DaphmalenineA的O-(二乙胺基)乙基衍生物在制备抗心衰药物中的应用
Daphmalenine A的O-(二乙胺基)乙基衍生物在制备抗心衰药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及DaphmalenineA衍生物、制备方 法及其用途。
【背景技术】
[0002] 心衰（hearfailure，HF)是指心脏功能异常导致心脏泵血量不能满足组织代谢需 要的一种病理生理状态。病因是心脏负荷过重、心肌本身舒张受限，及任何原因导致的初始 心肌损伤；而感染、贫血、妊娠、分娩、心律紊乱、肺栓塞、甲亢、糖尿病、抑制心脏药诱发加重 HF。发病机理过去认为HF发生发展的机制是血流动力学异常；20世纪80年代后期认识到 神经-内分泌激素的激活起重要作用（交感丨NE丨RAS丨等激活）；90年代以后逐渐明确 了"心肌重塑"(remodelling)是导致心衰的发生发展的基本机制。心衰又分为急性心衰和 慢性心衰。
[0003] 目前对于心衰的治疗，临床上没有特效药物，大部分药物在缓解心衰症状的同时 具有不可避免的毒副作用，从天然产物中寻找化合物或先导化合物并进行结构修饰获得其 衍生物，从而得到高效低毒的潜在药物最有重要价值。
[0004] 本发明涉及的化合物DaphmalenineA是一个2011年发表（YuZhanget al.,2011.DaphmaleninesAandB:TwoNewAlkaloidswithUnusualSkeletonsfrom Daphniphyllumhimalense.Eur.J.Org.Chem. 2011, 4103 - 4107)的化合物，我们对化合物 DaphmalenineA进行了结构修饰，获得了一个新的DaphmalenineA衍生物，并对其抗心衰 活性进行了评价，其具有抗心衰活性。
【发明内容】
[0005] 本发明公开了一个Daphmalenine A衍生物，其结构为：
[0006]
[0007] 本发明DaphmalenineA衍生物（III)可通过下面方法制备：
[0008] (I)DaphmalenineA(I)与1，2_ 二溴乙烧反应得到DaphmalenineA的O-溴乙基 衍生物（II);
[0009] (2)DaphmalenineA的0-溴乙基衍生物（II)与二乙胺发生取代反应制得 DaphmalenineA的〇-(二乙胺基）乙基衍生物（III)。
[0010]
[0012] 进一步的DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物（III)的制备方法为：（1) 将419mg化合物DaphmalenineA⑴溶于IOmL苯，向溶液中加入0? 08g的四丁基溴化按， 7.52(^的1，2-二溴乙烷和611^的50%氢氧化钠溶液；混合物在35摄氏度搅拌1211;1211之 后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取两次，合并有机相溶液；然后对有机相溶液依 次用水和饱和食盐水洗涤4次，再用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩去除溶剂得到产物粗 品；产物粗品用硅胶柱层析纯化，流动相为：石油醚/丙酮=100:1. 5，v/v，收集黄色集中洗 脱带即得到DaphmalenineA的0-溴乙基衍生物（II)的黄色固体。
[0013] (2)将化合物II(263mg，0.5mmol)溶于20mL乙腈当中，向其中加入无水碳酸钾 (345mg，2. 5mmol)，碘化钾（84mg，0. 5mmol)和二乙胺（1460mg，20mmol)，混合物加热回流 l〇h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取四次，合并有机相。依次用水 和饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物 粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:1，v/v)，收集黄色集 中洗脱带即得到DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙基衍生物（III)的黄色胶状固体 (196. 8mg, 76% )〇
[0014] 本发明公开的化合物可以制成药学上可接受的盐或药学上可接受的载体。
[0015] 药效学实验表明，本发明的DaphmalenineA衍生物（III)具有较好的抗心衰作 用。本发明的药学上可接受的盐与其化合物具有同样的药效。
[0016] 以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。
【具体实施方式】
[0017] 实施例1化合物DaphmalenineA的制备
[0018] 化合物DaphmalenineA(I)的制备方法参照YuZhang等人发表的文献（YuZhang etal.,2011.DaphmaleninesAandB:TwoNewAlkaloidswithUnusualSkeletonsfrom Daphniphyllumhimalense.Eur.J.Org.Chem. 2011, 4103 - 4107)的方法。
[0019]
[0020] 实施例2DaphmalenineA的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0021] 将化合物I(419mg，I.OOmmol)溶于IOmL苯，向溶液中加入四丁基溴化铵（TBAB) (0. 08g)，1，2-二溴乙烷（7. 520g，40.OOmmol)和6mL的50 %氢氧化钠溶液。混合物在35 摄氏度搅拌12h。12h之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取两次，合并有机相溶 液。然后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涤4次，再用无水硫酸钠干燥，最后减压 浓缩去除溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮= 100:1.5,v/v)，收集黄色集中洗脱带即得到化合物II的黄色固体（320mg，61% )。
[0022] IHNMR(500MHz,DMS〇-d6) 8 3. 84 (d,J=I. 6Hz, 2H), 3. 76 - 3. 50 (m, 5H), 3. 42 (s, 2 H),3. 09 (s, 1H),2. 99 (s, 1H),2. 88 (s, 1H),2. 70 (s, 1H),2. 64 (d,J= 19. 1Hz, 3H),2. 45 (d,J =5. 6Hz, 3H) , 2. 33 (s, 1H) , 2. 19 - 2. 12 (m, 5H) , 2. 07 (s, 1H) ,I. 97 (d,J= 9. 2Hz, 3H),I. 84 -I. 76 (m, 3H),I. 69 (s, 1H),I. 15 (s, 1H),I. 04 (s, 3H)。
[0023] 13CNMR(125MHz,DMS0-d6)S219. 71 (s) ,211. 07 (s)，176. 65 (s) ,66. 24 (s) ,65. 38 (s)，63. 59 (s)，59. 42 (s)，54. 79 (s)，52. 18 (s)，46. 22 (s)，46. 01 (s)，45. 50 (s)，45. 27 (s)，4 0? 33 (s)，37. 86 (s)，37. 61 (s)，36. 27 (s)，34. 26 (s)，30. 89 (s)，28. 52 (s)，26. 04 (s)，25. 24 ( s), 8. 50 (s) 〇
[0024] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcdforC25H37BrNO6:526. 1804；found526. 1801.
[0025]
[0026] 实施例3DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物（III)的合成
[0027] 将化合物II(263mg，0.5mmol)溶于20mL乙腈当中，向其中加入无水碳酸钾 (345mg，2. 5mmol)，碘化钾（84mg，0. 5mmol)和二乙胺（1460mg，20mmol)，混合物加热回流 l〇h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取四次，合并有机相。依次用 水和饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产 物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:1，v/v)，收集黄色 集中洗脱带即得到DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙基衍生物（III)的黄色胶状固体 (196. 8mg, 76% )〇
[0028]1H匪R(500MHz,DMS0-d6)S3. 78 (s, 1H)，3. 68 (s, 3H)，3. 45 (s, 2H)，3. 09(s ,1H), 2. 94(d,J= 59. 8Hz, 5H), 2. 79(s, 1H), 2. 71 (d,J= 10. 0Hz, 2H), 2. 63 (d,J= 1. 4Hz, 4H), 2. 43 (t,J= 16. 7Hz, 3H), 2. 36 (d,J= 5. 9Hz, 1H), 2. 19 - 2. 12 (m, 5H), 2. 09 - 2. 00 (m, 4H),I. 90 (dd,J= 10. 7, 8. 0Hz, 1H),L85 (d,J= 23. 9Hz, 1H),I. 72 (s, 1H),I. 65 (s, 1H),I. 13 (d,J= 7. 0Hz, 7H),I. 06 (s, 3H).
[0029]13CNMR(125MHz, ,DMS0-d6)S219. 80 (s) ,211. 16 (s)，176. 74 (s) ,66. 30 (s) ,63. 64 (s)，61. 62 (s)，59. 51 (s)，54. 88 (s)，52. 27 (s)，51. 99 (s)，47. 76 (s)，46. 30 (s)，46. 06 (s)，4 5. 55 (s)，45. 26 (s)，40. 31 (s)，37. 86 (s)，37. 63 (s)，36. 28 (s)，30. 87 (s)，28. 53 (s)，26. 01 ( s)，25. 23 (s)，12. 37 (s)，8. 50 (s) ?
[0030] HRMS(ESI) :m/z[M+H].calcdforC29H47N2O6:519. 3434;found:519. 3429。
[0031]
[0032] 实施例4本发明所涉及化合物II和III片剂的制备
[0033] 取20克化合物II或者III或者其药学上可接受的盐当中的一种，加入制备片剂 的常规辅料180克，混匀，常规压片机制成1000片。
[0034] 实施例5本发明所涉及化合物II和III胶囊的制备：
[0035] 取20克化合物II或者III或者其药学上可接受的盐当中的一种，加入制备胶囊 剂的常规辅料如淀粉180克，混匀，装胶囊制成1000粒。
[0036] 实施例6化合物III抗心衰活性
[0037](一）实验例：化合物III对犬急性心力衰竭的治疗作用
[0038] 1材料：动物一健康成年犬体重12. 5~13. 5kg。戊巴比妥钠（Sigma，进口分装， 规格：25g);仪器美国BIC16导生理记录仪（美国BIC公司生产）；电磁流量计（MFV-3200 型）：日本光电公司生产。
[0039] 三乙胺（化合物IV)为市售分析纯。
[0040]
[0041] 2试验方法与结果
[0042] 将犬随机分为NS组（等容量溶剂），灌胃给药化合物IIII.Omg/kg组、化合物IV 1.0mg/kg组，每组6只。禁食12小时后，静脉注射戊巴比妥钠40mg/kg麻醉，气管插管，人 工呼吸，监测主动脉压（AP)与心电图。左侧开胸，从心尖插导管至左室压及其压力变化速 度（±dp/dtmax)。将Waltan-Brodie应变弓植入左心室前壁，测定心肌收缩力。用电磁流量 计测定升主动脉血流量。以升主动脉流量作为心输出量（CO)，计算心脏指数（Cl)，每搏指 数（SI)，每搏作功（SW)，左心作功（LVW)。各项参数记录与BIC生理记录仪。术后半小时， 各项参数达到稳定。从股静脉恒速输注戊巴比妥钠（〇. 5mL/kgmin)，以土dp/dtmax下降到 约1000mHg/s为主要指标形成急性心力衰竭。待急性心衰模型稳定后，各组动物十二指肠 给予相应药物。组间T检验，进行统计学处理。
[0043] 表1化合物III对心力衰竭犬dp/dt的影响（n= 6)
[0044]
[0049]与给药前比较*p〈0. 05, **p〈0. 01 ;与NS组比较?p〈0. 05, @@p〈0. 01
[0050] 结果如表1、2所示，化合物III可显著增加心衰犬的SW、LVW、+dp/dt(与模型组 对照组比较，p〈〇. 05or p〈0. 01)。化合物III可显著增加心衰犬的SW、LVW、+dp/dt(与模 型组对照组比较，p〈〇. Olor p〈0. 05)。化合物IV不可显著增加心衰犬的SW、LVW、+dp/dt。 化合物IV不可显著增加心衰犬的SW、LVW、+dp/dt。
[0051] 表3化合物III对心力衰竭犬心输出量的影响（n= 6)
[0052]
[0053]与给药前比较*p〈0. 05, **p〈0. 01 ;与NS组比较@p〈0. 05, @@p〈0. 01
[0054] 结果如表3所示，化合物III可显著增加心衰犬的心输出量（与模型对照组比 较，p〈0.0 lor p〈0. 05)。化合物III可显著增加心衰犬的心输出量（与模型对照组比较， p〈0.0 lor p〈0. 05)。化合物IV不可显著增加心衰犬的心输出量；化合物IV也不可显著增 加心衰犬的心输出量。
[0055] 结论：化合物III能够显著改善急性心衰，可以用来制备治疗或预防急性心衰的 药物。化合物IV不能显著改善急性心衰，不可用来制备治疗或预防急性心衰的药物。
[0056](二）实验例化合物III对慢性心衰大鼠的影响
[0057] 试验方法与结果
[0058] 大鼠40只，雌雄各半。10只作为正常对照组。30只腹腔注射盐酸阿霉素2mg/kg， 每周1次，共6周，第5周时随机分为3组，即正常NS组和灌胃给药化合物III2. 5mg/kg 组、化合物IV2. 5mg/kg组。灌胃给药化合物III2. 5mg/kg组、化合物IV2. 5mg/kg组在 第5周起每日分别给予化合物III和化合物IV灌胃各组，给药21天。20 %乌拉坦I.Ig/ kg腹腔注射麻醉，手术剥离气管并插管，同时游离出右侧总动脉，经其插入自制的心室插管 (直径1_，充满1 %肝素），描记血压曲线；再继续插入，使其通过左侧动脉瓣进入左心室， 描记室内压曲线，自动分析处理左室收缩压（LVSP)，心室内压最大上升速率（+dp/dtmax)，心 室内压最大下降速度（-dp/dt_)和实测心肌最大收缩速度（Vpm)等数据。另取10只大鼠 作为正常对照组，不给予盐酸阿霉素，其余操作同上述，组间T检验，进行统计学处理。
[0059] 表4化合物III对慢性心衰大鼠心功能的影响（n= 10)
[0060]
[0061]与NS组比较，A:p〈0. 05,AA:p〈0. 01
[0062] 表4试验结果表明化合物III2. 5mg/kg能显著升高由盐酸阿霉素导致的心衰大 鼠的LVSP，+dp/dtmax，-dp/dtmax和Vpm的降低（与NS组比较，P〈0. 01);化合物IV2. 5mg/ kg不能显著升高由盐酸阿霉素导致的心衰大鼠的LVSP，+dp/dtmax，-dp/dtmax和Vpm的降低。
[0063] 结论：化合物III具有显著的治疗或预防慢性心衰的作用，可以用来制备治疗或 预防慢性心衰的药物。化合物IV不具有显著的治疗或预防慢性心衰的作用，不可以用来制 备治疗或预防慢性心衰的药物。
【主权项】
1. 一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学上可接受的盐在抗心 衰药物中的应用，2.如权利要求1所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：所述心衰为急性心衰。3.如权利要求2所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：可以增加急性心衰的心脏做功。4.如权利要求2所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：可以增加急性心衰的心输出量。5.如权利要求1所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：所述心衰为慢性心衰。6.如权利要求5所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：可以增加慢性心衰的左室收缩压。7.如权利要求5所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：可以增加慢性心衰的心室内压最大上 升速率。8.如权利要求5所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：可以增加慢性心衰的心肌最大收缩速 度。
【专利摘要】本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及Daphmalenine A衍生物、制备方法及其在制备抗心衰药物上的用途。本发明合成了一个新的Daphmalenine A衍生物，并公开了其制备方法。药理学实验表明，本发明的Daphmalenine A衍生物具有抗心衰作用，具有开发抗心衰药物的价值。
【IPC分类】A61P9/04, C07D491/107, A61K31/439
【公开号】CN104906090
【申请号】CN201510280112
【发明人】江春平, 吴俊华
【申请人】南京广康协生物医药技术有限公司
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月27日
【技术领域】
[0001] 本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及DaphmalenineA衍生物、制备方 法及其用途。
【背景技术】
[0002] 心衰（hearfailure，HF)是指心脏功能异常导致心脏泵血量不能满足组织代谢需 要的一种病理生理状态。病因是心脏负荷过重、心肌本身舒张受限，及任何原因导致的初始 心肌损伤；而感染、贫血、妊娠、分娩、心律紊乱、肺栓塞、甲亢、糖尿病、抑制心脏药诱发加重 HF。发病机理过去认为HF发生发展的机制是血流动力学异常；20世纪80年代后期认识到 神经-内分泌激素的激活起重要作用（交感丨NE丨RAS丨等激活）；90年代以后逐渐明确 了"心肌重塑"(remodelling)是导致心衰的发生发展的基本机制。心衰又分为急性心衰和 慢性心衰。
[0003] 目前对于心衰的治疗，临床上没有特效药物，大部分药物在缓解心衰症状的同时 具有不可避免的毒副作用，从天然产物中寻找化合物或先导化合物并进行结构修饰获得其 衍生物，从而得到高效低毒的潜在药物最有重要价值。
[0004] 本发明涉及的化合物DaphmalenineA是一个2011年发表（YuZhanget al.,2011.DaphmaleninesAandB:TwoNewAlkaloidswithUnusualSkeletonsfrom Daphniphyllumhimalense.Eur.J.Org.Chem. 2011, 4103 - 4107)的化合物，我们对化合物 DaphmalenineA进行了结构修饰，获得了一个新的DaphmalenineA衍生物，并对其抗心衰 活性进行了评价，其具有抗心衰活性。
【发明内容】
[0005] 本发明公开了一个Daphmalenine A衍生物，其结构为：
[0006]
[0007] 本发明DaphmalenineA衍生物（III)可通过下面方法制备：
[0008] (I)DaphmalenineA(I)与1，2_ 二溴乙烧反应得到DaphmalenineA的O-溴乙基 衍生物（II);
[0009] (2)DaphmalenineA的0-溴乙基衍生物（II)与二乙胺发生取代反应制得 DaphmalenineA的〇-(二乙胺基）乙基衍生物（III)。
[0010]
[0012] 进一步的DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物（III)的制备方法为：（1) 将419mg化合物DaphmalenineA⑴溶于IOmL苯，向溶液中加入0? 08g的四丁基溴化按， 7.52(^的1，2-二溴乙烷和611^的50%氢氧化钠溶液；混合物在35摄氏度搅拌1211;1211之 后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取两次，合并有机相溶液；然后对有机相溶液依 次用水和饱和食盐水洗涤4次，再用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩去除溶剂得到产物粗 品；产物粗品用硅胶柱层析纯化，流动相为：石油醚/丙酮=100:1. 5，v/v，收集黄色集中洗 脱带即得到DaphmalenineA的0-溴乙基衍生物（II)的黄色固体。
[0013] (2)将化合物II(263mg，0.5mmol)溶于20mL乙腈当中，向其中加入无水碳酸钾 (345mg，2. 5mmol)，碘化钾（84mg，0. 5mmol)和二乙胺（1460mg，20mmol)，混合物加热回流 l〇h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取四次，合并有机相。依次用水 和饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物 粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:1，v/v)，收集黄色集 中洗脱带即得到DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙基衍生物（III)的黄色胶状固体 (196. 8mg, 76% )〇
[0014] 本发明公开的化合物可以制成药学上可接受的盐或药学上可接受的载体。
[0015] 药效学实验表明，本发明的DaphmalenineA衍生物（III)具有较好的抗心衰作 用。本发明的药学上可接受的盐与其化合物具有同样的药效。
[0016] 以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。
【具体实施方式】
[0017] 实施例1化合物DaphmalenineA的制备
[0018] 化合物DaphmalenineA(I)的制备方法参照YuZhang等人发表的文献（YuZhang etal.,2011.DaphmaleninesAandB:TwoNewAlkaloidswithUnusualSkeletonsfrom Daphniphyllumhimalense.Eur.J.Org.Chem. 2011, 4103 - 4107)的方法。
[0019]
[0020] 实施例2DaphmalenineA的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0021] 将化合物I(419mg，I.OOmmol)溶于IOmL苯，向溶液中加入四丁基溴化铵（TBAB) (0. 08g)，1，2-二溴乙烷（7. 520g，40.OOmmol)和6mL的50 %氢氧化钠溶液。混合物在35 摄氏度搅拌12h。12h之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取两次，合并有机相溶 液。然后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涤4次，再用无水硫酸钠干燥，最后减压 浓缩去除溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮= 100:1.5,v/v)，收集黄色集中洗脱带即得到化合物II的黄色固体（320mg，61% )。
[0022] IHNMR(500MHz,DMS〇-d6) 8 3. 84 (d,J=I. 6Hz, 2H), 3. 76 - 3. 50 (m, 5H), 3. 42 (s, 2 H),3. 09 (s, 1H),2. 99 (s, 1H),2. 88 (s, 1H),2. 70 (s, 1H),2. 64 (d,J= 19. 1Hz, 3H),2. 45 (d,J =5. 6Hz, 3H) , 2. 33 (s, 1H) , 2. 19 - 2. 12 (m, 5H) , 2. 07 (s, 1H) ,I. 97 (d,J= 9. 2Hz, 3H),I. 84 -I. 76 (m, 3H),I. 69 (s, 1H),I. 15 (s, 1H),I. 04 (s, 3H)。
[0023] 13CNMR(125MHz,DMS0-d6)S219. 71 (s) ,211. 07 (s)，176. 65 (s) ,66. 24 (s) ,65. 38 (s)，63. 59 (s)，59. 42 (s)，54. 79 (s)，52. 18 (s)，46. 22 (s)，46. 01 (s)，45. 50 (s)，45. 27 (s)，4 0? 33 (s)，37. 86 (s)，37. 61 (s)，36. 27 (s)，34. 26 (s)，30. 89 (s)，28. 52 (s)，26. 04 (s)，25. 24 ( s), 8. 50 (s) 〇
[0024] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcdforC25H37BrNO6:526. 1804；found526. 1801.
[0025]
[0026] 实施例3DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物（III)的合成
[0027] 将化合物II(263mg，0.5mmol)溶于20mL乙腈当中，向其中加入无水碳酸钾 (345mg，2. 5mmol)，碘化钾（84mg，0. 5mmol)和二乙胺（1460mg，20mmol)，混合物加热回流 l〇h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取四次，合并有机相。依次用 水和饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产 物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:1，v/v)，收集黄色 集中洗脱带即得到DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙基衍生物（III)的黄色胶状固体 (196. 8mg, 76% )〇
[0028]1H匪R(500MHz,DMS0-d6)S3. 78 (s, 1H)，3. 68 (s, 3H)，3. 45 (s, 2H)，3. 09(s ,1H), 2. 94(d,J= 59. 8Hz, 5H), 2. 79(s, 1H), 2. 71 (d,J= 10. 0Hz, 2H), 2. 63 (d,J= 1. 4Hz, 4H), 2. 43 (t,J= 16. 7Hz, 3H), 2. 36 (d,J= 5. 9Hz, 1H), 2. 19 - 2. 12 (m, 5H), 2. 09 - 2. 00 (m, 4H),I. 90 (dd,J= 10. 7, 8. 0Hz, 1H),L85 (d,J= 23. 9Hz, 1H),I. 72 (s, 1H),I. 65 (s, 1H),I. 13 (d,J= 7. 0Hz, 7H),I. 06 (s, 3H).
[0029]13CNMR(125MHz, ,DMS0-d6)S219. 80 (s) ,211. 16 (s)，176. 74 (s) ,66. 30 (s) ,63. 64 (s)，61. 62 (s)，59. 51 (s)，54. 88 (s)，52. 27 (s)，51. 99 (s)，47. 76 (s)，46. 30 (s)，46. 06 (s)，4 5. 55 (s)，45. 26 (s)，40. 31 (s)，37. 86 (s)，37. 63 (s)，36. 28 (s)，30. 87 (s)，28. 53 (s)，26. 01 ( s)，25. 23 (s)，12. 37 (s)，8. 50 (s) ?
[0030] HRMS(ESI) :m/z[M+H].calcdforC29H47N2O6:519. 3434;found:519. 3429。
[0031]
[0032] 实施例4本发明所涉及化合物II和III片剂的制备
[0033] 取20克化合物II或者III或者其药学上可接受的盐当中的一种，加入制备片剂 的常规辅料180克，混匀，常规压片机制成1000片。
[0034] 实施例5本发明所涉及化合物II和III胶囊的制备：
[0035] 取20克化合物II或者III或者其药学上可接受的盐当中的一种，加入制备胶囊 剂的常规辅料如淀粉180克，混匀，装胶囊制成1000粒。
[0036] 实施例6化合物III抗心衰活性
[0037](一）实验例：化合物III对犬急性心力衰竭的治疗作用
[0038] 1材料：动物一健康成年犬体重12. 5~13. 5kg。戊巴比妥钠（Sigma，进口分装， 规格：25g);仪器美国BIC16导生理记录仪（美国BIC公司生产）；电磁流量计（MFV-3200 型）：日本光电公司生产。
[0039] 三乙胺（化合物IV)为市售分析纯。
[0040]
[0041] 2试验方法与结果
[0042] 将犬随机分为NS组（等容量溶剂），灌胃给药化合物IIII.Omg/kg组、化合物IV 1.0mg/kg组，每组6只。禁食12小时后，静脉注射戊巴比妥钠40mg/kg麻醉，气管插管，人 工呼吸，监测主动脉压（AP)与心电图。左侧开胸，从心尖插导管至左室压及其压力变化速 度（±dp/dtmax)。将Waltan-Brodie应变弓植入左心室前壁，测定心肌收缩力。用电磁流量 计测定升主动脉血流量。以升主动脉流量作为心输出量（CO)，计算心脏指数（Cl)，每搏指 数（SI)，每搏作功（SW)，左心作功（LVW)。各项参数记录与BIC生理记录仪。术后半小时， 各项参数达到稳定。从股静脉恒速输注戊巴比妥钠（〇. 5mL/kgmin)，以土dp/dtmax下降到 约1000mHg/s为主要指标形成急性心力衰竭。待急性心衰模型稳定后，各组动物十二指肠 给予相应药物。组间T检验，进行统计学处理。
[0043] 表1化合物III对心力衰竭犬dp/dt的影响（n= 6)
[0044]
[0049]与给药前比较*p〈0. 05, **p〈0. 01 ;与NS组比较?p〈0. 05, @@p〈0. 01
[0050] 结果如表1、2所示，化合物III可显著增加心衰犬的SW、LVW、+dp/dt(与模型组 对照组比较，p〈〇. 05or p〈0. 01)。化合物III可显著增加心衰犬的SW、LVW、+dp/dt(与模 型组对照组比较，p〈〇. Olor p〈0. 05)。化合物IV不可显著增加心衰犬的SW、LVW、+dp/dt。 化合物IV不可显著增加心衰犬的SW、LVW、+dp/dt。
[0051] 表3化合物III对心力衰竭犬心输出量的影响（n= 6)
[0052]
[0053]与给药前比较*p〈0. 05, **p〈0. 01 ;与NS组比较@p〈0. 05, @@p〈0. 01
[0054] 结果如表3所示，化合物III可显著增加心衰犬的心输出量（与模型对照组比 较，p〈0.0 lor p〈0. 05)。化合物III可显著增加心衰犬的心输出量（与模型对照组比较， p〈0.0 lor p〈0. 05)。化合物IV不可显著增加心衰犬的心输出量；化合物IV也不可显著增 加心衰犬的心输出量。
[0055] 结论：化合物III能够显著改善急性心衰，可以用来制备治疗或预防急性心衰的 药物。化合物IV不能显著改善急性心衰，不可用来制备治疗或预防急性心衰的药物。
[0056](二）实验例化合物III对慢性心衰大鼠的影响
[0057] 试验方法与结果
[0058] 大鼠40只，雌雄各半。10只作为正常对照组。30只腹腔注射盐酸阿霉素2mg/kg， 每周1次，共6周，第5周时随机分为3组，即正常NS组和灌胃给药化合物III2. 5mg/kg 组、化合物IV2. 5mg/kg组。灌胃给药化合物III2. 5mg/kg组、化合物IV2. 5mg/kg组在 第5周起每日分别给予化合物III和化合物IV灌胃各组，给药21天。20 %乌拉坦I.Ig/ kg腹腔注射麻醉，手术剥离气管并插管，同时游离出右侧总动脉，经其插入自制的心室插管 (直径1_，充满1 %肝素），描记血压曲线；再继续插入，使其通过左侧动脉瓣进入左心室， 描记室内压曲线，自动分析处理左室收缩压（LVSP)，心室内压最大上升速率（+dp/dtmax)，心 室内压最大下降速度（-dp/dt_)和实测心肌最大收缩速度（Vpm)等数据。另取10只大鼠 作为正常对照组，不给予盐酸阿霉素，其余操作同上述，组间T检验，进行统计学处理。
[0059] 表4化合物III对慢性心衰大鼠心功能的影响（n= 10)
[0060]
[0061]与NS组比较，A:p〈0. 05,AA:p〈0. 01
[0062] 表4试验结果表明化合物III2. 5mg/kg能显著升高由盐酸阿霉素导致的心衰大 鼠的LVSP，+dp/dtmax，-dp/dtmax和Vpm的降低（与NS组比较，P〈0. 01);化合物IV2. 5mg/ kg不能显著升高由盐酸阿霉素导致的心衰大鼠的LVSP，+dp/dtmax，-dp/dtmax和Vpm的降低。
[0063] 结论：化合物III具有显著的治疗或预防慢性心衰的作用，可以用来制备治疗或 预防慢性心衰的药物。化合物IV不具有显著的治疗或预防慢性心衰的作用，不可以用来制 备治疗或预防慢性心衰的药物。
【主权项】
1. 一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学上可接受的盐在抗心 衰药物中的应用，2.如权利要求1所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：所述心衰为急性心衰。3.如权利要求2所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：可以增加急性心衰的心脏做功。4.如权利要求2所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：可以增加急性心衰的心输出量。5.如权利要求1所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：所述心衰为慢性心衰。6.如权利要求5所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：可以增加慢性心衰的左室收缩压。7.如权利要求5所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：可以增加慢性心衰的心室内压最大上 升速率。8.如权利要求5所述的一种具有式III所示结构的Daphmalenine A衍生物及其药学 上可接受的盐在抗心衰药物中的应用，其特征在于：可以增加慢性心衰的心肌最大收缩速 度。
【专利摘要】本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及Daphmalenine A衍生物、制备方法及其在制备抗心衰药物上的用途。本发明合成了一个新的Daphmalenine A衍生物，并公开了其制备方法。药理学实验表明，本发明的Daphmalenine A衍生物具有抗心衰作用，具有开发抗心衰药物的价值。
【IPC分类】A61P9/04, C07D491/107, A61K31/439
【公开号】CN104906090
【申请号】CN201510280112
【发明人】江春平, 吴俊华
【申请人】南京广康协生物医药技术有限公司
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月27日
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