作为11β-羟基类固醇脱氢酶1型的调节剂的异噁唑衍生物的制作方法
专利名称：作为11β-羟基类固醇脱氢酶1型的调节剂的异噁唑衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新颖的式(I)的异噁唑化合物，其为11 β-羟基类固醇脱氢酶1型 (11 β -HSD1)的调节剂并且可以用于治疗与11 β -HSDl活性相关的医学疾病。本发明还涉 及包含这些化合物的药物组合物、这些化合物在制备治疗青光眼的药物中的应用以及这些 化合物的制备方法。
背景技术：
青光眼是多相群疾病，其中原发性开角型青光眼(POAG)最为普遍，这种疾病是 导致14%总体失明的不可逆视力丧失的主要原因。其特征在于具有相应视野丧失的视 神经病变，这种视野丧失与一定范围的包括眼内压升高(IOP)的危险因素相关，它能够 治疗和控制。IOP通过因睫状体上皮产生房水(AH)与经过小梁网(TM)排出(Schlemm 管和色素层巩膜流出途径)之间的良好平衡而得到调节。该过程可以受到皮质类固醇 调节，因为用局部用皮质类固醇治疗的约三分之一的正常群体发生中度IOP升高，而实 际上具有POAG的全部患者在局部用皮质类固醇疗法后均发生IOP升高[Armaly，Arch. Ophthalmol. 1963，70，483-491 ；Armaly, Arch. Ophthalmol. 1963，70，492-499 ；Becker, Invest. Ophthalmol. 1965，4，198-205 ；Armaly, Arch. Ophthalmol. 1967，77，747-751]。 此外，患有库欣综合征的患者发生IOP升高[Sayegh等人，Ophthalmic Res. 1975,7, 390-394]。羟基类固醇脱氢酶(HSDs)调节类固醇激素受体的占有率和活化，所述酶将类固 醇激素转化成它们的无活性代谢物[有关近期综述参见Nobel等人，Eur. J. Biochem. 2001， 268,4113-4125]。存在大量类型的HSDs，其中11 β -羟基类固醇脱氢酶(11 β -HSDs)催化活 性糖皮质激素(例如皮质醇和皮质酮)及它们的惰性形式(例如可的松和11-脱氢皮质甾 酮)互变。将可的松活化成氢化可的松的同种型11 羟基类固醇脱氢酶1型(11 β-HSD1) 在肝、脂肪组织、脑、肺和其他糖皮质激素组织等中表达，并且是定向于可以通过减少糖皮 质激素作用改善的大量疾病例如糖尿病、肥胖和与年龄相关的认知功能障碍的疗法的潜在 靴标[Seckl 等人，Endocrinology 2001，142，1371-1376]。有意义的是，在健康志愿者试验非对照中，显示非选择性11 β -HSD1/11 β -HSD2 抑制剂甘珀酸(CBX)在口服给药时将眼内压(IOP)降低了 20% [Rauz等人，Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001，42，2037-2042]。类似地，在具有高眼压患者的安慰剂对照的研 究中，口服给药的CBX诱导10% IOP降低[Rauz等人，Q. J.Med. 2003，96，481-490]。组织表 达研究已经显示，在人睫状上皮细胞中存在ΙΙβ-HSDl，而不存在Ili3-HSD2。这种占优势 的11 β -HSDl在眼组织中的表达得到了健康受试者和患者AH中氢化可的松相对可的松的 水平过度的支持，而在尿中观察到了相反的结果，这反映出lli3_HSD2在肾中的活性。这些 结果共同暗示眼中ΙΙβ-HSDl的选择性抑制可以是降低已经升高的IOP的有效手段，且由 此治疗青光眼[US 6,548,053 ；另外参见Walker等人，P3-698海报，在Endocrine Society
5Meeting,1999 年 6 月 12-15 日，San Diego]。给眼局部施用是药理学干预眼病的优选途径，因为这导致活性化合物在期望作用 部位上的高浓度，而同时降低全身副作用的风险。水溶液通常被接受为用于青光眼药物的 优选制剂。从现有技术中已知几种取代的异噁唑化合物。WO 01/29015描述了对α la肾 上腺素能受体具有增强的选择性的异噁唑衍生物，用于治疗下泌尿道阻塞综合征。WO 2007/114124描述了取代的异噁唑衍生物作为治疗肥胖的11 β -HSDl抑制剂。然而，在先尚未显示取代的异噁唑化合物适合于局部施用于眼以治疗青光眼。
发明内容
令人意外地发现是有效和选择性11 β -HSDl抑制剂的式(I)的异噁唑化合物具有 使得它们特别适合于局部施用于眼治疗青光眼的理化特性。在第一个方面中，本发明涉及式(I)的化合物 或其药学可接受的盐、溶剂合物、水合物、几何异构体、互变体、旋光异构体或 N-氧化物，其中X-Y 表示 N-O 或 O-N ；R1独立地选自卤素、氰基、CF3> OCF3> C^4-烷基、羟基-(^4-烷基、C^4-烷氧 基-C 1-4 烷基和 烷氧基；或两个取代基R1与所连接的碳原子一起形成5-或6-元芳族或非芳族环，其任选 包含一个或多个选自0和N的杂原子，且该环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基 选自卤素、氰基、CF3、OCF3、C1^4-烷基、羟基-CV4-烷基、Cy-烷氧基-Ch-烷基和C^4-烷氧 基；R2独立地选自Cp8-烷基、羟基-Cu-烷基、CV8-烷氧基-CV8-烷基、C1^8-烷氧基、 羟基-Ch8-烷氧基、C1^8-烷氧基-CV8-烷氧基、c3_8-环烷基、羟基-c3_8-环烷基、C1^8-烷氧 基-c3_8-环烷基、c3_8-环烷氧基、羟基-c3_8-环烷氧基和Ch8-烷氧基-c3_8-环烷氧基；a 是 0，1 或 2;且m和η各独立地是0、1或2 ；条件是该化合物不选自· 1- [ (5-苯基-4-异噁唑基)羰基]_哌啶；· 5-苯基-4-(吡咯烷-1-基羰基)异噁唑；· 5-(4-氟苯基)-4_(吡咯烷-1-基羰基)异噁唑；· 5- (4-氯苯基)-4-(吡咯烷-1-基羰基)异噁唑；· 5- (4-溴苯基)-4-(吡咯烷-1-基羰基)异噁唑；
· 5- (4-甲基苯基)-4-(吡咯烷-1-基羰基)异噁唑；· 5- (4-甲氧基苯基)-4-(吡咯烷-1-基羰基)异噁唑；· 4- {[2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基} -5- (4-甲基苯基)异噁唑；· 4- {[ (2S) -2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基} _5_ (4_甲基苯基)异噁唑；· 4- {[ (2R) -2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基} _5_ (4_甲基苯基)异噁唑；· 5-(2-氯苯基)-4-{[2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基}异噁唑；· 5-(2-氯苯基)-4-{[(2幻-2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基}异噁唑；· 5-(2-氯苯基)-4-{[(21 )-2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基}异噁唑；· 4-{[(2S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-5-[4_(三氟甲基)苯基] 异噁唑；· 4-{[(2R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基} _5-[4_ (三氟甲基)苯基] 异噁唑；· 5- (4-氯苯基)-4- {[2-(异丙基)吡咯烷基]羰基}异噁唑；· 2- (1- {[5- (4-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- (1- {[5- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；·2-[1-({5-[4_(三氟甲基)苯基]异噁唑_4_基}羰基)哌啶_3_基]丙_2_醇；.2-((3R)-l-{[3-(4-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3R)-l-{[5-(4-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；·2-((3Κ)-1-{[3_(4-甲氧基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2-((3R)-l-{[3_(3-氯-4-甲氧基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 3- (1- {[5- (4-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)戊_3_醇；· 3- (1- {[3- (4-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)戊_3_醇；· 3，5_ 二甲基-l-{[5-(4-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶；· 1-{[5-(2_氯苯基)异噁唑-4-基]羰基} _3，5-二甲基哌啶；· 3，5-二甲基-1-( {5-[4-(三氟甲基)苯基]异噁唑_4_基}羰基)哌啶；· 5-乙基-2-甲基-1- {[5- (4-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶；· 1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基} -5-乙基_2_甲基哌啶；和· 5-乙基-2-甲基-1-({5-[4-(三氟甲基)苯基]异噁唑_4_基}羰基)哌啶。在本发明的一个优选的实施方案中，R1是卤素或CV4-烷基或两个取代基R1与所 连接的碳原子一起形成5-或6-元环。在一个最优选的实施方案中，R1是F、Cl或甲基或 两个取代基R1与所连接的碳原子一起形成6-元芳族环。在另一个优选的实施方案中，带有取代基R2的杂环是哌啶环。因此，a优选是1。在另一个优选的实施方案中，哌啶环被一个取代基R2取代。因此，η优选是1。在另一个优选的实施方案中，R2是羟基-CV8-烷基或Cp8-烷氧基-Cu-烷氧基。 在一个最优选的实施方案中，R2是1-羟基乙基、2-羟基乙基或1-羟基-1-甲基乙基。本发明特别优选的化合物是选自如下这样的化合物· 2- (1- {[5- (2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3R)-l-{[5-(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；
7
.2-((3S)-l-{[5-(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- (1- {[5- (3-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3S)-l-{[5-(4-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；
· 2- ((3S)-1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3S)-1-{[5- (3-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (4-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3S)-1-{[5- (4-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- (1- {[5- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_2_基)乙醇；·2-(1-{[5_(3-氯-2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2-(1_{ [5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2-((3R)-l-{[5_(3，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 2-((3S)-l-{[5_(3，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 2-((3R)-l-{[5_(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 2-((3S)-l-{[5_(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (2-氟苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (4-氟苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3S)-1-{[5- (4-氟苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (1-萘基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3S)-l-{[3-(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3R)-l-{[3-(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[3- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3S)-1-{[3- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2-((3R)-l-{[3_(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 1-(1_{[3-(2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)乙醇；和· 2-((3S)-l-{[3_(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇。本发明的另一个方面是用于疗法的式(I)的化合物。如上述定义的化合物是有效 和选择性的11 β-HSDl抑制剂。照此，它们用于治疗或预防青光眼。本发明由此包括用于 治疗或预防青光眼的式(I)的化合物。本发明在另一个方面中包括式(I)的化合物在制备治疗或预防青光眼的药物中 的应用。本发明在另一个方面中包括治疗或预防青光眼的方法，包括对有这种治疗需要的 人受试者给予有效量的式(I)的化合物。
本发明在另一个方面中提供了包含作为活性成分的式(I)的化合物与药学可接 受的稀释剂或载体的药物制剂。所述药物制剂用于治疗或预防青光眼。本文所述的方法包括这样的方法，其中将受试者鉴定为需要特定的所述治疗。鉴 定需要这种治疗的受试者可以是受试者或健康护理职业者的判断并且可以是主观(例如 意见)或客观的(例如可通过试验或诊断方法测定)。定义下列定义应适用于本说明书和附属权利要求上下文中。除非另做陈述或另有指示，否则术语"(^8-烷基”表示具有1-8个碳原子的直链或 支链烷基。所述C"-烷基的实例包括甲基、乙基、正_丙基、异_丙基、正_ 丁基、异_ 丁基、 仲-丁基、叔-丁基和直链和支链戊基、己基、庚基和辛基。就"(V8-烷基”部分范围而言， 关注其全部亚组，例如Ci_7-烷基、Ch6-烷基、CV5-烷基、CV4-烷基、Cp3-烷基、Ci_2-烷基、 C2-S-焼基、C2-7—焼基、C2-Q~焼基，C2-5—焼基、C2-4—焼基、C2-3—焼基、C3-S-焼基、C3-7—焼基等。除非另做陈述或另有指示，否则术语“羟基-Cm-烷基”表示具有其氢原子被OH替 代的直链或支链Cp8-烷基。所述羟基-CV8-烷基的实例包括羟基甲基、2-羟基乙基、2-羟 基丙基、2-羟基-2-甲基丙基和1-羟基-1-甲基乙基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“C"-烷氧基”表示通过氧连接分子其余部分 的直链或支链Cu-烷基。所述Cu-烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、异-丙 氧基、正-丁氧基、异-丁氧基、仲-丁氧基、叔-丁氧基和直链和支链戊氧基、己氧基、庚氧 基和辛氧基。就“Cu-烷氧基”的部分范围而言，关注其全部亚组例如CV7-烷氧基、Ch6-烷氧 基、C1-5_焼氧基、Cp4- -烧氧基、C"-烧氧基、C"-烧氧基、c2_8-烧氧基、c2_7-烧氧基、c2_6-烧 氧基、c2_5-烷氧基、 C2—4_焼氧基、C2—3_焼氧基、C3-S-焼氧基、C3—7_焼氧基等。除非另做陈述或另有指示，否则术语"(^8-烷氧基-Cu-烷基”表示具有其氢原子 被直链或支链Cu-烷氧基替代的直链或支链Cu-烷基。所述Cu-烷氧基-Ch8-烷基的实 例包括甲氧基甲基、1-甲氧基乙基、2-甲氧基乙基和2-乙氧基乙基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“羟基-Cm-烷氧基”表示具有其氢原子被OH 替代的直链或支链CV8-烷基。所述羟基-Cm-烷氧基的实例包括羟基甲氧基、2-羟基乙氧 基和2-羟基丙氧基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“Cm-烷氧基-CM-烷氧基”表示具有其氢原 子被直链或支链Cu-烷氧基替代的直链或支链Cu-烷基。所述Cu-烷氧基-Ch8-烷氧基 的实例包括甲氧基甲氧基、2-甲氧基乙氧基和3-甲氧基丙氧基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“C3_8_环烷基”表示具有3-8个碳原子的单环 饱和烃环系。C3_8_环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。就 “c3_8-环烷基”的部分范围而言，关注其全部亚组例如c3_7-环烷基、c3_6-环烷基、c3_5-环烷 ■、C3_4_ C5_g-C5_7-烧基、C6_8_环烧基禾口 C6_7_环烧基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“羟基-C3_8_环烷基”表示具有其氢原子被OH 替代的C3_8_环烷基。所述羟基-C3_8_环烷基的实例包括3-羟基环戊基和4-羟基环己基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“Cm-烷氧基-C3_8_环烷基”表示具有其氢原 子被直链或支链Cu-烷氧基替代的c3_8-环烷基。所述Ch8-烷氧基-c3_8-环烷基的实例包
9括3-甲氧基环戊基和4-甲氧基环己基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“C3_8_环烷氧基”表示通过氧与分子其余部分 连接的C3_8-环烷基。所述c3_8-环烷氧基的实例包括环丙氧基、环戊氧基和环己氧基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“羟基-c3_8-环烷氧基”表示具有其氢原子被 OH替代的C3_8_环烷氧基。所述羟基-C3_8_环烷氧基的实例包括3-羟基环戊氧基和4-羟 基环己氧基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“Cm-烷氧基-C3_8-环烷氧基”表示具有其氢 原子被直链或支链Cu-烷氧基替代的c3_8-环烷氧基。所述Cu-烷氧基-c3_8-环烷氧基的 实例包括3-甲氧基环戊氧基和4-甲氧基环己氧基。当本文所述的两个取代基R1与所连接的碳原子一起形成5-或6-元芳族或非芳 族环时，所述环可以任选包含一个或多个选自0和N的杂原子。这种二价取代基R1的实例 包括-CH = CH-CH = CH-、-O-CH2-O-(亚甲二氧基)和-O-CH2-CH2-O-(亚乙二氧基)。“卤素”意指氟、氯、溴或碘。“羟基”意指-OH基团。“氰基”意指-CN基团。“CF3”意指三氟甲基。“ OCF3 ”意指三氟甲氧基。“任选”或“任选地”意指随后所述的结果或情况不一定发生，且该描述包括其中该 结果或情况发生的例子和其不发生的例子。“药学可接受的”意指用于制备的药物组合物一般是安全的、无毒性的、且既不是 生物学也不是其它方面不期望的特性，并且用于人体药物应用。本文所用的“治疗”包括预防所述病症或疾病，或改善或消除一旦已确立的病症。“有效量”意指赋予治疗剂对所治疗受试者的治疗效果(例如治疗，控制，改善，预 防，延缓疾病、障碍或病症或其症状发生或减轻其风险)的用量。治疗效果可以是客观的 (即可通过一些试验或标记测定)或主观的(即受试者给出的效果的表示或感觉)。“前体药物”意指在生理学条件下或通过溶剂解转化成本发明生物活性化合物的 化合物。前体药物在对有此需要的受试者给药时可以是无活性的，但在体内被转化成本发 明的活性化合物。前体药物典型地在体内被转化成本发明的母体化合物，例如通过水解。 前体药物化合物通常提供在哺乳动物生物体中溶解性、组织相容性或延缓释放的优点(参 见 Silverman, R. B. , The Organic Chemistry of Drug Designand Drug Action,第 2 版， Elsevier Academic Press (2004), pp. 498-549)。可以通过修饰存在于本发明化合物上的 官能团例如羟基制备本发明化合物的前体药物，按照这种方式，用常规操作或在体内裂解 修饰物，得到本发明的母体化合物。前体药物的实例包括但不限于羟基官能团的乙酸酯、甲 酸酯和琥珀酸酯衍生物。在本说明书和附属权利要求上下文中，指定化学式或名称还应包括其所有的盐、 水合物、溶剂合物、N-氧化物和前体药物形式。此外，指定化学式或名称应包括其所有互变 体和立体异构体形式。立体异构体包括对映体和非对映异构体。对映体可以以其纯形式或 两种对映体的外消旋(相等)或不相等混合物存在。非对映异构体可以以其纯的形式或作 为非对映异构体混合物存在。非对映异构体还包括几何异构体，它们可以以其纯的顺式或
10反式形式或作为它们的混合物存在。式(i)的化合物可以照此使用或(如果适合)作为其药理学可接受的盐(酸或碱 加成盐)使用。下文举出的药理学可接受的加成盐意指包括化合物能够形成的治疗活性无 毒性酸和碱加成盐形式。可以通过用适宜酸处理碱形式将具有碱性特性的化合物可以被转 化成其药学可接受的酸加成盐。典型酸包括无机酸例如氯化氢、溴化氢、碘化氢、硫酸、磷 酸；和有机酸例如甲酸、乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、乙醇酸、马来酸、丙二酸、草酸、 苯磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、三氟乙酸、富马酸、琥珀酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、水杨酸、对 氨基水杨酸、扑酸、苯甲酸、抗坏血酸等。典型碱加成盐形式是钠、钾、钙盐和与药学可接受 胺类形成的盐，所述胺类例如氨、烷基胺类、苄星青霉素和氨基酸例如精氨酸和赖氨酸。本 文所用的术语加成盐还包括化合物及其盐能够形成例如水合物、醇化物等的溶剂合物。组合物就临床应用而言，将本发明的化合物配制成用于眼给药的药物制剂。将要理解的 是可以将本发明的化合物与生理学可接受的载体、赋形剂或稀释剂一起给予。包含溶于、分散于或混悬于其中的活性成分的药物组合物的制备是本领域众 所周知的。典型地，将这种组合物制备成作为水性或非水性液体溶液或混悬液滴注 (oculoguttae)的无菌组合物，然而，还可以制备适合于在使用前溶解、分散或混悬在液体 中的固体剂型。还可以乳化制剂。活性成分可以与药学可接受并且与活性成分相容赋形剂混合，且用量适用于本文 所述的治疗方法。如果需要，组合物可以包含辅助物质例如湿润剂或乳化剂、ph缓冲剂等， 它们增强活性成分的有效性。药学可接受的载体是本领域众所周知的。典型液体载体是不舍除活性成分和水外 的物质的无菌水溶液，或包含生理ph值的缓冲液例如磷酸钠、生理盐水或它们两者，例如 磷酸缓冲的盐水。其他水性载体可以包含一种以上缓冲盐以及盐，例如氯化钠和氯化钾、葡 萄糖、丙二醇、聚乙二醇和其他溶质。液体组合物还可以包含除了水以及与水相排斥的液相。这种额外液相的实例是甘 油、植物油、有机酯类和水_油乳剂。优选药物组合物包含一种或多种用作增溶剂、乳化剂和/或渗透促进剂的试剂。 为本领域众所周知的这种试剂包括例如在Cremophor (basf)名称下销售的试剂。实例 是Cremophor rh 40(聚氧乙烯醚氢化蓖麻油；cas No. 61788-85-0)。本发明化合物的制备可以通过常规方法或与之类似的方法制备上述式(i)的化合物。本发明实施例的 中间体和化合物的制备特别阐明在下列反应路线1和2中。本文反应路线中结构上的变量 的定义与本文所述式中相应位置的定义相符。以适宜苯乙酮(ii)为原料，在几个合成步骤中容易地得到5_(苯基)异噁 唑-4-甲酸甲酯(v)。在水解该酯后，通过用tbtu处理活化甲酸(vi)或转化成相应酰氯， 使其与适宜环胺(vii)反应，导致形成期望的式(i)的化合物。该过程一般表示在反应路 线1中。反应路线1
11 其中R1-R^Eun和m如式⑴所定义。反应路线2显示了式(I)的异构体异噁唑化合物的制备。以适当取代的苯甲醛 (VIII)为原料，在三步中得到3-(苯基)异噁唑-4-甲酸乙酯(XI)。然后通过水解酯(XI) 并且使得到的酸(XII)与适宜的环胺(VII)在作为活化剂的TBTU的存在下缩合或通过将 酸转化成相应酰氯容易地形成式(I)的化合物。反应路线2 其中R1-R^Eun和m如式⑴所定义。用于制备式(I)化合物的必要原料是商购的或可以通过本领域公知的方法制备。可以实施下述实验部分中的方法，得到游离碱或酸加成盐形式的本发明化合物。 可以通过下列步骤得到药学可接受的酸加成盐根据由碱化合物制备酸加成盐的常规方法 将游离碱溶于适宜有机溶剂，用酸处理该溶液。形成加成盐的酸的实例如上所述。式(I)的化合物可以具有一个或多个手性碳原子且由此可以以旋光异构体形式 得到它们，例如作为纯的对映体或对映体混合物(外消旋物)或作为包含非对映异构体的 混合物。得到纯对映体的旋光异构体的混合物的分离是本领域众所周知的并且例如可以通 过用旋光(手性)酸对盐分级结晶或通过手性柱色谱分离实现。用于本文所述合成途径的化学物质可以包括，例如溶剂、试剂、催化剂和保护基和 脱保护基试剂。保护基的实例是叔-丁氧羰基(Boc)、苄基和三苯甲基(三苯基甲基)。上述 方法还可以包括如下步骤在本文具体描述的步骤之前或之后，添加或除去适宜的保护基， 以最终能够合成所述化合物。此外，可以以交替顺序或次序进行各种合成步骤，得到期望的 化合物。用于合成适用的化合物的合成化学转化和保护基方法(保护和脱保护)是本领域 公知的并且包括，例如描述在如下文献中这样的方法R. Larock，Comprehensive Organic Transformations,VCH Publishers (1989) ；T. W. Greene禾口P. G. M. Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed. , John Wiley 禾口 Sons (1999) ；L. Fieser 禾口 M. Fieser, Fieser and Fieser' s Reagents for Organic Synthesis, John Wiley 禾口 Sons(1994)； 禾口 L. Paquette，ed.，Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley 禾口 Sons (1995)及其后续版本。使用如下缩写
DMF-DMA二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛
EtOAc乙酸乙酯
ESI电喷雾电离
h小时
HPLC高效液相色谱法
HRMS高分辨率质谱法
LCMS液相色谱法_质谱法
M摩尔
MeCN乙腈
MeOH甲醇
min分钟
MS质谱法
NCSN-氯琥珀酰亚胺
NEt3三乙胺
TBTU2-(1Η-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3_四甲基脲四
氟硼酸盐
THF四氢呋喃
本文变量的任意定义中列出的化学基团的描述包括该变量作为列出基团的任
单一基团或组合的定义。本文实施方案的描述包括作为任意单一实施方案或与任意其他实 施方案或其部分组合的该实施方案。现在通过下列非限制性实施例进一步示例本发明。下文具体实施例认作为仅仅是 示例性的，但不以任何方式限定本说明书公开内容的其余部分。尽管没有进一步阐述，但是 认为本领域技术人员基于本文描述可以以其最完整的程度利用本发明。将所用参考出版物 和公开出版物完整地引入本文参考。实施例和中间体化合物实验方法除非另有指定，否则全部试剂均为商品级并且无需进一步纯化接受使用。除非另 有指定，否则在所有其他情况中使用试剂级溶剂。使用Waters/Micromass Platform ZQ 系统进行制备型HPLC/MS，并且使用Gilson系统、根据实施例中具体描述的实验进行制备 型HPLC/UV。使用安装了电喷雾接口的Agilent 1100/1200系列液相色谱仪/质量选择检 测器(MSD)(单一四极)(1946A/1946C/1956C/6110)进行分析型 HPLC/MS。使用 Merck 硅 胶60(230-400目)进行制备性快速色谱。使用Personal Chemistry Smith Creator或 Personal Chemistry SmithOptimizer、应用配有铝盖和隔片的 0. 5_2mL 或 2_5mL Smith Process小瓶进行微波反应。使用连接Agilent 1100HPLC系统的AgilentMSD-TOF得到高 分辨质谱(HRMS)。在分析过程中，根据两种质量检验校准并且如果需要自动校正。以正电 喷雾模式获取光谱。获取的质量范围是m/z 100-1100。使用质量峰的分布检测。使用ACD Name 6.0命名化合物。中间体15-(2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸
步骤1 3- (2-甲基苯基)-3-氧代丙酸甲酯 将2-甲基苯乙酮(20g，149mmol)溶于甲苯(20mL)，在室温缓慢加入搅拌的 NaH(7. 16g,298mmol)和碳酸二甲酯(14. 8g，164mmol)在甲苯(约150mL)的淤浆中。通过 LCMS监测反应。当原料苯乙酮耗尽时，在约IOmin内加入MeOH(约IOmL)，同时搅拌，然后 加入约50mL碎冰。用CH2Cl2稀释该混合物，用HCl水溶液(9-12M)酸化。分离有机相，用 CH2Cl2萃取水相。干燥合并的有机相(Na2SO4),蒸发溶剂，得到27. 2g标题化合物(>95% 纯)。MS m/z 193[m+1]。步骤2: (2Z)-3-( 二甲氨基)-2-(2-甲基苯甲酰基)丙烯酸甲酯将3-(2-甲基苯基)-3-氧代丙酸甲酯(27. lg, 141mmol)溶于甲苯(IOOmL)。加入 DMF-DMA (17. 6g，148. Ommol)，将该反应混合物在70°C搅拌。当原料耗尽时(通过LCMS监 测)，将该反应混合物冷却至室温，蒸发溶剂，得到34. Ig标题化合物(> 95%纯)，将其用 于下一步。MS m/z 248[m+1] 步骤3 5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸甲酯 将(2Z)-3_( 二甲氨基)-2-(2_甲基苯甲酰基)丙烯酸甲酯(34. 0g，138mmol)和 羟基胺盐酸盐(10. lg,145mmol)溶于Me0H(150mL)，在室温搅拌得到的溶液。通过HPLC监 测反应。18h后，蒸发90%的溶剂，将残余物溶于CH2Cl2，用水洗涤，干燥(Na2SO4)15蒸发溶 剂，得至IJ 28. 5g( > 95%纯)标题化合物。MS m/z 218[m+1]。步骤4 5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸 将5-(2_甲基苯基)异噁唑-4-甲酸甲酯(8. OOg, 36. 8mmol)溶于HOAc (40mL)。 加入HCl (浓)，同时在室温搅拌，直到观察到混浊(约40mL)。在70°C搅拌该反应混合物， 通过HPLC监测。18h后，将该反应体系冷却至室温，用水(IOOmL)稀释，用CH2Cl2(2x50mL) 萃取。用水(50mL)洗涤合并的有机相。用K2CO3中和有机相，用K2COwK溶液(3xl00mL)萃 取。用012(12(约50mL)洗涤合并的碱水相，用HCl水溶液(浓)酸化，用CH2Cl2 (3xl00mL)萃取。干燥合并的有机相(Na2SO4),蒸发溶剂，得到6.51g浅褐色固体(>98%纯)。MS m/ z204[m+l]。中间体 2-12以适当取代的苯乙酮为原料，按照如中间体1所述方法制备中间体2-12。
中间体133-(2，4-二甲基苯基)异噁唑-4-甲酸步骤1 :2，4_ 二甲基苯甲醛肟
^OH H将 2，4_ 二甲基苯甲醛(10.0g;74. 5mmol)、羟基胺盐酸盐(7. 73g ;lllmmol)和吡啶(IOmL)在Me0H(75mL)中的溶液在室温搅拌过夜。蒸发溶剂，将粗混合物溶于 CH2Cl2 (150mL)，用水(4x25mL)洗涤，干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，得到10. Ig透明油状物，在 其在室温固化，用于下一步。MS m/z 150 [m+1]。步骤2 :2，4-二甲基-N-羟基苯羧亚氨酰氯(carboximidoylchloride) 在室温在90min内向2，4_ 二甲基苯甲醛肟(6. 12g，41. Immo 1)在DMF (IOOmL)中 的搅拌溶液中分小部分加入N-氯琥珀酰亚胺(6.30g，47.2mmol)在DMF中的溶液。将该反 应混合物搅拌过夜，然后用乙醚稀释，用冰水洗涤，干燥(MgS04)，蒸发溶剂，得到6. 92g标 题化合物，为黄色油状物。MS m/z 184[m+l]。步骤3 :3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_甲酸乙酯 向乙基-3-( 二甲氨基)丙烯酸酯(1.56g，10.9mmOl)在乙醚(30mL)中的冰冷溶 液中加入三甲胺(1.52ml，10.9mmOl)，然后滴加(在Ih内)溶于乙醚(15mL)的2，4_ 二甲 基-N-羟基苯羧亚氨酰氯(2. 012g, 10. 96mmol)。白色沉淀形成，再加入乙醚(50mL)。除去 冰浴，将该反应混合物在22°C搅拌过夜。通过过滤除去固体，用5% HOAc水溶液(3x)洗涤 有机相，干燥(MgSO4)，蒸发溶剂，得到2. 54g标题化合物。MSm/z246 [m+1]。步骤4 :3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_甲酸在微波反应器中将3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑-4-甲酸乙酯(890mg，3.63mmol) 在HOAc (IOmL)和12M HCl水溶液(5mL)中的溶液在110°C加热70min。将该反应混合物浓 缩至约一半体积，用甲苯稀释。除去水相，用IM HCl水溶液萃取有机相。用甲苯萃取合并 的水相，合并有机相，浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(CH2Cl2/MeOH 9 1)，得到723mg 标题化合物，为棕色油状物。MS m/z 224[m+l]。中间体 14-16以适当取代的苯甲醛为原料，按照如中间体13的方法所述制备中间体14-16。
中间体172- [ (3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐 在室温将(S)-哌啶-3-甲酸乙酯(25. 0g, 159mmol)在CH2Cl2(25mL)中的溶液滴 加到搅拌的二碳酸二叔丁酯(36. 5g，167mmol)在CH2Cl2(150mL)中的溶液中。将该反应体 系搅拌过夜。用饱和NaHCO3水溶液洗涤粗混合物，然后与10% NH3水溶液(约30mL) —起 搅拌90min。分离有机相，干燥(Na2SO4),蒸发溶剂，得到39. 7g 1_叔丁基3-乙基(3S)-哌 啶-1，3-二甲酸酯，为透明油状物，在静置时固化。将1-叔丁基3-乙基(3S)-哌啶-1，3-二甲酸酯(16. 0g，62. 2mmol)在无水 THF(IOOmL)中的溶液在Ih内滴加到搅拌的MeMgBr的THF/甲苯溶液中(IOOmL, 1. 4M， HOmmol)。通过用冰冷却将该反应混合物保持在低于25°C。将该反应混合物搅拌过夜，通 过滴加水(约5mL)淬灭，然后加入HCl水溶液(6M)，直到用pH_试纸显示呈酸性。分离有 机相，蒸发溶剂。将残余物溶于CH2Cl2，用水(约50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，蒸发溶剂，得到 14. 7g淡黄色油状物。将粗产物溶于EtOAc/HCl (g) (IOOmL ；由鼓泡HCl (g)进入EtOAc制 备)，在室温搅拌过夜。蒸发溶剂。将粗产物溶于CH2Cl2 (IOOmL)，搅拌5min。蒸发溶剂(重 复一次)，将粗产物真空温热至50°C 3h。将粗产物与乙醚一起研磨，导致形成白色晶体，其 被过滤，干燥至得到6. 41g标题化合物。MSm/zl44[m+l]。中间体18 2- [ (3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐
如中间体17方法所述由(R)-哌啶-3-甲酸乙酯(25. 0g, 159mmol)和二碳酸二叔 丁酯(36. 5g，167mmol)制备标题化合物，得到6. 88g产物，为白色固体。MSm/z 144[m+l]。中间体192-[哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐 如中间体17方法所述由-哌啶-3-甲酸乙酯(6. 837g，47. 75mmol)和二碳酸二叔 丁酯(10. 42g，47. 75mmol)制备标题化合物，得到4. 85g产物，为白色固体。MSm/zl44[m+1]。中间体201-(哌啶-3-基)乙-1-醇 在微波反应器中将1_(吡啶-3-基)乙醇(249mg，2.03mmol)、甲酸铵(557mg， 8. 83mmol)和 Pd/C(10%,65. 5mg)在 EtOH(15mL)中的混合物加热至 110°C 20min。再加入 一定量的甲酸铵(412mg，6. 53mmol)，将该反应混合物加热至110°C 20min。过滤该反应混合 物，蒸发溶剂，得到165mg标题化合物。MS m/z 130 [m+1]。实施例12-(l-{[5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体 1 ； 103mg，0. 51mmol)和 TBTU(195mg， 0. 607mmol)在CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到2-哌啶-3-基丙-2-醇盐酸盐(中间体19 ； 116mg,0. 645mmol)和三乙胺(0. 142mL，1. Olmmol)在 CH2Cl2(2mL)中的混合物中。将该 混合物在室温搅拌30min。用乙醚稀释该混合物，用饱和NaHCO3水溶液、5 % HOAc水溶液 洗涤，然后干燥(MgS04)。蒸发溶剂，通过快速色谱法纯化残余物(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)，得到145mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1786，测定值 328. 1784.实施例22-((3R)-l-{[5_(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体1 ； 102mg，0. 507mmol)和 TBTU(196mg,0. 611mmol)在 CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 盐酸盐(中间体 18 ；84. Img, 0. 471mmol)和三乙胺(0. 142mL, 1. Olmmol)在 CH2Cl2 (2mL)中 的混合物中。将该混合物在室温搅拌过夜，然后用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液、5%HOAc水溶液洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，通过快速色谱法纯化残余物(乙醚/石油醚/ MeOH 60 35 5)，得到IOlmg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1786，测定值 328. 1790。实施例32- ((3S)-1-{[5- (2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体1 ；64. Omg, 0. 36mmol)和 TBTU(101mg,0. 315mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的溶液加入到 2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 盐酸盐(中间体 17 ；54. Img, 0. 379mmol)和三乙胺(0. 048mL，0. 341mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中 的混合物中。将该混合物在室温搅拌lhr。通过制备性HPLC纯化粗产物(Xterra C18，IOmM NH4HC03 (pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)，得到 23mg 标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1786，测定值 328. 1788。实施例42- (1- {[5- (3-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(3-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体2 ； 112mg,0. 551mmol)和 TBTU(194mg,0. 607mmol)在CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到2-哌啶-3-基丙-2-醇盐酸盐(中 间体 19 ； 136mg，0. 757mmol)和三乙胺(0. 196mL, 1. 41mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。 将该混合物在室温搅拌30min，用乙醚稀释，用饱和NaHCO3水溶液、5% HOAc水溶液洗涤，干 燥(MgS04)。蒸发溶剂，通过快速色谱法纯化残余物(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)， 得到174mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1786，测定值 328. 1785。实施例52- ((3S)-1-{[5- (4-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将DMF(3滴)加入到5_(4_甲基苯基)异噁唑_4_甲酸(中间体3 ;1. IOg, 5. 41mmol)在SOCl2 (8mL)中的溶液中。将该混合物温热至110°C 30min，然后真空浓缩。在-20 V将酰氯在CH2Cl2 (20mL)中的冷(-20 °C )溶液加入到2- [ (3S)-哌啶-3-基] 丙-2-醇盐酸盐(中间体17 ；0. 973g，5. 41mmol)和三乙胺(1. 49mL, 11. 8_ο1)在 CH2Cl2(IOmL)中的溶液中。将该反应混合物搅拌30min，然后用CH2Cl2稀释。用0. 5M HCl 水溶液(3xl5mL)洗涤该混合物，干燥(Na2SO4),蒸发溶剂，得到澄清糖浆状物/油状物。将 糖浆状物溶于乙醚，在室温蒸发溶剂。将固体部分在乙醚中研磨，导致形成750mg标题化合 物，为白色固体。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1786，测定值 328. 1797。实施例62- ((3R)-1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5- (2-氯苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体 4 ； 148mg, 0. 664mmol)和 TBTU (264mg, 0. 822mmol)在CH2Cl2 (IOmL)中的溶液加入到2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙_2_醇盐酸盐(中 间体 18 ； 169mg, 0. 940mmol)和 NEt3 (236 μ L, 172mg, 1. 70mmol)在 CH2Cl2 (5mL)中的混合 物中。将该混合物在室温搅拌30min。蒸发溶剂，通过快速色谱法纯化残余物(石油醚/ EtOAc (1 1,1-6% MeOH))，得到 179mg 标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1247。实施例72- ((3S)-1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(2-氯苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体 4 ； 149mg，0. 666mmol)和 TBTU(246mg， 0. 766mmol)在CH2Cl2 (5mL)中的混合物加入到2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中 间体 17 ； 147mg,0. 818mmol)和 NEt3 (190 μ L，1. 34mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的溶液中。将该混 合物在室温搅拌30min，用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸 发溶剂，通过快速色谱法纯化残余物(石油醚/EtOAc 1 1，梯度1-6% MeOH)，得到23. Img 标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1249。实施例82- ((3S)-1-{[5- (3-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(3-氯苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体 5 ；67mg，0. 30mmol)和 TBTU(1 OOmg, 0. 312mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液加入到2_[ (3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体 17 ；57mg，0. 32mmol)和 NEt3 (120 μ L，1. 34mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。将该混合物 在室温搅拌 30min。蒸发溶剂，通过制备性 HPLC(Xterra C18, IOmM NH4HCO3 (pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)纯化残余物，得到12mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1244。实施例92- ((3R)-1-{[5- (4-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(4-氯苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体6 ； 117mg，0. 524mmol)和 TBTU (195. 7mg，0. 609mmol)在 CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇 盐酸盐(中间体 I8 ;107mg，0. 595mmol)和三乙胺(ΙδΟ μ L，1. OSmmol)在 CH2Cl2(2mL)中 的混合物中。将该混合物在室温搅拌30min。用乙醚稀释该混合物，用饱和NaHCO3水溶 液、5% HOAc水溶液洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，通过快速色谱法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)纯化残余物，得到120mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1247。实施例102- ((3S)-1-{[5- (4-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(3-氯苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体 6 ；57mg，0. 30mmol)和 TBTU(80mg, 0. 249mmol)在CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体 17 ； 147mg，0. 818mmol)和 NEt3 (120 μ L，1. 34mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。将该混合 物在室温搅拌 30min。蒸发溶剂，通过制备性 HPLC (Xterra C18，IOmMNH4HCO3 (pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)纯化残余物，得到19mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1245。实施例112- (1- {[5- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_2_基)乙醇 将2-(2-羟基乙基)哌啶(203mg, 1. 57mmol)加入到5_(2_氯苯基)异噁唑-4-甲 酸(中间体 4 ； 120mg,0. 54mmol)和 TBTU(206mg，0. 642mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液中。 将该反应在室温搅拌30min。用乙醚稀释该混合物，用饱和NaHCO3水溶液、5% HOAc水溶 液洗涤，然后干燥(MgS04)。蒸发溶剂，通过快速色谱法纯化残余物(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)，得到5mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C17H19ClN2O3 334. 1084，测定值 334. 1081。实施例122- (1- {[5- (3-氯_2_甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(3_氯-2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体7 ；95. 5mg,0. 402mmol)和 TBTU(147mg,0. 458mmol)在CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到2-哌啶-3-基丙-2-醇盐酸盐(中 间体 19 ；84. Omg, 0. 467mmol)和三乙胺(0. 112mL，0. 80mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。 将该混合物在室温搅拌30min。用乙醚稀释该混合物，用饱和NaHCO3水溶液、5% HOAc水溶 液洗涤，然后干燥(MgS04)。蒸发溶剂，通过快速色谱法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5) 纯化残余物，得到63mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C19H23ClN2O3 362. 1397，测定值 362. 1392。实施例132-(1_{ [5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5- (3，4- 二甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体8 ；56. Omg, 0. 26mmol)和 TBTU(103mg,0. 321mmol)在CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到2-哌啶-3-基丙-2-醇(中间体 19 ；52. 2mg，0. 290mmol)和三乙胺(0. 072mL，0. 52mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。将 该混合物在室温搅拌lh。用乙醚稀释该混合物，用饱和NaHCO3水溶液、5 % HOAc水溶液洗 涤，干燥(MgSO4),然后浓缩。通过快速色谱法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)纯化残 余物，得到46mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值C20H26N2O3 342. 1943，测定值342. 1941。实施例14
23
2-((3 -1-{[5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇将5-(3，4- 二甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体8 ； 139mg，0. 642mmol)和 TBTU(245mg,0. 766mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 (中间体 18 ； 140mg，0. 779mmol)和三乙胺(0. 225mL, 1. 6mmol)在 CH2Cl2(2mL)中的混合物 中。将该混合物在室温搅拌lh，用乙醚稀释，用饱和NaHCO3水溶液、5 % HOAc水溶液洗涤， 干燥(MgSO4),浓缩。通过快速色谱法(乙醚/石油醚/Me0H70 25 5)纯化残余物，得 到202mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，测定值 342. 1946。实施例152-((3幻-1-{[5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5- (3，4- 二甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体8 ；68. Omg, 0. 31mmol)和 TBTU(101mg,0. 315mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的溶液加入到 2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 盐酸盐(中间体 17 ;54mg，0. 3(kimol)和三乙胺(120 μ L, 1. 34mmol)在 CH2Cl2(2mL)中的 混合物中。将该混合物在室温搅拌Ihr。通过制备性HPLC(Xterra C18, IOmM NH4HCO3(pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)纯化粗产物，得到 9mg 标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，测定值 342. 1949。实施例162-((3 -1-{[5-(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5- (2，4- 二甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体9 ； 104mg, 0. 478mmol)和 TBTU(166mg,0. 517mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 (中间体 18 ;92. 5mg，0. 515mmol)和三乙胺(133 μ L，97mg，0. 96mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的 混合物中。将该混合物在室温搅拌lh。蒸发溶剂，通过快速色谱法(乙醚/石油醚/MeOH 70 26 4)纯化残余物，得到105mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，测定值 342. 1945。
实施例172-((3幻-1-{[5-(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将DMF(3滴)加入到5_(2，4_ 二甲基苯基)异噁唑_4_甲酸(中间体9 ； 1. OOg, 4. 60mmol)在SOCl2 (8mL)中的溶液中。将该混合物温至110 °C 30min,然后真 空浓缩。在-70 V将酰氯在CH2Cl2 (20mL)中的冷(-20 °C )溶液加入到2- [ (3S)-哌 啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体17;0. 827g，4. 60mmol)和三乙胺(1. 3mL,9. 2mmol)在 CH2Cl2(IOmL)中的溶液中。在室温将该反应混合物搅拌30min，用CH2Cl2稀释。用0. 5M HCl 水溶液(3xl5mL)洗涤该混合物，然后干燥(Na2SO4)，蒸发溶剂，得到澄清糖浆状物/油状物。 将糖浆状物溶于乙醚，在室温蒸发溶剂。将固体部分在乙醚中研磨，导致形成1. 32g标题化 合物，为浅褐色固体。HRMS (ESI+)计算值 C20H26N2O3 342. 1943，测定值 342. 1951。实施例182- ((3R)-1-{[5- (2-氟苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(2-氟苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体10 ；81. 6mg，0. 394mmol)和 TBTU(132mg,0. 411mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐 酸盐(中间体 18 ；73. 4mg，0. 408mmol)和三乙胺(0. ImL, 0. 719mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混 合物中。将该混合物在室温搅拌30min。用乙醚稀释，用饱和NaHCO3水溶液、5% HOAc水溶 液洗涤，然后干燥(MgS04)。蒸发溶剂，通过快速色谱法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5) 纯化残余物，得到49mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21FN2O3 332. 1536，测定值 332. 1543。实施例19 2- ((3R)-1-{[5- (4-氟苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇
将5-(4-氟苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体11 ； 116. Omg, 0. 560mmol)和 TBTU(195mg,0. 607mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇盐酸盐(中间体 18 ；107. Omg, 0. 595mmol)和三乙胺(0. 083mL,0. 600mmol)在 CH2C12(2mL) 中的混合物中。将该混合物在室温搅拌lh，然后用乙醚稀释。用饱和NaHCOyK溶液、5% HOAc水溶液洗涤有机相，然后干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，通过快速色谱法(乙醚/石油醚/ MeOH 70 25 5)纯化残余物，得到174mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21FN2O3 332. 1536，测定值 332. 1527。实施例202- ((3S)-1-{[5- (4-氟苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(4-氟苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体11 ；52. Omg, 0. 301mmol)和 TBTU(101mg,0. 315mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的溶液加入到 2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 盐酸盐(中间体 17 ；54. Img, 0. 301mmol)和三乙胺(0. 048mL，0. 3mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中 的混合物中。将该混合物在室温搅拌Ihr。通过制备性HPLC (Xterra C18, IOmM NH4HCO3 (pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)纯化粗产物，得到24mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21FN2O3 332. 1536，测定值 332. 1534。实施例212-((3R)-l-{[5_(l-萘基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(1_ 萘基)异噁唑-4-甲酸(中间体 12 ；IOlmg, 0. 424mmol)和 TBTU(140mg, 0.436mmol在CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙_2_醇盐酸盐(中间 体 18 ；80. Img, 0. 446mmol)和三乙胺(118μ L，0. 85mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。将 该混合物在室温搅拌30min，然后用乙醚稀释。用饱和NaHCO3水溶液、5 % HOAc水溶液洗涤 有机相，干燥(MgS04)。蒸发溶剂，通过快速色谱法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)纯 化残余物，得到44mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C22H24N2O3 364. 1787，测定值 364. 1781。实施例222-((3S)-l-{[3_(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将溶于CH2Cl2 (4mL)的3_ (2-甲基苯基)异噁唑_4_甲酸(中间体14 ； 137mg, 0. 674mmol)和 TBTU(221mg, 0. 688mmol)加入到 2_[ (3S)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇盐酸盐 (中间体 17 ;121mg，0. 673mmol)和 NEt3 (189 μ L，1. 35mmol)在 CH2Cl2 (4mL)中的溶液中。 将该混合物在22°C搅拌90min，浓缩，通过快速色谱法纯化(石油醚/EtOAc/MeOH梯度 6 4 0 —48 48 4)，得到47mg标题化合物，为灰色固体。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1787，测定值 328. 1788。实施例232-((3R)-l-{[3_(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将溶于CH2Cl2(5mL)的3_(2_甲基苯基)异噁唑~4~甲酸(中间体14 ；92. Omg, 0. 452mmol)和 TBTU(145mg, 0. 452mmol)加入到 2_[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇盐酸盐 (中间体 18 ；97. 5mg, 0. 545mmol)和 NEt3 (126 μ L, 0. 935mmol)在 CH2Cl2 (4mL)中的溶液 中。将该混合物在22°C搅拌90min，浓缩，通过快速色谱法纯化(石油醚/EtOAc/MeOH梯度 6 4 0 —48 48 4)，得到81mg标题化合物，为白色泡沫。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1787，测定值 328. 1786。实施例242-((3R)-l-{[3_(2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇在微波反应器中将溶于SOCl2 (IOmL)的3_(2_氯苯基)异噁唑_4_甲酸(中间体 15 ；795mg,3. 56mmol)加热至110°C 20min。真空浓缩该混合物，溶于CH2Cl2 (5mL)，在室温加 入到 2-[(3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体 18 ；630mg,3. 51mmol)和NEt3(l. 24mL， 8. 90mmol)在CH2Cl2 (20mL)中的溶液中。将该反应混合物搅拌30min，用CH2Cl2 (20mL)稀 释。用5% HOAc水溶液、盐水洗涤有机相，干燥(MgS04)。蒸发溶剂，将粗产物在甲苯中研 磨，得到977mg标题化合物，为白色固体。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1240。实施例252- ((3S)-1-{[3- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 在微波反应器中将溶于SOCl2 (IOmL)的3_(2_氯苯基)异噁唑_4_甲酸(中间体 15 ；1. OOg, 4. 48mmol)加热至110°C 20min。真空浓缩该混合物，溶于CH2Cl2 (5mL)，在室温加 入到 2-[(3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体 17 ；807mg,4. 49mmol)和 NEt3 (1. 56mL， 11. 2mmol)在CH2Cl2 (20mL)中的溶液中。将该反应混合物搅拌30min，用CH2Cl2 (20mL)稀 释。用5% HOAc水溶液、盐水洗涤，然后干燥(MgS04)。蒸发溶剂，将粗产物在甲苯中研磨， 得到1.32g标题化合物，为白色固体。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1242。实施例261- (1- {[3- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)乙醇 在微波反应器中将溶于SOCl2 (3mL)的3_(2_氯苯基)异噁唑_4_甲酸(中间体15 ； 149mg，0. 666mmol)在120°C加热15min。真空浓缩该混合物，溶于CH2Cl2 (5mL)，在室温加入 到 I-(哌啶-3-基)乙-1-醇(中间体 20 ； 130mg, 0. 785mmol)和 NEt3 (0. 228mL, 1. 64mmol) 在CH2Cl2 (4mL)中的溶液中。将该反应混合物搅拌30min。用CH2Cl2 (20mL)稀释该混合物。 用IM HCl水溶液和盐水洗涤，然后干燥(MgS04)。通过快速色谱法纯化物(CH2Cl2/MeOH梯 度98 2 — 94 6)，得到99. Img澄清油状物的标题化合物，为4种非对映异构体的混合 物。HRMS (ESI+)计算值 C17H19ClN2O3 334. 1084，测定值 334. 1085。实施例272-((3 -1-{[3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 在微波反应器中将溶于SOCl2 (2mL)的3_ (2，4_ 二甲基苯基)异噁唑_4_甲酸(中 间体13 ； 135mg,0. 621mmol)加热至110°C 30min。真空浓缩该混合物，溶于CH2Cl2(5mL)， 在室温加入到2-[(3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体18 ;112mg，0. 623mmol)和 NEt3 (0. 173mL, 1. 24mmol)在CH2Cl2 (4mL)中的溶液中。将该反应混合物搅拌30min，然后用 乙醚稀释。用IM HCl水溶液、盐水洗涤有机相，然后干燥(MgS04)。使残余物从乙醚/石油醚中结晶，得到152mg标题化合物，为白色固体。HRMS (ESI+)计算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，测定值 342. 1947。实施例282-((3幻-1-{[3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 在微波反应器中将溶于SOCl2 (2mL)的3_ (2，4_ 二甲基苯基)异噁唑_4_甲酸(中 间体13 ； 115mg,0. 529mmol)在110°C加热20min。真空浓缩该混合物，溶于CH2Cl2 (5mL)，在 室温加入到2-[(3S)_哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体17 ； 105mg,0. 584mmol)和三 乙胺(0. 173mL, 1. 24mmol)在CH2Cl2 (4mL)中的溶液中。将该反应混合物搅拌30min，然后 用乙醚稀释。用IM HCl水溶液、盐水洗涤有机相，然后干燥(MgS04)。使残余物从乙醚/石 油醚中结晶，得到11 Img标题化合物，为浅褐色固体。HRMS (ESI+)计算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，测定值 342. 1949。生物学方法闪烁迫近分析法(1，2 (n)-3H)-可的松购自 Amersham Pharmacia Biotech。抗可的松单克隆小 鼠抗体克隆6D6.7获自Immimotech，且包被了单克隆抗小鼠抗体的闪烁亲近测定(SPA) 珠购自 Amersham Pharmacia Biotech。NADPH 四钠盐来自 Calbiochem，且葡糖 _6_ 磷酸 (G-6-P)由Sigma提供。人11 β-羟基类固醇脱氢酶1型酶(ΙΙβ-HSDl)在巴斯德毕赤酵 母(Pichia pastoris)中表达。18-β-甘草亭酸(GA)获自Sigma。将化合物的连续稀释 液溶于 DMSO(ImM)并且用包含 ImM EDTA 的 50mMTris_HCl，pH 7. 2 稀释。在 Wallac Quadra 上进行培养板增殖。用Packard，Top Count微量培养板液体闪烁计数器测定与珠结合的 [3H]-氢化可的松的量。11 β -HSDl酶测定在96孔微量滴定板(Packard Optiplate)中进行，总孔体积 为220 μ L并且包含30mM Tris-HCl，pH 7.2与ImM EDTA、底物混合物氚标记的可的松/ NADPH(175ηΜ/181 μ Μ)、G_6_P (InM)和连续稀释的抑制剂。通过加入作为巴斯德毕赤酵母细 胞勻化物或由巴斯德毕赤酵母制备的微粒体的人11 β -HSDl开始反应。在混合后，在室温 将培养板振摇30-45分钟。用IOyL ImM GA终止溶液终止反应。然后加入单克隆小鼠抗体 (IOyL 4μΜ)，然后加入IOOyL SPA珠(根据制造商的说明混悬)。通过不添加11 β-HSDl 设定适宜对照组，得到非特异性结合(NSB)值。用塑料薄膜覆盖培养板，在室温、在振荡器 上孵育30分钟，然后计数。用微量培养板液体闪烁计数器测定与珠结合的[3H]-氢化可的 松的量。通过使用活性碱计算抑制剂的Ki值。根据IC5tl计算Ki值，使用Cheng Prushoff 等式计算Km值(其中可逆抑制遵循Michaelis-Menten等式)=Ki = IC50 (1+[S]/Kffl) [Cheng, Y. C. ；Prushoff，W. H. Biochem. Pharmacol. 1973，22，3099-3108]。在测定中以实验方式测定 IC5tl，其中可的松更新成氢化可的松的减少依赖于每一物质的抑制潜能。实施例1-28的化合物对11 β -HSDl的Ki值典型地在约5ηΜ_约600ηΜ。
HTM-细胞试验MYOC基因产物-myocilin在许多眼组织包括小梁网(TM)和睫状体中表达(牵连 眼内压的调节的眼的结构)。MYOC基因突变涉及眼内压升高和一些形式的开角型青光眼。 该蛋白质被糖皮质激素诱导至较高程度并且启示它涉及眼房水流出阻力的调节(例如，参 见Nguyen Τ. D.等人(1998) J. Biol. Chem. 273，6341-6350，Tamm Ε. R. (2002) ProgRetin Eye Res 21,395-428)。此外，11 β -羟基类固醇脱氢酶1型(ΙΙβ-HSDl)是负责无活性糖皮质 激素可的松胞内转化成活性类固醇激素氢化可的松的酶。人小梁网(HTM)细胞初级培养物分离自由人眼库获得的外植块并且用于两种不 同类型的实验。就剂量响应实验而言，将细胞与连续稀释的测试化合物(在包含IOOnM可 的松的细胞培养基中10 μ Μ-565ρΜ) 一起孵育24小时。对照组仅是培养基(阴性对照)和 IOOnM可的松(阳性对照)。使用氢化可的松-EIA试剂盒测定收集的培养基中的氢化可的 松水平，并且根据得到的剂量响应曲线测定IC5tl值为3-30ηΜ。进行长期实验以检验MYOC和11 β -HSDl基因的表达是否可能与氢化可的松水平 相关。实验持续3周并且从与可的松的7天孵育期开始，然后在可的松的存在下与化合物 一起孵育7天。为了研究化合物的效果是否持续1至最多3天，从培养基中取出它并且仅 加入可的松。收集培养基用于氢化可的松分析并且制备细胞裂解液以便在第7、14、15和17 天时进行基因表达分析。所有步骤中的对照组仅是培养基(阴性对照)和IOOnM可的松 (阳性对照)。每个第3天进行培养基改变。用氢化可的松-EIA试剂盒测定收集的培养基 中的氢化可的松水平。在17-天处理后从细胞裂解液中提取RNA，并且通过相对定量和实时 TaqMan聚合酶链反应测定基因表达。作为对照组，使用18S RNA和β-肌动蛋。与对照组 校准RNA水平以避免因细胞密度导致的差异。与阳性对照相比，用抑制剂+可的松的7-天处理导致防止了 98%的氢化可的松 产生。有趣的是，在取出抑制剂后1和3天，氢化可的松产生仍然保持较低水平且停留在其 相应对照组的约20%和50%。在类似的方式中，MYOC和11 β -HSDl基因受到抑制剂影响。 在相应可的松处理7-14天后测定了 MYOC基因的2-至10-倍的向上调节。另一方面，仅 用可的松处理7天和用抑制剂+可的松处理的又7天期限的细胞停止了基因的向上调节， 并且保持在与可的松处理第一周后相同的表达水平。除去抑制剂后1天，MYOC表达恢复至 对照组的约40%，且在向上调节后3天，它达到可的松对照组的约70%。在相同条件下， 11 β -HSDl基因表达增加了 2-至5-倍，以及取出抑制剂逐步恢复了可的松实现的向上调 节。总之，本发明化合物对抑制氢化可的松产生的宽泛影响与对涉及眼内压升高的基 因产物表达的效果相关，并且证实它对药理学相关小梁网细胞具有长效作用。角膜透性筛选工具测试如本文所述选择的许多化合物在体外局部施用于猪眼后的它们的眼穿透性， 作为决定其作为眼内药物候选物的潜能的辅助。新鲜的眼来自在每天早晨实验期过程中处 死的动物。将眼转入包含+37°C BSS的50ml Falcon试管，以允许角膜内皮变成有代谢活 性。在局部施用测试物质前，将眼放入湿度室，以避免较长孵育过程中眼过度干燥。使猪眼暴露在化合物的磷酸盐缓冲液的溶液或混悬液。Cremophor RH40 (聚 氧乙烯醚氢化蓖麻油，BASF)通常用作制剂赋形剂。对每一制剂而言，使用三种孵育时间。对每一时间点而言，使用6只眼。在施用前，用BSS洗涤眼，然后施用50 μ 1磷酸盐缓冲液， 以湿润角膜表面。在孵育开始时施加1滴(20 μ 1)制剂。在孵育时间结束时，用30G套管 给角膜穿孔并且抽取房水(AH)，转入塑料管。将房水样品贮存在_18°C至分析为止。就测试化合物而言，在IOmin接触后，将AH浓度测定为在0. 001-6 μ M的范围。作 为筛选工具，然后使用AH2tlminAC5tl的化合物浓度比进行化合物分类。对测试化合物发现该 比值在30-400范围。结果，显示本发明所述的化合物在体外局部施用于猪眼后能够透过眼。
权利要求
式(I)的化合物，或其药学可接受的盐、溶剂合物、水合物、几何异构体、互变体、旋光异构体或N 氧化物，其中X Y表示N O或O N；R1独立地选自卤素、氰基、CF3、OCF3、C1 4 烷基、羟基 C1 4 烷基、C1 4 烷氧基 C1 4 烷基和C1 4 烷氧基；或两个取代基R1与所连接的碳原子一起形成5 或6 元芳族或非芳族环，其任选包含一个或多个选自O和N的杂原子，且该环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素、氰基、CF3、OCF3、C1 4 烷基、羟基 C1 4 烷基、C1 4 烷氧基 C1 4 烷基和C1 4 烷氧基；R2独立地选自C1 8 烷基、羟基 C1 8 烷基、C1 8 烷氧基 C1 8 烷基、C1 8 烷氧基、羟基 C1 8 烷氧基、C1 8 烷氧基 C1 8 烷氧基、C3 8 环烷基、羟基 C3 8 环烷基、C1 8 烷氧基 C3 8 环烷基、C3 8 环烷氧基、羟基 C3 8 环烷氧基和C1 8 烷氧基 C3 8 环烷氧基；a是0，1或2；且m和n各独立地是0、1或2；条件是该化合物不选自·1 [(5 苯基 4 异噁唑基)羰基] 哌啶；·5 苯基 4 (吡咯烷 1 基羰基)异噁唑；·5 (4 氟苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)异噁唑；·5 (4 氯苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)异噁唑；·5 (4 溴苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)异噁唑；·5 (4 甲基苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)异噁唑；·5 (4 甲氧基苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)异噁唑；·4 {[2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 (4 甲基苯基)异噁唑；·4 {[(2S) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 (4 甲基苯基)异噁唑；·4 {[(2R) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 (4 甲基苯基)异噁唑；·5 (2 氯苯基) 4 {[2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基}异噁唑；·5 (2 氯苯基) 4 {[(2S) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 异噁唑；·5 (2 氯苯基) 4 {[(2R) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 异噁唑；·4 {[(2S) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 [4 (三氟甲基)苯基]异噁唑；·4 {[(2R) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 [4 (三氟甲基)苯基]异噁唑；·5 (4 氯苯基) 4 {[2 (异丙基)吡咯烷 1 基]羰基}异噁唑；·2 (1 {[5 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 (1 {[5 (2 氯苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 [1 ({5 [4 (三氟甲基)苯基]异噁唑 4 基}羰基)哌啶 3 基]丙 2 醇；·2 ((3R) 1 {[3 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 ((3R) 1 {[5 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 ((3R) 1 {[3 (4 甲氧基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 ((3R) 1 {[3 (3 氯 4 甲氧基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·3 (1 {[5 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)戊 3 醇；·3 (1 {[3 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)戊 3 醇；·3，5 二甲基 1 {[5 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶；·1 {[5 (2 氯苯基)异噁唑 4 基]羰基} 3，5 二甲基哌啶；·3，5 二甲基 1 ({5 [4 (三氟甲基)苯基]异噁唑 4 基}羰基)哌啶；·5 乙基 2 甲基 1 {[5 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶；·1 {[5 (2 氯苯基)异噁唑 4 基]羰基} 5 乙基 2 甲基哌啶；和·5 乙基 2 甲基 1 ({5 [4 (三氟甲基)苯基]异噁唑 4 基}羰基)哌啶。FPA00001184106900011.tif
2.权利要求1的化合物，其中a是1。
3.权利要求1或2的化合物，其中R1是卤素或CV4-烷基，或其中两个取代基R1与所连 接的碳原子一起形成5-或6-元环。
4.权利要求1-3任一项的化合物，其中R1是F、Cl或甲基，或其中两个取代基R1与所 连接的碳原子一起形成6-元芳族环。
5.权利要求1-4任一项的化合物，其中R2是羟基-Cm-烷基或C"-烷氧基-CM-烷氧基。
6.权利要求1-5任一项的化合物，其中R2是1-羟基乙基、2-羟基乙基或1-羟基-1-甲 基乙基。
7.权利要求1的化合物，选自 2-(1-{[5-(2_甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-((3R)-l-{[5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2- ((3S)-1-{[5- (2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-(1-{[5-(3_甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (4-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3R)-1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (3-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3R)-1-{[5- (4-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (4-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-(1-{[5-(2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-2-基)乙醇； 2-(1-{[5-(3_氯-2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-(1-{ [5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-((3 -1-{[5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2-((3幻-1-{[5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2-((3 -1-{[5-(2，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2-((3幻-1-{[5-(2，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2- ((3R)-1-{[5- (2-氟苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3R)-1-{[5- (4-氟苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (4-氟苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3R)-1-{[5- (1-萘基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-((3S)-l-{[3-(2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2-((3R)-l-{[3-(2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2- ((3R)-1-{[3- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[3- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-((3 -1-{[3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 1-(1_{[3-(2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)乙醇；和 2-((3幻-1-{[3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇。
8.药物组合物，包含作为活性成分的权利要求1-7任一项的化合物和药学可接受的载 体、稀释剂或赋形剂。
9.权利要求1-7任一项的化合物，用于疗法。
10.权利要求1-7任一项的化合物，用于治疗或预防青光眼。
11.权利要求1-7任一项的化合物在制备治疗或预防青光眼的药物中的应用。
12.治疗或预防青光眼的方法，包括对有这种治疗需要的人受试者给予有效量的权利 要求1-7任一项的化合物。全文摘要
本发明涉及新颖的式(I)的异噁唑化合物，及其药学可接受的盐、溶剂合物、水合物、几何异构体、互变体、旋光异构体或N-氧化物，它们是11β-羟基类固醇脱氢酶1型(11β-HSD1)调节剂。本发明还涉及包含这些化合物的药物组合物和这些化合物在制备治疗青光眼的药物中的应用。
文档编号A61P27/00GK101910160SQ200980102362
公开日2010年12月8日 申请日期2009年1月16日 优先权日2008年1月17日
发明者J·泰吉布兰特, L·乔汉松, M·哈拉德森, S·比斯托姆 申请人:比奥维特罗姆股份公开公司
技术领域：
本发明涉及新颖的式(I)的异噁唑化合物，其为11 β-羟基类固醇脱氢酶1型 (11 β -HSD1)的调节剂并且可以用于治疗与11 β -HSDl活性相关的医学疾病。本发明还涉 及包含这些化合物的药物组合物、这些化合物在制备治疗青光眼的药物中的应用以及这些 化合物的制备方法。
背景技术：
青光眼是多相群疾病，其中原发性开角型青光眼(POAG)最为普遍，这种疾病是 导致14%总体失明的不可逆视力丧失的主要原因。其特征在于具有相应视野丧失的视 神经病变，这种视野丧失与一定范围的包括眼内压升高(IOP)的危险因素相关，它能够 治疗和控制。IOP通过因睫状体上皮产生房水(AH)与经过小梁网(TM)排出(Schlemm 管和色素层巩膜流出途径)之间的良好平衡而得到调节。该过程可以受到皮质类固醇 调节，因为用局部用皮质类固醇治疗的约三分之一的正常群体发生中度IOP升高，而实 际上具有POAG的全部患者在局部用皮质类固醇疗法后均发生IOP升高[Armaly，Arch. Ophthalmol. 1963，70，483-491 ；Armaly, Arch. Ophthalmol. 1963，70，492-499 ；Becker, Invest. Ophthalmol. 1965，4，198-205 ；Armaly, Arch. Ophthalmol. 1967，77，747-751]。 此外，患有库欣综合征的患者发生IOP升高[Sayegh等人，Ophthalmic Res. 1975,7, 390-394]。羟基类固醇脱氢酶(HSDs)调节类固醇激素受体的占有率和活化，所述酶将类固 醇激素转化成它们的无活性代谢物[有关近期综述参见Nobel等人，Eur. J. Biochem. 2001， 268,4113-4125]。存在大量类型的HSDs，其中11 β -羟基类固醇脱氢酶(11 β -HSDs)催化活 性糖皮质激素(例如皮质醇和皮质酮)及它们的惰性形式(例如可的松和11-脱氢皮质甾 酮)互变。将可的松活化成氢化可的松的同种型11 羟基类固醇脱氢酶1型(11 β-HSD1) 在肝、脂肪组织、脑、肺和其他糖皮质激素组织等中表达，并且是定向于可以通过减少糖皮 质激素作用改善的大量疾病例如糖尿病、肥胖和与年龄相关的认知功能障碍的疗法的潜在 靴标[Seckl 等人，Endocrinology 2001，142，1371-1376]。有意义的是，在健康志愿者试验非对照中，显示非选择性11 β -HSD1/11 β -HSD2 抑制剂甘珀酸(CBX)在口服给药时将眼内压(IOP)降低了 20% [Rauz等人，Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001，42，2037-2042]。类似地，在具有高眼压患者的安慰剂对照的研 究中，口服给药的CBX诱导10% IOP降低[Rauz等人，Q. J.Med. 2003，96，481-490]。组织表 达研究已经显示，在人睫状上皮细胞中存在ΙΙβ-HSDl，而不存在Ili3-HSD2。这种占优势 的11 β -HSDl在眼组织中的表达得到了健康受试者和患者AH中氢化可的松相对可的松的 水平过度的支持，而在尿中观察到了相反的结果，这反映出lli3_HSD2在肾中的活性。这些 结果共同暗示眼中ΙΙβ-HSDl的选择性抑制可以是降低已经升高的IOP的有效手段，且由 此治疗青光眼[US 6,548,053 ；另外参见Walker等人，P3-698海报，在Endocrine Society
5Meeting,1999 年 6 月 12-15 日，San Diego]。给眼局部施用是药理学干预眼病的优选途径，因为这导致活性化合物在期望作用 部位上的高浓度，而同时降低全身副作用的风险。水溶液通常被接受为用于青光眼药物的 优选制剂。从现有技术中已知几种取代的异噁唑化合物。WO 01/29015描述了对α la肾 上腺素能受体具有增强的选择性的异噁唑衍生物，用于治疗下泌尿道阻塞综合征。WO 2007/114124描述了取代的异噁唑衍生物作为治疗肥胖的11 β -HSDl抑制剂。然而，在先尚未显示取代的异噁唑化合物适合于局部施用于眼以治疗青光眼。
发明内容
令人意外地发现是有效和选择性11 β -HSDl抑制剂的式(I)的异噁唑化合物具有 使得它们特别适合于局部施用于眼治疗青光眼的理化特性。在第一个方面中，本发明涉及式(I)的化合物 或其药学可接受的盐、溶剂合物、水合物、几何异构体、互变体、旋光异构体或 N-氧化物，其中X-Y 表示 N-O 或 O-N ；R1独立地选自卤素、氰基、CF3> OCF3> C^4-烷基、羟基-(^4-烷基、C^4-烷氧 基-C 1-4 烷基和 烷氧基；或两个取代基R1与所连接的碳原子一起形成5-或6-元芳族或非芳族环，其任选 包含一个或多个选自0和N的杂原子，且该环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基 选自卤素、氰基、CF3、OCF3、C1^4-烷基、羟基-CV4-烷基、Cy-烷氧基-Ch-烷基和C^4-烷氧 基；R2独立地选自Cp8-烷基、羟基-Cu-烷基、CV8-烷氧基-CV8-烷基、C1^8-烷氧基、 羟基-Ch8-烷氧基、C1^8-烷氧基-CV8-烷氧基、c3_8-环烷基、羟基-c3_8-环烷基、C1^8-烷氧 基-c3_8-环烷基、c3_8-环烷氧基、羟基-c3_8-环烷氧基和Ch8-烷氧基-c3_8-环烷氧基；a 是 0，1 或 2;且m和η各独立地是0、1或2 ；条件是该化合物不选自· 1- [ (5-苯基-4-异噁唑基)羰基]_哌啶；· 5-苯基-4-(吡咯烷-1-基羰基)异噁唑；· 5-(4-氟苯基)-4_(吡咯烷-1-基羰基)异噁唑；· 5- (4-氯苯基)-4-(吡咯烷-1-基羰基)异噁唑；· 5- (4-溴苯基)-4-(吡咯烷-1-基羰基)异噁唑；
· 5- (4-甲基苯基)-4-(吡咯烷-1-基羰基)异噁唑；· 5- (4-甲氧基苯基)-4-(吡咯烷-1-基羰基)异噁唑；· 4- {[2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基} -5- (4-甲基苯基)异噁唑；· 4- {[ (2S) -2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基} _5_ (4_甲基苯基)异噁唑；· 4- {[ (2R) -2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基} _5_ (4_甲基苯基)异噁唑；· 5-(2-氯苯基)-4-{[2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基}异噁唑；· 5-(2-氯苯基)-4-{[(2幻-2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基}异噁唑；· 5-(2-氯苯基)-4-{[(21 )-2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基}异噁唑；· 4-{[(2S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-5-[4_(三氟甲基)苯基] 异噁唑；· 4-{[(2R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基} _5-[4_ (三氟甲基)苯基] 异噁唑；· 5- (4-氯苯基)-4- {[2-(异丙基)吡咯烷基]羰基}异噁唑；· 2- (1- {[5- (4-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- (1- {[5- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；·2-[1-({5-[4_(三氟甲基)苯基]异噁唑_4_基}羰基)哌啶_3_基]丙_2_醇；.2-((3R)-l-{[3-(4-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3R)-l-{[5-(4-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；·2-((3Κ)-1-{[3_(4-甲氧基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2-((3R)-l-{[3_(3-氯-4-甲氧基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 3- (1- {[5- (4-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)戊_3_醇；· 3- (1- {[3- (4-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)戊_3_醇；· 3，5_ 二甲基-l-{[5-(4-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶；· 1-{[5-(2_氯苯基)异噁唑-4-基]羰基} _3，5-二甲基哌啶；· 3，5-二甲基-1-( {5-[4-(三氟甲基)苯基]异噁唑_4_基}羰基)哌啶；· 5-乙基-2-甲基-1- {[5- (4-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶；· 1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基} -5-乙基_2_甲基哌啶；和· 5-乙基-2-甲基-1-({5-[4-(三氟甲基)苯基]异噁唑_4_基}羰基)哌啶。在本发明的一个优选的实施方案中，R1是卤素或CV4-烷基或两个取代基R1与所 连接的碳原子一起形成5-或6-元环。在一个最优选的实施方案中，R1是F、Cl或甲基或 两个取代基R1与所连接的碳原子一起形成6-元芳族环。在另一个优选的实施方案中，带有取代基R2的杂环是哌啶环。因此，a优选是1。在另一个优选的实施方案中，哌啶环被一个取代基R2取代。因此，η优选是1。在另一个优选的实施方案中，R2是羟基-CV8-烷基或Cp8-烷氧基-Cu-烷氧基。 在一个最优选的实施方案中，R2是1-羟基乙基、2-羟基乙基或1-羟基-1-甲基乙基。本发明特别优选的化合物是选自如下这样的化合物· 2- (1- {[5- (2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3R)-l-{[5-(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；
7
.2-((3S)-l-{[5-(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- (1- {[5- (3-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3S)-l-{[5-(4-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；
· 2- ((3S)-1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3S)-1-{[5- (3-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (4-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3S)-1-{[5- (4-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- (1- {[5- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_2_基)乙醇；·2-(1-{[5_(3-氯-2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2-(1_{ [5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2-((3R)-l-{[5_(3，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 2-((3S)-l-{[5_(3，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 2-((3R)-l-{[5_(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 2-((3S)-l-{[5_(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (2-氟苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (4-氟苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3S)-1-{[5- (4-氟苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (1-萘基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3S)-l-{[3-(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3R)-l-{[3-(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[3- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3S)-1-{[3- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2-((3R)-l-{[3_(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 1-(1_{[3-(2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)乙醇；和· 2-((3S)-l-{[3_(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇。本发明的另一个方面是用于疗法的式(I)的化合物。如上述定义的化合物是有效 和选择性的11 β-HSDl抑制剂。照此，它们用于治疗或预防青光眼。本发明由此包括用于 治疗或预防青光眼的式(I)的化合物。本发明在另一个方面中包括式(I)的化合物在制备治疗或预防青光眼的药物中 的应用。本发明在另一个方面中包括治疗或预防青光眼的方法，包括对有这种治疗需要的 人受试者给予有效量的式(I)的化合物。
本发明在另一个方面中提供了包含作为活性成分的式(I)的化合物与药学可接 受的稀释剂或载体的药物制剂。所述药物制剂用于治疗或预防青光眼。本文所述的方法包括这样的方法，其中将受试者鉴定为需要特定的所述治疗。鉴 定需要这种治疗的受试者可以是受试者或健康护理职业者的判断并且可以是主观(例如 意见)或客观的(例如可通过试验或诊断方法测定)。定义下列定义应适用于本说明书和附属权利要求上下文中。除非另做陈述或另有指示，否则术语"(^8-烷基”表示具有1-8个碳原子的直链或 支链烷基。所述C"-烷基的实例包括甲基、乙基、正_丙基、异_丙基、正_ 丁基、异_ 丁基、 仲-丁基、叔-丁基和直链和支链戊基、己基、庚基和辛基。就"(V8-烷基”部分范围而言， 关注其全部亚组，例如Ci_7-烷基、Ch6-烷基、CV5-烷基、CV4-烷基、Cp3-烷基、Ci_2-烷基、 C2-S-焼基、C2-7—焼基、C2-Q~焼基，C2-5—焼基、C2-4—焼基、C2-3—焼基、C3-S-焼基、C3-7—焼基等。除非另做陈述或另有指示，否则术语“羟基-Cm-烷基”表示具有其氢原子被OH替 代的直链或支链Cp8-烷基。所述羟基-CV8-烷基的实例包括羟基甲基、2-羟基乙基、2-羟 基丙基、2-羟基-2-甲基丙基和1-羟基-1-甲基乙基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“C"-烷氧基”表示通过氧连接分子其余部分 的直链或支链Cu-烷基。所述Cu-烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、异-丙 氧基、正-丁氧基、异-丁氧基、仲-丁氧基、叔-丁氧基和直链和支链戊氧基、己氧基、庚氧 基和辛氧基。就“Cu-烷氧基”的部分范围而言，关注其全部亚组例如CV7-烷氧基、Ch6-烷氧 基、C1-5_焼氧基、Cp4- -烧氧基、C"-烧氧基、C"-烧氧基、c2_8-烧氧基、c2_7-烧氧基、c2_6-烧 氧基、c2_5-烷氧基、 C2—4_焼氧基、C2—3_焼氧基、C3-S-焼氧基、C3—7_焼氧基等。除非另做陈述或另有指示，否则术语"(^8-烷氧基-Cu-烷基”表示具有其氢原子 被直链或支链Cu-烷氧基替代的直链或支链Cu-烷基。所述Cu-烷氧基-Ch8-烷基的实 例包括甲氧基甲基、1-甲氧基乙基、2-甲氧基乙基和2-乙氧基乙基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“羟基-Cm-烷氧基”表示具有其氢原子被OH 替代的直链或支链CV8-烷基。所述羟基-Cm-烷氧基的实例包括羟基甲氧基、2-羟基乙氧 基和2-羟基丙氧基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“Cm-烷氧基-CM-烷氧基”表示具有其氢原 子被直链或支链Cu-烷氧基替代的直链或支链Cu-烷基。所述Cu-烷氧基-Ch8-烷氧基 的实例包括甲氧基甲氧基、2-甲氧基乙氧基和3-甲氧基丙氧基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“C3_8_环烷基”表示具有3-8个碳原子的单环 饱和烃环系。C3_8_环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。就 “c3_8-环烷基”的部分范围而言，关注其全部亚组例如c3_7-环烷基、c3_6-环烷基、c3_5-环烷 ■、C3_4_ C5_g-C5_7-烧基、C6_8_环烧基禾口 C6_7_环烧基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“羟基-C3_8_环烷基”表示具有其氢原子被OH 替代的C3_8_环烷基。所述羟基-C3_8_环烷基的实例包括3-羟基环戊基和4-羟基环己基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“Cm-烷氧基-C3_8_环烷基”表示具有其氢原 子被直链或支链Cu-烷氧基替代的c3_8-环烷基。所述Ch8-烷氧基-c3_8-环烷基的实例包
9括3-甲氧基环戊基和4-甲氧基环己基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“C3_8_环烷氧基”表示通过氧与分子其余部分 连接的C3_8-环烷基。所述c3_8-环烷氧基的实例包括环丙氧基、环戊氧基和环己氧基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“羟基-c3_8-环烷氧基”表示具有其氢原子被 OH替代的C3_8_环烷氧基。所述羟基-C3_8_环烷氧基的实例包括3-羟基环戊氧基和4-羟 基环己氧基。除非另做陈述或另有指示，否则术语“Cm-烷氧基-C3_8-环烷氧基”表示具有其氢 原子被直链或支链Cu-烷氧基替代的c3_8-环烷氧基。所述Cu-烷氧基-c3_8-环烷氧基的 实例包括3-甲氧基环戊氧基和4-甲氧基环己氧基。当本文所述的两个取代基R1与所连接的碳原子一起形成5-或6-元芳族或非芳 族环时，所述环可以任选包含一个或多个选自0和N的杂原子。这种二价取代基R1的实例 包括-CH = CH-CH = CH-、-O-CH2-O-(亚甲二氧基)和-O-CH2-CH2-O-(亚乙二氧基)。“卤素”意指氟、氯、溴或碘。“羟基”意指-OH基团。“氰基”意指-CN基团。“CF3”意指三氟甲基。“ OCF3 ”意指三氟甲氧基。“任选”或“任选地”意指随后所述的结果或情况不一定发生，且该描述包括其中该 结果或情况发生的例子和其不发生的例子。“药学可接受的”意指用于制备的药物组合物一般是安全的、无毒性的、且既不是 生物学也不是其它方面不期望的特性，并且用于人体药物应用。本文所用的“治疗”包括预防所述病症或疾病，或改善或消除一旦已确立的病症。“有效量”意指赋予治疗剂对所治疗受试者的治疗效果(例如治疗，控制，改善，预 防，延缓疾病、障碍或病症或其症状发生或减轻其风险)的用量。治疗效果可以是客观的 (即可通过一些试验或标记测定)或主观的(即受试者给出的效果的表示或感觉)。“前体药物”意指在生理学条件下或通过溶剂解转化成本发明生物活性化合物的 化合物。前体药物在对有此需要的受试者给药时可以是无活性的，但在体内被转化成本发 明的活性化合物。前体药物典型地在体内被转化成本发明的母体化合物，例如通过水解。 前体药物化合物通常提供在哺乳动物生物体中溶解性、组织相容性或延缓释放的优点(参 见 Silverman, R. B. , The Organic Chemistry of Drug Designand Drug Action,第 2 版， Elsevier Academic Press (2004), pp. 498-549)。可以通过修饰存在于本发明化合物上的 官能团例如羟基制备本发明化合物的前体药物，按照这种方式，用常规操作或在体内裂解 修饰物，得到本发明的母体化合物。前体药物的实例包括但不限于羟基官能团的乙酸酯、甲 酸酯和琥珀酸酯衍生物。在本说明书和附属权利要求上下文中，指定化学式或名称还应包括其所有的盐、 水合物、溶剂合物、N-氧化物和前体药物形式。此外，指定化学式或名称应包括其所有互变 体和立体异构体形式。立体异构体包括对映体和非对映异构体。对映体可以以其纯形式或 两种对映体的外消旋(相等)或不相等混合物存在。非对映异构体可以以其纯的形式或作 为非对映异构体混合物存在。非对映异构体还包括几何异构体，它们可以以其纯的顺式或
10反式形式或作为它们的混合物存在。式(i)的化合物可以照此使用或(如果适合)作为其药理学可接受的盐(酸或碱 加成盐)使用。下文举出的药理学可接受的加成盐意指包括化合物能够形成的治疗活性无 毒性酸和碱加成盐形式。可以通过用适宜酸处理碱形式将具有碱性特性的化合物可以被转 化成其药学可接受的酸加成盐。典型酸包括无机酸例如氯化氢、溴化氢、碘化氢、硫酸、磷 酸；和有机酸例如甲酸、乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、乙醇酸、马来酸、丙二酸、草酸、 苯磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、三氟乙酸、富马酸、琥珀酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、水杨酸、对 氨基水杨酸、扑酸、苯甲酸、抗坏血酸等。典型碱加成盐形式是钠、钾、钙盐和与药学可接受 胺类形成的盐，所述胺类例如氨、烷基胺类、苄星青霉素和氨基酸例如精氨酸和赖氨酸。本 文所用的术语加成盐还包括化合物及其盐能够形成例如水合物、醇化物等的溶剂合物。组合物就临床应用而言，将本发明的化合物配制成用于眼给药的药物制剂。将要理解的 是可以将本发明的化合物与生理学可接受的载体、赋形剂或稀释剂一起给予。包含溶于、分散于或混悬于其中的活性成分的药物组合物的制备是本领域众 所周知的。典型地，将这种组合物制备成作为水性或非水性液体溶液或混悬液滴注 (oculoguttae)的无菌组合物，然而，还可以制备适合于在使用前溶解、分散或混悬在液体 中的固体剂型。还可以乳化制剂。活性成分可以与药学可接受并且与活性成分相容赋形剂混合，且用量适用于本文 所述的治疗方法。如果需要，组合物可以包含辅助物质例如湿润剂或乳化剂、ph缓冲剂等， 它们增强活性成分的有效性。药学可接受的载体是本领域众所周知的。典型液体载体是不舍除活性成分和水外 的物质的无菌水溶液，或包含生理ph值的缓冲液例如磷酸钠、生理盐水或它们两者，例如 磷酸缓冲的盐水。其他水性载体可以包含一种以上缓冲盐以及盐，例如氯化钠和氯化钾、葡 萄糖、丙二醇、聚乙二醇和其他溶质。液体组合物还可以包含除了水以及与水相排斥的液相。这种额外液相的实例是甘 油、植物油、有机酯类和水_油乳剂。优选药物组合物包含一种或多种用作增溶剂、乳化剂和/或渗透促进剂的试剂。 为本领域众所周知的这种试剂包括例如在Cremophor (basf)名称下销售的试剂。实例 是Cremophor rh 40(聚氧乙烯醚氢化蓖麻油；cas No. 61788-85-0)。本发明化合物的制备可以通过常规方法或与之类似的方法制备上述式(i)的化合物。本发明实施例的 中间体和化合物的制备特别阐明在下列反应路线1和2中。本文反应路线中结构上的变量 的定义与本文所述式中相应位置的定义相符。以适宜苯乙酮(ii)为原料，在几个合成步骤中容易地得到5_(苯基)异噁 唑-4-甲酸甲酯(v)。在水解该酯后，通过用tbtu处理活化甲酸(vi)或转化成相应酰氯， 使其与适宜环胺(vii)反应，导致形成期望的式(i)的化合物。该过程一般表示在反应路 线1中。反应路线1
11 其中R1-R^Eun和m如式⑴所定义。反应路线2显示了式(I)的异构体异噁唑化合物的制备。以适当取代的苯甲醛 (VIII)为原料，在三步中得到3-(苯基)异噁唑-4-甲酸乙酯(XI)。然后通过水解酯(XI) 并且使得到的酸(XII)与适宜的环胺(VII)在作为活化剂的TBTU的存在下缩合或通过将 酸转化成相应酰氯容易地形成式(I)的化合物。反应路线2 其中R1-R^Eun和m如式⑴所定义。用于制备式(I)化合物的必要原料是商购的或可以通过本领域公知的方法制备。可以实施下述实验部分中的方法，得到游离碱或酸加成盐形式的本发明化合物。 可以通过下列步骤得到药学可接受的酸加成盐根据由碱化合物制备酸加成盐的常规方法 将游离碱溶于适宜有机溶剂，用酸处理该溶液。形成加成盐的酸的实例如上所述。式(I)的化合物可以具有一个或多个手性碳原子且由此可以以旋光异构体形式 得到它们，例如作为纯的对映体或对映体混合物(外消旋物)或作为包含非对映异构体的 混合物。得到纯对映体的旋光异构体的混合物的分离是本领域众所周知的并且例如可以通 过用旋光(手性)酸对盐分级结晶或通过手性柱色谱分离实现。用于本文所述合成途径的化学物质可以包括，例如溶剂、试剂、催化剂和保护基和 脱保护基试剂。保护基的实例是叔-丁氧羰基(Boc)、苄基和三苯甲基(三苯基甲基)。上述 方法还可以包括如下步骤在本文具体描述的步骤之前或之后，添加或除去适宜的保护基， 以最终能够合成所述化合物。此外，可以以交替顺序或次序进行各种合成步骤，得到期望的 化合物。用于合成适用的化合物的合成化学转化和保护基方法(保护和脱保护)是本领域 公知的并且包括，例如描述在如下文献中这样的方法R. Larock，Comprehensive Organic Transformations,VCH Publishers (1989) ；T. W. Greene禾口P. G. M. Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed. , John Wiley 禾口 Sons (1999) ；L. Fieser 禾口 M. Fieser, Fieser and Fieser' s Reagents for Organic Synthesis, John Wiley 禾口 Sons(1994)； 禾口 L. Paquette，ed.，Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley 禾口 Sons (1995)及其后续版本。使用如下缩写
DMF-DMA二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛
EtOAc乙酸乙酯
ESI电喷雾电离
h小时
HPLC高效液相色谱法
HRMS高分辨率质谱法
LCMS液相色谱法_质谱法
M摩尔
MeCN乙腈
MeOH甲醇
min分钟
MS质谱法
NCSN-氯琥珀酰亚胺
NEt3三乙胺
TBTU2-(1Η-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3_四甲基脲四
氟硼酸盐
THF四氢呋喃
本文变量的任意定义中列出的化学基团的描述包括该变量作为列出基团的任
单一基团或组合的定义。本文实施方案的描述包括作为任意单一实施方案或与任意其他实 施方案或其部分组合的该实施方案。现在通过下列非限制性实施例进一步示例本发明。下文具体实施例认作为仅仅是 示例性的，但不以任何方式限定本说明书公开内容的其余部分。尽管没有进一步阐述，但是 认为本领域技术人员基于本文描述可以以其最完整的程度利用本发明。将所用参考出版物 和公开出版物完整地引入本文参考。实施例和中间体化合物实验方法除非另有指定，否则全部试剂均为商品级并且无需进一步纯化接受使用。除非另 有指定，否则在所有其他情况中使用试剂级溶剂。使用Waters/Micromass Platform ZQ 系统进行制备型HPLC/MS，并且使用Gilson系统、根据实施例中具体描述的实验进行制备 型HPLC/UV。使用安装了电喷雾接口的Agilent 1100/1200系列液相色谱仪/质量选择检 测器(MSD)(单一四极)(1946A/1946C/1956C/6110)进行分析型 HPLC/MS。使用 Merck 硅 胶60(230-400目)进行制备性快速色谱。使用Personal Chemistry Smith Creator或 Personal Chemistry SmithOptimizer、应用配有铝盖和隔片的 0. 5_2mL 或 2_5mL Smith Process小瓶进行微波反应。使用连接Agilent 1100HPLC系统的AgilentMSD-TOF得到高 分辨质谱(HRMS)。在分析过程中，根据两种质量检验校准并且如果需要自动校正。以正电 喷雾模式获取光谱。获取的质量范围是m/z 100-1100。使用质量峰的分布检测。使用ACD Name 6.0命名化合物。中间体15-(2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸
步骤1 3- (2-甲基苯基)-3-氧代丙酸甲酯 将2-甲基苯乙酮(20g，149mmol)溶于甲苯(20mL)，在室温缓慢加入搅拌的 NaH(7. 16g,298mmol)和碳酸二甲酯(14. 8g，164mmol)在甲苯(约150mL)的淤浆中。通过 LCMS监测反应。当原料苯乙酮耗尽时，在约IOmin内加入MeOH(约IOmL)，同时搅拌，然后 加入约50mL碎冰。用CH2Cl2稀释该混合物，用HCl水溶液(9-12M)酸化。分离有机相，用 CH2Cl2萃取水相。干燥合并的有机相(Na2SO4),蒸发溶剂，得到27. 2g标题化合物(>95% 纯)。MS m/z 193[m+1]。步骤2: (2Z)-3-( 二甲氨基)-2-(2-甲基苯甲酰基)丙烯酸甲酯将3-(2-甲基苯基)-3-氧代丙酸甲酯(27. lg, 141mmol)溶于甲苯(IOOmL)。加入 DMF-DMA (17. 6g，148. Ommol)，将该反应混合物在70°C搅拌。当原料耗尽时(通过LCMS监 测)，将该反应混合物冷却至室温，蒸发溶剂，得到34. Ig标题化合物(> 95%纯)，将其用 于下一步。MS m/z 248[m+1] 步骤3 5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸甲酯 将(2Z)-3_( 二甲氨基)-2-(2_甲基苯甲酰基)丙烯酸甲酯(34. 0g，138mmol)和 羟基胺盐酸盐(10. lg,145mmol)溶于Me0H(150mL)，在室温搅拌得到的溶液。通过HPLC监 测反应。18h后，蒸发90%的溶剂，将残余物溶于CH2Cl2，用水洗涤，干燥(Na2SO4)15蒸发溶 剂，得至IJ 28. 5g( > 95%纯)标题化合物。MS m/z 218[m+1]。步骤4 5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸 将5-(2_甲基苯基)异噁唑-4-甲酸甲酯(8. OOg, 36. 8mmol)溶于HOAc (40mL)。 加入HCl (浓)，同时在室温搅拌，直到观察到混浊(约40mL)。在70°C搅拌该反应混合物， 通过HPLC监测。18h后，将该反应体系冷却至室温，用水(IOOmL)稀释，用CH2Cl2(2x50mL) 萃取。用水(50mL)洗涤合并的有机相。用K2CO3中和有机相，用K2COwK溶液(3xl00mL)萃 取。用012(12(约50mL)洗涤合并的碱水相，用HCl水溶液(浓)酸化，用CH2Cl2 (3xl00mL)萃取。干燥合并的有机相(Na2SO4),蒸发溶剂，得到6.51g浅褐色固体(>98%纯)。MS m/ z204[m+l]。中间体 2-12以适当取代的苯乙酮为原料，按照如中间体1所述方法制备中间体2-12。
中间体133-(2，4-二甲基苯基)异噁唑-4-甲酸步骤1 :2，4_ 二甲基苯甲醛肟
^OH H将 2，4_ 二甲基苯甲醛(10.0g;74. 5mmol)、羟基胺盐酸盐(7. 73g ;lllmmol)和吡啶(IOmL)在Me0H(75mL)中的溶液在室温搅拌过夜。蒸发溶剂，将粗混合物溶于 CH2Cl2 (150mL)，用水(4x25mL)洗涤，干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，得到10. Ig透明油状物，在 其在室温固化，用于下一步。MS m/z 150 [m+1]。步骤2 :2，4-二甲基-N-羟基苯羧亚氨酰氯(carboximidoylchloride) 在室温在90min内向2，4_ 二甲基苯甲醛肟(6. 12g，41. Immo 1)在DMF (IOOmL)中 的搅拌溶液中分小部分加入N-氯琥珀酰亚胺(6.30g，47.2mmol)在DMF中的溶液。将该反 应混合物搅拌过夜，然后用乙醚稀释，用冰水洗涤，干燥(MgS04)，蒸发溶剂，得到6. 92g标 题化合物，为黄色油状物。MS m/z 184[m+l]。步骤3 :3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_甲酸乙酯 向乙基-3-( 二甲氨基)丙烯酸酯(1.56g，10.9mmOl)在乙醚(30mL)中的冰冷溶 液中加入三甲胺(1.52ml，10.9mmOl)，然后滴加(在Ih内)溶于乙醚(15mL)的2，4_ 二甲 基-N-羟基苯羧亚氨酰氯(2. 012g, 10. 96mmol)。白色沉淀形成，再加入乙醚(50mL)。除去 冰浴，将该反应混合物在22°C搅拌过夜。通过过滤除去固体，用5% HOAc水溶液(3x)洗涤 有机相，干燥(MgSO4)，蒸发溶剂，得到2. 54g标题化合物。MSm/z246 [m+1]。步骤4 :3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_甲酸在微波反应器中将3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑-4-甲酸乙酯(890mg，3.63mmol) 在HOAc (IOmL)和12M HCl水溶液(5mL)中的溶液在110°C加热70min。将该反应混合物浓 缩至约一半体积，用甲苯稀释。除去水相，用IM HCl水溶液萃取有机相。用甲苯萃取合并 的水相，合并有机相，浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(CH2Cl2/MeOH 9 1)，得到723mg 标题化合物，为棕色油状物。MS m/z 224[m+l]。中间体 14-16以适当取代的苯甲醛为原料，按照如中间体13的方法所述制备中间体14-16。
中间体172- [ (3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐 在室温将(S)-哌啶-3-甲酸乙酯(25. 0g, 159mmol)在CH2Cl2(25mL)中的溶液滴 加到搅拌的二碳酸二叔丁酯(36. 5g，167mmol)在CH2Cl2(150mL)中的溶液中。将该反应体 系搅拌过夜。用饱和NaHCO3水溶液洗涤粗混合物，然后与10% NH3水溶液(约30mL) —起 搅拌90min。分离有机相，干燥(Na2SO4),蒸发溶剂，得到39. 7g 1_叔丁基3-乙基(3S)-哌 啶-1，3-二甲酸酯，为透明油状物，在静置时固化。将1-叔丁基3-乙基(3S)-哌啶-1，3-二甲酸酯(16. 0g，62. 2mmol)在无水 THF(IOOmL)中的溶液在Ih内滴加到搅拌的MeMgBr的THF/甲苯溶液中(IOOmL, 1. 4M， HOmmol)。通过用冰冷却将该反应混合物保持在低于25°C。将该反应混合物搅拌过夜，通 过滴加水(约5mL)淬灭，然后加入HCl水溶液(6M)，直到用pH_试纸显示呈酸性。分离有 机相，蒸发溶剂。将残余物溶于CH2Cl2，用水(约50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，蒸发溶剂，得到 14. 7g淡黄色油状物。将粗产物溶于EtOAc/HCl (g) (IOOmL ；由鼓泡HCl (g)进入EtOAc制 备)，在室温搅拌过夜。蒸发溶剂。将粗产物溶于CH2Cl2 (IOOmL)，搅拌5min。蒸发溶剂(重 复一次)，将粗产物真空温热至50°C 3h。将粗产物与乙醚一起研磨，导致形成白色晶体，其 被过滤，干燥至得到6. 41g标题化合物。MSm/zl44[m+l]。中间体18 2- [ (3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐
如中间体17方法所述由(R)-哌啶-3-甲酸乙酯(25. 0g, 159mmol)和二碳酸二叔 丁酯(36. 5g，167mmol)制备标题化合物，得到6. 88g产物，为白色固体。MSm/z 144[m+l]。中间体192-[哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐 如中间体17方法所述由-哌啶-3-甲酸乙酯(6. 837g，47. 75mmol)和二碳酸二叔 丁酯(10. 42g，47. 75mmol)制备标题化合物，得到4. 85g产物，为白色固体。MSm/zl44[m+1]。中间体201-(哌啶-3-基)乙-1-醇 在微波反应器中将1_(吡啶-3-基)乙醇(249mg，2.03mmol)、甲酸铵(557mg， 8. 83mmol)和 Pd/C(10%,65. 5mg)在 EtOH(15mL)中的混合物加热至 110°C 20min。再加入 一定量的甲酸铵(412mg，6. 53mmol)，将该反应混合物加热至110°C 20min。过滤该反应混合 物，蒸发溶剂，得到165mg标题化合物。MS m/z 130 [m+1]。实施例12-(l-{[5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体 1 ； 103mg，0. 51mmol)和 TBTU(195mg， 0. 607mmol)在CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到2-哌啶-3-基丙-2-醇盐酸盐(中间体19 ； 116mg,0. 645mmol)和三乙胺(0. 142mL，1. Olmmol)在 CH2Cl2(2mL)中的混合物中。将该 混合物在室温搅拌30min。用乙醚稀释该混合物，用饱和NaHCO3水溶液、5 % HOAc水溶液 洗涤，然后干燥(MgS04)。蒸发溶剂，通过快速色谱法纯化残余物(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)，得到145mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1786，测定值 328. 1784.实施例22-((3R)-l-{[5_(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体1 ； 102mg，0. 507mmol)和 TBTU(196mg,0. 611mmol)在 CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 盐酸盐(中间体 18 ；84. Img, 0. 471mmol)和三乙胺(0. 142mL, 1. Olmmol)在 CH2Cl2 (2mL)中 的混合物中。将该混合物在室温搅拌过夜，然后用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液、5%HOAc水溶液洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，通过快速色谱法纯化残余物(乙醚/石油醚/ MeOH 60 35 5)，得到IOlmg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1786，测定值 328. 1790。实施例32- ((3S)-1-{[5- (2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体1 ；64. Omg, 0. 36mmol)和 TBTU(101mg,0. 315mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的溶液加入到 2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 盐酸盐(中间体 17 ；54. Img, 0. 379mmol)和三乙胺(0. 048mL，0. 341mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中 的混合物中。将该混合物在室温搅拌lhr。通过制备性HPLC纯化粗产物(Xterra C18，IOmM NH4HC03 (pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)，得到 23mg 标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1786，测定值 328. 1788。实施例42- (1- {[5- (3-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(3-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体2 ； 112mg,0. 551mmol)和 TBTU(194mg,0. 607mmol)在CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到2-哌啶-3-基丙-2-醇盐酸盐(中 间体 19 ； 136mg，0. 757mmol)和三乙胺(0. 196mL, 1. 41mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。 将该混合物在室温搅拌30min，用乙醚稀释，用饱和NaHCO3水溶液、5% HOAc水溶液洗涤，干 燥(MgS04)。蒸发溶剂，通过快速色谱法纯化残余物(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)， 得到174mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1786，测定值 328. 1785。实施例52- ((3S)-1-{[5- (4-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将DMF(3滴)加入到5_(4_甲基苯基)异噁唑_4_甲酸(中间体3 ;1. IOg, 5. 41mmol)在SOCl2 (8mL)中的溶液中。将该混合物温热至110°C 30min，然后真空浓缩。在-20 V将酰氯在CH2Cl2 (20mL)中的冷(-20 °C )溶液加入到2- [ (3S)-哌啶-3-基] 丙-2-醇盐酸盐(中间体17 ；0. 973g，5. 41mmol)和三乙胺(1. 49mL, 11. 8_ο1)在 CH2Cl2(IOmL)中的溶液中。将该反应混合物搅拌30min，然后用CH2Cl2稀释。用0. 5M HCl 水溶液(3xl5mL)洗涤该混合物，干燥(Na2SO4),蒸发溶剂，得到澄清糖浆状物/油状物。将 糖浆状物溶于乙醚，在室温蒸发溶剂。将固体部分在乙醚中研磨，导致形成750mg标题化合 物，为白色固体。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1786，测定值 328. 1797。实施例62- ((3R)-1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5- (2-氯苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体 4 ； 148mg, 0. 664mmol)和 TBTU (264mg, 0. 822mmol)在CH2Cl2 (IOmL)中的溶液加入到2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙_2_醇盐酸盐(中 间体 18 ； 169mg, 0. 940mmol)和 NEt3 (236 μ L, 172mg, 1. 70mmol)在 CH2Cl2 (5mL)中的混合 物中。将该混合物在室温搅拌30min。蒸发溶剂，通过快速色谱法纯化残余物(石油醚/ EtOAc (1 1,1-6% MeOH))，得到 179mg 标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1247。实施例72- ((3S)-1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(2-氯苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体 4 ； 149mg，0. 666mmol)和 TBTU(246mg， 0. 766mmol)在CH2Cl2 (5mL)中的混合物加入到2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中 间体 17 ； 147mg,0. 818mmol)和 NEt3 (190 μ L，1. 34mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的溶液中。将该混 合物在室温搅拌30min，用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸 发溶剂，通过快速色谱法纯化残余物(石油醚/EtOAc 1 1，梯度1-6% MeOH)，得到23. Img 标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1249。实施例82- ((3S)-1-{[5- (3-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(3-氯苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体 5 ；67mg，0. 30mmol)和 TBTU(1 OOmg, 0. 312mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液加入到2_[ (3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体 17 ；57mg，0. 32mmol)和 NEt3 (120 μ L，1. 34mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。将该混合物 在室温搅拌 30min。蒸发溶剂，通过制备性 HPLC(Xterra C18, IOmM NH4HCO3 (pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)纯化残余物，得到12mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1244。实施例92- ((3R)-1-{[5- (4-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(4-氯苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体6 ； 117mg，0. 524mmol)和 TBTU (195. 7mg，0. 609mmol)在 CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇 盐酸盐(中间体 I8 ;107mg，0. 595mmol)和三乙胺(ΙδΟ μ L，1. OSmmol)在 CH2Cl2(2mL)中 的混合物中。将该混合物在室温搅拌30min。用乙醚稀释该混合物，用饱和NaHCO3水溶 液、5% HOAc水溶液洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，通过快速色谱法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)纯化残余物，得到120mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1247。实施例102- ((3S)-1-{[5- (4-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(3-氯苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体 6 ；57mg，0. 30mmol)和 TBTU(80mg, 0. 249mmol)在CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体 17 ； 147mg，0. 818mmol)和 NEt3 (120 μ L，1. 34mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。将该混合 物在室温搅拌 30min。蒸发溶剂，通过制备性 HPLC (Xterra C18，IOmMNH4HCO3 (pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)纯化残余物，得到19mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1245。实施例112- (1- {[5- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_2_基)乙醇 将2-(2-羟基乙基)哌啶(203mg, 1. 57mmol)加入到5_(2_氯苯基)异噁唑-4-甲 酸(中间体 4 ； 120mg,0. 54mmol)和 TBTU(206mg，0. 642mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液中。 将该反应在室温搅拌30min。用乙醚稀释该混合物，用饱和NaHCO3水溶液、5% HOAc水溶 液洗涤，然后干燥(MgS04)。蒸发溶剂，通过快速色谱法纯化残余物(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)，得到5mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C17H19ClN2O3 334. 1084，测定值 334. 1081。实施例122- (1- {[5- (3-氯_2_甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(3_氯-2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体7 ；95. 5mg,0. 402mmol)和 TBTU(147mg,0. 458mmol)在CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到2-哌啶-3-基丙-2-醇盐酸盐(中 间体 19 ；84. Omg, 0. 467mmol)和三乙胺(0. 112mL，0. 80mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。 将该混合物在室温搅拌30min。用乙醚稀释该混合物，用饱和NaHCO3水溶液、5% HOAc水溶 液洗涤，然后干燥(MgS04)。蒸发溶剂，通过快速色谱法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5) 纯化残余物，得到63mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C19H23ClN2O3 362. 1397，测定值 362. 1392。实施例132-(1_{ [5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5- (3，4- 二甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体8 ；56. Omg, 0. 26mmol)和 TBTU(103mg,0. 321mmol)在CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到2-哌啶-3-基丙-2-醇(中间体 19 ；52. 2mg，0. 290mmol)和三乙胺(0. 072mL，0. 52mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。将 该混合物在室温搅拌lh。用乙醚稀释该混合物，用饱和NaHCO3水溶液、5 % HOAc水溶液洗 涤，干燥(MgSO4),然后浓缩。通过快速色谱法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)纯化残 余物，得到46mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值C20H26N2O3 342. 1943，测定值342. 1941。实施例14
23
2-((3 -1-{[5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇将5-(3，4- 二甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体8 ； 139mg，0. 642mmol)和 TBTU(245mg,0. 766mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 (中间体 18 ； 140mg，0. 779mmol)和三乙胺(0. 225mL, 1. 6mmol)在 CH2Cl2(2mL)中的混合物 中。将该混合物在室温搅拌lh，用乙醚稀释，用饱和NaHCO3水溶液、5 % HOAc水溶液洗涤， 干燥(MgSO4),浓缩。通过快速色谱法(乙醚/石油醚/Me0H70 25 5)纯化残余物，得 到202mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，测定值 342. 1946。实施例152-((3幻-1-{[5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5- (3，4- 二甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体8 ；68. Omg, 0. 31mmol)和 TBTU(101mg,0. 315mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的溶液加入到 2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 盐酸盐(中间体 17 ;54mg，0. 3(kimol)和三乙胺(120 μ L, 1. 34mmol)在 CH2Cl2(2mL)中的 混合物中。将该混合物在室温搅拌Ihr。通过制备性HPLC(Xterra C18, IOmM NH4HCO3(pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)纯化粗产物，得到 9mg 标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，测定值 342. 1949。实施例162-((3 -1-{[5-(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5- (2，4- 二甲基苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体9 ； 104mg, 0. 478mmol)和 TBTU(166mg,0. 517mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 (中间体 18 ;92. 5mg，0. 515mmol)和三乙胺(133 μ L，97mg，0. 96mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的 混合物中。将该混合物在室温搅拌lh。蒸发溶剂，通过快速色谱法(乙醚/石油醚/MeOH 70 26 4)纯化残余物，得到105mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，测定值 342. 1945。
实施例172-((3幻-1-{[5-(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将DMF(3滴)加入到5_(2，4_ 二甲基苯基)异噁唑_4_甲酸(中间体9 ； 1. OOg, 4. 60mmol)在SOCl2 (8mL)中的溶液中。将该混合物温至110 °C 30min,然后真 空浓缩。在-70 V将酰氯在CH2Cl2 (20mL)中的冷(-20 °C )溶液加入到2- [ (3S)-哌 啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体17;0. 827g，4. 60mmol)和三乙胺(1. 3mL,9. 2mmol)在 CH2Cl2(IOmL)中的溶液中。在室温将该反应混合物搅拌30min，用CH2Cl2稀释。用0. 5M HCl 水溶液(3xl5mL)洗涤该混合物，然后干燥(Na2SO4)，蒸发溶剂，得到澄清糖浆状物/油状物。 将糖浆状物溶于乙醚，在室温蒸发溶剂。将固体部分在乙醚中研磨，导致形成1. 32g标题化 合物，为浅褐色固体。HRMS (ESI+)计算值 C20H26N2O3 342. 1943，测定值 342. 1951。实施例182- ((3R)-1-{[5- (2-氟苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(2-氟苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体10 ；81. 6mg，0. 394mmol)和 TBTU(132mg,0. 411mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐 酸盐(中间体 18 ；73. 4mg，0. 408mmol)和三乙胺(0. ImL, 0. 719mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混 合物中。将该混合物在室温搅拌30min。用乙醚稀释，用饱和NaHCO3水溶液、5% HOAc水溶 液洗涤，然后干燥(MgS04)。蒸发溶剂，通过快速色谱法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5) 纯化残余物，得到49mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21FN2O3 332. 1536，测定值 332. 1543。实施例19 2- ((3R)-1-{[5- (4-氟苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇
将5-(4-氟苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体11 ； 116. Omg, 0. 560mmol)和 TBTU(195mg,0. 607mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇盐酸盐(中间体 18 ；107. Omg, 0. 595mmol)和三乙胺(0. 083mL,0. 600mmol)在 CH2C12(2mL) 中的混合物中。将该混合物在室温搅拌lh，然后用乙醚稀释。用饱和NaHCOyK溶液、5% HOAc水溶液洗涤有机相，然后干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，通过快速色谱法(乙醚/石油醚/ MeOH 70 25 5)纯化残余物，得到174mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21FN2O3 332. 1536，测定值 332. 1527。实施例202- ((3S)-1-{[5- (4-氟苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(4-氟苯基)异噁唑-4-甲酸(中间体11 ；52. Omg, 0. 301mmol)和 TBTU(101mg,0. 315mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的溶液加入到 2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 盐酸盐(中间体 17 ；54. Img, 0. 301mmol)和三乙胺(0. 048mL，0. 3mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中 的混合物中。将该混合物在室温搅拌Ihr。通过制备性HPLC (Xterra C18, IOmM NH4HCO3 (pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)纯化粗产物，得到24mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C18H21FN2O3 332. 1536，测定值 332. 1534。实施例212-((3R)-l-{[5_(l-萘基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将5-(1_ 萘基)异噁唑-4-甲酸(中间体 12 ；IOlmg, 0. 424mmol)和 TBTU(140mg, 0.436mmol在CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙_2_醇盐酸盐(中间 体 18 ；80. Img, 0. 446mmol)和三乙胺(118μ L，0. 85mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。将 该混合物在室温搅拌30min，然后用乙醚稀释。用饱和NaHCO3水溶液、5 % HOAc水溶液洗涤 有机相，干燥(MgS04)。蒸发溶剂，通过快速色谱法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)纯 化残余物，得到44mg标题化合物。HRMS (ESI+)计算值 C22H24N2O3 364. 1787，测定值 364. 1781。实施例222-((3S)-l-{[3_(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将溶于CH2Cl2 (4mL)的3_ (2-甲基苯基)异噁唑_4_甲酸(中间体14 ； 137mg, 0. 674mmol)和 TBTU(221mg, 0. 688mmol)加入到 2_[ (3S)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇盐酸盐 (中间体 17 ;121mg，0. 673mmol)和 NEt3 (189 μ L，1. 35mmol)在 CH2Cl2 (4mL)中的溶液中。 将该混合物在22°C搅拌90min，浓缩，通过快速色谱法纯化(石油醚/EtOAc/MeOH梯度 6 4 0 —48 48 4)，得到47mg标题化合物，为灰色固体。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1787，测定值 328. 1788。实施例232-((3R)-l-{[3_(2-甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 将溶于CH2Cl2(5mL)的3_(2_甲基苯基)异噁唑~4~甲酸(中间体14 ；92. Omg, 0. 452mmol)和 TBTU(145mg, 0. 452mmol)加入到 2_[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇盐酸盐 (中间体 18 ；97. 5mg, 0. 545mmol)和 NEt3 (126 μ L, 0. 935mmol)在 CH2Cl2 (4mL)中的溶液 中。将该混合物在22°C搅拌90min，浓缩，通过快速色谱法纯化(石油醚/EtOAc/MeOH梯度 6 4 0 —48 48 4)，得到81mg标题化合物，为白色泡沫。HRMS (ESI+)计算值 C19H24N2O3 328. 1787，测定值 328. 1786。实施例242-((3R)-l-{[3_(2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇在微波反应器中将溶于SOCl2 (IOmL)的3_(2_氯苯基)异噁唑_4_甲酸(中间体 15 ；795mg,3. 56mmol)加热至110°C 20min。真空浓缩该混合物，溶于CH2Cl2 (5mL)，在室温加 入到 2-[(3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体 18 ；630mg,3. 51mmol)和NEt3(l. 24mL， 8. 90mmol)在CH2Cl2 (20mL)中的溶液中。将该反应混合物搅拌30min，用CH2Cl2 (20mL)稀 释。用5% HOAc水溶液、盐水洗涤有机相，干燥(MgS04)。蒸发溶剂，将粗产物在甲苯中研 磨，得到977mg标题化合物，为白色固体。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1240。实施例252- ((3S)-1-{[3- (2-氯苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 在微波反应器中将溶于SOCl2 (IOmL)的3_(2_氯苯基)异噁唑_4_甲酸(中间体 15 ；1. OOg, 4. 48mmol)加热至110°C 20min。真空浓缩该混合物，溶于CH2Cl2 (5mL)，在室温加 入到 2-[(3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体 17 ；807mg,4. 49mmol)和 NEt3 (1. 56mL， 11. 2mmol)在CH2Cl2 (20mL)中的溶液中。将该反应混合物搅拌30min，用CH2Cl2 (20mL)稀 释。用5% HOAc水溶液、盐水洗涤，然后干燥(MgS04)。蒸发溶剂，将粗产物在甲苯中研磨， 得到1.32g标题化合物，为白色固体。HRMS (ESI+)计算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，测定值 348. 1242。实施例261- (1- {[3- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)乙醇 在微波反应器中将溶于SOCl2 (3mL)的3_(2_氯苯基)异噁唑_4_甲酸(中间体15 ； 149mg，0. 666mmol)在120°C加热15min。真空浓缩该混合物，溶于CH2Cl2 (5mL)，在室温加入 到 I-(哌啶-3-基)乙-1-醇(中间体 20 ； 130mg, 0. 785mmol)和 NEt3 (0. 228mL, 1. 64mmol) 在CH2Cl2 (4mL)中的溶液中。将该反应混合物搅拌30min。用CH2Cl2 (20mL)稀释该混合物。 用IM HCl水溶液和盐水洗涤，然后干燥(MgS04)。通过快速色谱法纯化物(CH2Cl2/MeOH梯 度98 2 — 94 6)，得到99. Img澄清油状物的标题化合物，为4种非对映异构体的混合 物。HRMS (ESI+)计算值 C17H19ClN2O3 334. 1084，测定值 334. 1085。实施例272-((3 -1-{[3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 在微波反应器中将溶于SOCl2 (2mL)的3_ (2，4_ 二甲基苯基)异噁唑_4_甲酸(中 间体13 ； 135mg,0. 621mmol)加热至110°C 30min。真空浓缩该混合物，溶于CH2Cl2(5mL)， 在室温加入到2-[(3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体18 ;112mg，0. 623mmol)和 NEt3 (0. 173mL, 1. 24mmol)在CH2Cl2 (4mL)中的溶液中。将该反应混合物搅拌30min，然后用 乙醚稀释。用IM HCl水溶液、盐水洗涤有机相，然后干燥(MgS04)。使残余物从乙醚/石油醚中结晶，得到152mg标题化合物，为白色固体。HRMS (ESI+)计算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，测定值 342. 1947。实施例282-((3幻-1-{[3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 在微波反应器中将溶于SOCl2 (2mL)的3_ (2，4_ 二甲基苯基)异噁唑_4_甲酸(中 间体13 ； 115mg,0. 529mmol)在110°C加热20min。真空浓缩该混合物，溶于CH2Cl2 (5mL)，在 室温加入到2-[(3S)_哌啶-3-基]丙-2-醇盐酸盐(中间体17 ； 105mg,0. 584mmol)和三 乙胺(0. 173mL, 1. 24mmol)在CH2Cl2 (4mL)中的溶液中。将该反应混合物搅拌30min，然后 用乙醚稀释。用IM HCl水溶液、盐水洗涤有机相，然后干燥(MgS04)。使残余物从乙醚/石 油醚中结晶，得到11 Img标题化合物，为浅褐色固体。HRMS (ESI+)计算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，测定值 342. 1949。生物学方法闪烁迫近分析法(1，2 (n)-3H)-可的松购自 Amersham Pharmacia Biotech。抗可的松单克隆小 鼠抗体克隆6D6.7获自Immimotech，且包被了单克隆抗小鼠抗体的闪烁亲近测定(SPA) 珠购自 Amersham Pharmacia Biotech。NADPH 四钠盐来自 Calbiochem，且葡糖 _6_ 磷酸 (G-6-P)由Sigma提供。人11 β-羟基类固醇脱氢酶1型酶(ΙΙβ-HSDl)在巴斯德毕赤酵 母(Pichia pastoris)中表达。18-β-甘草亭酸(GA)获自Sigma。将化合物的连续稀释 液溶于 DMSO(ImM)并且用包含 ImM EDTA 的 50mMTris_HCl，pH 7. 2 稀释。在 Wallac Quadra 上进行培养板增殖。用Packard，Top Count微量培养板液体闪烁计数器测定与珠结合的 [3H]-氢化可的松的量。11 β -HSDl酶测定在96孔微量滴定板(Packard Optiplate)中进行，总孔体积 为220 μ L并且包含30mM Tris-HCl，pH 7.2与ImM EDTA、底物混合物氚标记的可的松/ NADPH(175ηΜ/181 μ Μ)、G_6_P (InM)和连续稀释的抑制剂。通过加入作为巴斯德毕赤酵母细 胞勻化物或由巴斯德毕赤酵母制备的微粒体的人11 β -HSDl开始反应。在混合后，在室温 将培养板振摇30-45分钟。用IOyL ImM GA终止溶液终止反应。然后加入单克隆小鼠抗体 (IOyL 4μΜ)，然后加入IOOyL SPA珠(根据制造商的说明混悬)。通过不添加11 β-HSDl 设定适宜对照组，得到非特异性结合(NSB)值。用塑料薄膜覆盖培养板，在室温、在振荡器 上孵育30分钟，然后计数。用微量培养板液体闪烁计数器测定与珠结合的[3H]-氢化可的 松的量。通过使用活性碱计算抑制剂的Ki值。根据IC5tl计算Ki值，使用Cheng Prushoff 等式计算Km值(其中可逆抑制遵循Michaelis-Menten等式)=Ki = IC50 (1+[S]/Kffl) [Cheng, Y. C. ；Prushoff，W. H. Biochem. Pharmacol. 1973，22，3099-3108]。在测定中以实验方式测定 IC5tl，其中可的松更新成氢化可的松的减少依赖于每一物质的抑制潜能。实施例1-28的化合物对11 β -HSDl的Ki值典型地在约5ηΜ_约600ηΜ。
HTM-细胞试验MYOC基因产物-myocilin在许多眼组织包括小梁网(TM)和睫状体中表达(牵连 眼内压的调节的眼的结构)。MYOC基因突变涉及眼内压升高和一些形式的开角型青光眼。 该蛋白质被糖皮质激素诱导至较高程度并且启示它涉及眼房水流出阻力的调节(例如，参 见Nguyen Τ. D.等人(1998) J. Biol. Chem. 273，6341-6350，Tamm Ε. R. (2002) ProgRetin Eye Res 21,395-428)。此外，11 β -羟基类固醇脱氢酶1型(ΙΙβ-HSDl)是负责无活性糖皮质 激素可的松胞内转化成活性类固醇激素氢化可的松的酶。人小梁网(HTM)细胞初级培养物分离自由人眼库获得的外植块并且用于两种不 同类型的实验。就剂量响应实验而言，将细胞与连续稀释的测试化合物(在包含IOOnM可 的松的细胞培养基中10 μ Μ-565ρΜ) 一起孵育24小时。对照组仅是培养基(阴性对照)和 IOOnM可的松(阳性对照)。使用氢化可的松-EIA试剂盒测定收集的培养基中的氢化可的 松水平，并且根据得到的剂量响应曲线测定IC5tl值为3-30ηΜ。进行长期实验以检验MYOC和11 β -HSDl基因的表达是否可能与氢化可的松水平 相关。实验持续3周并且从与可的松的7天孵育期开始，然后在可的松的存在下与化合物 一起孵育7天。为了研究化合物的效果是否持续1至最多3天，从培养基中取出它并且仅 加入可的松。收集培养基用于氢化可的松分析并且制备细胞裂解液以便在第7、14、15和17 天时进行基因表达分析。所有步骤中的对照组仅是培养基(阴性对照)和IOOnM可的松 (阳性对照)。每个第3天进行培养基改变。用氢化可的松-EIA试剂盒测定收集的培养基 中的氢化可的松水平。在17-天处理后从细胞裂解液中提取RNA，并且通过相对定量和实时 TaqMan聚合酶链反应测定基因表达。作为对照组，使用18S RNA和β-肌动蛋。与对照组 校准RNA水平以避免因细胞密度导致的差异。与阳性对照相比，用抑制剂+可的松的7-天处理导致防止了 98%的氢化可的松 产生。有趣的是，在取出抑制剂后1和3天，氢化可的松产生仍然保持较低水平且停留在其 相应对照组的约20%和50%。在类似的方式中，MYOC和11 β -HSDl基因受到抑制剂影响。 在相应可的松处理7-14天后测定了 MYOC基因的2-至10-倍的向上调节。另一方面，仅 用可的松处理7天和用抑制剂+可的松处理的又7天期限的细胞停止了基因的向上调节， 并且保持在与可的松处理第一周后相同的表达水平。除去抑制剂后1天，MYOC表达恢复至 对照组的约40%，且在向上调节后3天，它达到可的松对照组的约70%。在相同条件下， 11 β -HSDl基因表达增加了 2-至5-倍，以及取出抑制剂逐步恢复了可的松实现的向上调 节。总之，本发明化合物对抑制氢化可的松产生的宽泛影响与对涉及眼内压升高的基 因产物表达的效果相关，并且证实它对药理学相关小梁网细胞具有长效作用。角膜透性筛选工具测试如本文所述选择的许多化合物在体外局部施用于猪眼后的它们的眼穿透性， 作为决定其作为眼内药物候选物的潜能的辅助。新鲜的眼来自在每天早晨实验期过程中处 死的动物。将眼转入包含+37°C BSS的50ml Falcon试管，以允许角膜内皮变成有代谢活 性。在局部施用测试物质前，将眼放入湿度室，以避免较长孵育过程中眼过度干燥。使猪眼暴露在化合物的磷酸盐缓冲液的溶液或混悬液。Cremophor RH40 (聚 氧乙烯醚氢化蓖麻油，BASF)通常用作制剂赋形剂。对每一制剂而言，使用三种孵育时间。对每一时间点而言，使用6只眼。在施用前，用BSS洗涤眼，然后施用50 μ 1磷酸盐缓冲液， 以湿润角膜表面。在孵育开始时施加1滴(20 μ 1)制剂。在孵育时间结束时，用30G套管 给角膜穿孔并且抽取房水(AH)，转入塑料管。将房水样品贮存在_18°C至分析为止。就测试化合物而言，在IOmin接触后，将AH浓度测定为在0. 001-6 μ M的范围。作 为筛选工具，然后使用AH2tlminAC5tl的化合物浓度比进行化合物分类。对测试化合物发现该 比值在30-400范围。结果，显示本发明所述的化合物在体外局部施用于猪眼后能够透过眼。
权利要求
式(I)的化合物，或其药学可接受的盐、溶剂合物、水合物、几何异构体、互变体、旋光异构体或N 氧化物，其中X Y表示N O或O N；R1独立地选自卤素、氰基、CF3、OCF3、C1 4 烷基、羟基 C1 4 烷基、C1 4 烷氧基 C1 4 烷基和C1 4 烷氧基；或两个取代基R1与所连接的碳原子一起形成5 或6 元芳族或非芳族环，其任选包含一个或多个选自O和N的杂原子，且该环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素、氰基、CF3、OCF3、C1 4 烷基、羟基 C1 4 烷基、C1 4 烷氧基 C1 4 烷基和C1 4 烷氧基；R2独立地选自C1 8 烷基、羟基 C1 8 烷基、C1 8 烷氧基 C1 8 烷基、C1 8 烷氧基、羟基 C1 8 烷氧基、C1 8 烷氧基 C1 8 烷氧基、C3 8 环烷基、羟基 C3 8 环烷基、C1 8 烷氧基 C3 8 环烷基、C3 8 环烷氧基、羟基 C3 8 环烷氧基和C1 8 烷氧基 C3 8 环烷氧基；a是0，1或2；且m和n各独立地是0、1或2；条件是该化合物不选自·1 [(5 苯基 4 异噁唑基)羰基] 哌啶；·5 苯基 4 (吡咯烷 1 基羰基)异噁唑；·5 (4 氟苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)异噁唑；·5 (4 氯苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)异噁唑；·5 (4 溴苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)异噁唑；·5 (4 甲基苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)异噁唑；·5 (4 甲氧基苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)异噁唑；·4 {[2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 (4 甲基苯基)异噁唑；·4 {[(2S) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 (4 甲基苯基)异噁唑；·4 {[(2R) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 (4 甲基苯基)异噁唑；·5 (2 氯苯基) 4 {[2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基}异噁唑；·5 (2 氯苯基) 4 {[(2S) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 异噁唑；·5 (2 氯苯基) 4 {[(2R) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 异噁唑；·4 {[(2S) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 [4 (三氟甲基)苯基]异噁唑；·4 {[(2R) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 [4 (三氟甲基)苯基]异噁唑；·5 (4 氯苯基) 4 {[2 (异丙基)吡咯烷 1 基]羰基}异噁唑；·2 (1 {[5 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 (1 {[5 (2 氯苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 [1 ({5 [4 (三氟甲基)苯基]异噁唑 4 基}羰基)哌啶 3 基]丙 2 醇；·2 ((3R) 1 {[3 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 ((3R) 1 {[5 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 ((3R) 1 {[3 (4 甲氧基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 ((3R) 1 {[3 (3 氯 4 甲氧基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·3 (1 {[5 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)戊 3 醇；·3 (1 {[3 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)戊 3 醇；·3，5 二甲基 1 {[5 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶；·1 {[5 (2 氯苯基)异噁唑 4 基]羰基} 3，5 二甲基哌啶；·3，5 二甲基 1 ({5 [4 (三氟甲基)苯基]异噁唑 4 基}羰基)哌啶；·5 乙基 2 甲基 1 {[5 (4 甲基苯基)异噁唑 4 基]羰基}哌啶；·1 {[5 (2 氯苯基)异噁唑 4 基]羰基} 5 乙基 2 甲基哌啶；和·5 乙基 2 甲基 1 ({5 [4 (三氟甲基)苯基]异噁唑 4 基}羰基)哌啶。FPA00001184106900011.tif
2.权利要求1的化合物，其中a是1。
3.权利要求1或2的化合物，其中R1是卤素或CV4-烷基，或其中两个取代基R1与所连 接的碳原子一起形成5-或6-元环。
4.权利要求1-3任一项的化合物，其中R1是F、Cl或甲基，或其中两个取代基R1与所 连接的碳原子一起形成6-元芳族环。
5.权利要求1-4任一项的化合物，其中R2是羟基-Cm-烷基或C"-烷氧基-CM-烷氧基。
6.权利要求1-5任一项的化合物，其中R2是1-羟基乙基、2-羟基乙基或1-羟基-1-甲 基乙基。
7.权利要求1的化合物，选自 2-(1-{[5-(2_甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-((3R)-l-{[5-(2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2- ((3S)-1-{[5- (2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-(1-{[5-(3_甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (4-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3R)-1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (3-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3R)-1-{[5- (4-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (4-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-(1-{[5-(2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-2-基)乙醇； 2-(1-{[5-(3_氯-2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-(1-{ [5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-((3 -1-{[5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2-((3幻-1-{[5-(3，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2-((3 -1-{[5-(2，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2-((3幻-1-{[5-(2，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2- ((3R)-1-{[5- (2-氟苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3R)-1-{[5- (4-氟苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (4-氟苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3R)-1-{[5- (1-萘基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-((3S)-l-{[3-(2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2-((3R)-l-{[3-(2-甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2- ((3R)-1-{[3- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[3- (2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-((3 -1-{[3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 1-(1_{[3-(2-氯苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)乙醇；和 2-((3幻-1-{[3-(2，4-二甲基苯基)异噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇。
8.药物组合物，包含作为活性成分的权利要求1-7任一项的化合物和药学可接受的载 体、稀释剂或赋形剂。
9.权利要求1-7任一项的化合物，用于疗法。
10.权利要求1-7任一项的化合物，用于治疗或预防青光眼。
11.权利要求1-7任一项的化合物在制备治疗或预防青光眼的药物中的应用。
12.治疗或预防青光眼的方法，包括对有这种治疗需要的人受试者给予有效量的权利 要求1-7任一项的化合物。全文摘要
本发明涉及新颖的式(I)的异噁唑化合物，及其药学可接受的盐、溶剂合物、水合物、几何异构体、互变体、旋光异构体或N-氧化物，它们是11β-羟基类固醇脱氢酶1型(11β-HSD1)调节剂。本发明还涉及包含这些化合物的药物组合物和这些化合物在制备治疗青光眼的药物中的应用。
文档编号A61P27/00GK101910160SQ200980102362
公开日2010年12月8日 申请日期2009年1月16日 优先权日2008年1月17日
发明者J·泰吉布兰特, L·乔汉松, M·哈拉德森, S·比斯托姆 申请人:比奥维特罗姆股份公开公司
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