用于治疗i型和ii型糖尿病的方法
用于治疗i型和ii型糖尿病的方法
【专利说明】用于治疗I型和M型糖尿病的方法
[0001] 与相关申请的交叉参考 本申请要求于2012年10月19日提交的美国临时申请61/716, 142的优先权，所述美 国临时申请整体引入本文。
[0002] 公开内容背景 Wnt基因家族编码一大类与Intl/Wntl原癌基因和果幡无翅（Drosophila wingless) ("Wg")(果幡 Wntl 同系物）（Cadigan 等人（1997)Genes & Development 11:3286-3305) 相关的分泌性蛋白质。fct在多种组织和器官中表达，并且是许多发育过程所需的，所述 发育过程包括果蝇的分段；秀丽隐杆线虫（C. elegans)的内胚层发育；以及哺乳动物的肢 极性建立、神经嵴分化、肾形态建成、性别决定和脑发育（Parr，等人（1994)Curr. Opinion Genetics & Devel. 4:523-528)。Wnt途径是在胚胎发生期间和在成熟生物两者的发育 的主要调节物（Eastman,等人（1999)Curr Opin Cell Biol 11: 233-240 ;Peifer,等人 (2000)Science 287: 1606-1609)。
[0003] Wnt信号通过七跨膜域受体的Frizzled(〃Fz〃）家族转导（Bhanot等人（1996) Nature 382:225-230)。Frizzled细胞表面受体（Fzd)在经典和非经典Wnt信号转导两者 中均发挥重要作用。在经典途径中，Fzd和LRP5/6(低密度脂蛋白受体相关蛋白质5和6) 通过fct蛋白质活化后生成信号，其阻止通过"0连环蛋白破坏复合物"的0连环蛋白 磷酸化和降解，允许稳定的0连环蛋白易位和在核中累积，并且因此允许fct信号转导。 (Perrimon(1994)Cell 76:781-784)(Miller, J. R. (2001)Genome Biology ；3 (I):1-15)〇 非经典Wnt信号转导途径较不充分确定：存在已提议的至少两种非经典Wnt信号转导途径， 包括平面细胞极性（PCP)途径，Wnt/Ca++途径和汇聚延伸途径。
[0004]糖原合酶激酶3 (GSK3)、肿瘤抑制基因产物APC (腺瘤性结肠息肉病） (Gumbiner (1997) Curr. Biol. 7: R443-436)和支架蛋白Axin均为Wnt途径的负调节物，并 且一起形成连环蛋白破坏复合物"。在不存在fct配体的情况下，这些蛋白质形成复合 物且促进e连环蛋白的磷酸化和降解，而fct信号转导使复合物失活且阻止e连环蛋白 降解。稳定的e连环蛋白因此易位至核，在其中它结合TCF(T细胞因子）转录因子（也称 为淋巴样增强子结合因子-1〇^?1))，且充当1^^/1^?诱导的转录的辅激活物（8化似，等人 (2000)Cell 103: 311-320 ;Polakis，等人（2000)Genes Dev 14: 1837-1851)。
[0005] Wnt信号转导经由经典和非经典机制发生。在经典途径中，Fzd和LRP5/6通过Wnt 蛋白质活化后，稳定的0连环蛋白在核中累积且导致TCF靶基因活化（如上所述；Miller， J. R. (2001) Genome Biology ;3(1) :1-15)。非经典Wnt信号转导途径较不充分确定：已提 议至少两种非经典fct信号转导途径，包括平面细胞极性（PCP)途径和Wnt/Ca ++途径。
[0006] 与病理性高或低水平的Wnt信号转导相关的障碍包括但不限于骨质疏松症、骨关 节炎、多囊性肾病、糖尿病、精神分裂症、血管疾病、心脏疾病、非恶性增生性疾病和神经变 性疾病例如阿尔茨海默氏病。
[0007] 糖尿病描述特征在于慢性高血糖的代谢障碍，伴随碳水化合物、脂肪和蛋白质代 谢的紊乱，其起因于胰岛素分泌、胰岛素作用或两者的缺陷。糖尿病的效应包括多种器官的 长期损害、功能障碍和衰竭。糖尿病可以伴随特征性症状存在，例如口渴、多尿、视力模糊、 慢性感染、伤口愈合缓慢和体重减轻。在其最严重的形式中，可以发展成酮症酸中毒或非酮 症高渗状态（non-ketotic hyperosmolar state )，且导致木僵、昏迷和在不存在有效治疗 的情况下的死亡。通常症状不严重，未识别或可以是不存在的。因此，在作出诊断前，足以 引起病理和功能性变化的高血糖症可以长时间存在，偶然高达十年，诊断通常通过在常规 医学工作期间的禁食过夜后在尿中高葡萄糖水平的检测进行。糖尿病的长期效应包括并发 症的进行性发展，例如伴随潜在失明的视网膜病变、可以导致肾衰竭的肾病、神经病、微血 管变化和自主神经功能障碍。具有糖尿病的人患心血管、周围血管和脑血管疾病（统称为 "动脉血管（arteriovascular)"疾病）的风险增加。癌症的风险也增加。糖尿病的发展与 几种发病过程相关。这些包括破坏胰腺的胰岛素分泌e细胞的过程，伴随后续的胰岛素缺 陷以及肝和平滑肌细胞中的变化，所述变化导致对胰岛素摄取的抗性。碳水化合物、脂肪和 蛋白质代谢的异常是由于胰岛素对靶组织的缺陷作用，其起因于对胰岛素的不敏感性或胰 岛素缺乏。
[0008] 与潜在原因无关，糖尿病再分成1型糖尿病和2型糖尿病。1型糖尿病起因于自 身免疫介导的胰腺0细胞的破坏。破坏率是可变的，并且快速进展形式通常在儿童中观察 到，但还可以在成人中发生。缓慢进展形式的1型糖尿病一般在成人中发生，并且有时被称 为成人隐匿性自身免疫性糖尿病（LADA)。一些患者，特别是儿童和青少年，可以显示出酮 症酸中毒作为疾病的第一种表现。其他人具有适度的空腹高血糖症，在感染或其他应激的 存在下，其快速改变为严重高血糖症和/或酮症酸中毒。另外其他人特别是成人可以保持 足以阻止酮症酸中毒的残留e细胞功能多年。具有这种形式的1型糖尿病的个体通常变 得依赖胰岛素存活，并且处于酮症酸中毒的风险中。具有1型糖尿病的患者显示出很少或 无胰岛素分泌，如由低或无法检测水平的血浆C肽体现的。然而，存在一些形式的1型糖尿 病，其没有已知病因学，并且这些患者中的一些具有持久的胰岛素贫乏症（insulinopenia) 且有酮症酸中毒的倾向，但没有自身免疫的证据。这些患者被称为"1型特发性"。
[0009] 2型糖尿病是最常见形式的糖尿病，并且特征在于胰岛素作用和胰岛素分泌的障 碍，其中任一均可以是占优势的特征。两者通常在这种形式的糖尿病临床体现时存在。2型 糖尿病患者特征在于相对而不是绝对的胰岛素缺乏，并且对胰岛素的作用抗性。至少最初 且通常在其生命自始至终，这些个体不需要胰岛素治疗来存活。2型糖尿病占所有糖尿病病 例的90-95%。这种形式的糖尿病可以多年未被诊断，因为高血糖症通常不足够严重以引发 显著的糖尿病症状或症状仅未被识别。大多数具有2型糖尿病的患者是肥胖的，并且肥胖 自身可以引起或恶化胰岛素抗性。通过常规重量标准并不肥胖的那些人中的许多可以具有 占优势地分布在腹腔区域（内脏脂肪）中的增加的体脂百分比。酮症酸中毒在这类糖尿病 中不常见，并且通常与另一种病的应激相关而出现。然而，具有这种形式的糖尿病的患者可 以具有看起来正常或升高的胰岛素水平，如果其0细胞功能正常，这些糖尿病患者中的高 血糖水平可以预期导致更高的胰岛素值。因此，胰岛素分泌通常是缺陷的且不足以补偿胰 岛素抗性。另一方面，一些高血糖个体具有基本上正常的胰岛素作用，但显著受损的胰岛素 分泌。
[0010] 糖尿病性视网膜病变是由于衬里血管的细胞中的变化而在糖尿病中发展的眼疾 病。当葡萄糖水平高时，如在糖尿病中，葡萄糖可以以许多方式引起损害。例如，葡萄糖或葡 萄糖的代谢产物与蛋白质的氨基结合，导致组织损害。另外，过量葡萄糖进入多元醇途径， 导致山梨糖醇的累积。山梨糖醇无法由视网膜的细胞代谢，并且可以促成高细胞内渗透压、 细胞内水肿、扩散受损、组织缺氧、毛细血管细胞损害和毛细血管弱化。糖尿病性视网膜病 变涉及毛细血管基底膜的增厚，并且阻止周细胞接触毛细血管的内皮细胞。周细胞的丧失 增加毛细血管的泄露且导致血-视网膜屏障的损毁。减弱的毛细血管导致动脉瘤形成和进 一步泄露。高血糖症的这些效应还可以损害视网膜中的神经元功能。这是糖尿病性视网膜 病变的早期，称为非增殖性糖尿病性视网膜病变。
[0011] 视网膜毛细血管在糖尿病中可以变得堵塞，引起视网膜中的缺血区。非灌注组织 通过诱发来自现有血管的新血管生长（血管生成）响应。这些新血管还可以引起失明。
[0012] 考虑到维持人糖尿病患者的良好血糖控制的困难，抑制或减慢视网膜毛细血管细 胞和视网膜神经元损害的药物开发将提供降低在糖尿病性视网膜病变中发生的早期细胞 损害的方式。
[0013] 存在用于糖尿病和糖尿病并发症例如糖尿病性视网膜病变的新治疗的迫切需要。
[0014] 公开内容概述 本公开内容一般涉及a螺旋模拟结构，且具体涉及为0连环蛋白抑制剂的a螺旋模 拟结构。公开内容还涉及在糖尿病、高血压和糖尿病病症例如糖尿病性神经病变治疗中的 应用，以及包含此类a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂的药物组合物。
[0015] 附图简述 图1.患者101的血糖水平。
[0016] 图2?患者1103的血糖水平。
[0017] 图3?测试动物的C肽水平。
[0018] 图4?测试动物的胰岛素水平。
[0019]图 5?测试动物的HbAlc水平(mmol HbAlc/mol Hb/天）。
[0020] 公开内容详述 近来，已开发了非肽化合物，其模拟生物活性蛋白质或肽中发现的转角 (reverse-turn)的二级结构。例如，美国专利号5, 440, 013以及公开的PCT申请号 W094/03494、W001/00210A1和W001/16135A2,各自公开了构象约束的非肽化合物，其模拟 转角的三维结构。另外，美国专利号5, 929, 237及其部分继续申请美国专利号6, 013, 458 公开了构象约束的化合物，其模拟生物活性肽和蛋白质中的转角区域的二级结构。与转角 模拟物相关，已公开了构象约束的化合物，其模拟W02007/056513和W02007/056593中的生 物活性肽和蛋白质中的a螺旋区域的二级结构。
[0021] 本文公开的是用于治疗I型和II型糖尿病 、糖尿病性视网膜病变、高血压和妊娠 糖尿病的治疗和化合物。
[0022] 本发明的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂的结构和化合物公开于WO 2010/044485、TO 2010/128685、TO 2009/148192 和 US 2011/0092459,其各自整体引入本 文作为参考。这些化合物目前已发现可用于治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病变、高血压和妊 娠糖尿病。
[0023] 本发明的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂的优选结构具有下式（I):
其中 A 是 _CHR7_， 其中 R7是任选取代的芳基烷基、任选取代的杂芳基烷基、任选取代的环烷基烷基或任选取 代的杂环烷基烷基； G 是-NH-、-NR6-或-O-其中 R6是低级烷基或低级烯基； R1 是-Ra-R 10; 其中 Ra是任选取代的低级亚烷基，和 Rltl是任选取代的二环稠合芳基或任选取代的二环稠合杂芳基； R2是- (CO)-NH-Rb-R 20， 其中 Rb是键或任选取代的低级亚烷基；和 R2tl是任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；和 R3是Cp4烷基。
[0024] 这些化合物尤其可用于预防和/或治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病变、高血糖症 和妊娠糖尿病。
[0025] 本发明的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂的更优选结构具有在上述式（I)中的下 述取代基： A 是 _CHR7_， 其中 R7是任选由羟基或C i_4烷基取代的芳基烷基； G 是-NH-、-NR6-或-0_ 其中 R6是C i_4烷基或C i_4烯基； R1 是-Ra-R 10; 其中 Ra是Cp4亚烷基，和 Rltl是任选由卤素或氨基取代的二环稠合芳基或二环稠合杂芳基； R2是- (CO)-NH-Rb-R 20， 其中 Rb是键或Ch亚烷基；和 R2tl是芳基或杂芳基；和 R3是Cp4烷基。
[0026] 这些化合物尤其可用于预防和/或治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病变、高血糖症 和妊娠糖尿病。
[0027] 本发明的最优选的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂如下： (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二氧代八 氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -2-烯丙基-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二 氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二氧代六氢吡 嘆并[2, 1-c] [1，2, 4]噁二嘆-I (6H)-甲酰胺， (6S，9S) -8- ((2-氨基苯并[d]噻唑-4-基）甲基）-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二 甲基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -2-烯丙基-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基 甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二氧代八 氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基磷酸钠， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(萘-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基磷酸钠， (6S，9S) -2-烯丙基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-4, 7-二氧代-N- ((R) -1-苯基乙 基）-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, l-c][l，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -2-烯丙基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-4, 7-二氧代-N- ((S) -1-苯基乙 基）-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, l-c][l，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基-2, 6-二甲基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹 啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -8-(苯并[b]噻吩-3-基甲基）-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲 基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S)-8-(苯并[c] [1，2,5]噻二唑-4-基甲基）-N-苄基-6-(4-羟基苄基）-2,9-二 甲基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-8-(异喹啉-5-基甲基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧 代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-8- ((5-氯噻吩并[3, 2-b]吡啶-3-基）甲基）-6- (4-羟基苄 基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹喔啉-5-基甲 基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺，和 (6S，9S) -6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基）-N-(噻 吩-2-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺。
[0028] 这些化合物尤其可用于预防和/或治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病变、高血糖症 和妊娠糖尿病。
[0029] 在最优选的实施方案中，所述化合物是： 4- (((6S，9S，9aS) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基 甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯，或 (6S，9S，9aS) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基 甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺。
[0030] 这些化合物尤其可用于预防和/或治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病变、高血糖症 和妊娠糖尿病。
[0031] 虽然不希望被束缚，但这些化合物在治疗这些病症中的有效性部分基于这些化合 物通过抑制CBP阻断TCF4/ e连环蛋白转录途径的能力，从而改变wnt途径信号转导，已发 现这改善糖尿病后果。
[0032] "0连环蛋白抑制剂"是可以降低或阻止0连环蛋白活性的物质。0连环蛋白活 性包括易位至核，与TCF (T细胞因子）转录因子结合，和辅活化TCF转录因子诱导的TCF靶 基因转录。
[0033] 本文公开的是用于治疗糖尿病病症和高血糖症的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂 化合物。
[0034] 如本文使用的，术语"糖尿病病症"包括胰岛素依赖性糖尿病（也称为IDDM，1型 糖尿病）和非胰岛素依赖性糖尿病（也称为NIDDM，2型糖尿病）两者，以及前驱糖尿病和 妊娠糖尿病。"糖尿病性视网膜病变"是眼糖尿病病症。
[0035] 如本文使用的，"治疗"指在改变待治疗的个体或细胞的疾病过程的尝试中的临 床干预，并且可以在临床病理学的过程期间执行。治疗的疗效包括但不限于预防疾病的复 发，减轻症状，缩小疾病的任何直接或间接病理后果，减小疾病进展速率，改善或减轻疾病 状态，以及缓解或改善预后。
[0036] 如本文使用的，术语"治疗有效量"和"有效量"可互换使用，以指本发明的组合物 的量，其足以预防糖尿病或其一种或多种症状的发展或发作，增强或改善另一种疗法的一 种或多种效应，和/或改善糖尿病的一种或多种症状。对于糖尿病患者，优选的治疗有效量 是有效控制血糖水平或使血糖水平正常的量。
[0037] 治疗有效量可以以一个或多个剂量施用于患者，所述剂量足以减轻、改善、稳定、 逆转或减慢疾病的进展，或以其他方式降低疾病的病理后果，或降低疾病的症状。改善或降 低无需是持久的，可以是范围为至少一小时、至少一天或至少一周或更久的时间段。有效量 一般由医生在具体情况的基础上进行确定，并且在本领域技术人员的技术内。当确定实现 有效量的适当剂量时，一般考虑到几种因素。这些因素包括患者的年龄、性别和重量，待治 疗的病症，病症的严重性，以及施用途径、剂型和方案以及所需结果。
[0038] 如本文使用的，术语"对象"和"患者"可互换使用，并且指动物，优选哺乳动物例 如非灵长类动物（例如牛、猪、马、猫、狗、大鼠等）和灵长类动物（例如猴和人），且最优选 人。
[0039] 本文描述的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂可以掺入药物组合物内用于单独或组 合施用于对象，用于治疗或预防本文描述的障碍。此类组合物通常包括活性剂和药学可接 受的载体。如本文使用的，术语"药学可接受的载体"包括与药学施用相容的盐水、溶剂、分 散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等等。补充活性化合物也可以掺入组 合物内。本文描述的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂用于预防或治疗疾病。具体地，公开 内容提供了治疗处于糖尿病和糖尿病病症的风险中（或易患糖尿病和糖尿病病症）的对象 的预防和治疗方法两者。相应地，呈现的方法提供了通过给有此需要的对象施用有效量的 a螺旋模拟0连环 蛋白抑制剂，用于预防和/或治疗对象的糖尿病和糖尿病病症。例如， 对象可以在改善糖尿病病症的一种或多种因素的努力中施用a螺旋模拟0连环蛋白抑制 剂。
[0040] 在一个方面，本发明提供了包含下述的药物组合物或组合：(a)本文描述的a螺 旋模拟e连环蛋白抑制剂，和（b)抗糖尿病剂或其药学可接受的盐。
[0041] 抗糖尿病剂类别在下文提及，例如双胍类、噻唑烷二酮类、磺酰脲类、格列奈类、a 葡糖苷酶抑制剂类、GLP-I类似物类等。
[0042] 在一个实施方案中，抗糖尿病剂选自由双胍、噻唑烷二酮、磺酰脲、格列奈、a葡糖 苷酶抑制剂、GLP-I类似物或其药学可接受的盐组成的G3组。
[0043] G3组包含双胍。双胍的例子是二甲双胍、苯乙双胍和丁双胍。优选双胍是二甲双 胍。与双胍特别是二甲双胍组合的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂可以提供更有效的血糖 控制和/或可以与双胍一起作用，例如以降低重量，其例如对代谢综合征具有总体有益作 用，所述代谢综合征通常与2型糖尿病相关。
[0044] 本文采用的术语"二甲双胍"指二甲双胍或其药学可接受的盐，例如盐酸盐、二甲 双胍（2:1)富马酸盐和二甲双胍（2:1)琥珀酸盐、氢溴酸盐、对氯苯氧基乙酸盐或双羟萘酸 盐、以及其他已知的单和二元羧酸的二甲双胍盐。优选本文采用的二甲双胍是二甲双胍盐 酸盐。
[0045] G3组包含噻唑烷二酮。噻唑烷二酮（TZD)的例子是吡格列酮和罗格列酮。TZD疗 法与重量增加和脂肪再分布相关。另外，TZD引起流体潴留且不指示用于具有充血性心力 衰竭的患者中。用TZD的长期治疗进一步与增加的骨折风险相关。与噻唑烷二酮特别是吡 格列酮组合的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂可以提供更有效的血糖控制和/或可以使得 用TZD治疗的副作用降到最低。
[0046] G3组包含磺酰脲。磺酰脲的例子是格列本脲（glibenclamide)、甲苯磺丁脲、格列 美脲、格列吡嗪、格列喹酮、格列波脲、格列本脲（glyburide)、格列派特和格列齐特。优选磺 酰脲是甲苯磺丁脲、格列喹酮、格列本脲和格列美脲，特别是格列本脲和格列美脲。因为磺 酰脲的功效在疗程中损耗，所以a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂与磺酰脲的组合可以对患 者提供就更佳的血糖控制而言的另外利益。另外，用磺酰脲的治疗通常与在治疗过程中的 逐步重量增加相关，并且a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂可以使得用磺酰脲的治疗的该副 作用降到最低和/或改善代谢综合征。另外，与磺酰脲组合的a螺旋模拟0连环蛋白抑 制剂可以使低血糖症降到最低，所述低血糖症是磺酰脲的另一种不希望的副作用。该组合 还可以使磺酰脲剂量降低，这可以转变为更少的低血糖症。
[0047] 如本文采用的，"格列本脲"、"格列美脲"、"格列喹酮"、"格列波脲"、"格列齐特"、 "格列派特"、"甲苯磺丁脲"和"格列吡嗪"组的每个术语指各自的活性药物或其药学可接受 的盐。
[0048] G3组包含格列奈。格列奈的例子是那格列奈、瑞格列奈和米格列奈。因为它们的 功效在疗程中损耗，所以a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂与美格列奈的组合可以对患者提 供就更佳的血糖控制而言的另外利益。另外，用美格列奈的治疗通常与在治疗过程中的逐 步重量增加相关，并且a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂可以使得用美格列奈治疗的该副作 用降到最低和/或改善代谢综合征。另外，与美格列奈组合的a螺旋模拟0连环蛋白抑 制剂可以使低血糖症降到最低，所述低血糖症是美格列奈的另一种不希望的副作用。该组 合还可以使美格列奈剂量降低，这可以转变为更少的低血糖症。
[0049] G3组包含a葡糖苷酶的抑制剂。a葡糖苷酶的抑制剂的例子是阿卡波糖、伏格 列波糖和米格列醇。来自a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂和a葡糖苷酶抑制剂组合的另 外利益可以涉及例如在更低剂量的个别药物下的更有效的血糖控制，和/或降低a葡糖苷 酶抑制剂的不希望的胃肠道副作用。
[0050] 如本文采用的，"阿卡波糖"、"伏格列波糖"和"米格列醇"组的每个术语指各自的 活性药物或其药学可接受的盐。
[0051] G3组包含GLP-I类似物的抑制剂。GLP-I类似物的例子是艾塞那肽（exenatide)、 利拉鲁肽（liraglutide)、他司鲁泰（taspoglutide)、司美鲁肽（semaglutide)、阿必鲁肽 (albiglutide)和利西拉肽（lixisenatide)。a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂和GLP-I类似 物的组合可以实现例如在更低剂量的个别药物下的优良的血糖控制。另外，例如GLP-I类 似物的体重降低能力可以连同a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂的特性一起发挥积极作用。 另一方面，例如当降低剂量的GLP-I类似物与a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂组合应用时， 可以获得副作用（例如恶心、胃肠道副作用如呕吐）的降低。
[0052] 如本文采用的，"艾塞那肽"、"利拉鲁肽"、"他司鲁泰"、"司美鲁肽"、"阿必鲁肽" 和"利西拉肽"组的每个术语指各自的活性药物或其药学可接受的盐。
[0053] 根据本发明的另一个方面，提供了用于在有此需要的患者中预防代谢障碍、减慢 代谢障碍进展、延迟或治疗代谢障碍的方法，所述代谢障碍选自1型糖尿病、2型糖尿病、葡 萄糖耐量受损（IGT)、空腹血糖受损（IFG)、高血糖症、餐后高血糖症、超重、肥胖和代谢综 合征，所述方法的特征在于例如将本文描述的a螺旋模拟e连环蛋白抑制剂和任选的第 二种和任选的第三种如上文和下文定义的抗糖尿病剂例如组合施用于患者。
[0054] 如通过使用根据本发明的药物组合物或组合，可获得有此需要的患者中的血糖控 制的改善，以及可以治疗与增加的血糖水平相关或由增加的血糖水平引起的那些病症和/ 或疾病。
[0055] 糖尿病特征在于大于或等于126 mg/dl的空腹血衆葡萄糖水平。糖尿病对象具有 大于或等于126 mg/dl的空腹血衆葡萄糖水平。前驱糖尿病特征在于大于或等于110 mg/ dl且小于126 mg/dl的空腹血浆葡萄糖（FPG)受损水平；或葡萄糖耐量受损；或胰岛素抗 性。前驱糖尿病对象是空腹葡萄糖受损（大于或等于110 mg/dl且小于126 mg/dl的空腹 血浆葡萄糖（FPG)水平）；或葡萄糖耐量受损（>140 mg/dl和〈200 mg/dl的2小时血浆葡 萄糖水平）；或胰岛素抗性的对象，导致发展糖尿病的风险增加。
[0056] 视网膜病变是I型糖尿病的失明主因，并且在II型糖尿病中也常见。视网膜病变 的程度依赖糖尿病的持续时间，并且一般在糖尿病发作后十年或更多内开始发生。糖尿病 性视网膜病变可以分类为非增生性的，其中视网膜病变特征在于毛细血管渗透性增加、水 肿和渗出物，或增生性的，其中视网膜病变特征在于从视网膜延伸到玻璃体的新生血管生 成、结瘢、纤维组织沉积和视网膜脱离的可能性。糖尿病性视网膜病变被认为通过由于高血 糖的糖基化蛋白质发展引起。
[0057] "妊娠糖尿病"指伴随在妊娠期间的发作或首次识别的任何程度的葡萄糖耐受不 良。临床诊断一般基于多步过程。评估最通常通过测量在空腹或非空腹状态下的50克经 口葡萄糖负荷测试后1小时的血浆葡萄糖来执行。如果葡萄糖负荷测试的值是< 140 mg/ dl，则完成3小时100 g经口葡萄糖耐量测试。如果符合下述标准中的两个或更多个，则 患者视为需要血糖控制：空腹静脉血浆彡105 mg/dl ;在1小时的静脉血浆彡190 ma/dl， 在2小时的静脉血浆彡165 mg/dl或在3小时的静脉血浆彡145 mg/dl。Williams等人， Diabetes Care 22: 418-421，1999。
[0058] "高血糖症"或高血糖是其中过量葡萄糖在血浆中循环的病症。这一般诊断为高于 11. I mmol/1 (200 mg/dl)的葡萄糖水平，尽管症状无法开始变得引人注意，直到达到更高 的值例如15 - 20 mmol/1 (~250 - 300 mg/dl)。具有在100和126 mg/dl之间的一致血糖范 围的对象视为高血糖，而高于126 mg/dl或7 mmol/1-般视为具有糖尿病。超过7 mmol/ 1(125 mg/dl)的慢性血糖水平可以产生器官损害。
[0059] 本文描述的化合物（上述a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂）和组合物用于治疗糖 尿病病症包括1型糖尿病和2型糖尿病。本文描述的化合物和组合物还可用于治疗和/或 预防高血糖症、前驱糖尿病和/或妊娠糖尿病。
[0060] 糖尿病的治疗指施用本文描述的化合物或组合以治疗糖尿病对象。糖尿病治疗的 一个后果是降低增加的血浆葡萄糖浓度。糖尿病治疗的另一个后果是降低增加的胰岛素浓 度。糖尿病治疗的另外一个后果是降低增加的血液甘油三酯浓度。糖尿病治疗的另外一个 后果是增加胰岛素敏感性。糖尿病治疗的另外一个后果可以是增强具有葡萄糖耐受不良的 对象的葡萄糖耐受。糖尿病治疗的另外一个后果是降低葡萄糖抗性。糖尿病治疗的另一个 后果是使血浆胰岛素水平正常。糖尿病治疗的另外一个后果是血糖控制的改善，特别是在 2型糖尿病中。糖尿病治疗的另外一个后果是增加肝胰岛素敏感性。
[0061] a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂还可以施用于对象，以治疗或预防糖尿病性视网 膜病变。糖尿病性视网膜病变特征在于毛细血管微动脉瘤和圆点状出血。其后，微血管阻 塞引起棉絮斑在视网膜上形成。此外，由于血管渗透性增加，可以在具有糖尿病性视网膜病 变的个体中形成视网膜水肿和/或硬性渗出物。随后，新生血管形成出现，并且由在玻璃体 中生长的结缔组织的牵引力引起视网膜脱离。还可以发生虹膜红变和新生血管性青光眼， 其反过来又可以导致失明。糖尿病性视网膜病变的症状包括但不限于阅读困难、视力模糊、 在一只眼中的视力突然丧失、看到光周围的环、看到暗点和/或看到闪光。
[0062] a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂还可以施用于对象，以治疗或预防高血糖症，包括 血浆葡萄糖水平的降低，优选血浆葡萄糖水平至低于100 mg/dl的降低。
[0063] 任何合适的施用途径均可用于给哺乳动物尤其是人提供有效剂量的本文描述的 化合物。例如，可以采用经口、直肠、局部、肠胃外、眼、肺、鼻等等。剂型包括片剂、锭剂、分 散体、悬浮液、溶液、胶囊、乳膏、软膏、气溶胶等。优选地，本文描述的化合物经口施用。 [0064] 取决于采用的具体化合物、施用模式、待治 疗的病症和待治疗病症的严重性，采用 的活性成分的有效剂量可以改变。此类剂量本领域技术人员可以容易地确定。
[0065] 当治疗或控制本文描述的化合物指示用于其的糖尿病和/或其他疾病时，当本文 描述的化合物以约〇. 1毫克至约100毫克/千克动物体重的日剂量施用，优选作为单一日 剂量或以每天两至六次的分份剂量给药，或以持续释放形式给药时，获得一般令人满意的 结果。对于最大型的哺乳动物，日总剂量是约1.0毫克至约1000毫克。在70 kg成年人的 情况下，日总剂量一般为约1毫克至约500毫克。对于特别有效的化合物，成年人的剂量可 以低至0.1 mg。在一些情况下，日剂量可以高达1克。剂量方案可以在该范围内或甚至在 该范围外进行调整，以提供最佳治疗应答。
[0066] 经口施用通常使用片剂或胶囊进行。片剂和胶囊中的剂量的例子是0.1 mg、0. 25 mg、0. 5 mg、l mg、2 mg、5 mg、10 mg、15 mg、20 mg、25 mg、30 mg、40 mg、50 mg、100 mg、200 mg、250 mg、300 mg、400 mg、500 mg和750 mg。其他经口形式也可以具有相同或相似剂量。 [0067] 本文还描述的是药物组合物，其包含本文描述的化合物和药学可接受的载体。本 文描述的药物组合物包含本文描述的化合物或药学可接受的盐作为活性成分，以及药学可 接受的载体和任选的其他治疗成分。如果施用前体药物，则药物组合物还可以包含前体药 物或其药学可接受的盐。
[0068] 组合物可以适合于经口、直肠、局部、肠胃外（包括皮下、肌内和静脉内）、眼（眼 睛）、肺（鼻或颊吸入）或鼻施用，尽管在任何给定情况下最合适的途径取决于待治疗病症 的性质和严重性以及活性成分的性质。它们可以方便地以单位剂型呈现，并且通过药学领 域众所周知的任意方法进行制备。
[0069] 在实际使用中，本文描述的化合物可以根据常规药学配料技术组合为在具有药学 载体的紧密混合物中的活性成分。载体可以采取广泛多样的形式，取决于施用所需的制剂 形式，例如经口或肠胃外（包括静脉内）。在将组合物制备为经口剂型中，可以采用通常药 学介质中的任一种，例如在经口液体制剂例如悬浮液、酏剂和溶液的情况下的水、乙二醇、 油、醇、调味剂、防腐剂、着色剂等；或在经口固体制剂例如粉末、硬和软胶囊以及片剂的情 况下的淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等，其中与液体制剂 相比，更优选固体经口制剂。
[0070] 由于其易于施用，片剂和胶囊代表在采用固体药学载体的情况下最有利的经口剂 量单位形式。需要时，片剂可以通过标准水性或非水性技术包被。此类组合物和制剂应含 有至少0. 1百分比的活性化合物。这些组合物中的活性化合物的百分比当然可以改变，并 且可以方便地在约2百分比至约60百分比的单位重量之间。此类治疗有用组合物中的活 性化合物的量是这样的，从而使得获得有效剂量。活性化合物还可以作为例如液体滴剂或 喷雾剂鼻内施用。
[0071] 片剂、丸剂、胶囊等还可以含有粘合剂例如黄蓍胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；赋 形剂例如磷酸二f?(dicalcium phosphate);崩解剂例如玉米淀粉、马铃薯淀粉、海藻酸；润 滑剂例如硬脂酸镁；和甜味剂例如蔗糖、乳糖或糖精。当剂量单位形式是胶囊时，除上述类 型的材料之外，它还可以含有液体载体例如脂肪油。
[0072] 多种其他材料可以作为包衣存在或修饰剂量单位的物理形式。例如，片剂可以由 虫胶、糖或两者包被。除活性成分之外，糖浆剂或酏剂还可以含有蔗糖作为甜味剂，对羟基 苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯作为防腐剂，染料和调味料例如樱桃或橙调味料。
[0073] 对于眼应用，将治疗化合物配制成适合用于眼中的溶液、悬浮液和软膏。对于眼制 剂一般，参见 Mitra(编辑），Ophthalmic Drug Delivery Systems，Marcel Dekker，Inc.， New York，N. Y. (1993)以及 Havener，W. H.，Ocular Pharmacology，C. V. Mosby Co.，St. L〇Uis(1983)。眼药物组合物可以适合于以溶液、悬浮液、软膏、乳膏的形式或作为固体插入 物局部施用于眼。对于单一剂量，0.1 ng - 5000 yg、l ng - 500 yg或10 ng - 100 yg 的芳香族阳离子肽可以应用于人眼。
[0074] 眼制剂可以含有无毒辅助物质，例如在使用中是无害的抗菌组分，例如硫柳汞、苯 扎氯按、对羟基苯甲酸甲醋和对羟基苯甲酸丙醋、溴化苄基十二酸按（benzyldodecinium bromide)、苄醇或苯基乙醇；缓冲成分例如氯化钠、硼酸钠、乙酸钠、柠檬酸钠或葡糖酸盐缓 冲剂；及其他常规成分例如脱水山梨糖醇单月桂酸酯、三乙醇胺、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单 棕榈酸醋（monopalmitylate)、乙二胺四乙酸等。
[0075] 眼溶液或悬浮液可以根据需要经常施用，以维持眼中可接受水平的a螺旋模拟 0连环蛋白抑制剂。对哺乳动物眼的施用可以是每天约一次或两次。
[0076] 本文描述的化合物还可以肠胃外施用。这些活性化合物的溶液或悬浮液可以在水 中与表面活性剂或表面活性剂的混合物适当混合进行制备，所述表面活性剂例如羟丙基纤 维素、聚山梨醇酯80以及中和长链脂肪酸的甘油单酯和甘油二酯。分散体还可以在甘油、 液体聚乙二醇及其在油中的混合物中进行制备。在普通贮存和使用条件下，这些制剂含有 防腐剂以阻止微生物的生长。
[0077] 适合于注射使用的药学形式包括无菌水溶液或分散体和用于临时制备无菌可注 射溶液或分散体的无菌粉末。在所有情况下，形式均必须是无菌的且必须流动至可容易注 射的程度。它在制造和贮存条件下必须是稳定的，并且必须针对微生物例如细菌和真菌的 污染作用进行防腐。载体可以是含有例如水、乙醇、多元醇（例如甘油、丙二醇和液体聚乙 二醇）、其合适混合物和植物油的溶剂或分散介质。
[0078] 本公开内容进一步通过下述非限制性实施例举例说明。 实施例
[0079] 实施例1 :报道基因测定 该研宄的目的是评价化合物A，a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂化合物，用于抑制Wnt 信号转导途径的效应。化合物A是4-(((6S，9S，9aS)-1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲 基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基） 甲基）苯基二氢磷酸酯。
[0080] 使用STF报道细胞系（在SuperTOPFlash报道元件的八个串联重复的控制下，用 萤火虫萤光素酶基因稳定转染的人胚肾细胞系Hek-293 116:883-895, 2004)，根据 下述操作进行fct信号转导途径的抑制作用的筛选。
[0081] 生长培养基：杜尔贝科改良伊格尔培养基（Dulbecco'sModifiedEagle Medium，DMEM)、10%FBS、Pen-Str印，补充有 400g/mlG418抗生素，以维持SuperTOPFlash 驱动的萤光素酶基因的选择。
[0082] 在测定前一天，将细胞在200微升完全生长培养基中以20, 000细胞/孔拆分到白 色不透明96孔板内。使板在37°C、5% CO2下温育过夜，以允许细胞附着至表面。
[0083] 第二天，以2X所需最终浓度（所有条件均一式两份完成）制备抑制剂，以在不含 G418的完全生长培养基中测试。使用多重移液管（multiple pipettor)小心地从每个孔中 吸取现有培养基。将含有抑制剂（化合物A)的50微升新鲜生长培养基（不含G148)加入 每个孔中。2个孔仅含有培养基，2个孔用于刺激对照，2个孔用于DMSO对照，并且孔用于阳 性对照ICG-001 (2、5和10微摩尔）。
[0084] 一旦加入所有抑制剂和对照，板就在37°C、5% CO2下温育1小时。在板温育时，制 备在完全生长培养基（不含G148)中的新鲜20 mM LiCl。在1小时后，将板从温箱中取出， 并且将含有20 mM LiCl的50微升培养基加入每个孔中，除了未受刺激的对照的两个孔之 外（向其中单独加入50微升完全培养基）。使板在37°C、5% CO2下温育24小时。
[0085] 在24小时后，将100微升BrightGlo试剂（Promega，Madison，WI)加入每个孔中。 使板振荡5分钟以确保完全裂解。使用PackardTopCount(PerkinElmer，Inc.)阅读板。
[0086] 如通过报道基因测定所测定的，发现化合物A在I y M的浓度下具有超过50%的 抑制活性。
[0087] 实施例2 :人临床试验中的血糖水平 该研宄的目的是评价化合物A，a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂化合物，对糖尿病患 者的血糖水平的作用。化合物A是4- (((6S，9S，9aS) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲 基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基） 甲基）苯基二氢磷酸酯。
[0088] 具有癌症和II型糖尿病的患者加入临床试验（具有晚期实体瘤的对象的安全和 功效研宄）。通过测量患者的血糖水平来研宄化合物A用于治疗糖尿病的功效。加入该研 宄中的患者条件如下： (患者101)男性，66岁，具有乙状结肠癌和糖尿病。施用化合物A (40 mg/m2/天）和 盐酸二甲双胍。
[0089] (患者1103)男性，57岁，具有结肠癌和糖尿病。化合物A以905mg/m2/天施用， 另外患者用盐酸吡格列酮（Actos)和盐酸二甲双胍进行治疗。
[0090] 化合物A施用是7天连续IV输注。施用循环是一周开和一周关。患者101在施 用化合物A之前具有高血糖水平。在施用化合物A之后，血糖水平在每一个循环结束时降 低（由箭头指示）（图1)。
[0091] 患者1103在施用化合物A之前具有高血糖水平。在施用化合物A之后，血糖水平 在每一个循环结束时降低（由箭头指示）（图2)。
[0092] 除已开出的药物（盐酸吡格列酮或盐酸二甲双胍）作为基础治疗之外，对于每个 患者具有限定剂量的化合物A静脉内施用连续7天，随后为7天休息期。 具有7天输注期 和7天休息期的该14天时期定义为一个循环。糖尿病的基础治疗在该时期期间连续执行。 在施用期（每个循环的第一、第五和第八天）过程中或在施用后，测量血糖水平。
[0093] 图1和2显示每个患者的血糖水平。如图中所示，每个患者的血糖水平通过化合 物A与已知糖尿病药物（单独的盐酸二甲双胍、或盐酸吡格列酮/Actos和盐酸二甲双胍） 的伴随施用而降低。发现该效应不依赖于化合物A的剂量水平。
[0094] 未观察到化合物A的伴随使用的不良作用。
[0095] 如上所示，血糖水平未被II型糖尿病的已知药物充分控制的具有II型糖尿病的 患者的血糖水平通过化合物A的伴随使用而显著降低。
[0096] 实施例3 :灵长类动物研宄 该研宄的目的是评价化合物A，a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂化合物，对具 有高血糖症的年老灵长类动物的C肽、胰岛素和HbAlc水平的作用。化合物A是 4- (((6S，9S，9aS) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯。
[0097] 动物：具有高血糖症的年老的食蟹猴（ifecaca /kscicw/aris) (21 - 27岁），N=3。
[0098] 施用：化合物A (8mg/Kg/天）从第152到236天（84天）通过经由i. p.的连续输 注施用。生物化学测试：每周测量c肽、胰岛素和HbAlc水平。
[0099] 使用 ELECSYS c 肽测定（Roche Diagnostics，Hoffmann-La Roche Ltd.)和电化 学发光测定（ECLIA)读出来测量C肽，在高血糖症中升高的胰岛素生产的副产物。
[0100] 使用E测试II IRI，EIA方法（TOSOH Corp.，Tokyo)测量胰岛素水平。胰岛素水 平在高血糖症中升高。
[0101] 测量HbAlC或糖化血红蛋白（血红蛋白Alc)，以鉴定在测量前的先前数月中的平 均糖化血红蛋白，作为血浆葡萄糖浓度的测量。HbAlc水平在高血糖症中升高。使用Nordia N HbAlc 测定试剂盒，酶方法（Sekisui Medical Co.，Ltd.，日本）测量 HbAlc。
[0102] 如图3中可见，c肽水平在用化合物A处理的高血糖症猴中随着时间推移下降。如 图4中可见，胰岛素水平在用化合物A处理的高血糖症猴中随着时间推移下降。如图5中 可见，HbAlc水平在用化合物A处理的高血糖症猴中随着时间推移下降（测量mmol HbAlc 与mol血红蛋白的比）。因此，用化合物A处理降低多个升高的高血糖症标记，且改善血糖 水平。
【主权项】
1. 用于治疗糖尿病病症的α螺旋模拟的β连环蛋白抑制剂化合物或其药学可接受的 盐，其具有下式（I): 其中：A 是 _CHR7_， 其中R7是氢、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的芳基烷 基、任选取代的杂芳基烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环烷基烷基、任选取代 的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的环烷基或任选取代的杂环烷基； G 是-NH_、_NR6_、_0 _、_CHR6_ 或-C (R6) 2_， 其中R6独立地选自任选取代的烷基、任选取代的烯基和任选取代的炔基； R1是任选取代的芳基烷基、任选取代的杂芳基烷基、任选取代的环烷基烷基或任选取 代的杂环烷基烷基； R2是-W 21-W22-Rb-R20， 其中W21是-(⑶)-或- (SO2)- ;W22是键、-0-、-NH-或任选取代的低级亚烷基；Rb是键 或任选取代的低级亚烷基；并且R2tl是任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、 任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的环烷基或任选取代的杂环烷基；和 R3是任选取代的烷基、任选取代的烯基或任选取代的炔基。2. 根据权利要求1所述的化合物，其选自： (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二氧代八 氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -2-烯丙基-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二 氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二氧代六氢吡 嘆并[2, 1-c] [1，2, 4]噁二嘆-I (6H)-甲酰胺， (6S，9S) -8- ((2-氨基苯并[d]噻唑-4-基）甲基）-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二 甲基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -2-烯丙基-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基 甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯， 4- (((6S，9S) -I-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二氧代八 氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基磷酸钠， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(萘-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基磷酸钠， (6S，9S) -2-烯丙基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-4, 7-二氧代-N- ((R) -1-苯基乙 基）-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, l-c][l，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -2-烯丙基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-4, 7-二氧代-N- ((S) -1-苯基乙 基）-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, l-c][l，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基-2, 6-二甲基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹 啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -8-(苯并[b]噻吩-3-基甲基）-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲 基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S)-8-(苯并[c] [1，2,5]噻二唑-4-基甲基）-N-苄基-6-(4-羟基苄基）-2,9-二 甲基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-8-(异喹啉-5-基甲基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧 代八氢-IH-吡嗪并[2, Ι-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-8- ((5-氯噻吩并[3, 2-b]吡啶-3-基）甲基）-6- (4-羟基苄 基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, Ι-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹喔啉-5-基甲 基）八氢-IH-吡嗪并[2, Ι-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺，和 (6S，9S) -6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基）-N-(噻 吩-2-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, Ι-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺。3. 根据权利要求1所述的化合物，其选自： 4- (((6S，9S，9aS) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基 甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, Ι-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯，和 (6S，9S，9aS) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基 甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, Ι-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺。4. 药物组合物，其包含权利要求1、2或3的化合物。5. 用于糖尿病病症的治疗方法，其包括给有此需要的患者施用有效量的权利要求1、2 或3的化合物。6. 根据权利要求5的方法，其中所述病症是I型糖尿病。7. 根据权利要求5的方法，其中所述病症是II型糖尿病。8. 根据权利要求5的方法，其中所述病症是糖尿病性视网膜病变。9. 根据权利要求5的方法，其中所述病症是妊娠糖尿病。10. 用于高血糖症的治疗方法，其包括给有此需要的患者施用有效量的权利要求1、2 或3的化合物。
【专利摘要】本公开内容一般涉及α螺旋模拟结构，且具体涉及为β连环蛋白抑制剂的α螺旋模拟结构。公开内容还涉及在糖尿病和糖尿病病症例如糖尿病性神经病变治疗中的应用，以及包含此类α螺旋模拟β连环蛋白抑制剂的药物组合物。
【IPC分类】A61P3/10, A61K31/5365
【公开号】CN104902903
【申请号】CN201380054489
【发明人】小路弘行, 小田上刚直
【申请人】株式会社棱镜制药
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2013年10月21日
【公告号】CA2888972A1, EP2916843A1, WO2014061823A1
【专利说明】用于治疗I型和M型糖尿病的方法
[0001] 与相关申请的交叉参考 本申请要求于2012年10月19日提交的美国临时申请61/716, 142的优先权，所述美 国临时申请整体引入本文。
[0002] 公开内容背景 Wnt基因家族编码一大类与Intl/Wntl原癌基因和果幡无翅（Drosophila wingless) ("Wg")(果幡 Wntl 同系物）（Cadigan 等人（1997)Genes & Development 11:3286-3305) 相关的分泌性蛋白质。fct在多种组织和器官中表达，并且是许多发育过程所需的，所述 发育过程包括果蝇的分段；秀丽隐杆线虫（C. elegans)的内胚层发育；以及哺乳动物的肢 极性建立、神经嵴分化、肾形态建成、性别决定和脑发育（Parr，等人（1994)Curr. Opinion Genetics & Devel. 4:523-528)。Wnt途径是在胚胎发生期间和在成熟生物两者的发育 的主要调节物（Eastman,等人（1999)Curr Opin Cell Biol 11: 233-240 ;Peifer,等人 (2000)Science 287: 1606-1609)。
[0003] Wnt信号通过七跨膜域受体的Frizzled(〃Fz〃）家族转导（Bhanot等人（1996) Nature 382:225-230)。Frizzled细胞表面受体（Fzd)在经典和非经典Wnt信号转导两者 中均发挥重要作用。在经典途径中，Fzd和LRP5/6(低密度脂蛋白受体相关蛋白质5和6) 通过fct蛋白质活化后生成信号，其阻止通过"0连环蛋白破坏复合物"的0连环蛋白 磷酸化和降解，允许稳定的0连环蛋白易位和在核中累积，并且因此允许fct信号转导。 (Perrimon(1994)Cell 76:781-784)(Miller, J. R. (2001)Genome Biology ；3 (I):1-15)〇 非经典Wnt信号转导途径较不充分确定：存在已提议的至少两种非经典Wnt信号转导途径， 包括平面细胞极性（PCP)途径，Wnt/Ca++途径和汇聚延伸途径。
[0004]糖原合酶激酶3 (GSK3)、肿瘤抑制基因产物APC (腺瘤性结肠息肉病） (Gumbiner (1997) Curr. Biol. 7: R443-436)和支架蛋白Axin均为Wnt途径的负调节物，并 且一起形成连环蛋白破坏复合物"。在不存在fct配体的情况下，这些蛋白质形成复合 物且促进e连环蛋白的磷酸化和降解，而fct信号转导使复合物失活且阻止e连环蛋白 降解。稳定的e连环蛋白因此易位至核，在其中它结合TCF(T细胞因子）转录因子（也称 为淋巴样增强子结合因子-1〇^?1))，且充当1^^/1^?诱导的转录的辅激活物（8化似，等人 (2000)Cell 103: 311-320 ;Polakis，等人（2000)Genes Dev 14: 1837-1851)。
[0005] Wnt信号转导经由经典和非经典机制发生。在经典途径中，Fzd和LRP5/6通过Wnt 蛋白质活化后，稳定的0连环蛋白在核中累积且导致TCF靶基因活化（如上所述；Miller， J. R. (2001) Genome Biology ;3(1) :1-15)。非经典Wnt信号转导途径较不充分确定：已提 议至少两种非经典fct信号转导途径，包括平面细胞极性（PCP)途径和Wnt/Ca ++途径。
[0006] 与病理性高或低水平的Wnt信号转导相关的障碍包括但不限于骨质疏松症、骨关 节炎、多囊性肾病、糖尿病、精神分裂症、血管疾病、心脏疾病、非恶性增生性疾病和神经变 性疾病例如阿尔茨海默氏病。
[0007] 糖尿病描述特征在于慢性高血糖的代谢障碍，伴随碳水化合物、脂肪和蛋白质代 谢的紊乱，其起因于胰岛素分泌、胰岛素作用或两者的缺陷。糖尿病的效应包括多种器官的 长期损害、功能障碍和衰竭。糖尿病可以伴随特征性症状存在，例如口渴、多尿、视力模糊、 慢性感染、伤口愈合缓慢和体重减轻。在其最严重的形式中，可以发展成酮症酸中毒或非酮 症高渗状态（non-ketotic hyperosmolar state )，且导致木僵、昏迷和在不存在有效治疗 的情况下的死亡。通常症状不严重，未识别或可以是不存在的。因此，在作出诊断前，足以 引起病理和功能性变化的高血糖症可以长时间存在，偶然高达十年，诊断通常通过在常规 医学工作期间的禁食过夜后在尿中高葡萄糖水平的检测进行。糖尿病的长期效应包括并发 症的进行性发展，例如伴随潜在失明的视网膜病变、可以导致肾衰竭的肾病、神经病、微血 管变化和自主神经功能障碍。具有糖尿病的人患心血管、周围血管和脑血管疾病（统称为 "动脉血管（arteriovascular)"疾病）的风险增加。癌症的风险也增加。糖尿病的发展与 几种发病过程相关。这些包括破坏胰腺的胰岛素分泌e细胞的过程，伴随后续的胰岛素缺 陷以及肝和平滑肌细胞中的变化，所述变化导致对胰岛素摄取的抗性。碳水化合物、脂肪和 蛋白质代谢的异常是由于胰岛素对靶组织的缺陷作用，其起因于对胰岛素的不敏感性或胰 岛素缺乏。
[0008] 与潜在原因无关，糖尿病再分成1型糖尿病和2型糖尿病。1型糖尿病起因于自 身免疫介导的胰腺0细胞的破坏。破坏率是可变的，并且快速进展形式通常在儿童中观察 到，但还可以在成人中发生。缓慢进展形式的1型糖尿病一般在成人中发生，并且有时被称 为成人隐匿性自身免疫性糖尿病（LADA)。一些患者，特别是儿童和青少年，可以显示出酮 症酸中毒作为疾病的第一种表现。其他人具有适度的空腹高血糖症，在感染或其他应激的 存在下，其快速改变为严重高血糖症和/或酮症酸中毒。另外其他人特别是成人可以保持 足以阻止酮症酸中毒的残留e细胞功能多年。具有这种形式的1型糖尿病的个体通常变 得依赖胰岛素存活，并且处于酮症酸中毒的风险中。具有1型糖尿病的患者显示出很少或 无胰岛素分泌，如由低或无法检测水平的血浆C肽体现的。然而，存在一些形式的1型糖尿 病，其没有已知病因学，并且这些患者中的一些具有持久的胰岛素贫乏症（insulinopenia) 且有酮症酸中毒的倾向，但没有自身免疫的证据。这些患者被称为"1型特发性"。
[0009] 2型糖尿病是最常见形式的糖尿病，并且特征在于胰岛素作用和胰岛素分泌的障 碍，其中任一均可以是占优势的特征。两者通常在这种形式的糖尿病临床体现时存在。2型 糖尿病患者特征在于相对而不是绝对的胰岛素缺乏，并且对胰岛素的作用抗性。至少最初 且通常在其生命自始至终，这些个体不需要胰岛素治疗来存活。2型糖尿病占所有糖尿病病 例的90-95%。这种形式的糖尿病可以多年未被诊断，因为高血糖症通常不足够严重以引发 显著的糖尿病症状或症状仅未被识别。大多数具有2型糖尿病的患者是肥胖的，并且肥胖 自身可以引起或恶化胰岛素抗性。通过常规重量标准并不肥胖的那些人中的许多可以具有 占优势地分布在腹腔区域（内脏脂肪）中的增加的体脂百分比。酮症酸中毒在这类糖尿病 中不常见，并且通常与另一种病的应激相关而出现。然而，具有这种形式的糖尿病的患者可 以具有看起来正常或升高的胰岛素水平，如果其0细胞功能正常，这些糖尿病患者中的高 血糖水平可以预期导致更高的胰岛素值。因此，胰岛素分泌通常是缺陷的且不足以补偿胰 岛素抗性。另一方面，一些高血糖个体具有基本上正常的胰岛素作用，但显著受损的胰岛素 分泌。
[0010] 糖尿病性视网膜病变是由于衬里血管的细胞中的变化而在糖尿病中发展的眼疾 病。当葡萄糖水平高时，如在糖尿病中，葡萄糖可以以许多方式引起损害。例如，葡萄糖或葡 萄糖的代谢产物与蛋白质的氨基结合，导致组织损害。另外，过量葡萄糖进入多元醇途径， 导致山梨糖醇的累积。山梨糖醇无法由视网膜的细胞代谢，并且可以促成高细胞内渗透压、 细胞内水肿、扩散受损、组织缺氧、毛细血管细胞损害和毛细血管弱化。糖尿病性视网膜病 变涉及毛细血管基底膜的增厚，并且阻止周细胞接触毛细血管的内皮细胞。周细胞的丧失 增加毛细血管的泄露且导致血-视网膜屏障的损毁。减弱的毛细血管导致动脉瘤形成和进 一步泄露。高血糖症的这些效应还可以损害视网膜中的神经元功能。这是糖尿病性视网膜 病变的早期，称为非增殖性糖尿病性视网膜病变。
[0011] 视网膜毛细血管在糖尿病中可以变得堵塞，引起视网膜中的缺血区。非灌注组织 通过诱发来自现有血管的新血管生长（血管生成）响应。这些新血管还可以引起失明。
[0012] 考虑到维持人糖尿病患者的良好血糖控制的困难，抑制或减慢视网膜毛细血管细 胞和视网膜神经元损害的药物开发将提供降低在糖尿病性视网膜病变中发生的早期细胞 损害的方式。
[0013] 存在用于糖尿病和糖尿病并发症例如糖尿病性视网膜病变的新治疗的迫切需要。
[0014] 公开内容概述 本公开内容一般涉及a螺旋模拟结构，且具体涉及为0连环蛋白抑制剂的a螺旋模 拟结构。公开内容还涉及在糖尿病、高血压和糖尿病病症例如糖尿病性神经病变治疗中的 应用，以及包含此类a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂的药物组合物。
[0015] 附图简述 图1.患者101的血糖水平。
[0016] 图2?患者1103的血糖水平。
[0017] 图3?测试动物的C肽水平。
[0018] 图4?测试动物的胰岛素水平。
[0019]图 5?测试动物的HbAlc水平(mmol HbAlc/mol Hb/天）。
[0020] 公开内容详述 近来，已开发了非肽化合物，其模拟生物活性蛋白质或肽中发现的转角 (reverse-turn)的二级结构。例如，美国专利号5, 440, 013以及公开的PCT申请号 W094/03494、W001/00210A1和W001/16135A2,各自公开了构象约束的非肽化合物，其模拟 转角的三维结构。另外，美国专利号5, 929, 237及其部分继续申请美国专利号6, 013, 458 公开了构象约束的化合物，其模拟生物活性肽和蛋白质中的转角区域的二级结构。与转角 模拟物相关，已公开了构象约束的化合物，其模拟W02007/056513和W02007/056593中的生 物活性肽和蛋白质中的a螺旋区域的二级结构。
[0021] 本文公开的是用于治疗I型和II型糖尿病 、糖尿病性视网膜病变、高血压和妊娠 糖尿病的治疗和化合物。
[0022] 本发明的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂的结构和化合物公开于WO 2010/044485、TO 2010/128685、TO 2009/148192 和 US 2011/0092459,其各自整体引入本 文作为参考。这些化合物目前已发现可用于治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病变、高血压和妊 娠糖尿病。
[0023] 本发明的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂的优选结构具有下式（I):
其中 A 是 _CHR7_， 其中 R7是任选取代的芳基烷基、任选取代的杂芳基烷基、任选取代的环烷基烷基或任选取 代的杂环烷基烷基； G 是-NH-、-NR6-或-O-其中 R6是低级烷基或低级烯基； R1 是-Ra-R 10; 其中 Ra是任选取代的低级亚烷基，和 Rltl是任选取代的二环稠合芳基或任选取代的二环稠合杂芳基； R2是- (CO)-NH-Rb-R 20， 其中 Rb是键或任选取代的低级亚烷基；和 R2tl是任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；和 R3是Cp4烷基。
[0024] 这些化合物尤其可用于预防和/或治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病变、高血糖症 和妊娠糖尿病。
[0025] 本发明的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂的更优选结构具有在上述式（I)中的下 述取代基： A 是 _CHR7_， 其中 R7是任选由羟基或C i_4烷基取代的芳基烷基； G 是-NH-、-NR6-或-0_ 其中 R6是C i_4烷基或C i_4烯基； R1 是-Ra-R 10; 其中 Ra是Cp4亚烷基，和 Rltl是任选由卤素或氨基取代的二环稠合芳基或二环稠合杂芳基； R2是- (CO)-NH-Rb-R 20， 其中 Rb是键或Ch亚烷基；和 R2tl是芳基或杂芳基；和 R3是Cp4烷基。
[0026] 这些化合物尤其可用于预防和/或治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病变、高血糖症 和妊娠糖尿病。
[0027] 本发明的最优选的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂如下： (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二氧代八 氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -2-烯丙基-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二 氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二氧代六氢吡 嘆并[2, 1-c] [1，2, 4]噁二嘆-I (6H)-甲酰胺， (6S，9S) -8- ((2-氨基苯并[d]噻唑-4-基）甲基）-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二 甲基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -2-烯丙基-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基 甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二氧代八 氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基磷酸钠， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(萘-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基磷酸钠， (6S，9S) -2-烯丙基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-4, 7-二氧代-N- ((R) -1-苯基乙 基）-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, l-c][l，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -2-烯丙基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-4, 7-二氧代-N- ((S) -1-苯基乙 基）-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, l-c][l，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基-2, 6-二甲基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹 啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -8-(苯并[b]噻吩-3-基甲基）-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲 基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S)-8-(苯并[c] [1，2,5]噻二唑-4-基甲基）-N-苄基-6-(4-羟基苄基）-2,9-二 甲基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-8-(异喹啉-5-基甲基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧 代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-8- ((5-氯噻吩并[3, 2-b]吡啶-3-基）甲基）-6- (4-羟基苄 基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹喔啉-5-基甲 基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺，和 (6S，9S) -6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基）-N-(噻 吩-2-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺。
[0028] 这些化合物尤其可用于预防和/或治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病变、高血糖症 和妊娠糖尿病。
[0029] 在最优选的实施方案中，所述化合物是： 4- (((6S，9S，9aS) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基 甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯，或 (6S，9S，9aS) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基 甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺。
[0030] 这些化合物尤其可用于预防和/或治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病变、高血糖症 和妊娠糖尿病。
[0031] 虽然不希望被束缚，但这些化合物在治疗这些病症中的有效性部分基于这些化合 物通过抑制CBP阻断TCF4/ e连环蛋白转录途径的能力，从而改变wnt途径信号转导，已发 现这改善糖尿病后果。
[0032] "0连环蛋白抑制剂"是可以降低或阻止0连环蛋白活性的物质。0连环蛋白活 性包括易位至核，与TCF (T细胞因子）转录因子结合，和辅活化TCF转录因子诱导的TCF靶 基因转录。
[0033] 本文公开的是用于治疗糖尿病病症和高血糖症的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂 化合物。
[0034] 如本文使用的，术语"糖尿病病症"包括胰岛素依赖性糖尿病（也称为IDDM，1型 糖尿病）和非胰岛素依赖性糖尿病（也称为NIDDM，2型糖尿病）两者，以及前驱糖尿病和 妊娠糖尿病。"糖尿病性视网膜病变"是眼糖尿病病症。
[0035] 如本文使用的，"治疗"指在改变待治疗的个体或细胞的疾病过程的尝试中的临 床干预，并且可以在临床病理学的过程期间执行。治疗的疗效包括但不限于预防疾病的复 发，减轻症状，缩小疾病的任何直接或间接病理后果，减小疾病进展速率，改善或减轻疾病 状态，以及缓解或改善预后。
[0036] 如本文使用的，术语"治疗有效量"和"有效量"可互换使用，以指本发明的组合物 的量，其足以预防糖尿病或其一种或多种症状的发展或发作，增强或改善另一种疗法的一 种或多种效应，和/或改善糖尿病的一种或多种症状。对于糖尿病患者，优选的治疗有效量 是有效控制血糖水平或使血糖水平正常的量。
[0037] 治疗有效量可以以一个或多个剂量施用于患者，所述剂量足以减轻、改善、稳定、 逆转或减慢疾病的进展，或以其他方式降低疾病的病理后果，或降低疾病的症状。改善或降 低无需是持久的，可以是范围为至少一小时、至少一天或至少一周或更久的时间段。有效量 一般由医生在具体情况的基础上进行确定，并且在本领域技术人员的技术内。当确定实现 有效量的适当剂量时，一般考虑到几种因素。这些因素包括患者的年龄、性别和重量，待治 疗的病症，病症的严重性，以及施用途径、剂型和方案以及所需结果。
[0038] 如本文使用的，术语"对象"和"患者"可互换使用，并且指动物，优选哺乳动物例 如非灵长类动物（例如牛、猪、马、猫、狗、大鼠等）和灵长类动物（例如猴和人），且最优选 人。
[0039] 本文描述的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂可以掺入药物组合物内用于单独或组 合施用于对象，用于治疗或预防本文描述的障碍。此类组合物通常包括活性剂和药学可接 受的载体。如本文使用的，术语"药学可接受的载体"包括与药学施用相容的盐水、溶剂、分 散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等等。补充活性化合物也可以掺入组 合物内。本文描述的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂用于预防或治疗疾病。具体地，公开 内容提供了治疗处于糖尿病和糖尿病病症的风险中（或易患糖尿病和糖尿病病症）的对象 的预防和治疗方法两者。相应地，呈现的方法提供了通过给有此需要的对象施用有效量的 a螺旋模拟0连环 蛋白抑制剂，用于预防和/或治疗对象的糖尿病和糖尿病病症。例如， 对象可以在改善糖尿病病症的一种或多种因素的努力中施用a螺旋模拟0连环蛋白抑制 剂。
[0040] 在一个方面，本发明提供了包含下述的药物组合物或组合：(a)本文描述的a螺 旋模拟e连环蛋白抑制剂，和（b)抗糖尿病剂或其药学可接受的盐。
[0041] 抗糖尿病剂类别在下文提及，例如双胍类、噻唑烷二酮类、磺酰脲类、格列奈类、a 葡糖苷酶抑制剂类、GLP-I类似物类等。
[0042] 在一个实施方案中，抗糖尿病剂选自由双胍、噻唑烷二酮、磺酰脲、格列奈、a葡糖 苷酶抑制剂、GLP-I类似物或其药学可接受的盐组成的G3组。
[0043] G3组包含双胍。双胍的例子是二甲双胍、苯乙双胍和丁双胍。优选双胍是二甲双 胍。与双胍特别是二甲双胍组合的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂可以提供更有效的血糖 控制和/或可以与双胍一起作用，例如以降低重量，其例如对代谢综合征具有总体有益作 用，所述代谢综合征通常与2型糖尿病相关。
[0044] 本文采用的术语"二甲双胍"指二甲双胍或其药学可接受的盐，例如盐酸盐、二甲 双胍（2:1)富马酸盐和二甲双胍（2:1)琥珀酸盐、氢溴酸盐、对氯苯氧基乙酸盐或双羟萘酸 盐、以及其他已知的单和二元羧酸的二甲双胍盐。优选本文采用的二甲双胍是二甲双胍盐 酸盐。
[0045] G3组包含噻唑烷二酮。噻唑烷二酮（TZD)的例子是吡格列酮和罗格列酮。TZD疗 法与重量增加和脂肪再分布相关。另外，TZD引起流体潴留且不指示用于具有充血性心力 衰竭的患者中。用TZD的长期治疗进一步与增加的骨折风险相关。与噻唑烷二酮特别是吡 格列酮组合的a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂可以提供更有效的血糖控制和/或可以使得 用TZD治疗的副作用降到最低。
[0046] G3组包含磺酰脲。磺酰脲的例子是格列本脲（glibenclamide)、甲苯磺丁脲、格列 美脲、格列吡嗪、格列喹酮、格列波脲、格列本脲（glyburide)、格列派特和格列齐特。优选磺 酰脲是甲苯磺丁脲、格列喹酮、格列本脲和格列美脲，特别是格列本脲和格列美脲。因为磺 酰脲的功效在疗程中损耗，所以a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂与磺酰脲的组合可以对患 者提供就更佳的血糖控制而言的另外利益。另外，用磺酰脲的治疗通常与在治疗过程中的 逐步重量增加相关，并且a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂可以使得用磺酰脲的治疗的该副 作用降到最低和/或改善代谢综合征。另外，与磺酰脲组合的a螺旋模拟0连环蛋白抑 制剂可以使低血糖症降到最低，所述低血糖症是磺酰脲的另一种不希望的副作用。该组合 还可以使磺酰脲剂量降低，这可以转变为更少的低血糖症。
[0047] 如本文采用的，"格列本脲"、"格列美脲"、"格列喹酮"、"格列波脲"、"格列齐特"、 "格列派特"、"甲苯磺丁脲"和"格列吡嗪"组的每个术语指各自的活性药物或其药学可接受 的盐。
[0048] G3组包含格列奈。格列奈的例子是那格列奈、瑞格列奈和米格列奈。因为它们的 功效在疗程中损耗，所以a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂与美格列奈的组合可以对患者提 供就更佳的血糖控制而言的另外利益。另外，用美格列奈的治疗通常与在治疗过程中的逐 步重量增加相关，并且a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂可以使得用美格列奈治疗的该副作 用降到最低和/或改善代谢综合征。另外，与美格列奈组合的a螺旋模拟0连环蛋白抑 制剂可以使低血糖症降到最低，所述低血糖症是美格列奈的另一种不希望的副作用。该组 合还可以使美格列奈剂量降低，这可以转变为更少的低血糖症。
[0049] G3组包含a葡糖苷酶的抑制剂。a葡糖苷酶的抑制剂的例子是阿卡波糖、伏格 列波糖和米格列醇。来自a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂和a葡糖苷酶抑制剂组合的另 外利益可以涉及例如在更低剂量的个别药物下的更有效的血糖控制，和/或降低a葡糖苷 酶抑制剂的不希望的胃肠道副作用。
[0050] 如本文采用的，"阿卡波糖"、"伏格列波糖"和"米格列醇"组的每个术语指各自的 活性药物或其药学可接受的盐。
[0051] G3组包含GLP-I类似物的抑制剂。GLP-I类似物的例子是艾塞那肽（exenatide)、 利拉鲁肽（liraglutide)、他司鲁泰（taspoglutide)、司美鲁肽（semaglutide)、阿必鲁肽 (albiglutide)和利西拉肽（lixisenatide)。a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂和GLP-I类似 物的组合可以实现例如在更低剂量的个别药物下的优良的血糖控制。另外，例如GLP-I类 似物的体重降低能力可以连同a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂的特性一起发挥积极作用。 另一方面，例如当降低剂量的GLP-I类似物与a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂组合应用时， 可以获得副作用（例如恶心、胃肠道副作用如呕吐）的降低。
[0052] 如本文采用的，"艾塞那肽"、"利拉鲁肽"、"他司鲁泰"、"司美鲁肽"、"阿必鲁肽" 和"利西拉肽"组的每个术语指各自的活性药物或其药学可接受的盐。
[0053] 根据本发明的另一个方面，提供了用于在有此需要的患者中预防代谢障碍、减慢 代谢障碍进展、延迟或治疗代谢障碍的方法，所述代谢障碍选自1型糖尿病、2型糖尿病、葡 萄糖耐量受损（IGT)、空腹血糖受损（IFG)、高血糖症、餐后高血糖症、超重、肥胖和代谢综 合征，所述方法的特征在于例如将本文描述的a螺旋模拟e连环蛋白抑制剂和任选的第 二种和任选的第三种如上文和下文定义的抗糖尿病剂例如组合施用于患者。
[0054] 如通过使用根据本发明的药物组合物或组合，可获得有此需要的患者中的血糖控 制的改善，以及可以治疗与增加的血糖水平相关或由增加的血糖水平引起的那些病症和/ 或疾病。
[0055] 糖尿病特征在于大于或等于126 mg/dl的空腹血衆葡萄糖水平。糖尿病对象具有 大于或等于126 mg/dl的空腹血衆葡萄糖水平。前驱糖尿病特征在于大于或等于110 mg/ dl且小于126 mg/dl的空腹血浆葡萄糖（FPG)受损水平；或葡萄糖耐量受损；或胰岛素抗 性。前驱糖尿病对象是空腹葡萄糖受损（大于或等于110 mg/dl且小于126 mg/dl的空腹 血浆葡萄糖（FPG)水平）；或葡萄糖耐量受损（>140 mg/dl和〈200 mg/dl的2小时血浆葡 萄糖水平）；或胰岛素抗性的对象，导致发展糖尿病的风险增加。
[0056] 视网膜病变是I型糖尿病的失明主因，并且在II型糖尿病中也常见。视网膜病变 的程度依赖糖尿病的持续时间，并且一般在糖尿病发作后十年或更多内开始发生。糖尿病 性视网膜病变可以分类为非增生性的，其中视网膜病变特征在于毛细血管渗透性增加、水 肿和渗出物，或增生性的，其中视网膜病变特征在于从视网膜延伸到玻璃体的新生血管生 成、结瘢、纤维组织沉积和视网膜脱离的可能性。糖尿病性视网膜病变被认为通过由于高血 糖的糖基化蛋白质发展引起。
[0057] "妊娠糖尿病"指伴随在妊娠期间的发作或首次识别的任何程度的葡萄糖耐受不 良。临床诊断一般基于多步过程。评估最通常通过测量在空腹或非空腹状态下的50克经 口葡萄糖负荷测试后1小时的血浆葡萄糖来执行。如果葡萄糖负荷测试的值是< 140 mg/ dl，则完成3小时100 g经口葡萄糖耐量测试。如果符合下述标准中的两个或更多个，则 患者视为需要血糖控制：空腹静脉血浆彡105 mg/dl ;在1小时的静脉血浆彡190 ma/dl， 在2小时的静脉血浆彡165 mg/dl或在3小时的静脉血浆彡145 mg/dl。Williams等人， Diabetes Care 22: 418-421，1999。
[0058] "高血糖症"或高血糖是其中过量葡萄糖在血浆中循环的病症。这一般诊断为高于 11. I mmol/1 (200 mg/dl)的葡萄糖水平，尽管症状无法开始变得引人注意，直到达到更高 的值例如15 - 20 mmol/1 (~250 - 300 mg/dl)。具有在100和126 mg/dl之间的一致血糖范 围的对象视为高血糖，而高于126 mg/dl或7 mmol/1-般视为具有糖尿病。超过7 mmol/ 1(125 mg/dl)的慢性血糖水平可以产生器官损害。
[0059] 本文描述的化合物（上述a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂）和组合物用于治疗糖 尿病病症包括1型糖尿病和2型糖尿病。本文描述的化合物和组合物还可用于治疗和/或 预防高血糖症、前驱糖尿病和/或妊娠糖尿病。
[0060] 糖尿病的治疗指施用本文描述的化合物或组合以治疗糖尿病对象。糖尿病治疗的 一个后果是降低增加的血浆葡萄糖浓度。糖尿病治疗的另一个后果是降低增加的胰岛素浓 度。糖尿病治疗的另外一个后果是降低增加的血液甘油三酯浓度。糖尿病治疗的另外一个 后果是增加胰岛素敏感性。糖尿病治疗的另外一个后果可以是增强具有葡萄糖耐受不良的 对象的葡萄糖耐受。糖尿病治疗的另外一个后果是降低葡萄糖抗性。糖尿病治疗的另一个 后果是使血浆胰岛素水平正常。糖尿病治疗的另外一个后果是血糖控制的改善，特别是在 2型糖尿病中。糖尿病治疗的另外一个后果是增加肝胰岛素敏感性。
[0061] a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂还可以施用于对象，以治疗或预防糖尿病性视网 膜病变。糖尿病性视网膜病变特征在于毛细血管微动脉瘤和圆点状出血。其后，微血管阻 塞引起棉絮斑在视网膜上形成。此外，由于血管渗透性增加，可以在具有糖尿病性视网膜病 变的个体中形成视网膜水肿和/或硬性渗出物。随后，新生血管形成出现，并且由在玻璃体 中生长的结缔组织的牵引力引起视网膜脱离。还可以发生虹膜红变和新生血管性青光眼， 其反过来又可以导致失明。糖尿病性视网膜病变的症状包括但不限于阅读困难、视力模糊、 在一只眼中的视力突然丧失、看到光周围的环、看到暗点和/或看到闪光。
[0062] a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂还可以施用于对象，以治疗或预防高血糖症，包括 血浆葡萄糖水平的降低，优选血浆葡萄糖水平至低于100 mg/dl的降低。
[0063] 任何合适的施用途径均可用于给哺乳动物尤其是人提供有效剂量的本文描述的 化合物。例如，可以采用经口、直肠、局部、肠胃外、眼、肺、鼻等等。剂型包括片剂、锭剂、分 散体、悬浮液、溶液、胶囊、乳膏、软膏、气溶胶等。优选地，本文描述的化合物经口施用。 [0064] 取决于采用的具体化合物、施用模式、待治 疗的病症和待治疗病症的严重性，采用 的活性成分的有效剂量可以改变。此类剂量本领域技术人员可以容易地确定。
[0065] 当治疗或控制本文描述的化合物指示用于其的糖尿病和/或其他疾病时，当本文 描述的化合物以约〇. 1毫克至约100毫克/千克动物体重的日剂量施用，优选作为单一日 剂量或以每天两至六次的分份剂量给药，或以持续释放形式给药时，获得一般令人满意的 结果。对于最大型的哺乳动物，日总剂量是约1.0毫克至约1000毫克。在70 kg成年人的 情况下，日总剂量一般为约1毫克至约500毫克。对于特别有效的化合物，成年人的剂量可 以低至0.1 mg。在一些情况下，日剂量可以高达1克。剂量方案可以在该范围内或甚至在 该范围外进行调整，以提供最佳治疗应答。
[0066] 经口施用通常使用片剂或胶囊进行。片剂和胶囊中的剂量的例子是0.1 mg、0. 25 mg、0. 5 mg、l mg、2 mg、5 mg、10 mg、15 mg、20 mg、25 mg、30 mg、40 mg、50 mg、100 mg、200 mg、250 mg、300 mg、400 mg、500 mg和750 mg。其他经口形式也可以具有相同或相似剂量。 [0067] 本文还描述的是药物组合物，其包含本文描述的化合物和药学可接受的载体。本 文描述的药物组合物包含本文描述的化合物或药学可接受的盐作为活性成分，以及药学可 接受的载体和任选的其他治疗成分。如果施用前体药物，则药物组合物还可以包含前体药 物或其药学可接受的盐。
[0068] 组合物可以适合于经口、直肠、局部、肠胃外（包括皮下、肌内和静脉内）、眼（眼 睛）、肺（鼻或颊吸入）或鼻施用，尽管在任何给定情况下最合适的途径取决于待治疗病症 的性质和严重性以及活性成分的性质。它们可以方便地以单位剂型呈现，并且通过药学领 域众所周知的任意方法进行制备。
[0069] 在实际使用中，本文描述的化合物可以根据常规药学配料技术组合为在具有药学 载体的紧密混合物中的活性成分。载体可以采取广泛多样的形式，取决于施用所需的制剂 形式，例如经口或肠胃外（包括静脉内）。在将组合物制备为经口剂型中，可以采用通常药 学介质中的任一种，例如在经口液体制剂例如悬浮液、酏剂和溶液的情况下的水、乙二醇、 油、醇、调味剂、防腐剂、着色剂等；或在经口固体制剂例如粉末、硬和软胶囊以及片剂的情 况下的淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等，其中与液体制剂 相比，更优选固体经口制剂。
[0070] 由于其易于施用，片剂和胶囊代表在采用固体药学载体的情况下最有利的经口剂 量单位形式。需要时，片剂可以通过标准水性或非水性技术包被。此类组合物和制剂应含 有至少0. 1百分比的活性化合物。这些组合物中的活性化合物的百分比当然可以改变，并 且可以方便地在约2百分比至约60百分比的单位重量之间。此类治疗有用组合物中的活 性化合物的量是这样的，从而使得获得有效剂量。活性化合物还可以作为例如液体滴剂或 喷雾剂鼻内施用。
[0071] 片剂、丸剂、胶囊等还可以含有粘合剂例如黄蓍胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；赋 形剂例如磷酸二f?(dicalcium phosphate);崩解剂例如玉米淀粉、马铃薯淀粉、海藻酸；润 滑剂例如硬脂酸镁；和甜味剂例如蔗糖、乳糖或糖精。当剂量单位形式是胶囊时，除上述类 型的材料之外，它还可以含有液体载体例如脂肪油。
[0072] 多种其他材料可以作为包衣存在或修饰剂量单位的物理形式。例如，片剂可以由 虫胶、糖或两者包被。除活性成分之外，糖浆剂或酏剂还可以含有蔗糖作为甜味剂，对羟基 苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯作为防腐剂，染料和调味料例如樱桃或橙调味料。
[0073] 对于眼应用，将治疗化合物配制成适合用于眼中的溶液、悬浮液和软膏。对于眼制 剂一般，参见 Mitra(编辑），Ophthalmic Drug Delivery Systems，Marcel Dekker，Inc.， New York，N. Y. (1993)以及 Havener，W. H.，Ocular Pharmacology，C. V. Mosby Co.，St. L〇Uis(1983)。眼药物组合物可以适合于以溶液、悬浮液、软膏、乳膏的形式或作为固体插入 物局部施用于眼。对于单一剂量，0.1 ng - 5000 yg、l ng - 500 yg或10 ng - 100 yg 的芳香族阳离子肽可以应用于人眼。
[0074] 眼制剂可以含有无毒辅助物质，例如在使用中是无害的抗菌组分，例如硫柳汞、苯 扎氯按、对羟基苯甲酸甲醋和对羟基苯甲酸丙醋、溴化苄基十二酸按（benzyldodecinium bromide)、苄醇或苯基乙醇；缓冲成分例如氯化钠、硼酸钠、乙酸钠、柠檬酸钠或葡糖酸盐缓 冲剂；及其他常规成分例如脱水山梨糖醇单月桂酸酯、三乙醇胺、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单 棕榈酸醋（monopalmitylate)、乙二胺四乙酸等。
[0075] 眼溶液或悬浮液可以根据需要经常施用，以维持眼中可接受水平的a螺旋模拟 0连环蛋白抑制剂。对哺乳动物眼的施用可以是每天约一次或两次。
[0076] 本文描述的化合物还可以肠胃外施用。这些活性化合物的溶液或悬浮液可以在水 中与表面活性剂或表面活性剂的混合物适当混合进行制备，所述表面活性剂例如羟丙基纤 维素、聚山梨醇酯80以及中和长链脂肪酸的甘油单酯和甘油二酯。分散体还可以在甘油、 液体聚乙二醇及其在油中的混合物中进行制备。在普通贮存和使用条件下，这些制剂含有 防腐剂以阻止微生物的生长。
[0077] 适合于注射使用的药学形式包括无菌水溶液或分散体和用于临时制备无菌可注 射溶液或分散体的无菌粉末。在所有情况下，形式均必须是无菌的且必须流动至可容易注 射的程度。它在制造和贮存条件下必须是稳定的，并且必须针对微生物例如细菌和真菌的 污染作用进行防腐。载体可以是含有例如水、乙醇、多元醇（例如甘油、丙二醇和液体聚乙 二醇）、其合适混合物和植物油的溶剂或分散介质。
[0078] 本公开内容进一步通过下述非限制性实施例举例说明。 实施例
[0079] 实施例1 :报道基因测定 该研宄的目的是评价化合物A，a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂化合物，用于抑制Wnt 信号转导途径的效应。化合物A是4-(((6S，9S，9aS)-1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲 基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基） 甲基）苯基二氢磷酸酯。
[0080] 使用STF报道细胞系（在SuperTOPFlash报道元件的八个串联重复的控制下，用 萤火虫萤光素酶基因稳定转染的人胚肾细胞系Hek-293 116:883-895, 2004)，根据 下述操作进行fct信号转导途径的抑制作用的筛选。
[0081] 生长培养基：杜尔贝科改良伊格尔培养基（Dulbecco'sModifiedEagle Medium，DMEM)、10%FBS、Pen-Str印，补充有 400g/mlG418抗生素，以维持SuperTOPFlash 驱动的萤光素酶基因的选择。
[0082] 在测定前一天，将细胞在200微升完全生长培养基中以20, 000细胞/孔拆分到白 色不透明96孔板内。使板在37°C、5% CO2下温育过夜，以允许细胞附着至表面。
[0083] 第二天，以2X所需最终浓度（所有条件均一式两份完成）制备抑制剂，以在不含 G418的完全生长培养基中测试。使用多重移液管（multiple pipettor)小心地从每个孔中 吸取现有培养基。将含有抑制剂（化合物A)的50微升新鲜生长培养基（不含G148)加入 每个孔中。2个孔仅含有培养基，2个孔用于刺激对照，2个孔用于DMSO对照，并且孔用于阳 性对照ICG-001 (2、5和10微摩尔）。
[0084] 一旦加入所有抑制剂和对照，板就在37°C、5% CO2下温育1小时。在板温育时，制 备在完全生长培养基（不含G148)中的新鲜20 mM LiCl。在1小时后，将板从温箱中取出， 并且将含有20 mM LiCl的50微升培养基加入每个孔中，除了未受刺激的对照的两个孔之 外（向其中单独加入50微升完全培养基）。使板在37°C、5% CO2下温育24小时。
[0085] 在24小时后，将100微升BrightGlo试剂（Promega，Madison，WI)加入每个孔中。 使板振荡5分钟以确保完全裂解。使用PackardTopCount(PerkinElmer，Inc.)阅读板。
[0086] 如通过报道基因测定所测定的，发现化合物A在I y M的浓度下具有超过50%的 抑制活性。
[0087] 实施例2 :人临床试验中的血糖水平 该研宄的目的是评价化合物A，a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂化合物，对糖尿病患 者的血糖水平的作用。化合物A是4- (((6S，9S，9aS) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲 基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基） 甲基）苯基二氢磷酸酯。
[0088] 具有癌症和II型糖尿病的患者加入临床试验（具有晚期实体瘤的对象的安全和 功效研宄）。通过测量患者的血糖水平来研宄化合物A用于治疗糖尿病的功效。加入该研 宄中的患者条件如下： (患者101)男性，66岁，具有乙状结肠癌和糖尿病。施用化合物A (40 mg/m2/天）和 盐酸二甲双胍。
[0089] (患者1103)男性，57岁，具有结肠癌和糖尿病。化合物A以905mg/m2/天施用， 另外患者用盐酸吡格列酮（Actos)和盐酸二甲双胍进行治疗。
[0090] 化合物A施用是7天连续IV输注。施用循环是一周开和一周关。患者101在施 用化合物A之前具有高血糖水平。在施用化合物A之后，血糖水平在每一个循环结束时降 低（由箭头指示）（图1)。
[0091] 患者1103在施用化合物A之前具有高血糖水平。在施用化合物A之后，血糖水平 在每一个循环结束时降低（由箭头指示）（图2)。
[0092] 除已开出的药物（盐酸吡格列酮或盐酸二甲双胍）作为基础治疗之外，对于每个 患者具有限定剂量的化合物A静脉内施用连续7天，随后为7天休息期。 具有7天输注期 和7天休息期的该14天时期定义为一个循环。糖尿病的基础治疗在该时期期间连续执行。 在施用期（每个循环的第一、第五和第八天）过程中或在施用后，测量血糖水平。
[0093] 图1和2显示每个患者的血糖水平。如图中所示，每个患者的血糖水平通过化合 物A与已知糖尿病药物（单独的盐酸二甲双胍、或盐酸吡格列酮/Actos和盐酸二甲双胍） 的伴随施用而降低。发现该效应不依赖于化合物A的剂量水平。
[0094] 未观察到化合物A的伴随使用的不良作用。
[0095] 如上所示，血糖水平未被II型糖尿病的已知药物充分控制的具有II型糖尿病的 患者的血糖水平通过化合物A的伴随使用而显著降低。
[0096] 实施例3 :灵长类动物研宄 该研宄的目的是评价化合物A，a螺旋模拟0连环蛋白抑制剂化合物，对具 有高血糖症的年老灵长类动物的C肽、胰岛素和HbAlc水平的作用。化合物A是 4- (((6S，9S，9aS) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯。
[0097] 动物：具有高血糖症的年老的食蟹猴（ifecaca /kscicw/aris) (21 - 27岁），N=3。
[0098] 施用：化合物A (8mg/Kg/天）从第152到236天（84天）通过经由i. p.的连续输 注施用。生物化学测试：每周测量c肽、胰岛素和HbAlc水平。
[0099] 使用 ELECSYS c 肽测定（Roche Diagnostics，Hoffmann-La Roche Ltd.)和电化 学发光测定（ECLIA)读出来测量C肽，在高血糖症中升高的胰岛素生产的副产物。
[0100] 使用E测试II IRI，EIA方法（TOSOH Corp.，Tokyo)测量胰岛素水平。胰岛素水 平在高血糖症中升高。
[0101] 测量HbAlC或糖化血红蛋白（血红蛋白Alc)，以鉴定在测量前的先前数月中的平 均糖化血红蛋白，作为血浆葡萄糖浓度的测量。HbAlc水平在高血糖症中升高。使用Nordia N HbAlc 测定试剂盒，酶方法（Sekisui Medical Co.，Ltd.，日本）测量 HbAlc。
[0102] 如图3中可见，c肽水平在用化合物A处理的高血糖症猴中随着时间推移下降。如 图4中可见，胰岛素水平在用化合物A处理的高血糖症猴中随着时间推移下降。如图5中 可见，HbAlc水平在用化合物A处理的高血糖症猴中随着时间推移下降（测量mmol HbAlc 与mol血红蛋白的比）。因此，用化合物A处理降低多个升高的高血糖症标记，且改善血糖 水平。
【主权项】
1. 用于治疗糖尿病病症的α螺旋模拟的β连环蛋白抑制剂化合物或其药学可接受的 盐，其具有下式（I): 其中：A 是 _CHR7_， 其中R7是氢、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的芳基烷 基、任选取代的杂芳基烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环烷基烷基、任选取代 的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的环烷基或任选取代的杂环烷基； G 是-NH_、_NR6_、_0 _、_CHR6_ 或-C (R6) 2_， 其中R6独立地选自任选取代的烷基、任选取代的烯基和任选取代的炔基； R1是任选取代的芳基烷基、任选取代的杂芳基烷基、任选取代的环烷基烷基或任选取 代的杂环烷基烷基； R2是-W 21-W22-Rb-R20， 其中W21是-(⑶)-或- (SO2)- ;W22是键、-0-、-NH-或任选取代的低级亚烷基；Rb是键 或任选取代的低级亚烷基；并且R2tl是任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、 任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的环烷基或任选取代的杂环烷基；和 R3是任选取代的烷基、任选取代的烯基或任选取代的炔基。2. 根据权利要求1所述的化合物，其选自： (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二氧代八 氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -2-烯丙基-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二 氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二氧代六氢吡 嘆并[2, 1-c] [1，2, 4]噁二嘆-I (6H)-甲酰胺， (6S，9S) -8- ((2-氨基苯并[d]噻唑-4-基）甲基）-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二 甲基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -2-烯丙基-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基 甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯， 4- (((6S，9S) -I-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-8-(萘-1-基甲基）-4, 7-二氧代八 氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基磷酸钠， 4- (((6S，9S) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(萘-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基磷酸钠， (6S，9S) -2-烯丙基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-4, 7-二氧代-N- ((R) -1-苯基乙 基）-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, l-c][l，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -2-烯丙基-6- (4-羟基苄基）-9-甲基-4, 7-二氧代-N- ((S) -1-苯基乙 基）-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, l-c][l，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基-2, 6-二甲基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹 啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -8-(苯并[b]噻吩-3-基甲基）-N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲 基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S)-8-(苯并[c] [1，2,5]噻二唑-4-基甲基）-N-苄基-6-(4-羟基苄基）-2,9-二 甲基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-8-(异喹啉-5-基甲基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧 代八氢-IH-吡嗪并[2, Ι-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-8- ((5-氯噻吩并[3, 2-b]吡啶-3-基）甲基）-6- (4-羟基苄 基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代八氢-IH-吡嗪并[2, Ι-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺， (6S，9S) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹喔啉-5-基甲 基）八氢-IH-吡嗪并[2, Ι-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺，和 (6S，9S) -6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基）-N-(噻 吩-2-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, Ι-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺。3. 根据权利要求1所述的化合物，其选自： 4- (((6S，9S，9aS) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基 甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, Ι-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二氢磷酸酯，和 (6S，9S，9aS) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基 甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, Ι-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺。4. 药物组合物，其包含权利要求1、2或3的化合物。5. 用于糖尿病病症的治疗方法，其包括给有此需要的患者施用有效量的权利要求1、2 或3的化合物。6. 根据权利要求5的方法，其中所述病症是I型糖尿病。7. 根据权利要求5的方法，其中所述病症是II型糖尿病。8. 根据权利要求5的方法，其中所述病症是糖尿病性视网膜病变。9. 根据权利要求5的方法，其中所述病症是妊娠糖尿病。10. 用于高血糖症的治疗方法，其包括给有此需要的患者施用有效量的权利要求1、2 或3的化合物。
【专利摘要】本公开内容一般涉及α螺旋模拟结构，且具体涉及为β连环蛋白抑制剂的α螺旋模拟结构。公开内容还涉及在糖尿病和糖尿病病症例如糖尿病性神经病变治疗中的应用，以及包含此类α螺旋模拟β连环蛋白抑制剂的药物组合物。
【IPC分类】A61P3/10, A61K31/5365
【公开号】CN104902903
【申请号】CN201380054489
【发明人】小路弘行, 小田上刚直
【申请人】株式会社棱镜制药
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2013年10月21日
【公告号】CA2888972A1, EP2916843A1, WO2014061823A1
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