准品，室温反应30min，吸除剩余标准品，加入酶标抗体，室温反应30min，清洗3次，排干管道，加入发光液，将芯片放入芯片阅读仪进行检测。测试结果见图5，从图中我们可以看出各指标均呈现阳性(发光部分即为阳性)，随着标准品浓度的增大，发光强度增强，该装置可同时测定乙肝、甲肝和丙肝。
[0069]实施例7-芯片应用
[0070]通过实施例3中制备的检测装置的槽口向沟槽中加入浓度均为18.75ng/ml的AFP、CEA、PSA(前列腺特异性抗原)、CA125糖链抗原、CA19-9糖抗原和CA15-3糖链抗原的混合标准品，室温反应30min，吸除剩余标准品，加入酶标抗体，室温反应30min，清洗3次，排干管道，加入发光液，将芯片放入芯片阅读仪进行检测。测试结果见图6，从图中我们可以看出各指标均呈现阳性(发光部分即为阳性)，该装置可同时测定AFP、CEA、PSA、CA125、CA 19-9和CA15-3的相关抗体。
[0071]实施例8-芯片应用
[0072]通过实施例5中制备的检测装置的槽口向沟槽中加入浓度均为37.5ng/ml的甲肝、乙肝和丙肝抗体标准品，室温反应30min，吸除剩余标准品，加入酶标抗体，室温反应30min，清洗3次，排干管道，加入发光液，将芯片放入芯片阅读仪进行检测。测试结果见图7，从图中我们可以看出各指标均呈现阳性(发光部分即为阳性)，该装置可同时测定甲肝、乙肝和丙肝的相关抗体。
【主权项】
1.一种微流控生物芯片检测装置，其特征在于，所述检测装置包括沟槽板、底板；所述沟槽板包括第一表面和与第一表面相对的第二表面，并且通过所述第一表面与所述底板密封结合；所述沟槽板的第一表面上设有至少一条不交叉的沟槽，每条沟槽均与所述沟槽板的第一表面的边界之间留有距离，并且每条沟槽中设有至少一个检测点，每个检测点上分别负载有一种捕获用分子；所述沟槽板的第二表面上设有槽口，所述槽口设置于所述第二表面上与每条沟槽两端相对应的位置，并与所述沟槽连通，用于向每条沟槽中添加待测试样品。2.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于，每条沟槽中设有至少两个检测点，所述的至少两个检测点上分别负载有不同的捕获用分子；优选地，所述捕获用分子选自抗原、抗体或探针。3.根据权利要求1或2所述的检测装置，其特征在于，所述检测点由能够吸附捕获用分子的材料制成；优选为选自普通玻璃、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯、有机玻璃、聚二甲基硅氧烷、或者它们经活性基团改性后的材料。4.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于，所述沟槽的宽度为100-5000μ m，所述沟槽的深度为100-5000 μm ;所述检测点位于所述沟槽的底部。5.根据权利要求1或4所述的检测装置，其特征在于，所述检测点是由直接组成所述沟槽底面的区域所形成的位置点，或者是由其他附着于所述沟槽底面上的物体所形成的位置点。6.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于，所述第一表面上设有一条不交叉的沟槽，或者所述第一表面上设有至少两条不交叉的沟槽；优选地，所述沟槽呈S型或蛇形。7.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于，所述沟槽板和底板同为平板，或者为带有相匹配弧度的板材。8.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于，所述槽口呈锥形，其锥形底部与所述沟槽连通；优选地，所述第二表面上还设有密封层，用于封闭所述槽口。9.根据权利要求1-8中任一项所述的检测装置的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: a、在沟槽板的第一表面上形成至少一条沟槽，并在所述沟槽板的第二表面上与每条沟槽两端相对应的位置开设槽口，所述槽口与所述沟槽连通，以便于向沟槽中添加待测试样品; b、将至少一种捕获用分子通过点样方式分别点在沟槽中的预定位置，以形成至少一个负载有一种捕获用分子的检测点； C、将所述底板与所述沟槽板的第一表面密封结合，得到所述检测装置。10.一种利用权利要求1-8中任一项所述的检测装置进行生物检测的方法，包括: 第一步:通过所述沟槽一端的槽口向所述沟槽内注入待检测样品； 第二步:对所述待检测样品与负载在所述检测点上的捕获用分子的相互作用进行检测。
【专利摘要】本发明公开了一种微流控生物芯片检测装置及制备方法。该检测装置主要是由沟槽板、底板、沟槽和槽口组成，所述沟槽内设有检测点。该检测装置制备、使用简单，适于大规模生产、应用，并且检测结果稳定可靠。
【IPC分类】G01N33/50, G01N21/76, G01N21/78
【公开号】CN104897654
【申请号】CN201510294370
【发明人】蓝海, 蓝洋, 张洪涛, 杨文兴, 时圣涛, 任方萍
【申请人】北京纳迅科技有限公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月2日
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