一种红掌花粉培养方法
一种红掌花粉培养方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种植物组织培养方法，具体涉及一种红掌花粉培养方法。
【背景技术】
[0002]红掌(Anthurium adndraeanum)为天南星科花烛属多年生常绿草本植物，可作盆花和切花使用，是当今世界最受欢迎的名贵花丼之一，具有很高的观赏价值和经济价值。
[0003]红掌是重要的热带切花，佛焰花序，其佛焰花苞硕大，肥厚具蜡质，色泽有红、粉、白、绿、双色等。其色泽鲜艳，造形奇特，应用范围广，经济价值高，是目前全球发展快、需求量较大的高档热带切花和盆栽花丼。在红掌原产地热带雨林，红掌可用种子繁殖，但进入开花时间长。分株繁殖是红掌以前繁殖的主要方式。红掌植株基部长出吸芽，产生根系后可分株，每年可分3-4株，繁殖系数较低，很难满足规模化生产所需的种苗。现在红掌种苗生产主要通过组织培养进行种苗的快速繁殖，也就是红掌的克隆技术。这样可以在比较短的时间内生产整齐一致的优质种苗，供应生产的需要。通过组织培养技术生产红掌种苗主要有再生体系的建立、增殖培养、壮苗生根、移栽和温室育苗等技术环节。
[0004]随着植物组织培养技术的发展，植物细胞具有“全能性”得到了广泛证实，因此，在离体的条件下用离体的方法培养花粉，人为的改变小孢子的发育途径，使其配子体发育途径终止，转向孢子体发育，通过器官发生或胚发生的途径，形成完整的植株。目前还未有关于红掌花粉离体培育的报道。
【发明内容】
[0005]本发明针对目前的问题，提供一种红掌花粉培养方法。
[0006]为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是:提供一种红掌花粉培养方法，包括以下步骤，
1)取单核靠边期的花粉接种到愈伤组织诱导培养基，培养获得愈伤组织，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA 0.3 ?0.5mg/L+6-BA 0.2-0.4mg/L+2.4_D 0.4-0.7mg/L+ 赤霉素 2.2-2.5mg/L + 琼脂 1500 ?1700mg/L+ 蔗糖 600 ?800mg/L ；
2)接种分化培养基，培养获得试管小苗，所述的分化培养基为WPM+6-BA 0.4-0.6mg/L+NAA 0.1-0.3mg/L+ ZT 0.6~lmg/L+ 600 ?800mg/L 蔗糖；
3)接种生根培养基，筛选获得单体植株，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA0.1?
0.3mg/L+NAA0.6~0.8mg/L+ 琼脂 600 ?800mg/L+ 鹿糖 1400 ?1600mg/L+ 活性炭质量比
0.1%?0.
[0007]优选地，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA 0.4mg/L+6_BA 0.3mg/L+2.4_D
0.6mg/L+ 赤霉素 2.4mg/L + 琼脂 1600mg/L+ 鹿糖 700mg/L。
[0008]优选地，所述的分化培养基为WPM +6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+ ZT 0.8mg/L+700mg/L 鹿糖。
[0009]优选地，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA 0.2mg/L+NAA0.7mg/L+ 琼脂 700mg/L+蔗糖1500mg/L+活性炭质量比0.2%。
[0010]优选地，培养条件:培养条件采用光照培养和暗培养相结合的方法，光照培养光源采用日光灯，培养室内白天温度为28 0C -30 °C,照明12h，光照强度15 ymol.m_2.s^-20 μ mol.m_2.s—1，暗培养温度控制在 16°C -18°C。
[0011]优选地，还包括幼苗移栽:待红掌苗健壮且有2-3片真叶、3-5cm高时，敞开瓶口炼苗2-3d，然后将红掌苗根系上附带的培养基彻底清洗掉，便移栽到温室的花钵中假植。
[0012]本发明的有益效果是:本发明采用红掌花粉为外植体，进行花粉愈伤组织的诱导，采用光照培养和暗培养相结合的方法交替培养，获得花粉植株。本发明培养基愈伤组织增殖明显，易形成花粉植株。关键是找到了适宜的培养方法，将基础培养基修改为WPM，同时相应调整激素的浓度，用本发明的方法对红掌的离体花粉进行培养，具有花粉萌发成胚时间短、加倍效率高、产量大及较容易获得优良变异育种中间材料等优点，在育种材料提纯复壮、种质资源创新、多倍体育种及花粉发育进程研宄等方面内容，具有较大的实用价值。
【具体实施方式】
[0013]下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
[0014]本发明实施例包括:
实施例1:
一种红掌花粉培养方法，包括以下步骤，
1)取单核靠边期的花粉1000粒接种到愈伤组织诱导培养基，培养获得愈伤组织，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA 0.3mg/L+6-BA 0.2mg/L+2.4_D 0.4mg/L+ 赤霉素 2.2mg/L + 琼脂 1500mg/L+ 鹿糖 600mg/L ；
2)接种分化培养基，培养获得试管小苗，所述的分化培养基为WPM+6-BA 0.4mg/L+NAA
0.lmg/L+ ZT 0.6mg/L+ 600mg/L 鹿糖；
3)接种生根培养基，筛选获得单体植株，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA0.1mg/L+NAA0.6mg/L+ 琼脂 600mg/L+ 鹿糖 1400mg/L+ 活性炭质量比 0.1 %。
[0015]培养条件米用光照培养和暗培养相结合的方法，光照培养光源米用日光灯，培养室内白天温度为28°C °C，照明12h，光照强度15 μ mol.m_2.s_\暗培养温度控制在16°C。
[0016]待红掌苗健壮且有2片真叶、3cm高时，敞开瓶口炼苗2d，然后将红掌苗根系上附带的培养基彻底清洗掉，便移栽到温室的花钵中假植。
[0017]实施例2:
一种红掌花粉培养方法，包括以下步骤，
1)取单核靠边期的花粉接种到愈伤组织诱导培养基，培养获得愈伤组织，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA0.5mg/L+6-BA0.4mg/L+2.4_D 0.7mg/L+ 赤霉素 2.5mg/L + 琼脂1700mg/L+ 鹿糖 800mg/L ；
2)接种分化培养基，培养获得试管小苗，所述的分化培养基为WPM+6-BA 0.6mg/L+NAA
0.3mg/L+ ZT lmg/L+ 800mg/L 鹿糖；
3)接种生根培养基，筛选获得单体植株，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA0.3mg/L+NAA 0.8mg/L+ 琼脂 800mg/L+ 鹿糖 1600mg/L+ 活性炭质量比 0.3%。
[0018]培养条件米用光照培养和暗培养相结合的方法，光照培养光源米用日光灯，培养室内白天温度为30°C，照明12h，光照强度20 μ mol.m_2.s_\暗培养温度控制在18°C。
[0019]待红掌苗健壮且有3片真叶、5cm高时，敞开瓶口炼苗3d，然后将红掌苗根系上附带的培养基彻底清洗掉，便移栽到温室的花钵中假植。
[0020]实施例3:
一种红掌花粉培养方法，包括以下步骤，
1)取单核靠边期的花粉接种到愈伤组织诱导培养基，培养获得愈伤组织，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA 0.4mg/L+6-BA 0.3mg/L+2.4_D 0.6mg/L+ 赤霉素 2.4mg/L + 琼脂 1600mg/L+ 鹿糖 700mg/L ；
2)接种分化培养基，培养获得试管小苗，所述的分化培养基为WPM+6-BA 0.5mg/L+NAA
0.2mg/L+ ZT 0.8mg/L+ 700mg/L 鹿糖；
3)接种生根培养基，筛选获得单体植株，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA0.2mg/L+NAA0.7mg/L+ 琼脂 700mg/L+ 鹿糖 1500mg/L+ 活性炭质量比 0.2%。
[0021]培养条件米用光照培养和暗培养相结合的方法，光照培养光源米用日光灯，培养室内白天温度为29°C °C，照明12h，光照强度17 μ mol.m_2.s_\暗培养温度控制在17°C V。
[0022]待红掌苗健壮且有3片真叶、5cm高时，敞开瓶口炼苗3d，然后将红掌苗根系上附带的培养基彻底清洗掉，便移栽到温室的花钵中假植。
[0023]经过上述培养的平均结果为，愈伤组织的诱导率达到88%，生根率达到94%，移栽成活率达到90%。
[0024]以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
【主权项】
1.一种红掌花粉培养方法，其特征在于， 1)取单核靠边期的花粉接种到愈伤组织诱导培养基，培养获得愈伤组织，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA 0.3 ?0.5mg/L+6-BA 0.2-0.4mg/L+2.4_D 0.4-0.7mg/L+ 赤霉素 2.2-2.5mg/L + 琼脂 1500 ?1700mg/L+ 蔗糖 600 ?800mg/L ； 2)接种分化培养基，培养获得试管小苗，所述的分化培养基为WPM+6-BA 0.4-0.6mg/L+NAA 0.1-0.3mg/L+ ZT 0.6~lmg/L+ 600 ?800mg/L 蔗糖； 3)接种生根培养基，筛选获得单体植株，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA0.1?0.3mg/L+NAA0.6~0.8mg/L+ 琼脂 600 ?800mg/L+ 鹿糖 1400 ?1600mg/L+ 活性炭质量比0.1%?0.3%2.根据权利要求1所述的红掌花粉培养方法，其特征在于，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA 0.4mg/L+6-BA 0.3mg/L+2.4-D 0.6mg/L+赤霉素 2.4mg/L + 琼脂 1600mg/L+蔗糖 700mg/L。3.根据权利要求1或2所述的红掌花粉培养方法，其特征在于，所述的分化培养基为WPM +6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+ ZT 0.8mg/L+ 700mg/L 蔗糖。4.如权利要求1或2所述的红掌花粉培养方法，其特征在于，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA 0.2mg/L+NAA0.7mg/L+ 琼脂 700mg/L+ 蔗糖 1500mg/L+ 活性炭质量比 0.2%。5.如权利要求1或2所述的红掌花粉培养方法，其特征在于，培养条件:培养条件采用光照培养和暗培养相结合的方法，光照培养光源采用日光灯，培养室内白天温度为28 0C -30°C，照明12h，光照强度15μπιο1.πΓ2.s_1-20 μmol.m^2.s'暗培养温度控制在16 °C -18 °C。6.如权利要求1或2所述的红掌花粉培养方法，其特征在于，还包括幼苗移栽:待红掌苗健壮且有2-3片真叶、3-5cm高时，敞开瓶口炼苗2_3d，然后将红掌苗根系上附带的培养基彻底清洗掉，便移栽到温室的花钵中假植。
【专利摘要】本发明涉及一种红掌花粉培养方法，包括取单核靠边期的花药接种愈伤组织诱导培养基，培养获得愈伤组织；接种分化培养基，培养获得试管小苗；接种生根培养基，筛选获得单体植株，经过上述培养的红掌花粉的愈伤组织的诱导率达到88%，生根率达到94%，移栽成活率达到90%。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN104904594
【申请号】CN201510253722
【发明人】于永军
【申请人】锡山区先锋家庭农场
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月19日
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种植物组织培养方法，具体涉及一种红掌花粉培养方法。
【背景技术】
[0002]红掌(Anthurium adndraeanum)为天南星科花烛属多年生常绿草本植物，可作盆花和切花使用，是当今世界最受欢迎的名贵花丼之一，具有很高的观赏价值和经济价值。
[0003]红掌是重要的热带切花，佛焰花序，其佛焰花苞硕大，肥厚具蜡质，色泽有红、粉、白、绿、双色等。其色泽鲜艳，造形奇特，应用范围广，经济价值高，是目前全球发展快、需求量较大的高档热带切花和盆栽花丼。在红掌原产地热带雨林，红掌可用种子繁殖，但进入开花时间长。分株繁殖是红掌以前繁殖的主要方式。红掌植株基部长出吸芽，产生根系后可分株，每年可分3-4株，繁殖系数较低，很难满足规模化生产所需的种苗。现在红掌种苗生产主要通过组织培养进行种苗的快速繁殖，也就是红掌的克隆技术。这样可以在比较短的时间内生产整齐一致的优质种苗，供应生产的需要。通过组织培养技术生产红掌种苗主要有再生体系的建立、增殖培养、壮苗生根、移栽和温室育苗等技术环节。
[0004]随着植物组织培养技术的发展，植物细胞具有“全能性”得到了广泛证实，因此，在离体的条件下用离体的方法培养花粉，人为的改变小孢子的发育途径，使其配子体发育途径终止，转向孢子体发育，通过器官发生或胚发生的途径，形成完整的植株。目前还未有关于红掌花粉离体培育的报道。
【发明内容】
[0005]本发明针对目前的问题，提供一种红掌花粉培养方法。
[0006]为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是:提供一种红掌花粉培养方法，包括以下步骤，
1)取单核靠边期的花粉接种到愈伤组织诱导培养基，培养获得愈伤组织，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA 0.3 ?0.5mg/L+6-BA 0.2-0.4mg/L+2.4_D 0.4-0.7mg/L+ 赤霉素 2.2-2.5mg/L + 琼脂 1500 ?1700mg/L+ 蔗糖 600 ?800mg/L ；
2)接种分化培养基，培养获得试管小苗，所述的分化培养基为WPM+6-BA 0.4-0.6mg/L+NAA 0.1-0.3mg/L+ ZT 0.6~lmg/L+ 600 ?800mg/L 蔗糖；
3)接种生根培养基，筛选获得单体植株，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA0.1?
0.3mg/L+NAA0.6~0.8mg/L+ 琼脂 600 ?800mg/L+ 鹿糖 1400 ?1600mg/L+ 活性炭质量比
0.1%?0.
[0007]优选地，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA 0.4mg/L+6_BA 0.3mg/L+2.4_D
0.6mg/L+ 赤霉素 2.4mg/L + 琼脂 1600mg/L+ 鹿糖 700mg/L。
[0008]优选地，所述的分化培养基为WPM +6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+ ZT 0.8mg/L+700mg/L 鹿糖。
[0009]优选地，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA 0.2mg/L+NAA0.7mg/L+ 琼脂 700mg/L+蔗糖1500mg/L+活性炭质量比0.2%。
[0010]优选地，培养条件:培养条件采用光照培养和暗培养相结合的方法，光照培养光源采用日光灯，培养室内白天温度为28 0C -30 °C,照明12h，光照强度15 ymol.m_2.s^-20 μ mol.m_2.s—1，暗培养温度控制在 16°C -18°C。
[0011]优选地，还包括幼苗移栽:待红掌苗健壮且有2-3片真叶、3-5cm高时，敞开瓶口炼苗2-3d，然后将红掌苗根系上附带的培养基彻底清洗掉，便移栽到温室的花钵中假植。
[0012]本发明的有益效果是:本发明采用红掌花粉为外植体，进行花粉愈伤组织的诱导，采用光照培养和暗培养相结合的方法交替培养，获得花粉植株。本发明培养基愈伤组织增殖明显，易形成花粉植株。关键是找到了适宜的培养方法，将基础培养基修改为WPM，同时相应调整激素的浓度，用本发明的方法对红掌的离体花粉进行培养，具有花粉萌发成胚时间短、加倍效率高、产量大及较容易获得优良变异育种中间材料等优点，在育种材料提纯复壮、种质资源创新、多倍体育种及花粉发育进程研宄等方面内容，具有较大的实用价值。
【具体实施方式】
[0013]下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
[0014]本发明实施例包括:
实施例1:
一种红掌花粉培养方法，包括以下步骤，
1)取单核靠边期的花粉1000粒接种到愈伤组织诱导培养基，培养获得愈伤组织，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA 0.3mg/L+6-BA 0.2mg/L+2.4_D 0.4mg/L+ 赤霉素 2.2mg/L + 琼脂 1500mg/L+ 鹿糖 600mg/L ；
2)接种分化培养基，培养获得试管小苗，所述的分化培养基为WPM+6-BA 0.4mg/L+NAA
0.lmg/L+ ZT 0.6mg/L+ 600mg/L 鹿糖；
3)接种生根培养基，筛选获得单体植株，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA0.1mg/L+NAA0.6mg/L+ 琼脂 600mg/L+ 鹿糖 1400mg/L+ 活性炭质量比 0.1 %。
[0015]培养条件米用光照培养和暗培养相结合的方法，光照培养光源米用日光灯，培养室内白天温度为28°C °C，照明12h，光照强度15 μ mol.m_2.s_\暗培养温度控制在16°C。
[0016]待红掌苗健壮且有2片真叶、3cm高时，敞开瓶口炼苗2d，然后将红掌苗根系上附带的培养基彻底清洗掉，便移栽到温室的花钵中假植。
[0017]实施例2:
一种红掌花粉培养方法，包括以下步骤，
1)取单核靠边期的花粉接种到愈伤组织诱导培养基，培养获得愈伤组织，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA0.5mg/L+6-BA0.4mg/L+2.4_D 0.7mg/L+ 赤霉素 2.5mg/L + 琼脂1700mg/L+ 鹿糖 800mg/L ；
2)接种分化培养基，培养获得试管小苗，所述的分化培养基为WPM+6-BA 0.6mg/L+NAA
0.3mg/L+ ZT lmg/L+ 800mg/L 鹿糖；
3)接种生根培养基，筛选获得单体植株，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA0.3mg/L+NAA 0.8mg/L+ 琼脂 800mg/L+ 鹿糖 1600mg/L+ 活性炭质量比 0.3%。
[0018]培养条件米用光照培养和暗培养相结合的方法，光照培养光源米用日光灯，培养室内白天温度为30°C，照明12h，光照强度20 μ mol.m_2.s_\暗培养温度控制在18°C。
[0019]待红掌苗健壮且有3片真叶、5cm高时，敞开瓶口炼苗3d，然后将红掌苗根系上附带的培养基彻底清洗掉，便移栽到温室的花钵中假植。
[0020]实施例3:
一种红掌花粉培养方法，包括以下步骤，
1)取单核靠边期的花粉接种到愈伤组织诱导培养基，培养获得愈伤组织，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA 0.4mg/L+6-BA 0.3mg/L+2.4_D 0.6mg/L+ 赤霉素 2.4mg/L + 琼脂 1600mg/L+ 鹿糖 700mg/L ；
2)接种分化培养基，培养获得试管小苗，所述的分化培养基为WPM+6-BA 0.5mg/L+NAA
0.2mg/L+ ZT 0.8mg/L+ 700mg/L 鹿糖；
3)接种生根培养基，筛选获得单体植株，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA0.2mg/L+NAA0.7mg/L+ 琼脂 700mg/L+ 鹿糖 1500mg/L+ 活性炭质量比 0.2%。
[0021]培养条件米用光照培养和暗培养相结合的方法，光照培养光源米用日光灯，培养室内白天温度为29°C °C，照明12h，光照强度17 μ mol.m_2.s_\暗培养温度控制在17°C V。
[0022]待红掌苗健壮且有3片真叶、5cm高时，敞开瓶口炼苗3d，然后将红掌苗根系上附带的培养基彻底清洗掉，便移栽到温室的花钵中假植。
[0023]经过上述培养的平均结果为，愈伤组织的诱导率达到88%，生根率达到94%，移栽成活率达到90%。
[0024]以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
【主权项】
1.一种红掌花粉培养方法，其特征在于， 1)取单核靠边期的花粉接种到愈伤组织诱导培养基，培养获得愈伤组织，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA 0.3 ?0.5mg/L+6-BA 0.2-0.4mg/L+2.4_D 0.4-0.7mg/L+ 赤霉素 2.2-2.5mg/L + 琼脂 1500 ?1700mg/L+ 蔗糖 600 ?800mg/L ； 2)接种分化培养基，培养获得试管小苗，所述的分化培养基为WPM+6-BA 0.4-0.6mg/L+NAA 0.1-0.3mg/L+ ZT 0.6~lmg/L+ 600 ?800mg/L 蔗糖； 3)接种生根培养基，筛选获得单体植株，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA0.1?0.3mg/L+NAA0.6~0.8mg/L+ 琼脂 600 ?800mg/L+ 鹿糖 1400 ?1600mg/L+ 活性炭质量比0.1%?0.3%2.根据权利要求1所述的红掌花粉培养方法，其特征在于，所述的愈伤组织诱导培养基:WPM+NAA 0.4mg/L+6-BA 0.3mg/L+2.4-D 0.6mg/L+赤霉素 2.4mg/L + 琼脂 1600mg/L+蔗糖 700mg/L。3.根据权利要求1或2所述的红掌花粉培养方法，其特征在于，所述的分化培养基为WPM +6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+ ZT 0.8mg/L+ 700mg/L 蔗糖。4.如权利要求1或2所述的红掌花粉培养方法，其特征在于，所述的生根培养基为1/2WPM+IBA 0.2mg/L+NAA0.7mg/L+ 琼脂 700mg/L+ 蔗糖 1500mg/L+ 活性炭质量比 0.2%。5.如权利要求1或2所述的红掌花粉培养方法，其特征在于，培养条件:培养条件采用光照培养和暗培养相结合的方法，光照培养光源采用日光灯，培养室内白天温度为28 0C -30°C，照明12h，光照强度15μπιο1.πΓ2.s_1-20 μmol.m^2.s'暗培养温度控制在16 °C -18 °C。6.如权利要求1或2所述的红掌花粉培养方法，其特征在于，还包括幼苗移栽:待红掌苗健壮且有2-3片真叶、3-5cm高时，敞开瓶口炼苗2_3d，然后将红掌苗根系上附带的培养基彻底清洗掉，便移栽到温室的花钵中假植。
【专利摘要】本发明涉及一种红掌花粉培养方法，包括取单核靠边期的花药接种愈伤组织诱导培养基，培养获得愈伤组织；接种分化培养基，培养获得试管小苗；接种生根培养基，筛选获得单体植株，经过上述培养的红掌花粉的愈伤组织的诱导率达到88%，生根率达到94%，移栽成活率达到90%。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN104904594
【申请号】CN201510253722
【发明人】于永军
【申请人】锡山区先锋家庭农场
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月19日
最新回复(0)