一种检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法
一种检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法。
【背景技术】
[0002] 喹诺酮类抗菌药氟甲喹（Flumequine)具有疗效显著、抗菌谱广、不会轻易出现交 叉耐药性的特点，被广泛应用于人和动物多种感染疾病的防治中。众所周知，食用水产动物 较难保存，对水质要求较高，极易感染细菌从而导致使用者出现肠道疾病等，而作为一种高 效的广谱抗菌药，氟甲喹不仅对于革兰阳性细菌和革兰阴性细菌具有一定的抑制作用，对 于水产动物感染的大肠杆菌病，弧球菌属和单孢菌属病等也有较强的抑制作用；并且，由于 使用氟甲喹的安全范围广、无不良反应、药物残留小等，也使氟甲喹在抗菌药中的应用更为 广泛。
[0003] 氟甲喹存在两种对映体，其结构式如下：
[0005] 由于不同的对映体在手性条件下反应可显示不同的反应性，而手性药物的对映体 分子于手性固定相上的手性识别是许多因素综合作用的结果，不同的体系存在着不尽相同 的手性识别机理，为了更进一步的对氟甲喹进行深入研究，研究手性化合物对映体及手性 固定相的拆分机理十分重要，对于手性药物的研究和开发都具有重要意义，鉴于此，本发明 提供一种检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法。
【发明内容】
[0006] 本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的现状，提供一种检测水产品中氟甲 喹手性对映体的方法，该方法能够成功实现氟甲喹手性对映体及手性固定相的拆分，为氟 甲喹的深入研究提供了条件。
[0007] 本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种检测水产品中氟甲喹手性对 映体的方法，其特征在于包括以下步骤：
[0008] (1)用体积比为80%~100%:20%~0%的无水乙醇与异丙醇的混合物作为流动相 将氟甲喹溶解并稀释配置成20yg/ml~30yg/ml的溶液，并用微孔滤膜过滤；
[0009] (2)取匀浆后的水产品2g于离心管中，加入步骤（1)中配置的氟甲喹溶液10~ lOOmL，振荡后加入2g~3g无水Na2S04及15ml~25ml乙酸乙酯，用漩润混匀后再将离心 管置于离心机上进行离心处理，然后转移离心管中的乙酸乙酯层到分液漏斗中；离心管中 的残渣再用5ml~10ml乙酸乙酯溶解并进行离心处理，将该离心后的乙酸乙酯层与上述分 液漏斗中的乙酸乙酯层进行混合；
[0010] (3)向上述分液漏斗中加入20ml~30ml正己烷溶液，充分振荡使其混匀，静置分 层后弃正己烷层，将乙酸乙酯溶液转移于水浴锅中蒸干，蒸干后的残渣用无水乙醇溶解定 溶至lml~2ml，并采用微孔滤膜进行过滤后得到溶液A，溶液A中加入三乙胺作为添加剂， 使其体积分数为〇. 1%~〇. 3% ;
[0011] (4)采用高效液相色谱仪对上述溶液A进行检测；检测时选用CHIRALCEL0D-H手 性柱，该手性柱的填料为硅胶表面涂布纤维素-三-[3,5_二甲苯基氨基甲酸酯];所 述手性柱的柱温为20°C~30°C;检测时的流速为0. 5mL/min~0. 7mL/min，波长为254nm。
[0012] 作为优选，所述无水乙醇占乙醇和异丙醇混合物的体积分数为100%。
[0013] 优选地，在所述溶液A中加入体积分数为0. 3%的三乙胺作为添加剂。
[0014] 所述步骤（4)中采用高效液相色谱仪对所述溶液A进行检测时的流速优选为 0? 6mL/min;检测波长为 254nm。
[0015] 所述步骤（4)中采用高效液相色谱仪对所述溶液A进行检测时所述手性柱的柱温 优选为20°C。
[0016] 所述微孔滤膜过滤所采用的微孔直径为0. 45ym。
[0017] 与现有技术相比，本发明用于检测水产品中氟甲喹手性对映体，成功实现了氟甲 喹手性对映体及手性固定相的拆分，其中，对映体S- (-)-FMQ及R- ( + )-FMQ在lOiig/ mL~10 0yg/mL浓度范围内与其响应值呈良好的线性关系，回归方程及相关系数分别为 Y=96. 62X-238. 50、R2=l. 0000 及Y=112. 32X-281. 04、R2=l. 0000,样品平均回收率分别为 85. 33%和83. 28%，日间精密度分别为5. 4%和4. 7%，检出限分别为0. 05iig/g和0. 04iig/ g，定量限分别为〇. 08iig/g和0. 07iig/g。
【附图说明】
[0018] 图1为本发明实施例中对映体分离度与乙醇含量之间的关系曲线图；
[0019] 图2为本发明实施例中对映体分离度与三乙胺浓度之间的关系曲线图；
[0020] 图3为本发明实施例中对映体分离度与流速之间的关系曲线图；
[0021] 图4为本发明实施例中氟甲喹对映体的分离色谱图；
[0022] 图5为本发明实施例中S- (_) -FMQ的色谱图；
[0023] 图6为本发明实施例中R- ( + )-FMQ的色谱图。
【具体实施方式】
[0024] 以下结合附图实施例对本发明作进一步详细描述。
[0025] -种检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，包括以下步骤：
[0026] (1)用乙醇和异丙醇的混合物作为流动相将氟甲喹溶解并稀释配置成20yg/ ml~30iig/ml的溶液，并用微孔直径为0. 45iim的滤膜过滤；
[0027] (2)取匀浆后的水产品2g于离心管中，加入步骤（1)中配置的氟甲喹溶液10~ lOOmL，振荡lOmin后分别加入2g无水Na2S04及20ml乙酸乙酯，用漩润混匀5min后再将离 心管置于离心机上以4000r/min的速度进行离心处理lOmin，然后转移离心管中的乙酸乙 酯层到分液漏斗中；离心管中的残渣再用10mL乙酸乙酯溶解并进行离心处理，将该离心后 的乙酸乙酯层与上述分液漏斗中的乙酸乙酯层进行混合；
[0028] (3)向上述分液漏斗中加入30mL正己烷溶液，充分振荡使其混匀，静置分层后弃 正己烷层，将乙酸乙酯溶液转移于水浴锅中蒸干，残渣用无水乙醇溶解定容至lmL并采用 0. 45ym的微孔滤膜进行过滤后得到溶液A;
[0029] (4 )在溶液A中加入三乙胺作为添加剂，采用高效液相色谱仪对上述溶液A进行检 测，高效液相色谱仪选用CHIRALCEL0D-H手性柱，该手性柱的填料为硅胶表面涂布纤 维素-三-[3,5-二甲苯基氨基甲酸酯]，检测波长为254nm。
[0030] 本实施例中所指的水产品为海洋和淡水渔业中的鱼、虾、蟹、贝等。
[0031] 在本实施例中，步骤（1)中分别使用乙醇的体积分数为80%、90%、100%的乙醇和异 丙醇的混合物作为流动相，表1为流动相中乙醇的含量对对映体保留和分离的影响，由图1 和表1可以看出，随着乙醇比例的升高，分离度R明显增大，而选择性因子a变化不大，因 此，所选用的流动相优选为100%的无水乙醇。
[0032] 表 1
[0034]
[0035] 由于氟甲喹为弱碱性化合物，如使用不含碱的乙醇溶液作为流动相进行分离，峰 形较差。本实施例在流动相为100%乙醇不变的条件下，分别在溶液A中添加体积分数为 0. 1%、0. 2%、0. 3%的三乙胺，表1为流动相中三乙胺的浓度对对映体分离的影响，如图2和表 2所示，随着三乙胺浓度提高，样品的保留时间延长，分离度也变大，色谱峰的拖尾情况逐步 改善，但a值变化不大。因此，在溶液A中加入的三乙胺的体积分数优选为0.3%。
[0036] 表 2
[0038] 由于检测时流速不同拆分效果可能不同，本实施例在选用乙醇作为流动相，在溶 液A中加入体积分数0. 3%的三乙胺的条件下，分别检测了流速为0. 5mL/min、0. 6mL/min、 0. 7mL/min时对映体的拆分情况，表3为不同流速下氟甲喹的拆分结果，如图3和表3所示， 当流速从〇. 7mL/min降至0. 5mL/min时，对映体的分离度随流速降低而升高。因此，本实施 例检测时的流速优选为0. 5mL/min。
[0039] 表 3
[0041] 保持其它的色谱条件不变，本实施例还考察了柱温对氟甲喹对映体手性分离的影 响。表4为不同柱温下氟甲喹的拆分结果，可以看出，随着柱温升高，分离度有下降趋势，因 此，本实施例优选20°C作为最佳柱温。
[0042]表 4
[0044]
[0045] 精确称取氟甲喹对照品，用乙醇溶解，稀释配制成25i!g/ml的溶液。以改变进样 量的方式测定峰面积与药液浓度的关系，计算时将进样量换算成质量浓度，即以峰面积为 纵坐标，质量浓度为横坐标绘制标准曲线，并求出回归方程和相关系数。S- (-)-FMQ浓度 在10~100iig/mL范围内与其响应值呈良好的线性关系，以Y表示浓度，X表示峰面积，回 归方程及相关系数为Y=96. 62X-238. 50，R2=1. 0000 ;R- ( +)-FMQ浓度在 10 ~100iig/mL范 围内与其响应值呈良好的线性关系，以Y表示浓度，X表示峰面积，回归方程及相关系数为 丫=112.32乂-281.04，护=1.0000。在真鲷空白肌肉样品中添加101^/^、501^/^和1001^/ g这3个浓度的氟甲喹标准溶液，按本实施例的方法进行回收率实验，每个添加浓度平行操 作5次，计算回收率和精密度，S- (-) -FMQ和R- ( + ) -FMQ的日间精密度分别为5. 4%和 4. 7% ;样品平均回收率分别为85. 33%和83. 28% ;检出限分别为0. 05iig/g和0. 04iig/g，定 量限分别为〇. 08yg/g和0. 07yg/g。
[0046] 由图4、5、6可知，本方法能成功实现氟甲喹手性对映体及手性固定相的拆分，氟 甲喹对映体的分离度为2. 72。
【主权项】
1. 一种检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，其特征在于包括以下步骤： (1) 用体积比为80%~100%:20%~0%的无水乙醇与异丙醇的混合物作为流动相将氟 甲喹溶解并稀释配置成20iig/ml~30iig/ml的溶液，并用微孔滤膜过滤； (2) 取匀浆后的水产品2g于离心管中，加入步骤（1)中配置的氟甲喹溶液10~IOOmL, 振荡后加入2g~3g无水Na2SO4及15ml~25ml乙酸乙酯，用漩润混匀后再将离心管置于 离心机上进行离心处理，然后转移离心管中的乙酸乙酯层到分液漏斗中；离心管中的残渣 再用5ml~IOml乙酸乙酯溶解并进行离心处理，将该离心后的乙酸乙酯层与上述分液漏斗 中的乙酸乙酯层进行混合； (3) 向上述分液漏斗中加入20ml~30ml正己烷溶液，充分振荡使其混匀，静置分层后 弃正己烷层，将乙酸乙酯溶液转移于水浴锅中蒸干，蒸干后的残渣用无水乙醇溶解定溶至 Iml~2ml，并采用微孔滤膜进行过滤后得到溶液A，溶液A中加入三乙胺作为添加剂，使其 体积分数为〇. 1%~〇. 3% ; (4) 采用高效液相色谱仪对上述溶液A进行检测；检测时选用CHIRALCELOD-H手性柱， 该手性柱的填料为硅胶表面涂布纤维素-三-[3,5_二甲苯基氨基甲酸酯];所述手性 柱的柱温为20°C~30°C;检测时的流速为0. 5mL/min~0. 7mL/min，波长为254nm。2. 根据权利要求1所述的检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，其特征在于：所述 无水乙醇占乙醇和异丙醇混合物的体积分数为100%。3. 根据权利要求2所述的检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，其特征在于：在所 述溶液A中加入体积分数为0. 3%的三乙胺作为添加剂。4. 根据权利要求3所述的检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，其特征在于：所述 步骤（4)中采用高效液相色谱仪对所述溶液A进行检测时的流速为0. 6mL/min。5. 根据权利要求4所述的检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，其特征在于：采用 高效液相色谱仪对所述溶液A进行检测时所述手性柱的柱温为20°C。
【专利摘要】本发明涉及检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，用于检测水产品中氟甲喹手性对映体，成功实现了氟甲喹手性对映体及手性固定相的拆分，其中，对映体S-（-）-FMQ及R-（+）-FMQ在10μg/mL～100μg/mL浓度范围内与其响应值呈良好的线性关系，回归方程及相关系数分别为Y=96.62X-238.50、R2=1.0000及Y=112.32X-281.04、R2=1.0000，样品平均回收率分别为85.33%和83.28%，日间精密度分别为5.4%和4.7%，检出限分别为0.05μg/g和0.04μg/g，定量限分别为0.08μg/g和0.07μg/g。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN104897785
【申请号】CN201410073924
【发明人】欧阳小琨, 杨立业, 王阳光, 聂晶, 高小峰, 李维娜
【申请人】浙江海洋学院
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2014年3月3日
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法。
【背景技术】
[0002] 喹诺酮类抗菌药氟甲喹（Flumequine)具有疗效显著、抗菌谱广、不会轻易出现交 叉耐药性的特点，被广泛应用于人和动物多种感染疾病的防治中。众所周知，食用水产动物 较难保存，对水质要求较高，极易感染细菌从而导致使用者出现肠道疾病等，而作为一种高 效的广谱抗菌药，氟甲喹不仅对于革兰阳性细菌和革兰阴性细菌具有一定的抑制作用，对 于水产动物感染的大肠杆菌病，弧球菌属和单孢菌属病等也有较强的抑制作用；并且，由于 使用氟甲喹的安全范围广、无不良反应、药物残留小等，也使氟甲喹在抗菌药中的应用更为 广泛。
[0003] 氟甲喹存在两种对映体，其结构式如下：
[0005] 由于不同的对映体在手性条件下反应可显示不同的反应性，而手性药物的对映体 分子于手性固定相上的手性识别是许多因素综合作用的结果，不同的体系存在着不尽相同 的手性识别机理，为了更进一步的对氟甲喹进行深入研究，研究手性化合物对映体及手性 固定相的拆分机理十分重要，对于手性药物的研究和开发都具有重要意义，鉴于此，本发明 提供一种检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法。
【发明内容】
[0006] 本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的现状，提供一种检测水产品中氟甲 喹手性对映体的方法，该方法能够成功实现氟甲喹手性对映体及手性固定相的拆分，为氟 甲喹的深入研究提供了条件。
[0007] 本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种检测水产品中氟甲喹手性对 映体的方法，其特征在于包括以下步骤：
[0008] (1)用体积比为80%~100%:20%~0%的无水乙醇与异丙醇的混合物作为流动相 将氟甲喹溶解并稀释配置成20yg/ml~30yg/ml的溶液，并用微孔滤膜过滤；
[0009] (2)取匀浆后的水产品2g于离心管中，加入步骤（1)中配置的氟甲喹溶液10~ lOOmL，振荡后加入2g~3g无水Na2S04及15ml~25ml乙酸乙酯，用漩润混匀后再将离心 管置于离心机上进行离心处理，然后转移离心管中的乙酸乙酯层到分液漏斗中；离心管中 的残渣再用5ml~10ml乙酸乙酯溶解并进行离心处理，将该离心后的乙酸乙酯层与上述分 液漏斗中的乙酸乙酯层进行混合；
[0010] (3)向上述分液漏斗中加入20ml~30ml正己烷溶液，充分振荡使其混匀，静置分 层后弃正己烷层，将乙酸乙酯溶液转移于水浴锅中蒸干，蒸干后的残渣用无水乙醇溶解定 溶至lml~2ml，并采用微孔滤膜进行过滤后得到溶液A，溶液A中加入三乙胺作为添加剂， 使其体积分数为〇. 1%~〇. 3% ;
[0011] (4)采用高效液相色谱仪对上述溶液A进行检测；检测时选用CHIRALCEL0D-H手 性柱，该手性柱的填料为硅胶表面涂布纤维素-三-[3,5_二甲苯基氨基甲酸酯];所 述手性柱的柱温为20°C~30°C;检测时的流速为0. 5mL/min~0. 7mL/min，波长为254nm。
[0012] 作为优选，所述无水乙醇占乙醇和异丙醇混合物的体积分数为100%。
[0013] 优选地，在所述溶液A中加入体积分数为0. 3%的三乙胺作为添加剂。
[0014] 所述步骤（4)中采用高效液相色谱仪对所述溶液A进行检测时的流速优选为 0? 6mL/min;检测波长为 254nm。
[0015] 所述步骤（4)中采用高效液相色谱仪对所述溶液A进行检测时所述手性柱的柱温 优选为20°C。
[0016] 所述微孔滤膜过滤所采用的微孔直径为0. 45ym。
[0017] 与现有技术相比，本发明用于检测水产品中氟甲喹手性对映体，成功实现了氟甲 喹手性对映体及手性固定相的拆分，其中，对映体S- (-)-FMQ及R- ( + )-FMQ在lOiig/ mL~10 0yg/mL浓度范围内与其响应值呈良好的线性关系，回归方程及相关系数分别为 Y=96. 62X-238. 50、R2=l. 0000 及Y=112. 32X-281. 04、R2=l. 0000,样品平均回收率分别为 85. 33%和83. 28%，日间精密度分别为5. 4%和4. 7%，检出限分别为0. 05iig/g和0. 04iig/ g，定量限分别为〇. 08iig/g和0. 07iig/g。
【附图说明】
[0018] 图1为本发明实施例中对映体分离度与乙醇含量之间的关系曲线图；
[0019] 图2为本发明实施例中对映体分离度与三乙胺浓度之间的关系曲线图；
[0020] 图3为本发明实施例中对映体分离度与流速之间的关系曲线图；
[0021] 图4为本发明实施例中氟甲喹对映体的分离色谱图；
[0022] 图5为本发明实施例中S- (_) -FMQ的色谱图；
[0023] 图6为本发明实施例中R- ( + )-FMQ的色谱图。
【具体实施方式】
[0024] 以下结合附图实施例对本发明作进一步详细描述。
[0025] -种检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，包括以下步骤：
[0026] (1)用乙醇和异丙醇的混合物作为流动相将氟甲喹溶解并稀释配置成20yg/ ml~30iig/ml的溶液，并用微孔直径为0. 45iim的滤膜过滤；
[0027] (2)取匀浆后的水产品2g于离心管中，加入步骤（1)中配置的氟甲喹溶液10~ lOOmL，振荡lOmin后分别加入2g无水Na2S04及20ml乙酸乙酯，用漩润混匀5min后再将离 心管置于离心机上以4000r/min的速度进行离心处理lOmin，然后转移离心管中的乙酸乙 酯层到分液漏斗中；离心管中的残渣再用10mL乙酸乙酯溶解并进行离心处理，将该离心后 的乙酸乙酯层与上述分液漏斗中的乙酸乙酯层进行混合；
[0028] (3)向上述分液漏斗中加入30mL正己烷溶液，充分振荡使其混匀，静置分层后弃 正己烷层，将乙酸乙酯溶液转移于水浴锅中蒸干，残渣用无水乙醇溶解定容至lmL并采用 0. 45ym的微孔滤膜进行过滤后得到溶液A;
[0029] (4 )在溶液A中加入三乙胺作为添加剂，采用高效液相色谱仪对上述溶液A进行检 测，高效液相色谱仪选用CHIRALCEL0D-H手性柱，该手性柱的填料为硅胶表面涂布纤 维素-三-[3,5-二甲苯基氨基甲酸酯]，检测波长为254nm。
[0030] 本实施例中所指的水产品为海洋和淡水渔业中的鱼、虾、蟹、贝等。
[0031] 在本实施例中，步骤（1)中分别使用乙醇的体积分数为80%、90%、100%的乙醇和异 丙醇的混合物作为流动相，表1为流动相中乙醇的含量对对映体保留和分离的影响，由图1 和表1可以看出，随着乙醇比例的升高，分离度R明显增大，而选择性因子a变化不大，因 此，所选用的流动相优选为100%的无水乙醇。
[0032] 表 1
[0034]
[0035] 由于氟甲喹为弱碱性化合物，如使用不含碱的乙醇溶液作为流动相进行分离，峰 形较差。本实施例在流动相为100%乙醇不变的条件下，分别在溶液A中添加体积分数为 0. 1%、0. 2%、0. 3%的三乙胺，表1为流动相中三乙胺的浓度对对映体分离的影响，如图2和表 2所示，随着三乙胺浓度提高，样品的保留时间延长，分离度也变大，色谱峰的拖尾情况逐步 改善，但a值变化不大。因此，在溶液A中加入的三乙胺的体积分数优选为0.3%。
[0036] 表 2
[0038] 由于检测时流速不同拆分效果可能不同，本实施例在选用乙醇作为流动相，在溶 液A中加入体积分数0. 3%的三乙胺的条件下，分别检测了流速为0. 5mL/min、0. 6mL/min、 0. 7mL/min时对映体的拆分情况，表3为不同流速下氟甲喹的拆分结果，如图3和表3所示， 当流速从〇. 7mL/min降至0. 5mL/min时，对映体的分离度随流速降低而升高。因此，本实施 例检测时的流速优选为0. 5mL/min。
[0039] 表 3
[0041] 保持其它的色谱条件不变，本实施例还考察了柱温对氟甲喹对映体手性分离的影 响。表4为不同柱温下氟甲喹的拆分结果，可以看出，随着柱温升高，分离度有下降趋势，因 此，本实施例优选20°C作为最佳柱温。
[0042]表 4
[0044]
[0045] 精确称取氟甲喹对照品，用乙醇溶解，稀释配制成25i!g/ml的溶液。以改变进样 量的方式测定峰面积与药液浓度的关系，计算时将进样量换算成质量浓度，即以峰面积为 纵坐标，质量浓度为横坐标绘制标准曲线，并求出回归方程和相关系数。S- (-)-FMQ浓度 在10~100iig/mL范围内与其响应值呈良好的线性关系，以Y表示浓度，X表示峰面积，回 归方程及相关系数为Y=96. 62X-238. 50，R2=1. 0000 ;R- ( +)-FMQ浓度在 10 ~100iig/mL范 围内与其响应值呈良好的线性关系，以Y表示浓度，X表示峰面积，回归方程及相关系数为 丫=112.32乂-281.04，护=1.0000。在真鲷空白肌肉样品中添加101^/^、501^/^和1001^/ g这3个浓度的氟甲喹标准溶液，按本实施例的方法进行回收率实验，每个添加浓度平行操 作5次，计算回收率和精密度，S- (-) -FMQ和R- ( + ) -FMQ的日间精密度分别为5. 4%和 4. 7% ;样品平均回收率分别为85. 33%和83. 28% ;检出限分别为0. 05iig/g和0. 04iig/g，定 量限分别为〇. 08yg/g和0. 07yg/g。
[0046] 由图4、5、6可知，本方法能成功实现氟甲喹手性对映体及手性固定相的拆分，氟 甲喹对映体的分离度为2. 72。
【主权项】
1. 一种检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，其特征在于包括以下步骤： (1) 用体积比为80%~100%:20%~0%的无水乙醇与异丙醇的混合物作为流动相将氟 甲喹溶解并稀释配置成20iig/ml~30iig/ml的溶液，并用微孔滤膜过滤； (2) 取匀浆后的水产品2g于离心管中，加入步骤（1)中配置的氟甲喹溶液10~IOOmL, 振荡后加入2g~3g无水Na2SO4及15ml~25ml乙酸乙酯，用漩润混匀后再将离心管置于 离心机上进行离心处理，然后转移离心管中的乙酸乙酯层到分液漏斗中；离心管中的残渣 再用5ml~IOml乙酸乙酯溶解并进行离心处理，将该离心后的乙酸乙酯层与上述分液漏斗 中的乙酸乙酯层进行混合； (3) 向上述分液漏斗中加入20ml~30ml正己烷溶液，充分振荡使其混匀，静置分层后 弃正己烷层，将乙酸乙酯溶液转移于水浴锅中蒸干，蒸干后的残渣用无水乙醇溶解定溶至 Iml~2ml，并采用微孔滤膜进行过滤后得到溶液A，溶液A中加入三乙胺作为添加剂，使其 体积分数为〇. 1%~〇. 3% ; (4) 采用高效液相色谱仪对上述溶液A进行检测；检测时选用CHIRALCELOD-H手性柱， 该手性柱的填料为硅胶表面涂布纤维素-三-[3,5_二甲苯基氨基甲酸酯];所述手性 柱的柱温为20°C~30°C;检测时的流速为0. 5mL/min~0. 7mL/min，波长为254nm。2. 根据权利要求1所述的检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，其特征在于：所述 无水乙醇占乙醇和异丙醇混合物的体积分数为100%。3. 根据权利要求2所述的检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，其特征在于：在所 述溶液A中加入体积分数为0. 3%的三乙胺作为添加剂。4. 根据权利要求3所述的检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，其特征在于：所述 步骤（4)中采用高效液相色谱仪对所述溶液A进行检测时的流速为0. 6mL/min。5. 根据权利要求4所述的检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，其特征在于：采用 高效液相色谱仪对所述溶液A进行检测时所述手性柱的柱温为20°C。
【专利摘要】本发明涉及检测水产品中氟甲喹手性对映体的方法，用于检测水产品中氟甲喹手性对映体，成功实现了氟甲喹手性对映体及手性固定相的拆分，其中，对映体S-（-）-FMQ及R-（+）-FMQ在10μg/mL～100μg/mL浓度范围内与其响应值呈良好的线性关系，回归方程及相关系数分别为Y=96.62X-238.50、R2=1.0000及Y=112.32X-281.04、R2=1.0000，样品平均回收率分别为85.33%和83.28%，日间精密度分别为5.4%和4.7%，检出限分别为0.05μg/g和0.04μg/g，定量限分别为0.08μg/g和0.07μg/g。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN104897785
【申请号】CN201410073924
【发明人】欧阳小琨, 杨立业, 王阳光, 聂晶, 高小峰, 李维娜
【申请人】浙江海洋学院
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2014年3月3日
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