一种气质联用检测多溴联苯醚及其代谢物的凝胶色谱柱及其检测方法
一种气质联用检测多溴联苯醚及其代谢物的凝胶色谱柱及其检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种气质联用检测多溴联苯醚及代谢物的凝胶色谱柱的制备方法，以及该凝胶色谱柱检测多溴联苯醚及其代谢物的检测方法，属于环境或食品检测技术领域。
【背景技术】
[0002]目前，环境和食品中的有机污染物种类越来越多，如多溴联苯醚及代谢物，它是一类卤代有机溴化阻燃剂(BFRs)，由于良好的阻燃性，它在工业领域被大量的使用在各种商业产品中，例如电子电器产品和纺织品。商业的多溴联苯醚产品主要包括五溴、八溴和十溴联苯醚。由于它们的理化性质和生物积累特征，如环境持久性和高疏水性导致了这类产品已经在自然环境中广泛分布。甲氧基多溴联苯醚(MeO-PBDEs)是一类和多溴联苯醚结构相似的化合物，它们被认为是人工合成的化合物。毒理学研宄表明，这两类化合物对人体的肝脏、甲状腺以及生殖器官和神经系统产生特定的毒理作用。且这类有机污染物所处的基体通常十分复杂，含量也甚微，常以yg/kg计。目前，测定多溴联苯醚及代谢物比较成熟的检测方法是气相色谱-质谱联用法，但是其结果的准确性很大程度受制于样品的杂质含量。如果这些杂质不经处理，则会对后续有机污染物的检测结果产生较大干扰，影响检测的结果。
【发明内容】
[0003]本发明解决了【背景技术】中的不足，提供了一种气质联用检测多溴联苯醚及其代谢物的凝胶色谱柱，该凝胶色谱柱制备方法简单，能够有效克服复杂的基体效应，能对含有机污染物基体中的多种杂质进行分离，从而有效地除去多种杂质，避免了对后续有机污染物检测的干扰。
[0004]实现本发明上述目的所采用的技术方案为:
[0005]一种气质联用检测多溴联苯醚及其代谢物的凝胶色谱柱，所述凝胶色谱柱采用如下方法制备:(I)、称取聚苯乙烯凝胶和溶剂，其中每I克聚苯乙烯对应量取5?8毫升溶剂，所述的溶剂为环己烷和乙酸乙酯的混合溶液，将聚苯乙烯凝胶混合于溶剂中，摇匀，然后进行溶胀，溶胀时间大于24小时，溶胀平衡后，倒出上清液以及悬浮颗粒杂质，备用；
[0006](2)、取一支干燥洁净的色谱柱以及一支硅胶软管，将硅胶软管连接在色谱柱的下端出口处，然后向色谱柱内加入占柱体积20?30%的溶剂，静置，直至色谱柱内的玻璃砂芯滤板中无气泡溢出，然后打开活塞，挤压硅胶软管，排出玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的气泡，使溶剂充满此部分空间，然后关闭活塞；
[0007](3)、将溶胀后的聚苯乙烯凝胶和溶剂倒入烧杯中，充分搅拌直至聚苯乙烯凝胶均匀的悬浮在溶剂中，制得凝胶悬浮液，然后将凝胶悬浮液由色谱柱的顶端缓慢倒入于色谱柱中，使凝胶悬浮液自然沉降，当色谱柱底部的凝胶悬浮液沉积至1/5柱体积时，打开色谱柱下端活塞，并调节流速至2?3mL/min，然后继续倒入凝胶悬浮液至柱体积5/6处，并保持凝胶始终浸泡在溶剂中，待凝胶完全沉降均匀后，在凝胶层之上加入1/12柱体积的海沙，铺平，即制得所述凝胶色谱柱。
[0008]步骤(I)所述的溶剂中环己烷和乙酸乙酯的体积比为1:1。
[0009]步骤⑵所述的色谱柱的长径比为8?10:1。
[0010]本发明同时还提供了基于上述凝胶色谱柱检测多溴联苯醚及其代谢物的方法，该方法有操作简单、重现性好、灵敏度高和准确度高的优点。该方法包括以下步骤:(I)、将待测样品与硅藻土按照1:8?10的体积比混合，再用二氯甲烷与正己烷按照1:1的体积比混合后的溶液进行洗脱，收集并浓缩待测样品洗脱液，制得浓缩液A ;
[0011](2)、在浓缩液A中加入内标碳13标记内标PBDEs 28,47,99，100，154，153和183，浓度为 100ng/mL，以及 BDE17, BDE28, BDE47, BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物 5-MeO_BDE47，6-MeO_BDE47，4' -MeO_BDE49，2'-MeO-BDE68, 5' -MeO_BDE99，5' -MeO-BDElOO, 4' -MeO-BDElOl 和4' -Me0_BDE103 的混合标准溶液，浓度为100ng/mL ;将以上物质加入浓缩液中并混合均匀，再将浓缩液注入色谱柱内，直至浓缩液的液面与海砂面平齐；
[0012](3)、采用1.2?1.4倍柱体积的溶剂进行洗脱，洗脱流速为1.00?1.50mL/min,弃去前50?60%柱体积的洗脱液，收集剩余部分的洗脱液于蒸发瓶中，后续经旋转蒸发与氮吹浓缩至0.9?1.1mL,制得浓缩液B，供GC-MS检测用；
[0013](4)、将浓缩液B注入GC-MS中，采用Elite_5MS毛细管色谱柱，进样体积为2.0?
3.0 μ L，不分流模式进样，以氦气作为载气，载气流速为0.8?1.2mL/min。进样口温度为270?280°C，衬管采用脱活衬管，传输线温度为315°C?325°C，离子源温度245°C?255°C，采用70ev的EI电离方式，扫描方式为SM，柱温箱程序升温条件为:95°C?105°C保持 0.8 ?1.2min — 195 °C ?205 °C，升温速度为 18 V /min ?22 V /min ； 195 V ?2050C ^ 275? ?285?，升温速度为 2.4°C /min ?2.6°C /min ;275°C ?285°C— 315°C ?325°C，升温速度为 4.50C /min ?5.5°C /min，315°C?325°C保持 9 ?Ilmin ；
[0014](5)、采用同位素稀释内标法定量，即以待测物浓度为横坐标，待测物峰面积与相应的同位素峰面积之比为纵坐标，得到工作曲线，从而计算中待测样品中BDE17，BDE28, BDE47, BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物 5-MeO-BDE47，6-MeO-BDE47，4, -MeO_BDE49，2' -MeO_BDE68，5' -MeO_BDE99，5' -MeO-BDE100, 4' -MeO-BDElOl 和 4' -Me0_BDE103 的含量。
[0015]凝胶分离是一种非常有效的处理方法，当基体中不同分子大小的混合物流经凝胶层析柱时，比凝胶网孔大的分子不能进入凝胶微粒内的网状结构，而被排阻凝胶微粒之外，随着溶剂在凝胶微粒之间的孔隙向下流动并最先流出柱外；比网孔小的分子能不同程度的自由出入凝胶微粒网状结构的内外，在色谱柱中的滞留时间较长，这样由于不同大小的分子所经的路程不同而得到分离，大分子物质被先洗脱出来，如蛋白质，小分子物质被后洗脱出来，如多溴联苯醚及代谢物。因此，样品经过凝胶色谱分离净化后，能去除大部分杂质，对测定多溴联苯醚及代谢物的准确性有促进作用。然后对样品溶液进行浓缩，供GC-MS测定。
[0016]首先要想得到较好的分离效果，凝胶必须进行溶胀处理，溶胀之后，凝胶体积进行膨胀，溶剂渗透到凝胶之中，凝胶微粒的网状结构才能充分伸展，这样大分子物质才能被排阻，小分子物质能够自由出入，从而达到良好的分离净化效果。
[0017]其次装柱一定要要均匀，平整，不能有气泡。气泡通常来源于璃砂芯滤板下方的空隙之中，采用硅胶软管排气泡的方式，能够使溶剂充满玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的死体积，从而抑制气泡的产生。在装柱过程中，凝胶的均一性也非常重要，凝胶装的即不能过松也不能过紧，如果装的太松，在层析过程中，凝胶层高度会下降，装的过紧，则洗脱阻力太大，延长分析时间。而采用本发明的装柱方法，凝胶的松紧程度恰到好处。
[0018]本发明在色谱柱的顶层使用了海砂，海砂主要成分为二氧化硅，性质稳定，不与其他化合物反应，在填充过程中海砂可以将凝胶压实压平整，其次再上样和洗脱过程中，由于海砂缓冲作用，凝胶不会因冲击力而扬起。
[0019]本发明在净化过程中所用试剂为环境友好型试剂，环己烷和乙酸乙酯较二氯甲烷毒性小，对环境的污染也小。本发明可避免操作人员接触毒性较强的二氯甲烷溶剂，减少对人体和环境的危害性。
[0020]本发明还对气象色谱质谱条件进行了优化，进样口温度设置为270?280°C，保证了所分析化合物完全充分的气化，衬管采用脱活衬管，可以避免进样口衬管上的活性点吸附样品组分并导致出现拖尾峰，尤其是针对多溴联苯醚化合物中的一些高沸点物质。传输线温度设置为315°C?325°C，保证了待测物从气相色谱进入质谱检测器的过程中不发生冷凝效果。
[0021]本发明从分析方法学上来看，选用了同位素稀释内标法来定量，这种方法定量上更为准确科学，可以排除由于样品中基质的干扰(离子抑制之类的)引起的误差，同时在样品净化之前加入内标化合物还可以考察整个实验过程中对目标化合物的损失情况。
[0022]本发明与现有技术相比，其有益效果和优点在于:
[0023]本发明中制备的凝胶性能优越，而且该方法中凝胶的填充操作描述细致具体，针对性强，从而加强了可操作性。因此，该方法制备的凝胶净化色谱柱能克服复杂的基体效应，能去除含多溴联苯类及其代谢物基体中的多种杂质，消除了对后续多溴联苯及其代谢物检测产生的干扰；后续的检测方法也给出了仪器的最适参数，使分析的结果更为准确可靠。更重要的是，该方法制备的凝净化色谱柱操作简单，经试验表明，使用该方法检测多溴联苯类化合物等有机污染物具有灵敏度高、准确度高、重现性好和回收率高的优点。
【具体实施方式】
[0024]下面结合具体实施例对本发明做详细具体的说明，但是本发明的保护范围并不局限于以下实施例。
[0025]为检验本发明提供的气质联用检测多溴联苯醚及代谢物的凝胶色谱柱及其检测方法的可行性和优越性，本申请的发明人特意在乳制品中加入多溴联苯醚及其代谢物的混合标准溶液及内标溶液，将加标溶液的乳制品采用本发明提供的凝胶净化色谱柱的制备和填充方法进行分离，按照本发明提供的仪器参数进行检测。测定经凝胶净化色谱柱分离后的乳制品的多溴联苯醚及其代谢物的含量，根据检出的结果浓度和已知的有机物浓度的差异，对该方法制备的凝胶净化色谱柱的分离及仪器检测的可行性和优越性进行评估。
[0026]实施例1
[0027]取10g聚苯乙烯凝胶，浸泡在500mL的环己烷:乙酸乙酯(1:1)中，摇匀，然后进行溶胀，溶胀时间为一天，溶胀平衡后，倒出上清液以及悬浮颗粒杂质，备用。取一支干净的色谱柱(ID:2.5CmXL:20Cm)，加入约5cm的环己烷:乙酸乙酯(1:1)，静置，直至色谱柱内的玻璃砂芯滤板中无气泡溢出，然后打开活塞，挤压硅胶软管，排出玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的气泡，使溶剂充满此部分空间，然后关闭活塞。将溶胀后的聚苯乙烯凝胶和溶剂倒入烧杯中，充分搅拌直至聚苯乙烯凝胶均匀的悬浮在溶剂中，制得凝胶悬浮液，然后将凝胶悬浮液由色谱柱的顶端缓慢倒入于色谱柱中，使凝胶悬浮液自然沉降，当色谱柱底部的凝胶悬浮液沉积至1/5柱体积时，打开色谱柱下端活塞，并调节流速至2?3mL/min，然后继续倒入凝胶悬浮液至17cm处，并保持凝胶始终浸泡在溶剂中，待凝胶完全沉降均匀后，在凝胶层之上加入1.6cm高的海沙，铺平，即制得所述凝胶色谱柱。
[0028]称取2g事先处理过的乳粉，与16g的硅藻土混合，用150mL的二氯甲烷:正己烷(1:1)进行洗脱萃取，收集萃取液，浓缩至lmL，制得浓缩液A。在浓缩液A中加入内标碳13标记内标 PBDEs 28,47,99，100，154，153 和 183，浓度为 100ng/mL，以及 BDE17, BDE28, BDE47，BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138 , BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物5-MeO-BDE47, 6-MeO-BDE47, 4' -MeO-BDE49,2r -MeO-BDE68, 5r -MeO-BDE99,5r -MeO-BDE100, 4r -MeO-BDElOl和f -Me0_BDE103的混合标准溶液，浓度为100ng/mL ;将以上物质加入浓缩液中并混合均匀，再将浓缩液注入色谱柱内，直至浓缩液的液面与海砂面平齐。
[0029]用120mL溶剂(环己烷:乙酸乙酯1:1)进行洗脱，弃去前60mL洗脱液，洗脱流速为lmL/min。收集后60mL洗脱液，洗脱液蒸发至1.0mL,制得浓缩液B，供GC-MS检测用。
[0030]将浓缩液B注入GC-MS中，采用Elite-5MS毛细管色谱柱，进样体积为2.0 μ L。不分流模式进样。氦气作为载气。载气流速为0.8mL/min。进样口温度为270°C，衬管采用脱活衬管。传输线温度为315°C，离子源温度为245°C。采用70ev的EI电离方式，扫描方式为SM。
[0031]柱温箱程序升温条件为:95°C(保持0.8min) - 195°C, 18°C/min ;195°C—275°C，
2.4°C /min ;275°C — 315°C，4.5°C /min (保持 9min)。
[0032]用同位素稀释内标法对样品进行定量，并计算回收率，测得BDE17，BDE28, BDE47, BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物5-Me0-BDE47，6-Me0-BDE47，4' -MeO_BDE49，2' -Me0_BDE68，5' -Me0_BDE99，5' -MeO-BDE100,4' -MeO-BDElOl 和 4' -Me0_BDE103 的回收率均为 70%?110%。
[0033]上述回收率的结果满足欧盟指令(European Un1n document 2002/657/EC)中的相关要求。即？< I μ g/L时回收率需在50%?120%范围内，P指待测物的浓度。
[0034]实施例2
[0035]取10g聚苯乙烯凝胶，浸泡在800mL的环己烷:乙酸乙酯(1:1)中，摇匀，然后进行溶胀，溶胀时间为一天，溶胀平衡后，倒出上清液以及悬浮颗粒杂质，备用。取一支干净的色谱柱(ID:3CmXL:30Cm)，加入约7.5cm的环己烷:乙酸乙酯(1:1)，静置，直至色谱柱内的玻璃砂芯滤板中无气泡溢出，然后打开活塞，挤压硅胶软管，排出玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的气泡，使溶剂充满此部分空间，然后关闭活塞。将溶胀后的聚苯乙烯凝胶和溶剂倒入烧杯中，充分搅拌直至聚苯乙烯凝胶均匀的悬浮在溶剂中，制得凝胶悬浮液，然后将凝胶悬浮液由色谱柱的顶端缓慢倒入于色谱柱中，使凝胶悬浮液自然沉降，当色谱柱底部的凝胶悬浮液沉积至1/5柱体积时，打开色谱柱下端活塞，并调节流速至2?3mL/min，然后继续倒入凝胶悬浮液至25cm高度处，并保持凝胶始终浸泡在溶剂中，待凝胶完全沉降均匀后，在凝胶层之上加入2.5cm高的海沙，铺平，即制得所述凝胶色谱柱。
[0036]称取3g事先处理过的乳粉，与30g的硅藻土混合，用250mL的二氯甲烷:正己烷(1:1)进行洗脱萃取，收集萃取液，浓缩至lmL，制得浓缩液A。在浓缩液A中加入内标碳13标记内标 PBDEs 28,47,99，100，154，153 和 183，浓度为 100ng/mL，以及 BDE17, BDE28, BDE47，BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物5-MeO-BDE47, 6-MeO-BDE47, 4' -MeO-BDE49,2r -MeO-BDE68, 5r -MeO-BDE99,5r -MeO-BDE100, 4r -MeO-BDElOl和f -Me0_BDE103的混合标准溶液，浓度为100ng/mL ;将以上物质加入浓缩液中并混合均匀，再将浓缩液注入色谱柱内，直至浓缩液的液面与海砂面平齐。
[0037]用250mL溶剂(环己烷:乙酸乙酯1:1)进行洗脱，弃去前150mL洗脱液，洗脱流速为1.5mL/min。收集后10mL洗脱液，洗脱液蒸发至1.0mL,制得浓缩液B，供GC-MS检测用。
[0038]将浓缩液B注入GC-MS中，采用Elite_5MS毛细管色谱柱，进样体积为3.0 μ L。不分流模式进样。氦气作为载气。载气流速为1.2mL/min。进样口温度为280°C，衬管采用脱活衬管。传输线温度为385°C，离子源温度为255°C。采用70ev的EI电离方式，扫描方式为SM。
[0039]柱温箱程序升温条件为:105 0C (保持1.2min) — 205 °C，2.2 V /min ；205°C^ 285°C, 2.6°C /min ；285°C^ 325°C, 5.5°C /min(保持 llmin)。
[0040]用同位素稀释内标法对样品进行定量，并计算回收率，测得BDE17，BDE28, BDE47, BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物5-Me0-BDE47，6-Me0-BDE47，4' -MeO_BDE49，2' -Me0_BDE68，5' -Me0_BDE99，5' -MeO-BDE100,4' -MeO-BDElOl 和 4' -Me0_BDE103 的回收率均为 70%?110%。
[0041]上述回收率的结果满足欧盟指令(European Un1n document 2002/657/EC)中的相关要求。即？< I μ g/L时回收率需在50%?120%范围内，P指待测物的浓度。
【主权项】
1.一种气质联用检测多溴联苯醚及其代谢物的凝胶色谱柱，其特征在于所述凝胶色谱柱采用如下方法制备:(I)、称取聚苯乙烯凝胶和溶剂，其中每I克聚苯乙烯对应量取5?8毫升溶剂，所述的溶剂为环己烷和乙酸乙酯的混合溶液，将聚苯乙烯凝胶混合于溶剂中，摇匀，然后进行溶胀，溶胀时间大于24小时，溶胀平衡后，倒出上清液以及悬浮颗粒杂质，备用； (2)、取一支干燥洁净的色谱柱以及一支硅胶软管，将硅胶软管连接在色谱柱的下端出口处，然后向色谱柱内加入占柱体积20?30%的溶剂，静置，直至色谱柱内的玻璃砂芯滤板中无气泡溢出，然后打开活塞，挤压硅胶软管，排出玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的气泡，使溶剂充满此部分空间，然后关闭活塞； (3)、将溶胀后的聚苯乙烯凝胶和溶剂倒入烧杯中，充分搅拌直至聚苯乙烯凝胶均匀的悬浮在溶剂中，制得凝胶悬浮液，然后将凝胶悬浮液由色谱柱的顶端倒入于色谱柱中，使凝胶悬浮液自然沉降，当色谱柱底部的凝胶悬浮液沉积至1/5柱体积时，打开色谱柱下端活塞，并调节流速至2?3mL/min，然后继续倒入凝胶悬浮液至柱体积5/6处，并保持凝胶始终浸泡在溶剂中，待凝胶完全沉降均匀后，在凝胶层之上加入1/12柱体积的海沙，铺平，即制得所述凝胶色谱柱。2.根据权利要求1所述的凝胶色谱柱，其特征在于:步骤⑴所述的溶剂中环己烷和乙酸乙酯的体积比为1:1。3.根据权利要求1所述的凝胶色谱柱，其特征在于:步骤(2)所述的色谱柱的长径比为8?10:1。4.一种基于权利要求1所述的凝胶色谱柱检测多溴联苯醚及其代谢物的方法，其特征在于包括以下步骤:(I)、将待测样品与硅藻土按照1:8?10的体积比混合，再用二氯甲烷与正己烷按照1:1的体积比混合后的溶液进行洗脱，收集并浓缩待测样品洗脱液，制得浓缩液A ； (2)、在浓缩液A中加入内标碳13标记内标PBDEs28，47，99，100，154，153和183，浓度为 100ng/mL，以及 BDE17, BDE28, BDE47, BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE15.3，BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物 5-MeO_BDE47，6-MeO_BDE47，4' -MeO_BDE49，2' -MeO-BDE68, 5r -MeO-BDE99, 5r -MeO-BDElOO, 4r -MeO-BDElOl和4' -Me0_BDE103 的混合标准溶液，浓度为100ng/mL ;将以上物质加入浓缩液中并混合均匀，再将浓缩液注入色谱柱内，直至浓缩液的液面与海砂面平齐； (3)、采用1.2?1.4倍柱体积的溶剂进行洗脱，洗脱流速为1.00?1.50mL/min，弃去前50?60%柱体积的洗脱液，收集剩余部分的洗脱液于蒸发瓶中，后续经旋转蒸发与氮吹浓缩至0.9?1.1mL,制得浓缩液B，供GC-MS检测用； (4)、将浓缩液B注入GC-MS中，采用Elite-5MS毛细管色谱柱，进样体积为2.0?.3.0 μ L，不分流模式进样，以氦气作为载气，载气流速为0.8?1.2mL/min，进样口温度为270?280°C，衬管采用脱活衬管，传输线温度为315°C?325°C，离子源温度245°C?.255°C，采用70ev的EI电离方式，扫描方式为SM，柱温箱程序升温条件为:95°C?105°C保持 0.8 ?1.2min — 195 °C ?205 °C，升温速度为 18 V /min ?22 V /min ； 195 V ?.205℃ ^ 275℃ ?285℃，升温速度为 2.4°C /min ?2.6°C /min ;275°C ?285°C— 315°C ?.325°C，升温速度为 4.50C /min ?5.5°C /min，315°C?325°C保持 9 ?Ilmin ； (5)、采用同位素稀释内标法定量，即以待测物浓度为横坐标，待测物峰面积与相应的同位素峰面积之比为纵坐标，得到工作曲线，从而计算中待测样品中BDE17，BDE28, BDE47, BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物.5-MeO-BDE47，6-MeO-BDE47，4' -MeO_BDE49，2' -MeO_BDE68，5' -MeO_BDE99，5' -MeO-BDE.100，4' -MeO-BDElOl 和 4' -Me0_BDE103 的含量。
【专利摘要】本发明提供了一种气质联用检测多溴联苯醚及其代谢物的凝胶色谱柱，所述凝胶色谱柱采用如下方法制备：称取凝胶和溶剂，将凝胶混合于溶剂中，摇匀溶胀；取一支干燥洁净的色谱柱，然后向色谱柱内加入溶剂，排出玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的气泡，使溶剂充满此部分空间；将凝胶悬浮液倒入于色谱柱中，在凝胶层之上加入海沙，即制得所述凝胶色谱柱。该凝胶色谱柱制备方法简单，能够有效克服复杂的基体效应，能对含有机污染物基体中的多种杂质进行分离，从而有效地除去多种杂质，避免了对后续有机污染物检测的干扰。本发明同时还提供了基于上述凝胶色谱柱检测多溴联苯醚及其代谢物的方法，该方法有操作简单、重现性好、灵敏度高和准确度高的优点。
【IPC分类】G01N30/88, G01N30/60
【公开号】CN104897824
【申请号】CN201510280046
【发明人】胡小钟, 胡德聪, 陈魏, 吴斌, 林长军
【申请人】中华人民共和国湖北出入境检验检疫局, 中国检验认证集团湖北有限公司, 中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月28日
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种气质联用检测多溴联苯醚及代谢物的凝胶色谱柱的制备方法，以及该凝胶色谱柱检测多溴联苯醚及其代谢物的检测方法，属于环境或食品检测技术领域。
【背景技术】
[0002]目前，环境和食品中的有机污染物种类越来越多，如多溴联苯醚及代谢物，它是一类卤代有机溴化阻燃剂(BFRs)，由于良好的阻燃性，它在工业领域被大量的使用在各种商业产品中，例如电子电器产品和纺织品。商业的多溴联苯醚产品主要包括五溴、八溴和十溴联苯醚。由于它们的理化性质和生物积累特征，如环境持久性和高疏水性导致了这类产品已经在自然环境中广泛分布。甲氧基多溴联苯醚(MeO-PBDEs)是一类和多溴联苯醚结构相似的化合物，它们被认为是人工合成的化合物。毒理学研宄表明，这两类化合物对人体的肝脏、甲状腺以及生殖器官和神经系统产生特定的毒理作用。且这类有机污染物所处的基体通常十分复杂，含量也甚微，常以yg/kg计。目前，测定多溴联苯醚及代谢物比较成熟的检测方法是气相色谱-质谱联用法，但是其结果的准确性很大程度受制于样品的杂质含量。如果这些杂质不经处理，则会对后续有机污染物的检测结果产生较大干扰，影响检测的结果。
【发明内容】
[0003]本发明解决了【背景技术】中的不足，提供了一种气质联用检测多溴联苯醚及其代谢物的凝胶色谱柱，该凝胶色谱柱制备方法简单，能够有效克服复杂的基体效应，能对含有机污染物基体中的多种杂质进行分离，从而有效地除去多种杂质，避免了对后续有机污染物检测的干扰。
[0004]实现本发明上述目的所采用的技术方案为:
[0005]一种气质联用检测多溴联苯醚及其代谢物的凝胶色谱柱，所述凝胶色谱柱采用如下方法制备:(I)、称取聚苯乙烯凝胶和溶剂，其中每I克聚苯乙烯对应量取5?8毫升溶剂，所述的溶剂为环己烷和乙酸乙酯的混合溶液，将聚苯乙烯凝胶混合于溶剂中，摇匀，然后进行溶胀，溶胀时间大于24小时，溶胀平衡后，倒出上清液以及悬浮颗粒杂质，备用；
[0006](2)、取一支干燥洁净的色谱柱以及一支硅胶软管，将硅胶软管连接在色谱柱的下端出口处，然后向色谱柱内加入占柱体积20?30%的溶剂，静置，直至色谱柱内的玻璃砂芯滤板中无气泡溢出，然后打开活塞，挤压硅胶软管，排出玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的气泡，使溶剂充满此部分空间，然后关闭活塞；
[0007](3)、将溶胀后的聚苯乙烯凝胶和溶剂倒入烧杯中，充分搅拌直至聚苯乙烯凝胶均匀的悬浮在溶剂中，制得凝胶悬浮液，然后将凝胶悬浮液由色谱柱的顶端缓慢倒入于色谱柱中，使凝胶悬浮液自然沉降，当色谱柱底部的凝胶悬浮液沉积至1/5柱体积时，打开色谱柱下端活塞，并调节流速至2?3mL/min，然后继续倒入凝胶悬浮液至柱体积5/6处，并保持凝胶始终浸泡在溶剂中，待凝胶完全沉降均匀后，在凝胶层之上加入1/12柱体积的海沙，铺平，即制得所述凝胶色谱柱。
[0008]步骤(I)所述的溶剂中环己烷和乙酸乙酯的体积比为1:1。
[0009]步骤⑵所述的色谱柱的长径比为8?10:1。
[0010]本发明同时还提供了基于上述凝胶色谱柱检测多溴联苯醚及其代谢物的方法，该方法有操作简单、重现性好、灵敏度高和准确度高的优点。该方法包括以下步骤:(I)、将待测样品与硅藻土按照1:8?10的体积比混合，再用二氯甲烷与正己烷按照1:1的体积比混合后的溶液进行洗脱，收集并浓缩待测样品洗脱液，制得浓缩液A ;
[0011](2)、在浓缩液A中加入内标碳13标记内标PBDEs 28,47,99，100，154，153和183，浓度为 100ng/mL，以及 BDE17, BDE28, BDE47, BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物 5-MeO_BDE47，6-MeO_BDE47，4' -MeO_BDE49，2'-MeO-BDE68, 5' -MeO_BDE99，5' -MeO-BDElOO, 4' -MeO-BDElOl 和4' -Me0_BDE103 的混合标准溶液，浓度为100ng/mL ;将以上物质加入浓缩液中并混合均匀，再将浓缩液注入色谱柱内，直至浓缩液的液面与海砂面平齐；
[0012](3)、采用1.2?1.4倍柱体积的溶剂进行洗脱，洗脱流速为1.00?1.50mL/min,弃去前50?60%柱体积的洗脱液，收集剩余部分的洗脱液于蒸发瓶中，后续经旋转蒸发与氮吹浓缩至0.9?1.1mL,制得浓缩液B，供GC-MS检测用；
[0013](4)、将浓缩液B注入GC-MS中，采用Elite_5MS毛细管色谱柱，进样体积为2.0?
3.0 μ L，不分流模式进样，以氦气作为载气，载气流速为0.8?1.2mL/min。进样口温度为270?280°C，衬管采用脱活衬管，传输线温度为315°C?325°C，离子源温度245°C?255°C，采用70ev的EI电离方式，扫描方式为SM，柱温箱程序升温条件为:95°C?105°C保持 0.8 ?1.2min — 195 °C ?205 °C，升温速度为 18 V /min ?22 V /min ； 195 V ?2050C ^ 275? ?285?，升温速度为 2.4°C /min ?2.6°C /min ;275°C ?285°C— 315°C ?325°C，升温速度为 4.50C /min ?5.5°C /min，315°C?325°C保持 9 ?Ilmin ；
[0014](5)、采用同位素稀释内标法定量，即以待测物浓度为横坐标，待测物峰面积与相应的同位素峰面积之比为纵坐标，得到工作曲线，从而计算中待测样品中BDE17，BDE28, BDE47, BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物 5-MeO-BDE47，6-MeO-BDE47，4, -MeO_BDE49，2' -MeO_BDE68，5' -MeO_BDE99，5' -MeO-BDE100, 4' -MeO-BDElOl 和 4' -Me0_BDE103 的含量。
[0015]凝胶分离是一种非常有效的处理方法，当基体中不同分子大小的混合物流经凝胶层析柱时，比凝胶网孔大的分子不能进入凝胶微粒内的网状结构，而被排阻凝胶微粒之外，随着溶剂在凝胶微粒之间的孔隙向下流动并最先流出柱外；比网孔小的分子能不同程度的自由出入凝胶微粒网状结构的内外，在色谱柱中的滞留时间较长，这样由于不同大小的分子所经的路程不同而得到分离，大分子物质被先洗脱出来，如蛋白质，小分子物质被后洗脱出来，如多溴联苯醚及代谢物。因此，样品经过凝胶色谱分离净化后，能去除大部分杂质，对测定多溴联苯醚及代谢物的准确性有促进作用。然后对样品溶液进行浓缩，供GC-MS测定。
[0016]首先要想得到较好的分离效果，凝胶必须进行溶胀处理，溶胀之后，凝胶体积进行膨胀，溶剂渗透到凝胶之中，凝胶微粒的网状结构才能充分伸展，这样大分子物质才能被排阻，小分子物质能够自由出入，从而达到良好的分离净化效果。
[0017]其次装柱一定要要均匀，平整，不能有气泡。气泡通常来源于璃砂芯滤板下方的空隙之中，采用硅胶软管排气泡的方式，能够使溶剂充满玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的死体积，从而抑制气泡的产生。在装柱过程中，凝胶的均一性也非常重要，凝胶装的即不能过松也不能过紧，如果装的太松，在层析过程中，凝胶层高度会下降，装的过紧，则洗脱阻力太大，延长分析时间。而采用本发明的装柱方法，凝胶的松紧程度恰到好处。
[0018]本发明在色谱柱的顶层使用了海砂，海砂主要成分为二氧化硅，性质稳定，不与其他化合物反应，在填充过程中海砂可以将凝胶压实压平整，其次再上样和洗脱过程中，由于海砂缓冲作用，凝胶不会因冲击力而扬起。
[0019]本发明在净化过程中所用试剂为环境友好型试剂，环己烷和乙酸乙酯较二氯甲烷毒性小，对环境的污染也小。本发明可避免操作人员接触毒性较强的二氯甲烷溶剂，减少对人体和环境的危害性。
[0020]本发明还对气象色谱质谱条件进行了优化，进样口温度设置为270?280°C，保证了所分析化合物完全充分的气化，衬管采用脱活衬管，可以避免进样口衬管上的活性点吸附样品组分并导致出现拖尾峰，尤其是针对多溴联苯醚化合物中的一些高沸点物质。传输线温度设置为315°C?325°C，保证了待测物从气相色谱进入质谱检测器的过程中不发生冷凝效果。
[0021]本发明从分析方法学上来看，选用了同位素稀释内标法来定量，这种方法定量上更为准确科学，可以排除由于样品中基质的干扰(离子抑制之类的)引起的误差，同时在样品净化之前加入内标化合物还可以考察整个实验过程中对目标化合物的损失情况。
[0022]本发明与现有技术相比，其有益效果和优点在于:
[0023]本发明中制备的凝胶性能优越，而且该方法中凝胶的填充操作描述细致具体，针对性强，从而加强了可操作性。因此，该方法制备的凝胶净化色谱柱能克服复杂的基体效应，能去除含多溴联苯类及其代谢物基体中的多种杂质，消除了对后续多溴联苯及其代谢物检测产生的干扰；后续的检测方法也给出了仪器的最适参数，使分析的结果更为准确可靠。更重要的是，该方法制备的凝净化色谱柱操作简单，经试验表明，使用该方法检测多溴联苯类化合物等有机污染物具有灵敏度高、准确度高、重现性好和回收率高的优点。
【具体实施方式】
[0024]下面结合具体实施例对本发明做详细具体的说明，但是本发明的保护范围并不局限于以下实施例。
[0025]为检验本发明提供的气质联用检测多溴联苯醚及代谢物的凝胶色谱柱及其检测方法的可行性和优越性，本申请的发明人特意在乳制品中加入多溴联苯醚及其代谢物的混合标准溶液及内标溶液，将加标溶液的乳制品采用本发明提供的凝胶净化色谱柱的制备和填充方法进行分离，按照本发明提供的仪器参数进行检测。测定经凝胶净化色谱柱分离后的乳制品的多溴联苯醚及其代谢物的含量，根据检出的结果浓度和已知的有机物浓度的差异，对该方法制备的凝胶净化色谱柱的分离及仪器检测的可行性和优越性进行评估。
[0026]实施例1
[0027]取10g聚苯乙烯凝胶，浸泡在500mL的环己烷:乙酸乙酯(1:1)中，摇匀，然后进行溶胀，溶胀时间为一天，溶胀平衡后，倒出上清液以及悬浮颗粒杂质，备用。取一支干净的色谱柱(ID:2.5CmXL:20Cm)，加入约5cm的环己烷:乙酸乙酯(1:1)，静置，直至色谱柱内的玻璃砂芯滤板中无气泡溢出，然后打开活塞，挤压硅胶软管，排出玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的气泡，使溶剂充满此部分空间，然后关闭活塞。将溶胀后的聚苯乙烯凝胶和溶剂倒入烧杯中，充分搅拌直至聚苯乙烯凝胶均匀的悬浮在溶剂中，制得凝胶悬浮液，然后将凝胶悬浮液由色谱柱的顶端缓慢倒入于色谱柱中，使凝胶悬浮液自然沉降，当色谱柱底部的凝胶悬浮液沉积至1/5柱体积时，打开色谱柱下端活塞，并调节流速至2?3mL/min，然后继续倒入凝胶悬浮液至17cm处，并保持凝胶始终浸泡在溶剂中，待凝胶完全沉降均匀后，在凝胶层之上加入1.6cm高的海沙，铺平，即制得所述凝胶色谱柱。
[0028]称取2g事先处理过的乳粉，与16g的硅藻土混合，用150mL的二氯甲烷:正己烷(1:1)进行洗脱萃取，收集萃取液，浓缩至lmL，制得浓缩液A。在浓缩液A中加入内标碳13标记内标 PBDEs 28,47,99，100，154，153 和 183，浓度为 100ng/mL，以及 BDE17, BDE28, BDE47，BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138 , BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物5-MeO-BDE47, 6-MeO-BDE47, 4' -MeO-BDE49,2r -MeO-BDE68, 5r -MeO-BDE99,5r -MeO-BDE100, 4r -MeO-BDElOl和f -Me0_BDE103的混合标准溶液，浓度为100ng/mL ;将以上物质加入浓缩液中并混合均匀，再将浓缩液注入色谱柱内，直至浓缩液的液面与海砂面平齐。
[0029]用120mL溶剂(环己烷:乙酸乙酯1:1)进行洗脱，弃去前60mL洗脱液，洗脱流速为lmL/min。收集后60mL洗脱液，洗脱液蒸发至1.0mL,制得浓缩液B，供GC-MS检测用。
[0030]将浓缩液B注入GC-MS中，采用Elite-5MS毛细管色谱柱，进样体积为2.0 μ L。不分流模式进样。氦气作为载气。载气流速为0.8mL/min。进样口温度为270°C，衬管采用脱活衬管。传输线温度为315°C，离子源温度为245°C。采用70ev的EI电离方式，扫描方式为SM。
[0031]柱温箱程序升温条件为:95°C(保持0.8min) - 195°C, 18°C/min ;195°C—275°C，
2.4°C /min ;275°C — 315°C，4.5°C /min (保持 9min)。
[0032]用同位素稀释内标法对样品进行定量，并计算回收率，测得BDE17，BDE28, BDE47, BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物5-Me0-BDE47，6-Me0-BDE47，4' -MeO_BDE49，2' -Me0_BDE68，5' -Me0_BDE99，5' -MeO-BDE100,4' -MeO-BDElOl 和 4' -Me0_BDE103 的回收率均为 70%?110%。
[0033]上述回收率的结果满足欧盟指令(European Un1n document 2002/657/EC)中的相关要求。即？< I μ g/L时回收率需在50%?120%范围内，P指待测物的浓度。
[0034]实施例2
[0035]取10g聚苯乙烯凝胶，浸泡在800mL的环己烷:乙酸乙酯(1:1)中，摇匀，然后进行溶胀，溶胀时间为一天，溶胀平衡后，倒出上清液以及悬浮颗粒杂质，备用。取一支干净的色谱柱(ID:3CmXL:30Cm)，加入约7.5cm的环己烷:乙酸乙酯(1:1)，静置，直至色谱柱内的玻璃砂芯滤板中无气泡溢出，然后打开活塞，挤压硅胶软管，排出玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的气泡，使溶剂充满此部分空间，然后关闭活塞。将溶胀后的聚苯乙烯凝胶和溶剂倒入烧杯中，充分搅拌直至聚苯乙烯凝胶均匀的悬浮在溶剂中，制得凝胶悬浮液，然后将凝胶悬浮液由色谱柱的顶端缓慢倒入于色谱柱中，使凝胶悬浮液自然沉降，当色谱柱底部的凝胶悬浮液沉积至1/5柱体积时，打开色谱柱下端活塞，并调节流速至2?3mL/min，然后继续倒入凝胶悬浮液至25cm高度处，并保持凝胶始终浸泡在溶剂中，待凝胶完全沉降均匀后，在凝胶层之上加入2.5cm高的海沙，铺平，即制得所述凝胶色谱柱。
[0036]称取3g事先处理过的乳粉，与30g的硅藻土混合，用250mL的二氯甲烷:正己烷(1:1)进行洗脱萃取，收集萃取液，浓缩至lmL，制得浓缩液A。在浓缩液A中加入内标碳13标记内标 PBDEs 28,47,99，100，154，153 和 183，浓度为 100ng/mL，以及 BDE17, BDE28, BDE47，BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物5-MeO-BDE47, 6-MeO-BDE47, 4' -MeO-BDE49,2r -MeO-BDE68, 5r -MeO-BDE99,5r -MeO-BDE100, 4r -MeO-BDElOl和f -Me0_BDE103的混合标准溶液，浓度为100ng/mL ;将以上物质加入浓缩液中并混合均匀，再将浓缩液注入色谱柱内，直至浓缩液的液面与海砂面平齐。
[0037]用250mL溶剂(环己烷:乙酸乙酯1:1)进行洗脱，弃去前150mL洗脱液，洗脱流速为1.5mL/min。收集后10mL洗脱液，洗脱液蒸发至1.0mL,制得浓缩液B，供GC-MS检测用。
[0038]将浓缩液B注入GC-MS中，采用Elite_5MS毛细管色谱柱，进样体积为3.0 μ L。不分流模式进样。氦气作为载气。载气流速为1.2mL/min。进样口温度为280°C，衬管采用脱活衬管。传输线温度为385°C，离子源温度为255°C。采用70ev的EI电离方式，扫描方式为SM。
[0039]柱温箱程序升温条件为:105 0C (保持1.2min) — 205 °C，2.2 V /min ；205°C^ 285°C, 2.6°C /min ；285°C^ 325°C, 5.5°C /min(保持 llmin)。
[0040]用同位素稀释内标法对样品进行定量，并计算回收率，测得BDE17，BDE28, BDE47, BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物5-Me0-BDE47，6-Me0-BDE47，4' -MeO_BDE49，2' -Me0_BDE68，5' -Me0_BDE99，5' -MeO-BDE100,4' -MeO-BDElOl 和 4' -Me0_BDE103 的回收率均为 70%?110%。
[0041]上述回收率的结果满足欧盟指令(European Un1n document 2002/657/EC)中的相关要求。即？< I μ g/L时回收率需在50%?120%范围内，P指待测物的浓度。
【主权项】
1.一种气质联用检测多溴联苯醚及其代谢物的凝胶色谱柱，其特征在于所述凝胶色谱柱采用如下方法制备:(I)、称取聚苯乙烯凝胶和溶剂，其中每I克聚苯乙烯对应量取5?8毫升溶剂，所述的溶剂为环己烷和乙酸乙酯的混合溶液，将聚苯乙烯凝胶混合于溶剂中，摇匀，然后进行溶胀，溶胀时间大于24小时，溶胀平衡后，倒出上清液以及悬浮颗粒杂质，备用； (2)、取一支干燥洁净的色谱柱以及一支硅胶软管，将硅胶软管连接在色谱柱的下端出口处，然后向色谱柱内加入占柱体积20?30%的溶剂，静置，直至色谱柱内的玻璃砂芯滤板中无气泡溢出，然后打开活塞，挤压硅胶软管，排出玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的气泡，使溶剂充满此部分空间，然后关闭活塞； (3)、将溶胀后的聚苯乙烯凝胶和溶剂倒入烧杯中，充分搅拌直至聚苯乙烯凝胶均匀的悬浮在溶剂中，制得凝胶悬浮液，然后将凝胶悬浮液由色谱柱的顶端倒入于色谱柱中，使凝胶悬浮液自然沉降，当色谱柱底部的凝胶悬浮液沉积至1/5柱体积时，打开色谱柱下端活塞，并调节流速至2?3mL/min，然后继续倒入凝胶悬浮液至柱体积5/6处，并保持凝胶始终浸泡在溶剂中，待凝胶完全沉降均匀后，在凝胶层之上加入1/12柱体积的海沙，铺平，即制得所述凝胶色谱柱。2.根据权利要求1所述的凝胶色谱柱，其特征在于:步骤⑴所述的溶剂中环己烷和乙酸乙酯的体积比为1:1。3.根据权利要求1所述的凝胶色谱柱，其特征在于:步骤(2)所述的色谱柱的长径比为8?10:1。4.一种基于权利要求1所述的凝胶色谱柱检测多溴联苯醚及其代谢物的方法，其特征在于包括以下步骤:(I)、将待测样品与硅藻土按照1:8?10的体积比混合，再用二氯甲烷与正己烷按照1:1的体积比混合后的溶液进行洗脱，收集并浓缩待测样品洗脱液，制得浓缩液A ； (2)、在浓缩液A中加入内标碳13标记内标PBDEs28，47，99，100，154，153和183，浓度为 100ng/mL，以及 BDE17, BDE28, BDE47, BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE15.3，BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物 5-MeO_BDE47，6-MeO_BDE47，4' -MeO_BDE49，2' -MeO-BDE68, 5r -MeO-BDE99, 5r -MeO-BDElOO, 4r -MeO-BDElOl和4' -Me0_BDE103 的混合标准溶液，浓度为100ng/mL ;将以上物质加入浓缩液中并混合均匀，再将浓缩液注入色谱柱内，直至浓缩液的液面与海砂面平齐； (3)、采用1.2?1.4倍柱体积的溶剂进行洗脱，洗脱流速为1.00?1.50mL/min，弃去前50?60%柱体积的洗脱液，收集剩余部分的洗脱液于蒸发瓶中，后续经旋转蒸发与氮吹浓缩至0.9?1.1mL,制得浓缩液B，供GC-MS检测用； (4)、将浓缩液B注入GC-MS中，采用Elite-5MS毛细管色谱柱，进样体积为2.0?.3.0 μ L，不分流模式进样，以氦气作为载气，载气流速为0.8?1.2mL/min，进样口温度为270?280°C，衬管采用脱活衬管，传输线温度为315°C?325°C，离子源温度245°C?.255°C，采用70ev的EI电离方式，扫描方式为SM，柱温箱程序升温条件为:95°C?105°C保持 0.8 ?1.2min — 195 °C ?205 °C，升温速度为 18 V /min ?22 V /min ； 195 V ?.205℃ ^ 275℃ ?285℃，升温速度为 2.4°C /min ?2.6°C /min ;275°C ?285°C— 315°C ?.325°C，升温速度为 4.50C /min ?5.5°C /min，315°C?325°C保持 9 ?Ilmin ； (5)、采用同位素稀释内标法定量，即以待测物浓度为横坐标，待测物峰面积与相应的同位素峰面积之比为纵坐标，得到工作曲线，从而计算中待测样品中BDE17，BDE28, BDE47, BDE66, BDE71, BDE85, BDE99, BDE100, BDE138, BDE153, BDE154, BDE183 和 BDE190 以及代谢物.5-MeO-BDE47，6-MeO-BDE47，4' -MeO_BDE49，2' -MeO_BDE68，5' -MeO_BDE99，5' -MeO-BDE.100，4' -MeO-BDElOl 和 4' -Me0_BDE103 的含量。
【专利摘要】本发明提供了一种气质联用检测多溴联苯醚及其代谢物的凝胶色谱柱，所述凝胶色谱柱采用如下方法制备：称取凝胶和溶剂，将凝胶混合于溶剂中，摇匀溶胀；取一支干燥洁净的色谱柱，然后向色谱柱内加入溶剂，排出玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的气泡，使溶剂充满此部分空间；将凝胶悬浮液倒入于色谱柱中，在凝胶层之上加入海沙，即制得所述凝胶色谱柱。该凝胶色谱柱制备方法简单，能够有效克服复杂的基体效应，能对含有机污染物基体中的多种杂质进行分离，从而有效地除去多种杂质，避免了对后续有机污染物检测的干扰。本发明同时还提供了基于上述凝胶色谱柱检测多溴联苯醚及其代谢物的方法，该方法有操作简单、重现性好、灵敏度高和准确度高的优点。
【IPC分类】G01N30/88, G01N30/60
【公开号】CN104897824
【申请号】CN201510280046
【发明人】胡小钟, 胡德聪, 陈魏, 吴斌, 林长军
【申请人】中华人民共和国湖北出入境检验检疫局, 中国检验认证集团湖北有限公司, 中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月28日
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