包含光学活性托伐普坦的可注射储库制剂及制造该制剂的方法
包含光学活性托伐普坦的可注射储库制剂及制造该制剂的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种可注射储库制剂（depot formulation)以及用于制造该制剂的方 法，所述制剂包含含有光学活性托伐普坦（tolvaptan)的颗粒，并且其适合作为肌内或皮 下施用的储库注射剂。
【背景技术】
[0002] 专利文献1公开了由化学式（I)表示的托伐普坦，其用作具有促排水活性的加压 素拮抗剂（即，7-氯-5-羟基-1- [2-甲基-4- (2-甲基苯甲酰氨基）苯甲酰基]-2, 3, 4, 5-四 氣_1H-本并氣杂卓）。
[0004] 如化学式（I)中所示，托伐普坦含有羟基键合的碳（5-位碳）作为不对称碳。因 此，基于所述不对称碳，托伐普坦具有一对光学异构体（对映体）。在专利文献1中公开的 托伐普坦为外消旋化合物，即，等量的光学异构体（对映体）R-(+) -7-氯-5-羟基-1-[2-甲 基-4- (2-甲基苯甲酰氨基）苯甲酰基]-2, 3, 4, 5-四氢-IH-苯并氮杂卓（以下，可以称为R 型）和S- (-) -7-氯-5-羟基-1- [2-甲基-4- (2-甲基苯甲酰氨基）苯甲酰基]-2, 3, 4, 5-四 氢-IH-苯并氮杂卓（以下，可以称为S型）的混合物；并且具有[a ]2°D=0°的旋光度。 所述外消旋托伐普坦作为在低钠血症或心脏衰竭中抗液体潴留的治疗剂出售。
[0005] 用于制造托伐普坦的光学异构体（R型和S型）的方法在非专利文献1至3中公 开。
[0006] 专利文献2报道了通过喷雾干燥含有托伐普坦和羟丙基纤维素的溶液而获得的 粉末状非晶态固体制剂组合物具有来自肠胃道的托伐普坦的改善的溶解性和改善的可吸 收性。
[0007] 现在，多囊肾病为一种遗传疾病，其中，多个囊肿在肾脏中发展导致慢性肾病 (CKD)。随着所述疾病发展，肾脏发展成肥大，导致需要透析或移植的终末期肾病（ESRD)。加 压素被认为在患有多囊肾病的患者的肾脏中促进抑制肾脏功能的囊肿的生长。托伐普坦， 一种加压素拮抗剂，作为对多囊肾病的有用的治疗剂正引起注意。
[0008] 引用文献列表
[0009] 专利文献
[0010] PTL 1:JP4-154765A
[0011] PTL 2:JP4210355B
[0012] 非专利文献
[0013] NPL I :Heterocycles, 54 (1), 2001, pp. 131-138
[0014] NPL 2:Heterocycles, 56,2002,pp. 123-128
[0015] NPL 3!Tetrahedron:Asymmetry 21, (2010)2390-2393
【发明内容】
[0016] 技术问题
[0017] 如上所述，加压素拮抗剂，托伐普坦，作为对多囊肾病有用的治疗剂正引起注意。 因为当口服施用时，托伐普坦相对迅速地消失，必须每日口服施用高剂量的托伐普坦两次 以稳定地抑制加压素的作用。进一步地，口服施用可引起由于托伐普坦的高血药浓度导致 的过度利尿作用；由于从血液中迅速消失导致的加压素拮抗作用的减少；等。所述高血药 浓度可导致尿频，尤其是夜尿。因此，存在进一步改善患者的生活质量（QOL)的空间。进一 步地，因为患者必须终生服用药物以治疗多囊肾病，从患者的QOL和依从性的角度出发，需 要减少托伐普坦施用的频率。
[0018] 因此，需要一种能够长时期保持托伐普坦的治疗有效血药浓度的储库制剂，以便 改善患有多囊肾病的患者的QOL和依从性，并且提供可靠的治疗效果。尤其是，例如，一种 通过每两周或更久（优选每一至三个月）的肌内或皮下施用能够保持加压素拮抗作用的 储库注射剂可为一种非常有用的制剂来改善患者的QOL和依从性，并且提供可靠的治疗效 果。
[0019] 本发明的目的是提供一种托伐普坦的可注射储库制剂以及制造该制剂的方法，所 述制剂用于多囊肾病的预防或治疗，并且可长时期保持托伐普坦的治疗有效血药浓度。
[0020] 技术方案
[0021] 为达到上述目的，本发明的发明人对肌内或皮下施用的托伐普坦的可注射储库制 剂（特别是，储库注射剂）进行深入研宄。
[0022] 结果表明，当制备并施用外消旋托伐普坦晶体的水悬浮液时，仅可保持低水平的 血清浓度。施用后四周观察施用部位发现大部分的外消旋托伐普坦晶体仍然未吸收。在外 消旋托伐普坦晶体的水悬浮液的情况下，外消旋托伐普坦的吸收量减少，并且保持低血清 浓度；因此，不能预料效果（试验实施例4的（1)、图6的对比实施例8)。
[0023] 但是，本发明的发明人意外地发现，包含含有光学活性托伐普坦（尤其是，R型或 S型）的颗粒和注射剂用制药上可接受的载体的可注射储库制剂可达到上述目的。更具体 地，本发明的发明人发现以下内容。
[0024] (1)发现，在哺乳动物中光学活性托伐普坦具有比外消旋托伐普坦更高的代谢稳 定性。在大鼠中，R型具有比外消旋化合物高的体外代谢稳定性；在人体中，S型具有比外 消旋化合物更高的体外代谢稳定性（试验实施例1，图1的（1)和（2))。
[0025] (2)发现，光学活性托伐普坦的水悬浮液的肌内施用在长时期下比外消旋托伐普 坦的水悬浮液的肌内施用产生更高的托伐普坦血清浓度。在大鼠中，R型比外消旋化合物 产生更高的血清浓度（试验实施例4的（1)和（2)，图6和7)。
[0026] (3)发现，在光学活性托伐普坦的水悬浮液的肌内施用中，施用后四周在施用部位 处的托伐普坦的残留量低于外消旋托伐普坦的残留量。所述残留量表示在所述施用部位未 吸收的托伐普坦的量。以上结果证实，在肌内施用中光学活性托伐普坦的吸收速率比外消 旋托伐普坦的吸收速率快（试验实施例4的（1)和（2)，表3和4)。
[0027] 基于以上发现，本发明的发明人进行了进一步的研宄，并且完成了本发明。
[0028] 本发明提供下列包含光学活性托伐普坦的可注射储库制剂及制造该制剂的方法。
[0029] 第1项、一种可注射储库制剂，其包含：
[0030] (1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒；和
[0031] (2)注射剂用制药上可接受的载体。
[0032] 第2项、根据第1项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒⑴中的光学活性托 伐普坦为基本上由R-托伐普坦组成的托伐普坦（优选R-托伐普坦）或基本上由S-托伐 普坦组成的托伐普坦（优选S-托伐普坦）。
[0033] 第3项、根据第1或第2项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1)中的光学活 性托伐普坦的含量为50至100重量％ (优选65至100重量％，更优选80至100重量％， 还更优选90至100重量％，并且尤其优选100重量％ )。
[0034] 第4项、根据第1至第3项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1) 基本上由光学活性托伐普坦组成。
[0035] 第5项、根据第1至第4项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1) 具有大约0. 2至100 y m (优选0. 5至60 y m，并且更优选1至50 y m)的平均粒度。
[0036] 第6项、根据第1至第5项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述注射剂用 制药上可接受的载体（2)包含
[0037] (a)悬浮剂和/或润湿剂
[0038] (b)非必须地，张度剂（tonicity agent)和 / 或膨胀剂（bulking agent)，
[0039] (c)非必须地，缓冲剂，
[0040] (d)非必须地，pH调节剂，
[0041] (e)非必须地，粘度增强剂，和
[0042] (f)非必须地，防腐剂。
[0043] 第7项、根据第6项所述的可注射储库制剂，其中，所述悬浮剂为羧甲基纤维素钠 和聚乙烯吡咯烷酮。
[0044] 第8项、根据第6或第7项所述的可注射储库制剂，其中，所述润湿剂为聚山梨醇 酯80和/或泊洛沙姆。
[0045] 第9项、根据第1至第8项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1) 含有水溶性聚合物和/或生物可降解聚合物。
[0046] 第10项、根据第9项所述的可注射储库制剂，其中，所述水溶性聚合物为选自羟丙 基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮和羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯中的至少一种，并且所述生 物可降解聚合物为选自聚乳酸和聚乳酸-聚乙醇酸共聚物中的至少一种。
[0047] 第11项、根据第1至第10项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述光学活 性托伐普坦为非晶态。
[0048] 第12项、根据第1至第10项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述光学活 性托伐普坦为晶态。
[0049] 第13项、根据第1至第12项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，其进一步包 含（3)注射剂用的水并且为水悬浮液的形式。
[0050] 第14项、根据第13项所述的可注射储库制剂，其中，在所述水悬浮液中的所述颗 粒⑴中含有的光学活性托伐普坦的浓度为lOOmg/ml至500mg/ml。
[0051] 第15项、根据第1至第14项中任一项所述的可注射储库制剂，其用于多囊肾病的 预防或治疗。
[0052] 第16项、根据第1至第15项中任一项所述的可注射储库制剂，将其肌内或皮下施 用。
[0053] 第17项、根据第1至第16项中任一项所述的可注射储库制剂，将其每两周或更久 施用一次。
[0054] 第18项、一种用于制造可注射储库制剂的方法，所述方法包括混合⑴含有光学 活性托伐普坦作为活性成分的颗粒；和（2)注射剂用制药上可接受的载体。
[0055] 第19项、一种用于制造水悬浮液形式的可注射储库制剂的方法，所述方法包括混 合（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒，（2)注射剂用制药上可接受的载体，和 (3)注射剂用的水。
[0056] 第20项、一种用于预防或治疗多囊肾病的试剂盒，所述试剂盒包括含有（1)含有 光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体的容器，和含 有（3)注射剂用的水的容器。
[0057] 第21项、一种用于预防或治疗多囊肾病的试剂盒，所述试剂盒包括含有（1)含有 光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒的容器，和含有（2)注射剂用制药上可接受的载体 和（3)注射剂用的水的容器。
[0058] 第22项、一种用于多囊肾病的预防或治疗的可注射储库制剂，所述制剂包含（1) 含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体。
[0059] 第23项、一种用作多囊肾病的预防或治疗的药物的可注射储库制剂，所述制剂包 含⑴含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和⑵注射剂用制药上可接受的载体。
[0060] 第24项、（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和⑵注射剂用制药上 可接受的载体的组合用于制造用于预防或治疗多囊肾病的可注射储库制剂的用途。
[0061] 第25项、一种用于预防或治疗多囊肾病的方法，所述方法包括向需要预防或治疗 多囊肾病的患者施用一种可注射储库制剂，所述制剂包含（1)含有光学活性托伐普坦作为 活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体。
[0062] 在本说明书中，术语"可注射储库制剂"用于包括不含注射剂用的水的固体形式的 制剂（粉剂、糕剂、颗粒剂等），和包含注射剂用的水的水悬浮液形式的制剂。
[0063] 有益效果
[0064] 本发明的可注射储库制剂具有适合作为光学活性托伐普坦的储库制剂的溶解性 能。通过肌内或皮下施用本发明的可注射储库制剂，可以长时期保持托伐普坦的治疗有效 血药浓度。
[0065] 因此，可以持续抑制为顽固疾病的多囊肾病的发展。更具体地，通过每两周或更 久、优选每 2至12周、并且更优选每2至4周向患有多囊肾病的患者肌内或皮下施用本发 明的可注射储库制剂可以保持或维持托伐普坦的治疗有效血药浓度。
[0066] 本发明的可注射储库制剂不但对多囊肾病的症状具有可靠的治疗和预防作用，还 提供可以每两周或更久施用制剂的方便剂型，并且进一步抑制过度的利尿作用。因此，本发 明的可注射储库制剂有助于患有多囊肾病的患者的QOL的改善，并且在医学上和工业上非 常有用。
[0067] 本发明的包含含有光学活性托伐普坦（尤其是，R型或S型）的颗粒的制剂与包 含含有外消旋托伐普坦的颗粒的制剂相比在以下方面具有显著效果。
[0068] (1)在哺乳动物中光学活性托伐普坦具有比外消旋托伐普坦更高的代谢稳定性。 在大鼠中，R型具有比外消旋化合物更高的体外代谢稳定性；在人体中，S型具有比外消旋 化合物更高的体外代谢稳定性（试验实施例1，图1的（1)和（2))。
[0069] (2)光学活性托伐普坦的水悬浮液的肌内施用或皮下施用比外消旋托伐普坦的水 悬浮液的肌内施用或皮下施用产生更高的托伐普坦血清浓度。在大鼠中，R型显示高血清 浓度（试验实施例4的（1)和（2)，图6和7)。这意味着即使光学活性托伐普坦的剂量与 外消旋托伐普坦的剂量相比是减少的，仍可以保持与外消旋托伐普坦相同水平的治疗有效 血药浓度。长效制剂，当制造时，通常需要以高剂量施用药物。但是，因为光学活性托伐普 坦可以以低剂量保持血药浓度，所以它是非常有用的。
[0070] (3)在光学活性托伐普坦的水悬浮液的肌内施用中，施用后四周在施用部位处的 托伐普坦的残留量低于外消旋托伐普坦的残留量。所述残留量表示在所述施用部位的未吸 收的托伐普坦的量。以上结果意味着，在肌内施用中光学活性托伐普坦的吸收速率比外消 旋托伐普坦的吸收速率快（试验实施例4的（1)和（2)，表3和4)。
[0071] 本发明的包含含有非晶态光学活性托伐普坦（尤其是，R型或S型）的颗粒的制 剂与包含含有非晶态外消旋托伐普坦的颗粒的制剂相比在以下方面是有利的。
[0072] (a)非晶态光学活性托伐普坦的水悬浮液的肌内施用具有高代谢稳定性，其比非 晶态外消旋托伐普坦的水悬浮液的肌内施用产生更高的血清浓度（试验实施例4的（2)，图 7)。这意味着即使光学活性托伐普坦的剂量与外消旋托伐普坦的剂量相比是减少的，仍可 以保持与外消旋托伐普坦相同水平的治疗有效血药浓度。
[0073] (b)非晶态光学活性托伐普坦可以在长时期内稳定地保持比非晶态外消旋托伐普 坦更高的溶解性能（试验实施例2,图2至4)。这是因为非晶态光学活性托伐普坦与非晶 态外消旋托伐普坦相比更不容易结晶，并且因此可保持非晶态。
[0074] 因为即使当使用长时间的、潮湿状态的制造工艺时非晶态光学活性托伐普坦仍可 由此保持非晶态，所以从制造的立场上看，其也是有用的。此外，肌内或皮下施用后，非晶态 光学活性托伐普坦在施用部位不容易结晶，并且因此可以保持高血药浓度。进一步地，非晶 态光学活性托伐普坦，当配制成水悬浮液以在临床环境中给患者施用时，可长时期保持非 晶态；因此，不需要在制备后立即施用所述制剂。
[0075] (C)施用后四周在施用部位的非晶态光学活性托伐普坦的残留量比非晶态外消旋 托伐普坦的残留量低（试验实施例4的（2)，表4)。
[0076] 本发明的包含含有晶态光学活性托伐普坦（尤其是，R型或S型）的颗粒的制剂 与包含含有晶态外消旋托伐普坦的颗粒的制剂相比在以下方面是有利的。
[0077] (i)晶态光学活性托伐普坦的水悬浮液的肌内施用或皮下施用具有高代谢稳定 性，其比晶态外消旋托伐普坦的水悬浮液的肌内施用或皮下施用产生更高的托伐普坦血药 浓度（例如，试验实施例4的（1)，图6)。
[0078] (ii)晶态光学活性托伐普坦可以在长时期内稳定地保持比晶态外消旋托伐普坦 更高的溶解性能。晶态外消旋型的溶解速率下降，而晶态光学活性型的溶解速率稳定地保 持（试验实施例3,图5)。
[0079] 因为即使当使用长时间的、潮湿状态的制造工艺时晶态光学活性托伐普坦也可由 此保持晶态，所以从制造的立场上看，其也是有用的。此外，晶态光学活性托伐普坦的溶解 速率与晶态外消旋托伐普坦的溶解速率相比不下降。进一步地，当将晶态光学活性托伐普 坦配制成水悬浮液以在临床环境中给患者施用时，没有关于所述溶解速率的下降的担忧； 因此，不需要在制备后立即施用所述制剂。
[0080] (iii)施用后四周在施用部位处的晶态光学活性托伐普坦的残留量比晶态外消旋 托伐普坦的残留量低（试验实施例4的（1)，表3)。所述残留量表示在所述施用部位处未 被吸收的托伐普坦的量。以上结果意味着，在肌内施用中晶态光学活性托伐普坦的吸收速 率比晶态外消旋托伐普坦的吸收速率快。此外，相较于晶态外消旋托伐普坦，在晶态光学活 性托伐普坦中可以保持更高的托伐普坦血药浓度。
[0081] 本发明的包含含有晶态光学活性托伐普坦（尤其是，R型或S型）的颗粒的制剂 与包含含有非晶态光学活性托伐普坦的颗粒的制剂相比在以下方面是有利的。
[0082] (I)在晶态光学活性托伐普坦中，没有观察到如在非晶态光学活性托伐普坦中发 现的施用后即刻的高血清浓度（突释（initial burst)等），并且治疗有效血清浓度可以长 时期保持在固定水平。因为血清浓度很少波动，所以可以抑制与高血药浓度相关的过度利 尿（试验实施例4的（3)，图8)。
[0083] (II)晶态光学活性托伐普坦从施用后第14天起比非晶态光学活性托伐普坦产生 更高的血清浓度，并且优选配制成每四周或更久施用的储库注射剂（试验实施例4的（3)， 图8)。
[0084] 证实，本发明的包含含有晶态光学活性托伐普坦（尤其是，R型或S型）的颗粒的 制剂在多囊肾病模型动物中可抑制肾脏重量或肾脏体积的增加，并且可长时期保持不变的 托伐普坦的有效血浆浓度（试验实施例5和6,表7和8,图9和10)。这些结果显示，所述 制剂在包括人类的哺乳动物中对多囊肾病的预防或治疗是有用的。
【附图说明】
[0085] 图1显示试验实施例1中外消旋托伐普坦和光学活性托伐普坦（R型和S型）的 代谢稳定性的试验结果。所述试验使用人类和大鼠的肝脏匀浆（S9组分）。圆形指示R型， 正方形指示S型，并且三角形指示所述外消旋化合物。
[0086] 图2显示在试验实施例2中，对比实施例1至3的含有非晶态外消旋托伐普坦的 喷雾干燥的粉末；和对比实施例7的晶态外消旋托伐普坦的喷磨粉末的溶解试验的结果。
[0087] 图3显示在试验实施例2中，对比实施例4至6的含有非晶态外消旋托伐普坦的 喷雾干燥的粉末；和对比实施例7的晶态外消旋托伐普坦的喷磨粉末的溶解试验的结果。
[0088] 图4显示在试验实施例2中，实施例1和2的含有非晶态光学活性托伐普坦（R型 或S型）的喷雾干燥的粉末；和对比实施例7的晶态外消旋托伐普坦的喷磨粉末的溶解试 验的结果。
[0089] 图5显示在试验实施例3中，R-托伐普坦晶体粉末、S-托伐普坦晶体粉末和对比 实施例7的晶态外消旋托伐普坦的粉末的溶解试验的结果。
[0090] 图6显示当在试验实施例4的（1)中将含有晶态R-托伐普坦颗粒的水悬浮液（实 施例3)和含有晶态外消旋托伐普坦颗粒的水悬浮液（对比实施例8)各自以100mg/kg的 量向雌性大鼠肌内施用时，托伐普坦的血清浓度的曲线。
[0091] 图7显示当在试验实施例4的⑵中将含有非晶态R-托伐普坦粉末的水悬浮液 (实施例1)和含有非晶态外消旋托伐普坦粉末的水悬浮液（对比实施例5)各自以IOOmg/ kg的量向雌性大鼠肌内施用时，托伐普坦的血清浓度的曲线。
[0092] 图8显示当在试验实施例4的（3)中将含有晶态R-托伐普坦颗粒的水悬浮液（实 施例3)和含有非晶态R-托伐普坦粉末的水悬浮液（实施例1)各自以100mg/kg的量向雌 性大鼠肌内施用时，托伐普坦的血清浓度的曲线。
[0093] 图9显示当在试验实施例5中将晶态S-托伐普坦颗粒水悬浮液（实施例5)以 1000mg/kg的量向pcy小鼠（雄性）皮下施用时，托伐普坦的血浆浓度的曲线。
[0094] 图10显示当在试验实施例6中将晶态R-托伐普坦颗粒水悬浮液（实施例6)以 400mg/kg的量向的PCK大鼠（雄性）肌内施用时，托伐普坦的血浆浓度的曲线。
【具体实施方式】
[0095] 1.可注射储库制剂
[0096] 本发明的可注射储库制剂包含（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒 和（2)注射剂用制药上可接受的载体。本发明的可注射储库制剂包括不含有注射剂用的水 的固体形式的制剂（粉剂、糕剂、颗粒剂等），以及含有注射剂用的水的水悬浮液形式的制 剂。
[0097] 以下描述本发明的制剂的各成分。
[0098] (1)含有活件成分的颗粒
[0099] 光学活件托伐普坦
[0100] 本发明的含有活性成分的颗粒含有托伐普坦作为活性成分，并且所述托伐普坦是 光学活性托伐普坦。
[0101] 术语"光学活性托伐普坦"指基本上由R- (+) -7-氯-5-羟基-1- [2-甲基-4- (2-甲 基苯甲酰氨基）苯甲酰基]-2, 3, 4, 5-四氢-IH-苯并氮杂卓（R-托伐普坦）组成的托 伐普坦或基本上由S-(-)-7-氯-5-羟基-1-[2-甲基-4-(2-甲基苯甲酰氨基）苯甲酰 基]-2, 3, 4, 5-四氢-IH-苯并氮杂卓（S-托伐普坦）组成的托伐普坦。
[0102] 基于，例如，非专利文献1、非专利文献2、非专利文献3等的公开内容，可以制造光 学活性托伐普坦。
[0103] 术语"基本上由R-托伐普坦组成的托伐普坦"指可能含有它的对映体（S型）的 托伐普坦，只要达到本发明的效果即可。更具体地，术语"基本上由R-托伐普坦组成的托 伐普坦"指托伐普坦的R-型光学纯度（对映体过量：ee)通常不小于80% ee、优选不小于 90% ee、更优选不小于95% ee、还更优选不小于99% ee、并且尤其优选100% ee。即，光学 纯R-托伐普坦为优选的。
[0104] 术语"基本上由S-托伐普坦组成的托伐普坦"指可能含有它的对映体（R型）的 托伐普坦，只要达到本发明的效果即可。更具体地，术语"基本上由S-托伐普坦组成的托 伐普坦"指托伐普坦的S-型光学纯度（对映体过量 ：ee)通常不小于80% ee、优选不小于 90% ee、更优选不小于95% ee、还更优选不小于99% ee、并且尤其优选100% ee。即，光学 纯S-托伐普坦为优选的。
[0105] 从人体的高吸收性和高代谢稳定性的角度出发，基本上由S-托伐普坦组成的托 伐普坦为优选的，并且S-托伐普坦为更优选的。
[0106] 光学活性托伐普坦包括托伐普坦的酸酐、溶剂化物（例如，水合物、醇化物等）、共 晶等。进一步地，光学活性托伐普坦包括托伐普坦分子中的一个或多个原子由一个或多个 同位素原子取代的那些化合物。同位素原子的例子包括氘（ 2H)、氚（3H)、13C、14N、180等。
[0107] 光学活性托伐普坦可以为晶态的或非晶态的。
[0108] 在"非晶态光学活性托伐普坦"中的术语"非晶态"表示，基于所述颗粒的总托伐普 坦含量，晶态托伐普坦的含量小于10重量％，优选小于5重量％，更优选小于3重量％ ;并 且尤其优选表示没检测到晶态托伐普坦。
[0109] 在"晶态光学活性托伐普坦"中的术语"晶态"表示，基于所述颗粒的总托伐普坦含 量，晶态托伐普坦的含量不小于90重量％，优选不小于95重量％，更优选不小于97重量％; 并且尤其优选表示没检测到非晶态托伐普坦。
[0110] 基于所述颗粒的总托伐普坦含量的晶态托伐普坦的含量可以通过使用分析仪 (如X射线衍射仪、差示扫描量热仪（DSC)、近红外线（NIR)分光计、微量热仪、拉曼光谱仪 或者太赫分光计）测量所述颗粒来测定。
[0111] 颗粒
[0112] 所述含有活性成分（即，光学活性托伐普坦）的颗粒包括含有光学活性托伐普坦 和一种或多种其他成分的颗粒，以及基本上由光学活性托伐普坦组成的颗粒（包括由光学 活性托伐普坦组成的颗粒）。
[0113] 其他成分的例子包括加入以控制光学活性托伐普坦从所述颗粒的释放速率的那 些成分。其他成分的例子包括水溶性聚合物和/或生物可降解聚合物。
[0114] 水溶性聚合物的例子包括聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、羟丙基纤维素（HPC)、羟丙基甲 基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP)、羟丙基甲基纤维素（HPMC)、甲基丙烯酸共聚物L、甲基纤 维素（MC)等。优选的水溶性聚合物为羟丙基纤维素（HPC)、聚乙烯吡咯烷酮（PVP)和羟丙 基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP)。
[0115] 生物可降解聚合物的例子包括聚乳酸、聚乙醇酸、聚已酸内酯、聚碳酸酯、聚酯酰 胺、聚酐、聚氨基酸、聚原酸酯、聚氰基丙烯酸酯、聚（对二氧杂环己酮）、聚亚烷基草酸酯、 生物可降解的聚氨酯、它们的混合物和它们的共聚物。如果所述聚合物含有不对称碳原子， 则构成所述聚合物的单体可为D-型、L-型或DL-型中的任意一种。L-型为优选的。优选 的生物可降解聚合物为聚乳酸和聚乳酸-聚乙醇酸共聚物。
[0116] 在所述颗粒中光学活性托伐普坦与所述水溶性聚合物和/或所述生物可降解聚 合物的重量比通常为1:0至1:4,进一步为4:1至1:4,此外为4:1至1:2,并且尤其为2:1 至1:1。特别地，适合的是在所述颗粒中所述光学活性托伐普坦与所述水溶性聚合物和/或 所述生物可降解聚合物的重量比为1:0。
[0117] 在所述含有光学活性托伐普坦的颗粒中的光学活性托伐普坦的含量通常为50至 1〇〇重量％，优选65至100重量％，更优选80至100重量％，还更优选90至100重量％，并 且尤其优选100重量％。
[0118] 在所述基本上由光学活性托伐普坦组成的颗粒中的光学活性托伐普坦的含量通 常为80至100重量％，优选90至100重量％，更优选95至100重量％，还更优选98至100 重量％，并且尤其优选100重量％。
[0119] 所述含有光学活性托伐普坦的颗粒的平均粒度通常可设置成0. 2至100 ym，优选 0. 5至60 y m，并且更优选1至50 y m。所述颗粒的平均粒度是体积平均直径，并且可以使用 激光衍射粒度分布仪测定。
[0120] 尤其是，含有非晶态光学活性托伐普坦的颗粒通常通过在有机溶剂中溶解光学活 性托伐普坦和（如果需要）水溶性聚合物和/或生物可降解聚合物然后喷雾干燥所述混 合物来制备。因此，所述颗粒通常具有球形形状。所述颗粒的平均粒度可以通过适当改变 所述喷雾干燥法的条件设置在所需的范围内（〇. 2至100 ym，优选2至60 ym，更优选4至 50 y m) 〇
[0121] 含有晶态光学活性托伐普坦的颗粒，例如，通过重结晶基于非专利文献1至3等合 成的光学活性托伐普坦来制备。通过已知的粉碎法（优选湿粉碎）制备所述颗粒以便具有 所需的平均粒度。所述颗粒的平均粒度可以通过适当改变所述粉碎的条件设置在所需范围 内（0? 2至100 y m，优选0? 5至30 y m，更优选1至10 y m)。
[0122] 与当使用含有晶态外消旋托伐普坦的颗粒（对比实施例7)时相比较，当使用含有 非晶态光学活性托伐普坦的颗粒时（实施例1和2)，可以长时期保持高溶解性能（试验实 施例2，图4)，并且在肌内施用或皮下施用中，可以长时期保持高血药浓度（例如，试验实施 例4的⑴和（2)，图6和7,实施例1和对比实施例8)。这使得能够在多囊肾病中有效地 抑制囊肾的发展。
[0123] 特别地，需要注意的是，非晶态光学活性托伐普坦与非晶态外消旋托伐普坦相比 可长时期保持更高的溶解性能。更具体地，在图2至4中显示的溶解试验结果显示出，在实 施例I (R型）和实施例2 (S型）的制剂的情况下，在溶解开始后长时期保持高溶解量（140 小时，大约6天），而在对比实施例1至6 (外消旋化合物）的情况下，在相对短时期内，所述 溶解量显著降低。这被认为是因为实施例1和2的非晶态光学活性托伐普坦比非晶态外消 旋托伐普坦更不容易结晶，并且因此可以保持所述高溶解量。因此，在所述含有非晶态光学 活性托伐普坦的颗粒中的非晶态光学活性托伐普坦从制造制剂的角度来看是有用的，因为 即使在包括花费相对长时期的潮湿状态的步骤（例如，湿粉碎）的工艺中，它仍可保持非晶 态。此外，因为在所述施用后，所述非晶态光学活性托伐普坦不太容易结晶，所以在肌内或 皮下施用中可以保持高血药浓度。进一步地，所述非晶态光学活性托伐普坦，当配制成水悬 浮液以在临床环境中给患者施用时，还可长时期保持非晶态，并且因此为临床上有用的。
[0124] 应当注意的是，晶态光学活性托伐普坦（R型或S型）具有比晶态外消旋托伐普坦 (对比实施例7)更稳定的溶解性能（图5)。还应当注意的是，与使用晶态外消旋托伐普坦 时比较，当在肌内施用或皮下施用中使用具有优异的吸收性和代谢稳定性的晶态光学活性 托伐普坦时，可以长时期保持高血药浓度（例如，图6,实施例3和对比实施例8)。这使得 能够在多囊肾病中有效抑制囊肾的发展。此外，与在非晶态外消旋托伐普坦和非晶态光学 活性托伐普坦中不同，在晶态光学活性托伐普坦中，没有观察到施用后即刻的高血药浓度 (突释）；并且可以长时期保持治疗有效血药浓度（例如，试验实施例4的图7和8)。这抑 制过度利尿作用。因此，晶态光学活性托伐普坦对于患者的QOL和依从性是有用的。
[0125] 进一步地，因为晶态光学活性托伐普坦在所述晶态中可天生地长时期保持优异的 血药浓度，所以不需要考虑在水悬浮液中从非晶态结晶的问题。因此，晶态光学活性托伐普 坦在临床上非常优异的可操纵性方面是有利的。进一步地，与外消旋托伐普坦晶体相比较， 光学活性托伐普坦晶体未显示溶解速率的降低。因此，因为可以长时期保持所述晶态形式， 所以血药浓度的波动小，并且可以长时期保持治疗有效血药浓度。
[0126] (2)注射剂用制药h可接#的裁体
[0127] 所述注射剂用制药上可接受的载体用于将所述含有活性成分（即，光学活性托伐 普坦）的颗粒配制到水悬浮液中。所述注射剂用的载体通常包括（a)悬浮剂和/或润湿剂， (b)非必须地，张度剂和/或膨胀剂，（c)非必须地，缓冲剂，（d)非必须地，pH调节剂，（e) 非必须地，粘度增强剂，和（f)非必须地，防腐剂。
[0128] 所述悬浮剂和/或润湿剂（a)对在水中悬浮所述光学活性托伐普坦是必需的。
[0129] 适合的悬浮剂的例子包括羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基 乙基纤维素、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮等。它 们可以单独使用，或以两种或多种的结合的方式使用。尤其是，羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡 咯烷酮的结合是优选的。
[0130] 基于可注射制剂（含有注射剂用的水的水悬浮液）的总体积，含有的悬浮剂的量 通常在大约0. 1至大约10w/v%的范围内，并且优选大约0. 2至大约5w/v%的范围内。
[0131] 适合的润湿剂的例子包括各种表面活性剂（包括非离子和离子型表面活性剂）， 如凝胶、卵磷脂（磷脂）、山梨糖醇酯、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯 山梨糖醇脂肪酸醋（例如，市售的Tweens(注册商标）；例如，Tween 20(注册商标）和 Tween 80(注册商标，聚山梨醇醋80) (ICI Specialty Chemicals))、泊洛沙姆（例如， Pluronic F-68 (注册商标）和Pluronic F-108 (注册商标），其为环氧乙烧和环氧丙烷的 嵌段共聚物）；和泊洛沙胺（poloxamines)(泊洛沙姆的乙二胺衍生物）（例如，Tetronic 908 (注册商标），还称为Poloxamine 908 (注册商标），其为源于向乙二胺顺序加成环氧丙 烧和环氧乙烧的四官能嵌段共聚物（BASF Wyandotte Corporation, Parsippany, N. J.))。 它们可以单独使用，或以两种或多种结合的方式使用。尤其是，聚山梨醇酯80和泊洛沙姆 为优选的。
[0132] 基于可注射制剂的总体积，含有的润湿剂的量通常在大约0. 01至大约5w/v%的 范围内，并且优选大约〇. 1至大约2w/v%的范围内。
[0133] 如需要，注射剂用的载体可包含（b)张度剂和/或膨胀剂。张度剂的例子包括氯化 钠、氯化钾、甘露醇、蔗糖、乳糖、麦芽糖、木糖醇、葡萄糖、山梨糖醇等。它们可以单独使用， 或以两种或多种结合的方式使用。
[0134] 当所述注射剂用的载体包含张度剂和/或膨胀剂时，基于可注射制剂的总体积， 含有的张度剂和/或膨胀剂的量通常在大约〇. 2至大约12w/v%的范围内，并且优选在大约 0. 5至大约10w/v%的范围内。
[0135] 如需要，所述注射剂用的载体可包含（C)缓冲剂。本发明中适合的缓冲剂的例子 包括柠檬酸钠、酒石酸钠、钠磷酸盐、钾磷酸盐、Tris缓冲剂等。它们可以单独使用，或以两 种或多种结合的方式使用。尤其是，钠磷酸盐（尤其是磷酸二氢钠）为优选的。
[0136] 当所述注射剂用的载体包含缓冲剂时，含有的缓冲剂的量为足够将使用时制备的 水悬浮液的pH调节到大约6至大约8,并且优选到大约7的量。为了达到该pH，基于可注 射制剂的总重，所述缓冲剂根据类型通常以大约〇. 02至大约2重量％，优选大约0. 03至大 约1重量％，并且更优选大约0. 1重量％的范围内的量使用。
[0137] 如需要，所述注射剂用的载体可包含（d)pH调节剂。所述pH调节剂以足够将在使 用时制备的水悬浮液的PH调节在大约6至大约8的范围内，并且优选到大约7的量使用； 并且根据是否必须升高或降低所述托伐普坦的水悬浮液的PH来调节所述pH至所需的大约 7的中性pH，所述pH调节剂可为碱或酸。因此，当必须降低所述pH时，可以使用酸性pH调 节剂（如盐酸、磷酸和醋酸，优选盐酸）。当必须升高所述PH时，可以使用碱性pH调节剂 (如氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钙、氧化镁和氢氧化镁，优选氢氧化钠）。
[0138] 如需要，所述注射剂用的载体可包含（e)粘度增强剂。粘度增强剂的例子包括羧 甲基纤维素钠等。
[0139] 如需要，所述注射剂用的载体可包含（f)防腐剂。防腐剂的例子包括：季铵盐， 如苯扎氯铵和苄索氯铵；阳离子化合物，如葡萄糖酸氯己定；对羟基苯甲酸酯，如对羟基苯 甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯；醇化合物，如氯丁醇和苄醇；脱氢醋酸 纳；硫采撒等。
[0140] 本发明提供一种可注射储库制剂，其包含（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成 分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体（以及如需要，另外的（3)注射剂用的水）， 用于多囊肾病的预防或治疗。
[0141] 本发明提供（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药 上可接受的载体（以及如需要，另外的（3)注射剂用的水）的组合在制造预防或治疗多囊 肾病的可注射储库制剂中的用途。
[0142] 本发明还提供预防或治疗多囊肾病的方法，其包括向需要预防或治疗多囊肾病的 患者施用包含（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接 受的载体（以及如需要，另外的⑶注射剂用的水）的可注射储库制剂。
[0143] 2.本发明的制剂的制各
[0144] 本发明的可注射储库制剂可以通过混合（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成 分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体来制备。
[0145] 本发明的水悬浮液形式的可注射储库制剂可以通过混合（1)含有光学活性托伐 普坦作为活性成分的颗粒，（2)注射剂用制药上可接受的载体，和（3)注射剂用的水来制 备。
[0146] 在以上各方法中，在所述颗粒（1)中含有的光学活性托伐普坦的量可为治疗有效 量，并且可根据目 的适当调节。
[0147] 含有非晶态光学活性托伐普坦的颗粒可以如下制备：例如，在有机溶剂中溶解光 学活性托伐普坦和，如需要的话，水溶性聚合物和/或生物可降解聚合物；蒸馏出所述有机 溶剂；并获得粉末。选择可溶解各成分并且可容易地蒸馏出来的有机溶剂。有机溶剂的例 子包括二氯甲烷，和二氯甲烷和醇（甲醇或乙醇）的混合溶剂。具有所需粒度分布的颗粒 可以通过喷雾干燥所制得的溶液来制造。例如，根据在专利文献2 (JP4210355B)中描述的 方法，可以进行制造所述颗粒的方法。
[0148] 含有晶态光学活性托伐普坦的颗粒（尤其是，基本上由晶态光学活性托伐普坦组 成的颗粒）可以如下制备：例如，重结晶光学活性托伐普坦，并将所述重结晶的光学活性托 伐普坦粉碎成粉末。制造所述颗粒的方法可以，例如，使用通常使用的干磨机（喷磨机、锤 磨机等）进行。作为制造所述颗粒的方法的其他例子，可以提及控制结晶的方法等。例如， 所述颗粒可以如下制备：在有机溶剂（良溶剂）中溶解托伐普坦，接着用不良溶剂（如水） 沉淀。含有晶态光学活性托伐普坦和一种或多种其他成分（例如，上述水溶性聚合物和/ 或生物可降解聚合物）的颗粒可以如下制备：例如，在晶态光学活性托伐普坦的颗粒几乎 不能溶解的溶剂中溶解所述一种或多种其他成分，在所述溶液中悬浮晶态光学活性托伐普 坦的颗粒，并且湿粉碎所述颗粒。优选使用湿粉碎技术，如湿式球磨、高压均化和高剪切均 化。除这些粉碎技术之外，还可以使用低能或高能研磨机（例如，辊磨机）。所述含有晶态 光学活性托伐普坦和一种或多种其他成分的颗粒可以通过喷雾干燥所述悬浮液来制备。
[0149] 本发明的固体形式的可注射储库制剂可以通过以预定比例混合所述颗粒（1)和 所述注射剂用制药上可接受的载体（2)来制备。
[0150] 当本发明的可注射储库制剂为水悬浮液形式时，其通常可以通过以预定比例混合 所述颗粒（1)，所述注射剂用制药上可接受的载体（2)，和注射剂用的水（3)来制备。
[0151] 例如，所述水悬浮液还可以通过混合所述颗粒（1)和含有所述注射剂用制药上可 接受的载体（2)和注射剂用的水（3)的水溶液来制备。
[0152] 更具体地，例如，含有注射剂用制药上可接受的载体（2)和注射剂用的水（3)的水 溶液与包封入容器（如管形瓶）中的含有光学活性托伐普坦的无菌颗粒（1)混合；随后，将 如此获得的混合物例如，剧烈震荡、用涡旋搅拌器搅拌、或进行超声照射，由此制备均质水 悬浮液。均质水悬浮液还可以如下制备：提供两个无菌注射器，将含有光学活性托伐普坦的 无菌颗粒（1)封装在所述注射器中的一个中，将含有注射剂用制药上可接受的载体（2)和 注射剂用的水（3)的水溶液放置在另一个注射器中，由连接器连接所述两个注射器，并且 进行反复抽吸。在使用时，可以使用以上方法中的任意一种来制备水悬浮液。
[0153] 当使用上述制备方法中的任意一种时，本发明的制剂可为，例如，用于预防或治疗 多囊肾病的试剂盒的形式，所述试剂盒包括含有（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分 的颗粒的容器和含有（2)注射剂用制药上可接受的载体和（3)注射剂用的水的容器。
[0154] 作为另一个例子，所述水悬浮液可以如下制备：在使用时，向不包含注射剂用的水 (3)的固体形式的制剂（即，包含所述颗粒⑴和所述注射剂用制药上可接受的载体⑵的 固体制剂）中加入注射剂用的水（3)。
[0155] 当使用上述制备方法时，本发明的制剂可为，例如，用于预防或治疗多囊肾病的试 剂盒的形式，所述试剂盒包括：包含（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2) 注射剂用制药上可接受的载体的容器，和含有（3)注射剂用的水的容器。
[0156] 作为上述成分和含有的它们的用量，可以使用在以上"1.可注射储库制剂"部分中 描述的所述成分和用量（包括预定比例等）。
[0157] 3.施用方法（用法和剂量）
[0158] 本发明的可注射储库制剂可以用于多囊肾病的预防或治疗。所述制剂如下制备： 在无菌条件下混合（1)含有光学活性托伐普坦的颗粒，（2)注射剂用制药上可接受的载体， 和（3)注射剂用的水以制造均质水悬浮液，在此之后，所述制剂可以经注射向需要预防或 治疗多囊肾病的患者肌内或皮下施用。所述水悬浮液还可在使用时制造。
[0159] 与含有非晶态外消旋托伐普坦的颗粒不同，当所述颗粒（1)含有非晶态光学活性 托伐普坦时，结晶不容易发生在所述水悬浮液中（试验实施例2,图2至4);因此，可长时期 保持高溶解量。因此，由于在制备托伐普坦水悬浮液后的时期，例如，在医院的配药部门到 向患者施用期间，含有包括非晶态光学活性托伐普坦的颗粒的制剂确保足够的稳定性，所 以它是临床上极其有用的。进一步地，因为结晶不容易发生在施用位置，与非晶态外消旋托 伐普坦相比，可以长时期保持高血药浓度。
[0160] 当所述颗粒（1)包括晶态光学活性托伐普坦时，因为所述光学活性托伐普坦初始 为晶态，所以不需要考虑在所述水悬浮液中托伐普坦的非晶态至晶态转变的问题。因此，该 颗粒具有临床上极其容易处理的优点。所述晶态光学活性托伐普坦临床上极其容易处理， 因为与外消旋晶体相比较，其不显示溶解速率降低（试验实施例3,图5)。此外，因为所述 晶态光学活性托伐普坦可在施用后长时期保持晶态，与非晶态光学活性托伐普坦相比较， 血清浓度的改变小（试验实施例4(3)和图8)，并且与外消旋晶体相比较，可以长时期保持 高血清浓度。由于此原因，光学活性托伐普坦晶体为最优选的（试验实施例4(1)和图6)。
[0161] 当本发明的可注射储库制剂为水悬浮液时，在所述水悬浮液中含有的托伐普坦的 量（浓度）没有特别限制，只要其为治疗有效量即可。治疗有效量表示改善临床症状的量。 在所述水悬浮液中的光学活性托伐普坦的量（浓度）优选调节至lOOmg/mL至500mg/mL的 范围内，并且更优选200mg/mL至400mg/mL的范围内。向患者肌内或皮下施用的水悬浮液 的量每次通常为0. 5mL至6mL，并且优选ImL至3mL。
[0162] 上述光学活性托伐普坦的量还表示在通过用注射剂用的水构成所述固体制剂而 制备的水悬浮液中的托伐普坦的量。
[0163] 实际上使用所述剂量取决于病人。例如，当每两周施用制剂时，托伐普坦优选在一 或两次施用中以100至1000 mg的剂量施用；并且当每四周施用制剂时，托伐普坦优选在一 或两至4次施用中以200至2000mg的剂量施用。当每八周施用制剂时，托伐普坦优选在一 或两至4次施用中以400至4000mg的剂量施用；并且当每12周施用制剂时，托伐普坦优选 在一或两至4次施用中以600至6000mg的剂量施用。当以较长施用间隔施用制剂时，所述 颗粒（1)优选为含有晶态光学活性托伐普坦的颗粒，因为可以长时期保持高血药浓度。
[0164] 有两种光学活性托伐普坦，即，R型和S型。例如，当向大鼠或兔子施用含有R-托 伐普坦的颗粒时，和当向狗或人施用含有S-托伐普坦的颗粒时，与当使用含有外消旋化合 物的颗粒相比较，可以保持高血药浓度，使得可以减少剂量。通常，因为已知在施用部位的 局部刺激取决于单次剂量，所以单次剂量的减少可降低在施用部位的局部刺激。进一步地， 因为晶态S-托伐普坦在人体中具有高代谢稳定性，所以可以保持有效血药浓度不变，这是 优选的。
[0165] 实施例
[0166] 现在将用以下实施例详细描述本发明。但是，本发明不局限于此或由此限制。
[0167] 实施例1 (含有33% HPC-SL的R-托伐普坦喷雾干燥（SD)粉末的制各）
[0168] 在二氯甲烷（1055mL)和乙醇（455mL)中溶解R-托伐普坦晶体（100. 6g，由日本 大冢制药株式会社（Otsuka pharmaceutical Co. ,Ltd.)制造）和轻丙基纤维素（50. 3g， 即051^，由日本曹达株式会社（附??〇115〇(1&(：〇.，1^(1.)制造）。使用喷雾干燥器（?111"8 GB21，由日本大和科学株式会社（Yamato Scientific Co.，Ltd.)制造），在L 6至I. 7kg/ cm2的喷射压、60°C的加热器温度和10至15g/min的液体发送速度下喷雾干燥所述溶液。所 制备的喷雾干燥粉末在减压条件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅观察到光 晕峰。因此，确定所制备的粉末为非晶态。
[0169] 将所述R-托伐普坦SD粉末（300mg)装入注射器中，并且将以下（表1)显示的 介质溶液（〇.76g)装入另一个注射器中。所述两个注射器经连接器连接。重复进行抽吸 来制备200mg/mL的均质非晶态R-托伐普坦水悬浮液。根据湿法使用激光衍射粒度分布 仪（SALD-3000J，由岛津（Shimadzu)公司制造）测量的R-托伐普坦SD粉末的平均粒度为 5. 8 y m〇
[0170] 表1介质溶液的组成（每mL的制剂）
[0172] 实施例2 (含有33% HPC-SL的S-托伐普坦喷雾干燥（SD)粉末的制各）
[0173] 在二氯甲烷（1050mL)和乙醇（455mL)中溶解S-托伐普坦晶体（100. 3g，由日本大 冢制药株式会社制造）和羟丙基纤维素（50.3g，HPC-SL，由日本曹达株式会社制造）。使用 喷雾干燥器（Pulvis GB21，由日本大和科学株式会社制造），在I. 7kg/cm2的喷射压、60°C 的加热器温度和10至15g/min的液体发送速度下喷雾干燥所述溶液。所制备的喷雾干燥 粉末在减压条件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅观察到光晕峰。因此，确定 所制备的粉末为非晶态。
[0174] 将所述S-托伐普坦SD粉末（300mg)装入注射器中，并且将实施例1的介质溶液 (0.76g)(表1)装入另一个注射器中。所述两个注射器经连接器连接。重复进行抽吸来制 备200mg/mL的均质非晶态S-托伐普坦水悬浮液。
[0175] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的S-托 伐普坦SD粉末的平均粒度为6. 2 y m。
[0176] 实施例3 (R-托伐普坦晶体颗粒制剂）
[0177] 在实施例1的介质溶液（表1) (8. 3g)(等于IOmL)中悬浮R-托伐普坦晶体（2.0g， 由日本大冢制药株式会社制造）。向所述悬浮液中加入直径为1.5mm的氧化锆珠粒。将搅 拌棒引入容器中，并且使用搅拌器进行搅拌来进行珠粒粉碎（湿粉碎），由此制备200mg/mL 的均质R-托伐普坦晶体水悬浮液。根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛 津公司制造）在超声照射期间测量的R-托伐普坦晶体颗粒的平均粒度为2. 5 y m。
[0178] 实施例4 (S-托伐普坦晶体颗粒制剂）
[0179] 在实施例1的介质溶液（表1) (8. 3g)(等于IOmL)中悬浮S-托伐普坦晶体（2. 0g， 由日本大冢制药株式会社制造）。向所述悬浮液中加入直径为1.5mm的氧化锆珠粒。将搅 拌棒引入容器中，并且使用搅拌器进行搅拌来进行珠粒粉碎（湿粉碎），由此制备200mg/mL 的均质S-托伐普坦晶体水悬浮液。根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛 津公司制造）在超声照射期间测量的S-托伐普坦晶体颗粒的平均粒度为2. 5 y m。
[0180] 对比实施例1 (外消旋托伐普坦喷雾干燥（SD)粉末的制各）
[0181] 在二氯甲烷（150mL)和乙醇（30mL)中溶解托伐普坦（外消旋化合物）晶体（20g， 由日本大冢制药株式会社制造）。使用喷雾干燥器（Pulvis GB22,由日本大和科学株式会 社制造），在0.1 MPa的喷射大气压、80°C的干燥温度、0. 45m3/min的气流和40mL/min的液 体发送速度下喷雾干燥所述溶液。所制备的喷雾干燥粉末在减压条件下干燥。在所制备粉 末的粉末X射线衍射中，仅观察到光晕峰。因此，确定所制备的粉末为非晶态。
[0182] 根据湿法 使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的外消 旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为5. I ym。
[0183] 对比实施例2 (含有33% PLGA的外消旋托伐普坦SD粉末的制各）
[0184] 在二氯甲烷（IOOmL)和乙醇（20mL)中溶解托伐普坦（外消旋化合物）晶体（10g， 由日本大冢制药株式会社制造）以及DL乳酸和乙醇酸的共聚物（5g) (PLGA-5005,由日本和 光纯药工业株式会社（Wako Pure Chemical Industries)制造）。使用喷雾干燥器（Pulvis GB22,由日本大和科学株式会社制造），在0.1 MPa的喷射大气压、80°C的干燥温度、0. 44m3/ min的气流和40mL/min的液体发送速度下喷雾干燥所述溶液。所制备的喷雾干燥粉末在减 压条件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅观察到光晕峰。因此，确定所制备的 粉末为非晶态。
[0185] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的含有 33%PLGA的外消旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为5.Iym。
[0186] 对比实施例3(含有33% PVP-17PF的外消旋托伐普坦SD粉末的制各）
[0187] 在二氯甲烷（IOOmL)和乙醇（20mL)中溶解托伐普坦（外消旋化合物）晶体（10g， 由日本大冢制药株式会社制造）和聚乙烯吡咯烷酮（5g，PVP-17PF，由BASF有限公司制 造）。使用喷雾干燥器（Pulvis GB22,由日本大和科学株式会社制造），在0.1 MPa的喷射 大气压、80°C的干燥温度、0. 41m3/min的气流和7mL/min的液体发送速度下喷雾干燥所述溶 液。所制备的喷雾干燥粉末在减压条件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅观 察到光晕峰。因此，确定所制备的粉末为非晶态。
[0188] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的含有 33% PVP-17PF的外消旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为7. 2 ym。
[0189] 对比实施例4(含有33% HP-55的外消旋托伐普坦SD粉末的制各)
[0190] 在二氯甲烷（150mL)和乙醇（30mL)中溶解托伐普坦（外消旋化合物）晶体（10g， 由日本大冢制药株式会社制造）和羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（5g)(由信越化学工业 株式会社（Shin-Etsu Chemical Co. ,Ltd.)制造的HP-55)。使用喷雾干燥器（Pulvis GB22， 由日本大和科学株式会社制造），在0.1 MPa的喷射大气压、80°C的干燥温度、0. 41m3/min的 气流和40mL/min的液体发送速度下喷雾干燥所述溶液。所制备的喷雾干燥粉末在减压条 件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅观察到光晕峰。因此，确定所制备的粉末 为非晶态。
[0191] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的含有 33% HP-55的外消旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为5. 5 ym。
[0192] 对比实施例5 (含有33% HPC-SL的外消旋托伐普坦SD粉末的制各）
[0193] 在二氯甲烷（IOOmL)和乙醇（30mL)中溶解托伐普坦（外消旋化合物）晶体 (l〇g，由日本大冢制药株式会社制造）和羟丙基纤维素（5g)(由日本曹达株式会社制造的 HPC-SL)。使用喷雾干燥器（Pulvis GB22,由日本大和科学株式会社制造），在0.1 MPa的喷 射大气压、80°C的干燥温度、0. 39m3/min的气流和7mL/min的液体发送速度下喷雾干燥所述 溶液。所制备的喷雾干燥粉末在减压条件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅 观察到光晕峰。因此，确定所制备的粉末为非晶态。
[0194] 将含有33% HPC-SL的外消旋托伐普坦SD粉末（300mg)装入注射器中，并且将所 述实施例1的介质溶液（〇. 76g)(表1)装入另一个注射器中。所述两个注射器经连接器连 接。重复进行抽吸来制备200mg/mL的均质非晶态外消旋托伐普坦水悬浮液。
[0195] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的含有 33% HPC-SL的外消旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为6. 6 ym。
[0196] 对比实施例6 (外消旋托伐普坦SD粉末的制各）
[0197] 在二氯甲烷（IOOmL)和乙醇（20mL)中溶解托伐普坦（外消旋化合物）晶体（10g， 由日本大冢制药株式会社制造）。使用喷雾干燥器（0DT-8喷雾干燥器，由日本大川原化 工机株式会社（Ohkawara Kakohki Co. ,Ltd.)制造）喷雾干燥所述溶液（转盘喷雾器、 13000rpm的转速、0/1kg/cm2的吹扫气压、90 °C热空气进口温度、180g/min的液体发送速 度）。所制备的喷雾干燥粉末在减压条件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅观 察到光晕峰。因此，确定所制备的粉末为非晶态。
[0198] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的外消 旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为32. 5 y m。
[0199] 对比实施例7 (外消旋托伐普坦晶体的喷磨粉末的制各）
[0200] 在5kgf/cm2的气压和20rpm的发送速度下，使用喷磨机（PJM-100SP，由Nippon Pneumatic Mfg. Co.，Ltd?制造）粉碎托伐普坦（外消旋化合物）晶体（由日本大冢制药株 式会社制造）。进行所制备粉末的粉末X射线衍射，并且确定所述托伐普坦晶体被保持。
[0201] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的外消 旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为2. 4 y m。
[0202] 对比实施例8 (外消旋托伐普坦晶体颗粒的制各）
[0203] 在实施例1的介质溶液（8. 3g)(等于IOmL)(表1)中悬浮托伐普坦（外消旋化合 物）晶体（2. Og)。向所述悬浮液中加入直径为I. 5mm的氧化锆珠粒（IOg)。将搅拌棒引入 容器中，并且使用搅拌器进行搅拌来进行珠粒粉碎（湿粉碎），由此制备200mg/mL的均质外 消旋托伐普坦晶体水悬浮液。
[0204] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）在超声照射 期间测量的外消旋托伐普坦晶体颗粒的平均粒度为2. 4 y m。
[0205] 试骀实施例1
[0206] 使用人和大鼠肝脏匀浆（S9部分），进行托伐普坦（外消旋化合物）、R_托伐普 坦和S-托伐普坦的体外代谢稳定性试验。将各评估的化合物的浓度设置为100nM，并且在 反应混合物中各化合物的浓度取样随时间进行，即，加入后5、10、30和60分钟，并且通过 LC-MS/MS来测量（图I (1)和⑵）。
[0207] 结果显示，在人体中，与托伐普坦（外消旋化合物）或R-托伐普坦相比较，S-托 伐普坦缓慢消失，并且具有高代谢稳定性（图1(1));以及在大鼠中，与托伐普坦（外消旋 化合物）或S-托伐普坦相比较，R-托伐普坦缓慢消失（图1 (2))。
[0208] 试骀实施例2
[0209] 进行实施例1和2的R-和S-托伐普坦SD粉末、对比实施例1至6的托伐普坦 (外消旋化合物）SD粉末和对比实施例7的托伐普坦（外消旋化合物）晶体粉末中的每一 个的溶解试验（图2至4)。在所述溶解试验方法中，以0.1 g的单个量称出所述R-和S-托 伐普坦SD粉末、托伐普坦（外消旋化合物）SD粉末和托伐普坦（外消旋化合物）晶体粉末， 然后加入至表2中显示的用于溶解试验的溶液（500mL)中。以上称重的量的托伐普坦都没 有溶解在所述用于溶解试验的溶液中，并且完全悬浮。在加入后〇. 〇83、0. 167、0. 5、1、2、4、 6、8、12、24、48和144小时进行顺序取样。
[0210] 表2用于溶解试验的溶液的组成
[0212] 结果显示，对比实施例7的托伐普坦（外消旋化合物）晶体的溶解量自开始就显 著低。对比实施例1至6的非晶态托伐普坦（外消旋化合物）在溶解试验开始后数小时显 示高浓度。此后，所述溶解量在10小时内突然下降，然后降低至与所述托伐普坦（外消旋 化合物）晶体的溶解量相同的水平。实施例1和2的R-托伐普坦SD粉末和S-托伐普坦 SD粉末在溶解试验开始之后的至少144小时之内未显示溶解量的显著下降。
[0213] 试骀实施例3
[0214] 进行R-和S-托伐普坦晶体粉末中每一个的溶解试验（图5)。作为对照，标绘在以 上试验实施例2中的对比实施例7的结果。在所述溶解试验方法中，以0.1 g的量称重R-托 伐普坦晶体粉末（平均粒度：34. 0 y m)或S-托伐普坦晶体粉末（平均粒度：35. 8 y m)，然 后加入到以上在表2中显示的用于溶解试验的溶液（500mL)中。以上称重的量的托伐普坦 都没有溶解在所述用于溶解试验的溶液中，并且完全悬浮。在加入后〇. 〇83、0. 167、0. 5、1、 2、4、6、8、12、24和48小时进行顺序取样。
[0215] 结果显示，尽管对比实施例7的托伐普坦（外消旋化合物）晶体的溶解量在试验 开始之后即刻稍微高，但此后，溶解速率立即减小。2小时后，R-托伐普坦晶体和S-托伐普 坦晶体的溶解量稍高于对比实施例7的托伐普坦（外消旋化合物）晶体的溶解量，并且保 持相当稳定。在溶解试验开始之后的至少48小时之内没有观察到如在对比实施例7中的 溶解量的下降。
[0216] 试骀实施例4
[0217] 使用装配有24G针头的注射器，在用乙醚轻度麻醉的情况下，将实施例1、2、3和4 的光学活性托伐普坦水悬浮液和实施例5和8的外消旋托伐普坦水悬浮液各以100mg/kg 的剂量肌内施用至各个SD雌性大鼠的大腿肌肉（n = 4)。在各制剂（水悬浮液）施用后1 小时、6小时、1天、3天、7天、14天、21天和28天，在用乙醚轻度麻醉的情况下，从颈静脉中 收集大约0. 5mL的血液。将所收集的血液分别引入到各个S印arapid管中，在室温下静置 大约30分钟，然后在ISOOxg离心10分钟来获得血清。所得血清在-20°C或更低温度下保 存直到测量。各血清的托伐普坦浓度通过LC-MS/MS法测量（n = 4)。
[0218] (1)晶态光学活性托伐普坦和晶态外消旋托伐普坦之间的比较
[0219] 实施例3的R-托伐普坦晶体水悬浮液、实施例4的S-托伐普坦晶体水悬浮液和 对比实施例8的托伐普坦（外消旋化合物）晶体水悬浮液各自向各个雌性SD大鼠施用。
[0220] 作为施用部位的大腿在施用后28天切开以确认剩余的托伐普坦。从各个囊肿中 提取所述托伐普坦。所述囊肿中的托伐普坦用乙腈提取，用乙腈和甲醇稀释，并且使用过滤 器（孔径：〇. 2 ym)过滤。然后通过HPLC测量托伐普坦的剩余率（n = 3)。
[0221] 结果显示，对比实施例8的托伐普坦（外消旋化合物）晶体的剩余率为大约70%; 作为每四周施用的制剂，所述吸收速率过慢；实施例3 (R-托伐普坦晶体）和实施例4 (S-托 伐普坦晶体）各自的剩余率为大约50% ;并且在所有实施例中，在四周内以适合于每四周 施用的制剂的量吸收了托伐普坦（表3)。
[0222] 表3在施用部位处的制剂的剩余率
[0224] 进一步地，图6显示实施例3的R-托伐普坦晶体水悬浮液和对比实施例8的托伐 普坦（外消旋化合物）晶体水悬浮液的肌内施用后28天的血清托伐普坦浓度曲线的结果 (n = 4)。与对比实施例8的托伐普坦（外消旋化合物）晶体相比较，实施例3的R-托伐 普坦晶体显示施用后4周显著高的血清浓度曲线。
[0225] (2)非晶态光学活性托伐普坦和非晶态外消旋托伐普坦之间的比较
[0226] 实施例1的非晶态R-托伐普坦水 悬浮液、实施例2的非晶态S-托伐普坦水悬浮 液和对比实施例5的非晶态托伐普坦（外消旋化合物）水悬浮液各自向各个雌性SD大鼠 施用。以与以上第（1)项相同的方式，测量施用后28天在所述施用部位的托伐普坦的剩余 率（n = 3)。
[0227] 结果显示，对比实施例5的非晶态托伐普坦（外消旋化合物）的剩余率为大约 20%，实施例2的非晶态S-托伐普坦没有剩余，以及实施例1的非晶态R-托伐普坦的剩余 率为大约4%。发现，实施例1的非晶态R-托伐普坦和实施例2的非晶态S-托伐普坦的吸 收速率比非晶态托伐普坦（外消旋化合物）的吸收速率快（表4)。
[0228] 表 4
[0230] *在所有情况下都没有检测到
[0231] 进一步地，图7显示肌内施用后28天的血清托伐普坦浓度曲线的结果（n = 4)。 与对比实施例5的非晶态托伐普坦（外消旋化合物）相比较，实施例1的非晶态R-托伐普 坦显示施用后4周显著高的血清浓度曲线。
[0232] (3)晶态光学活性托伐普坦和非晶态光学活性托伐普坦之间的比较
[0233] 实施例3的R-托伐普坦晶体水悬浮液和实施例1的非晶态R-托伐普坦水悬浮液 各自向各个雌性SD大鼠施用。图8显示肌内施用后28天的血清浓度曲线的结果。与实施 例1的非晶态R-托伐普坦相反，实施例3的R-托伐普坦晶体未显示在施用后即刻的高血 清浓度（突释等），并且施用后4周可以保持治疗有效量的血清浓度。尤其是，实施例3的 R-托伐普坦晶体的血清浓度未显著改变。自第14天的实施例3的R-托伐普坦晶体的血清 浓度高于自第14天的实施例1的非晶态R-托伐普坦的血清浓度。因此，发现，实施例3的 R-托伐普坦晶体适合作为每4周施用的储库注射剂。
[0234]如在以上表3和4中所示，实施例3的R-托伐普坦晶体的剩余率为大约50%，而 实施例1的非晶态R-托伐普坦的剩余率为大约4%。
[0235] 实施例5 (S-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液）
[0236] 在表5所示的介质溶液（38. Og)(等于50mL的制剂）中悬浮S-托伐普坦晶体 (15. 0g，由日本大冢制药株式会社制造）。向所述悬浮液加入直径为I. 5mm的氧化错珠粒 (50g)。搅拌容器的内含物以进行珠粒粉碎（湿粉碎），由此制备S-托伐普坦晶体颗粒水悬 浮液。
[0237] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）在超声照射 期间测量的S-托伐普坦晶体颗粒的平均粒度为3. 0 y m。
[0238] 表5介质溶液的组成（每mL的制剂）
[0240] 实施例6 (R-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液）
[0241] 在实施例5的介质溶液（76. Og)(表5)(等于IOOmL的制剂）中悬浮R-托伐普坦 晶体（30. 0g，由日本大冢制药株式会社制造）。向所述悬浮液加入直径为I. 5mm的氧化错 珠粒（150g)。搅拌容器的内含物以进行珠粒粉碎（湿粉碎），由此制备R-托伐普坦晶体颗 粒水悬浮液。
[0242] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）在超声照射 期间测量的R-托伐普坦晶体颗粒的平均粒度为I. 9 y m。
[0243] 表6显示实施例5和6中制备的各制剂的组成。
[0244] 表6制剂的组成（每mL的制剂）
[0246]试骀实施例5
[0247] 使用作为多囊肾病模型动物的pcy小鼠（雄性）来评估在实施例5中获得的S-托 伐普坦晶体颗粒水悬浮液抗多囊肾病的作用。
[0248] 基于在4周龄时的体重和通过MRI测量的肾脏体积，将pcy小鼠分成2组：（1) 对照组；和（2)接受S-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液的组。作为正常对照小鼠，可使用 DBA/2JJcl 小鼠。
[0249] 在6和10周龄时，以1000mg/kg的量向接受S-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液的组 皮下注射稀释到200mg/mL的S-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液。从6周龄开始药物治疗，并 且在16周龄时进行尸检。在尸检期间，收集右肾和左肾，并且基于体重，调节所述肾脏重量 并评估。
[0250] 表7显示在16周龄（试验开始后10周）时评估的肾脏重量的结果。与正常DBA 小鼠比较，在16周龄的pcy对照小鼠中观察到肾脏重量的增力卩。与所述pcy对照组相比较， 在接受S-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液的组中显著抑制了肾脏重量的增加。
[0251] 图9显示在7、9、13和16周龄时测量的血浆托伐普坦浓度。通过在6和10周龄 时施用S-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液，pcy小鼠的血浆托伐普坦浓度以稳定的方式保持直 到试验结束（16周龄）。
[0252] 表7:(16周龄）pcy小鼠的肾脏重量BW)
[0254] 每个值都表示平均值土 SEM。
[0255] 为与对照组相比较，使用双尾t-检验。
[0256]试骀实施例6
[0257] 使用作为多囊肾病模型动物的PCK大鼠（雄性）来评估在实施例6中获得的R-托 伐普坦晶体颗粒水悬浮液抗多囊肾病的作用。
[0258] 基于在12周龄时的血浆白蛋白水平和通过MRI测量的肾脏体积，将PCK大鼠分成 2组：（1)对照组；和（2)接受R-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液的组。作为正常对照大鼠，可 使用Crl = CD(SD)大鼠。
[0259] 在14、15和20周龄时，以400mg/kg的量向接受R-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液的 组的右腓肠肌和左腓肠肌肌内注射R-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液（300mg/mL)。从14周龄 开始药物治疗。在24周龄时，再次通过MRI测量右肾体积，并且作为多囊肾的指标，评估在 药物施用前后的肾脏体积的改变。
[0260] 表8显示由在12周龄（分组时）和24周龄时通过MRI测量的右肾体积计算出的 右肾体积的改变（Amm 3)。在12周龄时的PCK对照大鼠的右肾体积为3595± 162mm3,而到 24周龄时由于囊肿扩大导致其增加大约1.4倍。在接受R-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液的 组中显著抑制了肾脏体积的增大（P〈0. 05)。
[0261] 图10显示在16、20、21和25周龄时测量的血浆托伐普坦浓度。通过在14、15和 20周龄时施用R-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液，PCK大鼠的血浆托伐普坦浓度以稳定的方式 保持直到试验结束（25周龄）。
[0262] 表8 :PCK大鼠的右肾体积的改变（12周龄和24周龄之间的变化）
[0264] 每个值都表示平均值土 SEM。
[0265] 为与对照组比较，使用双尾t-检验。
[0266] 上述结果显示，因为含有晶态光学活性托伐普坦的水悬浮液可在作为多囊肾病模 型动物的pcy小鼠和PCK大鼠中稳定保持血浆托伐普坦浓度，所以可以抑制多囊肾病的发 展。
【主权项】
1. 一种可注射储库制剂，其包含： (1) 含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒；和 (2) 注射剂用制药上可接受的载体。2. 根据权利要求1所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1)中的光学活性托伐普坦 为基本上由R-托伐普坦组成的托伐普坦或基本上由S-托伐普坦组成的托伐普坦。3. 根据权利要求1或2所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1)中的光学活性托伐 普坦的含量为50至100重量％。4. 根据权利要求1至3中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1)基本上由 光学活性托伐普坦组成。5. 根据权利要求1至4中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1)具有大约 0. 2至100ym的平均粒度。6. 根据权利要求1至5中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述注射剂用制药上可 接受的载体（2)包含 (a) 悬浮剂和/或润湿剂 (b) 非必须地，张度剂和/或膨胀剂， (c) 非必须地，缓冲剂， (d) 非必须地，pH调节剂， (e) 非必须地，粘度增强剂，和 (f) 非必须地，防腐剂。7. 根据权利要求6所述的可注射储库制剂，其中，所述悬浮剂为羧甲基纤维素钠和聚 乙烯吡咯烷酮。8. 根据权利要求6或7所述的可注射储库制剂，其中，所述润湿剂为聚山梨醇酯80和 /或泊洛沙姆。9. 根据权利要求1至8中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒⑴含有水溶 性聚合物和/或生物可降解聚合物。10. 根据权利要求9所述的可注射储库制剂，其中，所述水溶性聚合物为选自羟丙基纤 维素、聚乙烯吡咯烷酮和羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯中的至少一种，以及所述生物可 降解聚合物为选自聚乳酸和聚乳酸-聚乙醇酸共聚物中的至少一种。11. 根据权利要求1至10中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述光学活性托伐普 坦为非晶态。12. 根据权利要求1至10中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述光学活性托伐普 坦为晶态。13. 根据权利要求1至12中任一项所述的可注射储库制剂，其进一步包含（3)注射剂 用的水并且为水悬浮液的形式。14. 根据权利要求13所述的可注射储库制剂，其中，在所述水悬浮液中的所述颗粒（1) 中含有的光学活性托伐普坦的浓度为lOOmg/ml至500mg/ml。15. 根据权利要求1至14中任一项所述的可注射储库制剂，其用于多囊肾病的预防或 治疗。16. 根据权利要求1至15中任一项所述的可注射储库制剂，其被肌内或皮下施用。17. 根据权利要求1至16中任一项所述的可注射储库制剂，其被每两周或更久施用一 次。18. -种用于制造可注射储库制剂的方法，所述方法包括混合（1)含有光学活性托伐 普坦作为活性成分的颗粒；和（2)注射剂用制药上可接受的载体。19. 一种用于制造水悬浮液形式的可注射储库制剂的方法，所述方法包括混合（1)含 有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒，（2)注射剂用制药上可接受的载体，和（3)注射 剂用的水。20. -种用于预防或治疗多囊肾病的试剂盒，所述试剂盒包括含有（1)含有光学活性 托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体的容器，和含有（3)注 射剂用的水的容器。21. -种用于预防或治疗多囊肾病的试剂盒，所述试剂盒包括含有（1)含有光学活性 托伐普坦作为活性成分的颗粒的容器，和含有（2)注射剂用制药上可接受的载体和（3)注 射剂用的水的容器。22. -种用于多囊肾病的预防或治疗的可注射储库制剂，所述制剂包含（1)含有光学 活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体。23. -种用作预防或治疗多囊肾病的药物的可注射储库制剂，所述制剂包含（1)含有 光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体。24. (1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的 载体的组合用于制造用于预防或治疗多囊肾病的可注射储库制剂的用途。25. -种预防或治疗多囊肾病的方法，所述方法包括向需要预防或治疗多囊肾病的患 者施用可注射储库制剂，所述制剂包含（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和 (2)注射剂用制药上可接受的载体。
【专利摘要】本发明提供一种肌内或皮下施用的可注射制剂及制造该制剂的方法，所述制剂用于多囊肾病的预防或治疗，并且可长时期保持托伐普坦的治疗有效血药浓度。更具体地，本发明涉及一种可注射储库制剂及制造该制剂的方法，所述制剂包含(1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和(2)注射剂用制药上可接受的载体。
【IPC分类】A61K9/16, A61K9/00, A61K9/14, A61K31/55
【公开号】CN104902874
【申请号】CN201380068094
【发明人】金子大树, 松田贵邦, 宫田宪一, 铃木海, 藤木浩之, 木下静男, 大本浩嗣, 相原美纪
【申请人】大塚制药株式会社
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2013年12月27日
【公告号】CA2894516A1, EP2941242A1, US20150352041, WO2014104412A1
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种可注射储库制剂（depot formulation)以及用于制造该制剂的方 法，所述制剂包含含有光学活性托伐普坦（tolvaptan)的颗粒，并且其适合作为肌内或皮 下施用的储库注射剂。
【背景技术】
[0002] 专利文献1公开了由化学式（I)表示的托伐普坦，其用作具有促排水活性的加压 素拮抗剂（即，7-氯-5-羟基-1- [2-甲基-4- (2-甲基苯甲酰氨基）苯甲酰基]-2, 3, 4, 5-四 氣_1H-本并氣杂卓）。
[0004] 如化学式（I)中所示，托伐普坦含有羟基键合的碳（5-位碳）作为不对称碳。因 此，基于所述不对称碳，托伐普坦具有一对光学异构体（对映体）。在专利文献1中公开的 托伐普坦为外消旋化合物，即，等量的光学异构体（对映体）R-(+) -7-氯-5-羟基-1-[2-甲 基-4- (2-甲基苯甲酰氨基）苯甲酰基]-2, 3, 4, 5-四氢-IH-苯并氮杂卓（以下，可以称为R 型）和S- (-) -7-氯-5-羟基-1- [2-甲基-4- (2-甲基苯甲酰氨基）苯甲酰基]-2, 3, 4, 5-四 氢-IH-苯并氮杂卓（以下，可以称为S型）的混合物；并且具有[a ]2°D=0°的旋光度。 所述外消旋托伐普坦作为在低钠血症或心脏衰竭中抗液体潴留的治疗剂出售。
[0005] 用于制造托伐普坦的光学异构体（R型和S型）的方法在非专利文献1至3中公 开。
[0006] 专利文献2报道了通过喷雾干燥含有托伐普坦和羟丙基纤维素的溶液而获得的 粉末状非晶态固体制剂组合物具有来自肠胃道的托伐普坦的改善的溶解性和改善的可吸 收性。
[0007] 现在，多囊肾病为一种遗传疾病，其中，多个囊肿在肾脏中发展导致慢性肾病 (CKD)。随着所述疾病发展，肾脏发展成肥大，导致需要透析或移植的终末期肾病（ESRD)。加 压素被认为在患有多囊肾病的患者的肾脏中促进抑制肾脏功能的囊肿的生长。托伐普坦， 一种加压素拮抗剂，作为对多囊肾病的有用的治疗剂正引起注意。
[0008] 引用文献列表
[0009] 专利文献
[0010] PTL 1:JP4-154765A
[0011] PTL 2:JP4210355B
[0012] 非专利文献
[0013] NPL I :Heterocycles, 54 (1), 2001, pp. 131-138
[0014] NPL 2:Heterocycles, 56,2002,pp. 123-128
[0015] NPL 3!Tetrahedron:Asymmetry 21, (2010)2390-2393
【发明内容】
[0016] 技术问题
[0017] 如上所述，加压素拮抗剂，托伐普坦，作为对多囊肾病有用的治疗剂正引起注意。 因为当口服施用时，托伐普坦相对迅速地消失，必须每日口服施用高剂量的托伐普坦两次 以稳定地抑制加压素的作用。进一步地，口服施用可引起由于托伐普坦的高血药浓度导致 的过度利尿作用；由于从血液中迅速消失导致的加压素拮抗作用的减少；等。所述高血药 浓度可导致尿频，尤其是夜尿。因此，存在进一步改善患者的生活质量（QOL)的空间。进一 步地，因为患者必须终生服用药物以治疗多囊肾病，从患者的QOL和依从性的角度出发，需 要减少托伐普坦施用的频率。
[0018] 因此，需要一种能够长时期保持托伐普坦的治疗有效血药浓度的储库制剂，以便 改善患有多囊肾病的患者的QOL和依从性，并且提供可靠的治疗效果。尤其是，例如，一种 通过每两周或更久（优选每一至三个月）的肌内或皮下施用能够保持加压素拮抗作用的 储库注射剂可为一种非常有用的制剂来改善患者的QOL和依从性，并且提供可靠的治疗效 果。
[0019] 本发明的目的是提供一种托伐普坦的可注射储库制剂以及制造该制剂的方法，所 述制剂用于多囊肾病的预防或治疗，并且可长时期保持托伐普坦的治疗有效血药浓度。
[0020] 技术方案
[0021] 为达到上述目的，本发明的发明人对肌内或皮下施用的托伐普坦的可注射储库制 剂（特别是，储库注射剂）进行深入研宄。
[0022] 结果表明，当制备并施用外消旋托伐普坦晶体的水悬浮液时，仅可保持低水平的 血清浓度。施用后四周观察施用部位发现大部分的外消旋托伐普坦晶体仍然未吸收。在外 消旋托伐普坦晶体的水悬浮液的情况下，外消旋托伐普坦的吸收量减少，并且保持低血清 浓度；因此，不能预料效果（试验实施例4的（1)、图6的对比实施例8)。
[0023] 但是，本发明的发明人意外地发现，包含含有光学活性托伐普坦（尤其是，R型或 S型）的颗粒和注射剂用制药上可接受的载体的可注射储库制剂可达到上述目的。更具体 地，本发明的发明人发现以下内容。
[0024] (1)发现，在哺乳动物中光学活性托伐普坦具有比外消旋托伐普坦更高的代谢稳 定性。在大鼠中，R型具有比外消旋化合物高的体外代谢稳定性；在人体中，S型具有比外 消旋化合物更高的体外代谢稳定性（试验实施例1，图1的（1)和（2))。
[0025] (2)发现，光学活性托伐普坦的水悬浮液的肌内施用在长时期下比外消旋托伐普 坦的水悬浮液的肌内施用产生更高的托伐普坦血清浓度。在大鼠中，R型比外消旋化合物 产生更高的血清浓度（试验实施例4的（1)和（2)，图6和7)。
[0026] (3)发现，在光学活性托伐普坦的水悬浮液的肌内施用中，施用后四周在施用部位 处的托伐普坦的残留量低于外消旋托伐普坦的残留量。所述残留量表示在所述施用部位未 吸收的托伐普坦的量。以上结果证实，在肌内施用中光学活性托伐普坦的吸收速率比外消 旋托伐普坦的吸收速率快（试验实施例4的（1)和（2)，表3和4)。
[0027] 基于以上发现，本发明的发明人进行了进一步的研宄，并且完成了本发明。
[0028] 本发明提供下列包含光学活性托伐普坦的可注射储库制剂及制造该制剂的方法。
[0029] 第1项、一种可注射储库制剂，其包含：
[0030] (1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒；和
[0031] (2)注射剂用制药上可接受的载体。
[0032] 第2项、根据第1项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒⑴中的光学活性托 伐普坦为基本上由R-托伐普坦组成的托伐普坦（优选R-托伐普坦）或基本上由S-托伐 普坦组成的托伐普坦（优选S-托伐普坦）。
[0033] 第3项、根据第1或第2项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1)中的光学活 性托伐普坦的含量为50至100重量％ (优选65至100重量％，更优选80至100重量％， 还更优选90至100重量％，并且尤其优选100重量％ )。
[0034] 第4项、根据第1至第3项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1) 基本上由光学活性托伐普坦组成。
[0035] 第5项、根据第1至第4项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1) 具有大约0. 2至100 y m (优选0. 5至60 y m，并且更优选1至50 y m)的平均粒度。
[0036] 第6项、根据第1至第5项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述注射剂用 制药上可接受的载体（2)包含
[0037] (a)悬浮剂和/或润湿剂
[0038] (b)非必须地，张度剂（tonicity agent)和 / 或膨胀剂（bulking agent)，
[0039] (c)非必须地，缓冲剂，
[0040] (d)非必须地，pH调节剂，
[0041] (e)非必须地，粘度增强剂，和
[0042] (f)非必须地，防腐剂。
[0043] 第7项、根据第6项所述的可注射储库制剂，其中，所述悬浮剂为羧甲基纤维素钠 和聚乙烯吡咯烷酮。
[0044] 第8项、根据第6或第7项所述的可注射储库制剂，其中，所述润湿剂为聚山梨醇 酯80和/或泊洛沙姆。
[0045] 第9项、根据第1至第8项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1) 含有水溶性聚合物和/或生物可降解聚合物。
[0046] 第10项、根据第9项所述的可注射储库制剂，其中，所述水溶性聚合物为选自羟丙 基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮和羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯中的至少一种，并且所述生 物可降解聚合物为选自聚乳酸和聚乳酸-聚乙醇酸共聚物中的至少一种。
[0047] 第11项、根据第1至第10项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述光学活 性托伐普坦为非晶态。
[0048] 第12项、根据第1至第10项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述光学活 性托伐普坦为晶态。
[0049] 第13项、根据第1至第12项中任一项所述的可注射储库制剂，其中，其进一步包 含（3)注射剂用的水并且为水悬浮液的形式。
[0050] 第14项、根据第13项所述的可注射储库制剂，其中，在所述水悬浮液中的所述颗 粒⑴中含有的光学活性托伐普坦的浓度为lOOmg/ml至500mg/ml。
[0051] 第15项、根据第1至第14项中任一项所述的可注射储库制剂，其用于多囊肾病的 预防或治疗。
[0052] 第16项、根据第1至第15项中任一项所述的可注射储库制剂，将其肌内或皮下施 用。
[0053] 第17项、根据第1至第16项中任一项所述的可注射储库制剂，将其每两周或更久 施用一次。
[0054] 第18项、一种用于制造可注射储库制剂的方法，所述方法包括混合⑴含有光学 活性托伐普坦作为活性成分的颗粒；和（2)注射剂用制药上可接受的载体。
[0055] 第19项、一种用于制造水悬浮液形式的可注射储库制剂的方法，所述方法包括混 合（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒，（2)注射剂用制药上可接受的载体，和 (3)注射剂用的水。
[0056] 第20项、一种用于预防或治疗多囊肾病的试剂盒，所述试剂盒包括含有（1)含有 光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体的容器，和含 有（3)注射剂用的水的容器。
[0057] 第21项、一种用于预防或治疗多囊肾病的试剂盒，所述试剂盒包括含有（1)含有 光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒的容器，和含有（2)注射剂用制药上可接受的载体 和（3)注射剂用的水的容器。
[0058] 第22项、一种用于多囊肾病的预防或治疗的可注射储库制剂，所述制剂包含（1) 含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体。
[0059] 第23项、一种用作多囊肾病的预防或治疗的药物的可注射储库制剂，所述制剂包 含⑴含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和⑵注射剂用制药上可接受的载体。
[0060] 第24项、（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和⑵注射剂用制药上 可接受的载体的组合用于制造用于预防或治疗多囊肾病的可注射储库制剂的用途。
[0061] 第25项、一种用于预防或治疗多囊肾病的方法，所述方法包括向需要预防或治疗 多囊肾病的患者施用一种可注射储库制剂，所述制剂包含（1)含有光学活性托伐普坦作为 活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体。
[0062] 在本说明书中，术语"可注射储库制剂"用于包括不含注射剂用的水的固体形式的 制剂（粉剂、糕剂、颗粒剂等），和包含注射剂用的水的水悬浮液形式的制剂。
[0063] 有益效果
[0064] 本发明的可注射储库制剂具有适合作为光学活性托伐普坦的储库制剂的溶解性 能。通过肌内或皮下施用本发明的可注射储库制剂，可以长时期保持托伐普坦的治疗有效 血药浓度。
[0065] 因此，可以持续抑制为顽固疾病的多囊肾病的发展。更具体地，通过每两周或更 久、优选每 2至12周、并且更优选每2至4周向患有多囊肾病的患者肌内或皮下施用本发 明的可注射储库制剂可以保持或维持托伐普坦的治疗有效血药浓度。
[0066] 本发明的可注射储库制剂不但对多囊肾病的症状具有可靠的治疗和预防作用，还 提供可以每两周或更久施用制剂的方便剂型，并且进一步抑制过度的利尿作用。因此，本发 明的可注射储库制剂有助于患有多囊肾病的患者的QOL的改善，并且在医学上和工业上非 常有用。
[0067] 本发明的包含含有光学活性托伐普坦（尤其是，R型或S型）的颗粒的制剂与包 含含有外消旋托伐普坦的颗粒的制剂相比在以下方面具有显著效果。
[0068] (1)在哺乳动物中光学活性托伐普坦具有比外消旋托伐普坦更高的代谢稳定性。 在大鼠中，R型具有比外消旋化合物更高的体外代谢稳定性；在人体中，S型具有比外消旋 化合物更高的体外代谢稳定性（试验实施例1，图1的（1)和（2))。
[0069] (2)光学活性托伐普坦的水悬浮液的肌内施用或皮下施用比外消旋托伐普坦的水 悬浮液的肌内施用或皮下施用产生更高的托伐普坦血清浓度。在大鼠中，R型显示高血清 浓度（试验实施例4的（1)和（2)，图6和7)。这意味着即使光学活性托伐普坦的剂量与 外消旋托伐普坦的剂量相比是减少的，仍可以保持与外消旋托伐普坦相同水平的治疗有效 血药浓度。长效制剂，当制造时，通常需要以高剂量施用药物。但是，因为光学活性托伐普 坦可以以低剂量保持血药浓度，所以它是非常有用的。
[0070] (3)在光学活性托伐普坦的水悬浮液的肌内施用中，施用后四周在施用部位处的 托伐普坦的残留量低于外消旋托伐普坦的残留量。所述残留量表示在所述施用部位的未吸 收的托伐普坦的量。以上结果意味着，在肌内施用中光学活性托伐普坦的吸收速率比外消 旋托伐普坦的吸收速率快（试验实施例4的（1)和（2)，表3和4)。
[0071] 本发明的包含含有非晶态光学活性托伐普坦（尤其是，R型或S型）的颗粒的制 剂与包含含有非晶态外消旋托伐普坦的颗粒的制剂相比在以下方面是有利的。
[0072] (a)非晶态光学活性托伐普坦的水悬浮液的肌内施用具有高代谢稳定性，其比非 晶态外消旋托伐普坦的水悬浮液的肌内施用产生更高的血清浓度（试验实施例4的（2)，图 7)。这意味着即使光学活性托伐普坦的剂量与外消旋托伐普坦的剂量相比是减少的，仍可 以保持与外消旋托伐普坦相同水平的治疗有效血药浓度。
[0073] (b)非晶态光学活性托伐普坦可以在长时期内稳定地保持比非晶态外消旋托伐普 坦更高的溶解性能（试验实施例2,图2至4)。这是因为非晶态光学活性托伐普坦与非晶 态外消旋托伐普坦相比更不容易结晶，并且因此可保持非晶态。
[0074] 因为即使当使用长时间的、潮湿状态的制造工艺时非晶态光学活性托伐普坦仍可 由此保持非晶态，所以从制造的立场上看，其也是有用的。此外，肌内或皮下施用后，非晶态 光学活性托伐普坦在施用部位不容易结晶，并且因此可以保持高血药浓度。进一步地，非晶 态光学活性托伐普坦，当配制成水悬浮液以在临床环境中给患者施用时，可长时期保持非 晶态；因此，不需要在制备后立即施用所述制剂。
[0075] (C)施用后四周在施用部位的非晶态光学活性托伐普坦的残留量比非晶态外消旋 托伐普坦的残留量低（试验实施例4的（2)，表4)。
[0076] 本发明的包含含有晶态光学活性托伐普坦（尤其是，R型或S型）的颗粒的制剂 与包含含有晶态外消旋托伐普坦的颗粒的制剂相比在以下方面是有利的。
[0077] (i)晶态光学活性托伐普坦的水悬浮液的肌内施用或皮下施用具有高代谢稳定 性，其比晶态外消旋托伐普坦的水悬浮液的肌内施用或皮下施用产生更高的托伐普坦血药 浓度（例如，试验实施例4的（1)，图6)。
[0078] (ii)晶态光学活性托伐普坦可以在长时期内稳定地保持比晶态外消旋托伐普坦 更高的溶解性能。晶态外消旋型的溶解速率下降，而晶态光学活性型的溶解速率稳定地保 持（试验实施例3,图5)。
[0079] 因为即使当使用长时间的、潮湿状态的制造工艺时晶态光学活性托伐普坦也可由 此保持晶态，所以从制造的立场上看，其也是有用的。此外，晶态光学活性托伐普坦的溶解 速率与晶态外消旋托伐普坦的溶解速率相比不下降。进一步地，当将晶态光学活性托伐普 坦配制成水悬浮液以在临床环境中给患者施用时，没有关于所述溶解速率的下降的担忧； 因此，不需要在制备后立即施用所述制剂。
[0080] (iii)施用后四周在施用部位处的晶态光学活性托伐普坦的残留量比晶态外消旋 托伐普坦的残留量低（试验实施例4的（1)，表3)。所述残留量表示在所述施用部位处未 被吸收的托伐普坦的量。以上结果意味着，在肌内施用中晶态光学活性托伐普坦的吸收速 率比晶态外消旋托伐普坦的吸收速率快。此外，相较于晶态外消旋托伐普坦，在晶态光学活 性托伐普坦中可以保持更高的托伐普坦血药浓度。
[0081] 本发明的包含含有晶态光学活性托伐普坦（尤其是，R型或S型）的颗粒的制剂 与包含含有非晶态光学活性托伐普坦的颗粒的制剂相比在以下方面是有利的。
[0082] (I)在晶态光学活性托伐普坦中，没有观察到如在非晶态光学活性托伐普坦中发 现的施用后即刻的高血清浓度（突释（initial burst)等），并且治疗有效血清浓度可以长 时期保持在固定水平。因为血清浓度很少波动，所以可以抑制与高血药浓度相关的过度利 尿（试验实施例4的（3)，图8)。
[0083] (II)晶态光学活性托伐普坦从施用后第14天起比非晶态光学活性托伐普坦产生 更高的血清浓度，并且优选配制成每四周或更久施用的储库注射剂（试验实施例4的（3)， 图8)。
[0084] 证实，本发明的包含含有晶态光学活性托伐普坦（尤其是，R型或S型）的颗粒的 制剂在多囊肾病模型动物中可抑制肾脏重量或肾脏体积的增加，并且可长时期保持不变的 托伐普坦的有效血浆浓度（试验实施例5和6,表7和8,图9和10)。这些结果显示，所述 制剂在包括人类的哺乳动物中对多囊肾病的预防或治疗是有用的。
【附图说明】
[0085] 图1显示试验实施例1中外消旋托伐普坦和光学活性托伐普坦（R型和S型）的 代谢稳定性的试验结果。所述试验使用人类和大鼠的肝脏匀浆（S9组分）。圆形指示R型， 正方形指示S型，并且三角形指示所述外消旋化合物。
[0086] 图2显示在试验实施例2中，对比实施例1至3的含有非晶态外消旋托伐普坦的 喷雾干燥的粉末；和对比实施例7的晶态外消旋托伐普坦的喷磨粉末的溶解试验的结果。
[0087] 图3显示在试验实施例2中，对比实施例4至6的含有非晶态外消旋托伐普坦的 喷雾干燥的粉末；和对比实施例7的晶态外消旋托伐普坦的喷磨粉末的溶解试验的结果。
[0088] 图4显示在试验实施例2中，实施例1和2的含有非晶态光学活性托伐普坦（R型 或S型）的喷雾干燥的粉末；和对比实施例7的晶态外消旋托伐普坦的喷磨粉末的溶解试 验的结果。
[0089] 图5显示在试验实施例3中，R-托伐普坦晶体粉末、S-托伐普坦晶体粉末和对比 实施例7的晶态外消旋托伐普坦的粉末的溶解试验的结果。
[0090] 图6显示当在试验实施例4的（1)中将含有晶态R-托伐普坦颗粒的水悬浮液（实 施例3)和含有晶态外消旋托伐普坦颗粒的水悬浮液（对比实施例8)各自以100mg/kg的 量向雌性大鼠肌内施用时，托伐普坦的血清浓度的曲线。
[0091] 图7显示当在试验实施例4的⑵中将含有非晶态R-托伐普坦粉末的水悬浮液 (实施例1)和含有非晶态外消旋托伐普坦粉末的水悬浮液（对比实施例5)各自以IOOmg/ kg的量向雌性大鼠肌内施用时，托伐普坦的血清浓度的曲线。
[0092] 图8显示当在试验实施例4的（3)中将含有晶态R-托伐普坦颗粒的水悬浮液（实 施例3)和含有非晶态R-托伐普坦粉末的水悬浮液（实施例1)各自以100mg/kg的量向雌 性大鼠肌内施用时，托伐普坦的血清浓度的曲线。
[0093] 图9显示当在试验实施例5中将晶态S-托伐普坦颗粒水悬浮液（实施例5)以 1000mg/kg的量向pcy小鼠（雄性）皮下施用时，托伐普坦的血浆浓度的曲线。
[0094] 图10显示当在试验实施例6中将晶态R-托伐普坦颗粒水悬浮液（实施例6)以 400mg/kg的量向的PCK大鼠（雄性）肌内施用时，托伐普坦的血浆浓度的曲线。
【具体实施方式】
[0095] 1.可注射储库制剂
[0096] 本发明的可注射储库制剂包含（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒 和（2)注射剂用制药上可接受的载体。本发明的可注射储库制剂包括不含有注射剂用的水 的固体形式的制剂（粉剂、糕剂、颗粒剂等），以及含有注射剂用的水的水悬浮液形式的制 剂。
[0097] 以下描述本发明的制剂的各成分。
[0098] (1)含有活件成分的颗粒
[0099] 光学活件托伐普坦
[0100] 本发明的含有活性成分的颗粒含有托伐普坦作为活性成分，并且所述托伐普坦是 光学活性托伐普坦。
[0101] 术语"光学活性托伐普坦"指基本上由R- (+) -7-氯-5-羟基-1- [2-甲基-4- (2-甲 基苯甲酰氨基）苯甲酰基]-2, 3, 4, 5-四氢-IH-苯并氮杂卓（R-托伐普坦）组成的托 伐普坦或基本上由S-(-)-7-氯-5-羟基-1-[2-甲基-4-(2-甲基苯甲酰氨基）苯甲酰 基]-2, 3, 4, 5-四氢-IH-苯并氮杂卓（S-托伐普坦）组成的托伐普坦。
[0102] 基于，例如，非专利文献1、非专利文献2、非专利文献3等的公开内容，可以制造光 学活性托伐普坦。
[0103] 术语"基本上由R-托伐普坦组成的托伐普坦"指可能含有它的对映体（S型）的 托伐普坦，只要达到本发明的效果即可。更具体地，术语"基本上由R-托伐普坦组成的托 伐普坦"指托伐普坦的R-型光学纯度（对映体过量：ee)通常不小于80% ee、优选不小于 90% ee、更优选不小于95% ee、还更优选不小于99% ee、并且尤其优选100% ee。即，光学 纯R-托伐普坦为优选的。
[0104] 术语"基本上由S-托伐普坦组成的托伐普坦"指可能含有它的对映体（R型）的 托伐普坦，只要达到本发明的效果即可。更具体地，术语"基本上由S-托伐普坦组成的托 伐普坦"指托伐普坦的S-型光学纯度（对映体过量 ：ee)通常不小于80% ee、优选不小于 90% ee、更优选不小于95% ee、还更优选不小于99% ee、并且尤其优选100% ee。即，光学 纯S-托伐普坦为优选的。
[0105] 从人体的高吸收性和高代谢稳定性的角度出发，基本上由S-托伐普坦组成的托 伐普坦为优选的，并且S-托伐普坦为更优选的。
[0106] 光学活性托伐普坦包括托伐普坦的酸酐、溶剂化物（例如，水合物、醇化物等）、共 晶等。进一步地，光学活性托伐普坦包括托伐普坦分子中的一个或多个原子由一个或多个 同位素原子取代的那些化合物。同位素原子的例子包括氘（ 2H)、氚（3H)、13C、14N、180等。
[0107] 光学活性托伐普坦可以为晶态的或非晶态的。
[0108] 在"非晶态光学活性托伐普坦"中的术语"非晶态"表示，基于所述颗粒的总托伐普 坦含量，晶态托伐普坦的含量小于10重量％，优选小于5重量％，更优选小于3重量％ ;并 且尤其优选表示没检测到晶态托伐普坦。
[0109] 在"晶态光学活性托伐普坦"中的术语"晶态"表示，基于所述颗粒的总托伐普坦含 量，晶态托伐普坦的含量不小于90重量％，优选不小于95重量％，更优选不小于97重量％; 并且尤其优选表示没检测到非晶态托伐普坦。
[0110] 基于所述颗粒的总托伐普坦含量的晶态托伐普坦的含量可以通过使用分析仪 (如X射线衍射仪、差示扫描量热仪（DSC)、近红外线（NIR)分光计、微量热仪、拉曼光谱仪 或者太赫分光计）测量所述颗粒来测定。
[0111] 颗粒
[0112] 所述含有活性成分（即，光学活性托伐普坦）的颗粒包括含有光学活性托伐普坦 和一种或多种其他成分的颗粒，以及基本上由光学活性托伐普坦组成的颗粒（包括由光学 活性托伐普坦组成的颗粒）。
[0113] 其他成分的例子包括加入以控制光学活性托伐普坦从所述颗粒的释放速率的那 些成分。其他成分的例子包括水溶性聚合物和/或生物可降解聚合物。
[0114] 水溶性聚合物的例子包括聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、羟丙基纤维素（HPC)、羟丙基甲 基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP)、羟丙基甲基纤维素（HPMC)、甲基丙烯酸共聚物L、甲基纤 维素（MC)等。优选的水溶性聚合物为羟丙基纤维素（HPC)、聚乙烯吡咯烷酮（PVP)和羟丙 基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP)。
[0115] 生物可降解聚合物的例子包括聚乳酸、聚乙醇酸、聚已酸内酯、聚碳酸酯、聚酯酰 胺、聚酐、聚氨基酸、聚原酸酯、聚氰基丙烯酸酯、聚（对二氧杂环己酮）、聚亚烷基草酸酯、 生物可降解的聚氨酯、它们的混合物和它们的共聚物。如果所述聚合物含有不对称碳原子， 则构成所述聚合物的单体可为D-型、L-型或DL-型中的任意一种。L-型为优选的。优选 的生物可降解聚合物为聚乳酸和聚乳酸-聚乙醇酸共聚物。
[0116] 在所述颗粒中光学活性托伐普坦与所述水溶性聚合物和/或所述生物可降解聚 合物的重量比通常为1:0至1:4,进一步为4:1至1:4,此外为4:1至1:2,并且尤其为2:1 至1:1。特别地，适合的是在所述颗粒中所述光学活性托伐普坦与所述水溶性聚合物和/或 所述生物可降解聚合物的重量比为1:0。
[0117] 在所述含有光学活性托伐普坦的颗粒中的光学活性托伐普坦的含量通常为50至 1〇〇重量％，优选65至100重量％，更优选80至100重量％，还更优选90至100重量％，并 且尤其优选100重量％。
[0118] 在所述基本上由光学活性托伐普坦组成的颗粒中的光学活性托伐普坦的含量通 常为80至100重量％，优选90至100重量％，更优选95至100重量％，还更优选98至100 重量％，并且尤其优选100重量％。
[0119] 所述含有光学活性托伐普坦的颗粒的平均粒度通常可设置成0. 2至100 ym，优选 0. 5至60 y m，并且更优选1至50 y m。所述颗粒的平均粒度是体积平均直径，并且可以使用 激光衍射粒度分布仪测定。
[0120] 尤其是，含有非晶态光学活性托伐普坦的颗粒通常通过在有机溶剂中溶解光学活 性托伐普坦和（如果需要）水溶性聚合物和/或生物可降解聚合物然后喷雾干燥所述混 合物来制备。因此，所述颗粒通常具有球形形状。所述颗粒的平均粒度可以通过适当改变 所述喷雾干燥法的条件设置在所需的范围内（〇. 2至100 ym，优选2至60 ym，更优选4至 50 y m) 〇
[0121] 含有晶态光学活性托伐普坦的颗粒，例如，通过重结晶基于非专利文献1至3等合 成的光学活性托伐普坦来制备。通过已知的粉碎法（优选湿粉碎）制备所述颗粒以便具有 所需的平均粒度。所述颗粒的平均粒度可以通过适当改变所述粉碎的条件设置在所需范围 内（0? 2至100 y m，优选0? 5至30 y m，更优选1至10 y m)。
[0122] 与当使用含有晶态外消旋托伐普坦的颗粒（对比实施例7)时相比较，当使用含有 非晶态光学活性托伐普坦的颗粒时（实施例1和2)，可以长时期保持高溶解性能（试验实 施例2，图4)，并且在肌内施用或皮下施用中，可以长时期保持高血药浓度（例如，试验实施 例4的⑴和（2)，图6和7,实施例1和对比实施例8)。这使得能够在多囊肾病中有效地 抑制囊肾的发展。
[0123] 特别地，需要注意的是，非晶态光学活性托伐普坦与非晶态外消旋托伐普坦相比 可长时期保持更高的溶解性能。更具体地，在图2至4中显示的溶解试验结果显示出，在实 施例I (R型）和实施例2 (S型）的制剂的情况下，在溶解开始后长时期保持高溶解量（140 小时，大约6天），而在对比实施例1至6 (外消旋化合物）的情况下，在相对短时期内，所述 溶解量显著降低。这被认为是因为实施例1和2的非晶态光学活性托伐普坦比非晶态外消 旋托伐普坦更不容易结晶，并且因此可以保持所述高溶解量。因此，在所述含有非晶态光学 活性托伐普坦的颗粒中的非晶态光学活性托伐普坦从制造制剂的角度来看是有用的，因为 即使在包括花费相对长时期的潮湿状态的步骤（例如，湿粉碎）的工艺中，它仍可保持非晶 态。此外，因为在所述施用后，所述非晶态光学活性托伐普坦不太容易结晶，所以在肌内或 皮下施用中可以保持高血药浓度。进一步地，所述非晶态光学活性托伐普坦，当配制成水悬 浮液以在临床环境中给患者施用时，还可长时期保持非晶态，并且因此为临床上有用的。
[0124] 应当注意的是，晶态光学活性托伐普坦（R型或S型）具有比晶态外消旋托伐普坦 (对比实施例7)更稳定的溶解性能（图5)。还应当注意的是，与使用晶态外消旋托伐普坦 时比较，当在肌内施用或皮下施用中使用具有优异的吸收性和代谢稳定性的晶态光学活性 托伐普坦时，可以长时期保持高血药浓度（例如，图6,实施例3和对比实施例8)。这使得 能够在多囊肾病中有效抑制囊肾的发展。此外，与在非晶态外消旋托伐普坦和非晶态光学 活性托伐普坦中不同，在晶态光学活性托伐普坦中，没有观察到施用后即刻的高血药浓度 (突释）；并且可以长时期保持治疗有效血药浓度（例如，试验实施例4的图7和8)。这抑 制过度利尿作用。因此，晶态光学活性托伐普坦对于患者的QOL和依从性是有用的。
[0125] 进一步地，因为晶态光学活性托伐普坦在所述晶态中可天生地长时期保持优异的 血药浓度，所以不需要考虑在水悬浮液中从非晶态结晶的问题。因此，晶态光学活性托伐普 坦在临床上非常优异的可操纵性方面是有利的。进一步地，与外消旋托伐普坦晶体相比较， 光学活性托伐普坦晶体未显示溶解速率的降低。因此，因为可以长时期保持所述晶态形式， 所以血药浓度的波动小，并且可以长时期保持治疗有效血药浓度。
[0126] (2)注射剂用制药h可接#的裁体
[0127] 所述注射剂用制药上可接受的载体用于将所述含有活性成分（即，光学活性托伐 普坦）的颗粒配制到水悬浮液中。所述注射剂用的载体通常包括（a)悬浮剂和/或润湿剂， (b)非必须地，张度剂和/或膨胀剂，（c)非必须地，缓冲剂，（d)非必须地，pH调节剂，（e) 非必须地，粘度增强剂，和（f)非必须地，防腐剂。
[0128] 所述悬浮剂和/或润湿剂（a)对在水中悬浮所述光学活性托伐普坦是必需的。
[0129] 适合的悬浮剂的例子包括羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基 乙基纤维素、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮等。它 们可以单独使用，或以两种或多种的结合的方式使用。尤其是，羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡 咯烷酮的结合是优选的。
[0130] 基于可注射制剂（含有注射剂用的水的水悬浮液）的总体积，含有的悬浮剂的量 通常在大约0. 1至大约10w/v%的范围内，并且优选大约0. 2至大约5w/v%的范围内。
[0131] 适合的润湿剂的例子包括各种表面活性剂（包括非离子和离子型表面活性剂）， 如凝胶、卵磷脂（磷脂）、山梨糖醇酯、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯 山梨糖醇脂肪酸醋（例如，市售的Tweens(注册商标）；例如，Tween 20(注册商标）和 Tween 80(注册商标，聚山梨醇醋80) (ICI Specialty Chemicals))、泊洛沙姆（例如， Pluronic F-68 (注册商标）和Pluronic F-108 (注册商标），其为环氧乙烧和环氧丙烷的 嵌段共聚物）；和泊洛沙胺（poloxamines)(泊洛沙姆的乙二胺衍生物）（例如，Tetronic 908 (注册商标），还称为Poloxamine 908 (注册商标），其为源于向乙二胺顺序加成环氧丙 烧和环氧乙烧的四官能嵌段共聚物（BASF Wyandotte Corporation, Parsippany, N. J.))。 它们可以单独使用，或以两种或多种结合的方式使用。尤其是，聚山梨醇酯80和泊洛沙姆 为优选的。
[0132] 基于可注射制剂的总体积，含有的润湿剂的量通常在大约0. 01至大约5w/v%的 范围内，并且优选大约〇. 1至大约2w/v%的范围内。
[0133] 如需要，注射剂用的载体可包含（b)张度剂和/或膨胀剂。张度剂的例子包括氯化 钠、氯化钾、甘露醇、蔗糖、乳糖、麦芽糖、木糖醇、葡萄糖、山梨糖醇等。它们可以单独使用， 或以两种或多种结合的方式使用。
[0134] 当所述注射剂用的载体包含张度剂和/或膨胀剂时，基于可注射制剂的总体积， 含有的张度剂和/或膨胀剂的量通常在大约〇. 2至大约12w/v%的范围内，并且优选在大约 0. 5至大约10w/v%的范围内。
[0135] 如需要，所述注射剂用的载体可包含（C)缓冲剂。本发明中适合的缓冲剂的例子 包括柠檬酸钠、酒石酸钠、钠磷酸盐、钾磷酸盐、Tris缓冲剂等。它们可以单独使用，或以两 种或多种结合的方式使用。尤其是，钠磷酸盐（尤其是磷酸二氢钠）为优选的。
[0136] 当所述注射剂用的载体包含缓冲剂时，含有的缓冲剂的量为足够将使用时制备的 水悬浮液的pH调节到大约6至大约8,并且优选到大约7的量。为了达到该pH，基于可注 射制剂的总重，所述缓冲剂根据类型通常以大约〇. 02至大约2重量％，优选大约0. 03至大 约1重量％，并且更优选大约0. 1重量％的范围内的量使用。
[0137] 如需要，所述注射剂用的载体可包含（d)pH调节剂。所述pH调节剂以足够将在使 用时制备的水悬浮液的PH调节在大约6至大约8的范围内，并且优选到大约7的量使用； 并且根据是否必须升高或降低所述托伐普坦的水悬浮液的PH来调节所述pH至所需的大约 7的中性pH，所述pH调节剂可为碱或酸。因此，当必须降低所述pH时，可以使用酸性pH调 节剂（如盐酸、磷酸和醋酸，优选盐酸）。当必须升高所述PH时，可以使用碱性pH调节剂 (如氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钙、氧化镁和氢氧化镁，优选氢氧化钠）。
[0138] 如需要，所述注射剂用的载体可包含（e)粘度增强剂。粘度增强剂的例子包括羧 甲基纤维素钠等。
[0139] 如需要，所述注射剂用的载体可包含（f)防腐剂。防腐剂的例子包括：季铵盐， 如苯扎氯铵和苄索氯铵；阳离子化合物，如葡萄糖酸氯己定；对羟基苯甲酸酯，如对羟基苯 甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯；醇化合物，如氯丁醇和苄醇；脱氢醋酸 纳；硫采撒等。
[0140] 本发明提供一种可注射储库制剂，其包含（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成 分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体（以及如需要，另外的（3)注射剂用的水）， 用于多囊肾病的预防或治疗。
[0141] 本发明提供（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药 上可接受的载体（以及如需要，另外的（3)注射剂用的水）的组合在制造预防或治疗多囊 肾病的可注射储库制剂中的用途。
[0142] 本发明还提供预防或治疗多囊肾病的方法，其包括向需要预防或治疗多囊肾病的 患者施用包含（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接 受的载体（以及如需要，另外的⑶注射剂用的水）的可注射储库制剂。
[0143] 2.本发明的制剂的制各
[0144] 本发明的可注射储库制剂可以通过混合（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成 分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体来制备。
[0145] 本发明的水悬浮液形式的可注射储库制剂可以通过混合（1)含有光学活性托伐 普坦作为活性成分的颗粒，（2)注射剂用制药上可接受的载体，和（3)注射剂用的水来制 备。
[0146] 在以上各方法中，在所述颗粒（1)中含有的光学活性托伐普坦的量可为治疗有效 量，并且可根据目 的适当调节。
[0147] 含有非晶态光学活性托伐普坦的颗粒可以如下制备：例如，在有机溶剂中溶解光 学活性托伐普坦和，如需要的话，水溶性聚合物和/或生物可降解聚合物；蒸馏出所述有机 溶剂；并获得粉末。选择可溶解各成分并且可容易地蒸馏出来的有机溶剂。有机溶剂的例 子包括二氯甲烷，和二氯甲烷和醇（甲醇或乙醇）的混合溶剂。具有所需粒度分布的颗粒 可以通过喷雾干燥所制得的溶液来制造。例如，根据在专利文献2 (JP4210355B)中描述的 方法，可以进行制造所述颗粒的方法。
[0148] 含有晶态光学活性托伐普坦的颗粒（尤其是，基本上由晶态光学活性托伐普坦组 成的颗粒）可以如下制备：例如，重结晶光学活性托伐普坦，并将所述重结晶的光学活性托 伐普坦粉碎成粉末。制造所述颗粒的方法可以，例如，使用通常使用的干磨机（喷磨机、锤 磨机等）进行。作为制造所述颗粒的方法的其他例子，可以提及控制结晶的方法等。例如， 所述颗粒可以如下制备：在有机溶剂（良溶剂）中溶解托伐普坦，接着用不良溶剂（如水） 沉淀。含有晶态光学活性托伐普坦和一种或多种其他成分（例如，上述水溶性聚合物和/ 或生物可降解聚合物）的颗粒可以如下制备：例如，在晶态光学活性托伐普坦的颗粒几乎 不能溶解的溶剂中溶解所述一种或多种其他成分，在所述溶液中悬浮晶态光学活性托伐普 坦的颗粒，并且湿粉碎所述颗粒。优选使用湿粉碎技术，如湿式球磨、高压均化和高剪切均 化。除这些粉碎技术之外，还可以使用低能或高能研磨机（例如，辊磨机）。所述含有晶态 光学活性托伐普坦和一种或多种其他成分的颗粒可以通过喷雾干燥所述悬浮液来制备。
[0149] 本发明的固体形式的可注射储库制剂可以通过以预定比例混合所述颗粒（1)和 所述注射剂用制药上可接受的载体（2)来制备。
[0150] 当本发明的可注射储库制剂为水悬浮液形式时，其通常可以通过以预定比例混合 所述颗粒（1)，所述注射剂用制药上可接受的载体（2)，和注射剂用的水（3)来制备。
[0151] 例如，所述水悬浮液还可以通过混合所述颗粒（1)和含有所述注射剂用制药上可 接受的载体（2)和注射剂用的水（3)的水溶液来制备。
[0152] 更具体地，例如，含有注射剂用制药上可接受的载体（2)和注射剂用的水（3)的水 溶液与包封入容器（如管形瓶）中的含有光学活性托伐普坦的无菌颗粒（1)混合；随后，将 如此获得的混合物例如，剧烈震荡、用涡旋搅拌器搅拌、或进行超声照射，由此制备均质水 悬浮液。均质水悬浮液还可以如下制备：提供两个无菌注射器，将含有光学活性托伐普坦的 无菌颗粒（1)封装在所述注射器中的一个中，将含有注射剂用制药上可接受的载体（2)和 注射剂用的水（3)的水溶液放置在另一个注射器中，由连接器连接所述两个注射器，并且 进行反复抽吸。在使用时，可以使用以上方法中的任意一种来制备水悬浮液。
[0153] 当使用上述制备方法中的任意一种时，本发明的制剂可为，例如，用于预防或治疗 多囊肾病的试剂盒的形式，所述试剂盒包括含有（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分 的颗粒的容器和含有（2)注射剂用制药上可接受的载体和（3)注射剂用的水的容器。
[0154] 作为另一个例子，所述水悬浮液可以如下制备：在使用时，向不包含注射剂用的水 (3)的固体形式的制剂（即，包含所述颗粒⑴和所述注射剂用制药上可接受的载体⑵的 固体制剂）中加入注射剂用的水（3)。
[0155] 当使用上述制备方法时，本发明的制剂可为，例如，用于预防或治疗多囊肾病的试 剂盒的形式，所述试剂盒包括：包含（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2) 注射剂用制药上可接受的载体的容器，和含有（3)注射剂用的水的容器。
[0156] 作为上述成分和含有的它们的用量，可以使用在以上"1.可注射储库制剂"部分中 描述的所述成分和用量（包括预定比例等）。
[0157] 3.施用方法（用法和剂量）
[0158] 本发明的可注射储库制剂可以用于多囊肾病的预防或治疗。所述制剂如下制备： 在无菌条件下混合（1)含有光学活性托伐普坦的颗粒，（2)注射剂用制药上可接受的载体， 和（3)注射剂用的水以制造均质水悬浮液，在此之后，所述制剂可以经注射向需要预防或 治疗多囊肾病的患者肌内或皮下施用。所述水悬浮液还可在使用时制造。
[0159] 与含有非晶态外消旋托伐普坦的颗粒不同，当所述颗粒（1)含有非晶态光学活性 托伐普坦时，结晶不容易发生在所述水悬浮液中（试验实施例2,图2至4);因此，可长时期 保持高溶解量。因此，由于在制备托伐普坦水悬浮液后的时期，例如，在医院的配药部门到 向患者施用期间，含有包括非晶态光学活性托伐普坦的颗粒的制剂确保足够的稳定性，所 以它是临床上极其有用的。进一步地，因为结晶不容易发生在施用位置，与非晶态外消旋托 伐普坦相比，可以长时期保持高血药浓度。
[0160] 当所述颗粒（1)包括晶态光学活性托伐普坦时，因为所述光学活性托伐普坦初始 为晶态，所以不需要考虑在所述水悬浮液中托伐普坦的非晶态至晶态转变的问题。因此，该 颗粒具有临床上极其容易处理的优点。所述晶态光学活性托伐普坦临床上极其容易处理， 因为与外消旋晶体相比较，其不显示溶解速率降低（试验实施例3,图5)。此外，因为所述 晶态光学活性托伐普坦可在施用后长时期保持晶态，与非晶态光学活性托伐普坦相比较， 血清浓度的改变小（试验实施例4(3)和图8)，并且与外消旋晶体相比较，可以长时期保持 高血清浓度。由于此原因，光学活性托伐普坦晶体为最优选的（试验实施例4(1)和图6)。
[0161] 当本发明的可注射储库制剂为水悬浮液时，在所述水悬浮液中含有的托伐普坦的 量（浓度）没有特别限制，只要其为治疗有效量即可。治疗有效量表示改善临床症状的量。 在所述水悬浮液中的光学活性托伐普坦的量（浓度）优选调节至lOOmg/mL至500mg/mL的 范围内，并且更优选200mg/mL至400mg/mL的范围内。向患者肌内或皮下施用的水悬浮液 的量每次通常为0. 5mL至6mL，并且优选ImL至3mL。
[0162] 上述光学活性托伐普坦的量还表示在通过用注射剂用的水构成所述固体制剂而 制备的水悬浮液中的托伐普坦的量。
[0163] 实际上使用所述剂量取决于病人。例如，当每两周施用制剂时，托伐普坦优选在一 或两次施用中以100至1000 mg的剂量施用；并且当每四周施用制剂时，托伐普坦优选在一 或两至4次施用中以200至2000mg的剂量施用。当每八周施用制剂时，托伐普坦优选在一 或两至4次施用中以400至4000mg的剂量施用；并且当每12周施用制剂时，托伐普坦优选 在一或两至4次施用中以600至6000mg的剂量施用。当以较长施用间隔施用制剂时，所述 颗粒（1)优选为含有晶态光学活性托伐普坦的颗粒，因为可以长时期保持高血药浓度。
[0164] 有两种光学活性托伐普坦，即，R型和S型。例如，当向大鼠或兔子施用含有R-托 伐普坦的颗粒时，和当向狗或人施用含有S-托伐普坦的颗粒时，与当使用含有外消旋化合 物的颗粒相比较，可以保持高血药浓度，使得可以减少剂量。通常，因为已知在施用部位的 局部刺激取决于单次剂量，所以单次剂量的减少可降低在施用部位的局部刺激。进一步地， 因为晶态S-托伐普坦在人体中具有高代谢稳定性，所以可以保持有效血药浓度不变，这是 优选的。
[0165] 实施例
[0166] 现在将用以下实施例详细描述本发明。但是，本发明不局限于此或由此限制。
[0167] 实施例1 (含有33% HPC-SL的R-托伐普坦喷雾干燥（SD)粉末的制各）
[0168] 在二氯甲烷（1055mL)和乙醇（455mL)中溶解R-托伐普坦晶体（100. 6g，由日本 大冢制药株式会社（Otsuka pharmaceutical Co. ,Ltd.)制造）和轻丙基纤维素（50. 3g， 即051^，由日本曹达株式会社（附??〇115〇(1&(：〇.，1^(1.)制造）。使用喷雾干燥器（?111"8 GB21，由日本大和科学株式会社（Yamato Scientific Co.，Ltd.)制造），在L 6至I. 7kg/ cm2的喷射压、60°C的加热器温度和10至15g/min的液体发送速度下喷雾干燥所述溶液。所 制备的喷雾干燥粉末在减压条件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅观察到光 晕峰。因此，确定所制备的粉末为非晶态。
[0169] 将所述R-托伐普坦SD粉末（300mg)装入注射器中，并且将以下（表1)显示的 介质溶液（〇.76g)装入另一个注射器中。所述两个注射器经连接器连接。重复进行抽吸 来制备200mg/mL的均质非晶态R-托伐普坦水悬浮液。根据湿法使用激光衍射粒度分布 仪（SALD-3000J，由岛津（Shimadzu)公司制造）测量的R-托伐普坦SD粉末的平均粒度为 5. 8 y m〇
[0170] 表1介质溶液的组成（每mL的制剂）
[0172] 实施例2 (含有33% HPC-SL的S-托伐普坦喷雾干燥（SD)粉末的制各）
[0173] 在二氯甲烷（1050mL)和乙醇（455mL)中溶解S-托伐普坦晶体（100. 3g，由日本大 冢制药株式会社制造）和羟丙基纤维素（50.3g，HPC-SL，由日本曹达株式会社制造）。使用 喷雾干燥器（Pulvis GB21，由日本大和科学株式会社制造），在I. 7kg/cm2的喷射压、60°C 的加热器温度和10至15g/min的液体发送速度下喷雾干燥所述溶液。所制备的喷雾干燥 粉末在减压条件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅观察到光晕峰。因此，确定 所制备的粉末为非晶态。
[0174] 将所述S-托伐普坦SD粉末（300mg)装入注射器中，并且将实施例1的介质溶液 (0.76g)(表1)装入另一个注射器中。所述两个注射器经连接器连接。重复进行抽吸来制 备200mg/mL的均质非晶态S-托伐普坦水悬浮液。
[0175] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的S-托 伐普坦SD粉末的平均粒度为6. 2 y m。
[0176] 实施例3 (R-托伐普坦晶体颗粒制剂）
[0177] 在实施例1的介质溶液（表1) (8. 3g)(等于IOmL)中悬浮R-托伐普坦晶体（2.0g， 由日本大冢制药株式会社制造）。向所述悬浮液中加入直径为1.5mm的氧化锆珠粒。将搅 拌棒引入容器中，并且使用搅拌器进行搅拌来进行珠粒粉碎（湿粉碎），由此制备200mg/mL 的均质R-托伐普坦晶体水悬浮液。根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛 津公司制造）在超声照射期间测量的R-托伐普坦晶体颗粒的平均粒度为2. 5 y m。
[0178] 实施例4 (S-托伐普坦晶体颗粒制剂）
[0179] 在实施例1的介质溶液（表1) (8. 3g)(等于IOmL)中悬浮S-托伐普坦晶体（2. 0g， 由日本大冢制药株式会社制造）。向所述悬浮液中加入直径为1.5mm的氧化锆珠粒。将搅 拌棒引入容器中，并且使用搅拌器进行搅拌来进行珠粒粉碎（湿粉碎），由此制备200mg/mL 的均质S-托伐普坦晶体水悬浮液。根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛 津公司制造）在超声照射期间测量的S-托伐普坦晶体颗粒的平均粒度为2. 5 y m。
[0180] 对比实施例1 (外消旋托伐普坦喷雾干燥（SD)粉末的制各）
[0181] 在二氯甲烷（150mL)和乙醇（30mL)中溶解托伐普坦（外消旋化合物）晶体（20g， 由日本大冢制药株式会社制造）。使用喷雾干燥器（Pulvis GB22,由日本大和科学株式会 社制造），在0.1 MPa的喷射大气压、80°C的干燥温度、0. 45m3/min的气流和40mL/min的液 体发送速度下喷雾干燥所述溶液。所制备的喷雾干燥粉末在减压条件下干燥。在所制备粉 末的粉末X射线衍射中，仅观察到光晕峰。因此，确定所制备的粉末为非晶态。
[0182] 根据湿法 使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的外消 旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为5. I ym。
[0183] 对比实施例2 (含有33% PLGA的外消旋托伐普坦SD粉末的制各）
[0184] 在二氯甲烷（IOOmL)和乙醇（20mL)中溶解托伐普坦（外消旋化合物）晶体（10g， 由日本大冢制药株式会社制造）以及DL乳酸和乙醇酸的共聚物（5g) (PLGA-5005,由日本和 光纯药工业株式会社（Wako Pure Chemical Industries)制造）。使用喷雾干燥器（Pulvis GB22,由日本大和科学株式会社制造），在0.1 MPa的喷射大气压、80°C的干燥温度、0. 44m3/ min的气流和40mL/min的液体发送速度下喷雾干燥所述溶液。所制备的喷雾干燥粉末在减 压条件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅观察到光晕峰。因此，确定所制备的 粉末为非晶态。
[0185] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的含有 33%PLGA的外消旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为5.Iym。
[0186] 对比实施例3(含有33% PVP-17PF的外消旋托伐普坦SD粉末的制各）
[0187] 在二氯甲烷（IOOmL)和乙醇（20mL)中溶解托伐普坦（外消旋化合物）晶体（10g， 由日本大冢制药株式会社制造）和聚乙烯吡咯烷酮（5g，PVP-17PF，由BASF有限公司制 造）。使用喷雾干燥器（Pulvis GB22,由日本大和科学株式会社制造），在0.1 MPa的喷射 大气压、80°C的干燥温度、0. 41m3/min的气流和7mL/min的液体发送速度下喷雾干燥所述溶 液。所制备的喷雾干燥粉末在减压条件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅观 察到光晕峰。因此，确定所制备的粉末为非晶态。
[0188] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的含有 33% PVP-17PF的外消旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为7. 2 ym。
[0189] 对比实施例4(含有33% HP-55的外消旋托伐普坦SD粉末的制各)
[0190] 在二氯甲烷（150mL)和乙醇（30mL)中溶解托伐普坦（外消旋化合物）晶体（10g， 由日本大冢制药株式会社制造）和羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（5g)(由信越化学工业 株式会社（Shin-Etsu Chemical Co. ,Ltd.)制造的HP-55)。使用喷雾干燥器（Pulvis GB22， 由日本大和科学株式会社制造），在0.1 MPa的喷射大气压、80°C的干燥温度、0. 41m3/min的 气流和40mL/min的液体发送速度下喷雾干燥所述溶液。所制备的喷雾干燥粉末在减压条 件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅观察到光晕峰。因此，确定所制备的粉末 为非晶态。
[0191] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的含有 33% HP-55的外消旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为5. 5 ym。
[0192] 对比实施例5 (含有33% HPC-SL的外消旋托伐普坦SD粉末的制各）
[0193] 在二氯甲烷（IOOmL)和乙醇（30mL)中溶解托伐普坦（外消旋化合物）晶体 (l〇g，由日本大冢制药株式会社制造）和羟丙基纤维素（5g)(由日本曹达株式会社制造的 HPC-SL)。使用喷雾干燥器（Pulvis GB22,由日本大和科学株式会社制造），在0.1 MPa的喷 射大气压、80°C的干燥温度、0. 39m3/min的气流和7mL/min的液体发送速度下喷雾干燥所述 溶液。所制备的喷雾干燥粉末在减压条件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅 观察到光晕峰。因此，确定所制备的粉末为非晶态。
[0194] 将含有33% HPC-SL的外消旋托伐普坦SD粉末（300mg)装入注射器中，并且将所 述实施例1的介质溶液（〇. 76g)(表1)装入另一个注射器中。所述两个注射器经连接器连 接。重复进行抽吸来制备200mg/mL的均质非晶态外消旋托伐普坦水悬浮液。
[0195] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的含有 33% HPC-SL的外消旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为6. 6 ym。
[0196] 对比实施例6 (外消旋托伐普坦SD粉末的制各）
[0197] 在二氯甲烷（IOOmL)和乙醇（20mL)中溶解托伐普坦（外消旋化合物）晶体（10g， 由日本大冢制药株式会社制造）。使用喷雾干燥器（0DT-8喷雾干燥器，由日本大川原化 工机株式会社（Ohkawara Kakohki Co. ,Ltd.)制造）喷雾干燥所述溶液（转盘喷雾器、 13000rpm的转速、0/1kg/cm2的吹扫气压、90 °C热空气进口温度、180g/min的液体发送速 度）。所制备的喷雾干燥粉末在减压条件下干燥。在所制备粉末的粉末X射线衍射中，仅观 察到光晕峰。因此，确定所制备的粉末为非晶态。
[0198] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的外消 旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为32. 5 y m。
[0199] 对比实施例7 (外消旋托伐普坦晶体的喷磨粉末的制各）
[0200] 在5kgf/cm2的气压和20rpm的发送速度下，使用喷磨机（PJM-100SP，由Nippon Pneumatic Mfg. Co.，Ltd?制造）粉碎托伐普坦（外消旋化合物）晶体（由日本大冢制药株 式会社制造）。进行所制备粉末的粉末X射线衍射，并且确定所述托伐普坦晶体被保持。
[0201] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）测量的外消 旋托伐普坦SD粉末的平均粒度为2. 4 y m。
[0202] 对比实施例8 (外消旋托伐普坦晶体颗粒的制各）
[0203] 在实施例1的介质溶液（8. 3g)(等于IOmL)(表1)中悬浮托伐普坦（外消旋化合 物）晶体（2. Og)。向所述悬浮液中加入直径为I. 5mm的氧化锆珠粒（IOg)。将搅拌棒引入 容器中，并且使用搅拌器进行搅拌来进行珠粒粉碎（湿粉碎），由此制备200mg/mL的均质外 消旋托伐普坦晶体水悬浮液。
[0204] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）在超声照射 期间测量的外消旋托伐普坦晶体颗粒的平均粒度为2. 4 y m。
[0205] 试骀实施例1
[0206] 使用人和大鼠肝脏匀浆（S9部分），进行托伐普坦（外消旋化合物）、R_托伐普 坦和S-托伐普坦的体外代谢稳定性试验。将各评估的化合物的浓度设置为100nM，并且在 反应混合物中各化合物的浓度取样随时间进行，即，加入后5、10、30和60分钟，并且通过 LC-MS/MS来测量（图I (1)和⑵）。
[0207] 结果显示，在人体中，与托伐普坦（外消旋化合物）或R-托伐普坦相比较，S-托 伐普坦缓慢消失，并且具有高代谢稳定性（图1(1));以及在大鼠中，与托伐普坦（外消旋 化合物）或S-托伐普坦相比较，R-托伐普坦缓慢消失（图1 (2))。
[0208] 试骀实施例2
[0209] 进行实施例1和2的R-和S-托伐普坦SD粉末、对比实施例1至6的托伐普坦 (外消旋化合物）SD粉末和对比实施例7的托伐普坦（外消旋化合物）晶体粉末中的每一 个的溶解试验（图2至4)。在所述溶解试验方法中，以0.1 g的单个量称出所述R-和S-托 伐普坦SD粉末、托伐普坦（外消旋化合物）SD粉末和托伐普坦（外消旋化合物）晶体粉末， 然后加入至表2中显示的用于溶解试验的溶液（500mL)中。以上称重的量的托伐普坦都没 有溶解在所述用于溶解试验的溶液中，并且完全悬浮。在加入后〇. 〇83、0. 167、0. 5、1、2、4、 6、8、12、24、48和144小时进行顺序取样。
[0210] 表2用于溶解试验的溶液的组成
[0212] 结果显示，对比实施例7的托伐普坦（外消旋化合物）晶体的溶解量自开始就显 著低。对比实施例1至6的非晶态托伐普坦（外消旋化合物）在溶解试验开始后数小时显 示高浓度。此后，所述溶解量在10小时内突然下降，然后降低至与所述托伐普坦（外消旋 化合物）晶体的溶解量相同的水平。实施例1和2的R-托伐普坦SD粉末和S-托伐普坦 SD粉末在溶解试验开始之后的至少144小时之内未显示溶解量的显著下降。
[0213] 试骀实施例3
[0214] 进行R-和S-托伐普坦晶体粉末中每一个的溶解试验（图5)。作为对照，标绘在以 上试验实施例2中的对比实施例7的结果。在所述溶解试验方法中，以0.1 g的量称重R-托 伐普坦晶体粉末（平均粒度：34. 0 y m)或S-托伐普坦晶体粉末（平均粒度：35. 8 y m)，然 后加入到以上在表2中显示的用于溶解试验的溶液（500mL)中。以上称重的量的托伐普坦 都没有溶解在所述用于溶解试验的溶液中，并且完全悬浮。在加入后〇. 〇83、0. 167、0. 5、1、 2、4、6、8、12、24和48小时进行顺序取样。
[0215] 结果显示，尽管对比实施例7的托伐普坦（外消旋化合物）晶体的溶解量在试验 开始之后即刻稍微高，但此后，溶解速率立即减小。2小时后，R-托伐普坦晶体和S-托伐普 坦晶体的溶解量稍高于对比实施例7的托伐普坦（外消旋化合物）晶体的溶解量，并且保 持相当稳定。在溶解试验开始之后的至少48小时之内没有观察到如在对比实施例7中的 溶解量的下降。
[0216] 试骀实施例4
[0217] 使用装配有24G针头的注射器，在用乙醚轻度麻醉的情况下，将实施例1、2、3和4 的光学活性托伐普坦水悬浮液和实施例5和8的外消旋托伐普坦水悬浮液各以100mg/kg 的剂量肌内施用至各个SD雌性大鼠的大腿肌肉（n = 4)。在各制剂（水悬浮液）施用后1 小时、6小时、1天、3天、7天、14天、21天和28天，在用乙醚轻度麻醉的情况下，从颈静脉中 收集大约0. 5mL的血液。将所收集的血液分别引入到各个S印arapid管中，在室温下静置 大约30分钟，然后在ISOOxg离心10分钟来获得血清。所得血清在-20°C或更低温度下保 存直到测量。各血清的托伐普坦浓度通过LC-MS/MS法测量（n = 4)。
[0218] (1)晶态光学活性托伐普坦和晶态外消旋托伐普坦之间的比较
[0219] 实施例3的R-托伐普坦晶体水悬浮液、实施例4的S-托伐普坦晶体水悬浮液和 对比实施例8的托伐普坦（外消旋化合物）晶体水悬浮液各自向各个雌性SD大鼠施用。
[0220] 作为施用部位的大腿在施用后28天切开以确认剩余的托伐普坦。从各个囊肿中 提取所述托伐普坦。所述囊肿中的托伐普坦用乙腈提取，用乙腈和甲醇稀释，并且使用过滤 器（孔径：〇. 2 ym)过滤。然后通过HPLC测量托伐普坦的剩余率（n = 3)。
[0221] 结果显示，对比实施例8的托伐普坦（外消旋化合物）晶体的剩余率为大约70%; 作为每四周施用的制剂，所述吸收速率过慢；实施例3 (R-托伐普坦晶体）和实施例4 (S-托 伐普坦晶体）各自的剩余率为大约50% ;并且在所有实施例中，在四周内以适合于每四周 施用的制剂的量吸收了托伐普坦（表3)。
[0222] 表3在施用部位处的制剂的剩余率
[0224] 进一步地，图6显示实施例3的R-托伐普坦晶体水悬浮液和对比实施例8的托伐 普坦（外消旋化合物）晶体水悬浮液的肌内施用后28天的血清托伐普坦浓度曲线的结果 (n = 4)。与对比实施例8的托伐普坦（外消旋化合物）晶体相比较，实施例3的R-托伐 普坦晶体显示施用后4周显著高的血清浓度曲线。
[0225] (2)非晶态光学活性托伐普坦和非晶态外消旋托伐普坦之间的比较
[0226] 实施例1的非晶态R-托伐普坦水 悬浮液、实施例2的非晶态S-托伐普坦水悬浮 液和对比实施例5的非晶态托伐普坦（外消旋化合物）水悬浮液各自向各个雌性SD大鼠 施用。以与以上第（1)项相同的方式，测量施用后28天在所述施用部位的托伐普坦的剩余 率（n = 3)。
[0227] 结果显示，对比实施例5的非晶态托伐普坦（外消旋化合物）的剩余率为大约 20%，实施例2的非晶态S-托伐普坦没有剩余，以及实施例1的非晶态R-托伐普坦的剩余 率为大约4%。发现，实施例1的非晶态R-托伐普坦和实施例2的非晶态S-托伐普坦的吸 收速率比非晶态托伐普坦（外消旋化合物）的吸收速率快（表4)。
[0228] 表 4
[0230] *在所有情况下都没有检测到
[0231] 进一步地，图7显示肌内施用后28天的血清托伐普坦浓度曲线的结果（n = 4)。 与对比实施例5的非晶态托伐普坦（外消旋化合物）相比较，实施例1的非晶态R-托伐普 坦显示施用后4周显著高的血清浓度曲线。
[0232] (3)晶态光学活性托伐普坦和非晶态光学活性托伐普坦之间的比较
[0233] 实施例3的R-托伐普坦晶体水悬浮液和实施例1的非晶态R-托伐普坦水悬浮液 各自向各个雌性SD大鼠施用。图8显示肌内施用后28天的血清浓度曲线的结果。与实施 例1的非晶态R-托伐普坦相反，实施例3的R-托伐普坦晶体未显示在施用后即刻的高血 清浓度（突释等），并且施用后4周可以保持治疗有效量的血清浓度。尤其是，实施例3的 R-托伐普坦晶体的血清浓度未显著改变。自第14天的实施例3的R-托伐普坦晶体的血清 浓度高于自第14天的实施例1的非晶态R-托伐普坦的血清浓度。因此，发现，实施例3的 R-托伐普坦晶体适合作为每4周施用的储库注射剂。
[0234]如在以上表3和4中所示，实施例3的R-托伐普坦晶体的剩余率为大约50%，而 实施例1的非晶态R-托伐普坦的剩余率为大约4%。
[0235] 实施例5 (S-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液）
[0236] 在表5所示的介质溶液（38. Og)(等于50mL的制剂）中悬浮S-托伐普坦晶体 (15. 0g，由日本大冢制药株式会社制造）。向所述悬浮液加入直径为I. 5mm的氧化错珠粒 (50g)。搅拌容器的内含物以进行珠粒粉碎（湿粉碎），由此制备S-托伐普坦晶体颗粒水悬 浮液。
[0237] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）在超声照射 期间测量的S-托伐普坦晶体颗粒的平均粒度为3. 0 y m。
[0238] 表5介质溶液的组成（每mL的制剂）
[0240] 实施例6 (R-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液）
[0241] 在实施例5的介质溶液（76. Og)(表5)(等于IOOmL的制剂）中悬浮R-托伐普坦 晶体（30. 0g，由日本大冢制药株式会社制造）。向所述悬浮液加入直径为I. 5mm的氧化错 珠粒（150g)。搅拌容器的内含物以进行珠粒粉碎（湿粉碎），由此制备R-托伐普坦晶体颗 粒水悬浮液。
[0242] 根据湿法使用激光衍射粒度分布仪（SALD-3000J，由岛津公司制造）在超声照射 期间测量的R-托伐普坦晶体颗粒的平均粒度为I. 9 y m。
[0243] 表6显示实施例5和6中制备的各制剂的组成。
[0244] 表6制剂的组成（每mL的制剂）
[0246]试骀实施例5
[0247] 使用作为多囊肾病模型动物的pcy小鼠（雄性）来评估在实施例5中获得的S-托 伐普坦晶体颗粒水悬浮液抗多囊肾病的作用。
[0248] 基于在4周龄时的体重和通过MRI测量的肾脏体积，将pcy小鼠分成2组：（1) 对照组；和（2)接受S-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液的组。作为正常对照小鼠，可使用 DBA/2JJcl 小鼠。
[0249] 在6和10周龄时，以1000mg/kg的量向接受S-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液的组 皮下注射稀释到200mg/mL的S-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液。从6周龄开始药物治疗，并 且在16周龄时进行尸检。在尸检期间，收集右肾和左肾，并且基于体重，调节所述肾脏重量 并评估。
[0250] 表7显示在16周龄（试验开始后10周）时评估的肾脏重量的结果。与正常DBA 小鼠比较，在16周龄的pcy对照小鼠中观察到肾脏重量的增力卩。与所述pcy对照组相比较， 在接受S-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液的组中显著抑制了肾脏重量的增加。
[0251] 图9显示在7、9、13和16周龄时测量的血浆托伐普坦浓度。通过在6和10周龄 时施用S-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液，pcy小鼠的血浆托伐普坦浓度以稳定的方式保持直 到试验结束（16周龄）。
[0252] 表7:(16周龄）pcy小鼠的肾脏重量BW)
[0254] 每个值都表示平均值土 SEM。
[0255] 为与对照组相比较，使用双尾t-检验。
[0256]试骀实施例6
[0257] 使用作为多囊肾病模型动物的PCK大鼠（雄性）来评估在实施例6中获得的R-托 伐普坦晶体颗粒水悬浮液抗多囊肾病的作用。
[0258] 基于在12周龄时的血浆白蛋白水平和通过MRI测量的肾脏体积，将PCK大鼠分成 2组：（1)对照组；和（2)接受R-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液的组。作为正常对照大鼠，可 使用Crl = CD(SD)大鼠。
[0259] 在14、15和20周龄时，以400mg/kg的量向接受R-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液的 组的右腓肠肌和左腓肠肌肌内注射R-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液（300mg/mL)。从14周龄 开始药物治疗。在24周龄时，再次通过MRI测量右肾体积，并且作为多囊肾的指标，评估在 药物施用前后的肾脏体积的改变。
[0260] 表8显示由在12周龄（分组时）和24周龄时通过MRI测量的右肾体积计算出的 右肾体积的改变（Amm 3)。在12周龄时的PCK对照大鼠的右肾体积为3595± 162mm3,而到 24周龄时由于囊肿扩大导致其增加大约1.4倍。在接受R-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液的 组中显著抑制了肾脏体积的增大（P〈0. 05)。
[0261] 图10显示在16、20、21和25周龄时测量的血浆托伐普坦浓度。通过在14、15和 20周龄时施用R-托伐普坦晶体颗粒水悬浮液，PCK大鼠的血浆托伐普坦浓度以稳定的方式 保持直到试验结束（25周龄）。
[0262] 表8 :PCK大鼠的右肾体积的改变（12周龄和24周龄之间的变化）
[0264] 每个值都表示平均值土 SEM。
[0265] 为与对照组比较，使用双尾t-检验。
[0266] 上述结果显示，因为含有晶态光学活性托伐普坦的水悬浮液可在作为多囊肾病模 型动物的pcy小鼠和PCK大鼠中稳定保持血浆托伐普坦浓度，所以可以抑制多囊肾病的发 展。
【主权项】
1. 一种可注射储库制剂，其包含： (1) 含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒；和 (2) 注射剂用制药上可接受的载体。2. 根据权利要求1所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1)中的光学活性托伐普坦 为基本上由R-托伐普坦组成的托伐普坦或基本上由S-托伐普坦组成的托伐普坦。3. 根据权利要求1或2所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1)中的光学活性托伐 普坦的含量为50至100重量％。4. 根据权利要求1至3中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1)基本上由 光学活性托伐普坦组成。5. 根据权利要求1至4中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒（1)具有大约 0. 2至100ym的平均粒度。6. 根据权利要求1至5中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述注射剂用制药上可 接受的载体（2)包含 (a) 悬浮剂和/或润湿剂 (b) 非必须地，张度剂和/或膨胀剂， (c) 非必须地，缓冲剂， (d) 非必须地，pH调节剂， (e) 非必须地，粘度增强剂，和 (f) 非必须地，防腐剂。7. 根据权利要求6所述的可注射储库制剂，其中，所述悬浮剂为羧甲基纤维素钠和聚 乙烯吡咯烷酮。8. 根据权利要求6或7所述的可注射储库制剂，其中，所述润湿剂为聚山梨醇酯80和 /或泊洛沙姆。9. 根据权利要求1至8中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述颗粒⑴含有水溶 性聚合物和/或生物可降解聚合物。10. 根据权利要求9所述的可注射储库制剂，其中，所述水溶性聚合物为选自羟丙基纤 维素、聚乙烯吡咯烷酮和羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯中的至少一种，以及所述生物可 降解聚合物为选自聚乳酸和聚乳酸-聚乙醇酸共聚物中的至少一种。11. 根据权利要求1至10中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述光学活性托伐普 坦为非晶态。12. 根据权利要求1至10中任一项所述的可注射储库制剂，其中，所述光学活性托伐普 坦为晶态。13. 根据权利要求1至12中任一项所述的可注射储库制剂，其进一步包含（3)注射剂 用的水并且为水悬浮液的形式。14. 根据权利要求13所述的可注射储库制剂，其中，在所述水悬浮液中的所述颗粒（1) 中含有的光学活性托伐普坦的浓度为lOOmg/ml至500mg/ml。15. 根据权利要求1至14中任一项所述的可注射储库制剂，其用于多囊肾病的预防或 治疗。16. 根据权利要求1至15中任一项所述的可注射储库制剂，其被肌内或皮下施用。17. 根据权利要求1至16中任一项所述的可注射储库制剂，其被每两周或更久施用一 次。18. -种用于制造可注射储库制剂的方法，所述方法包括混合（1)含有光学活性托伐 普坦作为活性成分的颗粒；和（2)注射剂用制药上可接受的载体。19. 一种用于制造水悬浮液形式的可注射储库制剂的方法，所述方法包括混合（1)含 有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒，（2)注射剂用制药上可接受的载体，和（3)注射 剂用的水。20. -种用于预防或治疗多囊肾病的试剂盒，所述试剂盒包括含有（1)含有光学活性 托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体的容器，和含有（3)注 射剂用的水的容器。21. -种用于预防或治疗多囊肾病的试剂盒，所述试剂盒包括含有（1)含有光学活性 托伐普坦作为活性成分的颗粒的容器，和含有（2)注射剂用制药上可接受的载体和（3)注 射剂用的水的容器。22. -种用于多囊肾病的预防或治疗的可注射储库制剂，所述制剂包含（1)含有光学 活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体。23. -种用作预防或治疗多囊肾病的药物的可注射储库制剂，所述制剂包含（1)含有 光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的载体。24. (1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和（2)注射剂用制药上可接受的 载体的组合用于制造用于预防或治疗多囊肾病的可注射储库制剂的用途。25. -种预防或治疗多囊肾病的方法，所述方法包括向需要预防或治疗多囊肾病的患 者施用可注射储库制剂，所述制剂包含（1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和 (2)注射剂用制药上可接受的载体。
【专利摘要】本发明提供一种肌内或皮下施用的可注射制剂及制造该制剂的方法，所述制剂用于多囊肾病的预防或治疗，并且可长时期保持托伐普坦的治疗有效血药浓度。更具体地，本发明涉及一种可注射储库制剂及制造该制剂的方法，所述制剂包含(1)含有光学活性托伐普坦作为活性成分的颗粒和(2)注射剂用制药上可接受的载体。
【IPC分类】A61K9/16, A61K9/00, A61K9/14, A61K31/55
【公开号】CN104902874
【申请号】CN201380068094
【发明人】金子大树, 松田贵邦, 宫田宪一, 铃木海, 藤木浩之, 木下静男, 大本浩嗣, 相原美纪
【申请人】大塚制药株式会社
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2013年12月27日
【公告号】CA2894516A1, EP2941242A1, US20150352041, WO2014104412A1
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