一种促进蛋白质合成的组合物及其制备方法和用图
一种促进蛋白质合成的组合物及其制备方法和用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种促进和/或提高生物体内蛋白质合成的含有0 -隐黄质的药物 组合物，属于医药生物技术领域。
【背景技术】
[0002] e-隐黄质是一种类胡萝卜素，其分子中由中央共轭多烯链和末端六元环组成， 且其中一个末端六元环上存在单个羟基，分子呈非对称型，其中以全反式异构体最稳定。 e-隐黄质通常呈单体或酯的形式存在于橘子、红辣椒、酸浆等高等植物的花或果实组织 中。研宄表明，e隐黄质可以增强和提高人类动物组织，例如肝、皮肤、肌肉等中的蛋白质 的合成，也可以用于在运动及训练、康复过程中一般性强化生长和发育，以及用于预防和治 疗肌肉减少。有研宄表明，当胆汁中存在胆汁盐时，e-隐黄质促进的蛋白形成更为有效。
[0003] 酸衆为前科酸衆属的一种多年生草本植物，在我国大部分地区均有分布，又名"红 姑娘"、"红灯笼"、"洛神珠"等。酸浆膨大的宿萼可入药，具有化痰、镇咳、明目等功效。酸 浆中含有丰富的类胡萝卜素，主要组分为玉米黄质、叶黄素、隐黄质等，其中隐黄 质（cryptoxantin)的含量较为丰富，主要以酯的形式存在。虽然现在市面上已售有含有 0 -隐黄质的产品，但其含量均较低，例如COTION公司销售的|3 -隐黄质产品，其含量仅为 0. 2%，且其成分较为单一，实际药用效果也并不理想。
【发明内容】
[0004] 针对现有技术存在的诸多缺陷，本发明人经过大量的深入研宄，在付出了充分的 创造性劳动后，提供一种含有更高含量的e-隐黄质的药物组合物及其制备方法和制药用 途。
[0005] 具体而言，本发明是通过如下技术方案实现的： 步骤一、处理原料 取酸浆宿萼原药，清洗，避光干燥，粉碎，混匀，过20-200目筛，得到酸浆宿萼粉末。
[0006] 步骤二、酶处理 在惰性气体氛围下，按照酸浆宿萼与水的质量比1:1 〇 - 6 0，生物酶的用量占酸浆宿萼 粉末总重量的0. 1-5%的比例，配制酶解溶液，搅拌，利用无机酸或者无机碱调节酶解溶 液的pH为3-7，放入恒温摇床中，摇床转速为100~120rpm，在30-70 °C下进行保温酶解 60-180min〇
[0007] 根据本发明的一种优选方式，为了保证生物酶的活力，所述步骤B中PH5-7,最优 选5-6。反应液的pH过高或过低，都会影响酶的稳定性，从而使酶催化遭受不可逆破坏。
[0008] 根据本发明的一种优选方式，所述步骤二中的生物酶为纤维素酶、果胶酶、半纤 维素酶、蛋白酶、淀粉酶、木聚糖酶、葡聚糖酶或上述酶的混合物，优选纤维素酶、果胶 酶、e_葡聚糖酶或其混合物，最优选纤维素酶和果胶酶的混合物，两者的质量比优选为 1:1-10,优选 1:3-8,更优选 1:6-8。
[0009] 根据本发明的一种优选方式，所述步骤二中酶与酸浆宿萼粉末的质量比优选为 0. 1-6:100 ;随着反应体系中酶用量的增加，酶与底物接触机会增加，但当酶用量达到一定 比例后，再增加酶的用量，e-隐黄质的提取率增加不明显，从节约成本、提高提取率的角度 考虑，酶与酸浆宿萼的质量比更优选为2-5:100。
[0010] 根据本发明的一种优选方式，所述步骤二中的酶解保温温度优选35-65°C，酶解温 度过高或过低均会使酶的活力降低，从而导致酶解效率降低，本发明中的酶解温度更优选 35-50 °C，最优选 40-45 °C。
[0011] 根据本发明的一种优选方式，所述步骤二中酶解时间优选90-180min。酶解反应时 间与酶解进行程度密切相关，酶解时间太短，酶解不充分，但当反应进行到一定程度以后， 延长酶促反应时间并不能显著增加提取率，综合考虑，酶解时间更优选90-120min。
[0012] 根据本发明的一种优选方式，所述步骤二中的无机酸选自盐酸、硫酸、硝酸或磷 酸，无机碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾。
[0013] 步骤三、超临界C02萃取 称取步骤二得到的干燥后的酶处理酸浆宿萼粉末，利用超临界C02萃取法超临界萃 取得到e-隐黄质浓缩物，其中，超临界C02萃取的温度为40-70°C，优选40-55°C，更优选 45°C。萃取压力为10_50MPa，优选20-45MPa，更优选25-35MPa。萃取时间为0. 5-6h，优选 l_3h，更优选2h。
[0014] 步骤四、复配 称取适量步骤三所得的浓缩物，根据e-隐黄质的含量，按比例加入适量胆汁盐，混 合、搅拌均匀，得到本发明所述的含有e-隐黄质的组合物。
[0015]根据本发明的一种优选方式，e-隐黄质与胆汁盐的质量比为1 : (0. 5-8)，优选1 : (〇? 5-6)，更优选I:(3-6)，即为 1:3、1:4、1:5、1:6。
[0016] 根据本发明的一种优选方式，所述胆汁盐为胆酸钠、甘胆酸盐、牛黄胆酸盐、甘氨 脱氧胆酸盐，优选甘胆酸钠或钾、甘氨脱氧胆酸钠或钾，更优选甘胆酸钠。
[0017] 根据本发明的一种优选方式，组合物中还含有DL-ALPHA-生育酚和/或抗坏血酸 钠。其中，0-隐黄质与DL-ALPHA-生育酚的质量比为I:(0.01-0. 1)，优选I:(0.03-0. 08)， 更优选 1 : (〇? 05-0. 08)，即为 1 :0? 05、1 :0? 06、1 :0? 07、1:0. 08。
[0018]根据本发明的一种优选方式，0 _隐黄质与抗坏血酸钠的质量比为1 : (3-10)，优 选 1 :(5-10)，即为 1 :5、1 :6、1 :7、1 :8、1 :9、1 :10。
[0019] 根据本发明的一种优选方式，复配所得的组合物中还包括食用纤维质，包括可溶 性非淀粉多糖如阿拉伯胶或果胶，不溶性非淀粉多糖如纤维素、半纤维素和木素，低聚糖如 菊粉或半乳低聚糖。
[0020] 根据实际生产需要，可向本发明所得组合物中加入适应的赋形剂、调味剂、防腐 剂、稳定剂、乳化剂、缓冲剂，并按照本领域常规制剂方法制备呈任意一种临床上可接受的 适宜药物制剂，优选的，可加工成胶囊、粉剂、片剂或颗粒剂。
[0021] 有益效果： 相对于市售的类胡萝卜素类药物制品，本发明的药用组合物中不仅含有含量较高、纯 度更好的隐黄质，还存在胆汁盐等物质进行复配，其显著地增加了蛋白形成，有效预防 了蛋白损失，提高了 隐黄质的药物利用效果。本发明的组合物中的隐黄质提取自酸 浆宿萼，根据本发明所述的组合物的制备方法得到的e-隐黄质，其提取率较高，为酸浆的 进一步开发利用提供了一条新的途径。本发明原料易得，提取 工艺简单，所得产品质量高， 综合成本可控，适合于工业化生产。
【具体实施方式】
[0022] 下面通过具体的实施例对本发明进行详细说明，但这些例举性实施方式的用途和 目的仅用来例举本发明，并非对本发明的实际保护范围构成任何形式的任何限定，更非将 本发明的保护范围局限于此。
[0023] 实施例1 :本发明含有0 _隐黄质的浓缩物的制备 取酸浆宿萼原药，清洗，避光干燥，粉碎，混匀，过20-200目筛，得到酸浆宿萼粉末。在 惰性气体氛围下，按照酸浆宿萼与水的质量比1:30,纤维素酶和果胶酶的混合酶的用量 占酸浆宿萼粉末总重量的3%的比例，配制酶解溶液，其中，纤维素酶和果胶酶的质量比为 1: 7。搅拌，利用盐酸或者氢氧化钠溶液调节酶解溶液的pH为6,放入恒温摇床中，摇床转速 为100~120rpm，在45°C下进行保温酶解lOOmin。过滤，干燥，称取干燥后的酶处理酸衆宿 萼粉末，利用超临界C02萃取法，在45°C、35MPa的条件下，超临界萃取2h，得到0 -隐黄质 浓缩物。经HPLC检测，所得浓缩物种0 -隐黄质含量为15. 68%。
[0024] 实施例2 :本发明的组合物的制备 根据实施例1中所得的浓缩物中的隐黄质的质量，分别按照1:1的质量比加入胆 酸钠、甘胆酸钠、牛黄胆酸钠、甘氨脱氧胆酸钾，混合、搅拌均匀，得到本发明所述的组合物。
[0025] 参考例1 :促进蛋白形成能力表征 由于鱼类的生长实际上是通过蛋白质合成完成的，白肌又是鱼类蛋白质合成沉积最高 的组织，是代表鱼体生长最优代表性的组织。因此选择市售的鲤鱼苗为实验对象，评价本发 明所述的药物组合物对蛋白质合成的影响。
[0026] 按照20mg/Kg的添加量，将实施例1中所得的浓缩物、实施例2中所得的组合物分 别添加至市售鱼饲料中，混合均匀，粉碎至1. 5_，干燥后备用。市场上购买100尾规格整齐 的鲤鱼苗，置于网箱中进行驯养，其间从市售饲料逐渐过渡到上述复配饲料。待全部摄食复 配饲料后，试验开始前先停食24h，称重，随后从驯养鱼苗中随机取30尾鱼，喂饲复配饲料， 持续饲养一周。实验结束前停食24h。从30尾鱼中随机取10尾，吸干体表水分，存在背鳍 基部取白肌和肝胰脏作为待测样品，于_20°C保存待测DNA、RNA含量。配制RNA、DNA标准 液，绘制标准曲线，分别在260nm和265nm处测定RNA和DNA的吸收值（OD)，换算确定RNA 和DNA含量（yg/mL)。RNA/DNA比率表示核糖体的数量或蛋白质的合成潜力或RNA的转录 效率，是衡量组织蛋白质合成能力的指标。实验结果见表1 : 表1
实施例3 :本发明的组合物的制备 根据实施例1中所得的浓缩物中的e-隐黄质的质量，分别按照1:0. 5、I:I、1: 2、1: 3、 1:5、1:7、1:8的质量比加入甘胆酸钠，混合、搅拌均匀，得到本发明所述的组合物。
[0027] 参考例2 :促进蛋白形成能力表征 参照参考例1的表征方法，测定实施例3的组合物的RNA/DNA比值，结果见表2 :
由参考例1和2的实验结果可知，当饲料中加入本发明的组合物，鱼苗体内的RNA/DNA比率得到了显著的提高。其中，当胆汁盐为甘胆酸钠、0-隐黄质与甘胆酸钠的质量比为 1:5时，RNA/DNA比率值最高，取得了预料不到的技术效果。
[0028] 应当理解，这些实施例的用途仅用于说明本发明而非意欲限制本发明的保护范 围。此外，也应理解，在阅读了本发明的技术内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各 种改动、修改和/或变型，所有的这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的 保护范围之内。
【主权项】
1. 一种促进和/或提高生物体内蛋白质合成的组合物，其特征在于，包括提取自酸浆 宿萼的、含有e-隐黄质的浓缩物，和胆汁盐。2. 根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，0 -隐黄质与胆汁盐的质量比为1 : (0. 5-8)，优选 1 : (0. 5-6)，更优选 1 : (3-6)。3. 根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述胆汁盐为胆酸钠、甘胆酸盐、牛黄 胆酸盐、甘氨脱氧胆酸盐，优选甘胆酸钠或钾、甘氨脱氧胆酸钠或钾，更优选甘胆酸钠。4. 根据权利要求1-3中任一项所述的组合物，其特征在于，组合物中还含有 DL-ALPHA-生育酚和/或抗坏血酸钠。5. 根据权利要求1-3中任一项所述的组合物，其特征在于，组合物中还包括食用纤维 质，例如可溶性非淀粉多糖如阿拉伯胶或果胶，不溶性非淀粉多糖例如纤维素、半纤维素和 木素，低聚糖如菊粉或半乳低聚糖。6. 权利要求1-5中任一项所述的组合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤： 步骤一、处理原料 取酸浆宿萼原药，清洗，避光干燥，粉碎，混匀，过20-200目筛，得到酸浆宿萼粉末； 步骤二、酶处理 在惰性气体氛围下，按照酸浆宿萼与水的质量比1:1 〇 _ 6 0，生物酶的用量占酸浆宿萼 粉末总重量的0. 1-5%的比例，配制酶解溶液，搅拌，利用无机酸或者无机碱调节酶解溶 液的pH为3-7,放入恒温摇床中，摇床转速为100~120rpm，在30-70°C下进行保温酶解 60_180min; 步骤三、超临界C02萃取 称取步骤二得到的干燥后的酶处理酸浆宿萼粉末，利用超临界C02萃取法超临界萃取 得到e-隐黄质浓缩物，其中，超临界C02萃取的温度为40-70°C，萃取压力为10-50MPa，萃 取时间为〇. 5-6h; 步骤四、复配 称取适量步骤三所得的浓缩物，根据e-隐黄质的含量，按比例加入适量胆汁盐，和/ 或DL-ALPHA-生育酚，和/或抗坏血酸钠、和/或食用纤维质，混合、搅拌均匀，得到本发明 所述的含有隐黄质的组合物。7. 权利要求1-5中任一项所述的组合物的用途，其特征在于，用于制备促进和/或提高 生物体内蛋白质合成的药物。
【专利摘要】本申请涉及生物技术领域，特别涉及一种组合物、用途及制备方法。该组合物中含有提取自酸浆宿萼的β-隐黄质浓缩物和胆汁盐，以及DL-ALPHA-生育酚和/或抗坏血酸钠，可有效促进人类和动物组织中蛋白质的合成，预防衰老或治疗过程中肌肉减少。本发明的组合物原料易得，制备工艺简单，所得产品质量高，综合成本可控，适合于工业化生产。
【IPC分类】A61K31/575, A61P21/00, A61P3/02, A61K31/07
【公开号】CN104906112
【申请号】CN201510257154
【发明人】杨克西, 王炜, 颜丙春, 王芬
【申请人】杨克西
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月20日
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种促进和/或提高生物体内蛋白质合成的含有0 -隐黄质的药物 组合物，属于医药生物技术领域。
【背景技术】
[0002] e-隐黄质是一种类胡萝卜素，其分子中由中央共轭多烯链和末端六元环组成， 且其中一个末端六元环上存在单个羟基，分子呈非对称型，其中以全反式异构体最稳定。 e-隐黄质通常呈单体或酯的形式存在于橘子、红辣椒、酸浆等高等植物的花或果实组织 中。研宄表明，e隐黄质可以增强和提高人类动物组织，例如肝、皮肤、肌肉等中的蛋白质 的合成，也可以用于在运动及训练、康复过程中一般性强化生长和发育，以及用于预防和治 疗肌肉减少。有研宄表明，当胆汁中存在胆汁盐时，e-隐黄质促进的蛋白形成更为有效。
[0003] 酸衆为前科酸衆属的一种多年生草本植物，在我国大部分地区均有分布，又名"红 姑娘"、"红灯笼"、"洛神珠"等。酸浆膨大的宿萼可入药，具有化痰、镇咳、明目等功效。酸 浆中含有丰富的类胡萝卜素，主要组分为玉米黄质、叶黄素、隐黄质等，其中隐黄 质（cryptoxantin)的含量较为丰富，主要以酯的形式存在。虽然现在市面上已售有含有 0 -隐黄质的产品，但其含量均较低，例如COTION公司销售的|3 -隐黄质产品，其含量仅为 0. 2%，且其成分较为单一，实际药用效果也并不理想。
【发明内容】
[0004] 针对现有技术存在的诸多缺陷，本发明人经过大量的深入研宄，在付出了充分的 创造性劳动后，提供一种含有更高含量的e-隐黄质的药物组合物及其制备方法和制药用 途。
[0005] 具体而言，本发明是通过如下技术方案实现的： 步骤一、处理原料 取酸浆宿萼原药，清洗，避光干燥，粉碎，混匀，过20-200目筛，得到酸浆宿萼粉末。
[0006] 步骤二、酶处理 在惰性气体氛围下，按照酸浆宿萼与水的质量比1:1 〇 - 6 0，生物酶的用量占酸浆宿萼 粉末总重量的0. 1-5%的比例，配制酶解溶液，搅拌，利用无机酸或者无机碱调节酶解溶 液的pH为3-7，放入恒温摇床中，摇床转速为100~120rpm，在30-70 °C下进行保温酶解 60-180min〇
[0007] 根据本发明的一种优选方式，为了保证生物酶的活力，所述步骤B中PH5-7,最优 选5-6。反应液的pH过高或过低，都会影响酶的稳定性，从而使酶催化遭受不可逆破坏。
[0008] 根据本发明的一种优选方式，所述步骤二中的生物酶为纤维素酶、果胶酶、半纤 维素酶、蛋白酶、淀粉酶、木聚糖酶、葡聚糖酶或上述酶的混合物，优选纤维素酶、果胶 酶、e_葡聚糖酶或其混合物，最优选纤维素酶和果胶酶的混合物，两者的质量比优选为 1:1-10,优选 1:3-8,更优选 1:6-8。
[0009] 根据本发明的一种优选方式，所述步骤二中酶与酸浆宿萼粉末的质量比优选为 0. 1-6:100 ;随着反应体系中酶用量的增加，酶与底物接触机会增加，但当酶用量达到一定 比例后，再增加酶的用量，e-隐黄质的提取率增加不明显，从节约成本、提高提取率的角度 考虑，酶与酸浆宿萼的质量比更优选为2-5:100。
[0010] 根据本发明的一种优选方式，所述步骤二中的酶解保温温度优选35-65°C，酶解温 度过高或过低均会使酶的活力降低，从而导致酶解效率降低，本发明中的酶解温度更优选 35-50 °C，最优选 40-45 °C。
[0011] 根据本发明的一种优选方式，所述步骤二中酶解时间优选90-180min。酶解反应时 间与酶解进行程度密切相关，酶解时间太短，酶解不充分，但当反应进行到一定程度以后， 延长酶促反应时间并不能显著增加提取率，综合考虑，酶解时间更优选90-120min。
[0012] 根据本发明的一种优选方式，所述步骤二中的无机酸选自盐酸、硫酸、硝酸或磷 酸，无机碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾。
[0013] 步骤三、超临界C02萃取 称取步骤二得到的干燥后的酶处理酸浆宿萼粉末，利用超临界C02萃取法超临界萃 取得到e-隐黄质浓缩物，其中，超临界C02萃取的温度为40-70°C，优选40-55°C，更优选 45°C。萃取压力为10_50MPa，优选20-45MPa，更优选25-35MPa。萃取时间为0. 5-6h，优选 l_3h，更优选2h。
[0014] 步骤四、复配 称取适量步骤三所得的浓缩物，根据e-隐黄质的含量，按比例加入适量胆汁盐，混 合、搅拌均匀，得到本发明所述的含有e-隐黄质的组合物。
[0015]根据本发明的一种优选方式，e-隐黄质与胆汁盐的质量比为1 : (0. 5-8)，优选1 : (〇? 5-6)，更优选I:(3-6)，即为 1:3、1:4、1:5、1:6。
[0016] 根据本发明的一种优选方式，所述胆汁盐为胆酸钠、甘胆酸盐、牛黄胆酸盐、甘氨 脱氧胆酸盐，优选甘胆酸钠或钾、甘氨脱氧胆酸钠或钾，更优选甘胆酸钠。
[0017] 根据本发明的一种优选方式，组合物中还含有DL-ALPHA-生育酚和/或抗坏血酸 钠。其中，0-隐黄质与DL-ALPHA-生育酚的质量比为I:(0.01-0. 1)，优选I:(0.03-0. 08)， 更优选 1 : (〇? 05-0. 08)，即为 1 :0? 05、1 :0? 06、1 :0? 07、1:0. 08。
[0018]根据本发明的一种优选方式，0 _隐黄质与抗坏血酸钠的质量比为1 : (3-10)，优 选 1 :(5-10)，即为 1 :5、1 :6、1 :7、1 :8、1 :9、1 :10。
[0019] 根据本发明的一种优选方式，复配所得的组合物中还包括食用纤维质，包括可溶 性非淀粉多糖如阿拉伯胶或果胶，不溶性非淀粉多糖如纤维素、半纤维素和木素，低聚糖如 菊粉或半乳低聚糖。
[0020] 根据实际生产需要，可向本发明所得组合物中加入适应的赋形剂、调味剂、防腐 剂、稳定剂、乳化剂、缓冲剂，并按照本领域常规制剂方法制备呈任意一种临床上可接受的 适宜药物制剂，优选的，可加工成胶囊、粉剂、片剂或颗粒剂。
[0021] 有益效果： 相对于市售的类胡萝卜素类药物制品，本发明的药用组合物中不仅含有含量较高、纯 度更好的隐黄质，还存在胆汁盐等物质进行复配，其显著地增加了蛋白形成，有效预防 了蛋白损失，提高了 隐黄质的药物利用效果。本发明的组合物中的隐黄质提取自酸 浆宿萼，根据本发明所述的组合物的制备方法得到的e-隐黄质，其提取率较高，为酸浆的 进一步开发利用提供了一条新的途径。本发明原料易得，提取 工艺简单，所得产品质量高， 综合成本可控，适合于工业化生产。
【具体实施方式】
[0022] 下面通过具体的实施例对本发明进行详细说明，但这些例举性实施方式的用途和 目的仅用来例举本发明，并非对本发明的实际保护范围构成任何形式的任何限定，更非将 本发明的保护范围局限于此。
[0023] 实施例1 :本发明含有0 _隐黄质的浓缩物的制备 取酸浆宿萼原药，清洗，避光干燥，粉碎，混匀，过20-200目筛，得到酸浆宿萼粉末。在 惰性气体氛围下，按照酸浆宿萼与水的质量比1:30,纤维素酶和果胶酶的混合酶的用量 占酸浆宿萼粉末总重量的3%的比例，配制酶解溶液，其中，纤维素酶和果胶酶的质量比为 1: 7。搅拌，利用盐酸或者氢氧化钠溶液调节酶解溶液的pH为6,放入恒温摇床中，摇床转速 为100~120rpm，在45°C下进行保温酶解lOOmin。过滤，干燥，称取干燥后的酶处理酸衆宿 萼粉末，利用超临界C02萃取法，在45°C、35MPa的条件下，超临界萃取2h，得到0 -隐黄质 浓缩物。经HPLC检测，所得浓缩物种0 -隐黄质含量为15. 68%。
[0024] 实施例2 :本发明的组合物的制备 根据实施例1中所得的浓缩物中的隐黄质的质量，分别按照1:1的质量比加入胆 酸钠、甘胆酸钠、牛黄胆酸钠、甘氨脱氧胆酸钾，混合、搅拌均匀，得到本发明所述的组合物。
[0025] 参考例1 :促进蛋白形成能力表征 由于鱼类的生长实际上是通过蛋白质合成完成的，白肌又是鱼类蛋白质合成沉积最高 的组织，是代表鱼体生长最优代表性的组织。因此选择市售的鲤鱼苗为实验对象，评价本发 明所述的药物组合物对蛋白质合成的影响。
[0026] 按照20mg/Kg的添加量，将实施例1中所得的浓缩物、实施例2中所得的组合物分 别添加至市售鱼饲料中，混合均匀，粉碎至1. 5_，干燥后备用。市场上购买100尾规格整齐 的鲤鱼苗，置于网箱中进行驯养，其间从市售饲料逐渐过渡到上述复配饲料。待全部摄食复 配饲料后，试验开始前先停食24h，称重，随后从驯养鱼苗中随机取30尾鱼，喂饲复配饲料， 持续饲养一周。实验结束前停食24h。从30尾鱼中随机取10尾，吸干体表水分，存在背鳍 基部取白肌和肝胰脏作为待测样品，于_20°C保存待测DNA、RNA含量。配制RNA、DNA标准 液，绘制标准曲线，分别在260nm和265nm处测定RNA和DNA的吸收值（OD)，换算确定RNA 和DNA含量（yg/mL)。RNA/DNA比率表示核糖体的数量或蛋白质的合成潜力或RNA的转录 效率，是衡量组织蛋白质合成能力的指标。实验结果见表1 : 表1
实施例3 :本发明的组合物的制备 根据实施例1中所得的浓缩物中的e-隐黄质的质量，分别按照1:0. 5、I:I、1: 2、1: 3、 1:5、1:7、1:8的质量比加入甘胆酸钠，混合、搅拌均匀，得到本发明所述的组合物。
[0027] 参考例2 :促进蛋白形成能力表征 参照参考例1的表征方法，测定实施例3的组合物的RNA/DNA比值，结果见表2 :
由参考例1和2的实验结果可知，当饲料中加入本发明的组合物，鱼苗体内的RNA/DNA比率得到了显著的提高。其中，当胆汁盐为甘胆酸钠、0-隐黄质与甘胆酸钠的质量比为 1:5时，RNA/DNA比率值最高，取得了预料不到的技术效果。
[0028] 应当理解，这些实施例的用途仅用于说明本发明而非意欲限制本发明的保护范 围。此外，也应理解，在阅读了本发明的技术内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各 种改动、修改和/或变型，所有的这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的 保护范围之内。
【主权项】
1. 一种促进和/或提高生物体内蛋白质合成的组合物，其特征在于，包括提取自酸浆 宿萼的、含有e-隐黄质的浓缩物，和胆汁盐。2. 根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，0 -隐黄质与胆汁盐的质量比为1 : (0. 5-8)，优选 1 : (0. 5-6)，更优选 1 : (3-6)。3. 根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述胆汁盐为胆酸钠、甘胆酸盐、牛黄 胆酸盐、甘氨脱氧胆酸盐，优选甘胆酸钠或钾、甘氨脱氧胆酸钠或钾，更优选甘胆酸钠。4. 根据权利要求1-3中任一项所述的组合物，其特征在于，组合物中还含有 DL-ALPHA-生育酚和/或抗坏血酸钠。5. 根据权利要求1-3中任一项所述的组合物，其特征在于，组合物中还包括食用纤维 质，例如可溶性非淀粉多糖如阿拉伯胶或果胶，不溶性非淀粉多糖例如纤维素、半纤维素和 木素，低聚糖如菊粉或半乳低聚糖。6. 权利要求1-5中任一项所述的组合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤： 步骤一、处理原料 取酸浆宿萼原药，清洗，避光干燥，粉碎，混匀，过20-200目筛，得到酸浆宿萼粉末； 步骤二、酶处理 在惰性气体氛围下，按照酸浆宿萼与水的质量比1:1 〇 _ 6 0，生物酶的用量占酸浆宿萼 粉末总重量的0. 1-5%的比例，配制酶解溶液，搅拌，利用无机酸或者无机碱调节酶解溶 液的pH为3-7,放入恒温摇床中，摇床转速为100~120rpm，在30-70°C下进行保温酶解 60_180min; 步骤三、超临界C02萃取 称取步骤二得到的干燥后的酶处理酸浆宿萼粉末，利用超临界C02萃取法超临界萃取 得到e-隐黄质浓缩物，其中，超临界C02萃取的温度为40-70°C，萃取压力为10-50MPa，萃 取时间为〇. 5-6h; 步骤四、复配 称取适量步骤三所得的浓缩物，根据e-隐黄质的含量，按比例加入适量胆汁盐，和/ 或DL-ALPHA-生育酚，和/或抗坏血酸钠、和/或食用纤维质，混合、搅拌均匀，得到本发明 所述的含有隐黄质的组合物。7. 权利要求1-5中任一项所述的组合物的用途，其特征在于，用于制备促进和/或提高 生物体内蛋白质合成的药物。
【专利摘要】本申请涉及生物技术领域，特别涉及一种组合物、用途及制备方法。该组合物中含有提取自酸浆宿萼的β-隐黄质浓缩物和胆汁盐，以及DL-ALPHA-生育酚和/或抗坏血酸钠，可有效促进人类和动物组织中蛋白质的合成，预防衰老或治疗过程中肌肉减少。本发明的组合物原料易得，制备工艺简单，所得产品质量高，综合成本可控，适合于工业化生产。
【IPC分类】A61K31/575, A61P21/00, A61P3/02, A61K31/07
【公开号】CN104906112
【申请号】CN201510257154
【发明人】杨克西, 王炜, 颜丙春, 王芬
【申请人】杨克西
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月20日
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