Smith试剂在检测液体检材中GHB中的应用
Smith试剂在检测液体检材中GHB中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于检测领域，具体涉及Smith试剂在检测液体检材中GHB中的应用。
【背景技术】
[0002] 临床显示，口服GHB10mg，会产生暂时性记忆丧失，而一次使用达20g就会造成中 毒。中毒症状包括恶心、呕吐、头痛、反射作用丧失、失去意识、昏迷甚至死亡，与酒精并用会 更加剧其危险性。其有可能被应用于犯罪，如：添加到常见的酒类饮品（伏特加、白酒、红葡 萄酒、啤酒）或者饮料（橙汁、绿茶、雪碧、可乐）而给予被害人饮用，达到不法目的，也有一 些人为了追求感官刺激而服用GHB。
[0003] 因此，如何快速检测检测液体检材中GHB成分，控制其被非法滥用，需要一种快速 准确的检测方法，目前针对GHB的颜色反应原理均为将GHB内酯化成GBL后的双键氧化，当 前，GHB在我国为管制药品，而GBL作为一种应用广泛的香料、医药中间体不受管制，因而， 无法规避GBL对GHB检测结果的干扰，可能造成假阳性的产生。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种Smith试剂在检测液体检材中GHB(y-羟丁酸）中的应 用。
[0005] 本发明的再一个目的是提供一种液体检材中GHB的快速颜色反应辅助检测方法。
[0006] 本发明所提供的检测方法，包括如下步骤：向待检测液体检材中滴加Smith试剂 (颜色呈橙红色），若待检测液体检材颜色变为绿色，则证明待检测液体检材中候选含有 GHB，反之，则候选不含或者含量低于检测限。
[0007]上述检测方法中，所述待检测液体检材与Smith试剂的体积比为1:(0. 2-0. 6)，具 体可按如下方法：向〇. 5ml的所述待检测液体检材中滴加2-6滴的所述Smith试剂，其中， 每滴的体积约为〇.〇5ml。
[0008] 上述检测方法中，所述滴加Smith试剂之前，还包括对所述待检测液体检材调节 其pH值至中性或弱酸性的步骤，具体可先用pH计测定所述待检测液体检材的pH值，据此 pH值，向其中加入0. 5-0. 15mol/L盐酸或氢氧化钠进行调节。
[0009] 为了便于对比观察，区分颜色，还可完全按所述检测方法，仅将所述待检测液体检 材换为去离子水，向去离子水中滴加Smith试剂，作为阴性对照，观察颜色变化。
[0010] 上述检测方法中，当所述待检测液体检材为简单基质时，所述GHB的检测限为 5mg/ml;当所述待检测液体检材为复杂基质时，所述GHB的检测限为10mg/ml，其中，所述简 单基质为成分单一的物质，如：水等；所述复杂基质为多成分组成的物质，如：酒、茶水、果 汁、碳酸饮料等。
[0011] 上述检测方法中，所述Smith试剂按照如下方法制备得到：
[0012] (1)制备改良Schweppes试剂：将葡萄糖和盐酸苯胺混合，得到改良Schweppes试 剂；
[0013] (2)将溴甲酚绿和甲基橙混合，得到混合溶液A;
[0014] (3)将改良Schweppes试剂和混合溶液A混合，得到Smith试剂。
[0015] 上述制备方法中，步骤（1)中，所述葡萄糖是以葡萄糖水溶液的形式存在，所述葡 萄糖水溶液的质量浓度为（0. 5-0. 15)g/ml，具体可为0.lg/ml。
[0016] 所述盐酸苯胺是以盐酸苯胺乙醇溶液的形式存在，所述盐酸苯胺乙醇溶液的质量 浓度为（〇? 10-0. 15)g/ml，具体可为 0? 12g/ml。
[0017] 所述改良Schweppes试剂中葡萄糖的质量浓度为（0? 02-0. 03)g/ml，具体可为 0.025g/ml〇
[0018] 所述改良Schweppes试剂中盐酸苯胺的质量浓度为（0? 02-0. 04)g/ml，具体可为 0.03g/ml〇
[0019] 为了保持所述改良Schweppes试剂中葡萄糖和盐酸苯胺的所述质量浓度，可选用 溶剂进行稀释，所述溶剂具体可为甲醇。
[0020] 上述制备方法中，步骤（2)中，所述溴甲酚绿是以溴甲酚绿甲醇溶液的形式存在， 所述溴甲酚绿甲醇溶液的质量浓度为（〇. 2-0. 4)g/L，具体可为0. 3g/L。
[0021] 所述甲基橙是以甲基橙甲醇溶液的形式存在，所述甲基橙甲醇溶液的质量浓度为 (0? 05-0. 2)g/L，具体可为 0?lg/L。
[0022] 所述溴甲酚绿和甲基橙的体积比为（0. 5-1. 5) :1，具体可为1:1。
[0023] 上述制备方法中，步骤（2)中，还包括对所述混合溶液A调节pH值至7. 0的步骤， 如：可用〇?lmol/L氢氧化钠调节pH值至7. 0〇
[0024] 上述制备方法中，步骤⑶中，所述混合溶液A和所述改良Schweppes试剂的体积 比为（2-4) :1，具体可为3:1。
[0025] 本发明通过研宄Smith试剂的颜色反应试剂稳定性与专属性、颜色反应检测限、 复杂基质对颜色反应结果影响，发现Smith试剂对液体检材中GHB成分具有很好的快速检 测效果。
[0026] 与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
[0027] 1)本发明所采用的Smith试剂和相应的检测方法具有颜色反应检测灵敏度较高， 专属性较好；
[0028] 2)在简单基质中，GHB的检测限可达到5mg/ml;在复杂基质中，GHB的检测限也基 本可以达到l〇mg/ml。
[0029] 3)本发明直接是和GHB产生颜色反应，通过颜色变化来检测GHB的存在与否，避免 GBL的干扰。
[0030] 4)低温保存下，Smith试剂至少在半年时间内性质保持稳定，反应结果可靠。
【具体实施方式】
[0031] 下面通过具体实施例对本发明的方法进行说明，但本发明并不局限于此。
[0032] 下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如 无特殊说明，均可从商业途径获得。
[0033] 实施例1、Smith试剂在检测液体检材中GHB成分中的应用：
[0034]1、制备Smith试剂：
[0035] (a)改良Schweppes试剂：将试剂A(2g葡萄糖溶解在20ml水中）和试剂B(2. 4g 盐酸苯胺溶解在20ml乙醇中）混合并用甲醇稀释至80ml;
[0036] (b)将溴甲酚绿和甲基橙等体积混合，得到混合溶液A，其中，溴甲酚绿：将0. 03g 溴甲酯绿溶解在l〇〇ml80%的甲醇溶液中，用0.IN氢氧化钠调节PH值至7. 0而得到，甲基 橙：将0.Olg甲基橙溶解在100ml甲醇中，用0. 1N氢氧化钠调节PH值至7. 0而得到；
[0037] (c)将步骤（b)中的混合溶液A与步骤（a)中的改良Schweppes试剂以3 :1 (体 积比）的比例混合，得到Smith试剂。
[0038] 2、应用：
[0039] 1)标准样品的制备：称取Y-羟基丁酸内酯（GBL)标准样品约lg，用20%氢氧 化钠调节pH值大于12,振荡5min，用水定容至10ml，配制成100mg/mlGHB(钠盐）溶液。 移取100mg/mlGHB(钠盐）溶液适量，加水逐级稀释成20mg/ml、10mg/ml、5mg/ml、lmg/ml、 0? 5mg/mlGHB(钠盐）标准物质溶液；
[0040] 2)颜色反应实验：分别移取不同浓度GHB标准物质溶液各约0. 5ml置于试管中， 调节pH值使待测溶液（即不同浓度GHB标准物 质溶液）呈中性或弱酸性，再各加入2滴 Smith试剂，振摇混匀后立刻观察颜色变化情况；
[0041] 移取约0. 5ml去离子水置于试管中，加入2滴Smith试剂，立刻观察颜色变化情 况，作为阴性控制。
[0042] 颜色反应实验的测试结果如下表1所示，从表1可得知：当GHB标准物质溶液浓度 低于5mg/ml，已经观察不到明显的特征颜色变化。由于快速颜色反应须满足肉眼清晰可辨 的要求，本实验将GHB的Smith颜色反应检测限定为5mg/ml。
[0043] 表1颜色反应结果
[0045] 3、Smith试剂的稳定性研宄：配制四组Smith试剂，存条件如表2所示：
[0046] 表2Smith试剂贮存条件
[0048] 分别考察12个月内各组Smith试剂作用效果随时间变化情况：按月配制10mg/ml 的新鲜GHB标准物质溶液，以保证其自身稳定性。前3个月中，每个月都分别用各组Smith试剂对GHB标准物质溶液进行一次检测，记录检测结果；接下来的6个月中，每2个月进行 一次检测，记录检测结果；最后的3个月中，每周进行一次检测，记录检测结果，相应的测试 结果如表3所示：
[0049] 表3Smith试剂稳定性研宄结果
[0051] 从表3可得知：无论是否避光保存，在室温下储存的Smith试剂在4个月后逐渐 失效，而在低温下储存的Smith试剂在8个月后依然有效。因此，为了保证实验结果的可靠 性，建议Smith试剂在低温下保存，并且保存期尽可能不要超过半年。
[0052] 4、Smith试剂作为液体检材中GHB快速检测试剂的专属性研宄：
[0053] 选取办案中常见的易于掺入饮料中的管制药品及掺假剂共27种，分别进行Smith 颜色反应实验，颜色反应的过程如"2、应用"中所述，具体可向0. 5ml、浓度30mg/ml的管制 药品或掺假剂中滴加〇. 1-0. 3ml的Smith试剂，观察颜色反应，记录检测结果如下表4所 示：
[0054] 表4Smith试剂专属性研宄结果
[0056]
[0057] 从表4可得知：Smith试剂对氢氧化钠溶液呈强阳性反应，对可卡因、盐酸海洛因、 烟酰胺及甲丙氨酯呈弱阳性反应，对GHB类似物、其它常见管制药品及添加剂均呈阴性反 应。
[0058] 5、检材基质对颜色反应实验结果影响的研宄：
[0059] 选取四种乙醇含量不同的酒类饮品（伏特加、白酒、红葡萄酒、啤酒），一种果汁饮 料（橙汁），一种茶类饮料（绿茶），两种碳酸饮料（雪碧、可乐），分别测定其pH值，并分别 向其中加入适量lOOmg/ml的GHB标准物质溶液配制成lOmg/ml的GHB饮料溶液。以相应 空白饮料为阴性对照，分别进行Smith颜色反应实验，记录检测结果如表5所示：
[0060] 表5检材基质对Smith颜色反应结果的影响
[0062] 从表5可得出：当GHB浓度为10mg/ml时，除红葡萄酒外，Smith试剂对以其余饮 料、饮品为基质的GHB溶液均呈明显阳性反应。由于红葡萄酒自身颜色较厚重，当GHB浓度 大于20mg/ml时，GHB红葡萄酒溶液Smith颜色反应现象（即呈现绿色的变化）才能被较 明显观察到，红葡萄酒基质对GHB的快速颜色反应有一定干扰。
[0063] 综上可知：Smith试剂作为GHB的快速颜色反应试剂有其可行性。该颜色反应检 测灵敏度较高，专属性较好，但由于Smith试剂对氢氧化钠溶液呈强阳性，在样品前处理过 程中需调节pH值使待测溶液呈中性或弱酸性以避免假阳性结果出现。在简单基质中，GHB 的检测限可达到5mg/ml;在复杂基质中，GHB的检测限也基本可以达到10mg/ml，远低于常 见市售GHB液体样品的浓度。低温保存下，Smith试剂至少在半年时间内性质保持稳定，反 应结果可靠。
【主权项】
1. Smith试剂在检测液体检材中GHB中的应用。2. -种液体检材中GHB的辅助检测方法，包括如下步骤：向待检测液体检材中滴加 Smith试剂，若待检测液体检材颜色变为绿色，则证明待检测液体检材中候选含有GHB，反 之，则候选不含或者含量低于检测限。3. 根据权利要求2所述的辅助检测方法，其特征在于：所述待检测液体检材与Smith 试剂的体积比为1 : (〇. 2-0. 6)。4. 根据权利要求2或3所述的辅助检测方法，其特征在于：所述向待检测液体检材中 滴加Smith试剂按如下方法进行：向0. 5ml的所述待检测液体检材中滴加2-6滴的所述 Smith试剂，其中，每滴的体积为0. 05ml。5. 根据权利要求2-4中任一项所述的辅助检测方法，其特征在于：所述滴加Smith试 剂之前，还包括对所述待检测液体检材调节其PH值至中性或弱酸性的步骤。6. 根据权利要求2-5中任一项所述的辅助检测方法，其特征在于：当所述待检测液体 检材为简单基质时，所述GHB的检测限为5mg/ml;当所述待检测液体检材为复杂基质时，所 述GHB的检测限为10mg/ml。7. 根据权利要求1所述的应用或根据权利要求2-6中任一项所述的辅助检测方法，其 特征在于：所述Smith试剂按照如下方法制备得到： (1) 制备改良Schweppes试剂：将葡萄糖和盐酸苯胺混合，得到改良Schweppes试剂； (2) 将溴甲酚绿和甲基橙混合，得到混合溶液A; (3) 将改良Schweppes试剂和混合溶液A混合，得到Smith试剂。8. 根据权利要求7所述的辅助检测方法，其特征在于：步骤（1)中，所述葡萄糖是以葡 萄糖水溶液的形式存在，所述葡萄糖水溶液的质量浓度为（0. 5-0. 15)g/ml; 所述盐酸苯胺是以盐酸苯胺乙醇溶液的形式存在，所述盐酸苯胺乙醇溶液的质量浓度 为（0? 10-0. 15)g/ml; 所述改良Schweppes试剂中葡萄糖的质量浓度为（0? 02-0. 03)g/ml; 所述改良Schweppes试剂中盐酸苯胺的质量浓度为（0? 02-0. 04)g/ml; 为了保持所述改良Schweppes试剂中葡萄糖和盐酸苯胺的所述质量浓度，选用溶剂进 行稀释，所述溶剂为甲醇。9. 根据权利要求7或8所述的辅助检测方法，其特征在于：步骤（2)中，所述溴甲酚绿 是以溴甲酚绿甲醇溶液的形式存在，所述溴甲酚绿甲醇溶液的质量浓度为（0. 2-0. 4)g/L; 所述甲基橙是以甲基橙甲醇溶液的形式存在，所述甲基橙甲醇溶液的质量浓度为 (0. 05-0. 2)g/L； 所述溴甲酚绿和甲基橙的体积比为（0.5-1. 5) :1 ; 步骤（2)中，还包括对所述混合溶液A调节pH值至7. 0的步骤。10. 根据权利要求7-9中任一项所述的辅助检测方法，其特征在于：步骤（3)中，所述 混合溶液A和所述改良Schweppes试剂的体积比为（2-4) :1。
【专利摘要】本发明公开了Smith试剂在检测液体检材中GHB中的应用。同时也公开了一种液体检材中GHB的检测方法，包括如下步骤：向待检测液体检材中滴加Smith试剂，若待检测液体检材颜色变为绿色，则证明待检测液体检材中候选含有GHB，反之，则候选不含或者含量低于检测限。本发明的检测方法具有检测灵敏度较高，专属性较好，且在低温保存下，Smith试剂至少在半年时间内性质保持稳定，反应结果可靠。
【IPC分类】G01N21/78
【公开号】CN104897667
【申请号】CN201510347016
【发明人】王蔚昕, 黄星
【申请人】公安部物证鉴定中心
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月19日
【技术领域】
[0001] 本发明属于检测领域，具体涉及Smith试剂在检测液体检材中GHB中的应用。
【背景技术】
[0002] 临床显示，口服GHB10mg，会产生暂时性记忆丧失，而一次使用达20g就会造成中 毒。中毒症状包括恶心、呕吐、头痛、反射作用丧失、失去意识、昏迷甚至死亡，与酒精并用会 更加剧其危险性。其有可能被应用于犯罪，如：添加到常见的酒类饮品（伏特加、白酒、红葡 萄酒、啤酒）或者饮料（橙汁、绿茶、雪碧、可乐）而给予被害人饮用，达到不法目的，也有一 些人为了追求感官刺激而服用GHB。
[0003] 因此，如何快速检测检测液体检材中GHB成分，控制其被非法滥用，需要一种快速 准确的检测方法，目前针对GHB的颜色反应原理均为将GHB内酯化成GBL后的双键氧化，当 前，GHB在我国为管制药品，而GBL作为一种应用广泛的香料、医药中间体不受管制，因而， 无法规避GBL对GHB检测结果的干扰，可能造成假阳性的产生。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种Smith试剂在检测液体检材中GHB(y-羟丁酸）中的应 用。
[0005] 本发明的再一个目的是提供一种液体检材中GHB的快速颜色反应辅助检测方法。
[0006] 本发明所提供的检测方法，包括如下步骤：向待检测液体检材中滴加Smith试剂 (颜色呈橙红色），若待检测液体检材颜色变为绿色，则证明待检测液体检材中候选含有 GHB，反之，则候选不含或者含量低于检测限。
[0007]上述检测方法中，所述待检测液体检材与Smith试剂的体积比为1:(0. 2-0. 6)，具 体可按如下方法：向〇. 5ml的所述待检测液体检材中滴加2-6滴的所述Smith试剂，其中， 每滴的体积约为〇.〇5ml。
[0008] 上述检测方法中，所述滴加Smith试剂之前，还包括对所述待检测液体检材调节 其pH值至中性或弱酸性的步骤，具体可先用pH计测定所述待检测液体检材的pH值，据此 pH值，向其中加入0. 5-0. 15mol/L盐酸或氢氧化钠进行调节。
[0009] 为了便于对比观察，区分颜色，还可完全按所述检测方法，仅将所述待检测液体检 材换为去离子水，向去离子水中滴加Smith试剂，作为阴性对照，观察颜色变化。
[0010] 上述检测方法中，当所述待检测液体检材为简单基质时，所述GHB的检测限为 5mg/ml;当所述待检测液体检材为复杂基质时，所述GHB的检测限为10mg/ml，其中，所述简 单基质为成分单一的物质，如：水等；所述复杂基质为多成分组成的物质，如：酒、茶水、果 汁、碳酸饮料等。
[0011] 上述检测方法中，所述Smith试剂按照如下方法制备得到：
[0012] (1)制备改良Schweppes试剂：将葡萄糖和盐酸苯胺混合，得到改良Schweppes试 剂；
[0013] (2)将溴甲酚绿和甲基橙混合，得到混合溶液A;
[0014] (3)将改良Schweppes试剂和混合溶液A混合，得到Smith试剂。
[0015] 上述制备方法中，步骤（1)中，所述葡萄糖是以葡萄糖水溶液的形式存在，所述葡 萄糖水溶液的质量浓度为（0. 5-0. 15)g/ml，具体可为0.lg/ml。
[0016] 所述盐酸苯胺是以盐酸苯胺乙醇溶液的形式存在，所述盐酸苯胺乙醇溶液的质量 浓度为（〇? 10-0. 15)g/ml，具体可为 0? 12g/ml。
[0017] 所述改良Schweppes试剂中葡萄糖的质量浓度为（0? 02-0. 03)g/ml，具体可为 0.025g/ml〇
[0018] 所述改良Schweppes试剂中盐酸苯胺的质量浓度为（0? 02-0. 04)g/ml，具体可为 0.03g/ml〇
[0019] 为了保持所述改良Schweppes试剂中葡萄糖和盐酸苯胺的所述质量浓度，可选用 溶剂进行稀释，所述溶剂具体可为甲醇。
[0020] 上述制备方法中，步骤（2)中，所述溴甲酚绿是以溴甲酚绿甲醇溶液的形式存在， 所述溴甲酚绿甲醇溶液的质量浓度为（〇. 2-0. 4)g/L，具体可为0. 3g/L。
[0021] 所述甲基橙是以甲基橙甲醇溶液的形式存在，所述甲基橙甲醇溶液的质量浓度为 (0? 05-0. 2)g/L，具体可为 0?lg/L。
[0022] 所述溴甲酚绿和甲基橙的体积比为（0. 5-1. 5) :1，具体可为1:1。
[0023] 上述制备方法中，步骤（2)中，还包括对所述混合溶液A调节pH值至7. 0的步骤， 如：可用〇?lmol/L氢氧化钠调节pH值至7. 0〇
[0024] 上述制备方法中，步骤⑶中，所述混合溶液A和所述改良Schweppes试剂的体积 比为（2-4) :1，具体可为3:1。
[0025] 本发明通过研宄Smith试剂的颜色反应试剂稳定性与专属性、颜色反应检测限、 复杂基质对颜色反应结果影响，发现Smith试剂对液体检材中GHB成分具有很好的快速检 测效果。
[0026] 与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
[0027] 1)本发明所采用的Smith试剂和相应的检测方法具有颜色反应检测灵敏度较高， 专属性较好；
[0028] 2)在简单基质中，GHB的检测限可达到5mg/ml;在复杂基质中，GHB的检测限也基 本可以达到l〇mg/ml。
[0029] 3)本发明直接是和GHB产生颜色反应，通过颜色变化来检测GHB的存在与否，避免 GBL的干扰。
[0030] 4)低温保存下，Smith试剂至少在半年时间内性质保持稳定，反应结果可靠。
【具体实施方式】
[0031] 下面通过具体实施例对本发明的方法进行说明，但本发明并不局限于此。
[0032] 下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如 无特殊说明，均可从商业途径获得。
[0033] 实施例1、Smith试剂在检测液体检材中GHB成分中的应用：
[0034]1、制备Smith试剂：
[0035] (a)改良Schweppes试剂：将试剂A(2g葡萄糖溶解在20ml水中）和试剂B(2. 4g 盐酸苯胺溶解在20ml乙醇中）混合并用甲醇稀释至80ml;
[0036] (b)将溴甲酚绿和甲基橙等体积混合，得到混合溶液A，其中，溴甲酚绿：将0. 03g 溴甲酯绿溶解在l〇〇ml80%的甲醇溶液中，用0.IN氢氧化钠调节PH值至7. 0而得到，甲基 橙：将0.Olg甲基橙溶解在100ml甲醇中，用0. 1N氢氧化钠调节PH值至7. 0而得到；
[0037] (c)将步骤（b)中的混合溶液A与步骤（a)中的改良Schweppes试剂以3 :1 (体 积比）的比例混合，得到Smith试剂。
[0038] 2、应用：
[0039] 1)标准样品的制备：称取Y-羟基丁酸内酯（GBL)标准样品约lg，用20%氢氧 化钠调节pH值大于12,振荡5min，用水定容至10ml，配制成100mg/mlGHB(钠盐）溶液。 移取100mg/mlGHB(钠盐）溶液适量，加水逐级稀释成20mg/ml、10mg/ml、5mg/ml、lmg/ml、 0? 5mg/mlGHB(钠盐）标准物质溶液；
[0040] 2)颜色反应实验：分别移取不同浓度GHB标准物质溶液各约0. 5ml置于试管中， 调节pH值使待测溶液（即不同浓度GHB标准物 质溶液）呈中性或弱酸性，再各加入2滴 Smith试剂，振摇混匀后立刻观察颜色变化情况；
[0041] 移取约0. 5ml去离子水置于试管中，加入2滴Smith试剂，立刻观察颜色变化情 况，作为阴性控制。
[0042] 颜色反应实验的测试结果如下表1所示，从表1可得知：当GHB标准物质溶液浓度 低于5mg/ml，已经观察不到明显的特征颜色变化。由于快速颜色反应须满足肉眼清晰可辨 的要求，本实验将GHB的Smith颜色反应检测限定为5mg/ml。
[0043] 表1颜色反应结果
[0045] 3、Smith试剂的稳定性研宄：配制四组Smith试剂，存条件如表2所示：
[0046] 表2Smith试剂贮存条件
[0048] 分别考察12个月内各组Smith试剂作用效果随时间变化情况：按月配制10mg/ml 的新鲜GHB标准物质溶液，以保证其自身稳定性。前3个月中，每个月都分别用各组Smith试剂对GHB标准物质溶液进行一次检测，记录检测结果；接下来的6个月中，每2个月进行 一次检测，记录检测结果；最后的3个月中，每周进行一次检测，记录检测结果，相应的测试 结果如表3所示：
[0049] 表3Smith试剂稳定性研宄结果
[0051] 从表3可得知：无论是否避光保存，在室温下储存的Smith试剂在4个月后逐渐 失效，而在低温下储存的Smith试剂在8个月后依然有效。因此，为了保证实验结果的可靠 性，建议Smith试剂在低温下保存，并且保存期尽可能不要超过半年。
[0052] 4、Smith试剂作为液体检材中GHB快速检测试剂的专属性研宄：
[0053] 选取办案中常见的易于掺入饮料中的管制药品及掺假剂共27种，分别进行Smith 颜色反应实验，颜色反应的过程如"2、应用"中所述，具体可向0. 5ml、浓度30mg/ml的管制 药品或掺假剂中滴加〇. 1-0. 3ml的Smith试剂，观察颜色反应，记录检测结果如下表4所 示：
[0054] 表4Smith试剂专属性研宄结果
[0056]
[0057] 从表4可得知：Smith试剂对氢氧化钠溶液呈强阳性反应，对可卡因、盐酸海洛因、 烟酰胺及甲丙氨酯呈弱阳性反应，对GHB类似物、其它常见管制药品及添加剂均呈阴性反 应。
[0058] 5、检材基质对颜色反应实验结果影响的研宄：
[0059] 选取四种乙醇含量不同的酒类饮品（伏特加、白酒、红葡萄酒、啤酒），一种果汁饮 料（橙汁），一种茶类饮料（绿茶），两种碳酸饮料（雪碧、可乐），分别测定其pH值，并分别 向其中加入适量lOOmg/ml的GHB标准物质溶液配制成lOmg/ml的GHB饮料溶液。以相应 空白饮料为阴性对照，分别进行Smith颜色反应实验，记录检测结果如表5所示：
[0060] 表5检材基质对Smith颜色反应结果的影响
[0062] 从表5可得出：当GHB浓度为10mg/ml时，除红葡萄酒外，Smith试剂对以其余饮 料、饮品为基质的GHB溶液均呈明显阳性反应。由于红葡萄酒自身颜色较厚重，当GHB浓度 大于20mg/ml时，GHB红葡萄酒溶液Smith颜色反应现象（即呈现绿色的变化）才能被较 明显观察到，红葡萄酒基质对GHB的快速颜色反应有一定干扰。
[0063] 综上可知：Smith试剂作为GHB的快速颜色反应试剂有其可行性。该颜色反应检 测灵敏度较高，专属性较好，但由于Smith试剂对氢氧化钠溶液呈强阳性，在样品前处理过 程中需调节pH值使待测溶液呈中性或弱酸性以避免假阳性结果出现。在简单基质中，GHB 的检测限可达到5mg/ml;在复杂基质中，GHB的检测限也基本可以达到10mg/ml，远低于常 见市售GHB液体样品的浓度。低温保存下，Smith试剂至少在半年时间内性质保持稳定，反 应结果可靠。
【主权项】
1. Smith试剂在检测液体检材中GHB中的应用。2. -种液体检材中GHB的辅助检测方法，包括如下步骤：向待检测液体检材中滴加 Smith试剂，若待检测液体检材颜色变为绿色，则证明待检测液体检材中候选含有GHB，反 之，则候选不含或者含量低于检测限。3. 根据权利要求2所述的辅助检测方法，其特征在于：所述待检测液体检材与Smith 试剂的体积比为1 : (〇. 2-0. 6)。4. 根据权利要求2或3所述的辅助检测方法，其特征在于：所述向待检测液体检材中 滴加Smith试剂按如下方法进行：向0. 5ml的所述待检测液体检材中滴加2-6滴的所述 Smith试剂，其中，每滴的体积为0. 05ml。5. 根据权利要求2-4中任一项所述的辅助检测方法，其特征在于：所述滴加Smith试 剂之前，还包括对所述待检测液体检材调节其PH值至中性或弱酸性的步骤。6. 根据权利要求2-5中任一项所述的辅助检测方法，其特征在于：当所述待检测液体 检材为简单基质时，所述GHB的检测限为5mg/ml;当所述待检测液体检材为复杂基质时，所 述GHB的检测限为10mg/ml。7. 根据权利要求1所述的应用或根据权利要求2-6中任一项所述的辅助检测方法，其 特征在于：所述Smith试剂按照如下方法制备得到： (1) 制备改良Schweppes试剂：将葡萄糖和盐酸苯胺混合，得到改良Schweppes试剂； (2) 将溴甲酚绿和甲基橙混合，得到混合溶液A; (3) 将改良Schweppes试剂和混合溶液A混合，得到Smith试剂。8. 根据权利要求7所述的辅助检测方法，其特征在于：步骤（1)中，所述葡萄糖是以葡 萄糖水溶液的形式存在，所述葡萄糖水溶液的质量浓度为（0. 5-0. 15)g/ml; 所述盐酸苯胺是以盐酸苯胺乙醇溶液的形式存在，所述盐酸苯胺乙醇溶液的质量浓度 为（0? 10-0. 15)g/ml; 所述改良Schweppes试剂中葡萄糖的质量浓度为（0? 02-0. 03)g/ml; 所述改良Schweppes试剂中盐酸苯胺的质量浓度为（0? 02-0. 04)g/ml; 为了保持所述改良Schweppes试剂中葡萄糖和盐酸苯胺的所述质量浓度，选用溶剂进 行稀释，所述溶剂为甲醇。9. 根据权利要求7或8所述的辅助检测方法，其特征在于：步骤（2)中，所述溴甲酚绿 是以溴甲酚绿甲醇溶液的形式存在，所述溴甲酚绿甲醇溶液的质量浓度为（0. 2-0. 4)g/L; 所述甲基橙是以甲基橙甲醇溶液的形式存在，所述甲基橙甲醇溶液的质量浓度为 (0. 05-0. 2)g/L； 所述溴甲酚绿和甲基橙的体积比为（0.5-1. 5) :1 ; 步骤（2)中，还包括对所述混合溶液A调节pH值至7. 0的步骤。10. 根据权利要求7-9中任一项所述的辅助检测方法，其特征在于：步骤（3)中，所述 混合溶液A和所述改良Schweppes试剂的体积比为（2-4) :1。
【专利摘要】本发明公开了Smith试剂在检测液体检材中GHB中的应用。同时也公开了一种液体检材中GHB的检测方法，包括如下步骤：向待检测液体检材中滴加Smith试剂，若待检测液体检材颜色变为绿色，则证明待检测液体检材中候选含有GHB，反之，则候选不含或者含量低于检测限。本发明的检测方法具有检测灵敏度较高，专属性较好，且在低温保存下，Smith试剂至少在半年时间内性质保持稳定，反应结果可靠。
【IPC分类】G01N21/78
【公开号】CN104897667
【申请号】CN201510347016
【发明人】王蔚昕, 黄星
【申请人】公安部物证鉴定中心
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月19日
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