一种烟梗微生物处理提香的方法

xiaoxiao2020-10-23  9

一种烟梗微生物处理提香的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于烟用添加剂的技术领域,特别是嗜酸小球菌用于烟梗处理提香的方法。
【背景技术】
[0002]烟草是茄科烟草属植物,烟梗即是烟叶之粗硬叶脉,约占叶重的2 5- 30 %。烟梗是烟草工业的副产物,目前多作弃置处理。我国是烟草大国,每年有数十万吨烟梗资源被废弃,既造成环境污染,同时也是对自然资源的浪费。研宄表明,烟梗中含有的成分种类与烟叶成分基本一致。在配方中加入膨胀梗丝后,由于其填充值较高,可以减少卷烟烟丝用量,不仅节约卷烟成本,也可以起到降低卷烟焦油量的作用。
[0003]烟梗的主要成分是细胞壁物质,约占40%以上,其包括木质素、纤维素、半纤维素和果胶等。这类物质的热裂解产物具有强烈的刺激性,杂气重、呛咳、涩口、香气量少,严重影响了卷烟的吸味品质,直接限制了梗丝在叶组配方中所占的比例。因此,降低梗丝燃烧产生的不良气息,提高梗丝吸味是提高梗丝综合利用率的关键问题。
[0004]现有技术表明,通过微生物或生物酶处理具有明显消除烟叶的青杂气,减轻刺激性的作用,对烟叶香气质量的改善也有一定的帮助。利用木质素降解菌和降解酶对烟梗进行处理能减轻梗丝的木质气、刺激性。尤其是现有技术公开了一种短小芽孢杆菌Van35,其能直接处理烟梗,改善其品质。
[0005]本发明旨在提供一种新的烟梗微生物处理方法,本产品与现有技术相比,具有更好的烟梗提香的效果,并且其来源不仅仅限制于保藏的某特殊菌株。

【发明内容】

[0006]本发明的目的是提供一种新的烟梗微生物处理方法,本产品与现有技术相比,具有更好的烟梗提香的效果,并且其来源不仅仅限制于保藏的某特殊菌株,原材料成本低廉,易于购买,制备方法简单,适于大量生产。
[0007]为了实现上述的目的,本发明采用了以下的技术方案:
一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下:
(1)取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别按照0.1%和0.15%的接种量接种于含有重量百分比为0.2%海藻糖的200ml的LB液体培养基中;
(2)在37°C摇床,转速160r/min振荡培养至OD值=2.2 ;3800rpm/min离心8min,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用20mL无菌水振荡均匀,使用时稀释15倍,并加入果胶酶即为处理用菌剂;
(3)称取梗丝,取0.12-0.15倍梗丝质量的菌剂喷洒到梗丝上,密封,30°C下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于20-22°C相对湿度为50%-60%的恒温恒湿箱平衡48h。
[0008]嗜酸小球菌(Ped1coccus acidilactici )是一种乳酸菌,作为畜饲用添加剂的生产和使用已经得到中国和欧盟的认证,并可应用于美国和巴西等许多国家和地区,其安全性已得到国际主要权威机构(如美国FDA、欧盟SCAN等)的认证,是被选择用来改善动物消化道微生态系统的绿色、安全、环保的新型饲料添加剂。
[0009]枯草芽胞杆菌,是芽胞杆菌属的一种。单个细胞0.7?0.8X2?3微米,着色均匀。无荚膜,周生鞭毛,能运动。革兰氏阳性菌,芽孢0.6?0.9X1.0?1.5微米,椭圆到柱状,位于菌体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时,常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研宄中应用广泛,对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研宄较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中,易在枯草浸汁中繁殖,故名。
[0010]本发明人意外发现,这两种菌株混合培养成菌剂后,能够处理烟梗达到提香的效果O
[0011]本发明的有益之处在于:
1.本产品与现有技术相比,来源菌株易于购买得到,并且成本低廉,易于生产。
[0012]2.本发明的处理方法对烟梗的提香效果极佳,可大大改善烟梗的利用度。
【具体实施方式】
[0013]本发明的菌剂均为商业购买获得。
[0014]实施例1:
一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下:
取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别按照0.1%和0.15%的接种量接种于额外含有重量百分比为0.2%海藻糖的200ml的LB液体培养基中;
在37°C摇床,转速160r/min振荡培养上述培养基至OD值=2.2 ;3800rpm/min离心8min,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用20mL无菌水振荡均匀,使用时稀释15倍,并加入果胶酶即为处理用菌剂;
称取梗丝,取0.12倍梗丝质量的菌剂喷洒到梗丝上,密封,30°C下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于20°C相对湿度为50%的恒温恒湿箱平衡48h。
[0015]根据《分子克隆实验指南》(J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔著)配制每升LB培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
胰蛋白胨1g 酵母提取物5g NaCl 1g
摇动容器直至溶质溶解.用511101/1似0!1调?!1至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌21min.实施例2:
一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下:
取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别按照0.1%和0.15%的接种量接种于含有重量百分比为0.2%海藻糖的200ml的LB液体培养基中;
在37°C摇床,转速160r/min振荡培养上述培养基至OD值=2.2 ;3800rpm/min离心8min,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用20mL无菌水振荡均匀,使用时稀释15倍,并加入果胶酶即为处理用菌剂; 称取梗丝,取0.15倍梗丝质量的菌剂喷洒到梗丝上,密封,30°C下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于22 °C相对湿度为60%的恒温恒湿箱平衡48h。
[0016]根据《分子克隆实验指南》(J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔著)配制每升LB培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
胰蛋白胨1g 酵母提取物5g NaCl 1g
摇动容器直至溶质溶解.用511101/1似0!1调?!1至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌21min.实施例3:
一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下:
取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别按照0.1%和0.15%的接种量接种于含有重量百分比为0.2%海藻糖的200ml的LB液体培养基中;
在37°C摇床,转速160r/min振荡培养上述培养基至OD值=2.2 ;3800rpm/min离心8min,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用20mL无菌水振荡均匀,使用时稀释15倍,并加入果胶酶即为处理用菌剂;
称取梗丝,取0.13倍梗丝质量的菌剂喷洒到梗丝上,密封,30°C下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于21°C相对湿度为55%的恒温恒湿箱平衡48h。
[0017]根据《分子克隆实验指南》(J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔著)配制每升LB培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
胰蛋白胨1g 酵母提取物5g NaCl 1g
摇动容器直至溶质溶解.用511101/1似0!1调?!1至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌21min.实施例4:
一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下:
取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别按照0.1%和0.15%的接种量接种于含有重量百分比为0.2%海藻糖的200ml的LB液体培养基中;
在37°C摇床,转速160r/min振荡培养上述培养基至OD值=2.2 ;3800rpm/min离心8min,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用20mL无菌水振荡均匀,使用时稀释15倍,并加入果胶酶即为处理用菌剂;
称取梗丝,取0.14倍梗丝质量的菌剂喷洒到梗丝上,密封,30°C下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于22 °C相对湿度为58%的恒温恒湿箱平衡48h。
[0018]根据《分子克隆实验指南》(J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔著)配制每升LB培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
胰蛋白胨1g 酵母提取物5g NaCl 1g 摇动容器直至溶质溶解.用511101/1似0!1调?!1至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌21min.实施例5:
对比实施例:
一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下:
称取梗丝,取蒸馏水喷洒到梗丝上,密封,30°C下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于20-22°C相对湿度为50%-60%的恒温恒湿箱平衡48h。
[0019]实施例6:效果测评:
(I)对梗丝主要化学成分含量和致香物质进行检测。
[0020]常规化学成分的检测结果表明:实施例1-4相对于实施例5的还原糖和总糖的含量发生了明显的提高,同时还检测到果胶、纤维素和木质素的含量发生了下降,尤其是果胶降低了 58%。
[0021]致香成分检测结果表明:实施例1-4相对于实施例5的许多致香成分得到了提高,尤其是香兰素较对照提高了 39%。
[0022](2)感官测评
将实施例1-5的梗丝手工卷制成烟支,每个实施例的梗丝制成10根烟支,由50位评吸专家组成5组评吸小组分别对实施例1-5的烟支进行感官评吸。
[0023]感官评吸结果表明:梗丝经处理后,香味较对照显著提升,刺激性明显下降,即使没有添加烟叶丝也不让人觉得刺激和难受。
[0024]试验结果表明,本发明的方法可以有效降低提高梗丝的香气,愉悦度,提高梗丝抽吸品质,从而达到高比例添加梗丝的掺配量的目的。
以上所述,仅为本发明较佳的【具体实施方式】,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于步骤如下: (1)取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌接种于含有海藻糖的200ml的LB液体培养基中; (2)摇床培养,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用20mL无菌水振荡均匀,使用时稀释15倍,并加入果胶酶即为处理用菌剂; (3)称取梗丝,取菌剂喷洒到梗丝上,密封,30°C下恒温保持5小时,然后烘干梗丝,再将梗丝于恒温恒湿箱平衡。2.权利要求1所述的烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于:步骤(I)中,嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别按照0.1%和0.15%的接种量接种于含有重量百分比为0.2%海藻糖的200ml的LB液体培养基中。3.权利要求2所述的烟梗微生物处理提香的方法,其步骤(2)摇床培养为:在37°C摇床,转速160r/min振荡培养至OD值=2.2 ;3800rpm/min离心8min。4.权利要求3所述的烟梗微生物处理提香的方法,其步骤(3)为取0.12-0.15倍梗丝质量的菌剂喷洒到梗丝上。5.权利要求4所述的烟梗微生物处理提香的方法,其步骤(3)为在20-22?相对湿度为50%-60%的恒温恒湿箱中平衡48h。
【专利摘要】本发明公开了一种烟梗微生物处理提香的方法,其特征在于其步骤如下:取嗜酸小球菌,枯草芽孢杆菌分别接种于含有重量百分比为0.2%海藻糖的LB液体培养基中;培养后离心,然后用无菌水洗涤沉淀,离心,然后用无菌水振荡均匀,使用时稀释为处理用菌剂;取菌剂喷洒到梗丝上进行处理即可。
【IPC分类】A24B5/16
【公开号】CN104905396
【申请号】CN201510249706
【发明人】潘高峰
【申请人】湖州品创孵化器有限公司
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月18日

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