一种消除皱纹或抗衰老的组合物的制作方法
一种消除皱纹或抗衰老的组合物的制作方法
【专利说明】
【技术领域】
[0001]本发明涉及用于消除或预防面部皱纹的组合物，特别涉及成体干细胞提取物，海藻不饱和脂肪酸，透明质酸，水解明胶和褐藻多酚，以及很有提取物与其他的常用护肤功能物质的组合物。
【【背景技术】】
[0002]目前普遍认为，导致皮肤衰老的原因主要有内源性因素和外源性因素两方面。人们一直对衰老机理的理解各不相同，曾提出多种多样的衰老学说。目前研究较多的是衰老的自由基学说及免疫调节障碍学说。体内代谢产生的自由基作用于细胞膜的多不饱和脂肪酸，形成脂质过氧化物，造成细胞的损伤和破坏，引起机体衰老与疾病。天然抗衰老化妆品原料具有延缓皮肤衰老、保护皮肤、延长寿命、逆转衰老的作用。目前作为化妆品中抗衰老活性成分的天然生物提取成分主要来自于植物、动物和一些海洋微生物，其中对陆生植物提取物的研究开发最为深入，但是对藻类尤其是海洋藻类的提取物研究较少。
[0003]发明人通过创造性劳动，选择出成体干细胞提取物、海藻不饱和脂肪酸、透明质酸、水解明胶和褐藻多酚联合应用的其他具有皮肤养护作用的物质，并利用适当的组合使其能够充分发挥协同作用，具有消除或预防面部皱纹的作用。
【
【发明内容】
】
[0004]本发明是基于更安全和有效的预防或消除面部皱纹，克服现有产品中的毒性缺陷，提供了一种不仅能够抑制、消除表情肌过度收缩所产生的皱纹，而且能够强力保持面部皮肤水分的组合物。
[0005]本发明的技术特征是采用从成体干细胞提取的活性蛋白因子和生物活性物质，所述活性蛋白因子包括白细胞介素、干扰素、集落刺激因子、生长因子和趋化性细胞因子。所述生物活性物质可以是任何活性因子，例如神经递质、神经调质、儿茶酚胺、生长因子、辅助因子、营养因子和激素，活性物质也可以是类似物、激动剂、衍生物或具有活性的活性因子片段，活性物质还可以是生物活性物质的抑制剂。
[0006]本发明的技术特征还在于添加了海藻不饱和脂肪酸，由于海藻中含有丰富的极性月旨，主要有糖脂、磷脂和硫脂。糖脂有一半乳糖酰二甘油酯、二半乳糖酰二甘油酯，能清除多于胆固醇。磷脂有磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸以及磷脂酰肌醇等，磷脂是构成细胞的主要成份，能够降解过氧化物，是高度不饱和脂肪酸的稳定剂。海藻中的硫脂还具有抗艾滋病毒的功能。这些物质的添加对衰老和细胞修复有重要作用。
[0007]本发明的技术特征还在于添加了褐藻多酚，褐藻多酚有脱臭作用和抗氧化活性，其基本结构单元是间苯三酚，其多聚物能够裂解DNA，抑制多种酶的活性，如淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶，能聚集人血红细胞，而且褐藻多酚中的Eckols类化合物是抗血纤维蛋白溶酶原的抑制物。同时卤代酚还具有类生长素活性和抗氧化活性。
[0008]本发明中添加的透明质酸和水解明胶主要作用是固定皮肤和组织内的水份、养护结缔组织，是目前抗衰老和美容化妆品中常用的添加物。
[0009]从成体干细胞中提取抗衰老有效成份:
[0010]I) I %明胶铺T75细胞培养瓶半个小时。
[0011]2)吸干并静置5分钟。
[0012]3)在37°C水浴箱快速溶解一管人成体干细胞，加入1ml无血清培养液清洗一次。1000转/分离心5分钟，去除上清液，用Iml培养液重悬细胞，按上述步骤再清洗两次。
[0013]4)加入14ml无血清干细胞培养液到培养瓶中，转移干细胞到培养瓶中，二氧化碳培养箱培养3天。
[0014]5)吸出培养液，用PBS清洗2-3次。
[0015]6)加2_3ml细胞溶解液溶解细胞，然后收集到离心管中。
[0016]7)在4°C摇晃I小时，离心14000转/分，30分钟。
[0017]8)取上清液4°C PBS透析8小时。
[0018]9)冷冻干燥，保存在_80°C冰箱。
[0019]从海藻中提取不饱和脂肪酸的提取:
[0020]I)采取研磨的方法破碎，可以加入钢砂加强研磨的效果，显微镜下观察，大部分细胞被破碎。
[0021]2)加入无水乙醚和石油醚的混合溶剂(不同体积配比)粗提取粗脂，适当振荡混匀。并且加入质量分数10%的KOH沉淀藻细胞，然后在4000转/分条件下离心15分钟取上层清液。在60°C水浴迅速蒸去多余的溶剂至溶液恒重。
[0022]3)蒸去多余溶剂后的溶液中加入等体积饱和KOH-甲醇溶液(0.4mol / L，加热使KOH完全溶解)皂化6h或过夜。
[0023]4)然后用HCl稀溶液(商品浓盐酸与去离子水以体积比9: I稀释)调节pH值至I?2，再加入少量H2O使溶液分层，离心分离取上层油层。
[0024]5)尿素包合富集海藻多不饱和脂肪酸配制不同质量浓度的尿素一甲醇溶液，加入到混合脂肪酸中，置冰箱冷冻层(_20°C )形成包合物至不再有结晶物析出(2h)。水洗后离心得多不饱和脂肪酸粗品。
[0025]从褐藻中提取褐藻多酚:
[0026]I)选择生长旺盛的褐藻。
[0027]2)清洗后迅速降温至-10°C，以防止藻体细胞中有大冰晶形成。
[0028]3)用组织破碎器破碎藻体，转速大于等于10000转/分。
[0029]4) 80%乙醇抽提，200目筛过滤，纱布，棉花过滤，布氏漏斗抽滤。
[0030]5)在减压的条件下，于45?60°C蒸去有机溶剂。
[0031]6)将不溶于水的色素等杂质形成沉淀除去。
[0032]7)利用冷冻升华干燥或喷雾干燥，得到深褐色褐藻多酚粗品粉末。
[0033]组合物的制备
[0034]I)以去离子纯净水作为溶剂，其中首先加入透明质酸，浓度为0.5?4g/L。
[0035]2)加入水解明胶，30?200g / L，将混合物置于60°C温水浴锅，轻摇45分钟，溶液完全澄清透明后取出。
[0036]3)趁热加入适量海藻不饱和脂肪酸和褐藻多酚，搅拌均匀。
[0037]4)冷却至37°C，加入适量的成体干细胞提取物，冷却至室温。冷却后形成凝胶。
[0038]5)最后加入杀菌剂，充分搅拌均匀，置于低光低温保存。
[0039]使用方法:
[0040]用清水清洗面部，用食指挑少许本组合物轻柔均匀涂抹在眼角及眼下，之后轻柔地由内向外按摩8?10次即可。
【【具体实施方式】】
[0041]通过以下实施例将组分物质具体配比进一步举例以描述本发明。各实施例中包含但不限于可能在此基础上添加的其它各类有益于保水、抗衰老的添加组分。
[0042]实施例1:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸0.1?0.5g、透明质酸0.1?0.5g、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.3?0.9g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0043]实施例2:组分配比为:成体干细胞提取物0.4?1.0g、海藻不饱和脂肪酸0.1?
0.5g、透明质酸0.1?0.5g、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.3?0.9g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0044]实施例3:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸0.4?
1.0g、透明质酸0.1?0.5g、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.3?0.9g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0045]实施例4:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸0.1?0.5g、透明质酸0.1?0.5g、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.9?1.5g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0046]实施例5:组分配比为:成体干细胞提取物0.4?1.0g、海藻不饱和脂肪酸0.1?0.5g、透明质酸0.1?0.5g、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.1?0.3g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0047]实施例6:组分配比为:成体干细胞提取物0.4?1.0g、海藻不饱和脂肪酸0.1?0.5g、透明质酸0.5?lg、水解明胶5?10g、褐藻多酹0.1?0.3g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0048]实施例7:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸0.5?lg、透明质酸0.5?lg、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.3?0.9g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0049]实施例8:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸0.5?lg、透明质酸0.5?lg、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.1?0.3g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0050]实施例9:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸0.5?lg、透明质酸0.5?lg、水解明胶5?10g、褐藻多酹0.9?1.5g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0051]实施例10:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸I?2g、透明质酸0.5?lg、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.9?1.5g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
【主权项】
1.用于消除和预防面部皱纹的组合物，所述组合物包括有效剂量的:第一组分，人成体干细胞提取物；第二组分，海藻不饱和脂肪酸；第三组分，透明质酸；第四组分，水解明胶；第五组分，褐藻多酚。2.如权利要求1所述的组合物，其中所述成体干细胞提取物和生长因子。3.如权利要求1所述的组合物，其中所述海藻不饱和脂肪酸。4.如权利要求1所述的组合物，其中所述透明质酸。5.如权利要求1所述的组合物，其中所述水解明胶。6.如权利要求1所述的组合物，其中所述褐藻多酚。7.如权利要求1-6中任一权利要求所述组合物在制备用于消除或预防面部皱纹尤其是眼部皱纹中的用途。8.如权利要求1中所述的干细胞提取物在制备用于消除或预防面部皱纹尤其是眼部皱纹中的用途。9.如权利要求1，其中还可包含VC，VE等可用于面部养护的营养素。
【专利摘要】本发明提供了一种涉及用于消除或预防面部皱纹的组合物，特别涉及成体干细胞提取物、海藻不饱和脂肪酸、透明质酸、水解明胶和褐藻多酚，以及很有提取物与其他的常用护肤功能物质的组合物。该组合物基于更安全和有效的预防或消除面部皱纹，克服现有产品中的毒性缺陷，提供了一种不仅能够抑制、消除表情肌过度收缩所产生的皱纹，而且能够强力保持面部皮肤水分。
【IPC分类】A61K8/97, A61Q19/08, A61Q19/00, A61K8/98
【公开号】CN104906011
【申请号】CN201410097307
【发明人】吴世凯
【申请人】吴世凯
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2014年3月14日
【专利说明】
【技术领域】
[0001]本发明涉及用于消除或预防面部皱纹的组合物，特别涉及成体干细胞提取物，海藻不饱和脂肪酸，透明质酸，水解明胶和褐藻多酚，以及很有提取物与其他的常用护肤功能物质的组合物。
【【背景技术】】
[0002]目前普遍认为，导致皮肤衰老的原因主要有内源性因素和外源性因素两方面。人们一直对衰老机理的理解各不相同，曾提出多种多样的衰老学说。目前研究较多的是衰老的自由基学说及免疫调节障碍学说。体内代谢产生的自由基作用于细胞膜的多不饱和脂肪酸，形成脂质过氧化物，造成细胞的损伤和破坏，引起机体衰老与疾病。天然抗衰老化妆品原料具有延缓皮肤衰老、保护皮肤、延长寿命、逆转衰老的作用。目前作为化妆品中抗衰老活性成分的天然生物提取成分主要来自于植物、动物和一些海洋微生物，其中对陆生植物提取物的研究开发最为深入，但是对藻类尤其是海洋藻类的提取物研究较少。
[0003]发明人通过创造性劳动，选择出成体干细胞提取物、海藻不饱和脂肪酸、透明质酸、水解明胶和褐藻多酚联合应用的其他具有皮肤养护作用的物质，并利用适当的组合使其能够充分发挥协同作用，具有消除或预防面部皱纹的作用。
【
【发明内容】
】
[0004]本发明是基于更安全和有效的预防或消除面部皱纹，克服现有产品中的毒性缺陷，提供了一种不仅能够抑制、消除表情肌过度收缩所产生的皱纹，而且能够强力保持面部皮肤水分的组合物。
[0005]本发明的技术特征是采用从成体干细胞提取的活性蛋白因子和生物活性物质，所述活性蛋白因子包括白细胞介素、干扰素、集落刺激因子、生长因子和趋化性细胞因子。所述生物活性物质可以是任何活性因子，例如神经递质、神经调质、儿茶酚胺、生长因子、辅助因子、营养因子和激素，活性物质也可以是类似物、激动剂、衍生物或具有活性的活性因子片段，活性物质还可以是生物活性物质的抑制剂。
[0006]本发明的技术特征还在于添加了海藻不饱和脂肪酸，由于海藻中含有丰富的极性月旨，主要有糖脂、磷脂和硫脂。糖脂有一半乳糖酰二甘油酯、二半乳糖酰二甘油酯，能清除多于胆固醇。磷脂有磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸以及磷脂酰肌醇等，磷脂是构成细胞的主要成份，能够降解过氧化物，是高度不饱和脂肪酸的稳定剂。海藻中的硫脂还具有抗艾滋病毒的功能。这些物质的添加对衰老和细胞修复有重要作用。
[0007]本发明的技术特征还在于添加了褐藻多酚，褐藻多酚有脱臭作用和抗氧化活性，其基本结构单元是间苯三酚，其多聚物能够裂解DNA，抑制多种酶的活性，如淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶，能聚集人血红细胞，而且褐藻多酚中的Eckols类化合物是抗血纤维蛋白溶酶原的抑制物。同时卤代酚还具有类生长素活性和抗氧化活性。
[0008]本发明中添加的透明质酸和水解明胶主要作用是固定皮肤和组织内的水份、养护结缔组织，是目前抗衰老和美容化妆品中常用的添加物。
[0009]从成体干细胞中提取抗衰老有效成份:
[0010]I) I %明胶铺T75细胞培养瓶半个小时。
[0011]2)吸干并静置5分钟。
[0012]3)在37°C水浴箱快速溶解一管人成体干细胞，加入1ml无血清培养液清洗一次。1000转/分离心5分钟，去除上清液，用Iml培养液重悬细胞，按上述步骤再清洗两次。
[0013]4)加入14ml无血清干细胞培养液到培养瓶中，转移干细胞到培养瓶中，二氧化碳培养箱培养3天。
[0014]5)吸出培养液，用PBS清洗2-3次。
[0015]6)加2_3ml细胞溶解液溶解细胞，然后收集到离心管中。
[0016]7)在4°C摇晃I小时，离心14000转/分，30分钟。
[0017]8)取上清液4°C PBS透析8小时。
[0018]9)冷冻干燥，保存在_80°C冰箱。
[0019]从海藻中提取不饱和脂肪酸的提取:
[0020]I)采取研磨的方法破碎，可以加入钢砂加强研磨的效果，显微镜下观察，大部分细胞被破碎。
[0021]2)加入无水乙醚和石油醚的混合溶剂(不同体积配比)粗提取粗脂，适当振荡混匀。并且加入质量分数10%的KOH沉淀藻细胞，然后在4000转/分条件下离心15分钟取上层清液。在60°C水浴迅速蒸去多余的溶剂至溶液恒重。
[0022]3)蒸去多余溶剂后的溶液中加入等体积饱和KOH-甲醇溶液(0.4mol / L，加热使KOH完全溶解)皂化6h或过夜。
[0023]4)然后用HCl稀溶液(商品浓盐酸与去离子水以体积比9: I稀释)调节pH值至I?2，再加入少量H2O使溶液分层，离心分离取上层油层。
[0024]5)尿素包合富集海藻多不饱和脂肪酸配制不同质量浓度的尿素一甲醇溶液，加入到混合脂肪酸中，置冰箱冷冻层(_20°C )形成包合物至不再有结晶物析出(2h)。水洗后离心得多不饱和脂肪酸粗品。
[0025]从褐藻中提取褐藻多酚:
[0026]I)选择生长旺盛的褐藻。
[0027]2)清洗后迅速降温至-10°C，以防止藻体细胞中有大冰晶形成。
[0028]3)用组织破碎器破碎藻体，转速大于等于10000转/分。
[0029]4) 80%乙醇抽提，200目筛过滤，纱布，棉花过滤，布氏漏斗抽滤。
[0030]5)在减压的条件下，于45?60°C蒸去有机溶剂。
[0031]6)将不溶于水的色素等杂质形成沉淀除去。
[0032]7)利用冷冻升华干燥或喷雾干燥，得到深褐色褐藻多酚粗品粉末。
[0033]组合物的制备
[0034]I)以去离子纯净水作为溶剂，其中首先加入透明质酸，浓度为0.5?4g/L。
[0035]2)加入水解明胶，30?200g / L，将混合物置于60°C温水浴锅，轻摇45分钟，溶液完全澄清透明后取出。
[0036]3)趁热加入适量海藻不饱和脂肪酸和褐藻多酚，搅拌均匀。
[0037]4)冷却至37°C，加入适量的成体干细胞提取物，冷却至室温。冷却后形成凝胶。
[0038]5)最后加入杀菌剂，充分搅拌均匀，置于低光低温保存。
[0039]使用方法:
[0040]用清水清洗面部，用食指挑少许本组合物轻柔均匀涂抹在眼角及眼下，之后轻柔地由内向外按摩8?10次即可。
【【具体实施方式】】
[0041]通过以下实施例将组分物质具体配比进一步举例以描述本发明。各实施例中包含但不限于可能在此基础上添加的其它各类有益于保水、抗衰老的添加组分。
[0042]实施例1:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸0.1?0.5g、透明质酸0.1?0.5g、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.3?0.9g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0043]实施例2:组分配比为:成体干细胞提取物0.4?1.0g、海藻不饱和脂肪酸0.1?
0.5g、透明质酸0.1?0.5g、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.3?0.9g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0044]实施例3:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸0.4?
1.0g、透明质酸0.1?0.5g、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.3?0.9g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0045]实施例4:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸0.1?0.5g、透明质酸0.1?0.5g、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.9?1.5g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0046]实施例5:组分配比为:成体干细胞提取物0.4?1.0g、海藻不饱和脂肪酸0.1?0.5g、透明质酸0.1?0.5g、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.1?0.3g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0047]实施例6:组分配比为:成体干细胞提取物0.4?1.0g、海藻不饱和脂肪酸0.1?0.5g、透明质酸0.5?lg、水解明胶5?10g、褐藻多酹0.1?0.3g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0048]实施例7:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸0.5?lg、透明质酸0.5?lg、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.3?0.9g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0049]实施例8:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸0.5?lg、透明质酸0.5?lg、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.1?0.3g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0050]实施例9:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸0.5?lg、透明质酸0.5?lg、水解明胶5?10g、褐藻多酹0.9?1.5g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
[0051]实施例10:组分配比为:成体干细胞提取物0.1?0.5g、海藻不饱和脂肪酸I?2g、透明质酸0.5?lg、水解明胶3?5g、褐藻多酹0.9?1.5g,最后定容到10ml去离子纯水中，分装，低温保存。
【主权项】
1.用于消除和预防面部皱纹的组合物，所述组合物包括有效剂量的:第一组分，人成体干细胞提取物；第二组分，海藻不饱和脂肪酸；第三组分，透明质酸；第四组分，水解明胶；第五组分，褐藻多酚。2.如权利要求1所述的组合物，其中所述成体干细胞提取物和生长因子。3.如权利要求1所述的组合物，其中所述海藻不饱和脂肪酸。4.如权利要求1所述的组合物，其中所述透明质酸。5.如权利要求1所述的组合物，其中所述水解明胶。6.如权利要求1所述的组合物，其中所述褐藻多酚。7.如权利要求1-6中任一权利要求所述组合物在制备用于消除或预防面部皱纹尤其是眼部皱纹中的用途。8.如权利要求1中所述的干细胞提取物在制备用于消除或预防面部皱纹尤其是眼部皱纹中的用途。9.如权利要求1，其中还可包含VC，VE等可用于面部养护的营养素。
【专利摘要】本发明提供了一种涉及用于消除或预防面部皱纹的组合物，特别涉及成体干细胞提取物、海藻不饱和脂肪酸、透明质酸、水解明胶和褐藻多酚，以及很有提取物与其他的常用护肤功能物质的组合物。该组合物基于更安全和有效的预防或消除面部皱纹，克服现有产品中的毒性缺陷，提供了一种不仅能够抑制、消除表情肌过度收缩所产生的皱纹，而且能够强力保持面部皮肤水分。
【IPC分类】A61K8/97, A61Q19/08, A61Q19/00, A61K8/98
【公开号】CN104906011
【申请号】CN201410097307
【发明人】吴世凯
【申请人】吴世凯
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2014年3月14日
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